Ciclo del cido ctrico (CAC)

Bioqumica Metablica
Ciclo del cido ctrico (CAC) Ciclo de Krebs Ciclo de los cidos tricaboxlicos

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Metabolismo oxidativo Primera etapa

Primera etapa de la respiracin celular
las molculas orgnicas combustibles (glucosa, cidos grasos y algunos aminocidos) son oxidados hasta generar los llamados metabolitos intermedios como son piruvato acetilCoA. La energa libre de oxidacin de esta etapa (e-) es depositada en las coenzimas reducidas NADH y FADH2 que sern consumidas posteriormente durante la tercera etapa

Metabolismo oxidativo Segunda etapa

Segunda etapa de la respiracin celular cel lar
El carbono de los metabolitos intermedios es llevado hacia la va CAC, durante la cual este se oxida para producir CO2 Nuevamente, la energa lb d d liberada de l la oxidacin d se conserva en las coenzimas reducidas NADH y FADH2

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Metabolismo oxidativo Tercera etapa

Tercera etapa de la respiracin celular

Durante esta etapa, las coenzimas reducidas acumuladas de las dos etapas anteriores, son a su vez oxidadas para liberar los electrones y protones. Los electrones son usados para reducir O2 y producir H2O, de aqu la referencia de respiracin celular como un proceso que consume O2 Esta transferencia de electrones desde las coenzimas reducidas hasta el O2 se conoce como cadena respiratoria La energa libre de la cadena respiratoria se conserva para impulsar la sntesis de ATP

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Dentro del metabolismo oxidativo, , la p principal p funcin de las reacciones del ciclo AC es oxidar hasta CO2 el carbono de los principales metabolitos intermedios con la consecuente produccin de las coenzimas reducidas NADH y FADH As entonces el CAC es una va central para recuperar energa de los varios metabolitos combustibles mediante reacciones de oxidacin

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Metabolismo energtico Integracin

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Piruvato deshidrogenasa
Cataliza tres reacciones
Descarboxilacin oxidativa Transacetilacin Deshidrogenacin

Requiere de cofactores para cada una de estas reacciones (Tiamina pirofosfato (TPPi), lipoamida y FAD)

Piruvato deshidrogenasa Un complejo multienzimtico

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Piruvato deshidrogenasa Una enzima multifuncional

E1. Piruvato deshidrogenasa

Cataliza la descarboxilacin oxidativa del piruvato Produce Produce hidroxietil-TPP hidroxietil TPP como intermediario intermediario. El mecanismo de reaccin semeja al de la Piruvato descarboxilasa en la fermentacin alcohlica. Utiliza tiamina pirofosfato como cofactor. La capacidad del anillo de tiazolio para adicionarse a los grupos carboxilos y ser electrfilo hace que la TPP sea el cofactor de las reacciones enzimticas para la descarboxilacin de -ceto cidos

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

E2. Dihidrolipoil transacetilasa

E3. Dihidrolipoil deshidrogenasa

Para Para completar el ciclo cataltico de E2, la forma oxidada de E3 (que contiene un puente Cys-Cys y un FAD) reoxida la dihidrolipoamida, en una reaccin de intercambio de disulfuro Finalmente, E3 se regenera por la reoxidacin del FADH2 con NAD+. Esta tercera reaccin libera el NADH del complejo enzimtico

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Piruvato deshidrogenasa Un complejo multienzimtico

Reacciones del Ciclo AC

Suma de reacciones 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + AcCoA 3 NADH + FADH2 + GTP + CoA + 2CO2 El ciclo AC funciona como un catalizador que puede oxidar un nmero ilimitado de grupos acetilo

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Citrato sintasa

Cataliza la condensacin del AcCoa con oxalacetato para producir citrato it t y regenerar el lA AcCoA. C A El alto contenido de energa libre estndar se debe a la hidrlisis de un intermediario tioester In vivo, la reaccin se desplaza debido al consumo de citrato en la va CAC y otros procesos

Bioqumica (1508)

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Aconitasa

Aconitato hidratasa Cataliza la reaccin reversible para la transformacin de citrato o isocitrato, isocitrato mediante el intermediario cis-aconitato. Este intermediario permanece asociado a la enzima La aconitasa puede catalizar la hidratacin del doble enlace del cis-aconitato en dos modos diferentes, uno hacia la produccin de citrato y otro hacia isocitrato In vivo, la reaccin reversible se encuentra desplaza hacia isocitrato por consumo de producto

Isocitrato deshidrogenasa

Primera descarboxilacin oxidativa del CAC Produce P d uno d de l las d dos molculas l l d de CO2 del d l CAC y una molcula l l de NADH La oxidacin ocurre sobre el hidroxilo del isocitrato que se convierte en el grupo -ceto del producto La descarboxilacin ocurre en el carboxilo del C-2 de isocitrato

Bioqumica (1508)

10

Ciclo del cido ctrico (CAC)

-cetoglutarato deshidrogenasa

Segunda descarboxilacin oxidativa del CAC Produce Produce el segundo CO2 y una segunda molcula de NADH La reaccin semeja a la catalizada por PDH Esta enzima tambin presenta una estructura de complejo multienzimtico con componetes E1, E2 y E3 que utilizan el mismo tipo de cofactores Genera la sntesis de un enlace tioester de alta energa de hidrlisis

