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RESUMEN
En esta investigacin se evalu el proceso de obten-
cin de las enzimas pectolticas endo-
polimetilgalacturonasa (endo-PMG) y pectinesterasa
(PE) con una cepa del hongo Aspergillus foetidus.
La produccin de las enzimas se realiz en un
biorreactor New Brunswick modelo BioFlo 110 (ubi-
cado en el Laboratorio de Biotecnologa de la Facul-
tad de Ingeniera de Alimentos de la Universidad
de La Salle), con fermentaciones de 3 L de medio
de cultivo que contena pectina ctrica como sustrato
y con adicin permanente de 3 L/min de oxgeno.
En estas condiciones de la fermentacin sumergida
se hallaron los siguientes resultados en los fenme-
nos de transporte desarrollados: coeficiente de trans-
ferencia de pelcula entre la pared del biorreactor y
el medio de 1.710 W/Km
2
, coeficiente de transferen-
cia de masa de 4,24x10
-4
m/s, coeficiente volumtrico
de transferencia de masa de 6,07x10
-3
s
-1
, y una po-
tencia disipada con aireacin de 0,089 W; para unos
rendimientos de 0,030 kg de enzimas/3 L de medio
y 0,83 kg de enzimas/1 kg de biomasa.
Palabras clave: Aspergillus foetidus, enzimas
pectolticas, fenmenos de transporte, transferen-
cia de calor, transferencia de masa.
Fenmenos de transporte de la fermentacin
sumergida para obtener enzimas pectolticas a
partir de Aspergillus foetidus
1
Lena Prieto Contreras* / Renata Grevechova**
TRANSPORT PHENOMENA IN THE
PRODUCTION OF PECTOLYTIC ENZYMES
FROM ASPERGILLUS FOETIDUS UNDER
SUBMERGED FERMENTATION CONDITIONS
ABSTRACT
The production process of the pectolytic enzymes
endo-polymethylgalacturonase (endo-PMG) and
pectin esterase (PE) from a fungal strain of
Aspergillus foetidus was sutidied in this research.
The pectolytic enzymes were produced in a New
Brunswick BioFlo 110 bioreactor located in the
Laboratory of Biotechnology at the Food Engineering
Department of La Salle University. The fermentation
assays were carried out in 3 L batches of growth
medium with citric pectin as the substrate and
permanent addition of oxygen at 3 L/min. Under
these fermentation conditions, the following results
were found in the developed phenomena: film
transfer coefficient between the bioreactor wall and
the growth medium: 1.710 W/K.m
2
, mass transfer
coefficient: 4,24x10
-4
m/s, volumetric mass transfer
coefficient: 6,07x10
-3
s
-1
, and an aeration-dissipated
potency of 0,089 W; for yields of 0,030 kg of
enzymes/3 L growth medium and 0,83 kg of
enzymes/1 kg of biomass. These results are close to
those found by other researchers.
Key Words: Aspergillus foetidus, pectolytic enzymes,
transport phenomena, heat transfer, mass transfer
1 Este artculo es parte del Proyecto de Investigacin: Determinacin del modelo cintico de fermentacin y de los fenmenos de transporte en el proceso de
obtencin de enzimas pectolticas a partir de Aspergillus niger y Aspergillus foetidus (Ascomicetes: Aspergilales); desarrollado con la Dra. Renata Grebechova
y financiado por la Universidad de La Salle. Correo electrnico: lprieto@lasalle.edu.co
* Ingeniera Qumica, Magster en Educacin y Docente Investigadora de la Facultad de Ingeniera de Alimentos de la Universidad de La Salle.
** Profesora Investigadora Universidad de La Salle. Correo electrnico: rgrevechova@hotmail.com
Fecha de recepcin: julio 4 de 2006.
Fecha de aprobacin: septiembre 15 de 2006.
