Dr. Claudio O.

Cervino
Fisiologa Animal Comparada - 2014
FISIOLOGA
DE LOS
TEJIDOS
EXCITABLES
(1
ra
Parte)
En honor a...
Alan Hogdkin Andrew Huxley Bernard Katz
Introduccin: Tejidos
Excitables
Potencial de Membrana
Electroqumica
Potencial de Reposo
Introduccin
Definicin de Tejido
Excitable

Tejido Nervioso

Tejido Muscular
Tejido
Nervioso

Neuronas
Cl. de la gla

n. sensitivas
n. motoras
interneuronas
n. de proyeccin
Membrana plasmtica
composicin
estructura
funciones
Permeabilidad selectiva
Transporte a travs de membrana
Distribucin inica desigual
Distribucin inica
Principio de Electroneutralidad
8
en mmol/L
Type of
Transport
Active or
Passive
Carrier-
Mediated
Uses
Metabolic
Energy
Dependent on
Na
+
Gradient
Simple
diffusion/osmos
is
Passive; downhill No No No
Facilitated
diffusion
Passive; downhill Yes No No
Primary active
transport
Active; uphill Yes Yes; direct No
Cotransport
Secondary
active*
Yes Yes; indirect
Yes (solutes move in
same direction as Na
+

across cell membrane)
Counter-
transport
Secondary
active*
Yes Yes; indirect
Yes (solutes move in
opposite direction as
Na
+
across cell
membrane)
*Na
+
is transported downhill and one or more solutes are transported uphill.
Downhill transport = pasivo o cuesta abajo; Uphill transport = activo o cuesta arriba.
9
Transporte a travs de la Membrana Celular
Canales inicos
Definicin
Especficos (selectividad inica)
Compuertas
canal de Na
+
voltaje
dependiente : 3 m y 1 h
canal de K
+

voltaje
dependiente

: 4 n
Estados (modelos fsicos):
1- abierto
2- abierto - cerrado
4- abierto - cerrado -
desinactivado - inactivado
Canales inicos
Tipos: segn el
estmulo que controla la
apertura o cierre de una
canal inico.
A. Ligando dependiente
B. Fosforilacin dependiente
C. Voltaje dependiente
D. Mecano dependientes
E. de Fuga (leak)
Cerrados Abiertos
Tcnica Patch-clamp
abierto
cerrado
Canales de Na
+

y de K
+
voltaje
dependientes
en membrana
del axn
neuronal
y de la fibra
muscular!!!
Cono axnico
Segmento
inicial
alta densidad
de canales de
Na
+
V
tipos P, N, L
Corriente (I): n de cargas q / t (C/s= A)
El Potencial de
Membrana
(V
m
o E
m
)
16
Pantalla de fsforo recibe electrones
tiempo
Tubo de
Rayos
Catdicos
Amplificador de la Seal
Amplificador de Tiempo
(Generador de diente de sierra)
s
e

a
l

Haz de e
-
Sistema de Registro del V
m
microelectrodos - ORC
Tcnica
Current-
clamp
ESTIMULACIN REGISTRO
Potencial de Referencia y V
m
neuronas: -65 a -70 mV
f. musc.: -90 mV
PR
Conceptos de
Electricidad
Ley de Ohm R I V
R
V
I . = A
A
=
Electroqumica
Iones

Aniones
Cationes
Solucin
con
electrolitos
debido
Comp. A
Comp. B
100 mM KCl
100 mM K
+
100 mM Cl
-
membrana permeable
a ambos iones
Comp. A
Comp. B
50 mM K
+
50 mM Cl
-
50 mM Cl
-
50 mM K
+
membrana permeable
a ambos iones
Equilibrio
FLUJO NETO = 0
Comp. A
Comp. B
100 mM KCl
100 mM K
+
100 mM Cl
-
membrana permeable
solo al K
+
Comp. A
Comp. B
50 mM K
+
?

100 mM Cl
-
0 mM Cl
-
50 mM K
+
?

membrana permeable
solo al K
+
gradiente qumico
gradiente elctrico
Membrana permeable solamente al potasio (K
+
)
Potencial
Electroqumico
1 : 1
10 : 1
0,01M
Gradiente Electroqumico
1. la permeabilidad de la membrana para este
ion X.
2. el gradiente de concentracin del ion X
gradiente qumico.
3. la diferencia de potencial elctrica (AV) entre
ambos lados de la membrana gradiente
elctrico.
4. la temperatura absoluta y algunas
constantes fsico-qumicas.
Flujo de un in a travs de una
membrana depende:
Potencial Electroqumico de un in
Gradiente qumico: flujo de difusin
) . / ( . .
2
cm seg moles
x
C
A D
A
A
= u
Ley de Fick
+ + + = zF C T R ln . .
0

componente
qumico
componente
elctrico
Potencial Electroqumico =
in
flujo neto de un in = desde >
i
hacia <
i
Tendencia neta de un in para moverse
desde un punto A a otro B:
diferencia de potencial electroqumica:
A
A-B
=
A
-

