GUIA 2: POTENCIAL DE MEMBRANA

Introduccin Una caracterstica de toda clula viva es la existencia de un potencial a ambos lados de la membrana en reposo. Este potencial se genera gracias a la caracterstica semipermeable de la membrana celular que produce una diferente distribucin de cargas elctricas a ambos lados de ella. Por un lado, en el interior de la clula se encuentran las protenas que, aunque son anfipticas al pH intracelular, se comportan como aniones esta ocasiona un exceso de cargas atrae cationes como el sodio el

negativas en el interior de la clula que repele a otros aniones

potasio !acia el interior. "in embargo, estos aniones no atraviesan la membrana celular con la misma facilidad, a que esta, en estado de reposo, es poco permeable el sodio al potasio. #a concentracin de un ion a ambos lados de la membrana celular depende, adems de la permeabilidad de la membrana celular depende, adems de la permeabilidad de la membrana al ion, de la magnitud de la fuer$a que act%a sobre el. En el caso del potasio, los aniones proteicos en el interior de la clula crean un gradiente elctrico que mueve al potasio !acia adentro de la clula& pero a medida que el potasio entra, la magnitud de este gradiente disminu e debido a que la cantidad de cargas elctrica negativas que atraen al potasio se neutrali$an por la entrada de este mismo ion. 'l mismo tiempo, se va creando un gradiente de concentracin que tiene a sacar potasio de la clula, a que la concentracin intracelular de potasio es ma or que la extracelular, !asta que llega a un estado de equilibrio entre las ( fuer$as que act%an sobre el potasio a no mu permeable

!a flu)o de potasio ni !acia el interior ni al exterior de la clula. 'l potencial que se mide en este momento se le da el nombre de potencial de de equilibrio del ion, en este caso el potasio, ala

suma de las dos fuer$as que act%an sobre el movimiento de un ion !acia el interior o el exterior de la clula se le llama gradiente electroqumico. El potencial de equilibrio de cualquier ion puede calcularse por medio de la ecuacin de *ernst, determina el potencial en el cual, a las concentraciones intra neto del ion. Esta ecuacin se expresa como+ extracelulares dadas, no !a flu)o

Eion, -./0$ 1 2n 3ext/3int En donde+ -, constante de los gases, ., temperatura absoluta, 0, constante de 0arada , 2n, logaritmo negativo, 3ext, concentracin extracelular, 3int, concentracin intracelular del ion.

Una ve$ que sustitu e estas constantes

se utili$a el logaritmo de base 45, la ecuacin queda de

la siguiente manera para una temperatura de 67 o3, obteniendo el valor en m8+ Eion, 9 : ;41 #og 3int/3ext "i se calcula el potasio de equilibrio del potasio con una concentracin intracelular de 4<5 mmol/# extracelular de < mmol/#, valores normales en los lquidos corporales, el E=9 es igual a :><m8. En este caso se multiplica por :;4 por tratarse de un ion positivo multiplica por 9;4. "i el potencial de membrana en reposo se genera exclusivamente por la diferente distribucin de iones potasio a ambos lados de la membrana, entonces el valor obtenido con la ecuacin de *ernst debera ser igual al potencial de membrana en reposo medido de forma directa. "in embargo, cuando se mide el potencial de membrana en reposo, el valor obtenido es un poco menos negativo que el E=9. Esto es debido a que la membrana celular, aunque un poco permeable al sodio, permite el paso de algunos de estos iones sobre los cuales tanto el gradiente elctrico como el gradiente de concentracin tienden a mantener en la clula. #a bomba '.P:asa de *a:= conduce de nuevo a estos iones al exterior, lo cual tambin contribu e con algo a mantener la negatividad en el interior de la clula, a que por cada 6 iones de sodio que saca, solo introduce a la clula ( iones de potasio El otro ion que se toma en cuenta al !ablar de potencial de membrana en reposo es el cloro. ' diferencia del sodio el potasio, el cloro tiene una carga negativa, por lo que el gradiente elctrico cuando el ion es negativo se

lo saca de la clula, mientras que el gradiente de concentracin tienden a introducirlo a la clula debido a que su concentracin extracelular es ma or que la intracelular. El E3l- es mu cercana al potencial de la membrana en reposo a solo unos cuantos m8 mas negativo nerviosas la membrana celular

musculares es permeable al cloro, lo que permite a este atravesar la membrana de

una u otra direccin en respuesta a peque?as variaciones en el potencial de la membrana en reposo para estar nuevamente en equilibrio con el nuevo valor del potencial de membrana& por lo que se dice que los iones de cloro se distribu en @pasivamente@ a ambos lados de la membrana. #o importante que debe ser recordado en relacin con el cloro es que su permeabilidad no se modifica durante el potencial de accin. Ae lo dic!o anteriormente se deduce que para calcular el potencial de la membrana en reposo deben tomarse en consideracin todos los iones que atraviesan la membrana, as como la

