qwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasBiotecnologa dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasSeparacin cromatogrfica dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasde pigmentos vegetales dfghjklzxcvbnmqwertyuiopas2013/14 dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasMesa 2 dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjklzxcvbnmqwertyuiopa

1. EXTRACCIN DE PIGMENTOS VEGETALES

EXTRACCIN DE LOS PIGMENTOS VEGETALES CON HEXANO:ETANOL (4:2) DE: LECHUGA ACELGA

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA:

FASE ESTACIONARIA: Slica gel (compuesto polar) sobre una lmina de vidrio.

FASE MVIL: eluyentes apolares. o Benceno (1) o Benceno:Acetona (7:3) (2) o Etanol (3) o Etanol:Acetona (6:4) (4)

2. CROMATOGRAFA EN CAPA FINA.

Se emplearon diferentes disolventes de diferente naturaleza polar/apolar para determinar cul era aquel o aquellas mezclas que aumentaban la eficacia del proceso:
Benceno (apolar) (1) Benceno:Acetona (apolar:polar) (7:3) (2) Etanol (muy polar) (3) Etanol:Acetona (polares) (6:4) (4)

El principio del mtodo se basa en que la sustancia de inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase mvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. El eluyente no slo acta como fuerza propulsora sino que, adems, su propia estructura qumica contribuye a que los pigmentos puedan separarse mediante sucesivos equilibrios de adsorcin-desorcin. Si solo empleamos un disolvente apolar, las clorofilas no podran separarse porque quedaran adsorbidas en el punto de aplicacin (fase estacionaria polar). Aadiendo una pequea porcin de disolvente polar, en el cual estas molculas son solubles, posibilita el establecimiento de esa serie de equilibrios y por ende su separacin.
En nuestro caso, ajustndonos al tiempo disponible para realizar la experiencia, utilizamos 4 eluyentes (fase mvil) diferentes en base a su polaridad/apolaridad. El tipo de polaridad de las sustancias a separar permite que los solventes de acuerdo con su naturaleza polar o apolar las arrastren o no. (1) (2)

(3) DATOS A TENER EN CUENTA:

(4)

Las clorofilas A y B difieren en el tipo de sustituyente de su carbono 3 (grupo metilo y grupo aldehdo, respectivamente) => la Clorofila B es ms polar que la Clorofila A. Carotenoides (menos polares que las clorofilas): o Carotenos son hidrocarburos que slo poseen H y C, siendo solubles en disolventes no polares. o Xantofilas son derivados oxigenados de los carotenos, siendo solubles en alcohol.

Referencia: http://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/2510362.pdf

3. RESULTADOS Y CONCLUSIONES.
Se presentan los resultados obtenidos a partir de la cromatografa efectuada a muestras de dos extractos diferentes: uno de lechuga (L) y otro de acelga (A). Tras realizar las distintas experiencias, concluimos que la mezcla ms adecuada de todas las que empleamos fue la (2) Benceno:Acetona (7:3), que permiti una mejor separacin de los diferentes pigmentos en el caso de la acelga.

Se ha utilizado esta mezcla por contener un disolvente apolar (benceno) con una pequea proporcin de uno polar (acetona) lo que nos permite separar los pigmentos ms representativos, no siendo posible separar la totalidad de los pigmentos debido a sus diferentes polaridades.
Como se puede observar, los pigmentos se separan de forma proporcional a su polaridad, es decir, los ms polares como las clorofilas quedan retenidos cerca de la lnea de mxima altura mientras que los menos polares como los carotenos lo hacen ms cerca del punto de aplicacin del eluyente.

Rf1= 4,9/5,3 = 0,92

Rf2= 5,1/5,3 = 0,96 Rf3= 5,2/5,3 = 0,98