INTRODUCCIN

Los hidrocarburos aromticos son compuestos frecuentemente utilizados como disolventes de

aceites, grasas, caucho, resinas, etc., en las industrias de fabricacin de pinturas y barnices,
tintas, colas, adhesivos, as como, materia prima de sntesis orgnica e industrias de
carburantes. Por esta razn, resulta de inters disponer de un mtodo ensayado y validado
para la determinacin de vapores de hidrocarburos aromticos en aire, con el fin de poder
evaluar la exposicin laboral a este tipo de compuestos.
El presente estudio se realiz en una muestra de orina que fue facilitada por la ctedra de
Toxicologa y Qumica Legal, para determinar la concentracin de fenoles libres y de fenoles
totales y as comprobar si la muestra corresponde a una persona que ha sido expuesta a
solventes voltiles como el benceno, el cual como lo demuestran los estudios cientficos
recientes, es una sustancia txica para la salud humana.
La inhalacin involuntaria de solventes voltiles en forma crnica e manifiesta de diferentes
formas en el ser humano, pudiendo observarse alteracin a nivel psico motriz o bien algn
dao de un rgano y repercusin a las personas expuestas a este tipo de solventes.
El anlisis se realiz en el Laboratorio de Toxicologa de la Facultad de Farmacia y Bioqumica
de la UNMSM.
La cuantificacin de fenoles totales y libres en la orina se realiz por el mtodo de Marenzi y
Banfi.
Finalmente una vez obtenido los resultados se procede a comparar con los valores normales o
el rango permitido de fenoles en orina.







Marco terico
1. Benceno:
Es un hidrocarburo lquido de olor agradable que se
emplea como disolvente de grasas, pinturas, etc. Su
frmula molecular es C
6
H
6
, formando un anillo
aromtico, su punto de fusin es de 5,5
0
C y su punto
de ebullicin es de 80
0
C, es un qumico naturalmente
encontrado en el petrleo crudo a los niveles a 4g/L.
Conocido tambin como benzol, se evapora al aire
rpidamente y es slo ligeramente soluble en agua. El
benceno es sumamente inflamable. La mayora de la
gente puede empezar a detectar el olor del benceno en el aire cuando est en
concentraciones de 1.5 a 4.7 partes de benceno por milln de partes de aire (ppm) y
en el agua cuando la concentracin es de 2 ppm. La mayora de la gente empieza a
detectar el sabor del benceno cuando est en concentraciones entre 0.5 y 4.5 ppm en
el agua. Una parte por milln equivale aproximadamente a una gota en 40 galones. El
benceno se encuentra en el aire, el agua y el suelo. El benceno proviene tanto de
fuentes industriales como naturales.

A. Usos: Debido a su extenso uso, el benceno es una de las 20 sustancias qumicas
ms producidas en los Estados Unidos en trminos de volumen. Varias industrias
usan benceno para fabricar otros productos qumicos, como por ejemplo el
estireno (en Styrofoam y otros plsticos), cumeno (en varias resinas) y
ciclohexano (en niln y fibras sintticas). El benceno tambin se usa en la
manufactura de ciertos tipos de caucho, lubricantes, tinturas, detergentes,
medicamentos y plaguicidas.
Es buen disolvente de lacas, barnices, ceras,
resinas, plsticos, hules y aceites. Por ltimo,
tambin es utilizado como aditivo de la
gasolina. Sin embargo, debido a su gran
toxicidad, en la actualidad, solo se utiliza
cuando no existe un sustituto adecuado. El
tolueno es uno de los disolventes que pueden
utilizarse como alternativa.


B. Fuentes: Las fuentes naturales de benceno, entre las que se incluyen los gases
emitidos por volcanes y los incendios forestales, tambin contribuyen a la
presencia de benceno en el medio ambiente. El benceno tambin se encuentra en
el petrleo y la gasolina y en el humo de cigarrillos.

C. Propiedades Qumicas:
Productos de descomposicin: monxido y dixido de carbono. Es inflamable y
reacciona violentamente con agentes oxidantes como perclorato de plata,
perxidos de sodio y potasio, xgeno lquido, cloro, trixido de cromo, cido
crmico, cido ntrico, cido permangnico, ozono, perxido de nitrilo; cloruro de
aluminio en presencia de perclorato de fluor y con productos halogenados como
trifluoruro y pentafluoruro de bromo, pentafluoruro y heptafluoruro de yodo y con
hexafluoruro de uranio.