Revista psilon N
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7: 65-77 / Julio - diciembre de 2006
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INTRODUCCIN
Actualmente se integran los conocimientos del
microbilogo, del bioqumico, del ingeniero qumi-
co y del ingeniero de alimentos a los procesos
biotecnolgicos que incluyen fermentaciones, para
implementar este tipo de produccin en la indus-
tria alimentaria, con el fin de unir los conceptos
biolgicos a los principios de ingeniera y as, lle-
var esta integracin a la produccin industrial para
lograr alcances de importancia donde se beneficie
la industria con procesos modernos en tecnologa
(Quintero, 1981).
A nivel nacional e internacional las investigaciones
de diferentes tipos de fermentaciones (alcohlicas,
lcticas, acticas, de clulas animales o vegetales,
enzimticas, entre otras), continan con el estudio
de los parmetros que se requieren para el diseo
del bioproceso como: temperatura, pH, demanda de
oxgeno y contenido de nutrientes (Bartow y Spark,
2004; Prieto y Grebechova, 2005); tambin, se de-
terminan los fenmenos de transporte que se desa-
rrollan en los diferentes procesos fermentativos con
variables definidas a travs de las diferentes
experimentaciones de las investigaciones para que
se realicen en el futuro su produccin industrial
(Duarte, 1995; Junker, 2003).
Adems, estos fenmenos de transporte encontra-
dos se explican a travs de modelos matemticos,
donde describen la relacin entre todas las varia-
bles dependientes e independientes, aunque algu-
nos de ellos son empricos pues se basan en obser-
vaciones (Duarte, 1995; Heldman y Newsome, 2003).
Otro de los desarrollos actuales en el campo de la
Biotecnologa es el perfeccionamiento de los
microorganismos industriales a travs de la mani-
pulacin gentica para la produccin de
biocatalizadores ms estables, de mayor rendimien-
to y para el desarrollo de nuevos productos que
logren satisfacer la demanda tecnolgica de los pro-
cesos industriales actuales (Rowlands, 2002; Ashie,
2003).
Lo anterior permite evaluar el proceso de obtencin
de las enzimas pectolticas a partir de hongos
Aspergillus foetidus de la Coleccin Nacional de
Rusia, logrando la produccin de estos
biocatalizadores en diferentes escalas de fermenta-
cin para la aplicacin en diferentes procesos
alimentarios. Para complementar esto se estudian
modelos predictivos, ya que su ausencia dificulta
la seleccin de un modelo adecuado para la expli-
cacin del proceso bioqumico en cualquier escala
de produccin (Mukesh, 2002).
Balance de materia y energa. En la valoracin de
los fenmenos de transporte de las fermentaciones
es importante establecer las cantidades de materia-
les y de energa involucradas durante la obtencin
de enzimas, lo cual permite su replica en
experimentaciones similares. Debido a ello, se pue-
den establecer dichas cantidades porque todo pro-
ceso cumple la ley de la conservacin (Doran, 1998);
esto permite proponer igualdades matemticas, co-
nocidas como balance de materia y de energa del
bioproceso, as:
Materia que entra - materia que sale +
materia generada - materia consumida=
materia acumulada
Energa que entra - energa que sale =
energa acumulada
En la fermentacin sumergida se realiza un balance
de materia para los elementos que participan en el
crecimiento de los microorganismos. A pesar de su
complejidad y de que existen miles de reacciones
intracelulares, el crecimiento de las clulas tambin
obedece a la ley de la conservacin. Todos los to-
Fenmenos de transporte de la fermentacin sumergida para obtener enzimas pectolticas a partir de Aspergillus foetidus / 67
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mos de carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno y
otros elementos consumidos durante el crecimien-
to se incorporan a las nuevas clulas o se expulsan
como producto (Doran, 1998). Este crecimiento de
los microorganismos se puede describir mediante
la siguiente ecuacin (Duarte, 1995):
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ bH
g
O
h
N
i
! cCH
j
O
k
N
m
+ dCO
2
+ eH
2
O
Donde: C
w
H
x
O
y
N
z
es la frmula qumica del sustrato
que entra en el medio de cultivo, H
g
O
h
N
i
es la fr-
mula qumica de la fuente de nitrgeno, CH
j
O
k
N
m
es
la frmula qumica de la biomasa seca y CO
2
y H
2
O
son productos de la reaccin.