Succinil-CoA sintetasa

La energa de la hidrlisis del enlace tioester se utiliza para impulsar la fosforilacin de GDP en una reaccin de fosforilacin a nivel de sustrato Se regenera la CoA y se produce GTP El GTP puede transferir un grupo fosfato a ADP para sintetizar ATP mediante la reaccin catalizada por nucleosido difosfato cinasa El resultado neto es la conservacin de energa como ATP

Bioqumica (1508)

11

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Succinato deshidrogenasa

Enzima dependiente de FAD que cataliza la deshidrogenacin de succinato y producir el doble enlace del fumarato. fumarato Esta enzima, a diferencia del resto del CAC, se encuentra asociada a la membrana interna de la mitocondria eucarionte a la membrana plasmtica de los procariontes. Esta deshidrogenasa utiliza como sitios aceptores de electrones tres centros Fe-S y un FAD covalentemente unido

Fumarasa

Fumarasa o Fumarato hidratasa Cataliza Cataliza la hidratacin reversible del doble enlace del fumarato para producir el correspondiente alcohol (malato) La adicin del hidrxilo sobre el fumarato es indistinta pues ambos tomos de carbono son equivalentes Sin embargo, la enzima es altamente estereo especfica para reconocer la configuracin cis del fumarato y la configuracin del L-malato

Bioqumica (1508)

12

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Malato deshidrogenasa

Malato deshidrogenasa cataliza la oxidacin del L-malato a oxalacetato. La La transferencia del hidruro hacia el NAD+ ocurre de manera similar que en el caso de LDH y ADH Esta reaccin reversible se encuentra desplazada hacia la produccin de oxalacetato debido a la baja concentracin in vivo de oxalacetato.

Conservacin de energa en el CAC

La energa de oxidacin del CAC se conserva en la produccin de:
3 NADH 1 FADH2 1 GTP (ATP)

Bioqumica (1508)

13

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Balance energtico Gluclisis, PDH y Ciclo AC

Gluclisis
8 ATP

PDH
6 ATP

Ciclo AC
24 ATP (2x12)

Total de 38 ATP considerando las equivalencias siguientes

NADH = 3ATP y FADH = 2ATP

Balance energtico Oxidacin aerobia de la glucosa

Bioqumica (1508)

14

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Ciclo AC. Una va anfiblica

Reacciones cataplerticas

El ciclo AC representa una fuente de intermediarios precursores para la sntesis de varias va as otras ot as b biomolculas. o olculas. Las reacciones que utilizan intermediarios del CAC para la biosntesis se conocen como cataplerticas Algunas vas cataplerticas son:
Gluconeognesis. Sntesis de cidos grasos Sntesis de aminocidos

Bioqumica (1508)

15

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Reacciones anaplerticas
Los metabolitos intermedios del CAC q que se utilizan p para la biosntesis deben ser repuestos Las reacciones anaplerticas se encargan de regenerar estos intermediarios y permitir que el CAC contine La ms importante de estas reacciones anaplerticas es la catalizada por la piruvato carboxilasa que regenera el oxalacetato consumido

Piruvato carboxilasa Una reaccin anaplertica

Piruvato carboxilasa
Piruvato + CO2 + ATP + H2O oxalacetato + ADP + Pi

Las reacciones del CAC restauran los niveles de los diferentes intermediarios a partir del oxalacetato p sintetizado por la PC AcCoA es un activador alostrico positivo

Bioqumica (1508)

16

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Piruvato carboxilasa
Mecanismo cataltico

Regulacin del Ciclo AC

Factores que regulan el ciclo AC
Suministro de unidades acetilo La relacin [NADH]/[NAD+] en funcin de la actividad de la cadena respiratoria La relacin [ATP]/[ADP] en funcin de la fosforilacin oxidativa

En general, el CAC depende de la carga energtica de la clula

Bioqumica (1508)

17

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Control respiratorio

Regulacin de PDH
Inhibicin por producto
NADH y AcCoA inhiben a PDH

Regulacin por modificacin covalente

Fosforilacin / defosforilacin de E1

Niveles altos de [NADH]/[NAD] y [AcCoA]/[CoA] mantiene a E2 en su forma acetilada

La fosforilacin de un residuo de Ser en E1 resulata en la inactivacin d l complejo del l j PDH PDH cinasa se activa por NADH y AcCoA en eucariontes

Bioqumica (1508)

18

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Regulacin alostrica del CAC

Se distinguen tres principales puntos de regulacin p g alostrica en el CAC
Citrato sintasa Isocitrato deshidrogenasa -cetoglutarato deshidrogenasa

Todas estas enzimas catalizan reacciones irreversibles del ciclo Algunos de los principales reguladores del CAC son: AcCoA, oxalacetato, NADH, ATP

Bioqumica (1508)

19

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Ciclo del glioxilato

Plantas, bacterias y hongos poseen enzimas que median la conversin neta de AcCoA en oxalacetato que puede ser usado para la sntesis de glucosa (gluconeognesis)

Ciclo del glioxilato Glioxisoma

Bioqumica (1508)

20

Ciclo del cido ctrico (CAC)

Ciclo del glioxilato

El ciclo del glioxilato resulta en la produccin de succinato a partir de d A dos AcCoA C A El succinato producido es llevado a la mitocondria donde a travs de CAC se convierte en malato El malato es exportado al citoplasma para sintetizar oxalacetato como precursor de la g gluconeognesis g Suma de reacciones
2AcCoA + 2 NAD+ + FAD oxalacetato + 2CoA + 2NADH + FADH2 + 2H+

Overview
Give the big picture of the subject Explain how all the individual topics fit together
Text Text Text Text Text Text Text Text

Bioqumica (1508)

21