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2
AGRADECIMIENTOS
Heberth Velásquez, José C. Ciprian, Manuel Gil, Ferney López y Melba Mora.
Personal técnico del C.I. La Libertad.
3
CONTENIDO
pág.
INTRODUCCIÓN..........................................................................................................15
1. REVISIÓN DE LITERATURA................................................................................18
1.1 LOS CÍTRICOS......................................................................................................18
1.1.1 Taxonomía....................................................................................................18
1.1.3 Origen............................................................................................................19
1.1.4 Morfología ....................................................................................................19
1.1.5 Adaptación ...................................................................................................20
1.1.6 Suelos............................................................................................................20
1.1.7 Calidad nutricional.....................................................................................20
1.2 COBERTURAS EVALUADAS ......................................................................21
1.2.3 Pasto Maquenque: Desmodium heterocarpon (L.) DC. subsp.
ovalifolium (Prain.) Ohashi CIAT 13651 ...............................................................22
1.2.3.1 Origen ..............................................................................................................22
1.2.3.2 Morfología.......................................................................................................22
1.2.3.3 Características agronómicas.....................................................................23
1.2.4 Grama trenza: Paspalum notatum Flüegge ..............................................23
1.2.4.1 Origen ..............................................................................................................23
1.2.4.2 Morfología.......................................................................................................24
1.2.4.3 Características agronómicas.....................................................................24
1.2.5 Pasto Llanero: Brachiaria dictyoneura (Figari & De Not.) Staff cv.
Pasto Llanero ..............................................................................................................25
1.2.5.1 Origen ..............................................................................................................25
1.2.5.2 Morfología.......................................................................................................25
1.2.5.3 Características agronómicas.....................................................................26
1.2.6 Maní forrajero: Arachis pintoi Krapovickas y Gregory. Nom. Nud. cv.
Maní forrajero Perenne .............................................................................................26
1.2.6.1 Origen ..............................................................................................................26
1.2.6.2 Morfología.......................................................................................................27
1.2.6.3 Características Agronómicas ....................................................................28
1.2.7 Pasto Toledo: Brachiaria brizantha CIAT 26110 ......................................28
1.2.7.1 Origen ..............................................................................................................28
4
1.2.7.2 Morfología.......................................................................................................29
1.2.7.3 Características agronómicas.....................................................................29
1.2.8 Pasto Guinea: Panicum maximum Jacquin ..............................................30
1.2.8.1 Origen ..............................................................................................................30
1.2.8.2 Morfología.......................................................................................................31
1.2.8.3 Características agronómicas.....................................................................31
1.3 MICORRIZAS.........................................................................................................32
1.3.1. DEFINICIÓN E IMPORTANCIA .....................................................................32
1.3.1 TIPOS DE MICORRIZA ....................................................................................33
1.3.1.1 Ectomicorrizas...............................................................................................34
1.3.1.2 Endomicorrizas .............................................................................................35
1.4 Micorriza Arbuscular (MA) ................................................................................36
1.5 COLONIZACIÓN DE HMA ..................................................................................36
1.5.1 Pre-infección .....................................................................................................36
1.5.2 Penetración........................................................................................................37
1.5.3. Colonización intraradical ..............................................................................38
1.5.4. Desarrollo de micelio externo......................................................................39
1.5.5. Esporulación y Re-infección........................................................................39
1.6 FACTORES QUE AFECTAN LA SIMBIOSIS..................................................40
1.7 FISIOLOGÍA DE LOS HMA.................................................................................42
1.8 TAXONOMÍA..........................................................................................................45
1.9 ANTECEDENTES CIENTÍFICOS Y TECNOLOGICOS DE HMA.................47
2. MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................................50
2.1 LOCALIZACIÓN....................................................................................................50
2.2 ÁREA DE MUESTREO ........................................................................................51
2.3 DETERMINACIÓN DEL TAMAÑO DE LA MUESTRA .................................52
2.4 METODOLOGIA....................................................................................................53
2.5 MUESTREO ..........................................................................................................53
2.5.1 FASE PRELIMINAR .........................................................................................53
2.5.2 FASE DE LABORATORIO ............................................................................54
2.5.2.1 Extracción y separación de esporas del suelo....................................54
2.5.2.1.1 Variación al método del tamizado........................................................54
2.5.2.1.2 Centrifugación y decantación ...............................................................55
2.5.2.1.3 Extracción ..................................................................................................55
5
2.5.2.2 Identificación de morfotipos, conteo y caracterización de esporas
.........................................................................................................................................55
2.5.2.2.1 Reconocimiento de morfotipos ............................................................55
2.5.2.2.2 Conteo .........................................................................................................56
2.5.2.2.3 Identificación ...........................................................................................56
2.5.2.3 Determinación del porcentaje de colonización de raíces.................57
2.5.2.3.1 Tinción de Raíces .....................................................................................57
2.5.2.3.2 Cuantificación del porcentaje de colonización radicular ..............57
2.6 ANÁLISIS ESTADÍSTICO ..................................................................................58
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................59
3.1 ANÁLISIS FISICO-QUÍMICOS DE SUELO.....................................................59
3.2 DENSIDAD DE ESPORAS.................................................................................59
3.2.1 Época húmeda ..................................................................................................59
3.2.2 Época seca...................................................................................................60
3.2.3 Densidad de esporas en las dos épocas evaluadas ........................60
3.3 PORCENTAJE DE COLONIZACIÓN...........................................................62
3.3.1 Época Húmeda............................................................................................62
3.3.2 Época Seca ..................................................................................................64
3.3.3 Porcentaje de Colonización en las dos épocas evaluadas ............66
3.4 Comparación de la densidad de esporas y el porcentaje de
colonización de HMA en las dos épocas evaluadas ........................................67
3.5 GÉNEROS Y ESPECIES DETERMINADOS .............................................71
3.6 Distribución de los HMA en las épocas climáticas evaluadas ..........98
3.7 Asociación de los HMA con las coberturas evaluadas .....................101
3.7.1 Desmodium ovalifolium..........................................................................102
3.7.2 Paspalum notatum ...................................................................................103
3.7.3 Brachiaria dictyoneura ...........................................................................103
3.7.4 Arachis pintoi ............................................................................................104
3.7.5 Control químico ........................................................................................105
3.7.6 Control Mecánico .....................................................................................106
3.7.7 Brachiaria brizantha ................................................................................107
3.7.8 Panicum maximum ..................................................................................108
3.8 Distribución general de las especies de HMA en las coberturas ...109
3.9 Índice de biodiversidad de los HMA encontrados ..............................112
6
4. CONCLUSIONES .................................................................................................116
5. RECOMENDACIONES.........................................................................................120
BIBLIOGRAFIA..........................................................................................................121
7
LISTA DE TABLAS
pág.
8
LISTA DE FIGURAS
pág.
9
Figura 18. Número de esporas promedio/100g suelo seco Vs Colonización 66
promedio en 20 cm de raíz en la época seca.
Figura 19. Acaulospora denticulata Sieverding & Toro 71
Figura 30. Glomus fasciculatum (Thaxter) Gerd. & Trappe emend. Wlker & 83
Koske
Figura 31. Glomus geosporum (Nicol. & Gerd.) Walker 84
Figura 35. Glomus occultum Walter, 1982; m Paraglomus occultum, Morton & 88
Redecker, 2001.
Figura 36. Glomus sp1 89
Figura 39. Scutellospora heterogama (Nicol & Gerd.) Walter & Sanders 92
Figura 40. Scutellospora pellucida (Nicol & Schenck) Walter & Sanders 93
Figura 41. Scutellospora savannicola (Herr. & Ferr.) Walter & Sanders 94
Figura 42. Scutellospora sp1 95
Figura 43. Scutellospora sp2 96
10
Figura 44. Scutellospora sp3 97
Figura 45. Distribución porcentual de HMA encontrados en la época húmeda 99
Figura 46. Distribución porcentual de HMA encontrados en la época seca. 100
Figura 47. Comportamiento de las especies asociadas a D. ovalifolium 101
Figura 48. Comportamiento de las especies asociadas a P. notatum 102
Figura 49. Comportamiento de las especies asociadas a B. dictyoneura 103
Figura 50. Comportamiento de las especies asociadas a A. pintoi 104
Figura 51. Comportamiento de las especies asociadas al control químico 105
Figura 52. Comportamiento de las especies asociadas al control mecánico 106
Figura 53. Comportamiento de las especies asociadas a B. brizantha 107
Figura 54. Comportamiento de las especies asociadas a P. maximum 108
Figura 55. Índice de Shannon de los HMA encontrados en cada cobertura. 112
11
LISTA DE ANEXOS
pág.
12
CARACTERIZACIÓN DE HONGOS FORMADORES DE MICORRIZAS
ARBUSCULARES (HMA) NATIVAS, EN SEIS COBERTURAS DE CÍTRICOS EN EL
PIEDEMONTE DEL META
RESUMEN
13
CHARACTERIZATION OF ARBUSCULAR MYCORRHIZAL FUNGI (AM) NATIVE, IN
SIX COVERS OF CITRUS IN THE PIEDEMONTE OF META
ABSTRACT
In the present work was made the characterization of arbuscular mycorrhizal fungi
(AM) native in four gramineous species and two leguminous, used as vegetal covers in
the citruses orchards of the “La Libertad” research center, located in the municipality of
Villavicencio, department of Meta, Colombia. The study was carried out at two different
climatic times (humid - dry) and additionally evaluated the behavior of AM fungi in
parcels with chemical and mechanical control. Was used an experimental design of
complete blocks at random with eight treatments and three repetitions. The sampling
unit was of 24m2, in where 10 sub-samples of 50g of ground and roots to a depth of
20cm, were collected of to conform a sample by repetition.
26 species of AM fungi were identified of those which 8 were common in the two
evaluations, 12 were only reported in the dry time and 6 in the humid time.