Por otra parte, el balance de energa en la fermenta-
cin es significativo puesto que las clulas consu-
men el sustrato que provee la energa junto a la
materia prima, requerida para la sntesis de la nue-
va masa adicional. Los hongos utilizan
eficientemente la energa qumica, pero parte de esta
energa disponible en el sustrato es liberada como
calor. Entonces el balance de energa de una fer-
mentacin, sera (Duarte, 1995):
SEN EVAP INT AC AG MET
q q q q q q + + + = +
Donde se considera, la velocidad de generacin de
calor por la actividad metablica (q
MET
) que es el ca-
lor asociado con el crecimiento de los
microorganismos y tambin por la formacin de
productos, la velocidad de generacin de calor por
agitacin mecnica (q
AG
), la velocidad de acumula-
cin de calor (q
AC
) que es 0 en condiciones estables,
la velocidad de transferencia de calor del reactor
con los alrededores (q
INT
), la velocidad de prdida
de calor por evaporacin (q
EVAP
), y la velocidad de
cambio en la entalpa en las corrientes lquida y ga-
seosa que entran y salen del biorreactor.
Fenmenos de transporte del bioproceso. Estos los
integran las operaciones unitarias: mecnica de flui-
dos, transferencia de masa y transferencia de calor.
-Mecnica de fluidos. Los medios de cultivo de la
fermentacin estn constituidos por agua,
electrolitos, slidos suspendidos y materiales di-
sueltos. Estos componentes determinan el compor-
tamiento reolgico y la tensin superficial del me-
dio de cultivo, y a la vez influye sobre las transfe-
rencias de calor y de masa en el biorreactor. La ma-
yora de los medios de fermentacin manifiestan un
comportamiento newtoniano, es decir, presentan
una reologa similar a la del agua; pero los medios
en los cuales cambia las caractersticas fsicas del
mismo, especialmente la viscosidad, durante el cre-
cimiento de los microorganismos, entonces se pue-
de estudiar el medio como un fluido no newtoniano
(Duarte, 1995).
Adems, de las caractersticas reolgicas del medio
de cultivo, es importante determinar la velocidad
de agitacin y el flujo de aire para evaluar los N-
meros de Potencia y de Reynolds, tpicos del
biorreactor en el cual se desarrolla la fermentacin.
En la prctica la potencia suministrada por agita-
cin al biorreactor vara entre 1 y 5 W.(L)
-1
, donde
aproximadamente 85 95% de este valor corres-
ponde a agitacin mecnica y el resto a la energa
cintica y expansin isotrmica del gas dispersado
(Doran, 1998).
La potencia consumida por un sistema gaseado es
considerablemente menor que en un sistema no
gaseado. A bajos caudales el gas pasa por el impul-
sor del agitador sin dispersarse y el lquido fluye
sin ser perturbado, pero a medida que se aumenta
68 / Lena Prieto Contreras / Renata Grevechova
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el caudal del gas, este comienza a dispersarse y la
potencia del sistema comienza a disminuir con res-
pecto al sistema sin gas. A partir de este concepto
se plantea el Nmero de Aireacin (Ae), el cual rela-
ciona la velocidad superficial del gas y la velocidad
en la punta del impulsor, as:
Donde: Ca es el caudal del gas, Da es el dimetro
del agitador, n son las revoluciones del impulsor, y
n.Da es la velocidad en la punta del impulsor
(Duarte, 1995).
Transferencia de masa. Durante las fermentaciones
aerbicas se requieren cantidades de oxgeno que
permitan el crecimiento de los microorganismos a
travs del metabolismo que se desarrollan. La oxi-
dacin de la fuente de carbono y su transformacin
en clulas y en productos establece una demanda
de oxgeno que es esencial satisfacer a travs de la
aireacin durante la realizacin de la fermentacin
(Quintero, 1981). El mecanismo de la transferencia
de oxgeno a la clula se ha explicado por medio de
varios pasos de la siguiente manera: primero hay
una transferencia difusional del oxgeno a travs de
las pelculas del gas y lquido que rodean las bur-
bujas de aire, despus contina su camino en la
solucin, y finaliza a travs de la pelcula de lqui-
do que rodea la clula para realizar la reaccin
bioqumica intracelular. La mayor resistencia la opo-
ne la pelcula del lquido que rodea las burbujas
(Doran, 1998).
