ALlCAClCn CuAn1l1A1lvA uL LA

LSLC18ClC1CML18lA Ln CulMlCA CLlnlCA

1M. PL88L81 PL8Ll1Z ClluLn1LS
CulMlCA CLlnlCA 2014
"# $%#& '#()%*# +, -).
/#%0',1%). 23)45*'36). 45, .,
#&#-37#& ,& 5& -#2)%#1)%3) 6-*&36)
., 2#.#& ,& -# #2.)%638& +, -579
/)% -) 65#- ,- ':1)+) #&#-*;6)
'0. #'/-3#',&1, 5;-37#+) ,. -#<

=>?=@ABCDCACE=ABFG H=
GI>CB@FCJ KF>FI"= L
M"ABGKFC"=AG
LSLC18ClC1CML18lA uL A8SC8ClCn
uv-vlSl8LL
N"# ,./,61%)O)1)',1%*# ., 2#.# ,& -# 6#/#63+#+ +, 5&# .5.1#&63# +,
#2.)%2,% ,&,%$*# ,-,61%)'#$&:;6#9 +, 1#- O)%'# 45, -# 6#&;+#+ +,
,&,%$*# #2.)%23+# ., !"#$%&'($ *!'*'!%&'($#+"(," %'( #$-
%'(%"(,!$%&.( /" #$ -0-,$(%&$P
LL? uL LAM8L81-8LL8
La concenLracln de la susLancla es dlrecLamenLe proporclonal a la canudad de
luz absorblda o lnversamenLe proporclonal al logarlLmo de la luz Lransmluda"
=.1# ",( ., 65'/-, 6)& -#. .3$53,&1,. 6)&+363)&,.<
La radlacln lncldenLe sobre la susLancla de lnLeres debe ser monocromuca.
La absorcln del solvenLe debe ser lnslgnlcanLe.
La concenLracln del soluLo esLa denLro de llmlLes esLablecldos.
no esLe presenLe la lnLerferencla puca.
no ocurran reacclones qulmlcas enLre la molecula de lnLeres y oLros soluLos o solvenLe de la
solucln.
8ASLS uLL AnLlSlS CuAn1l1A1lvC
La radlacln de la poLencla radlanLe lnlclal !
"
es aLenuada y se Lransforma en energla
Lransmluda ! medlanLe una solucln que conuene $ moles por llLro de solucln
absorbenLe con una longlLud de LrayecLorla de % cenumeLros.
1 Q ?R?
S


l = l
0
10
-cbc
&'()*+ l = lnLensldad de luz Lransmluda
l
0
= lnLensldad de luz lncldenLe
c = CoeclenLe de exuncln molar
b = LrayecLo de luz en la solucln (ancho de cubeLa)
c = concenLracln de soluLo
l/l
0
= 10
-!bc
/Log
Log (l/l
0
) = -!bc /x-1
-Log (l/l
0
) = !bc
-Log (l/l
0
) = -Log L = A
G Q !26
8LLAClCn Ln18L 18AnSMl1AnClA ? A8SC88AnClA
AnLlSlS CuAn1l1A1lvC
Ln la especLroscopla de absorcln se requlere de soluclones coloreadas para
cuanucar una susLancla.
ue esLa forma a esLe upo de meLdlca Lamblen se le denomlna como
ColorlmeLrla.
CCLC8lML18lA
Ls una forma de revelar la presencla de una susLancla a Lraves de una reaccln
qulmlca que produce un color, %01$ &(,"(-&/$/ "- /&!"%,$+"(," *!'*'!%&'($# $ #$
%'(%"(,!$%&.( /" /&%2$ -0-,$(%&$.
ara esLa nalldad se deben uullzar reacuvos especlcos para la susLancla que se
qulere deLermlnar
lunuAMLn1C uL LAS 8LACClCnLS CulMlCAS
u1lLlZAuAS A8A LA CuAn1lllCAClCn
3"$%%&'("- /" *0(,' 4($#5
"# 3&1,&.3+#+ +, -57 ',+3+# ., %,-#63)&# 6)& ,- /%)+561) T&#- +, -#
%,#6638&U ?5,+,& .,%<
,*-.( */ (.0*1' )* 1*2$$3'(*45
nlcas o Acopladas
,*-.( /2 (26712/*82 )* /2 1*2$$39(5
ColorlmeLrlcas
Lnzlmucas-ColorlmeLrlcas

