2

Cuadernos de Biodiversidad
n d i c e
VARIACIN EPIGENTICA Y SU IMPACTO EN LA BIODIVERSIDAD
L. Iglesias y J.L. Casas ................................................................................................................... 3
ANLISIS DE LA MORTALIDAD DEL MANAT (TRICHECHUS MANATUS MANATUS
LINNAEUS, 1758) EN EL REFUGIO DE FAUNA LANZANILLO-PAJONAL-FRAGOSO,
CUBA
E. Garca Alfonso y R. Rodrguez Gonzlez ................................................................................... 6
ESTUDIO DE LA ESTABILIDAD GENTICA MEDIANTE EL USO DE MARCADORES
RAPD EN IPOMOEA: UNA ALTERNATIVA PARA LA CONSERVACIN DE LA
DIVERSIDAD BIOLGICA MEDIANTE TCNICAS MOLECULARES
O. S. Gonzlez Paneque, A. Fernndez, Y. Fraga, B. Pino, M.M. Hernndez Espinosa,
J.J. Silva Pupo, . Espinosa Reyes y J. Prez Prez .......................................................................... 11
LA MEMORIA BIOCULTURAL
G. Halter .................................................................................................................................... 19
BOLETN DE SUSCRIPCIN Y NORMAS PARA LOS ARTCULOS ................................... 23
Publicacin cuatrimestral del Centro Iberoamericano de la Biodiversidad
Cuadernos de Biodiversidad
2009
Centro Iberoamericano de la Biodiversidad (CIBIO)
Universidad de Alicante
DIRECCIN Y COORDINACIN:
Estefana Mic Balaguer
M ngeles Marcos Garca
CONSEJO ASESOR CIENTFICO:
Javier Bells-Ros
Gonzalo Halter Salas
Sergio Guevara Sada
Ramn Martn Mateo
Juan Manuel Nieto Nafra
CORRESPONDENCIA:
Centro Iberoamericano de la Biodiversidad (CIBIO)
Universidad de Alicante
Apartado de Correos 99
03080 Alicante (Spain)
www.cibio.org E-mail: cibio@ua.es
INSCRIPCIONES: cibio@ua.es
ILUSTRACIN PORTADA: Trigos de la regin Mediterrnea (de izquierda a derecha y de arriba abajo):
Triticum compactum, T. dicoccum, T. spelta, T. sphaerococcum
FOTOCOMPOSICIN E IMPRESIN:
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C/ Palma de Mallorca, 4 - bajo (Edicio Abeto)
E-30009-Murcia (Spain)
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DEPSITO LEGAL: MU-1286-1999
Cuadernos de Biodiversidad no se identica necesariamente con el contenido de los artculos ni con la opinin de los autores.
EDITA:
3
Cuadernos de Biodiversidad
L. Iglesias
1
y J.L. Casas
2
1 LABORATORIO DE BIOTECNOLOGA Y ECOLOGA APLICADA. UNIVERSIDAD VERACRUZANA. CAMPUS PARA LA
CULTURA, LAS ARTES Y EL DEPORTE. AV. DE LAS CULTURAS VERACRUZANAS NO. 101. COLONIA EMILIANO
ZAPATA, CP. 91090.
2 CIBIO. UNIVERSIDAD DE ALICANTE, CTRA. SAN VICENTE DEL RASPEIG S/N. 03690, ALICANTE,
ESPAA.
VARIACIN EPIGENTICA
Y SU I MPACTO EN
LA BI ODI VERSI DAD
ABSTRACT
Recent advances in the eld of genomics have
opened up new perspectives for understanding the
inuence of the environment on genome expression.
Epigenetics can provide a broad overview on the
study of genetic variation and its impact on biolo-
gical diversity. Epigenetic processes play an impor-
tant role in natural variation and microevolution
by generating a great number of polymorphisms
on which natural selection can act on. Tis paper
discusses gene expression modication by diverse
dynamic processes, the structure of DNA formed
by silent introns, repetitive elements, and DNA
methylation and histone acetylation. Te resulting
impact on biodiversity is also discussed.
Desde que Gregor Mendel comenzara a mediados
del siglo XIX a descubrir los secretos de la herencia
de los caracteres hasta los avances alcanzados en el
desarrollo del proyecto para descifrar el Genoma
Humano, la ciencia de la Gentica ha recorrido un
largo camino. Hoy en da son motivo de discusin
nuevas interrogantes que ponen en tela de juicio
conceptos y dogmas en el mbito gentico que hasta
hace poco resultaban incuestionables. Una de las ms
fascinantes ha sido los esfuerzos que se han realizado
para tratar de esclarecer cmo, cundo y por qu se
regula la expresin gnica y comprender la inuencia
del ambiente sobre la expresin del genoma. Esto
es lo que en la actualidad se le ha dado llamar el
paradigma epigentico.
La epigentica (del griego epi, en o sobre) se
reere a un conjunto de eventos moleculares (modi-
caciones del ADN y la cromatina) que van a ser
responsables de la modulacin de la expresin de los
genes sin alterar la secuencia de ADN (BIRD 2007).
Este trmino, acuado por Conrad Waddington
(WADDINGTON, 1942) y definido entonces
como la relacin entre el genotipo y el fenotipo o
como el proceso mediante el cual el genotipo genera
el fenotipo ha sido ampliamente documentado por
JABLONKA y LAMB (1994) desde la perspectiva
de su historia etimolgica.
Los cambios epigenticos se nos presentan como
modicaciones covalentes producidas por la adicin
4
Cuadernos de Biodiversidad
mitticas de una clula aun en ausencia de factores
ambientales especcos. As se puede armar que el
estatus epigentico de los genes y genomas vara en
mayor proporcin si se compara con la secuencia de
ADN relativamente esttica.
Los mecanismos epigenticos parecen ser particu-
larmente activos en respuesta a estrs ambiental (LU
et al., 2007) o a factores genmicos como pueden
ser acontecimientos de hibridacin (XIONG et
al., 1999). En plantas, las alteraciones epigenticas
parecen presentarse especialmente durante la forma-
cin de hbridos interespeccos y poliploides. De
igual forma se ha detectado variaciones epigenticas
asociadas a la variacin que se origina en los cultivo
de tejidos vegetales (KAEPPLER et al., 2000, XU
et al., 2004). Los cambios epigenticos inducidos
por cultivo de tejidos pueden manifestarse como la
activacin de loci quiescentes o por epimutaciones
de loci sensibles al control de la expresin a nivel
cromatnico.
Se abre con todos estos hallazgos nuevas pers-
pectivas para comprender el origen de la notable
biodiversidad que existe y cmo los organismos vivos
cambian espacial y temporalmente. La programacin
y reprogramacin del genoma que se produce desde
la etapa de clula germinal de todos los organismos
generan nuevos fenotipos con nuevas expresiones
que se maniestan tanto a nivel molecular como
morfolgico. De ste modo los efectos epigenticos
generan un gran nmero de polimorsmos sobre los
cuales acta la seleccin natural (Fig. 1).
Por todo ello es posible armar que los procesos
epigenticos juegan un papel muy signicativo en la
variacin natural y la microevolucin (BOSSDORF
et al., 2007). De hecho stos pueden llegar incluso a
incrementar el potencial evolutivo de los organismos
en respuesta a estrs abitico y jugar un papel impor-
de grupos funcionales (metilos, acetilos, fosfatos) o
de protenas (ubiquitina, SUMO) al ADN o algunas
de sus protenas asociadas, con repercusiones en la
regulacin transcripcional tales como activar, inhibir
o modicar la expresin de genes. La metilacin
de los residuos de citosinas del ADN constituye
el mecanismo epignetico mejor conocido (FIN-
NEGAN et al., 1993). Existen claras evidencias de
que aproximadamente el 30% de los residuos de
citosinas en el genoma vegetal se encuentra metilado
(JANOUSEK et al., 2002). Estas metilaciones repri-
men la transcripcin, impidiendo que los factores
de transcripcin se unan al ADN (FINNEGAN et
al., 2000). De esta manera, ya se ha comprobado
cmo la metilacion del ADN juega un papel muy
importante en el desarrollo de la planta as como en
los proceso de diferenciacin de rganos o tejidos y
durante la embriognesis (FINNEGAN et al., 2000,
CHAKRABARTY et al. 2003).
Otro mecanismo epigentico es el de la impronta
gentica (imprinting) descrito en plantas entre otros
por MESSING y GROSSNIKLAUS (1999). Como
se sabe cada gen de nuestro genoma suele estar
duplicado, siendo uno de ellos de origen materno y
el otro paterno. La impronta se inicia durante el pro-
ceso de la gametognesis y se transmite al embrin
(TAKEDA & PASZKOWSKI, 2006). El grado
de expresin o silenciamiento por esta va depende
tambin de metilaciones diferenciales que se pueden
reprogramar en las lneas germinales.