La velocidad de transferencia de oxgeno se puede
expresar as:
Velocidad de transferencia =
Coeficiente de transferencia x rea x fuerza de
masa de masa directriz
La igualdad anterior se puede expresar matemtica-
mente como: Na = k
L
a (C
g
C
L
), donde k
L
es el
coeficiente de transferencia de oxgeno en la fase
lquida, a es el rea interfacial, C
g
es la concentra-
cin de oxgeno en la entrecara gas-lquido es casi
igual a la solubilidad, y C
L
es la concentracin de
oxgeno en el seno de la solucin. Na es la veloci-
dad de transferencia de masa o de oxgeno expresa-
da por unidad de volumen, y esta es igual o mayor
a la demanda de oxgeno (Q
O
) para que el sistema
no est limitado por oxgeno.
Transferencia de calor. Inicialmente en el bioproceso
se requiere suministro de calor en la operacin de
esterilizacin para calentar el medio de cultivo has-
ta la temperatura necesaria que permita la elimina-
cin de microorganismos; despus, esta temperatu-
ra se baja para inocular el medio y as dar inicio a la
fermentacin. Durante el desarrollo de la fermenta-
cin enzimtica se requiere de calor para favorecer
el clima de crecimiento de los microorganismos que
producen los productos de inters (Duarte, 1995).
Las variables ms importantes en la determinacin
del calor transferido son: la diferencia de tempera-
tura entre el biorreactor y el medio ambiente, y el
rea disponible para transferencia de calor. El rea
efectiva de transferencia de calor de un sistema de
camisa externa, es el rea lateral del tanque:
H Dt Ac =
Donde: Ac es el rea de transferencia de calor de la
camisa, Dt es el dimetro del biorreactor, y H es la
Fenmenos de transporte de la fermentacin sumergida para obtener enzimas pectolticas a partir de Aspergillus foetidus / 69
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altura alcanzada por el medio de fermentacin den-
tro del biorreactor. Por otra parte, la transferencia
de calor se mide por medio del coeficiente de trans-
misin de calor, como se muestra en la siguiente
ecuacin:
Donde: q es la velocidad de transferencia de calor,
U es el coeficiente global de transferencia de calor,
A es el rea de la superficie de transferencia de ca-
lor, y T
M
es la diferencia media de temperatura en
el biorreactor (Duarte, 1995).
MATERIALES Y MTODOS
A continuacin se explica sobre los datos que se
levantaron experimentalmente y directamente en el
Laboratorio de Biotecnologa de la Facultad de Inge-
niera de Alimentos, Universidad de La Salle, para
realizar los clculos de balance de materia, balance
de energa y fenmenos de transporte que caracteri-
zan a la fermentacin investigada, operacin funda-
mental del bioproceso de obtencin de las enzimas
pectolticas.
Balances de materia y energa en la fermentacin.
Para la fermentacin sumergida se prepar el medio
de cultivo, nombrado E-4, constituido por los si-
guientes componentes: pectina ctrica, salvado de
trigo, casena, extracto de levadura, sulfato de
amonio, fosfato cido de potasio, cloruro de potasio,
sulfato de magnesio, cloruro de cobalto y tween 80
(Grebechova y Prieto, 2005). Durante la fermenta-
cin, se evalu el crecimiento de la cepa de hongos
por medio de la reaccin qumica que muestra el
consumo del sustrato, pectina ctrica, y para reali-
zar el balance de materia se requiere del peso
molecular del sustrato.
