TEMA 2: MEMBRANAS CELULARES 1

CONOCIMIENTOS INDIRECTOS DE LA ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS CELULARES

Overton (1985). La membrana es lipdica por su resistencia al paso de la corriente elctrica. Langmuir (1897). Los fosfolpidos se extienden sobre el agua con los grupos polares en contacto con sta. En la doble capa los fosfolpidos se disponen con los grupos no polares enfrentados. Gorter y Grenderl (1925). Los lpidos de la membrana del eritrocito extendidos sobre agua ocupan el doble de la superficie de la membrana. Cole (1922). La tensin superficial de la membrana del huevo de erizo de mar es menos que la terica para los lpidos, luego stos van acompaados de protenas. Danielli y Davson (1935). Modelo de membrana con doble capa de lpidos simtricos y protenas extendidas a lo largo de los grupos polares. Hay poros revestidos con protenas.

ESTUDIOS CON EL MICROSCOPIO ELECTRNICO DE LAS MEMBRANAS CELULARES

Con el microscopio electrnico se vio por primera vez la membrana plasmtica. A grandes aumentos (ms de 40.000), aparece como una estructura trilaminar. Inicialmente, su espesor se estim en 7.5nm. al mejorar la fijacin se situ en 10nm; valor corroborado por diversos mtodos La estructura trilaminar se vio tambin en las membranas citoplasmticas, por lo que Robertson (1959) la llam unidad de membrana. Stoeckenius (1962) obtuvo la imagen trilaminar en una membrana artificial de doble capa lipdica. Al aadir protenas las lneas densas se engrosaban. Hay continuidad entre diferentes membranas celulares: Del REL con el RER Del RER tanto la con la envoltura nuclear (que incluso tiene ribosomas en su cara externa) como con el Golgi y con la membrana plasmtica (slo en clulas jvenes y temporalmente). La membrana plasmtica conecta con vesculas: las que entran en el citoplasma y las que surgen del Golgi. Nunca se ven conexiones de mitocondrias o cloroplastos con otras membranas. Las membranas citoplasmticas: Son ms delgadas que la plasmtica: 7nm de espesor, frente a los 10nm de la membrana plasmtica. La bicapa lipdica es tambin ms delgada: 4nm frente a los 5nm de la membrana plasmtica. Tienen mayor proporcin de protenas que la plasmtica. Esto es muy evidente en las membranas mitocondriales. La estructura trilaminar no es tan clara a veces como en las mitocondrias, cuya membrana muestra partculas globulares, sobre todo con ciertos fijadores. Esto llev a algunos investigadores de la dcada 1960-70 a proponer otros modelos con los lpidos de membrana dispuestos radialmente formando glbulos, con los grupos polares hacia el exterior y diversos modelos para la distribucin de las protenas.

EL MOSAICO FLUIDO DE MEMBRANA

Hacia 1970 se desarroll el concepto termodinmico de interacciones entre molculas. Se concluy que las protenas (que tambin tienen grupos polares y no polares) no podan disponerse en configuracin beta, como se postulaba en el modelo de Danielli y Davson, sino como los lpidos: con los grupos polares en contacto con la fase acuosa y los no polares en el interior de la membrana.

El contraste negativo revel protuberancias y depresiones en la membrana y, a veces, una disposicin en placas. Con criofractura-rpplica en cada hemimembrana se ven protrusiones (de 4 a 16nm de dimetro) que encajan con depresiones en la membrana opuesta. La hemimembrana interna o protoplsmica (P) muestra partculas mayores y ms numerosas que la externa o exoplasmtica (E). Con estos estudios, Singer y Nicolson (1972) proponen el modelo del mosaico fluido de membrana, en el que las protenas, lpidos e hidratos de carbono se sitan en una configuracin estable de baja energa libre. Los lpidos forman una bicapa en la que se sitan las protenas configuradas de acuerdo con sus interacciones con las molculas que las rodean. Hay oligosacridos sobre los lpidos y las protenas en la membrana E.

La membrana plasmtica del eritrocito y hepatocito tienen 60% de protena y 40% de lpidos. Pero hay membranas plasmticas que se alejan de esta proporcin, como la mielina con un 20% de protenas y un 80% de lpidos. Las membranas citoplasmticas, adems de ser ms delgadas que la plasmtica, poseen mayor proporcin protenas/lpidos; sobre todo la membrana mitocondrial interna con 80% de protena y 20% de lpidos. LPIDOS DE MEMBRANA Los lpidos forman una doble capa con los grupos hidrfobos en el centro y los hidrfilos en el exterior, en contacto con la fase acuosa. Son la matriz de la membrana. Hay 5 millones de molculas por m2 de membrana. La mayora son fosfolpidos. Los ms abundantes son fosfatidil colina, fosfatidil etanolamina, fosfatidil serina y fosfatifil inositol.

En las mitocondrias hay fosfatidil glicerol y difosfatidil glicerol. Hay esfingolpidos (esfingomielina y glucolpidos complejos como cerebrsidos y ganglisidos). Hay tambin colesterol.

En esta matriz fluida, los lpidos hacen desplazamientos de difusin lateral, rotacin y flexin con una constante de difusin con una constante de difusin lateral de 10-8cm2/seg. Son infrecuentes los movimientos de voltereta (flipflop), que slo ocurren en la sntesis de membrana por el retculo endoplasmtico. La permeabilidad de la membrana disminuye con el colesterol, que: Dificulta que se unan y cristalicen las cadenas de los cidos grasos. Dificulta la permeabilidad a pequeas molculas solubles. Aumenta la flexibilidad y estabilidad mecnica de la bicapa. La proporcin de los diferentes lpidos difiere entre la membrana plasmtica y los diferentes orgnulos membranosos. Siempre hay una asimetra constante: En la cara E predominan la esfingomielina y fosfatidil colina (fosfolpidos con colina y numerosos cidos grasos saturados; esto es, sin dobles ni triples enlaces). En la cara P predominan la fosfatidil etanolamina y la fosfatidil serina (mayor proporcin de cidos grasos insaturados, lo que aumenta la fluidez de la matriz). Es tambin ms fina, porque estos cidos grasos quedan en posicin menos recta.

