PRCTICA N 7 OBTENCIN Y MANEJO DE MUESTRAS CLNICAS

A. Introduccin
El factor fundamental en la calidad del trabajo que se realiza en la seccin de microbiologa, lo constituye la adecuada coleccin y transporte del espcimen ha evaluar. Esto resulta particularmente cierto dado la diversidad de grmenes que pueden provocar enfermedades infecciosas y la alta posibilidad de que la muestra pueda ser contaminada por la abundante y variada flora saprfita del cuerpo humano. La coleccin y transporte del espcimen representa un punto crtico debido a que la calidad del trabajo a realizar en el Laboratorio de Microbiologa est en gran parte condicionado a la naturaleza de la muestra y su condicin de arribo al laboratorio. Si el laboratorio no recibe una muestra apropiada, no puede dar un informe de utilidad clnica y en muchos casos puede confundir y alejar al clnico del verdadero agente etiolgico de la enfermedad. Los elementos de todo el proceso deben ser claramente expresados, incluyendo sitio de coleccin, volumen de la muestra, nmero de especmenes, calidad del mismo, manejo apropiado, forma de transporte, etc. Es importante recalcar que el tratamiento correcto del espcimen, es responsabilidad de todos: Mdicos especialistas, internos, residentes, enfermeras, auxiliares, mensajeros, recepcionistas y laboratoristas, deben contribuir todos para lograr el objetivo comn. Una de las mayores responsabilidades del Laboratorio Clnico es el de desarrollar y promulgar guas para la Coleccin y Transporte de las muestras. Estas instrucciones deben estar accesibles a todo el personal mdico y de enfermera responsable de su coleccin y transporte. En la actualidad los hospitales, policlnicas y centros de salud a nivel nacional, no cuentan con una gua para ayudarlos en la coleccin y transporte de las muestras microbiolgicas, y es por ello que ponemos a la disposicin de la comunidad mdica en general ste Manual que intenta llenar una necesidad en nuestro medio como un aporte del Laboratorio Clnico.

B. Coleccin y transporte de muestras microbiolgicas Criterios para la obtencin, transporte y Recibo de muestras clnicas
En trminos de la efectividad del laboratorio de microbiologa, nada es ms importante que la apropiada seleccin, coleccin y transporte de las muestras clnicas. Por ello todo el personal que tiene que ver con estas responsabilidades, debe comprender lo determinante que es el mantenimiento de la calidad de la muestra, en la evaluacin e informe de un espcimen clnico. Es responsabilidad del laboratorio proveer sta informacin en forma clara y que sea fcilmente incorporada en la metodologa de trabajo de todas las salas de atencin y hospitalizacin , el cual debe estar siempre accesible al personal de enfermera y mdicos como una referencia. Independientemente del hecho de que algunos tipos de muestras requieren metodologas de coleccin muy especiales, podemos enumerar algunos aspectos generales que deben ser tenidos en cuenta al coleccionar las muestras clnicas:

Cuando se va a proceder a tomar un espcimen clnico, es importante evitar la contaminacin con microorganismos saprfitos del rea. Esta flora normal puede interferir con la interpretacin del cultivo y enmascarar la presencia del verdadero agente etiolgico de la enfermedad. Seleccione el tipo anatmico correcto donde se obtendr el espcimen, y utilice la tcnica apropiada y los instrumentos o elementos adecuados para su obtencin. En el caso de investigar microorganismos anaerbicos, la biopsia y el aspirado con aguja, son las muestras de eleccin.

Los hisopos y sistemas tipo Culturette son los menos deseables para este fin. Nunca refrigere una muestra por anaerobios. Coleccione un apropiado volumen de muestra. Insuficiente material puede ser causa de resultados falso-negativos. Identifique cada muestra con el nombre del paciente, nmero de identificacin personal (Nmero de seguro social o Cdula de identidad personal ), procedencia, tipo de muestra, fecha de coleccin e iniciales del funcionario que tom la muestra. Coloque la muestra en un receptculo adecuado para su transporte con el fin de asegurar la sobre vivencia del posible agente infeccioso, evitar derrame del espcimen y mantener las medidas de bioseguridad apropiadas. Anote en el formulario cualquiera informacin de inters, tales como si el paciente es inmunosuprimido o si recibe drogas inmunosupresoras, si recibe antibiticos, diagnstico presuntivo, inters en algn germen, etc