Aunque aun no se ha logrado descifrar comple-
tamente cmo opera este lenguaje epigentico, s se
conoce que a diferencia de los procesos genticos los
epigenticos pueden en algunos casos ser inducidos
por el ambiente. Los cambios epigenticos, una
vez producidos, puede ser parcialmente estables
y heredable, al menos en plantas (PATTERSON
et al., 1993, CUBAS et al., 1999, RICHARDS,
2006, JIRTLE & SKINNER 2007). Al respecto se
ha indicado que la herencia transgeneracional de la
metilacin del ADN parece descansar en la accin
del enzima metiltransferasa, que replica los patro-
nes de metilacin durante los procesos de mitosis
y meiosis (TAKEDA & PASZKOWSKI 2006).
Incluso despus que se han establecido los perles
epigenmicos se puede generar variacin gentica
sustancial durante las subsiguientes divisiones
Figura 1. La epigentica y su impacto en la biodiversidad
vegetal.
5
Cuadernos de Biodiversidad
tante en los procesos de especiacin y evolucin
(RAPP & WENDEL 2005, RICHARDS, 2006).
Esto se debe al hecho de que los procesos epigen-
ticos pueden proporcionar un segundo sistema de
herencia muy similar a la herencia gentica que per-
mite la evolucin por seleccin natural. A diferencia
de la variacin gentica, la epigentica puede verse
afectada por interacciones ecolgicas y proporcionar
una va adicional para acelerar el cambio evolutivo
(BOSSDORF et al., 2007).
En denitiva, la epigentica nos ha presentado
una nueva dimensin que nos puede ayudar a expli-
car mejor cmo las poblaciones biolgicas pueden
alcanzar una alta diversidad y cmo pueden en
muchos casos adaptarse como un guante a inespe-
rados y profundos cambios en su hbitat natural.
REFERENCIAS
BIRD, A. 2007. Perceptions of epigenetics. Nature,
447: 396-398.
BOSSDORF, O. , RI CHARDS, C. L. &
PIGLIUCCI, M. 2007. Epigenetics for ecologists.
Ecology Letters, 10: 1-10.
CHAKRABARTY, D., YU, K.W. & PAEK, K.Y.
2003. Detection of DNA methylation changes
during somatic embryogenesis of Siberian
ginseng (Eleuterococcus senticosus). Plant Sci.,
165: 61-68.
CUBAS, P., VINCENT, C. & COEN, E. 1999. An
epigenetic mutation responsible for natural variation
in oral symmetry. Nature, 401:157-161.
FINNEGAN, E.S., BRETTELL, R.I.S. & DENNIS,
E.S. 1993. Te role of DNA methylation in the
regulation of plant expression. In: J.P. Jost and
H.P. Saluz (Eds.) DNA Methylation: Molecular
Biology and Biological Signicance, Birkhauser,
Basel, pp. 218-261.
FINNEGAN, E.J., PEACOCK, W.J., AND
DENNIS, E.S. 2000. DNA methylation, a key
regulator of plant development and other processes.
Curr. Opin. Genet. Dev., 10: 217-223.
JABLONKA, E. & LAMB, M.J. 2002. The
changing concept of epigenetics. Annals of the
New York Academy of Sciences, 981: 82-96.
JANOUSEK, B., MATSUNAGA, S., KEJNOVSKY,
E., ZLUVOVA, J. & VYSKOT, B. 2002. DNA
methylation analysis of a male reproductive
organ specic gene (MROS1) during pollen
development. Genome, 45: 930-938.
JIRTLE, R. L. & SKINNER, M. K. 2007.
Environmental epigenomics and disease
susceptibility. Nat. Rev. Genet., 8: 253-262.
KAEPPLER, S.M., KAEPPLER, H.F. & RHEE,
Y. 2000. Epigenetic aspects of somaclonal
variation in plants. Plant Molecular Biology, 43:
179-188.
LU, G.Y., WU, X.M., CHEN, B.Y., GAO, G.Z.
& XU, K. 2006. Detection of DNA methylation
changes during seed germination in rapeseed
(Brassica napus). Chin. Sci. Bull., 51:182-190.
LU, G., WU., X., CHEN, B., GAO, G. & XU,
K. 2007. Evaluation of Genetic and Epigenetic
Modification in Rapeseed (Brassica napus)
Induced by Salt Stress. Journal of Integrative Plant
Biology, 49 (11): 1599-1607.
MESSING, J. & GROSSNIKLAUS, U. 1999.
Genomic imprinting in plants. Res. Probl. Cell
Dier, 25: 23-40.
PATTERSON, G. I . , THORPE, C. J . &
CHANDLER, V.L. 1993. Paramutation, an
allelic interaction, is associated with a stable and
heritable reduction of transcription of the maize
b regulatory gene. Genetics, 135: 881-894.
RAPP, R.A. & WENDEL, J.F. 2005. Epigenetics
and plant evolution. New Phytol., 168: 81-91.
RICHARDS, E.J. 2006. Inherited epigenetic
variation - revisiting soft inheritance. Nat. Rev.
Genet., 7: 395-401.
TAKEDA, S. & PASZKOWSKI, J. 2006. DNA
methylation and epigenetic inheritance during
plant gametogenesis. Chromosoma, 115:27-35.
XIONG, L.Z., XU, C.G., SAGHAI MAROOF,
M.A. & ZHANG, Q.F. 1999. Patterns of
cytosine methylation in an elite rice hybrid
and its parental lines by a methylation-sensitive
amplication polymorphism technique. Mol.
Gen. Genet., 261: 439-446.
XU, M.L., LI, X.Q. & KORBAN, S.S. 2004. DNA-
methylation alterations and exchanges during in
vitro cellular dierentiation in rose (Rosa hybrida
L.). Teor. Appl. Genet., 109: 899-910.
WADDINGTON, C.H. 1942. Te epigenotype.
Endeavour, 1: 18-20.
6
Cuadernos de Biodiversidad
RESUMEN
El refugio de Fauna Lanzanillo-Pajonal-Fragoso,
es un rea Protegida con 76.490 Ha marinas y su
territorio terrestre encierra la Baha de Nazabal, con
condiciones naturales para mantener poblaciones
de manates ya que presenta fondos con vegetacin
que constituyen su dieta. Adems a la Baha desem-
bocan ros que sirven de abrevaderos de agua dulce.
Se tomaron datos de 12 adultos y una cra muertos
ANL I S I S D E L A
MORTAL I DAD DE L
MANAT (TRICHECHUS
MANATUS MANATUS
LINNAEUS, 1758) EN
EL REFUGIO DE FAUNA
LANZANILLO-PAJONAL-
F R AGOS O, C UB A
E. Garca Alfonso
1
y R. Rodrguez Gonzlez
2
1 REFUGIO DE FAUNA LANZANILLO-PAJONAL-FRAGOSO. EMPRESA NACIONAL PARA LA PROTECCIN DE LA
FLORA Y LA FAUNA, VILLA CLARA. (ENPFF)
2 DEPARTAMENTO DE BIOLOGA, UNIVERSIDAD CENTRAL MARTA ABREU DE LAS VILLAS (UCLV)
RENERG@UCLV.EDU.CU
entre los aos 1987-2008, realizando recorridos por
toda la costa. Se confeccion una base de datos de
cada ejemplar y se determin que el chinchorreo
como arte de pesca estaba afectando la especie. Se
declar la Baha de Nazabal como Zona Protegida o
bajo Rgimen Especial de Uso y Proteccin, decre-
tado por la Secretaria de la Comisin Consultiva
de Pesca. El chinchorreo en la baha permanece
todava en un sector donde hasta la fecha no se han
registrado ms muertes.
7
Cuadernos de Biodiversidad
Palabras clave: Manat, mortalidad, Trichechus
manatus manatus, rea protegida.
ABSTRACT
Lanzanillo Pajonal-Fragoso Animals Shelter is
a protected marine area with 76,490 Ha and in its
land territory is located Nazabal Bay, with natural
conditions to maintain manatees due to it has see
beds vegetation that provide the diet as well as rivers
that ow to the Bay and serve as drinking fresh
water. Tere were collected data of dead individuals
including 12 adults and a baby from 1987-2008,
doing patrols along the coast. To determine possible
causes of death it was taken into account that the
shing gear coincided with the stranding. It was
drawn up a database of each analyzed specimen
and it was determined that the chinchorreo gear
was aecting the species. Nazabal Bay was declared
a protected or under special use and protection area
by the Secretary of the Advisory Committee on
Fisheries. Te chinchorreo gear in the bay was not
completely removed, remaining a sector where that
art of shing is still practiced up to the present there
have not caused more deaths.
Key words: Manatees, mortality, Trichechus
manatus manatus, protected area.
