1 MICROSCOPIA PARTES DE UN MICROSCOPIO COMPUESTO 1) Mecnica g) Platina a) Pie h) Diafragma 2) ptica b) Brazo c) Revolver a) Objetivos d) Tornillo micromtrico b) Oculares

e) Tornillo micromtrico c) Condensador f) Sujetador d) Espejo Los objetivos de un microscopio compuesto son los componentes ms importantes del mismo. Forma la imagen primaria del objeto, el cual es subsecuentemente examinado por el ocular. Se los clasifica en trminos de: 1. Poder de magnificacin 2. Apertura numrica (NA) una medida del poder de recoleccin de la luz y por consiguiente, del poder de resolucin. La AN se expresa como el producto del ndice de refraccin n del medio en la cual la lente opera (por ejemplo, 1.00 para el aire, 1.51 para aceite) y el seno de la mitad de la apertura angular u de la lente. El ngulo de apertura vara con la distancia focal de la lente del objetivo. NA n sin u. 3. Grado de correccin ptica: que se clasifica como acromtico, semiapocromtico o apocromtico 4. Longitud de tubo mecnico 5. Grosor de la laminilla 6. Plano del campo 7. Distancia focal La mayor parte de esta informacin se encuentra grabado en la superficie externa del objetivo.

2 ILUMINACIN DE KOHLER Para un trabajo microscpico de investigacin, fotomicrografa, microproyeccin, etc. la forma en que la luz llega al espcimen debe ser controlado con precisin. El Prof. August Kohler (1893) fue el primero en usar el mtodo exacto en que la luz llega a usarse eficientemente en el microscopio, el mtodo llamado Mtodo Kohler. Este mtodo requiere los siguientes ajustes: 1. ENFOCAR EL ESPCIMEN 1.1. Con el objetivo de 10X enfocar un espcimen con iluminacin adecuada. 1.2. Ajustar el binocular para la distancia interpupilar. 1.3. Ajustar el diopter en la forma siguiente: 1.3.1. Con un fragmento de papel o algo similar cubrir el ocular que posee el diopter sin cerrar los ojos para evitar cualquier tipo de molestia. 1.3.2. Buscar un detalle pequeo probablemente redondeado en el plano del espcimen o el contorno de una clula u otro tipo de estructura que pueda tomarse como referencia para enfocar cuidadosamente con el tornillo micromtrico. 1.3.3. Cubrir el ocular que estaban usando para enfocar, y luego enfocar con el diopter los mismos detalles del paso dos (1.3.2) pero sin usar el micromtrico. Remover el fragmento de papel y el binocular estar correctamente ajustada. 2. AJUSTAR LA APERTURA DEL DIAFRAGMA (AD) DE LA FUENTE DE LUZ 2.1. Cerrar el diafragma hasta que puedan ver un crculo dentro del campo de observacin. Es muy probable que la imagen del diafragma no este centrado y a la vez no definido. Con los tornillos del condensador centrar la imagen del diafragma. Levantar o bajar el condensador para enfocarlo. 3. AJUSTAR LA APERTURA DEL DIAFRAGMA DEL CONDENSADOR 3.1. Ajustar la apertura del diafragma (AD) es el paso MAS IMPORTANTE para el uso adecuado del microscopio porque: 3.1.1. Controla la apertura numrica 3.1.2. El poder de resolucin 3.1.3. Campo de penetracin y 3.1.4. Las caractersticas de la imagen. 3.2. Remover un ocular y observar dentro del tubo vaco. Al cerrar la AD una imagen del diafragma es observada. La AD debe ser ajustado en forma diferente para acomodar las caractersticas pticas de cada espcimen. 3.2.1. El fotomicrgrafo debe evaluar crticamente una imagen mientras est ajustando la AD hasta encontrar un compromiso de posicin ptimo entre el campo de profundidad y resolucin. Un conocido microscopista sola decir empezar con el diafragma abierto completamente e ir cerrando poco a poco hasta que aparezca la imagen que uno desea.