3"$%%&'("- %&(67%$-5
@#'23). +, 3&1,&.3+#+ +, -57 V#2.)%2#&63#W # 1%#X:. +,- ;,'/) .,
%,-#63)&# 6)& -# 6#&;+#+ ) #6;X3+#+ +, 5&# .5.1#&63#U
B,#6638& Y&36# +, /5&1) T&#-<




Ll comple[o creaunlna/plcraLo es de color amarlllo/naran[a y presenLa una
lnLensldad de color cuya absorbancla a 492nm es dlrecLamenLe
proporclonal a la concenLracln de creaunlna
L[emplo: ueLermlnacln de Creaunlna
* MeLodo colorlmeLrlco (meLodo de !ae)
B,#663)&,. #6)/-#+#. +, /5&1) T&#-
Ll comple[o coloreado es de color rosado y presenLa una lnLensldad de
color cuya absorbancla a 346 nm es dlrecLamenLe proporclonal a la
concenLracln de glucosa.
L[emplo: ueLermlnacln de Clucosa
* MeLodo colorlmeLrlco- enzlmuco (meLodo de Clucosa Cxldasa-eroxldasa)
B,#663)&,. #6)/-#+#. 63&:;6#
Ll aumenLo de nAP+P
+
a Lraves del uempo, medldo a 340 nm, es
proporclonal a la acuvldad de la enzlma.
L[emplo: ueLermlnacln de la acuvldad de la Creaun-Culnasa
* MeLodo foLomeLrlco-uv
CK-NAC FS - Pgina 1 *Fluid Stable = lquido estable


CK-NAC FS*
IFCC
Reactivo de diagnstico para la determinacin cuantitativa In Vitro de creatin-quinasa
(CK) en suero o plasma en equipos fotomtricos

Informacin de Pedido
N de pedido Tamao del envase
1 1601 99 10 021 R1 5 x 20 mL + R2 1 x 25 mL
1 1601 99 10 026 R1 5 x 80 mL + R2 1 x 100 mL
1 1601 99 10 023 R1 1 x 800 mL + R2 1 x 200 mL
1 1601 99 10 704 R1 8 x 50 mL + R2 8 x 12,5 mL
1 1601 99 10 917 R1 8 x 60 mL + R2 8 x 15 mL
1 1601 99 10 930 R1 4 x 20 mL + R2 2 x 10 mL
1 1601 99 10 191 R1 4 x 36 mL + R2 4 x 9 mL
1 1601 99 10 940 R1 8 x 60 mL + R2 8 x 15 mL
1 1601 99 90 305 R1 10 x 12 mL + R2 2 x 20 mL
1 1601 99 10 950 2750 Pruebas en ADVIA 1650/1800
Resumen [1,2]
La creatin-quinasa (CK) es una enzima formada por isoenzimas
principalmente del msculo (CK-M) y el cerebro (CK-B). La CK
existe en el suero en forma dimrica como CK-MM, CK-MB, CK-BB y
como macroenzima. Los valores elevados de CK son observados en
daos y lesiones del msculo cardaco y en enfermedades del
msculo esqueltico. La medicin de CK se usa sobre todo
conjuntamente con el CK-MB para el diagnstico y vigilancia del
infarto de miocardio.
Mtodo
Test UV optimizado de acuerdo a DGKC (Sociedad Alemana de
Qumica Clnica) y la IFCC (Federacin Internacional de Qumica
Clnica y Medicina de Laboratorio).
Principio
Fosfato de creatina + ADP <
CK
> Creatina + ATP