INTRODUCCIN
El rea Protegida Lanzanillo-Pajonal-Fragoso,
con categora de Manejo Refugio de Fauna, consiste
en un territorio marino costero de forma alargada,
estrecha y orientada de este a oeste y abarca una
supercie de 87.070 Ha (76.490 Ha marinas y
10.580 Ha terrestres), que incluye acuatorios sobre
la plataforma insular, numerosos cayos y cayuelos,
donde las tierras emergidas son evidentemente mino-
ritarias. Posee una alta diversidad de hbitat, los ms
signicativos son los manglares de desembocadura
(en ros, arroyos y canales) costeros, de canales entre
cayos y de cayos, tales combinaciones ambientales
favorecen una notable gama de hbitat que se reeja
en la diversidad de la ora y la fauna.
El manat de las Antillas (Trichechus manatus
manatus) se distribuye desde el Estado de Tabasco
en Mxico hasta Recife en Brasil (LEFEBRE et al,
1989), se encuentra adems en Las Antillas Mayores
incluyendo Cuba, Jamaica, Puerto Rico, La Espa-
ola y pequeos reductos en las Antllas Menores
(DOMNING & HAYEK, 1986).
Debido a las diversas amenazas a las que se
enfrenta la especie se encuentra catalogada en el
Libro Rojo de la UICN, bajo la categora de especie
vulnerable y tambin se encuentra en el apndice
I de CITES, inciso b (RATHBUN et al, 1985,
LEFEBVRE et al. 1989).
Los varamientos se clasican en dos tipos: los
varamientos individuales que involucran a un slo
animal o a una madre con su cra, y los varamientos
masivos, que involucran dos o ms animales de la
misma especie, exceptuando el caso de una madre
con su cra. (GERACI & LOUNSBURY, 1993).
Es necesario tener presente que los varamientos
individuales o masivos son eventos inesperados que
consecuentemente puede conducir a la mortandaz
de cualquier especie marina y que requiere de una
respuesta inmediata para reducir su probabilidad de
muerte (WIIKINSON, 1996).
El objetivo de este trabajo es determinar las posi-
bles causas que estn provocando la muerte de esta
especie en la Baha de. Para ello se registr y estudi
del varamiento de estos mamferos marinos con el
n de proporcionar informacin importante para el
manejo de los ecosistemas costeros.
DESCRIPCIN DEL REA DE TRABAJO
El rea de trabajo es un sistema manglar-seibadal-
arrecife que por su productividad y posibilidades de
refugio ofrece una garanta de soporte de la vida.
Estos hbitat constituyen sitios tpicos de reproduc-
cin, reclutamiento o cra de numerosas especies
debido a su alta productividad.
El Refugio de Fauna exhibe una alta diversidad de
hbitat (ALCOLADO, 2007), compuesta por man-
glares de desembocadura (en ros, arroyos y canales),
costeros, de canales entre cayos. Los seibadales se
asientan sobre cieno, grava, arena y cieno-arena,
los fondos duros aparecen mayoritariamente en la
zona norte exterior caracterizada por especies vege-
tales como Halodule wrighti, Syringodium liforme,
Talassia testudinum, Ruppia maritima. Esta elevada
diversidad de hbitat se reeja en la diversidad de
8
Cuadernos de Biodiversidad
la ora y la fauna, donde especies de requerimien-
tos muy especcos para la reproduccin, como
el Manat (Trichechus manatus) tienen lugar para
reproducirse.
Se realizaron recorridos de observacin en busca
de animales varados entre los aos 1987-2008, por la
costa que bordea la Baha de Nazabal, estableciendo
un sistema de informacin a travs del personal que
transita por el rea conformado por los trabajadores
de la Estacin Biolgica Manat, pescadores deporti-
vos, tropas guardafronteras y cuerpo de guardabos-
que. Se realizaron tomas de muestras y necropsias
para determinar la posible causa de muerte a los
animales que su estado lo permiti.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Se realiz el anlisis de 13 cadveres de manates
(12 adultos y una cra), encontrados en el Refugio
de Fauna Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, entre los
aos 1987 y 2008 (Figura 1). La mayora de los
varamientos ocurrieron en la baha de Nazabal o en
zonas cercanas a esta.
De los 13 animales varados 12 fueron encon-
trados entre los aos 2001 y 2008 (Figura 1), lo
que pudiera deberse a una mayor participacin de
los pobladores en la deteccin y comunicacin de
eventos de esta ndole. Adems en estos aos se
increment en el rea de estudio el arte de pesca
por chinchorreo que consiste en arrastrar mayas de
pesca de menor dimetro de abertura de la misma,
por el fondo de la baha, colectando las presas en un
embudo nal o matadero. Esto pudo causar la alta
mortalidad reportada entre los aos 2006 y 2008,
donde los manates eran vctimas de estos artes de
pesca.
Los manates son animales que nadan lentamente
(5-7 km por hora) a su vez, su cuerpo cilndrico
y de gran dimetro junto a su poca destreza hace
que caigan fcilmente en las redes (MIGNUCII-
GIANONI, 1990, MIGNUCII-GIANONI et al,
1991).
Los manates son mamferos de comportamiento
tmido, cuya estrategia para defenderse es huir y
esconderse (FREEMAN & QUINTERO, 1990).
Es de esperar que en reas con excesivo movimiento
antrpico, bien por trnsito de botes y por activi-
dad de pesca, los manates tiendan a huir o por lo
menos a disminuir su actividad (YOUNG et al,
1993). Al igual que todos los mamferos, el manat
Figura 1. Cadveres de manat (Trichechus manatus manatus) encontrados en el rea de estudio entre
los aos 1987 y 2008
9
Cuadernos de Biodiversidad
posee respiracin pulmonar, por lo que cada dos
o tres minutos emerge a la supercie para respirar,
pudiendo realizar apneas de hasta 20 minutos, esto
los hace vulnerables a las embarcaciones pesqueras
que pueden ocasionarles la muerte al impactar contra
su cuerpo (NACIONAL MARINE FISHERIES
SERVIE, 1992).
Los resultados muestran que la actividad pesquera
podra tener gran impacto en las poblaciones de
manaties, siendo importante controlar un posible
aumento en la actividad antrpica local, que conlle-
vara al desplazamiento de los manates del interior
de la Baha de Nazabal.
Se les observa fcilmente en grupos de dos a cua-
tro animales durante la actividad de apareamiento
en los sitios donde se concentra el alimento, y en el
invierno en las aguas clidas cercanas a las desembo-
caduras de ros, siendo las muertes ms frecuentes en
los primeros meses de cada ao de estudio en estas
zonas (Figura 2).
Los cadveres de manates se encontraron
fundamentalmente en cuatro estados de descom-
posicin, los cuales fueron, huesos secos, animales
en avanzado estado de descomposicin, anima-
les moderadamente descompuestos, y cadveres
frescos. Algunos de los manates se encontraron
desmembrados e incluso con heridas punzantes lo
que indica que la carne fue usada para el consumo
humano, como muestra la Figura 3. Se registran
muertes por ahogamiento, a pesar de que en algunos
animales, por su estado, no fue posible determinar
la causa exacta. Se tomaron muestras de material
seo, msculo etc, para futuros estudios genticos
y ecotoxicolgicos as como para la determinacin
de la edad de los animales.
Las causas que pudieran estar causando directa-
mente la muerte de los individuos de la poblacin
que vive el la Baha Nazabal, son la pesca con chin-
chorreo y el excesivo trasporte de embarcaciones
pesqueras en el rea.
Figura 2. Cadveres por meses en los aos estudiados.
10
Cuadernos de Biodiversidad
Debido a las abundantes muertes de esta especie
de importancia biolgica y ecolgica que tiene esta
especie para la baha y a raz del presente estudio,
se cre en la Baha de Nazabal una Micro-estacin
Biolgica, dentro de la Estacin Biolgica Manat,
perteneciente a la Empresa Nacional para Protec-
cin de la Flora y la Fauna, con el objetivo de forta-
lecer las acciones de conservacin y proteccin del
manat, as como promover la educacin ambiental
y realizar estudios de abundancia, distribucin y
anlisis de la mortalidad en dicha baha. Se declar
la Baha de Nazabal como Zona Protegida o bajo
Rgimen Especial de Uso y Proteccin, decretado
por la Secretaria de la Comisin Consultiva de
Pesca. El chinchorreo en la baha se elimin casi
completamente, quedando un sector donde aun se
realiza este arte de pesca, si bien, hasta la fecha no
han aparecido ms muertes.
Estos estudios de mortalidad de manates han
servido como puente para un entendimiento entre
diferentes usuarios de estas reas, lo que permitir
un mejor manejo de la misma con la nalidad de
garantizar la supervivencia del manat.
La conservacin del Trichechus manatus manatus
requiere una preservacin del ambiente como un
todo (MIGNUCCI-GIANNONI et al 1993),
incluyendo otras especies que comparten el hbitat
con el manat. Debe continuar el apoyo a la inves-
tigacin cientca de sta y otras especies en el rea
Protegida Lanzanillo-Pajonal-Fragoso, con miras a
la valoracin cultural y conservacin de nuestros
recursos.
REFERENCIAS
ALCOLADO, M. P. 2007. Ecosistema Sabana-
Camaguey. Estado actual, avances y desao en la
proteccin y uso sostenible de la biodiversidad.