permeabilidad de esta+ para ello se utili$a la ecuacin de campo constante de Boldman, tambin conocido como ecuacin de Boldman:HodgCin:=at$+ Em, :;41log P=9D=9 iE9 log P*a9D*a9iE9 log P3l-D3l-eE P=9D=9eE9P*a9D*a9eE9P3l-D3l:iE Para la ma ora de las membranas celulares P=9 es aproximadamente 65 veces ma ores que P*a9. El valor de P3l- es variable dependiendo del tipo celular, para la ma ora de las clulas se sit%an ntrelos valores de P=9 es superior a P=9. Ftra forma de calcular el potencial de membrana en reposo es con la ecuacin de la conductancia de cable, que toma en cuenta la conductancia en lugar de la permeabilidad. 3onviene recordar que la conductancia en lugar de la permeabilidad. 3onviene recordar que la conductancia es la reciproca de la resistencia la unidad de medicin es el "imenes G4 " : 4/o!mioH& se representa con la letras B cuando P*a9, pero en algunas clulas, como las del musculo esqueltico, su valor

con la letra g cuando se refiere a la conductancia especifica de un ion

!ace referencia a la conductancia total de la membrana. Esta frmula se expresa de la siguiente manera+ Em , g=9E=9 9 g*a9E*a9 9 g3i@ Ea@ 9 g3a99E3a99 . g=9 9 g*a9 9 ga- 9 g3a99 #a principal diferencia entre la ecuacin de Boldman primera se utili$a la permeabilidad la de conductancia de cable es que en la

en la segunda la conductancia. Estos dos trminos se usan

con frecuencia como sinnimos& sin embargo, no representan exactamente lo mismo. #a permeabilidad depende de la composicin estructura de la membrana, de su espesor se expresa en Henr del tipo

de sustancia qumica que difunde a travs de ella

por metro GH/mH&

mientras que la conductancia se refiere a la cantidad de corriente elctrica que mueve un ion a travs de la membrana con una diferencia de potencial elctrico determinado "iemens. Desarrollo de la r!ctica: Para demostrar cmo influ e el potencial de membrana, la variacin en la concentracin intra extracelular de los iones de potasio, sodio cloro, o bien la modificacin de su conductancia, se su unidad es el

utili$ar un programa de computacin titulado POTENCIAL DE MEMBRANA dise?ado por el Ar. Iic!ael J. Aavis del departamento de 0isiologa Iedica del Texas A&M University System Health Sciencie Center, puede obtenerse de forma gratuita.

"i por alguna ra$n este programa no puede usarse, los problemas que aqu se presentan pueden resolverse en forma manual utili$ando la ecuacin correspondiente& incluso si se cuenta con el programa, es buen e)ercicio calcular los potenciales de equilibrio de membrana en forma manual

comparar los resultados con los que se obtienen en el programa.2nicio del programa e instrucciones generales+ "i el programa no est abierto en la pantalla de la computadora, pulsa el icono correspondiente en la pantalla del escritorio& o bien, dar clic al botn 2*232F, selecciona programas, de la lista que

se despliegue seleccionar POTENCIAL DE MEMBRANA. Iaximi$a la ventana dando clic en el cuadro que se encuentra en la esquina superior derec!a. #a imagen desplegada debe ser como la que se muestra en la figura K.4. En la pantalla se muestran tres cuadros de lado i$quierdo en los que se dan los valores de concentraciones extra e intracelulares de conductancia de los cuatro principales iones que 3l-. El recuadro superior

modifican el potencial de membrana en reposo+ *a9, =9, 3a99

corresponde a la CONCENTRACI N E!TRACE"U"AR #E!TERNA" ION CONCENTRATIONS$, el siguiente a la

CONCENTRACI N INTRACE"U"AR

#INTERNA" ION CONCENTRATIONS$,

el inferior a la CON%UCTANCIA

para cada ion #IONIC CON%UCTANCES$. En el recuadro de la derec!a se representa el valor del potencial de membrana GE mH es el lado i$quierdo sobre la grfica con una lnea punteada. #os potenciales de equilibrio *a 9, =9, 3a99

3l- se representan con lneas de diferentes colores, de lado derec!o !a un cuadro que permite identificar a que ion corresponde el color. En este recuadro se grafica tambin la magnitud de la fuer$a electroqumica que mueve a cada ion #%RI&IN' (ORCE %IA'RAM$, que se representa por las flec!as verticales que van desde el potencial de equilibrio del ion !asta el potencial de membrana, a ma or longitud ma or fuer$a electroqumica. Estas flec!as tambin indican la direccin en la que los iones tienden a moverse+ las flec!as !acia aba)o indican movimiento del ion !acia el interior de la clula la flec!a !acia arriba, movimiento !acia el exterior.

#a concentracin interna o externa de cada uno de los cuatro iones se puede cambiar desli$ando el control correspondiente !acia arriba o aba)o, tecleando la cantidad en la casilla que esta en la parte superior de ese control, o !aciendo clic en las flec!as !acia arriba o aba)o que se encuentran ala i$quierda de cada casilla.

#os controles !ori$ontales en el recuadro inferior correspondiente ala conductancia para cada uno de los cuatro iones puede modificarse de la misma forma que la concentracin de los mismos.