2. Exposicin al benceno y sus riesgos en la salud
Como puede observarse en los valores dados en Niveles de toxicidad, este producto es
considerado altamente peligroso (especialmente ver el valor dado en Alemania).
El benceno tiene efectos txicos sobre la sangre principalmente. Un contacto
constante con este producto produce sangrado nasal y de las mucosas
desarrollndose, adems, manchas prpuras. Si las condiciones lo propician los daos
progresan y pueden generar leucemia. Estos efectos pueden aparecer meses o aos
despus de la exposicin.
Se elimina del cuerpo, en parte, sin cambio a travs de la respiracin y la orina. Otra
parte, es oxidada a epxido de benceno y despus a fenoles y difenoles, los cuales son
excretados en la orina. Es precisamente a travs de la deteccin de fenoles en la orina,
como puede detectarse el nivel de exposicin al benceno. Algunos productos como
fenacetina, cafena, sacarina y otros analgsicos suaves, tambin generan fenoles.
Aunque no se sabe con certeza la manera en que actua el benceno en la generacin de
los problemas sanguneos, ya mencionados, se cree que son alguno o algunos de los
metabolitos que se genera dentro del organismo son los responsables. En base a esto,
se ha propuesto que el benceno se convierte en fenol e hidroquinona en el hgado,
esta ltima se acumula en la mdula sea y se convierte en benzoquinona (mediante
la mieloperoxidasa), la cual reacciona con macromolculas provocando desordenes
celulares.

















Parte experimental
1. Objetivo:
Determinar fenoles (totales, libres y conjugados) en la orina mediante el mtodo
operatorio de Marenzi y Banfi.
2. Reactivos, materiales y equipos:
A. Reactivos:
HCL concentrado.
NaOH 0,1N.
P-nitroanilina diazotada.
Goma arbiga 1%.
Acetato de sodio 50%.
Carbonato de sodio 20%.
Agua destilada.
B. Materiales:
Tubos de ensayo de 20mL
Gradilla para tubos.
Pipeta graduada de 1, 5 y 10mL
Probeta graduada de 50 y 100mL
Pisetas.
Fiola de 10mL.
C. Equipos:
Espectrofotmetro UV.
Bao maria.
3. Mtodo de Banfi y Marenzi:
A. Fundamento:
Los fenoles presentes en la orina se determinan cuantificando el complejo rojo
naranja, formado por la reaccin de la p-nitroanilina diazotada con los fenoles en
medio alcalino (Na
2
CO
3
), que puede ser ledo por el espectrofotmetro a 525nm.
B. Tcnica operatoria:
Diluir 1 ml de orina hasta 100 ml con agua. Se toma 20 ml de esta orina
diluida y se coloca en un matraz erlenmeyer, se aade 1 g de permutita
por cada 10 ml se tapa y se agita suavemente durante 10 min. Se decanta
Tomar 1 ml de orina diluida en un tubo de ensayo para determinar fenoles
libre y otros 1 ml en otro tubo de ensayo para fenoles totoles.
Para determinar fenoles totales incorporar 0.4 ml de acido clorhdrico
concentrado. Llevar a bao maria hirviente por 5 minutos, enfriar y
neutralizar con 0.6 ml de hidrxido de sodio al 40 %. Completar el volumen
con 1 ml de agua destilada.
A ambos tubos agregar 1 ml de solucin de goma arbiga al 1% seguida de
1 ml de solucin de acetato de sodio al 50% y 1 ml de p-nitroanilina
diazotada recientemente preparada y mantenida en bao de hielo. Agitar
y dejar en reposo durante 1 minuto.
Agregar 2 ml de solucin de carbonato de sodio al 20 %, agitar y dejar en
reposo por 20 min.
Determinar la absorbancia a 525 nm en el espectrofotmetro.
C. Resultados:
Tubo N1: Fenoles libres.
Absorbancia: 0.17
Tubo N2: fenoles totales.
Absorbancia: 0.963

FT: Fenoles Totales.
FL: Fenoles Libres.
FC: Fenoles conjugados.











[C] A
20 0.150
40 0.301
60 0.452
80 0.602






La ecuacin de la recta:



Tubo N1: Fenoles libres.
0.17=0.0075 [FL]-0.0005
[FL] = 22.73 ug/ml
Tubo N2: fenoles totales.
0,963=0.0075 [FT]-0.0005
[FT] = 128.47ug/ml

Reemplazando:

128.47ug/ml =22.73 ug/ml + [FC]
[FT] = [FL] + [FC]
A = 0.0075 [C]-0.0005
[FC] = 105.74
Fenoles conjugados = 105.74 ug/ml

Bibliografa
Eusebio D., Rodrguez Y. Determinacin de fenoles y cido hiprico en orina como
indicadores de exposicin al Benceno y tolueno en trabajadores de confeccin y
reparacin de calzados del Mercado Virrey Amat del distrito del Rmac. Tesis
pregrado. Lima, 2007.
GeoSalud. El Benceno y su impacto en la Salud Pblica. ATSDR: Agency for Toxic
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el 27 de Abril del 2014]. Disponible en: http://geosalud.com/Ambiente/benceno.htm
INSHT. Benceno. Fichas Internacionales de Seguridad Qumica. INSHT: IPCS.
[Actualizacin, Mayo del 2003]. Madrid, Espaa [Revisado el 27 de abril de 2014].
Disponible en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Fich
eros/0a100/nspn0015.pdf