Proyecto PNUD. Editoial Academia 182 pp.
DOMNING, D.P. & L.C. HAYEK. 1986.
Interspecic and intraspecic morphological
variation in manatees (Sirenia: Trichechus). Mar.
Mamm. Sci. 2:87-144.
FREEMAN, J. & H. QUINTERO. 1990. Te
distribution of West Indian manatees (Trichechus
manatus) in Puerto Rico: 1988-1989. NTIS
PB91-137240. Springeld, VA. 43 pp.
LEFEBVRE, L.W., T.J. OSHEA, G.B. RATHBUN
& R.C. BEST. 1989. Distribution, status,and
biogeography of the West Indian manatee.
Biogeography of the West Indies, 567-610.
NATIONAL MARINE FISHERIES SERVICE.
1992. Proposed Regime to Govern Interactions
Between Marine Mammals and Commercial
Fishing Operations. Silver Spring, MD. 96 pp.
RATHBUN, G.B., CARR, N., CARR, T., & C.A.
WOODS. 1985. Te distribution of manatees
and sea turtles in Puerto Rico, with emphasis
on Roosevelt Roads Naval Station. NTIS PB
85-151847 AS. Springeld, VA. 83 pp.
YOUNG, N.M., S. IUDICELLO, K. EVANS, &
D. BAUR. 1993. Te incidental capture of marine
mammals in U.S. sheries: problems and solutions.
Center for Marine Conservation, Washington,
D.C. 415 pp.
Figura 3. Manates encontrados en diferentes estados de descomposicin en la costa de la Baha de Nazabal.
11
Cuadernos de Biodiversidad
ESTUDIO DE LA ESTABILIDAD
GENTICA MEDIANTE EL
USO DE MARCADORES
RAPD EN IPOMOEA: UNA
ALTERNATIVA PARA LA
CONSERVACIN DE LA
DIVERSIDAD BIOLGICA
MEDI ANTE TCNI CAS
M O L E C U L A R E S
O.S. Gonzlez Paneque, A. Fernndez, Y. Fraga, B. Pino,
M.M. Hernndez Espinosa, J.J. Silva Pupo, . Espinosa
Reyes y J. Prez Prez
1 CENTRO DE ESTUDIOS DE BIOTECNOLOGA VEGETAL. FACULTAD DE CIENCIAS AGRCOLAS. UNIVERSIDAD
DE GRANMA. APDO. 21. BAYAMO. CP: 85100. GRANMA. CUBA.
2 LABORATORIO DE FISIOPATOLOGA. DEPARTAMENTO DE FITOPATOLOGA. CENTRO NACIONAL DE SANIDAD
AGROPECUARIA DE LA HABANA (CENSA). SAN JOS DE LAS LAJAS. LA HABANA. CUBA.
3 DEPARTAMENTO DE GENTICA Y MEJORAMIENTO DE LAS PLANTAS. INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS
AGRCOLAS DE LA HABANA (INCA). GAVETA POSTAL 1. SAN JOS DE LAS LAJAS. LA HABANA. CP: 32700.
CUBA.
E-MAIL: OGPANEQUE@UDG.CO.CU
RESUMEN
El trabajo se realiz en el Centro de Estudios
de Biotecnologa Vegetal de la Facultad de Cien-
cias Agrcolas, perteneciente a la Universidad de
Granma, Cuba; para lo cual, se emplearon races
tuberosas del clon de boniato (camote) INIVIT B
93-1, trasladadas al laboratorio y colocadas en fras-
12
Cuadernos de Biodiversidad
establishment of strategies and procedures for the
conservation and diusion of the biodiversity.
Key words: ADN, sweet potato, molecular,
RADP.
INTRODUCCIN
El boniato (Ipomoea batatas (L.) Lam.) es comn-
mente consumido en el mundo y la obtencin de
material de siembra mediante la micropropagacin
acelerada representa una alternativa para la pro-
duccin de semilla de alta calidad (LPEZ et al.,
2002) y el empleo de las tcnicas in vitro posibilitan
resolver esta situacin favoreciendo la multiplicacin
del mismo.
Una va de multiplicacin acelerada de los cultivos
es la embriognesis somtica, la que representa un
gran avance en el empleo de las tcnicas de cultivo de
tejidos vegetales (MERKLE, PARROT & FLINN,
1995); siendo su aplicacin de gran importancia en
los cultivos de inters agrcola (FREIRE, 2001),
aunque todava no ha sido sealada para algunas
especies (PARROT, 2002). Conjuntamente con
ello, se hace necesario la identicacin gentica del
material vegetal, para lo cual se emplean los mar-
cadores morfolgicos, bioqumicos y moleculares
(CORNIDE et al., 2002). Segn FORD-LLYOD
(2001), la identicacin basada exclusivamente en
marcadores morfolgicos, no es totalmente satis-
factoria debido a su lentitud y de ah la necesidad
del empleo de otros medios como los moleculares
(VARGAS et al., 2002).
Los marcadores pueden ser empleados para bus-
car diferencias en los patrones de expresin entre
plantas; lo cual indica que son especcos para cada
material gentico, siendo una va que conrma que el
mtodo puede ser usado para evaluar las variaciones
genticas en las plantas (RODRGUEZ, 2005). De
ah que desde el punto de vista conservacionista, el
empleo de las tcnicas de cultivo in vitro han resul-
tado ser muy tiles para la proteccin de la ora
amenazada y se ha convertido en una alternativa
muy ecaz para la conservacin de las especies a nivel
mundial (SERNA, 1999). Sin embargo, es necesario
tener presente la estabilidad y variabilidad del mate-
rial vegetal para lograr una correcta manipulacin y
conservacin del mismo.
cos con agua para inducir la brotacin de las yemas,
y vitroplantas de embriones somticos obtenidos
de callos a partir de limbos foliares, sembrados en
medio MS; y para ambos casos se tomaron al azar
muestras de limbos foliares para estudiar la esta-
bilidad del material propagado mediante anlisis
moleculares del ADN (RAPD), empleando diez
cebadores arbitrarios (OPF y OPA), evalundose las
bandas existentes entre el donante y el regenerante
por su presencia y ausencia. Es necesario el moni-
toreo molecular del material vegetal para la conser-
vacin de la biodiversidad gentica en las diferentes
localidades, regiones y pases. Como resultado, siete
cebadores produjeron una amplicacin aceptable
en cuanto a la intensidad de bandas en el donante
y las vitroplantas obtenidas a partir de embriones
somticos, existiendo un alto monomorsmo entre
ambos materiales, lo cual puede brindar mayor y
ms certera informacin del material vegetal para
el establecimiento de estrategias y procedimientos
a favor de la conservacin y difusin de la biodi-
versidad.
Palabras clave: ADN, boniato, molecular,
RAPD.
ABSTRACT
This work was conducted in the Centre of
Studies of Plant Biotechnology of the Faculty of
Agricultural Sciences of the University of Granma.
We used tuberous roots of the sweet potato clone
INIVIT B 93-1 and vitroplants derived from
somatic embryos coming from calli obtained from
leaf tissue grown in MS medium. Tissue samples
from both types of plant material were randomly
obtained and their genetic stability analyzed by
molecular analysis of the ADN (RAPD), using ten
arbitrary primers (OPF y OPA) and evaluating the
bands in terms of presence and absence. Such a
molecular monitoring is required for any study of
genetic diversity conservation to be conducted in
dierent localities, regions and countries. As a result,
seven primers produced an acceptable amplication,
indicated by the intensity of the bands found in the
donor and the somatic embryo-derived vitroplants.
Te high monomorphism appearing between both
materials gives more accurate information for the
13
Cuadernos de Biodiversidad
Como una va segura de identicacin y carac-
terizacin del material vegetal en los ltimos aos
se han desarrollado y aplicado con xito las tcnicas
de los marcadores moleculares para el estudio de
poblaciones de plantas posibilitando la conserva-
cin de la biodiversidad de las especies vegetales
en el planeta. Al ser analizada la identicacin
de genotipos, especcamente mediante RAPD,
podemos plantear que ha sido posible su empleo
en varias especies debido a que cada cultivo pro-
duce un patrn reproducible de bandas de ADN
amplicado (VERA, 1999).
Como parte de los trabajos que se llevan a cabo
en el estudio de la diversidad gentica en el cultivo
del boniato, se desarroll la presente investiga-
cin donde perseguimos como objetivo evaluar,
mediante el uso de los marcadores RAPD, la estabi-
lidad gentica del material para lograr un adecuado
manejo y conservacin de los recursos vegetales en
esta especie.
MATERIAL Y MTODOS
Se emplearon plantas provenientes de races
tuberosas pertenecientes al clon INIVIT B 93-1, cul-
tivadas en parcelas experimentales de investigacin,
segn el Instructivo Tcnico del boniato (CUBA.