Scutellospora heterogama, Acaulospora ascrobiculata and Acaulospora morrowie
represented more of 65% of the population of AM fungi in the two evaluations. The
percentage of colonization oscillated between 47% and 94% and the density of spores
was between 63 and 300 by each 100g of dry ground. The vegetable covers that
displayed greater levels of infection and diversity of AM fungi were Brachiaria
brizantha, Brachiaria dictyoneura and Paspalum notatum. Nevertheless, the
mechanical control showed a smaller impact than chemistry on the population and
infectiveness of AM fungi in all the covers during the evaluated times.
14
INTRODUCCIÓN
En la citricultura del departamento del Meta son pocos los productores que poseen un
flujo de caja por la plantación de cultivos intercalados y la siembra de coberturas de
doble propósito en los primeros años de establecimiento del huerto. Con el fin de
ofrecer alternativas sostenibles a los productores, se han evaluado varios materiales
de gramíneas y leguminosas, probando su adaptación a las condiciones
edafoclimáticas de la región y se han obtenido resultados favorables de la asociación
de algunas coberturas, con los cultivos perennes (Cítricos, Palma de aceite, caucho,
forestales, entre otros).
1
ORDUZ, J.; BAQUERO, J y MONROY, H. 2003. Algunas recomendaciones para el manejo de suelos
en el cultivo de cítricos en los llanos orientales de Colombia. En: Plegable Divulgativo de CORPOICA,
No. 39. (Diciembre de 2003).Villavicencio, Meta. 6p.
2
ORDUZ, J. y MONROY, H. 2003.Sistema de laboreo en franjas alternas para el establecimiento de
cítricos en los llanos orientales. En: Plegable Divulgativo de CORPOICA, No. 35. (Diciembre de
2003).Villavicencio, Meta. 6p.
3
MORIN, C. 1980. Cultivo de cítricos. Editorial IICA. 2ª Edición. 22-23p.
15
cultivable4. Sin embargo, el establecimiento de una especie vegetal como cobertura
viva en las calles del huerto o como cultivo en potreros para forraje, se hace complejo
si no existe cierto rango de adaptación por parte de la especie a determinadas
condiciones ambientales.
Se estima que más del 90% de las especies vegetales conocidas establecen de forma
natural y constante la asociación mutualista con los hongos formadores de micorriza
arbuscular (HMA) 9 , la eficiencia de los HMA en un cultivo se da gracias a la
4
CORPOICA. Segundo Encuentro Nacional de labranza de conservación. Octubre 29 – Septiembre 1.
2003. Villavicencio, Meta. Memorias. 120p
5
ROMAN, C. 1996. Limitaciones y ventajas de los suelos de los llanos orientales para el establecimiento
de frutales. En: Suelos ecuatoriales. 26 (1): 54-61p.
6
CORTEZ, L.A.; MARTINEZ, O.E.; ANAMARÍA, P.; SUÁREZ, G.; VILLANEDA, E.V. 1985.
Zonificación agroecológica de Colombia. Memoria explicativa. IGAC-ICA. 60p.
7
SIEVERDING, E.; SÁNCHEZ, M. y BRAVO, O. 1984. Investigación sobre micorrizas en Colombia.
Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Agropecuarias Palmira. 270p.
8
GUERRERO, E. 1996. Micorrizas. Recurso biológico del suelo. Fondo FEN Colombia. 35p
9
FORERO, L.; UNIGARRO, A. y CHAVES, G. 1999. Evaluación cuantitativa de hongos formadores de
micorriza versículo arbuscular (MVA) en malezas de clima medio. Universidad de Nariño. p.9.
16
dependencia micorrícica del mismo para el máximo crecimiento en un nivel dado de
fertilidad del suelo y a la variabilidad de las micorrizas existentes en el mismo10.
10
HOWELER, R.H.; SIEVERDING, E. y SAIF. S.R. 1987. Mycorrhizal Technology. En: Plant and soil,
100 (1) 1987. p. 249-283.
17
1. REVISIÓN DE LITERATURA
1.1.1 Taxonomía
Morin 12 , indica que las especies del género citrus son las más importantes a nivel
mundial. En la tabla 1, se pueden observar los principales cítricos cultivados en el
mundo.
11
ROVIRA, L y RENGIFO, C. 1987. Los cítricos. Editorial América. 484p.
12
MORIN, Op cit.,15-20p.
18
1.1.3 Origen
Rovira y Rengifo13 , sostienen que la región de origen de los cítricos abarca desde el
sureste de Asia, incluyendo el este de Arabia, el este de Filipinas y el Himalaya hasta
el sur de Indonesia y Australia. Aunque evidencias recientes sugieren que la provincia
de Yunan en el centro sur de China, puede ser un importante centro de origen debido
a la diversidad de especies encontradas.
1.1.4 Morfología
Agusti y Almela14, señalan que los cítricos cultivados presentan un solo tronco, con
dos o tres ramas principales que nacen a una altura de 60-70 cm y cuyo ángulo de
inserción es distinto según la variedad. Estas ramas presentan acanaladuras que
tienen que ver con su relación con las raíces, siendo especialmente notorias en el
limonero. La forma de las ramas verticales es redondeada pero la de las horizontales
aplanada como consecuencia de la actividad diferencial del cambium que origina un
crecimiento hipotrófico. Los tallos muy jóvenes son verdes, blandos y con una sección
triangular, mayor en su base, que con la edad se redondea, endurece y cambia de
color. Las hojas se insertan en el tallo espiralmente con una filotaxis, en general de
3/8. en su axila se sitúan los nudos, estructura cubierta por varios profilos que
engloban las yemas.
Amoros15, sostiene que el sistema radicular de los cítricos es pivotante. Estas pueden
alcanzar hasta 1.5m de profundidad y se distribuyen principalmente en los primeros 80
cm del suelo. De igual forma las raíces secundarias 2alcanzan longitudes de 6 o 7 m
en sentido horizontal.
Román 16 afirma que cuando los cítricos son provenientes de semilla presentan un
período de juvenilidad que se prolonga por 6 ó 7 años. Una de las características de
esta etapa es la profusión de tejido con espinas y la imposibilidad de formar flores.
Para evitar una tardía entrada a producción y proteger a los árboles de enfermedades
13
ROVIRA, Op cit. 29-38p.
14
AGUSTI, M y ALMELA, V. 1991. Aplicación de fitorreguladores en citricultura. AEDOS. 261p.
15
AMOROS, M. 1985. Agrios. Ediciones Milagro Lleida. 23p
16
ROMAN. C. 1993. Cultivos de Cítricos. Memorias Curso regional de frutas tropicales. Villavicencio,
Meta. 100p
19
fungosas y vírales se utiliza el injerto aprovechando la habilidad que presentan los
géneros Citrus Poncirus y Fortunella.
1.1.5 Adaptación
18
Rewter indica que el crecimiento vegetativo de los agrios se detiene con
temperaturas menores de 12.5 ºC y se incrementa progresivamente hasta alcanzar los
30°C. Mientras que las temperaturas extremas que ocasionan daños severos e
irreversibles son 52°C y -2°C. De la misma forma, el autor sostiene que los cítricos
requieren cantidades de agua entre 1000 y 2000 mm / año y humedades relativas del
70% al 90% para su adecuado crecimiento y desarrollo.
1.1.6 Suelos
Rewter19, sostiene que los cítricos son cultivados en una amplia variedad de suelos,
sin embargo, son plantas muy exigentes en cuanto a su aireación, por lo tanto suelos
arcillosos con problemas de encharcamiento y de niveles freáticos inferiores a los 2 m
de la superficie no son los adecuados para el óptimo crecimiento y desarrollo del
cultivo. De la misma forma, el autor indica que el rango de pH óptimo para el cultivo
oscila entre 5 y 7.
Agusti y Almela 20 mencionan que los contenidos inorgánicos de las frutas cítricas
están directamente influenciados por la fertilización, generalmente presentan altos
contenidos de potasio, calcio y magnesio como se aprecia en la tabla 2.
17
AMOROS, Op cit., 26p.
18
REWTER, W. 1980. Climatic Effects and Quality of Citrus in the Tropics. En: Society Horticulture
Science. Vol. 24: 15-28p.
19
REWTER, W. 1988. Respuesta de los cítricos a los factores de clima. Fruticultura Tropical. Federación
Nacional de Cafeteros de Colombia. 11-13p.
20
AGUSTI, Op. cit. 192p.
20
Adicionalmente, posee altos contenidos de ácido cítrico, vitamina A, ácido ascórbico
(vitamina C) y carbohidratos.
mg / 100 g
Fruto
Na K Ca Mg Fe Cu P S Cl
Pomelo 1.4 234 17.1 10.4 0.26 0.06 15.6 5.1 0.6
Limón 6.0 163 10.7 11.6 0.35 0.26 20.7 12.3 5.1
Naranja 2.9 197 41.3 12.9 0.33 0.07 23.7 9.0 3.2
Mandarina 2.2 155 41.5 11.2 0.27 0.09 16.7 10.3 2.4
Lima 2.0 102 33 -- 0.6 -- 18 -- --
El uso de coberturas vivas en las calles del cultivo trae consigo consecuencias
21
positivas para el suelo. Como menciona Sánchez , algunas ventajas de la
implementación de ésta práctica son: aumento de la capacidad de la retención de
agua en el suelo y disminución de sus pérdidas por evaporación, regulación de las
fluctuaciones de temperatura en el suelo, aporte de materia orgánica y reducción de
las pérdidas del suelo, entre otras.
21
SANCHEZ, V. 2001. Evaluación de algunas especies arvenses como coberturas vivas en condiciones
de la sabana de Bogotá. Tesis de grado. Facultad de Agronomía. Universidad Nacional de Colombia. 23p.
22
Corporación Autónoma Regional de Cundinamarca. 2000. Cultivar sin Arar. Labranza mínima y
siembra directa en los andes. CAR-GTZ.146p.