1.- MUESTRAS DE SANGRE El pronto aislamiento del agente etiolgico en una septicemia, es una de las ms importantes funciones del laboratorio microbiolgico. Las muestras sern recolectadas, en lo posible antes de iniciar medicacin con antibiticos. El clnico deber observar en el paciente los signos y sntomas que suelen presentarse en estos casos, es decir. Relativo incremento del pulso, temperatura, escalofros, hipotensin, postracin, etc. La cantidad de muestras de sangre, vara por lo general entre 5 y 30 ml. Las condiciones de asepsia son estrictas por el hecho de que la sangre es un excelente medio de cultivo para la mayora de microorganismos ambientales (contaminantes). La piel en la zona de puncin se debe desinfectar con alcohol al 70% ms el aadido de Yodo al 2% no se debe refregar la piel, de la misma forma, los dedos utilizados para palpar la vena, tambin debe ser motivo de estricta limpieza y desinfeccin, una vez desinfectada la zona nunca se debe soplar sino esperar la evaporacin espontnea del alcohol. Utilizar de preferencia aguja descartable N 21 por 1. Tomada la muestra, inmediatamente proceder a inocular directamente al frasco conteniendo el medio de cultivo, siempre al lado del mechero. Ocasionalmente, la muestra puede ser transportada al laboratorio en un tubo estril conteniendo polietosul6notosdico (PSS) al 0.025405% sustancia que acta sobre el complemento y como antifagoctico.

2.- MUESTRAS DE ORINAS Para realizar una buena toma de muestras, seguir los pasos siguientes: 1. Lavado de la regin genital del paciente utilizando agua jabonosa, enjuagar con suero fisiolgico estril. No es recomendable secar. 2. Recolectar por miccin voluntaria la porcin intermedia desechando la primera y ltimas porciones. Los otros mtodos de toma de muestra se descartan, salvo en casos extremos y cuando las circunstancias as lo exijan. Las muestras se recolectan en fiascos de boca ancha esterilizadas. 3. Si se trata de pacientes lactantes o infantes, utilizar bolsas colectoras descartables. En este caso el punto (2) queda excluido por razones obvias. 4. Las muestras deben ser procesadas inmediatamente o en el transcurso de una hora. La orina de por si es un excelente medio de cultivo y a un pequeo o no significativo nmero de bacterias pueden multiplicarse rpidamente. Si no se procesa la muestra como se 0 indica, se puede refrigerar hasta por 24 horas a 4 C (2) y excepcionalmente se puede aadir algunos cristales de cido brico (3) 5. Procesar las muestras tanto cualitativa como cuantitativamente en forma rutinaria.

3.- MUESTRAS SUPERIORES

DE

LAS

VIAS

RESPIRATORIAS

Las muestras de la regin naso - farngea se obtienen mediante un aplicador o torunda Dacrn de 6, introduciendo lentamente en la fosa nasal 1 a 2 cm. y dejar unos segundos, retirar en igual forma y sembrar directamente en los medios o colocar en un medio de transporte. Si se trata de obtener muestra de exudado farngeo hacer uso del baja lengua. Con el hisopo se flota la parte amigdalina, fosa tonsilar y lugares donde se observe inflacin o sospecha de infeccin, evitando tocar las secreciones de la cavidad oral, lo cual puede dar lugar sobre crecimiento o inhibicin de la flora faringe motivo del aislamiento. Sembrar directamente o colocar en un medio de transporte.