PROTENAS INTEGRALES (transmembranosas). Hlices de uno o ms pasos unidas fuertemente a los lpidos por

enlaces covalentes. Son anfipticas (distribucin asimtrica de grupos hidrfilos e hidrfobos), por lo que estn en parte embebidas y en parte sobresalen en la membrana. Los grupos polares de la protena quedan en la superficie de la membrana, mientras los no polares estn embebidos entre las cadenas de fosfolpidos.

Realizan movimientos de rotacin y de traslacin con una constante de difusin de 5x10.9cm2/seg. En estos movimientos mantienen su orientacin y su grado de intercalacin en la membrana resultado de su estructura antiptica. Este desplazamiento se demostr cultivando clulas de ratn con clulas humanas y marcando una protena especfica de la membrana plasmtica de la clula de ratn y otra de la clula humana mediante anticuerpos unidos a un colorante fluorescente diferente en cada caso para distinguir ambas protenas. Tras fusionar ambas clulas, ambas protenas se entremezclaban.

PROTENAS PERIFRICAS. Sobresalen en una cara, sobre todo la interna. Se unen dbilmente por uniones

electrostticas a los lpidos. En la hemimembrana E son muy escasas y se unen a una molcula de GPI (glucosil fosfatidil inositol); esto es, a un oligosacrido que, a su vez, est unido a los dos cidos grasos de un fosfatidil inositol.
PROTENAS DE LA MEMBRANA DEL ERITROCITO. Glucoforina y banda 3. Transmembranosas, sobresalen en la cara E.

Anquirina. Perifrica interna. Protenas esquelticas bajo la membrana: espectrina (similar a la miosina), actina y tropomiosina. Asociadas a las esquelticas y a la membrana: banda 4.1 y aducina. PROTENAS DE LA MEMBRANA DE OTRAS CLULAS. Esta organizacin del eritrocito no aparece en otras clulas. En general varan de unas clulas a otras. Suele haber receptores, transportadores para el intercambio de sustancias, enzimas y protenas estructurales, algunas de ellas conectadas al citoesqueleto, a otras clulas o a la matriz celular. Las protenas esquelticas corticales son sobre todo largos filamentos de actina, que tienen troposina asociada e interactan con molculas de miosina.

HIDRATOS DE CARBONO DE LA MEMBRANA PLSMTICA GLICOCLIX

Son oligosacridos unidos por enlaces covalentes a protenas (glucoprotenas) o lpidos (glucolpidos). La estructura es visible (como finos filamentos) slo en algunos tipos celulares (como en enterocitos). Puede haber algunas protenas. La ms tpica es la ya mencionada, unida al glucosil fosfatidil inositol (GPI). Tambin puede haber glucoprotenas y proteoglucanos, que segrega la clula a la matriz extracelular y se adhieren a la superficie celular. Casi todas las protenas tienen oligosacridos pero slo 1/10 de los lpidos los poseen. Aunque hay 50 veces ms lpidos que protenas, es mayor el peso de los oligosacridos unidos a protenas, pues cada protena posee varias cadenas de oligosacridos y cada lpido slo una. Lo oligosacridos unidos a protenas se unen al N (los de 12 azcares) o al O (los de 4 azcares).

Las principales funciones reconocidas en el glicoclix son: Responsable de la carga negativa de la superficie celular (por el cido silico) y de los cambios en la carga elctrica del medio; acta como una resina intercambiadora de iones. Reconocimiento y fijacin de las partculas que se incorporan a la clula. Reconocimiento de clulas entre s en la embriognesis y en la regeneracin de los tejidos y rganos. Uniones de clulas entre s y a la matriz por las glucoprotenas transmembranosas: cadherinas (unen clulas entre s) e integrinas (unen clulas a la matriz extracelular). Propiedades inmunolgicas: grupos sanguneos, rechazo de trasplantes. Anclaje de enzimas: leucoaminopeptidasas en los hepatocitos y maltasa en lo enterocitos (clulas del epitelio intestinal).

BALSAS LIPDICAS DE LA MEMBRANA PLASMTICA

Los esfingolpidos (con largas cadenas de cidos grasos saturados) y el colesterol crean fuertes fuerzas de van der Waals que atraen los lpidos adyacentes formando microdominios transitorios (balsas lipdicas) de 70nm de dimetro. Esas zonas ocupan ambas hemimembranas, son algo ms gruesas que el resto de la bicapa y concentran ciertas protenas y componentes del glicoclix.

RENOVACIN DE LA MEMBRANA PLASMTICA

Las molculas de la membrana plasmtica estn en continua renovacin. Con marcaje radioactivo se ha visto que: El tiempo de recambio de las protenas vara entre ellas y entre los tipos celulares. En general en de unos pocos das y aumenta con el PM. Los fosfolpidos y el colesterol se recambian en pocas horas. Los carbohidratos del glicoclix se renuevan en horas (siempre menos de dos das) y la vida media de los anclados en una protena es menos que la de sta. La membrana est en un reciclaje continuo: aumenta por fusin de vesculas que vienen del Golgi y se compensa as la membrana introducida en el citoplasma en vesculas de endocitosis. Las protenas perifricas no van en vesculas sino que las sintetizan ribosomas libres en el citoplasma bajo la membrana plasmtica.