N u ev o s e n fo q u e s

Tony Merriman

Entender las causas genticas de la diabetes

variaciones genticas comunes de los genes que controlan el reconocimiento de sustancias qumicas propias o extraas gracias a las protenas de la superficie celular del sistema inmune (los genes MHC). stos juegan un papel fundamental en la activacin del sistema de defensa inmune del organismo, ayudando a identificar antgenos potencialmente dainos.

Las personas desarrollan diabetes tipo 1 cuando su sistema inmune busca y destruye las clulas del pncreas, productoras de insulina. La interaccin de los factores medioambientales con una serie de variantes genticas tiene como resultado la alteracin del sistema inmune, que provoca la afeccin. En este artculo, Tony Merriman nos habla de los enfoques que se utilizan para identificar los genes que hacen que una persona sea susceptible de desarrollar diabetes tipo 1.

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Encontrar los genes
La diabetes y sus complicaciones tienen fuertes determinantes genticos. Mientras que, por un lado, la diabetes parece desarrollarse como resultado de muchos factores, como los medioambientales, prcticamente todas las formas de la afeccin parecen tener influencias genticas. Estn involucrados varios genes, haciendo de la diabetes una afeccin gentica compleja que es particularmente difcil de comprender. Los clculos del riesgo gentico de la diabetes tipo 1 ayudarn a dirigir las medidas preventivas hacia aqullos nios que corran un mayor riesgo de desarrollar la afeccin. Esto resulta especialmente importante si pensamos En la diabetes tipo 1, el proceso inmune de destruccin est influido por los genes que controlan el sistema inmune. Se utiliz un mtodo conocido como el enfoque del gen candidato (adivinar a partir de su funcionamiento qu genes conocidos podran estar involucrados) para demostrar que los genes ms fuertes que predisponen al paciente a desarrollar diabetes tipo 1 son realizar intervenciones que sean eficaces cuando se apliquen antes de la aparicin de marcadores de riesgo ms convencionales, tales como los antecedentes familiares de diabetes tipo 1 y la presencia de anticuerpos en la sangre dirigidos contra las clulas beta de los islotes.

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La diabetes es una afeccin gentica compleja que es especialmente difcil de comprender.
Ms recientemente, otros enfoques, basados en la herencia de partes del genoma humano en asociacin con la diabetes, se han utilizado para apuntar a genes no sospechosos que determinan la susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1. Los xitos futuros dependern de grandes estudios realizados con familias con diabetes y un mejor conocimiento de la compleja arquitectura gentica de los humanos modernos.

Genes candidatos
Los genes candidatos, escogidos porque su producto proteico podra probablemente jugar un papel en el

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inactivacin tmica, el sistema inmune podra atacar a las clulas beta, con el Insulitis: un islote pancretico (las clulas estn teidas de rojo) est siendo invadido por linfocitos T (teidos de verde), proceso irreversible hasta la fecha y que provoca diabetes tipo 1. riesgo de producir diabetes. Se sabe que las personas con la versin del gen de insulina que no predispone a la diabetes tienen ms insulina en el timo.Tambin se sabe que la variante del MHC-DRB1 DR2, que protege ante la diabetes tipo 1, es capaz de unir molculas similares a la insulina con ms proceso de la enfermedad, se pueden poner a prueba para ver si existe una asociacin con la misma. En 1974, se descubri que variantes concretas de los genes MHC iban asociadas a la diabetes tipo 1. Esta asociacin es fuerte; las personas que han heredado estas dos variantes al mismo tiempo (conocidas como DR3 y DR4) tienen un riesgo entre 10 y 20 veces superior de desarrollar la afeccin. Otras personas, que han heredado la variante DR2, tienen una fuerte proteccin ante la diabetes tipo 1. Unos 10 aos ms tarde, se detect una asociacin del gen de la insulina con la diabetes tipo 1. Esta asociacin parece deberse a la repeticin de parte del ADN en la regin del gen de la insulina que controla los niveles de actividad gentica de la misma; las personas con ms repeticiones estn ms predispuestas a desarrollar diabetes tipo 1. La asociacin de los genes MHC y de la insulina con la diabetes tipo 1 ha visto ahora su rplica en muchas poblaciones distintas. En la glndula timo de un nio, que es donde el sistema inmune aprende a tolerarse a s mismo, los linfocitos T se inactivan cuando reconocen un autoantgeno. Sin embargo, en el resto del sistema inmune, los linfocitos T se activan si reconocen un antgeno. Si este antgeno es consecuencia de una infeccin, el linfocito T se activar para combatir dicha infeccin. Sin embargo, si el antgeno se deriva de las clulas beta pancreticas (quiz un fragmento de insulina) y es reconocido por un linfocito T en circulacin que ha escapado de la de reconocer otras clulas sanguneas, los linfocitos T. Dependiendo de la situacin, el linfocito T, por decirlo de algn modo, se activa o se inactiva. Este tipo de actividad de los linfocitos T es el eje de enfermedades autoinmunes (autolesiones) como la diabetes tipo 1, y por lo tanto un gen que tenga un efecto crtico sobre los linfocitos T afectar a dichas enfermedades. avidez. Esta y otras pruebas han llevado a la hiptesis de que la herencia de las variantes protectoras tanto del gen MHC-DRB1 como del de la insulina mejora la capacidad de una persona de inactivar los linfocitos T que actan contra la propia insulina en el timo. Esto sucede porque se produce ms insulina tmica, y esto est estrechamente relacionado con la variante del MHCDRB1 DR2. Esto significa que los linfocitos T autorreactivos se destruyen mejor. Sin embargo, la manera en la que las variantes DR3 y DR4 predisponen al desarrollo de diabetes tipo 1 est menos clara, aunque parece implicar una ruptura de la regulacin de la tolerancia a los componentes celulares beta por parte del sistema inmune.