4.- MUESTRA DEL TRACTO GENITAL: Antes de proceder a tomar las muestras, es necesario una rigurosa higiene de los genitales externos con solucin estril. En el varn la muestra de secrecin uretral empleando un hisopo o asa de Kolle luego de haber limpiado cuidadosamente el glande. Es recomendable tomar la muestra antes de la primera miccin del da. Se indica al paciente que presiones la uretra desde la regin escrotal hacia el glande, de manera que se observe suficiente cantidad de secrecin que se recibir en hisopo o directamente en la superficie de una lmina porta objetos, y la siembra debe realizarse directamente en los medios de cultivo y paralelamente efectuar dos extendidos para observacin directa o coloracin de Gram. Cuando se trata de procesos crnicos (uretritis y prostatitis a veces es conveniente tomar como muestra la primera miccin de la maana (2 a 5m1) o muestra de semen. En mujeres la muestra se toma del fondo del saco vaginal, en las proximidades del cuello uterino, utilizando un hisopo estril de 6 y la ayuda de un especulo. Se prepara un extendido para la observacin microscpica inmediata y posterior coloracin Gram. En las nias la muestra debe ser de la regin vulvo vaginal.

En el varn

En la mujer

5.- MUESTRA DE EXUDADO TICO: Para la toma de muestra es conveniente emplear hisopos con punta de algodn fina, con la finalidad de evitar dolor en pacientes con el conducto auditivo inflamado. Si la muestra procede del odo medio es recomendable que sea tomada por el Otorrino, en cambio si la muestra es del odo externo sta puede ser tomada en el laboratorio por el microbilogo. No es recomendable efectuar irrigaciones con sustancias antispticas, en todo caso, se dejar transcurrir por lo menos tres horas antes de tomar la muestra. Obtenida la muestra sembrar inmediatamente o colocar en un medio de transporte. Paralelamente preparar dos o tres lminas, urna para observacin directa y las oras ser coloreadas.

6.- MUESTRAS DE EXUDADO OCULAR. La muestra es obtenida de preferencia del saco conjuntval haciendo uso de una hisopo humedecido con solucin salina estril.. Si se trata de obtener muestras de raspados, stas deben ser obtenidas por el Oftalmlogo. La siembra debe ser directa o en un medio de transporte. Paralelamente se debe preparar una lmina para observacin directa, otra para coloracin de Orar y una para coloracin de Giemsa.

7.- MUESTRA DE SECRECION DE HERIDA.: Para obtener este tipo de muestra es necesario lavar la zona circundante a la herida con solucin salina estril, no secar y obtener la muestra de la parte profundada de preferencia de la regin central de la herida mediante un hisopo humedecido en SSF. Si se trata de heridas cenada % previamente se desinfecta toda la zona con alcohol yodado y luego se obtiene la muestra con una jeringa y aguja hipodrmica estriles. En cambio, si se trata de heridas abiertas supuradas, limpiar con eter tomar la muestra con hisopo o con usa de Kolle. Hacemos hincapi en el hecho de que este tipo de muestras deben ser sembradas directamente en los medios de cultivo, dirigiendo la atencin a la investigacin de anaerobios, ya que es alto el porcentaje de heridas purulentas infectadas por este tipo de microorganismos. En caso de no poder sembrar de inmediato la muestra, es necesario hacer uso de medios de transporte reductores. 8.- CONSERVACIN DE LAS MUESTRAS: 0 Por lo general las muestras pueden ser conservadas a temperatura entre 4 y 5 C, empleando los medios de transporte de Stuar. Ames, etc. y en otros casos las muestras se conservan tal como se obtienen (muestras de sangre).

Cierto tipo de muestras deben ser procesadas inmediatamente, no permitindose guardarlas en refrigeracin, esto es importante cuando se tiene que aislar Neisseria. Neumococcus, Haemophyllus, etc. microorganismos que son sensibles a bajas temperatura.

RESULTADOS: Obtencin de Secreciones: Agar Sangre Agar Chocolate Agar Sabouraud Agar Mac Konkey Suero Fisiolgico

Gardnerella, Maviluncus Haemofilo, Neisseria, Neumococo. Hongos Entereobacterias Parsitos

CONCLUSIONES: De acuerdo a las Observaciones realizadas se concluye que: Para la identificacin de microorganismos se hace uso especfico de determinados medios de cultivo, los cuales nos permitirn elaborar un esquema adecuado para actuar contra el microorganismo. Existe ms incidencia de determinadas enfermedades producidas por microorganismos que en otros casos. Las obtenciones realizadas requieres del manejo adecuado de bioseguridad.