Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
2
Los resultados de la prctica de Titulacin de aminocidos se muestran en la tabla 3.7.
Tabla 3.7. Titulacin de aminocidos: alanina.
ml
(titulante) pH
ml
(titulante) pH
ml
(titulante) pH
ml
(titulante) pH
0 1,86 13 2,7 25,5 9,38 38 10,78
1 1,89 13,5 2,75 26 9,43 38,5 10,88
1,5 1,9 14 2,8 26,5 9,48 39 10,99
2 1,93 14,5 2,85 27 9,53 39,5 11,09
2,5 1,96 15 2,91 27,5 9,58 40 11,19
3 1,99 15,5 2,96 28 9,63 40,5 11,27
3,5 2,02 16 3,02 28,5 9,67 41 11,34
4 2,06 16,5 3,1 29 9,72 41,5 11,41
4,5 2,09 17 3,18 29,5 9,77 42 11,46
5 2,12 17,5 3,27 30 9,82 42,5 11,51
5,5 2,16 18 3,39 30,5 9,86 43 11,55
6 2,19 18,5 3,55 31 9,91 43,5 11,59
6,5 2,22 19 3,77 31,5 9,95 44 11,62
7 2,26 19,5 4,15 32 10 44,5 11,66
7,5 2,29 20 7,6 32,5 10,05 45 11,69
8 2,33 20,5 8,28 33 10,1 45,5 11,71
8,5 2,36 21 8,58 33,5 10,15 46 11,74
9 2,39 21,5 8,77 34 10,2 46,5 11,76
9,5 2,43 22 8,89 34,5 10,27 47 11,78
10 2,46 22,5 9 35 10,32 47,5 11,81
10,5 2,5 23 9,09 35,5 10,38 48 11,83
11 2,54 23,5 9,16 36 10,45 48,5 11,84
11,5 2,58 24 9,23 36,5 10,54 49 11,86
12 2,62 24,5 9,29 37 10,6 49,5 11,88
12,5 2,66 25 9,34 37,5 10,72 50 11,9
La curva de titulacin correspondiente para la se presenta en la figura 3.1.
3
Figura 3.1. Curva de titulacin experimental.
Las especies inicas para los aminocidos son:
Figura 3.2. Especies inicas [2].
Donde el sustituyente R es CH3
El procedimiento utilizado para realizar la titulacin de la alanina fue diferente al propuesto por la
gua del laboratorio [1]. En primer lugar a los 15 mL de alanina 0.1 M se le adicionar gotas de cido
clorhdrico 0.1 M hasta obtener un pH cido aproximadamente igual a 1.34, por lo que se puede
suponer que la alanina se encuentra en ese instante en la forma ms protonada de la figura 3.2, y
luego se realiza la titulacin con hidrxido de sodio.
A continuacin se discuten las reacciones que ocurren y lo que pasa qumicamente [1].
Al agregar , la base reacciona con el grupo , consume la especie
protonada y produce la especie dipolar (zwitterin) [2].
0
2
4
6
8
10
12
14
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
p
H
ml de NaOH
Titulacin de un Aminoacido
4
Si se agrega una cantidad de
equivalente a inicial, la
alanina se neutraliza y la forma protonada desaparece, transformndose totalmente en la
forma dipolar, en este punto el pH del medio es igual al punto isoelctrico de la alanina
[1].
Al agregar ms cantidad de , la base reacciona con el grupo amino
,
consume la especie dipolar y se genera la especie desprotonada [2].
La adicin de 0.5 equivalentes de , para un total de 1.5 consume la mitad de la
especie dipolar y produce igual cantidad de la especie desprotonada, es decir, que
[zwitterin neutro] = [desprotonado] y de la ecuacin de Henderson-Hasselbalch, el pH del
medio ser igual al pKa [1].
La adicin de otros 0.5 equivalentes de , hace que se consuma totalmente la forma
dipolar [1].
La forma de la curva de titulacin (figura 3.1) presenta dos regiones planas amortiguadores que
indican la mnima variacin del pH a medida que se agrega la base (). El primer sistema
amortiguador es el formado por las especies protonada y dipolar, donde el punto medio muestra:
El volumen del titulante donde se da este valor del pH es aproximadamente a 12.5 mL.
El segundo sistema amortiguador es el formado por las especies dipolar y desprotonada, donde el
punto medio es:
5
El volumen del titulante donde se da este valor del pH es aproximadamente a 28.5 mL.
Adems la curva de titulacin presenta una inflexin con una verticalidad pronunciada, denotando
la finalizacin de la primera semititulacin, que corresponde al punto isoelctrico de la alanina:
La curva de titulacin para la alanina, graficada utilizando la ecuacin de Henderson-Hasselbalch,
se presenta en la figura 3.3.
Figura 3.3. Curva de titulacin para la alanina, graficada utilizando la ecuacin de Henderson-Hasselbalch [2].
A continuacin se calculan los porcentajes de error asociados a los valores
y .
| |
| |
| |
Las diferencias entre los valores experimentales y tericos se deben principalmente a las
condiciones especficas de medicin. Adems existen errores asociados a la precisin de los
instrumentos de medicin: pH metro y bureta.
6
Por otra parte hay que tener en cuenta que el hecho de haber modificado el procedimiento de
titulacin, en la primera parte, cuando a los 15 mL de alanina 0.1 M se le adicionaron gotas de
cido clorhdrico 0.1 M, hace que la concentracin de la alanina cambie, con lo cual en la curva de
titulacin los equivalentes de la base (
, y
,
no se van a presentar exactamente a 0.5, 1.0 y 1.5 respectivamente.
Conclusiones
La curva titulacin de un aminocido sirve para determinar los valores
y
del aminocido.
La titulacin de un aminocido puede realizarse partiendo de la forma dipolar del
aminocido y hacer dos titulaciones una agregando una base () y otra adicionando
un cido (), y luego se unen procurando obtener una sola curva de titulacin para todo
el experimento. La segunda forma de realizar la titulacin es como se hizo en presente
informe, es decir, llevando al aminocido a su forma protonada al adicionar gotas de un
cido () hasta obtener un pH cido, y luego se realiza la titulacin con la base ()
nicamente.
La interpretacin de los resultados de la curva de titulacin, si se realiza de la segunda
forma, es ms complicada debido a que la concentracin inicial del aminocido cambia al
adicionar gotas de un cido, y por lo tanto en la curva de titulacin los equivalentes de la
base (
, y
, no se van a presentar
exactamente a 0.5, 1.0 y 1.5 respectivamente.
Los valores de