Si el linfocito T reconoce un antgeno procedente de una clula beta pancretica (quiz un fragmento de insulina), el sistema inmune podra atacar a las clulas beta.

El CTLA-4, un gen candidato posicional

Mientras que la informacin sobre asociacin gentica del MHC y la insulina ha llevado a pistas importantes acerca del mecanismo de desarrollo de la diabetes tipo 1, est claro que muchos genes que controlan otros pasos dentro del proceso de la enfermedad an quedan por descubrir. Por ello, se est utilizando una poderosa y novedosa estrategia, el enfoque del candidato posicional. Estos genes son seleccionados en base a su posicin en el mapa genmico, utilizando

Traducir la informacin gentica en conocimiento de la etiologa

Los genes MHC, asociados a la diabetes tipo 1, codifican molculas que estn presentes sobre la superficie celular en el sistema inmune, dando a dichas clulas una identidad que son capaces

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posiciones ya implicadas en la susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1. Como mejor se ilustra el enfoque del candidato posicional es mediante la revisin de la reciente identificacin del gen CTLA-4 como gen que determina la susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1.1 La regin del genoma que contiene el gen CTLA-4 fue identificada a mediados de los aos 90 como regin vinculada a la diabetes tipo 1, ya que cuando dos hermanos tenan la afeccin tendan ambos a heredar esta misma regin genmica.

Dentro de esta regin el gen CTLA-4 era un candidato fuerte, debido a que su producto proteico est involucrado en el control de la actividad de los linfocitos T. Las variantes del CTLA-4 ya haban sido asociadas previamente, si bien de manera inconsistente, a la diabetes tipo 1, en una serie de poblaciones. La cuestin fundamental era si el CTLA-4 era realmente el gen implicado o tan slo un vecino cercano del verdadero gen de susceptibilidad. Con el fin de responder esta pregunta, se analizaron variaciones del CTLA-4 y de los genes flanqueantes (CD28 e

ICOS) para ver si iban asociados a la diabetes tipo 1.1 El gen CD28 en concreto era un fuerte candidato de la diabetes tipo 1. Como el CTLA-4, su producto est implicado en la regulacin de la activacin de los linfocitos T. Sin embargo, se averigu que las variantes mejor asociadas de los tres genes se encontraban en el gen CTLA-4. Por lo tanto, el CTLA-4 pertenece ahora al club exclusivo de los ampliamente aceptados determinantes de susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1. Las variantes del CTLA-4 asociadas a la diabetes tipo 1 estn