B
| |
A A
zF X T R + + + = ln . .
0 A

| |
B B
zF X T R + + + = ln . .
0 B

Potencial Electroqumico =
in
Si A
A-B
> 0 ines tienden a moverse de A a B
Si A
A-B
= 0 flujo neto = 0
Si A
A-B
< 0 ines tienden a moverse de B a A
| |
| |
) ( ln . .
B A
B
A
zF
X
X
T R + + + = =
B A

Cuando un in est en equilibrio electroqumico: A = 0
| |
| |
) ( ln . .
B A
B
A
zF
X
X
T R + + + = = 0
E
in

Potencial de Equilibrio de un in = E
in
y Ecuacin de Nerst
II
I
X
X
X
Fz
RT
E
] [
] [
ln =
II
I
X
X
X
z
E
] [
] [
log
058 , 0
=
C) 20 ( 58 058 , 0 ) 1 ( 058 , 0
1 , 0
01 , 0
log 058 , 0
] [
] [
log 058 , 0

a mV V
K
K
E
i
e
K
= = =
= = =
E
K+
en el equilibrio
En el sistema en estudio, la
neurona, a travs de la
membrana plasmtica se
establecen relaciones entre
el V
m
y los E
K+
y del E
Na+
grad. qumico
grad. elctrico
- +
- +
- +
- +
- +
10 M K
+
1 M K
+
E
K+
= -90 mV
AV = -60 mV
A B
Flujo Neto de A a B
Es lo que ocurre con el K
+

en los tejidos excitables
en el reposo
F
concentracin
> F
elctrica

grad. qumico > grad. elctrico
El movimiento neto del in es en direccin al que
determina la F
concentracin

Caso 3.- Si AV
m
< E
in
(pero de igual signo)
- +
- +
- +
- +
- +
1 M Na
+
10 M Na
+
E
Na+
= +40 mV
AV = -60 mV
A B
Super Flujo Neto de B a A
Es lo que ocurre con el Na
+

en los tejidos excitables
durante el comienzo de la
respuesta activa
grad. qumico
grad. elctrico
F
concentracin
y F
elctrica

grad. qumico y grad. elctrico
operan en igual sentido NO HAY EQUILIBRIO
Caso 4.- Si AV
m
= - E
in
(de distinto signo)
Con qu fuerza los iones pasan
de un compartimento a otro?
Hay una Fuerza Electromotriz que
hace que los iones pasen de un
compartimento a otro.
Es la Fuerza Impulsora o
Driving Force.
fem = V
m
- E
in
= driving force
En presencia de un
anin no difusible en
un compartimento, los
solutos difusibles se
redistribuyen
desigualmente entre
ambos compartimentos
>
<
Equilibrio
Donnan
[K
+
]
I
x [Cl
-
]
I
= [K
+
]
II
x [Cl
-
]
II
Se llega a un equilibrio
electroqumico, tal que:
37
En el Equilibrio Donnan, el potencial qumico y
el potencial elctrico se equilibran.
A pesar de la distribucin desigual de los iones
permeantes, el flujo neto = 0.
Para calcular el potencial de
equilibrio (E
in
) de un in se utiliza:
Ecuacin
de Nerst
Approximate Concentrations and Nernst Potentials
for Major Ions in Cytosol and Interstitial Fluid
CONCENTRATION (mM)
Ion Cytosolic Interstitial
Nernst
Potential (mV)
Na
+

14 140
61
K
+

140 4
-94
Cl
-

8 108
-68
mM, millimolar; mV, millivolts.
38
Qu ocurre si una membrana separa
tres iones permeables distintos, por
ejemplo: Na
+
, K
+
y Cl
-

Puede ocurrir que los 3 iones se distribuyan de
acuerdo a Donnan, y se puede averiguar el AV
desarrollado aplicando la ecuacin generalizada de
Nerst, y coincidir con el valor experimental medido.
Puede ser que el valor obtenido por Nerst y el
experimental no coincida hay algn in que no se
distribuye segn Donnan el sistema no est en estado
de equilibrio electroqumico el sistema est en
un estado estacionario fuera del equilibrio
termodinmico.
1. Las clulas vivas no estn en
equilibrio Donnan, se
encuentran fuera del equilibrio
en un estado estacionario.
2. Este estado estacionario es
mantenido gracias al aporte de
Energa desde las bombas
Na/K ATPasas.
La Bomba
Na/K
ATPasa
es electrognica
41
3. Estas bombas mantienen a los
principales iones fuera del
equilibrio electroqumico.
4. El hecho de que el sistema a travs
de la membrana est fuera del
equilibrio termodinmico, permite
acumular energa potencial para
realizar futuro trabajo.
5. Las bombas Na/K tambin regulan
el Volumen celular.
El Potencial
de Reposo
Concentraciones
inicas
y Potenciales de
Equilibrio.