Por lo tanto, se emple el mtodo de Rast (Shriner,
1957) para encontrar experimentalmente el peso
molecular con 0,050g de pectina ctrica y 0,50g de
alcanfor. La temperatura de fusin de la mezcla se
determin con un tubo capilar, al cual se le aadi
la mezcla hasta una altura de 1 cm, despus se ama-
rr a un termmetro y se sumergi en un tubo de
Thiele que contiene aceite mineral. Por ltimo, se
ley la temperatura de fusin del alcanfor con tubo
capilar. Los datos que se obtuvieron con el procedi-
miento anterior se aplicaron a la siguiente relacin
para hallar el peso molecular (PM):
W
w
PM


=
1000 7 , 39
Donde: W es el peso del alcanfor, w es el peso de la
pectina ctrica, y es la disminucin del punto de
fusin hallada por la diferencia entre las temperatu-
ras de fusin del alcanfor y de la mezcla pectina
ctrica-alcanfor.
Adems, se determin el calor de combustin del
sustrato; dato indispensable del balance de energa
de la fermentacin sumergida, con una bomba
calorimtrica de oxgeno marca Parr 1341 (ubicada
en el Laboratorio de Nutricin, Facultad de Zootec-
nia, Universidad de La Salle), con 1g de pectina
ctrica y 10 cm del alambre de ignicin de nquel-
cromo. Despus se amarr el alambre a las puntas
de los electrodos de la bomba, y se dej que el alam-
bre quedara en contacto con el sustrato, se le intro-
dujo oxgeno hasta que la presin aument a 10
psig, y una vez finalizada la ignicin se apag el
equipo y se midi el alambre no quemado. Despus
se aplic la siguiente ecuacin:
m
e W t
H
c s

= ) (
M
T A U q =
70 / Lena Prieto Contreras / Renata Grevechova
Revista psilon N
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Donde: m es la masa de pectina ctrica empleada en
la prueba, W es la energa equivalente del calormetro
determinada por estandarizacin y es de 2333 cal/
o
C, e es la correccin en caloras del alambre de n-
quel-cromo empleado en la prueba y es de 2,3 cal/
cm de alambre (cm de alambre no quemado) y t es el
aumento de la temperatura hallado con la siguiente
relacin matemtica:
) ( ) (
2 1
b c r a b r t t t
a c
= .
Potencia por agitacin del fluido newtoniano en la
fermentacin. Inicialmente se realiz fermentacio-
nes preexperimentales para cuadrar la velocidad de
agitacin de las aspas del agitador, vertical y centra-
do en el biorreactor, con el flujo de aire que ingres
al mismo puesto que se determin controlar duran-
te la fermentacin que no cambiara las caractersti-
cas reolgicas del medio de cultivo y que se mantu-
viera como fluido newtoniano para facilitar los cl-
culos de potencia por agitacin.
Una vez cuadradas las condiciones de trabajo del
biorreactor, se procedi a recoger los siguientes da-
tos por medicin o lectura directa: dimetro del
biorreactor,
t
o
b
; altura del biorreactor, h; di-
metro del impulsor del agitador,
a
; caudal de aire
que ingresa, Ca, en el rotmetro; velocidad de agita-
cin, n, en el panel de control del biorreactor; den-
sidad del medio de cultivo inoculado, , por mto-
do del picnmetro; viscosidad del medio de cultivo
inoculado, , por mtodo del viscosmetro de cada
de esfera marca Gilmont; nmero de deflectores en
el biorreactor; y nmero de impulsores del agita-
dor.
Coeficiente de transferencia de masa en la fermen-
tacin. En las fermentaciones aerbicas se determi-
n el suministro de la cantidad de oxgeno para
conocer los requerimientos de oxgeno segn las
necesidades metablicas del hongo A. foetidus em-
pleado en esta investigacin. Por lo tanto, una me-
dida de la transferencia del oxgeno a los
microorganismos durante la fermentacin, se hace
a travs del coeficiente de transferencia de masa, y
para determinarlo se requiri de los siguientes da-
tos experimentales: dimetro del biorreactor,
b
;
caudal de aire que ingresa, Ca; presin del aire de
ingreso, p, en el manmetro de la lnea de aire; den-
sidad del medio de cultivo inoculado, ; viscosi-
dad del medio de cultivo inoculado, ; lectura de
oxgeno disuelto en el biorreactor en el panel de
control del equipo; volumen del medio, Vm; y me-
didas del biorreactor.