21
1.2.3 Pasto Maquenque: Desmodium heterocarpon (L.) DC. subsp. ovalifolium
(Prain.) Ohashi CIAT 13651
1.2.3.1 Origen
Figura 1. Desmodium heterocarpon (L.) DC. subsp. ovalifolium (Prain.) Ohashi CIAT
13651
1.2.3.2 Morfología
23
PEREZ, R., et al. 2002. Maquenque. Desmodium heterocarpon (L.) DC. subsp. ovalifolium (Prain.)
Ohashi CIAT 13651. CORPOICA- MIN. AGRICULTURA – CIAT. p. 30.
22
es más largo que los laterales, glabros, brillantes, ovalados y acuminados. Las flores
se producen en racimos de color púrpura o rosado intenso que se vuelven azulados
al terminar la apertura. Las vainas son pubescentes y el fruto es un lomento
dehiscente que consta de 2 a 8 artejos cuadrados, de 2.5 a 3 mm de largo, con una
semilla cada uno.
• Tolerancia a la sombra
• Se desarrolla en regiones de precipitaciones superiores a los 2000 mm /año y
de 0 a 1300 m.s.n.m
• No tolera periodos de sequía superiores a los cuatro meses
• Se adapta a suelos con pH de 4 a 7
• Tolera inundaciones de corta duración
Escobar24 et al., afirman que una vez establecido el pasto Maquenque tiene una alta
capacidad de competencia contra la invasión de malezas y por su hábito de
crecimiento, favorece la conservación del suelo, presenta una alta celeridad de
cobertura y es persistente. En los llanos orientales se ha producido 0.8 Ton / ha y 0.9
Ton /ha de materia seca en época de verano e invierno a las 12 semanas de edad
respectivamente.
1.2.4.1 Origen
24
ESCOBAR .C., LOTERO. J., SOTO. L. 1994.Unidades de aprendizaje para la capacitación en
tecnología de producción de pastos. Agroecosistemas en suelos Ácidos de Colombia. Especies forrajeras
tropicales de interés para pasturas en suelos ácidos de Colombia. CIAT. Tomo 1. 25p.
23
1.2.4.2 Morfología
25
Escobar et al., describen a la grama trenza como una planta herbácea
monocotiledónea, perenne, vigorosa, muy agresiva, postrada, posee un sistema
radicular denso y vigoroso; presenta rizomas cortos y gruesos, puede llegar a alcanzar
una altura de 50 cm, sus hojas están agrupadas hacia la base, son levemente
pubescentes, linear-lanceoladas, de 5 a 25 cm de longitud y de 8 mm de ancho, con
racimos subconjugados, desde 2 hasta 7 cm; presenta espiguillas casi redondeadas,
planoconvexas, faltando una gluma y la primera lema es igual a la segunda gluma. El
fruto es una cariópside.
Escobar26 et al., afirman que crece desde el nivel del mar hasta 3.000 msnm en zonas
con temperaturas superiores a 10ºC, en suelos desde húmedos hasta secos y ácidos
o ligeramente alcalinos; pero su mejor desarrollo se observa en suelos neutros y
livianos.
Desarrolla buena cobertura en el suelo, pertenece al grupo de los pastos con sistema
radicular rizoma-herbáceo, fino, o sea, que además de desarrollar pseudo tallos
25
Ibid. p.34.
26
Ibid. p.37
24
paralelos a la superficie del suelo, a partir de estos forma raíces adventicias y tallos
aéreos que cubren totalmente el suelo.
Puede establecerse por semilla botánica o por material vegetativo; en éste último caso
pueden utilizarse rizomas o estolones.
1.2.5 Pasto Llanero: Brachiaria dictyoneura (Figari & De Not.) Staff cv. Pasto
Llanero
1.2.5.1 Origen
En una revisión realizada por Escobar 27 et al., se indica que el pasto llanero es
originario de África tropical y fue introducido a Colombia en 1978, se adapta bien a las
condiciones físico-químicas de los suelos del departamento del Meta (figura 3).
Figura 3. Brachiaria dictyoneura (Figari & De Not.) Staff cv. Pasto Llanero
1.2.5.2 Morfología
27
Ibid. p. 43
25
con un borde denticulado. La inflorescencia es una panícula con tres o cuatro racimos
de 4 a 6 cm de largo, cada uno con 10 a 22 espiguillas alternas, sobre un raquis de
color púrpura y verde.
Esta especie se caracteriza por generar en el suelo una cobertura inicial baja, pero su
crecimiento garantiza una protección eficiente del suelo. En cuanto a acumulación de
materia seca, en el Piedemonte llanero, Escobar28 et al., reportan valores de 0.94 y
2.05 Ton / ha en época de verano e invierno respectivamente, con una frecuencia de
corte de 12 semanas. La producción anual de materia seca oscila entre 7 y 10.8 Ton /
ha en el Piedemonte llanero.
1.2.6 Maní forrajero: Arachis pintoi Krapovickas y Gregory. Nom. Nud. cv. Maní
forrajero Perenne
1.2.6.1 Origen
Es originario de América del sur, en la región comprendida entre el este de los Andes,
el sur de las amazonas y el norte de la Plata. En 1978 se introdujo en los Llanos
orientales desde Australia (figura 4).
28
Ibid. p 53.
26
1.2.6.2 Morfología
Figura 4. Arachis pintoi Krapovickas y Gregory. Nom. Nud. cv. Maní forrajero Perenne
27
1.2.6.3 Características Agronómicas
Las características más sobresalientes del maní forrajero según Escobar29 et al., son
las siguientes:
En el Piedemonte llanero el maní forrajero ha llegado a producir entre 3.8 y 5.5 Ton
/ha de materia seca por año, alcanzando porcentajes de cobertura de hasta 100 % en
palma africana, disminuyendo los costos de manejo. En Cenicafé (Chinchiná, Caldas),
se encontró durante 4 meses de alta precipitación una pérdida de 1.4 Ton /ha en suelo
cubierto con A. pintoi, mientras que en el suelo descubierto se perdieron alrededor de
3 Ton / ha de suelo.
1.2.7.1 Origen
29
Ibid. p. 21.
30
LASCANO, C.; PEREZ, R.; PLAZAS, C.; MEDRANO, J.; PEREZ, O. y ARGEL, P.J. 2002. Pasto
Toledo (Brachiaria brizantha CIAT 26110) Gramínea de crecimiento vigoroso para intensificar la
ganadería colombiana. CORPOICA, MINISTERIO DE AGRICULTURA, CIAT. Villavicencio,
noviembre de 2002. p.21.
28
1.2.7.2 Morfología
Es una planta que puede alcanzar hasta 1.6m de altura, produce tallos vigorosos
capaces de enraizar a partir de los nudos cuando entran en estrecho contacto con el
suelo. Las hojas son lanceoladas con poca pubescencia y alcanzan hasta 60cm de
longitud y 2.5cm de ancho. La inflorescencia es una panícula de 40 a 50cm de
longitud, generalmente con cuatro racimos de 8 a 12 cm y una sola hilera de
espiguillas sobre ellos. Cada tallo produce una o más inflorescencias provenientes de
nudos diferentes, aunque la de mayor tamaño es la terminal.
29
• Mejor palatabilidad que otros Brachiaria.
Los promedios de producción de materia seca del B. brizantha según Escobar 31 et al.,
varían entre 25.2 y 33.2 Ton / ha por año en cortes durante 8 semanas durante época
seca y lluviosa. Por su hábito de crecimiento en forma de macollas, este cultivar se
asocia bien con leguminosas forrajeras de hábito estolonífero como A. pintoi y D,
heterocarpon subsp. Ovalifolium (cv Maquenque), brindando una óptima cobertura y
una mejor calidad forrajera.
1.2.8.1 Origen
Este género contiene más de 500 especies anuales y perennes. La mayoría son de
África tropical. La especie más importante es P. maximum , se introdujo en América en
1974 (figura 6).
31
ESCOBAR, Op. Cit. p. 57.
30
1.2.8.2 Morfología
Escobar32 et al., afirman que las plantas del pasto guinea son perennes, cespitosas,
pueden alcanzar hasta 3 m de altura y 1 m de diámetro de la macolla. Los tallos son
erectos y ascendentes sin vellosidades, las hojas alcanzan entre 25 y 80 cm de largo y
de 0.5 a 3.5 cm de ancho, son planas y erectas, glabras, ligeramente aserradas, con
pequeña lígula membranosa pilosa y sin aurículas. Las raíces son fibrosas, largas y
nudosas, forman pequeños bulbos y pueden medir hasta 4 metros, ocasionalmente
tienen rizomas cortos. La inflorescencia es una panoja abierta de 12 a 40 cm de
longitud con espiguillas bifloras. Se considera como semilla la espiguilla que contiene
la cariópside envuelta por las glumas, la lema y la palea de ambas flores. Las
cariópsides desnudas no germinan.
El pasto guinea forma macollas semi-erectas, dejando espacios entre las plantas por
lo que su cobertura es relativamente baja. En el Piedemonte llanero Escobar33 et al.,
han encontrado valores de acumulación de materia seca a las 12 semanas de corte de
alrededor de 1.07 Ton /ha en las épocas de lluvia y escasa precipitación. Al igual los
autores señalan que Panicum maximum se asocia bien con Centrosema pubenscens y
con Stylosanthes guianensis, Neotonia wightii, Macroptilium atropurpureum,
Desmodium uncinatum, D. intortum y Centrosema macrocarpum.
32
Ibid. p. 40.
33
Ibid. p.42.
31
1.3 MICORRIZAS
El mutualismo supone una relación benéfica para los dos organismos implicados, es
así como el hongo y la planta se ven favorecidos por la asociación. El hongo coloniza
la raíz de la planta proporcionándole nutrientes minerales y agua que extrae del suelo
por medio de su red externa de hifas, mientras que la planta suministra al hongo
sustratos energéticos y carbohidratos que elabora a través de la fotosíntesis.