MINAGRI, 1998), trasladadas al laboratorio y
colocadas en frascos con agua en condiciones semi-
controladas para inducir la brotacin de las yemas
y vitroplantas (Figura 1) procedentes de embriones
somticos (Figura 2) obtenidos a partir de callos
de limbos foliares de 1 cm
2
(GONZLEZ et al.,
2001), sembrados con la supercie adaxial (Figura
3) en contacto con el medio de cultivo propuesto
por MURASHIGE & SKOOG (1962); para ambos
casos se tomaron los limbos foliares para realizar los
anlisis moleculares del ADN.
Con la nalidad de evaluar la utilizacin de la
Tcnica de Amplicacin Aleatoria del ADN Poli-
mrco (RAPD), para estudiar la estabilidad del
material propagado, se tomaron al azar muestras
de tejido foliar de brotes de races tuberosas con 25
das y vitroplantas con 20 das de edad. Se extrajo
el ADN genmico total, segn el mtodo descrito
por DELLAPORTA, WOODY y HICH (1983).
La concentracin de ADN de cada muestra fue
determinada por espectrofotometra y se estim la
medicin a la intensidad ptica de 260 y 280 nm en
un espectrofotmetro. La reaccin de amplicacin
se realiz en un volumen total de 25 uL que con-
tena: 10 mM Tris-HCL a pH 8,3; 50 mM KCL,
2 mM MgCL
2
, 0,001% de gelatina; 100 uM de
cada dNTPs, 5 pmoles de los cebadores Kits OPA
y OPF, 5 ng de ADN genmico y 2 L de taq ADN
polimerasa (Amplicen).
Se usaron diez cebadores arbitrarios que fueron
los siguientes: OPF-15, OPF-14, OPA-13, OPF-13,
OPF-04, OPF-07, OPF-01, OPF-03, OPA-12 y
OPF-05; los cuales han sido usados con anterioridad
para este tipo de estudio en diferentes cultivos por
PETEIRA et al. (1999 y 2001).
Figura 1. Plantas provenientes de races tuberosas y vitroplantas procedentes de embriones somticos pertenecientes
al clon INIVIT B 93-1.
14
Cuadernos de Biodiversidad
Se evaluaron las bandas existentes en el donante
y el regenerante de forma binaria por su presencia
(1) y ausencia (0), visualizndose a travs de foto-
grafas. Los resultados se expresaron en porcentajes
de monomorsmo.
RESULTADOS
Como parte de la necesidad del monitoreo
molecular del material vegetal y la conservacin de
la biodiversidad, se hace necesario llevar a cabo estos
trabajos para el estudio de la diversidad gentica
y la conservacin de los recursos genticos en las
diferentes localidades, regiones o pases.
De un total de diez cebadores ensayados, siete
produjeron una amplicacin aceptable en cuanto a
la intensidad de bandas (OPF-15, OPF-14, OPF-04,
OPF-07, OPF-01, OPA-12 y OPF-05) y los ceba-
dores ms informativos fueron el OPF-01, OPA-12
y OPF-07, al generar el mayor nmero de bandas
en el donante y las vitroplantas obtenidas a partir
de embriones somticos (Tabla I), coincidiendo el
total de bandas obtenidas para el donante y las vitro-
plantas con todos los cebadores empleados (Figura
4), existiendo un alto monomorsmo entre ambos
materiales (100%).
A partir de los resultados obtenidos se puede
plantear que la amplicacin del ADN de los mate-
riales con los cebadores utilizados, produjo un alto
grado de monomorsmo, presentando las plantas
procedentes de embriones somticos patrones de
bandas idnticos al donante en la regin del ADN
explorada por los mismos. Las semejanzas observadas
en el ADN genmico de las plantas donante y las
vitroplantas obtenidas a partir de embriones som-
ticos evidenciaron que no se observ polimorsmo
para los cebadores empleados. Siendo de esperar que,
en futuros estudios que se realicen con el empleo
de un mayor nmero de marcadores moleculares,
brinden una mayor y ms certera informacin del
material vegetal para el establecimiento de estrategias
y procedimientos a favor de la conservacin y difu-
sin de la biodiversidad, con la seguridad gentica
de las especies de que se dispone y un mejor uso de
las mismas.
La funcionalidad de los cebadores empleados en
este trabajo, para detectar variacin gentica, ha sido
La amplicacin fue llevada a cabo en un ter-
mociclador y la reaccin de amplicacin se realiz
durante 45 ciclos de 1 minuto a 94C, 1 minuto a
36C, 2 y 10 minutos a 72C (Peteira et al., 1999).
Los productos de la amplificacin, separados
mediante electroforesis vertical en gel de agarosa
al 1,5% en solucin amortiguadora de Tris-HCL
cido brico EDTA (TBE) 0,5X a 110 volts, fueron
teidos con bromuro de etidio (5 mg.mL
-1
) y visua-
lizados en un transiluminador ultravioleta.
Figura 2. Embriones somticos obtenidos a partir de
callos de limbos foliares.
Figura 3. Callos con estructuras embriognicas obtenidos
a partir de limbos foliares.
15
Cuadernos de Biodiversidad
informada por PETEIRA et al. (1999 y 2001), en
estudios de diversidad gentica en diferentes especies
vegetales del gnero Lycopersicon, quienes demostra-
ron que los mismos son efectivos para llevar a cabo
estos estudios y no han sido sealados con anterio-
ridad para el cultivo del boniato, por lo que debern
probarse otros cebadores antes de hacer conclusivos
los resultados de monomorsmo encontrados para el
Tabla I. Resultados del anlisis de los RAPD en el material donante y el material regenerado a partir de
embriones somticos en el clon INIVIT B 93-1
Clon INIVIT B 93-1
Cebador
Total de bandas (n) Bandas
monomrcas
Monomorsmo
(%)
Donante Regenerado
OPF-15 4 4 4 100
OPF-14 2 2 2 100
OPA-13 5 5 5 100
OPF-13 1 1 1 100
OPF-04 3 3 3 100
OPF-07 5 5 5 100
OPF-01 6 6 6 100
OPF-03 2 2 2 100
OPA-12 6 6 6 100
OPF-05 6 6 6 100
--- 40 40 40 100
Figura 4. Productos de la amplicacin por PCR del ADN en Ipomoea batatas 1 Material donante. 2- Vitroplantas
obtenidas a partir de embriones somticos.
16
Cuadernos de Biodiversidad
donante y las plantas regeneradas a partir de embrio-
nes somticos del clon INIVIT B 93-1.
DISCUSIN
Referente al empleo de los marcadores mole-
culares, diferentes autores como Ramrez (2005),
plantearon que son una herramienta ecaz para
monitorear la estabilidad gentica del material
vegetal, y por otra parte (RODRGUEZ &
ARENCIBIA, 2002; COTO & CORNIDE,
2002), dejaron claro que los mismos brindan ms
informacin que los marcadores morfolgicos,
pues el polimorsmo detectado es mayor y no
estn inuenciados por el ambiente. Estas inves-
tigaciones son necesarias para poder identicar el
comportamiento y los cambios que se llevan a cabo
en el material vegetal en la naturaleza y los mismos
no pueden ser observados de inmediato y a simple
vista, trayendo consigo otras consecuencias en la
biodiversidad vegetal; de igual manera, se puede
conocer el impacto que ocasiona el cambio clim-
tico actual y la actividad del hombre en la natura-
leza, posibilitando el establecimiento de patrones
moleculares de estricta observacin y respeto para
el estudio de la biodiversidad.
Por otra parte, las investigaciones de los marca-
dores moleculares, permiten conocer de las especies
identicadas la informacin que las mismas ofrecen
de su composicin molecular especica, de su tra-
yectoria gentica, caractersticas y actividad; todo
lo cual puede ser empleado para futuros estudios,
ofreciendo posibles caminos a soluciones bsicas de
la conservacin y estudio de la biodiversidad; a pesar
de que los momentos actuales no permiten disponer
de las tcnicas moleculares en todos los laboratorios
y reas de conservacin de la biodiversidad, si se
considera una importante solucin para el estudio
de los problemas que existen actualmente de las
prdidas de la biodiversidad y las necesidades de su
proteccin urgente.
Los RAPD han sido usados extensamente para
determinar la diversidad gentica y relaciones entre
especies (IPEK & IPEK, 2003; BAMBERG & DEL
RIO, 2003). En el cultivo del boniato, los estudios
moleculares con el empleo de RAPD han sido usados
especcamente en algunos cultivares para la estima-
cin de la diversidad gentica, en el mapeo gentico
de los clones de inters y la localizacin de genes en
las races resistentes a nemtodos (TSENG et al.,
2001), no existiendo informacin en lo referente a
estudios llevados a cabo en el material propagado
va embriognesis somtica.
Al respecto SNCHEZ et al. (2003), plantearon
que los anlisis de RAPD pueden ser usados para la
identicacin de cultivares; adems, para distinguir
diferencias entre genotipos.