#os valores iniciales que se se?alan corresponden a los valores de una motoneurona espinal. Para iniciar el programa presiona la flec!a que est a la i$quierda en la barra de !erramientas GLH, el programa corre en forma continua cada ve$ que se cambia alguno de los parmetros

recalcula automticamente el potencial de equilibrio de ese ion utili$ando la ecuacin de *ernst, el potencial de membrana utili$ando la ecuacin de conductancia del cable. "i deseas volver a los valores originales, dar clic en la barra de !erramientas en )*ERATE seleccionar REINITIA"I+E A"" TO %E(AU"T. #a figura K.4 tambin servir como control para detectar los cambios que ocurran cada ve$ que realices alguna modificacin en la concentracin o conductancia de los iones.

N)ta, para evitar confusiones al escribir los cambios en los potenciales, descrbanse como un movimiento del potencial !acia el valor cero o ale)ndose de este, o bien como un aumento en la !iperpolari$acin no como un aumento o disminucin del potencial.

4. 'ntes de iniciar las modificaciones en la pantalla, calcula el potencial de equilibrio para el potasio, sodio cloro utili$ando la ecuacin de *ernst, el potencial de membrana utili$ando la

ecuacin de conductancia de cable. #a conductancia total se obtiene con la suma de las conductancias individuales. 'nota los resultados compralos con los mostrados en la

pantalla, las diferencias, si las !a deben ser decimales, debido al redondeo durante el clculo. Potencial de equilibrio del potasioMMMMMMMM Potencial de equilibrio del sodioMMMMMMMMMM Potencial de equilibrio del cloroMMMMMMMMMM Potencial de membranaMMMMMMMMMMMMMMMMM

(. Fbserva

explica el efecto de aumentar N veces la concentracin extracelular de potasio sobre+

9

aH el potencial de equilibrio del potasio GE= H. bH el potencial de equilibrio del sodio GE*a9H. cH el potencial de membrana GEmH. dH la fuer$a electroqumica que act%a sobre el potasio Grepresentada por las flec!as verticalesH. eH la fuer$a electroqumica que act%a sobre el sodio.

fH la fuer$a electroqumica que act%a sobre el cloro.

6. -egresa a los valores inciales seleccionando REINITIA"I+E A"" TO %E(AU"T en el men% O*ERATE, observa explica el efecto de aumentar N veces la concentracin intracelular de sodio sobre+
9

aH el potencial de equilibrio del potasio GE= H. bH el potencial de equilibrio del sodio GE*a H.
9

cH el potencial de membrana GEmH.

<. -epite el mismo procedimiento despus de aumentar la conductancia del sodio g*a a un valor de 6. Explica las diferencias con los resultados previos.

aH el potencial de equilibrio del potasio GE= H.

9

bH el potencial de equilibrio del sodio GE*a H.

9

cH el potencial de membrana GEmH. N. Explica las diferencias que se observan entre el aumento en la concentracin del sodio
que ocurri al aumentar el potasio. lo

;. -egresa de nuevo a los valores iniciales

determina el valor de la concentracin de sodio

intracelular en la que E*a es igual a cero. Explica el porqu del resultado.

7. Aetermina tambin el valor de la concentracin extracelular de cloro en el que el E 3l es igual a

cero. Explica el porqu del resultado.

K. -egresa a los valores iniciales, reali$a cada uno de los siguientes pasos
inicial nuevamente en cada paso.

vuelve al valor

aH OPu efecto se observa sobre el E m cuando g= aumenta en 45 vecesQ Explica por qu

ocurre este efecto.

bH OPu efecto se observa sobre el E m cuando g= disminu eQ Explica por qu ocurre este
efecto.

cH O3ul es el efecto sobre el Em cuando g*a aumenta en 455 vecesQ Explica por qu ocurre
este efecto.

dH O3ul es el efecto sobre el Em cuando g3l aumenta al mximoQ Explica por qu ocurre este
efecto.

eH 3oloca la g= , 4,
este efecto.

vea que ocurre en el E m cuando g3l aumenta. Explica por qu ocurre

>. -egresa a los valores iniciales

cambia %nicamente la conductancia inica, encuentra ba)o

que condiciones el sodio se mueve !acia afuera de la clula.

45. -egrese a los valores iniciales

inica produce despolari$acin.

determine de qu iones los cambios en la conductancia

44. -egresa a los valores iniciales. 3oloca la g3l en su valor mnimo

cambie la g*a !asta que el

valor de Em tenga un valor igual o cercano a :<5 m8. O3ul es el valor de g *a en estas condicionesQ O3ul es el valor de la concentracin interna del cloro que !ace que E 3l sea igual al EmQ Explica los resultados.

>. -egresa a los valores iniciales a!ora a)usta el valor del E m en :(5m8 cambiando g*a, O3ul es
el valor de g*a en estas condicionesQ O3ul es el valor de la concentracin interna del cloro que !ace que E3l sea igual al nuevo EmQ Explica los resultados.

45. Este procedimiento seme)a lo que ocurre con la distribucin del cloro cuando se lesiona un
axn. OPor quQ