36
Guerrero et al., argumentan que las plantas exhiben diferentes grados de
dependencia frente a la micorriza. Algunas son micotróficas obligadas y por tanto, ven
severamente afectado su desarrollo si no cuentan con esta asociación; otras son
micotróficas facultativas, al presentar un crecimiento y desarrollo normal sin micorrizas
bajo determinadas condiciones edáficas. No obstante, existen plantas que no forman
micorrizas.
34
ODUM, E.P. 1972. Ecologia. 3ed. Interamericana. México. p257.
35
TRAPPE, J.M. and SCHENCK, N.C. 1982. Taxonomy of the Fungi Forming Endomycorrhizae. A
Vesicular-Arbuscular Micorrhizal Fungi (Endogonales). En: Method and Principies of Micorrhizal
Research. Schenck, N.C. ed. The American Phytopathological Society. 22-31p.
36
GUERRERO, Op. cit.,
37
FORERO, Op. cit p.10.
38
AZCÓN-AGUILAR, C. & BAREA, J.M. 1988. Micorrizas, En: Biología vegetal. Libros de
Investigación y Ciencia. Prensa científica, España. P. 83-93. citado por FORERO, et al. 1999. Evaluación
cuantitativa de hongos formadores de micorriza versículo arbuscular (MVA) en malezas de clima medio.
Universidad de Nariño. p.10.
32
de las Chenopodiaceae, Polygonaceae, Brassicaceae, Cariophyllaceae, Cyperaceae y
Juncaceae, así como las plantas carnívoras, parásitas y pioneras de suelos
degradados no presentan micorrizas.
Sánchez 39 , citando a Azcón- Aguilar y Barea, plantea que cerca del 90% de las
leguminosas se han registrado como plantas micorrícicas, Mientras que en un amplio
número de géneros y especies de las Amaranthaceae, Commelinaceae,
Lecythidaceae, Portulacaceae, Proteaceae, Sapotaceae y Zygophyllaceae no se ha
observado la asociación natural con el hongo.
39
SANCHEZ DE PRAGUER, M. 1997. Endomicorrizas y agroecosistemas. En: XVIII Congreso de
fitopatología y ciencias afines. ASCOLFI. Pineda, L.B. ed. CIAT, Palmira, Colombia. p 81-92.
40
OLIVARES, J. & BAREA, J. 1991. Fijación y movilización biológica de nutrientes: Fijación del N y
micorrizas. Consejo Superior de investigaciones Científicas. Madrid. Vol. 2 Capítulo 17-18. citado por
PEROZA, V. 2003. Caracterización de hongos formadores de micorrizas arbusculares (HMA) y
micorrizas vesículo arbusculares (HMVA) nativas, asociadas con el pasto ángleton ( Dichantthium
aristatum, Benth) en el municipio de Tolú departamento de Sucre. Tesis Maestría. Facultad de
Agronomía. Universidad Nacional de Colombia. Maestría en ciencias Agrarias. p 22.
41
AZCON, Op. cit. p. 15.
42
LE TACON, F. 1985. Les mycorhizes: une cooperation entre plantes et champignons. La Recherche,
166 : 624-632p.
33
formas derivadas. Las formas derivadas de la EM, según Marks 43 , incluyen tipos
menores de micorriza, como la ectendomicorriza, las micorrizas ericoide, arbutroide,
monotropoide y orquidioide.
1.3.1.1 Ectomicorrizas
43
MARKS, G.C.1991. Casual morphology and evolution of micorrizas. Agriculture, Ecosystems and
Environmental. 35: 89-104.
44
TRAPPE, J.M. 1987. Phylogenetic and ecologic aspects of mycotrophy in the angiosperms from an
evolutionary standpoint. En: Ecophysiology of VA mycorrhizal plants, ed. Por G.R. Safir, CRC Press,
Florida. p.5-26
45
ALLEN, M.F. 1992. Mycorrhizal functioning: An integrative plant-fungal process. Chapman and Hall,
New York. 10-13p.
34
Figura 7. Esquema de Raíz colonizada por Ectomicorrizas. Tomado de
CDEEA46.
1.3.1.2 Endomicorrizas
46
Centro de Estudios Ecológicos Argentino. Disponible en: < http://www.cddea.com>
47
HARLEY, J. y SMITH. 1983. Mycorrhizal Simbiosis. Academic Press, Londres. 483 p.
48
Centro de Estudios Ecológicos Argentino. Disponible en: < http://www.cddea.com>
35
1.4 Micorriza Arbuscular (MA)
1.5.1 Pre-infección
Esta etapa, según Smith y Bowen55, consiste en la activación de los propágulos del
hongo que persisten en el suelo (esporas o micelio), la estimulación de los micelios
formados cuando alcanzan la rizósfera de una planta susceptible, la unión de la hifa
infectiva a la superficie de la raíz y la formación de los primeros puntos de penetración
del hongo.
49
GUERRERO, Op. cit. p. 31.
50
Ibid. p. 35.
51
BOWEN, G.D. 1981. The epidemiology of propagule numbers. Infection and response. En:
FAO/OEA Consultant meeting on the use of isotopes in studes on nutrient availability to food crop by
endomycorrhizae. 22-23p
52
HAYMAN, D.S. 1983. The physiology of vesicular-arbuscular endomycorrhizal simbiosis. Canadian
Journal of Botany. 61:944-963p.
53
BAREA and AZCÓN AGUILAR, 1983. Mycorrhizas and their significance in nodulating nitrogen-
fising plants. En: Advances in Agronomy. 36. 1-54p.
54
SIEVERDING, 1984. Op. cit., 6-10p.
55
SMITH, S.E. AND BOWEN, G.D. 1979. Soil temperature, mycorrhizal infection and nodulation of
Medicago truncatula and Trifolium subterraneum. Soil Biology and Biochemistry, 11 : 469-473p.
36
La colonización se produce más rápido a partir de raíces previamente micorrizadas
que a partir de esporas. De acuerdo a lo que plantea Hall56 esto puede ser debido a
la difícil germinación de éstas y al poco vigor del micelio que forman. La viabilidad del
inóculo Rives57 et al., depende de la edad y capacidad metabólica del fragmento de
raíz y de otro tipo de estructuras fúngicas que posean estos fragmentos. Es así como
58
Biermann y Linderman , han demostrado la importancia de las vesículas
extraradicales presentes en un fragmento de raíz para determinar la infectividad del
inóculo.
1.5.2 Penetración
Carling y Brown60 sostienen que este periodo se inicia con la formación de un punto de
entrada que se caracteriza por el desarrollo de un abultamiento o apresorio en el punto
de contacto sobre la superficie de la raíz. Cada espora genera un solo punto de
contacto, mientras que en un segmento de raíz se puede originar más de uno.
56
HALL, I.R. 1976. Response of Coprosma robusta to different forms of endomycorrhizal inoculum.
Transactions of the British Mycological Society, 67 (3):409-411p.
57
RIVES, C. S.; BAJWA, M.I.; LIBERTA, A.E. and MILLER, R.M. 1980. Effects of soil storage during
surface mining of the viability of VA mycorrhiza. Soil Science, 129 (4) : 253-257p.
58
BIERMANN, M. & LINDERMAN, R.G., 1983. New Phytol. 95, 97-105p.
59
TOMMERUP, I.C. 1984. Effect of soil water potential on spore germination by vesicular-arbuscular
mycorrhizal fungi. Trans. Br. Mycol. Soc. 83: 193-202p.
60
CARLING, D.E. & BROWN. M.C. 1982. Anatomy and physiology of vesicular-arbuscular and
nonmycorrhizae roots. Phytopath. 72(8): 1104-1108p.
61
BAREA, J.M.; AZCON, C.; OCAMPO, J.A. y AZCON R. 1991. Morfología, anatomía y citología de
las micorrizas vesiculo arbusculares. En: Fijación y movilización biológica de nutrientes. Vol II. Consejo
superior de investigaciones científicas, Madrid, España. p. 149-173.
62
HAYMAN, Op cit. 952 p.
37
funcional para la penetración. Ésta ocurre generalmente en el área de diferenciación y
elongación de las raíces, según Carling y Brown 63 , o en las raíces secundarias y
terciarias; pero no en raíces pigmentadas o con crecimiento secundario.
Los arbúsculos son estructuras del tipo de los haustorios que se originan a partir de la
ramificación dicotómica repetida de una hifa al interior de una célula vegetal (2-3 días
de iniciada la colonización). Carling y Brown67, indican que las finas ramificaciones de
los arbúsculos realmente no entran en contacto con el protoplasma de las células, sino
que penetran como dedos en un guante por una tortuosa trama de invaginaciones de
la membrana celular, en la parte más cercana al cilindro vascular. Así se produce una
gran superficie de contacto a través de la cual se lleva a cabo el intercambio de
nutrientes minerales y carbohidratos entre el hongo y la planta. Los arbúsculos son
estructuras de vida corta, lo cual depende de ciertas condiciones ambientales y de la
simbiosis como tal. Mosee 68 afirma que se presentan de 1 a 3 semanas y Cox 69
sostiene que duran tan sólo 4 días.
63
CARLING & BROWN, 1982. Op. cit. 1105p.
64
GERDEMANN, J.W. 1975. Vesicular-arbuscular mycorrhizas. In: The development and function of
roots. Third Cabot symposium. S.G. Torrey and D.T. Clarkson (Eds). Academic Press, London. p. 575-
591.
65
HOLLEY, J.D. and PETERSON, R.L. 1979. Development of vesicular arbuscular mycorrhiza in bean
roots. Can J. Bot. 57 (19): 1960-1978.
66
FORERO, 1999. Op cit. p.12.
67
CARLING & BROWN, 1982. Op. cit. p.1106.