Glucosa + ATP <
HK
> Glucosa-6-fosfato + ADP

Glucosa-6-fosfato + NADP
+
<
G6P-DH
> Gluconato-6-fosfato +
NADPH + H
+

Reactivos
Componentes y Concentraciones
R1 Imidazol pH 6,5 60 mmol/L
Glucosa 27 mmol/L
N-Acetilcistena (NAC) 27 mmol/L
Acetato de magnesio 14 mmol/L
EDTA-Na
2
2 mmol/L
NADP 2,7 mmol/L
Hexoquinasa (HK) 5 kU/L
R2 Imidazol 160 mmol/L
ADP 11 mmol/L
AMP 28 mmol/L
Deadenosina pentafosfato 55 mol/L
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6P-DH) 14 kU/L
EDTA-Na
2
2 mmol/L
Fosfato de creatina 160 mmol/L
Instrucciones de Almacenamiento y Estabilidad del Reactivo
Los reactivos son estables hasta el final del mes indicado de
expiracin, si se almacena entre 2 - 8 C, protegidos de la luz y si
se evita la contaminacin. No congelar los reactivos!

Advertencias y Precauciones
1. Los reactivos contienen azida de sodio (0.95 g/L) como
preservo. No ingerir! Evitar el contacto con la piel y las
membranas mucosas.
2. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar
todas las medidas de precaucin necesarias para la
manipulacin de reactivos de laboratorio.
Manipulacin de Desechos
Por favor remtase a los requerimientos legales locales.
Preparacin del Reactivo
Inicio con Sustrato
Los reactivos estn listos para usar.
Inicio con muestra
Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2
(p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = monoreactivo
Estabilidad: 3 semanas de 2 a 8 C
2 das de 15 a 25 C
El monoreactivo debe ser protegido de la luz!
Materiales requeridos pero no provistos
Solucin de NaCl 9 g/L
Equipo General de Laboratorio
Tipo de muestra
Suero, plasma heparinizado o con EDTA
Estabilidad [7]: 2 das de 20 a 25 C
7 das de 4 a 8 C
4 semanas (en oscuridad) a - 20 C
Desechar las muestras contaminadas!
Procedimiento del Ensayo
Hay disponibles a peticin aplicaciones para sistemas
automticos.
Longitud de onda 340 nm, Hg 365 nm, Hg 334 nm
Paso ptico 1 cm
Temperatura 37 C
Medicin Contra blanco de reactivo
Inicio con sustrato
Blanco Muestra
Muestra/Calibrador - 50 L
Agua destilada 50 L -
Reactivo 1 1000 L 1000 L
Mezclar, incubar durante aprox. 3 min., luego aadir:
Reactivo 2 250 L 250 L
Mezclar, leer la absorbancia despus de 2 min. y empezar a
cronometrar. Leer la absorbancia nuevamente despus de 1, 2 y
3 min.
A/min = A/min Muestra/Calibrador
Inicio con muestra
Blanco Muestra
Muestra/Calibrador 40 L
Agua destilada. 40 L
Monoreactivo 1000 L 1000 L
Mezclar, leer la absorbancia despus de 3 min. y empezar a
cronometrar. Leer la absorbancia nuevamente despus de 1, 2 y
3 min.
A/min = A/min Muestra/Calibrador
lundamenLo
8eacuvos
Condlclones de
lecLura
Lsquema de
plpeLeo
1lpo de
muesLras
valores de
referencla
recauclones
8eferenclas
blbllogrcas
Cu8vA uL CALl88AClCn
Ll anllsls cuanuLauvo puede
reallzarse a Lraves de:
- Curva de callbracln
- Lcuacln de la recLa
- lacLor mulupunLo
- lacLor de callbracln de un punLo
CbLencln de facLor de callbracln a parur de una
curva de callbracln
@)&6,&1%#638& V'$R+"W G2.)%2#&63#
30 0,123
100 0,271
130 0,403
200 0,604
300 0,863
400 1,163
300 1,433
600 1,360
700 1,337
800 1,444
900 1,333
1000 1,326
Consldere los valores de la Labla, correspondlenLes a resulLados de absorbancla para
el procedlmlenLo de medlda del meLodo de Clucosa Cxldasa eroxldasa.
1) Craque los valores.
2) LsLablezca el cumpllmlenLo
de l a L e y de 8e e r e
l denuque el rango de
llnealldad y llmlLe de dllucln.
3) C a l c u l e e l f a c L o r d e
callbracln mulupunLo y la
ecuacln de la recLa.