Coeficiente de transferencia de calor en la fermen-
tacin. En la velocidad de transferencia de calor en
el biorreactor es importante conocer el coeficiente
de transferencia de calor de pelcula entre el lqui-
do en el reactor y la superficie interior del biorreactor
encamisado; para ello, se realiz la definicin de
los siguientes datos en la operacin de fermenta-
cin: rea de transferencia de calor, A, por medi-
cin de la chaqueta elctrica del biorreactor; altura
del medio de cultivo, h; temperatura inicial del
medio de cultivo, T
1
; temperatura de fermentacin
en el biorreactor, T
2
; temperatura de la camisa, T;
presin del aire de ingreso, p; y medidas del
biorreactor.
RESULTADOS
Balance de materia del crecimiento de la cepa del
hongo A. foetidus. La fermentacin sumergida es la
operacin importante del bioproceso y el balance
de materia de los elementos participantes en el cre-
cimiento de los hongos Aspergillus para formar el
producto durante las 96 horas que dur la fermen-
tacin, se desarroll la siguiente reaccin:
C
w
H
x
O
y
N
z
+ aO
2
+ bH
g
O
h
N
i
! cCH
j
O
k
N
m
+ dCO
2
+
eH
2
O
Fenmenos de transporte de la fermentacin sumergida para obtener enzimas pectolticas a partir de Aspergillus foetidus / 71
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La cual se transform para la produccin especfica
de las enzimas pectolticas, as:
C
61
H
83
O
67
+ aO
2
+ bC
3,72
H
6,11
O
1,95
N
0,61
!
cCH
1,8
O
0,5
N
0,2
+ dCO
2
+ eH
2
O
Donde: C
61
H
83
O
67
es la frmula qumica del sustrato,
que en este caso es la pectina ctrica (aunque la
pectina es un polmero del cido galacturnico para
facilidad de clculos se deja la frmula hasta nueve
repeticiones y media del monmero) (Bernal, 1993);
C
3,72
H
6,11
O
1,95
N
0,61
es la frmula qumica de la fuente
de nitrgeno (Calvo, 2005), que corresponde al ex-
tracto de levadura; y CH
1,8
O
0,5
N
0,2
es la frmula qu-
mica de la biomasa seca, la cual est constituida
principalmente por la masa de la cepa del hongo A.
foetidus (Doran, 1998).
Por lo tanto, se consumi 1,208 kg de oxgeno du-
rante la reaccin en la operacin de fermentacin,
el cual lo aporta los 2,08 kg de aire que entra; ade-
ms, sale del biorreactor en los gases 3,095 kg cons-
tituido de oxgeno, CO
2
y H
2
O.
En conclusin, se obtiene del balance de materia
los siguientes rendimientos:
y
Balance de energa del crecimiento de la cepa de
hongos A. foetidus. Para la fermentacin donde se
desarrolla energa trmica se tiene, la ecuacin de
crecimiento para los hongos A. foetidus sobre la base
de clculos de 1mol de C en el sustrato:
CH
1,36
O
1,1
+ 0,62O
2
+ 0,17C
3,72
H
6,11
O
1,95
N
0,61

0,53CH
1,8
O
0,5
N
0,2
+ 0,52CO
2
+ 0,73H
2
O
El calor producido durante el crecimiento de los
microorganismos expresado por mol de carbn es
(Duarte 1995):
Donde: (H
R
)
C
es el calor producido durante el cre-
cimiento microbiano o calor de reaccin; (H
P
)
C
es
el calor de combustin del producto = -560 kJ/mol
C (Duarte, 1995); (H
X
)
C
es el calor de combustin
de los hongos (Doran, 1998) = -(115). kJ/mol C;
es el grado de reduccin de las clulas (Duarte, 1995)
= 7,4; por lo tanto, el calor de combustin de los
hongos es -851 kJ/mol; (H
S
)
C
es el calor de combus-
tin del sustrato = -4438,9 kJ/mol C.
Este ltimo calor de combustin se determin por
medio de los datos de la curva (Figura 1), que se
lograron en la bomba calorimtrica de oxgeno. El
aumento de la temperatura fue 1,39
o
C y, el calor de
combustin es - 4438,9 kJ/ mol de C; -3235,74 cal/g,
de energa trmica generada durante el crecimiento
de los hongos A. foetidus por cada mol o gramo de
carbono del sustrato empleado.