68
MOSSE, B. 1982. Vesicular- arbuscular mycorrhiza research for tropical agriculture. Hawai institute
of tropical agriculture and human resources. University of Hawai. Research Bull p82.
38
Después de la formación de arbúsculos, el micelio empieza a acumular reservas de
carbono en forma de lípidos, lo cual se manifiesta mediante la aparición de
ensanchamientos terminales de las hifas denominados vesículas. La aparición de
arbúsculos y vesículas según Morton70, está condicionada a diversos factores de la
planta y del medio en que ésta se desarrolla, no obstante existen géneros de HMA que
no forman este tipo de estructuras.
Semanas después del inicio de la colonización el hongo puede esporular, sin embargo
este fenómeno está condicionado al contenido de humedad del suelo. Forero73 et al.,
han reportado que el estrés hídrico aumenta la generación de estructuras de
resistencia. Una vez cumplido el proceso de esporulación de HMA, se inicia
nuevamente la colonización con la pre-infección.
69
COX, G.C. and TINKER, P.B. 1976. Translocation and transfer of nutrients in vesicular-arbuscular
mycorrhiza. En: The arbuscule and phosphourus transfer: A quantitative ultrastructural study. New
Phytol. 77 (2): 371-378p.
70
MORTON, J.B. 1990. Evolutionary relationships among arbuscular micorrhizal fungi in the
Endogonaceae. Mycologia, 82: 192-207p.
71
NEWMAN, E.I.; DEVOY, C.L.; EASEN, N.J. and FOWLES, K.J.1994. Plant species that can be
linkey dy VA micorrhizal fungi. New Phytol., 126 : 691-693p.
72
POWEL, C.L.1979. Spread of mycorrhizal fungi throught soil. New Zealand Journal of Agricultural
Research, 22: 335-339p.
73
FORERO., 1999. Op. cit. p18.
39
Moreira y Siqueira74, sugieren que el establecimiento de las micorrizas resulta de una
secuencia de eventos coordinados por el hongo, la planta y sus interacciones y
culmina con una relación simbiótica caracterizada por la perfecta integración
morfológica, bioquímica y funcional como se aprecia en la figura 9.
Hongo Planta
Germinación
Crecimiento micelial
Reconocimiento
Adherencia a la raíz
Formación de apresorio
Penetración de raíz
Colonización del córtex
Producción Respuesta en
de Propágulos crecimiento
Establecimiento en la raíz
Crecimiento y diferenciación
de micelio (Arbúsculos)
Relación simbiótica
Integración morfológica,
fisiológica, bioquímica y
Biotrofismo funcional Micotrofismo
(Fotoasimilados) (Nutrientes)
74
MOREIRA, M.S. y SIQUEIRA, J.O. 2002. Microbiologia e Bioquimica do solo. Editora UFLN.
Universidade Federal de Lavras. 625p.
75
SIQUEIRA, J.O; MOREIRA, F; LOPES, A; GUILHERME, L; FAQUIN, V; FURTINI, A y
CARVALHO, J. 1999. Inter-relaçao , Fertilidade, Biología do solo e nutriçao de plantas. Sociedade
Brasilera de ciência do solo. Universidade Federal de Lavras. Dpto de ciência do solo. 818p.
40
Tabla 3. Factores que influyen en la formación y ocurrencia de los HMA.
Componente Principales factores
Suelo Disponibilidad de nutrientes, pH, elementos tóxicos, salinidad,
textura, estructura, agregación, densidad, humedad y organismos.
Planta Especies, variedades, cobertura vegetal, nutrición, edad, tasa de
crecimiento, alelopatía, sistema radicular, exudaciones,
senescencia.
Ambiente Intensidad luminosa, temperatura, precipitación, polución
atmosférica
Manejo Tipo de cultivo, erosión, riego, fertilización, utilización de biocidas.
Por otra parte Sieverding76, agrega que existen otros factores que afectan la simbiosis
entre la micorriza y la planta además de las interacciones que surgen entre el complejo
hongo-planta-suelo. Estos factores se describen brevemente a continuación:
Planta
Los HMA favorecen a la planta si:
Hongo
Los HMA favorecen a la planta si:
76
SIEVERDING, Op cit. p 11.
41
• Compiten con microorganismos antagónicos y forman sinergias con otros
simbiontes.
• Toleran cambios de condiciones físico-químicas del suelo.
Sylvia 80 estima que cerca del 20% del carbono total asimilado por las plantas es
transferido al HMA. Sin embargo, las pérdidas se compensan rápidamente después de
la colonización de la micorriza, en donde la planta absorbe nutrientes del suelo. No
obstante, en muy pocas ocasiones se ha atribuido la supresión del crecimiento de las
plantas a los HMA; esto puede ocurrir por condiciones de baja luminosidad (limitante
de fotosíntesis) o altos contenidos de fósforo en el suelo.
77
FORERO, 1999. Op. cit., p. 23
78
DEXHEIMER, J.M.; GIANINAZI, P.V. and GIANINAZI, S. 1982.Enzymatic studies on the
metabolism of vesicular-arbuscular mycorrhizas. IV. Ultracytoenzymological evidence (ATPASE) for
active transfer processes in the host-arbuscule interface. New Phytol. 90 (1): 37-43p.
79
HAMPP. R y SCHAEFFER. 1999. Mycorrhiza - Carbohydrate and Energy Metabolism. En: VARMA,
A. y HOCK, B. 1999. Mycorrhiza, 2nd Ed. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 273-293p.
80
SYLVIA, D.M. 1990. Distribution, structure, and function of external hyphae of vesicular-arbuscular
mycorrhizal fungi.. En: J.E. Box and L.H. Hammond (ed.) Rhizosphere Dynamics. Westview Press,
Boulder, CO. 144-167p.
42
González81 et al., mencionan que las plantas micorrizadas presentan mayores niveles
de azúcares reductores y bajas concentraciones de almidón en comparación con las
no micorrizadas debido posiblemente a la hidrólisis en las células ocupadas por el
hongo.
Berkelaar85, señala que hasta un 80% del fósforo encontrado en brotes de plantas ha
sido sustraído del suelo por la presencia de micorrizas. Las asociaciones planta-
micorriza son menores cuando los suelos son particularmente salinos y tienen una
fertilidad extremadamente alta o baja. En el proceso de transporte de fosfato desde la
solución del suelo a la planta se distinguen tres fases de actuación de las HMA de
acuerdo a lo planteado por Dexheimer et al. 1982, citado por Forero86 et al.: captación
de fosfato por el micelio externo, translocación del fosfato desde el micelio externo al
micelio interno y transferencia de fosfato desde el hongo a las células de la planta
hospedera.
81
GONZALEZ, C; FERREA, R. y PEREZ, M. 1998. Biotecnología de la Micorriza Arbuscular en
Fruticultura. Universidad Autónoma de Tlaxcala. Colegio de Postgraduados. 131p.
82
COOPER, K.M. 1984. Physiology of VA mycorrhizal associations. En: VA Mycorrhiza. Ed. Powell &
Bagyaraj, CRC Press, Florida. 155-203p.
83
BAREA, Op. cit. p.151.
84
SIEVERDING, E. 1991. Vesicular-Arbuscular Mycorrhiza Management in Tropical Agrosystems.
GTZ, Eschborn, Germany. 10-12p.
85
BERKELAAR, E. 2001. Efecto del aluminio en suelos ácidos sobre el crecimiento de las plantas. EDN.
Julio 2001. Echonotas de desarrollo. 71: 3-4p.
86
FORERO, Op cit., p. 24-25
43
En algunas micorrizas, el micelio extramatrical produce enzimas hidrolíticas como
proteasas y fosfatasas que tienen un papel importante en la mineralización de la
materia orgánica y en la disponibilidad de nutrientes. De la misma forma Sylvia 87
plantea que el micelio externo puede contribuir a la agregación de partículas del suelo.
Existen otros efectos producidos por la micorriza arbuscular entre los cuales
Gerdemann88 destaca: aumento de la resistencia de la planta al estrés hídrico y a la
salinidad, aumento de la resistencia y/o tolerancia a determinados patógenos del
suelo, incremento de la supervivencia al transplante e incremento de la fijación del
nitrógeno en leguminosas.
Entre los microorganismos benéficos se pueden citar las bacterias promotoras del
crecimiento vegetal (PGPR), las bacterias fijadoras de nitrógeno (libres o simbiontes),
los actynomicetes y algunos hongos saprófitos que actúan como antagonistas de
patógenos del suelo y que pueden ser empleados para el control biológico. En muchos
casos las interacciones establecidas son positivas y se puede apreciar un efecto de
sinergismo con el cual la interacción del HMA y del otro microorganismo produce
incrementos de crecimiento y protección en la planta. De la misma forma Saif90, afirma
que en algunas especies vegetales como la habichuela (P.vulgaris), la interacción
Rhizobium sp - HMA es benéfica puesto que aumenta el crecimiento, la reproducción,
el número y peso de nódulos y la proteína en condiciones de invernadero.
Muchos autores han propuesto una serie de mecanismos a través de los cuales las
micorrizas pueden reducir la incidencia y severidad de enfermedades de la raíz, es así
87
SYLVIA, Op cit. p.148.
88
GERDEMANN, Op. cit. p.583.
89
GARBAYE, J. 1994. Helper bacteria: A new dimension to the mycorrhizal symbiosis. New Phytol.
28:197-210p.
90
SAIF, S.R. 1984. Interacción de Rhizobium-micorrizas VA en leguminosas tropicales. En:
Investigaciones sobre micorrizas en Colombia. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de ciencias
agropecuarias Palmira.1984. 15-43p.
44
como Azcón-Aguilar y Barea 91 enumeran los siguientes: (i) desarrollo de barreras
mecánicas como el manto formado por EM, (ii) Producción de compuestos antibióticos
que inhiben el patógeno, (iii) competencia por nutrientes con el patógeno, (iv) la
inducción de mecanismos de defensa en la planta y (v) cambios en la nutrición de la
planta. En este último aspecto los autores recalcan que un estado nutricional
adecuado de la planta, puede modificar sus exudados lo que altera las poblaciones de
microorganismos.