Desde el punto de vista molecular, el cultivo del
boniato ha sido poco investigado, aspecto que se
hace necesario enfatizar, ya que segn GONZLEZ
(2003), la aplicacin de las tcnicas de cultivo de
tejidos vegetales requieren como anlisis comple-
mentarios los estudios de la estabilidad gentica del
material obtenido. A partir de estos resultados se
logra un mayor entendimiento de la necesidad de
efectuar estudios moleculares del ADN en el material
vegetal, para alcanzar una mayor riqueza y seguridad
en las especies a conservar, proteger y extender en los
diferentes ecosistemas, garantizando la proteccin
de los mimos.
Los estudios a nivel molecular tienen especial
relevancia en los momentos actuales, donde se
ejecutan trabajos de seleccin acelerada y mejo-
ramiento gentico a los que estn sometidos la
mayora de los cultivos aprovechando el uso de
las modernas tecnologas en los cultivos agrcolas;
todo ello permite evaluar la aparicin de nuevas
variedades y su comparacin con las ya existentes,
lo que permitir el aumento de la biodiversidad del
material gentico.
El estudio de los recursos genticos a nivel mole-
cular se hacen cada da ms necesarios para controlar
y evitar la prdida de la biodiversidad; todo lo cual
pone en peligro la disponibilidad de alimentos a nivel
mundial y con ello la conservacin de las especies de
inters para el hombre con la mayor calidad y canti-
dad posible. En este sentido, el empleo de las tcnicas
moleculares, resulta de gran utilidad e importancia
en la elaboracin de futuros protocolos de investiga-
cin y produccin a gran escala de material vegetal
genticamente conocido y a favor de la diversidad
vegetal con una funcin protectora y evaluadora de
los posibles cambios presentados por la contamina-
cin ambiental y la accin del hombre.
17
Cuadernos de Biodiversidad
Los resultados obtenidos servirn de base a otros
estudios y permitirn evaluar, controlar y trazar
estrategias para la conservacin y uso de los recursos
genticos, todo lo cual se traduce en la conservacin
de la biodiversidad vegetal y con ello la vida en el
planeta.
AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecemos a los miembros del Ins-
tituto Nacional de Ciencias Agrcolas de La Habana
(INCA), especcamente al Departamento de Gen-
tica y Mejoramiento de las Plantas, especialmente a
la Dra.C. Martha lvarez Gil, el MSc. Juan Castillo
Hernndez, la Tcnica Mirtha Lpez Machado y
el administrador Tcnico Pedro Brito Gaspar. Al
Dr.C. Benedicto Martnez Coca, perteneciente al
Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria de La
Habana (CENSA). A los investigadores Dr. C. Lus
M. Gonzlez Nuez y el Dr.C. Ramiro Ramrez,
ambos del Instituto de Investigaciones Agropecua-
rias Jorge Dimitrov, Provincia de Granma, por las
correcciones del documento y la toma de las fotos
presentadas en el mismo, respectivamente. A los
miembros del Instituto Nacional de Investigaciones
de Viandas Tropicales (INIVIT), Santo Domingo,
Villa Clara, por la facilitacin del material vegetal
para realizar la investigacin. A los miembros del
Club de Computacin y Electrnica de la ciudad de
Manzanillo, Provincia de Granma, especialmente a
los directivos del mismo, los MSc. Dionisio Ponce
Ruiz y Omar Prez Lozada, por la facilitacin de la
tirada nal del presente artculo.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
BAMBERG, J. & A. DEL RO. 2003. Vulnerability
of alleles in the us potato gene bank extrapolated
from RAPDs. Amer. J. of Potato Res. 80: 79-85.
CORNIDE, M. T., J. SNCHEZ & D. CALVO.
2002. Identicacin de genotipos y progenitores.
En: M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares.
Nuevos horizontes en la gentica y la seleccin de las
plantas. Captulo 7. La Habana. Pp. 212-220.
COTO, O. & M. T. CORNIDE. 2002. Principales
aplicaciones de los marcadores moleculares. En:
M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares.
Nuevos horizontes en la gentica y la seleccin de las
plantas. Captulo 4. La Habana. Pp. 92-119.
CUBA. MINAGRI. 1998. Instructivo tcnico sobre
el cultivo del boniato. SEDAGRI/AGRINFOR.
La Habana. 21 pp.
DELLAPORTA, L., J. WOODY & J. HICH.
1983. A plant molecular DNA minipreparation.
Versin II. Plant Mol. Biol. 1: 19-21.
FORD-LLYOD, B. 2001. Genotyping in plant
genetic resources. Plant genotyping: the DNA
fingerprinting of plant. CAB International.
56 pp.
FREIRE, M. 2001. Nueva metodologa de
embriognesis somtica en caa de azcar
(Saccharum sp. ) H bri do var. C 87-51,
empleando medios de cultivo lquidos. Jornada
XXXV Aniversario del INIVIT, Santo Domingo,
Villa Clara. 56 pp.
GONZLEZ, M. E. 2003. Micropropagacin de
cafeto (Coea canephora P. var. Robusta) mediante
la embriognesis somtica con el empleo de
metabolitos de origen bacteriano. Tesis de Grado
(Dr. en Ciencias Agrcolas). INCA. La Habana.
97 pp.
GONZLEZ, O., J. SILVA, A. ESPINOSA,
E. OLIVA & I. MILANES. 2001. Efecto
de la iluminacin en la induccin de callos
morfognicos en boniato. Biotecnologa Vegetal
1(2): 89-92.
IPEK, M. & A. IPEK. 2003. Comparing of AFLPs,
RAPD markers, and isoenzymes for diversity
assessment of garlic and detection of putative
duplicates in germplasm collections. J. Amer. Soc.
Hort. Sci. 128(2): 246-252.
LPEZ, J., M. TORRES, C. BORROTO, R.
TRUJILLO, M. DAQUINTA, R. GMEZ,
M. GARCA, V. MEDERO, J. VENTURA, N.
MONTANO, A. MORALES, M. CABRERA,
A. ROBAINA, A. RAYAS, & C. PONS. 2002.
Metodologa para la propagacin in vitro del
boniato. Jornada XXXV Aniversario del INIVIT,
Santo Domingo, Villa Clara. 18 pp.
MERKLE, S., W. PARROT & B. FLINN. 1995.
Morphogenic aspects of somatic embryogenesis.
En: T. A. Torpe (ed), In Vitro Embryogenesis in
Plants. Klumer Academic Publishers. Pp. 155-
203.
18
Cuadernos de Biodiversidad
MURASHIGE, T. & F. SKOOG. 1962. A revised
medium for rapid growth and bioassays with
tobacco tissue culture. Physiology Plantar 15:
473-497.
PARROT, W. 2002. La embriognesis somtica
en las angiospermas. Conferencia. VI Simposio
Internacional de Biotecnologa Vegetal. Instituto
de Biotecnologa de las Plantas, Santa Clara. Pp.
7-17.
PETEIRA, B., B. FERNNDEZ, P. GARCA, E.
MIRANDA, O. LEON & I. MIRANDA. 1999.
Repetibilidad de los marcadores RAPD en el
gnero Lycopersicon. Breve estudio. Proteccin
Vegetal 14(2): 75-79.
PETEIRA, B., E. FERNNDEZ, M. GONZLEZ,
T. SHAGARODSKY & I. MIRANDA. 2001.
Aplicacin de marcadores RAPD al estudio de
la diversidad gentica en Cuba. Proteccin Vegetal
16(2-3): 84-91.
RAMREZ, R. 2005. Uso de bajas dosis de rayos x
en la estimulacin del crecimiento, rendimiento
y calidad del fruto en plantas de tomate
(Lycopersicon esculentum, Mill). Tesis de Grado
(Dr. en Ciencias Agrcolas). INCA. La Habana.
Pp. 99.
RODRGUEZ, M. & A. ARENCIBIA. 2002.
Principales tipos de marcadores del polimorsmo
de los cidos nucleicos. Tcnicas Analticas. En:
M. T. Cornide (ed), Marcadores Moleculares.
Nuevos horizontes en la gentica y la seleccin de
las plantas. Captulo 1, Pp. 13-35.
SNCHEZ, M., M. MARTNEZ, S. VALLADARES,
E. FERRO & A. VIEITEZ. 2003. Maturation
and germination of oak somatic embryos
originated from leaf and stem explants: RAPD
markers for genetic analysis of regenerants.
J. Plant Physiology 160: 699-707.
SERNA, M. D. 1999. Biotecnologa vegetal
y coservacin. Cuadernos de Biodiversidad.
Universidad de Alicante, Espaa. 2:9-11.
TSENG, Y., H. LO & S. HWANG. 2001. Genotyping
and assessment of genetic relationships in elite
polycross cultivars of sweet potato in Taiwan
based on SAMPL polymorphism. Botanical
Bulletin of Academia Sinica 43: 99-104.
VARGAS, D., A. ROQUE & E. HECTOR. 2002.