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Los anticuerpos son protenas que fabrica el organismo con el fin de protegerle de sustancias extraas como las bacterias o los virus. Las personas desarrollan diabetes tipo 1 cuando su organismo fabrica anticuerpos que atacan y destruyen las propias clulas del pncreas, productoras de insulina. Los antgenos son las toxinas, las bacterias y las clulas de los rganos transplantados. Estimulan la produccin de anticuerpos. Molculas similares a la insulina pueden actuar como antgenos si el sistema inmune no est programado adecuadamente para reconocerlas como propias. El timo es una pequea glndula situada tras el esternn, prominente en los nios. Est compuesta principalmente por tejido linftico y sirve como lugar de diferenciacin de los linfocitos T. El objetivo del Proyecto HapMap es desarrollar un mapa detallado (haplotipo) del genoma humano. Se espera que el HapMap sea un recurso clave para ser utilizado por los investigadores a la hora de detectar genes que influyan en la salud, la enfermedad y la respuesta a los medicamentos y a los factores medioambientales. La informacin procedente del Proyecto estar disponible de manera gratuita. Visite
okapia

http://www.hapmap.org/ si quiere saber ms sobre el Proyecto.

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problema. Como resultado, los genetistas tan slo necesitarn identificar cambios de cinco o seis puntos en el ADN para La actividad de linfocitos T es central en enfermedades autoinmunes como la diabetes tipo 1. capturar la mayora de las versiones de un gen concreto que en potencia iran asociadas a la enfermedad. Adems, la utilizacin de poblaciones de mayor tamao en las cuales las personas con diabetes son comparadas con grupos de diabetes tipo 1 entre poblaciones distintas, tres conclusiones son inevitables: Algunas de las regiones de >20 presentarn vnculos falsamente contenidas dentro de una regin del gen que influye en la estabilidad del mensajero trascrito desde el gen (su ARNm). Esto parece afectar los niveles de protena del CTLA-4, y podra tener una amplia gama de efectos sobre la regulacin del sistema inmune. Esto difcilmente puede ser una base positivos. El resto sern genuinos pero se detectarn por suerte Queda un nmero desconocido de regiones genmicas que no se han detectado. control (estudios de casos con cohorte de control) dar una mayor capacidad cientfica a este tipo de estudio.

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Cabe esperar nuevos xitos en la identificacin de genes determinantes de la diabetes tipo 1 durante los prximos 5 aos.

Optimismo
La reciente demostracin de que es posible la clonacin posicional de un gen de susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1 de efecto dbil (CTLA-4) da lugar al optimismo. Cabe esperar nuevos xitos en la identificacin de genes determinantes de la diabetes tipo 1 durante los prximos 5 aos. ideal sobre la cual seleccionar las mejores regiones genmicas para localizar los recursos necesarios a la hora de identificar los genes de susceptibilidad de diabetes tipo 1 mediante la utilizacin del mtodo del candidato posicional. Por lo tanto, la Fundacin para la Investigacin de la Diabetes Juvenil est patrocinando una cooperacin mundial para reunir un nuevo grupo de 2.500 familias en las que dos hermanos estn afectados. Estas se sumarn a las 1.800 que ya hay disponibles. Mientras tanto, la identificacin de ms genes de susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1 depender de si superamos nuestros conocimientos inadecuados de la compleja variacin gentica en humanos. La informacin procedente del Proyecto HapMap del Genoma Humano ayudar a superar este
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Futuro y proyectos
Se han desarrollado rastreos de todo el genoma en la ltima dcada en busca de regiones genmicas que se compartan en exceso (vinculadas) entre hermanos con diabetes tipo 1. Dichos rastreos han identificado una gran cantidad (>20) de regiones que pueden contener genes de susceptibilidad de desarrollar diabetes tipo 1.2 Estas regiones por lo general han sido identificadas utilizando menos de 1000 parejas de hermanos. A pesar del considerable esfuerzo necesario para reclutar a estas personas, el conjunto de familias es demasiado pequeo como para detectar de manera fiable efectos genticos dbiles. Esto significa que, por lo general, los vnculos no se han repetido entre un estudio y otro. Mientras que esta falta de consistencia puede explicarse mediante las diferencias de pasado gentico y etiologa de la

Tony Merriman
Tony Merriman es Miembro Veterano de Investigacin Gentica del Departamento de Bioqumica de la Universidad de Otago, en Dunedin, Nueva Zelanda. tony.merriman@stonebow.otago.ac.nz

Bibliografa
1 Ueda H, Howson JMM, Esposito L, Heward J, Snook H, Chamberlain G et al. Association of the T-cell regulatory gene CTLA-4 with susceptibility to autoimmune disease. Nature 2003; 423: 506-11. Redondo MJ, Eisenbarth GS. Genetic control of autoimmunity in type 1 diabetes and associated disorders. Diabetologia 2002; 45: 605-22.

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