1.8 TAXONOMÍA
Según Moreira y Siqueira94, los hongos que forman MA son actualmente clasificados
en el orden Glomales (Morton & Redecker, 2001), el cual presenta dos subordenes.
Glomineae se caracteriza por la presencia de vesículas en la raíz, la formación de
clamidosporas y abarca cuatro familias y cinco géneros; Gigasporineae caracterizado
por la formación de vesículas, presencia de células auxiliares, formación de
zygosporas y contiene una familia con dos géneros, como se aprecia en la figura 10.
91
AZCON, Op cit.p.85.
92
GUERRERO, Op. cit. p.25.
93
SCHENCK, N.C. & PÉREZ, Y. 1991. Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi. Plant
Pathology Department. Institute of Food and Agricultural Science. University of florida. 3rd Edition.
p.286
94
MOREIRA, Op cit. p. 484-489.
45
Figura 10. Esquema de la clasificación actual de las micorrizas elaborado por S.
Sturmer con base en informaciones de INVAM95.
95
International Culture Colection of Arbuscular & Vesicular-arbuscular Mycorrhizal Fungi. Disponible
en <http://invam.caf.wvu.edu>
96
MOREIRA, Op cit., p. 485.
46
1.9 ANTECEDENTES CIENTÍFICOS Y TECNOLOGICOS DE HMA
97
LÓPEZ, E., SALAZAR, O. 1999.Efecto de la inoculación de tres cepas de MVA sobre el crecimiento y
desarrollo de Mandarina Cleopatra en la etapa de vivero. Tesis Universidad de los llanos. Facultad de
Ciencias agropecuarias y recursos naturales. Villavicencio. 32-42p.
98
RODRIGUEZ, T.; TORRES, H. y VARGAS, H. 1988. Efecto de tres cepas de endomicorrizas sobre la
mandarina Cleopatra Citrus reshni Hart ex Tana, en cuatro suelos, Facultad de Ciencias Universidad del
Valle, Cali, Colombia. 132 p.
99
RODRIGUEZ, D. y PINZÓN, C. 1996. Caracterización de micorrizas vesiculo arbusculares nativas en
Mango, Naranja y Mandarina. En una región del municipio de la mesa-Cundinamarca. Tesis Universidad
Nacional de Bogotá. 35-64p.
100
GONZALEZ, Op cit., p. 41.
101
HOWELER, R.H. et al., 1987. Op cit. 251p.
47
102
Howeler et al., probaron en suelos esterilizados de los llanos orientales
colombianos, 13 aislamientos de HMA en cuatro leguminosas y cuatro gramíneas.
Encontrando que Entrophospora colombiana fue el hongo micorrícico más efectivo, ya
que incrementó el peso seco en cinco de las ocho especies evaluadas. Así mismo
Glomus manihotis, Acaulospora longula y A caulospora scrobiculata, fueron eficientes
en las especies restantes.
102
HOWELER, R.H.. et al., 1987. Op cit. 254 p.
103
PEROZA, V. 2003. Op cit. p. 98-100.
104
FORERO, L. 1999, et al., Op cit., 42p
105
HOWELER, et al., 1987. Op cit. 261 p.
106
Ibid. 259p.
48
Algunas prácticas agronómicas también pueden afectar el desarrollo de HMA. Miller107,
et al., encontraron que la perturbación del suelo afecta de manera directa la
colonización del HMA en maíz y en trigo, además de reducir la absorción de fósforo.
Gonzalez 110 et al., señala que en estudios más recientes se evidencian efectos
benéficos de los HMA en el mejoramiento de la adaptación de plantas
micropropagadas y en la reducción de la mortalidad de plantas ornamentales y frutales
al crecer en sustratos con bajos contenidos de fósforo y buena aireación. Esta
simbiosis ha reflejado un incremento del peso seco de hojas y raíces y una floración
más precoz.
107
MILLER, M.H.; MCGONIGLE, T.P. y ADDY, H.D. 1995. Functional ecology of vesicular
arbuscular mycorrhizas as influenced by phosphate fertilization and tillage in an agricultural ecosystem.
Crit. Rev. Biotech. 15:241-255p.
108
THOMPSON, J.P. 1987. Decline of vesicular-arbuscular mycorrhizae in long fallow disorder of field
crops and its expression in phosphorus deficiency of sunflower. Aust. J. Agric. Res. 38:847-867p.
109
SALAMANCA, C.R. 2003. Validación de la producción masiva de micorrizas como alternativa
agroambiental para los pequeños productores del municipio de Restrepo. CORPOICA-PRONATTA.
Informe final. 46p.
110
GONZALEZ, Op cit. p.37.
49
2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 LOCALIZACIÓN
Los suelos del C.I. La Libertad pertenecen a una terraza alta y poseen alto contenido
de arcillas; la densidad aparente varía entre 1.2 y 1.7 g /cm3, el pH es ácido o
ligeramente ácido (4.5-5.0), la saturación de bases es baja, al igual que la cantidad de
fósforo aprovechable. La capacidad de intercambio catiónico es media y la saturación
de aluminio puede ser alta o media. Guerrero y Cortes, 1976, citados por Sánchez y
111
Owen clasifican taxonómicamente estos suelos como Tropeptic Haplortox
111
SANCHEZ, S. y OWEN, B. E.J. 1979. Fuentes de fósforo en un oxisol de los llanos orientales de
Colombia. Revista ICA. Bogotá, Colombia. 14 (3): 155-162
50
(Actualmente clasificados como Tropeptic haplustox) los cuales se caracterizan por ser
suelos finos, caoliníticos e isohipertérmicos.
El Muestreo se realizó en un huerto experimental del C.I. La Libertad, que hace parte
de un ensayo en donde se evalúan cuatro especies gramíneas, dos especies
leguminosas y dos testigos (control químico y mecánico) como coberturas en las calles
del cultivo de naranja Valencia injertada sobre el patrón Cleopatra. Este ensayo fue
establecido en julio de 2002, con un diseño de bloques completamente al azar y
consta de 8 tratamientos y tres repeticiones por tratamiento, como se puede apreciar
en la tabla 5. Es necesario resaltar que para el establecimiento del ensayo fue
indispensable realizar aplicación de correctivos al suelo (cal dolomita) debido a la alta
saturación de aluminio que se presenta de forma natural en esta región.
Los árboles de naranja Valencia están ubicados a una distancia de 6m entre plantas y
8m entre filas. En las calles del cultivo se encuentran las coberturas en parcelas de 40
m2. El tratamiento uno (Desmodium ovalifolium) fue sembrado con semilla (20g por
parcela) mientras que los restantes (tratamientos 2, 3, 4, 7 y 8) fueron establecidos
mediante propagación vegetativa a una distancia de 50cm x 50cm (Anexo A). Las
coberturas fueron sembradas dos meses después del establecimiento del huerto
citrícola y se realizó control químico localizado de las malezas durante los primeros
meses (1.5 l/ha de glifosato comercial), para permitir que predominara la especie de
interés en cada parcela. La fertilización se ha realizado únicamente en el área de
gotera de los árboles y el manejo agronómico de las coberturas a evaluar ha sido el
mismo excepto para los testigos, en los cuales se realizaron aplicaciones de 1.5 l/ha
51
de glifosato (presentación comercial) cada tres meses (control químico) y cortes con
guadaña (control mecánico) para mantener el suelo libre de cobertura viva.
Para efectos del presente estudio en donde se manejaron parcelas de 40m2 por cada
cobertura, se estableció un área de 24 m2 (3m x 8m) en la cual se hicieron 10
divisiones de 1.5m x 1.6m, tomando en cada cuadrante una submuestra de 50g de
suelo a una profundidad de 20cm (Anexo B).
112
SIEVERDING, E. 1983. Manual de métodos para la investigación de la micorriza vesículo-arbuscular
en el laboratorio. CIAT. Palmira Cali, Colombia. p.120.
52
2.4 METODOLOGIA
2.5 MUESTREO
De los 500g de suelo obtenidos por parcela se tomaron 50g y se mezclaron para
realizar el análisis físico-químico en el laboratorio de suelos del C.I. La Libertad. En los
450g de suelo restantes se realizó la selección de raíces terciarias para cada
repetición y se efectuó el procedimiento de conservación de raíces con AFA (95ml
ácido acético (5%) + 13ml formol + 200 ml alcohol (50%)), bajo refrigeración en tubos
113
JARA, O. 2002. Compilación de la Información meteorológica de 1978 a 1990 y 1996 a 2001.
CORPOICA C.I. La Libertad. Villavicencio, Meta.
53
de ensayo de 20ml como recomiendan Sieverding114, Garza115 et al., y Rodríguez y
Pinzón116, con el fin de evaluar en primer lugar las esporas de HMA presentes en el
suelo.
Se tomaron 20g de suelo colectado por cada parcela y se vertieron en tubos plásticos
transparentes de 100ml (tubos de centrífuga). Se les agregó 20ml de agua destilada y
se agitaron fuertemente con una espátula metálica.
114
SIEVERDING, 1983. Op. cit. 20p.
115
GARZA, F.; GARCÍA, J.; ESTRADA, E. y VILLALÓN, H. 2002. Macromicetos, ectomicorrizas y
cultivos de Pinus culminicola en Nuevo León. En: Ciencia UANL. Vol. 5: 2. p.205.
116
RODRIGUEZ, D. y PINZÓN, C. 1996. Caracterización de micorrizas vesiculo arbusculares nativas en
Mango, Naranja y Mandarina. En una región del municipio de la mesa-Cundinamarca. Tesis Universidad
Nacional de Bogotá. p.32.
117
SIEVERDING, Manual de métodos para la investigación de la micorriza vesículo-arbuscular en el
laboratorio. Op. cit., p.1-30.