Empleo de la tcnica AFLP para determinar la
estabilidad de plantas de frutabomba (C. papaya
cv. Maradol rojo) durante la micropropagacin.
VIII Congreso Cientfico del INCA. Cultivos
Tropicales, La Habana. Pp. 24.
VERA, CL., M. PAREDES & V. BECERRA. 1999.
Estudio comparativo de diversidad morfolgica,
isoenzimas y RAPDs dentro y entre clases
comerciales de Frijol chileno (Phaseolus vulgaris
L.). Agricultura Tcnica 59(4): 247-259.
19
Cuadernos de Biodiversidad
RESUMEN
En los ltimos aos se ha manifestado una
tendencia creciente a valorizar el conocimiento
tradicional de la naturaleza, incluyendo su manejo
y conservacin. Este conocimiento, transmitido
en forma oral en aquellos pueblos que conservan
su estructura social y tradiciones, constituye un
verdadero patrimonio o memoria biocultural. Para
los idelogos y eclogos profesionales puede resul-
tar especialmente interesante conocer y aprender a
valorar esta memoria biocultural.
En esta nota comentamos dos libros reciente-
mente aparecidos que se reeren al tema. El de Victor
Manuel Toledo y Narciso Barrera-Bassols tiene un
enfoque mundial y una amplia discusin sobre la
importancia de la memoria biocultural y con ella de
la etnoecologa que sera justamente el estudio de esta
memoria. El segundo libro de Eckart Boege, centra
su inters en Mxico y su nfasis en la relacin que
existe entre conservacin de la memoria biocultural
y la apropiacin del uso de los recursos naturales por
los pueblos indgenas.
Ambos libros se complementan y presentan de
una manera excepcional un panorama lleno de suge-
rencias en esta poca en que resulta ineludible buscar
una estrategia de uso sustentable para los recursos
biolgicos y en general naturales.
ABSTRACT
In recent years there has been an increasing
tendency to place greater value on traditional
knowledge about nature, as well as its management
and conservation. Tis knowledge, transmitted
orally in villages where the traditions and social
structure have been preserved, represent a genuine
legacy: a biocultural memory. For professional
biologists and ecologists it is particularly interesting
to learn about and appreciate the depth of this
biocultural memory.
In this note we comment on two recently
published books that address this topic. In the rst,
Victor Manuel Toledo and Narciso Barrera-Bassols
take a worldwide perspective and oer a far reaching
discussion on the importance of biocultural memory
and, along with it, the ethnoecology which makes up
the study of this memory. Eckart Boege, author of
the second book, focuses on Mexico and emphasizes
the relationship that exists between biocultural
memory and the appropriation of the use of natural
resources by indigenous peoples.
These two books complement each other
beautifully and offer an exceptionally useful
panorama of suggestions at a time when it is
imperative that we nd strategies for the sustainable
use of biological resources and natural resources in
general.
G. Halter
INSTITUTO DE ECOLOGA, A.C. KM. 2.5 CARR. ANTIGUA A COATEPEC NO. 351. CONGREGACIN EL HAYA.
XALAPA, VERACRUZ
GONZALO.HALFFTER@INECOL.EDU.MX
L A M E M O R I A
B I O C U L T U R A L
20
Cuadernos de Biodiversidad
Es realmente excepcional tener la ocasin de
comentar la presentacin simultnea de dos notables
libros
1
sobre el patrimonio biocultural de los pue-
blos indgenas. Sin embargo, no es inesperado. Se
conjugan la creciente valorizacin del conocimiento
tradicional ecolgico y en general biolgico; la
importancia del patrimonio biocultural en Mxico;
y la existencia en nuestro pas de varios grupos de
investigacin dedicados a estudiar y valorizar este
patrimonio y su conocimiento tradicional.
Aunque coincidiendo en la temtica y en sus
principales conclusiones, los dos libros muestran
diferencias importantes en su contenido. Por eso,
he considerado conveniente comentarlos por sepa-
rado.
Como sealan Toledo y Barrera-Bassols, de todas
las expresiones que integran una cultura, los conoci-
mientos sobre la naturaleza conforman una dimen-
sin especialmente notable porque compendian las
observaciones sobre el entorno, realizadas, manteni-
das y perfeccionadas a travs de largos periodos de
tiempo. Conocimientos y usos de la biodiversidad
han estado asociados en las culturas tradicionales a
formas de conservacin que hacen su utilizacin sus-
tentable. Estas formas de uso dependen de delicados
equilibrios entre el conocimiento de suelos y biota y
la explotacin que se hace de ellos. A medida que se
extienden y penetran los procesos de globalizacin:
culturales y comerciales, las demandas de espacio y
de recursos se incrementan y ponen en peligro los
conocimientos y usos tradicionales.
Los dos primeros captulos de La Memoria
Biocultural estn destinados a explicar la esencia,
estructura y dinmica de esta memoria, su impor-
tancia para la conservacin de la biodiversidad y las
amenazas a las que se enfrenta. Basndose en un
acucioso anlisis de la bibliografa, los autores esta-
blecen la sobreposicin geogrca de las reas ms
ricas en diversidad biolgica, diversidad lingstica
y diversidad en usos agrcolas y pecuarios. Este es
un tema que tambin trata con amplitud Boege en
relacin a Mxico.
Resulta muy interesante el valor de la agricultura
tradicional en nuestros das: la quinta parte de la
poblacin mundial la prctica y con ello satisface sus
necesidades y las de una poblacin equivalente a la
suya. La importancia de los territorios indgenas para
la conservacin de la biodiversidad es evidente. De
hecho, los pueblos indgenas controlan, legalmente
o no, inmensas reas ricas en recursos naturales
(segn los autores, del 12 al 20% de la supercie
terrestre). Tanto la informacin reunida por Toledo
y Barrera-Bassols, como sus propios juicios y anlisis,
permiten asegurar que en el pasado, como ahora y en
el futuro, las estrategias tradicionales de uso mltiple
han sido y son el elemento ms importante para la
conservacin de la heterogeneidad y estabilidad de
los paisajes y por lo tanto de su riqueza bitica. Un
tema tambin tratado por Boege.
Los captulos III y IV de La Memoria Biocul-
tural son altamente personales. En ellos los autores
incluyen no solo sus conocimientos, sino tambin
sus pasiones, aunque en este ltimo caso siempre
con una mesura lingstica encomiable.
En el captulo III enfocan la existencia de dos
ciencias: la tradicional, integrada a travs del tiempo
desde la revolucin neoltica que da nacimiento a la
agricultura y a la ganadera; y la moderna, desarro-
llada en los ltimos trescientos aos en las sociedades
industriales de Occidente. Los autores recalcan la
falta de inters de la segunda por los conocimientos
acumulados por la primera. Dicen la fascinacin
por las nuevas tecnologas agrcolas, derivadas de
la qumica y la gentica y del uso de combustibles,
sepult la experiencia de manejo de la naturaleza
ganada por la especie humana en su modalidad
preindustrial. Sin embargo, sealan que a partir de
la dcada de los ochentas del siglo pasado, se inicia
un movimiento importante de retorno a la otra
ecologa. Este movimiento ha sido motivado por
la conciencia creciente de una crisis ambiental en el
Planeta y la acumulacin de evidencias que muestran
la incapacidad de los sistemas productivos modernos
para un uso sustentable de los recursos naturales.
El captulo IV est destinado a describir qu son
las sabiduras tradicionales, basndose en la distin-
cin desarrollada por Luis Villoro entre ciencia y
1 Toledo, Victor M. y Narciso Barrera-Bassols. 2008. La
Memoria Biocultural: La importancia Ecolgica de las Sabiduras
Tradicionales. Icaria Editorial, Barcelona. 220 p.
Boege, Eckart. 2008. El Patrimonio Biocultural de los Pueblos
Indgenas de Mxico: Hacia la Conservacin In Situ de la Biodiversi-
dad y Agrodiversidad en los Territorios Indgenas. Instituto Nacional
de Antropologa e Historia y Comisin Nacional para el Desarrollo
de los Pueblos Indgenas, Mxico, D.F. 342 p.
21
Cuadernos de Biodiversidad
sabidura. La ciencia es universal e impersonal; en
cambio la sabidura es local e individual. La ciencia
no puede reemplazar a la sabidura, ni sta a aquella.
A mi modo de ver, habra que hablar de complemen-
tariedad, ya que en casi cualquier tipo de sociedad,
aunque en muy distintas proporciones, ciencia y
sabidura forman parte de la visin global que los
seres humanos tenemos de la naturaleza.
Dnde ubicar en esta dicotoma entre ciencia y
sabidura, la memoria biocultural indgena y local?
En principio, los saberes tradicionales se encuentran
ms cercanos a lo que se ha denido como sabidura,
porque los conocimientos tradicionales no se gestan
per se, sino en funcin de otros dos contextos de las
culturas tradicionales: la produccin y las creencias.