Axn de Mamfero
Agua de mar: [Na
+
] = 478 mM; [K
+
] = 478 mM; [Cl
-
] = 478 mM.
AGC: axn gigante de calamar
AC: axn de cangrejo
AR: axn de rana
FMER: fibra muscular esqueltica de rana
AM:axn de mamfero
FMEM: fibra muscular esqueltica de mamfero
Concentraciones inicas, E
in
y PR
en diversas clulas excitables
[ ] interna (mM) [ ] externa (mM) E
equil
(mV) PR
K
+
Na
+
Cl
-
K
+
Na
+
Cl
-
K
+
Na
+
Cl
-
mV
AGC
400 50 40 10 460 540 -96 +58 -68 -70
AC
230 45 ~30 10 460 540 -89 +58 -76 -82
AR
110 37 ~7 2,5 120 120 -95 +30 -80 -71
FMER
140 9,2 3 2,5 120 120 -102 +67 -93 -90
AM
150 ~15 9 5,5 150 125 -94 +63 -80 -70
FMEM
140 15 5 4,4 140 105 -92 +59 -80 -85

Potencial
de Reposo
1. Distribucin
desigual de
iones
2. Permeabilidad
diferencial
P
K+
:P
Na+
:P
Cl-
=
1 : 0,01 : 0,45
3. Bombas Na/K
ATPasa
canales de
fuga
Ec. de
Goldman
Hodgkin
Katz
e Cl i Na i K
i Cl e Na e K
reposo
Cl P Na P K P
Cl P Na P K P
F
RT
V
] [ ] [ ] [
] [ ] [ ] [
ln
+ +
+ +
+ +
+ +
=
Modelo Matemtico
que explica el
establecimiento del
Potencial de Reposo
Ecuacin de
Conductancia Cuerda
Modelo Matemtico
que explica la contribucin que hace cada in a la
generacin del Vm en reposo
48
Conductancia g = 1 / R (en siemens, S)
Qu papel cumple, si es que tiene alguno, la
bomba Na/K-ATPasa en la generacin del PR?
A partir de la ecuacin de conductancia de cuerda y del esquema, explique el
origen y mantenimiento del potencial de reposo en una neurona:
Resumiendo:
49
Bibliografia

Carpenter, R. H. S.. 1998. Neurofisiologa (2da edicin). Ed. El Manual Moderno SA. 328 pg..
Cervino, C.. 2010. Neurofisiologa. Parte I: Bases antomo/funcionales del Sistema Nervioso.
(3ra edicin). Morn: E. Praia. 210 pg.
Ganong, W. F.. 2006. Fisiologa Mdica (20
ma
edicin). Ed. El Manual Moderno SA. 944 pg..
Guyton, A. C. y J. E. Hall. 2006. Tratado de Fisiologa Mdica. Dcima primera Edicin. Barcelona:
Elsevier Espaa. 1280 pg.
Hodgkin, A. and A. Huxley. 1952. Currents carried by sodium and potassium ions through the
membrane of the giant axon of Loligo. J. Physiol., 116: 449-472.
Hodgkin, A. and A. Huxley. 1952. The dual effect of membrane potential on sodium conductance
in the giant axon of Loligo. J. Physiol., 116: 497-506.
Hodgkin, A. and A. Huxley. 1952. A quantitative description of membrane current and its
application to conduction and excitation in nerve. J. Physiol., 117: 500-544.
Hodgkin, A. and B. Katz. 1949. The effect of sodium ions on the elecrical activity of the giant
axon of the squid. J. Physiol., 108: 37-77.
Houssay, A. , H. Cingolani y Co-autores. 2000. Fisiologa Humana de Houssay. A. Houssay y H.
Cingolani (eds.). Sptima Edicin. Ed. El Ateneo. 1150 pg.
Junge, D. 1981. Nerve and muscle excitation (2
nd
edition). Sinauer Ass. Inc. 240 pp..
Kandel, E., J. Schwartz and T. Jessell. 2000. Principles of Neural Science (4
th
edition). New
York: McGraw-Hill. 1414 pg..
Koeppen B.M. y B.A. Stanton. 2009. Fisiologa de Berny y Levy (sexta edicin). Barcelona:
Elsevier Espaa. 833 pp.
Kufler, S.; J. Nicholls and R. Martin. 1984. From Neuron to Brain (2
nd
edition). Sunderland, Mass..
Sinaver.
Randall D, Burggren W, French K.. 1998. Eckert Fisiologa Animal. (4 edicin). Interamericana-
McGraw Hill, Madrid. 683 pg.
Somjen, G.. 1986. Neurofisiologa. Ed. Med. Panamericana. 476 pg..
FIN
Esta presentacin Power Point fue realizada para su uso exclusivo en el
Curso de Fisiologa Animal Comparada FCEQyN UM.