118
Ibid., p.12.
119
Capacitación brindada por César Cano, Investigador asociado de CORPOICA. Villavicencio, Meta.
Marzo de 2003.
54
2.5.2.1.2 Centrifugación y decantación
2.5.2.1.3 Extracción
55
2.5.2.2.2 Conteo
2.5.2.2.3 Identificación
120
SIEVERDING, 1983. Op. cit. p. 1-30
121
BOLLAND, O.M y HEATHER, W.A. 1979. A permanent mounting medium for fungi. Bulletin of
the British Mycological Society. 13: 31 – 32.
122
SIEVERDING, 1983. Op. cit. p. 12, 120.
123
SCHENCK, N.C. & PÉREZ, Y. 1991. Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi. Plant
Pathology Department. Institute of Food and Agricultural Science. University of florida. 3rd Edition.
p.286
124
HALL, I.R. 1991. Invermay Technical Report No 26 A Summary of the Features of Endogonaceus
Taxa. Invermay Agricultural Centre. Private Bag Mossfield, New Zealand.
125
HALL, I.R. and ABBOTT, L.K. 1991. Technical Report No 25 Photographic Slide Collection
Illustrating Features of the endogonaceae. Departament of soil Science and plant nutrition. University of
Western Australia, Nedlands.
56
2.5.2.3 Determinación del porcentaje de colonización de raíces
126
SIEVERDING, Op cit. 7-9p.
127
VIERHEILIG, H.; COUGHLAN, A.P; WYSS, U. y PICHÉ, Y. 1998. Ink and Vinegar, a Simple
Staining Technique for Arbuscular-Mycorrhizal fungi. En: Applied and Environmental Microbiology,
Dic.1998, (64) 12 p.5004-5007. American Society for Microbiology.
57
• Se efectuó la observación de estructuras del hongo en el microscopio (40x),
utilizando la técnica de determinación de colonización por campos de
infección, en la cual se realizaron barridos de cada segmento de raíz,
registrando la presencia de estructuras de HMA.
**. Presencia de estructuras típicas del hongo: Hifas, Arbúsculos, Vesículas y/o
Esporas.
Para las variables número de esporas / 100g suelo seco y porcentaje de colonización
de 20cm de raíz, se realizaron los análisis estadísticos de forma independiente para
cada época evaluada mediante el software SAS.
De acuerdo al comportamiento matemático de los datos obtenidos en el número de
esporas/100g suelo seco, fue necesario efectuar la transformación Log (Nº Esporas
+1), con el fin de facilitar las comparaciones estadísticas. Mientras que en los
porcentajes de colonización de HMA en 20cm de raíz obtenidos, no fue necesario
efectuar ninguna transformación, debido a que su comportamiento estuvo dentro de la
distribución normal. (Anexos F y G).
128
SIEVERDING, Op cit. p. 9.
58
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los análisis de suelos realizados para cada época climática no muestran diferencias
relevantes en cuanto al contenido y disponibilidad de nutrientes (Anexo C). Sin
embargo, se apreció un leve aumento del contenido de la mayoría de elementos
durante la época lluviosa, excepto el Cobre y el Zinc que presentaron contenidos
relativamente más altos durante la época seca. El fósforo se incrementó en 7 ppm
durante la época húmeda, evidenciando niveles medios durante las evaluaciones.
Otras características como pH, contenido de materia orgánica, nitrógeno asimilable y
acidez intercambiable fueron estables durante las dos épocas evaluadas. De la misma
forma, los suelos presentaron altos contenidos de potasio y bajos niveles de Calcio,
Magnesio y Boro durante las dos evaluaciones.
59
Tabla 6. Número de esporas /100 g suelo seco en época húmeda.
Tratamiento R1 R2 R3 Promedio
Desmodium ovalifolium 49 84 31 55ab
Paspalum notatum Flüegge 173 352 205 243 ab
Brachiaria dictyoneura 487 272 142 300a
Promedios seguidos con letras distintas presentan diferencias estadísticas según prueba de Tukey al 5%
Tratamiento R1 R2 R3 Promedio
Desmodium ovalifolium 412 131 53 199a
Paspalum notatum Flüegge 241 75 148 155a
Brachiaria dictyoneura 218 137 44 133a
Arachis pintoi 213 102 30 115a
Testigo 1:Control Químico 110 36 70 72a
Testigo 2: Control Mecánico 191 141 65 133a
Brachiaria brizantha CIAT 26110 270 145 413 276a
Panicum maximum Jacquin 125 124 206 152a
Promedios seguidos con letras distintas presentan diferencias estadísticas según prueba de Tukey al 5%
Como se puede apreciar en la figura 11, tan sólo dos especies de las seis evaluadas
presentaron mayor número de esporas en la época lluviosa que en la seca. En
60
promedio la densidad de esporas fue un 12% mayor en la época seca que en la
lluviosa, lo cual corrobora lo planteado por muchos autores (Sieverding (1983);
Siqueira, (1999); Moreira y Siqueira (2002) y Forero (1999), entre otros), en donde
señalan que los HMA forman mayor número de estructuras de resistencia, cuando las
condiciones de humedad del suelo son adversas. Por ejemplo Correa 129 , et al.,
reportan en evaluaciones realizadas en el departamento de Caquetá, un mayor
número de esporas durante el periodo menos lluvioso.
Figura 11. Comparación del número promedio de esporas en 100g de suelo seco para
dos épocas climáticas distintas.
Por otra parte, en el pasto maquenque (D. ovalifolium), se aprecia un efecto muy
marcado de la época climática en la esporulación de HMA, puesto que el número de
129
CORREA, M., MARTINEZ, J. y MONTENEGRO, J. 1993. Análisis sobre la actividad de hongos
formadores de Micorrizas vesículo arbusculares. En: Aspectos ambientales para el ordenamiento
territorial del occidente del departamento del Caquetá. IGAC. 698-736p.
61
esporas por cada 100g de suelo seco aumentó con el estrés hídrico, mientras que en
la época húmeda la densidad de esporas disminuyó cerca del 70%. Efectos muy
similares se evidencian en el control mecánico, B. brizantha, A. pintoi y P. maximum,
en los cuales el número de esporas / 100g SS, en la época seca aumentó en un 46%,
39%, 37% y 24% respectivamente.
El tratamiento de control químico mostró densidades bajas y muy similares en las dos
épocas evaluadas, presentando una disminución del 12.5% en la época húmeda.
Tratamiento R1 R2 R3 Promedio
Desmodium ovalifolium 78,84 80,77 84,95 81,52ab
Promedios seguidos con letras distintas presentan diferencias estadísticas según prueba de Tukey al 5%
Los porcentajes promedio de colonización de raíces para la época húmeda son altos
en la mayoría de los tratamientos, no obstante, estadísticamente solo hay diferencias
en el control químico, ya que presenta los valores más bajos de colonización. (Anexo
62
F) En las figuras 12 y 13, se pueden apreciar algunas de las estructuras encontradas
durante ésta evaluación.
63
3.3.2 Época Seca
Tratamiento R1 R2 R3 Promedio
Desmodium ovalifolium 39,18 75,93 34,04 49,71abc
Promedios seguidos con letras distintas presentan diferencias estadísticas según prueba de Tukey al 5%
64
Figura 14. Vesículas observadas durante la época seca en raíces de B. brizantha.
Figura 15. Infección total en raíz de P. notatum. Vesículas halladas durante la época
seca.
65
3.3.3 Porcentaje de Colonización en las dos épocas evaluadas
Figura 16. Porcentaje de Colonización promedio de 20cm de raíz en las dos épocas
climáticas.
El control químico presentó los porcentajes de colonización de raíz más bajos en las
dos épocas evaluadas, sin embargo la colonización de HMA disminuye drásticamente
(68 %) en la época seca.
66
3.4 Comparación de la densidad de esporas y el porcentaje de colonización de
HMA en las dos épocas evaluadas
En la figura 17, se puede apreciar cómo en la época húmeda existe una relación
inversamente proporcional del número de esporas / 100g SS y el porcentaje de
colonización de raíces en la mayoría de los tratamientos. Tan sólo en P. notatum y B.
dyctioneura el número de esporas es alto mientras el porcentaje de colonización esta
por encima del 70%.
67
Figura 18. Número de esporas promedio/100g suelo seco Vs Colonización promedio
en 20 cm de raíz en la época seca.
Para efectos de comparación de las dos variables en las dos épocas climáticas y con
base en los datos obtenidos, en la tabla 10, se estableció una escala cualitativa en
donde se asignaron niveles altos o bajos para los porcentajes de colonización y el
número de esporas hallados en las dos épocas evaluadas.
68
Tabla 10. Evaluación cualitativa del comportamiento del porcentaje de colonización y
el número de esporas/ 100g suelo seco en los tratamientos evaluados durante las dos
épocas climáticas.
130
SANDERS, I.R.; KOIDE, T.G. y SHUMWAY, L. 1999. Diversity and Structure in natural
communities: The Role of the Mycorrhizal Symbiosis. En: VARMA, A. y HOCK, B. 1999. Mycorrhiza,
2nd Ed. Springer-Verlag Berlin Heidelberg. p574.
131
CANO, C y LYNCH J. 1990. Effect of Agrochemicals on Vesicular Arbuscular Mycorrhizal fungi.
CIAT. Palmira. 21p.
69
estas especies puede deberse al alto porcentaje de dependencia hacia los HMA de
acuerdo a lo encontrado por Sieverding132 et al., en donde las especies del género
Brachiaria alcanzaron porcentajes de más del 80%, mientras que A. pintoi, D.
ovalifolium y P. maximum tuvieron entre el 30 y el 55% de dependencia.
Por otra parte Habte134, sostiene que algunas plantas hospederas pueden modificar el
pH de su rizósfera más que otras, debido al contenido de amonio como fuente de
nitrógeno para las plantas. Desde este punto de vista, las leguminosas al fijar
nitrógeno pueden contribuir en mayor forma a la disminución del pH en la rizósfera.