Todo lo anterior lleva a Toledo y Barrera-Bassols a
denir que debe ser la etnoecologa: un estudio de
la concepcin de los productores tradicionales en sus
dimensiones de sistemas de conocimiento, sistemas
de creencias y de prcticas con las que los individuos
y sus familias satisfacen sus necesidades materiales
y espirituales.
El captulo V, Agroecologa y Sabidura, contiene
una serie de ejemplos bien escogidos y documenta-
dos, de situaciones agroecolgicas tradicionales a
nivel mundial.
El captulo VI: Globalizacin, Memorial Bio-
cultural y Agroecologa, es una sntesis de los cap-
tulos anteriores y una bsqueda de planteamientos
alternativos. Sealan los autores que durante su
larga historia biocultural el hombre ha favorecido
y usado la biodiversidad. La actual globalizacin,
por sus propias caractersticas y propsitos, es un
proceso fundamentalmente homogenizador y como
tal amenaza cualquier manifestacin de diversidad
muy especialmente la biolgica y la biocultural. La
agricultura industrial tiene entre sus muchos efectos
negativos, la destruccin de la memoria biocultural
integrada por los saberes acumulados durante 10 000
aos de interacciones entre el hombre y la naturaleza.
Ubicada en franca contraposicin, la agroecologa
busca construir los fundamentos y mtodos de una
agricultura alternativa. La agroecologa contempla
el reconocimiento y valorizacin de la experiencia
de los productores locales, especialmente de aquellos
con una larga presencia histrica. La agroecologa
reconoce en la investigacin participativa una acti-
vidad fundamental, situando al dilogo de valores
como un propsito fundamental. Todo esto con-
vierte a la agroecologa en una alternativa en estos
momentos de crisis.
Los autores, despus de examinar las deciencias
de los sistemas de reas naturales protegidas, consi-
deran que los mtodos de produccin tradicionales
como parte de una estrategia agroecolgica, son el
camino ms apropiado para mantener y enriquecer
la diversidad gentica y paisajista.
Estoy de acuerdo con ellos en el papel irrempla-
zable de los usos tradicionales en la conservacin de
la biodiversidad. Pero no coincido en equiparar las
reservas de la biosfera con los tipos convencionales
de rea protegida. Las reservas de la biosfera se gestan
en el marco del programa MAB de UNESCO. A
lo largo de tres dcadas de continuas controversias,
han reforzado su propsito, muy explcitamente
expresado, de no slo conservar la riqueza biolgica
prstina, sino tambin aquellas especies y paisajes
ligados a los usos tradicionales. Todo ello con la
participacin activa de las poblaciones locales. Las
reservas de la biosfera son lo ms cercano a una
propuesta con lmites geogrcos, de lo que plan-
tean Toledo y Barrera-Bassols. Puede alegarse y con
indudable base, que en muchos casos reservas de la
biosfera declaradas como tales no cumplen con los
propsitos antes sealados. Creo que en estos casos
lo que cabe hacer es exigir que se cumpla con los pro-
psitos internacionales a los que cada pas miembro
de MAB-UNESCO se ha comprometido.
En las paginas nales, los autores sealan: el
mundo moderno ha liberado enorme, digamos que
gigantescas, fuerzas naturales y sociales. Pero ello
ha tenido un costo, una doble paga: la violencia
intraespecca (incluyendo la marginacin social) y
la destruccin de la naturaleza Pero adems, para
establecer las nuevas bases de un mundo actual, la
civilizacin industrial ha tenido que destruir expe-
riencias de muy largo tiempo Visualizar una
modernidad alternativa signica antes que nada,
recuperar la memoria histrica; porque slo inno-
vando a partir, no en vez, de la experiencia acumu-
lada a travs del tiempo, es decir de la tradicin, es
que es posible crear un mundo duradero.
El libro de Eckart Boege se reere a Mxico, trata
en detalle a los pueblos indgenas mexicanos y su
22
Cuadernos de Biodiversidad
repertorio de biodiversidad. Resalta en este texto un
examen detallado y excepcionalmente bien ilustrado
de los maces mexicanos. Encuentro que es un libro
muy especial porque no rehye la importancia de las
soluciones polticas, principalmente el control de su
territorio y de sus riquezas naturales por los pueblos
indgenas. Para Boege no hay pueblo sin territorio,
y al territorio estn ligados medio ambiente y bio-
diversidad, su uso y su conservacin. Creo que este
es el planteamiento central del libro, mantenido a
travs de distintos captulos.
Como Toledo y Barrera-Bassols, Boege insiste
en la importancia de los usos tradicionales, tanto
en la actualidad como para el desarrollo de modelos
de uso ms sustentables. Para que estos modelos
funcionen es indispensable reconocer a los pueblos
indgenas como sujetos sociales centrales de la con-
servacin de la naturaleza y el desarrollo sustentable.
Por ejemplo, en los territorios indgenas se capta el
23.3% del agua y sin embargo no existen procesos
compensatorios por el uso nacional de este servicio.
Ante la importancia de la conservacin ecolgica de
las partes altas de las cuencas, no existe un acuerdo
entre pueblos indgenas y Estado para protegerlas,
ni para garantizar el acervo de agua de las poblacio-
nes indgenas, ni polticas de retribucin por este
servicio ecolgico.
Me ha resultado muy interesante el anlisis de
correspondencia entre territorios indgenas y reas
naturales protegidas. Segn Boege el 71% del territo-
rio indgena coincide con algn tipo de rea natural
protegida. En 52 de las reas naturales decretadas por
la Federacin habita poblacin indgena (un total
de 5.5 millones de has.). Simplemente este grado
de coincidencia demuestra que no puede haber una
poltica eciente de conservacin sin la participacin
de los pueblos indgenas.
El uso-conservacin de la diversidad natural, as
como de las especies cultivadas, a travs de los sis-
temas tradicionales ha sido efectiva, como Boege lo
ilustra en el caso de los maces. Hay que revalorarla y
situarla dentro del contexto de los programas nacio-
nales. Como en el caso de otros recursos y servicios
ambientales, la prdida de continuidad cultural y
en general los procesos de modernizacin ponen
en muchos casos en riesgo este uso/conservacin.
Boege considera que el camino a seguir requiere de
un respeto de los derechos y culturas indgenas y de
un reparto equitativo de los posibles benecios. Una
y otra vez aparece la necesidad de un buen gobierno
en las comunidades tradicionales como condicin
indispensable para evitar los abusos y daos deriva-
dos de los intereses personales, tanto ajenos como
propios a la comunidad.
De la lectura de los dos libros me queda la impre-
sin de que este buen gobierno no es sencillo, ni
mucho menos algo que se puede imponer desde el
exterior. Me persiste una sensacin de urgencia y de
responsabilidad ante una crisis. No deben perderse
las culturas tradicionales y su forma de uso y con-
servacin de la biodiversidad, para ello es necesario
valorar y respetar las estructuras y culturas tradicio-
nales. Pero cmo lograr sto ante una globalizacin
poco crtica y planteada como solucin universal a
los problemas de nuestro tiempo? Creo que esta es
la gran cuestin a resolver.
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Cuadernos de Biodiversidad
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1) Ttulo en el idioma del texto. En el caso de existir nombres latinos de los taxones pertenecientes a las categoras
de gnero y especie en cursiva y con referencia, en su caso a un taxn de nivel familiar y de otro nivel superior.
2) Nombre del autor o de los autores del trabajo con la(s) inicial(es) del nombre propio y uno o dos apellidos com-
pletos. En prrafo a parte se aadirn las direcciones completas de cada uno de los autores.
3) Resumen en ingls. Mxima extensin del resumen, 200 palabras.
4) Palabras clave en ingls, hasta un mximo de 6.
5) En el Texto, debern respetarse las normas de los Cdigos de Nomenclatura, todos los taxones de las categoras
de especie y gnero que se mencionen en el texto debern llevar la primera vez que se aparezcan el nombre del
autor y el ao de su inclusin en la literatura biolgica.
6) Las citas bibliogrcas en el texto se harn como muestran los siguientes ejemplos:
como indica FERNNDEZ (2002). O bien: en trabajos posteriores (LPEZ, 2004). Cuando los
autores sean ms de dos se utilizar la abreviatura et al. (Ej.: GARCA et al., 1990).
7) Bibliografa, en ella se incluir nicamente las referencias citadas en el texto y se darn del siguiente modo:
a) para un artculo:
BRUST, G. E., B. R. STINNER & D. A. MCCARTNEY. 1986. Predator activity and predation in corn
agroecosystems. Environ. Entomol. 15:1017-1021.
b) para un libro o publicacin no peridica:
PRIMACK, R. 2002. Essentials of conservation biology. Sinauer Associates. U.S.A. 699 pp.
c) Para un artculo de libro:
CROSSELY, D. A., G. J. HOUSE, R. M. SNIDER & B. R. STINNER. 1984. Positive interactions in
agroecosystems. En: R. Lowrence, B. R. Stinner & G. J. House (eds.), Agricultural Ecosystems. John Wiley
and Sons, New York. Pp. 73-82.
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