Al reemplazar los calores de combustin en la ecua-
cin anterior, se obtiene el calor de reaccin para el
crecimiento del hongo A. foetidus, por valor de -
3027,9 kJ/mol de C.
medio de L
enzimas de kg
3
030 , 0
biomasa de kg
enzimas de kg
1
83 , 0
C X C P C S C R
H H H H ) ( ) ( ) ( ) ( =
72 / Lena Prieto Contreras / Renata Grevechova
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Potencia de agitacin. La fermentacin sumergida
se realiz en el biorreactor New Brunswick BioFlo
110, el cual cuenta con un agitador de impulsores
de turbina doble: una en la base y otra en la zona
media. Este agitador dispersa el calor y el oxgeno
GRFICA 1. CURVA PARA HALLAR EL CALOR DE COMBUSTIN DE LA PECTINA CTRICA.
Temperatura Vs. Tiempo
19
19,5
20
20,5
21
21,5
0 2 4 6 8 10 12 14 16
Tiempo (min)
T
e
m
p
e
r
a
t
u
r
a
(

C
)
en el medio lquido, por esto, la velocidad del mis-
mo es importante evaluarla as como su consumo
de potencia. En la Tabla 1 se presentan las caracte-
rsticas del sistema de agitacin empleado en la ex-
perimentacin.
TABLA 1. CARACTERSTICAS DEL SISTEMA DE AGITACIN DEL BIORREACTOR NEW BRUNSWICK BIOFLO 110.
CARACTERSTICAS VALORES
Longitud del eje de rotacin 26,5 cm
Nmero de impulsores 2
Nmero de paleta por impulsor 6
Distancia entre los impulsores 13 cm
Dimetro del impulsor 5,8 cm
Nmero de deflectores 4
Ancho de deflectores 2 cm
Al sistema de agitacin empleado se le aplic las
ecuaciones y los nmeros adimensionales que ex-
plican el comportamiento de este fenmeno de trans-
porte, en el Grfico 2 se resumen los resultados
hallados para un caudal de oxgeno de 3L/min du-
rante la fermentacin. Por lo tanto, durante la agita-
cin del medio de cultivo a 180 rpm, se disip ener-
ga mecnica en un valor pequeo de 0,089 W, cuan-
do el oxgeno intervena en la agitacin, y de 0,101
W cuando no hay aire.
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Transferencia de masa. El coeficiente de transfe-
rencia de masa para la fermentacin sumergida de 3
L de volumen con la cepa de A. foetidus, evala la
transferencia de oxgeno del aire en el medio lqui-
do. A continuacin, se resume en la Tabla 3 los
resultados de aplicar las ecuaciones de este fen-
meno de transporte. Para los clculos de la transfe-
rencia de oxgeno en el medio de la fermentacin
sumergida, se evalu con el caudal de aire el coefi-
ciente volumtrico de transferencia de masa (en el
cuadro 3 se expresan en s
-1
); y el coeficiente de trans-
ferencia de masa es 4,24x10
-4
m/s, es decir, cada
burbuja de oxgeno se transfiere 0,0424 cm/s.
Transferencia de calor. La fermentacin sumergida
recibi calor por medio de la camisa que envuelve
TABLA 2. ECUACIONES Y RESULTADOS DEL CONSUMO DE POTENCIA POR AGITACIN.
al biorreactor, la cual se calienta elctricamente, sus
medidas son: 0,62 m de largo y 0,18 m de ancho. A
continuacin, en el cuadro 4 se muestran las
ecuaciones y los resultados de los clculos realiza-
dos para la transferencia de calor que se llev a cabo
en el biorreactor. Por lo tanto, el coeficiente de trans-
ferencia de calor de pelcula entre las paredes del
biorreactor y el medio de cultivo, se transfiere en
cada cm
2
de la pared 0,171 W o 0,171 J/s de opera-
cin y por cada aumento de temperatura en grados
Kelvin. Adems para las fermentaciones realizadas
fue suficiente el rea disponible de transferencia de
calor; y se gener por el cultivo 0,049 W y en el
biorreactor 0,305 W de calor respectivamente.
74 / Lena Prieto Contreras / Renata Grevechova
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TABLA 3. ECUACIONES Y RESULTADOS DE LA TRANSFERENCIA DE MASA EN EL BIORREACTOR.
Fenmenos de transporte de la fermentacin sumergida para obtener enzimas pectolticas a partir de Aspergillus foetidus / 75
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DISCUSIN
Los resultados de los fenmenos de transporte ha-
llados en la fermentacin sumergida donde se pro-
duce enzimas pectolticas con cepa del hongo A.
foetidus, se pueden considerar en el caso de reali-
zar esta fermentacin a diferentes escalas de experi-
mentacin o de produccin, con las siguientes rela-
ciones planteadas, para que el coeficiente de trans-
ferencia de calor vare proporcionalmente al cua-
drado del dimetro del biorreactor, en este caso se
parti de (0,175 m)
2
con un coeficiente de pelcula
de transferencia de calor de 1710 W/K.m
2
; y para
que el coeficiente de transferencia de masa vare
proporcionalmente al cubo del dimetro, por lo tanto
se inici con el biorreactor en (0,175 m)
3
y emplean-
do un coeficiente de transferencia de masa de
4,24x10
-4
m/s, y un coeficiente volumtrico de trans-
TABLA 4. ECUACIONES Y RESULTADOS DE LA TRANSFERENCIA DE CALOR EN EL BIORREACTOR.
ferencia de masa 6,07x10
-3
s
-1
para 3L de aire/minuto
(Quintero, 1981).
Por otra parte, se propone que la potencia disipada
por unidad de volumen sea proporcional al volu-
men del fermentador: P/V V
-0,37
(Duarte, 1995), para
el caudal estudiado la relacin P/V fue de 59,33 para
3L de aire/minuto. A mayor volumen de la fermen-
tacin la potencia de trabajo del agitador disminu-
ye, segn recomendaciones de investigadores (Quin-
tero, 1981), por ello ser necesario considerar esta
cantidad.
Segn Scragg (2000) los coeficientes de transferen-
cia de calor en fermentaciones se encuentran entre
3 y 5 kW/m
2
.K, y en la investigacin se determin
un coeficiente de transferencia de calor de 1,7 kW/
m
2
.K, valor cercano al lmite inferior. Con respecto
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al consumo de potencia fue del orden de 0,101 W o
de 0,03 kW/m
3
; y el consumo de oxgeno fue de
0,00117 kg/m
3
.s, es decir, 1,208 kg/3L en 96 horas
de fermentacin. Estos valores son pequeos pero
se acercan a los mnimos propuestos por investiga-
dores (Quintero, 1981; Scragg, 2000).
Adems de lo anterior, es importante considerar los
factores geomtricos del biorreactor New Brunswick
BioFlo 110, donde se realizaron las fermentaciones,
en el caso de emplear otro biorreactor. Estos son:
dimetro del impulsor/dimetro del biorreactor=1/
3; ancho de deflectores/dimetro del biorreactor=
1/9; altura entre la base y el primer impulsor/altura
entre impulsores=1; y Nmero de deflectores=4.
Entonces, los valores determinados a nivel de labo-
ratorio corresponden a un volumen de 3L de medio
de cultivo para la fermentacin sumergida, los cua-
les satisficieron los requerimientos del microorga-
nismo a travs de la biosntesis del sustrato hacia la
obtencin de las enzimas endo-PMG y PE como
productos principales; por ello, es conveniente para
nuevos volmenes evaluar estos parmetros de los
fenmenos de transporte y as establecer ms crite-
rios para cambiar a nuevas escalas de produccin
(Mukesh, 2002).
AGRADECIMIENTOS
Al Doctor Camilo Rozo, Decano de la Facultad de
Ingeniera de Alimentos y a la Doctora Estrella Cr-
denas, Coordinadora de Investigacin, respectiva-
mente, de la Universidad de La Salle, por sus valio-
sas colaboraciones y aportes.
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