No obstante el autor plantea que la eficiencia de la asociación de HMA con las plantas
no está condicionada necesariamente por el pH del suelo, sino por sus niveles de
fósforo y nitrógeno (en menor grado) y por las condiciones propias de cada especie de
micorriza.
132
SIEVERDING, Op cit., p 251.
133
HABTE, M. 1999. Soil Acidity as a Constraint to the Application of Arbuscular Mycorrhizal
Technology. En: VARMA, A. y HOCK, B. 1999. Mycorrhiza, 2nd Ed. Springer-Verlag Berlin Heidelberg.
p557-569.
134
Op cit., p.563.
135
FORERO, et al., Op cit., p 41.
136
SANDERS, Op. cit., p. 575.
70
casos las variaciones morfológicas de las raíces pueden generar cambios en el
abastecimiento de fósforo y por lo tanto en el proceso de colonización.
Tabla 11. Especies de HMA identificados en las dos evaluaciones y sus códigos.
137
SCHENCK, Op. cit., p. 267-271.
71
Continuación tabla 11.
Morfotipo Nombre científico Código
20 Glomus sp3 LSp3
21 Scutellospora heterogama (Nicol & Gerd.) Walter & Sanders CHTG
22 Scutellospora pellucida (Nicol & Schenck) Walter & Sanders CPLC
23 Scutellospora savannicola (Herr. & Ferr.) Walter & Sanders CSVN
24 Scutellospora sp1 Csp1
25 Scutellospora sp2 Csp2
26 Scutellospora sp3 Csp3
138
SCHENCK, N.C. & PÉREZ, Y. 1991. Manual for the identification of VA mycorrhizal fungi. Plant
Pathology Department. Institute of Food and Agricultural Science. University of florida. 3rd Edition.
p.286
139
HALL, I.R. 1991. Invermay Technical Report No 26 A Summary of the Features of Endogonaceus
Taxa. Invermay Agricultural Centre. Private Bag Mossfield, New Zealand.
140
HALL, I.R. and ABBOTT, L.K. 1991. Technical Report No 25 Photographic Slide
Collection Illustrating Features of the endogonaceae. Departament of soil Science and
plant nutrition. University of Western Australia, Nedlands.
141
Internacional Culture Colection of Arbuscular & Vesicular-arbuscular Mycorrhizal Fugi. Disponible
en <http://invam.caf.wvu.edu>
72
Acaulospora denticulata Sieverding & Toro
COLOR
Puede variar desde castaño o naranja claro (0-20-80-0), hasta castaño o naranja
oscuro (0-50-100-0). Aunque usualmente son de tipo claro.
L2: Se origina como una capa sencilla que tiene adheridos”botones” de color amarillo-
castaño (0-20-100-0) de 0.6-0.8 µm de espesor y de 3.0-3.2 µm de largos. Esta
característica le confiere el nombre de denticulada.
73
Acaulospora scrobiculata Trappe
74
Acaulospora mellea Spain & Schenck
COLOR: Varía desde naranja castaño pálido (0-20-40-0), hasta naranja castaño
oscuro (0-40-100-10).
L3: Delgada (1- 4 µm), flexible de un color amarillo o café (0-5-40-0). Esta pared
puede aparecer laminada por varias capas internas.
75
OBSERVACIONES: Su tonalidad miel es una característica importante para su
clasificación, aunque puede tener similitudes con A. koskei, A. lavéis, A. morrowiae y
suele confundirse con A. lavéis también en su forma, A. mellea es mucho más
pequeña y el color miel es más intenso, al igual las paredes suelen ser más oscuras.
COLOR: Es sub-hialina, pude presentar colores que van desde amarillos claros (0-0-
10-0) hasta castaños (0-15-60-0). El color en una población suele ser uniforme.
L1: Hialina menor de 1µm de espesor, flexible, muy similar a la de A.mellea, pero se
origina como una extensión de la pared hifal del sáculo espororífero.
76
L2: Es una capa laminada, constituida por varias sub-capas de color amarillo pálido
(0-0-20-0) y de 2.0-2.4 µm de espesor. En la madurez forma una endospora al igual
que A. mellea.
L3: Delgada de menos de 1 µm de espesor. De difícil visualización.
Acaulospora sp1
FORMA: Sub-globosa
77
Acaulospora sp2
FORMA: Globosa
78
Acaulospora sp3
FORMA: Elipsoide
79
Acaulospora sp4
FORMA: Globosa
80
Entrophospora infrequens (Hall) Ames & Schneider
81
Glomus citricolum Tang & Zang
82
Glomus deserticola Trappe, Bloss & Menge.
DIÁMETRO: 52-115µm
83
Glomus fasciculatum (Thaxter) Gerd. & Trappe emend. Wlker & Koske
DIÁMETRO: 60-110 µm
84
Glomus geosporum (Nicol. & Gerd.) Walker
85
Glomus invernnaium Hall
FORMA: Globosa
86
Glomus macrocarpum Tul. & Tul.
COLOR: Amarillo-castaño(0-30-40-0)
87
Glomus microaggregatum Koske, Gemma & Olexia
DIÁMETRO: 15-50µm
88
Glomus occultum Walter, 1982; m Paraglomus occultum, Morton & Redecker,
2001.
89
Glomus sp 1
FORMA: Sub-globosa
90
Glomus sp2
FORMA: Globosa
DIÁMETRO: 150µm.
91
Glomus sp 3
FORMA: Sub-globosa
92
Scutellospora heterogama (Nicol & Gerd.) Walter & Sanders
COLOR: Puede ser desde naranja-café oscuro (0-60-100-10) a rojizo oscuro (40-80-
100-0). Inmaduras pueden presentar colores levemente rosados.
93
Scutellospora pellucida (Nicol & Schenck) Walter & Sanders
94
Scutellospora savannicola (Herr. & Ferr.) Walter & Sanders
95
Scutellospora sp1
COLOR: (0-10-20-0)
FORMA: Subglobosa
96
Scutellospora sp2
COLOR: (0-40-40-0)
FORMA: Subglobosa
97
Scutellospora sp3
COLOR: (0-10-20-0)
FORMA: Sub-globosa
DIÁMETRO: 97.28 x 94.72µm
NÚMERO DE PAREDES (L): Aparentemente 2.
Como indica la tabla 12, cerca del 46% del total de las especies identificadas se
presentó únicamente en la época seca, el 23% en la húmeda y el 31% restante esta
representado por las especies que presentaron esporas en las dos épocas evaluadas
(Especies comunes en época húmeda y seca: H-S).
98
Tabla 12. Distribución de las especies de HMA en relación a la época climática
Mientras que las especies LMAG, LFSC, LDST, CSVN; Lsp1 y Csp2 presentaron una
dinámica completamente distinta, ya que solo generaron esporas en la época húmeda.
Por otra parte, ocho especies de HMA fueron hallados en las dos épocas evaluadas, lo
que indica cierto rango de adaptabilidad tanto a las condiciones ambientales como a
los hospederos evaluados.
99
Figura 45. Distribución porcentual de HMA encontrados en la época húmeda
3%
11%
29%
13%
23%
14%
Como se puede ver en la figura 46, durante la época seca se evidenció la dominancia
de A. ascrobiculata y S. heterogama, quienes representan más del 60% del total de la
población de HMA bajo estas condiciones.
142
Al respecto Habte, sostiene que aunque se encuentran micorrizas en pH que
oscilan entre 2.7 y 9.2, algunos géneros como Acaulospora y Glomus prevalecen en
condiciones ácidas y neutrales.
142
HABTE, Op cit., p. 559.
100
Figura 46. Distribución porcentual de HMA encontrados en la época seca.
6%
8% 38%
12%
26%
ASCB CHTG AMRW LGSP ASP3 EIFQ AMLL ASP1 ASP2 LOCC
LSP2 LIVM ASP4 LMCC LCTC LSP3 ADTC CPLC CSP1 CSP3
Las micorrizas al ser simbiontes obligados requieren de plantas micotróficas que les
brinden un sustrato de crecimiento, Sanders143 et al., sostienen que un cambio en la
composición de las especies vegetales afecta la composición de la comunidad de
micorrizas dependiendo del grado de especificidad que exista entre la planta y el
hongo. La especificidad ecológica se presenta principalmente en comunidades
naturales y se da en función de la efectividad e infectividad que presenten los hongos
con los hospederos. Así mismo, los autores resaltan la importancia de la competencia
intra e interespecífica entre las micorrizas y otros organismos del suelo dentro de una
comunidad.
Así mismo Sanders144 et al., aseveran que la dependencia de una planta hacia los
HMA está dada en función de la deficiencia de fósforo. Es así como plantas que
presentan mayores requerimientos de éste elemento pueden establecer mejores
asociaciones con las micorrizas. Esto se evidenció con las leguminosas D. ovalifolium
143
SANDERS, Op cit., p. 581.
144
SANDERS, Op cit., 575p.
101
y A. pintoi que presentaron niveles de colonización relativamente bajos en
comparación con las gramíneas de género Brizantha.
80,00
E. Húmeda
70,00 E.Seca
60,00
50,00
% 40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
CTHG ASP1 ASCB AMRW ASP2 LFSC ASP4 AMLL LSP3
En el verano CHTG y AMRW presentaron valores muy bajos (3.09%), mientras que
ASCB se incrementó en cerca del 70%.
102
3.7.2 Paspalum notatum
40,00
E. Húmeda
35,00
E.Seca
30,00
25,00
% 20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
CTHG ASCB AMRW ASP2 LFSC LOCC LSP1 CSVN AMLL LGSP CSP1 EIFQ LSP2 ASP3 LMCC
103
Figura 49. Comportamiento de las especies asociadas a B. dictyoneura
60,00
E. Húmeda
E. seca
50,00
40,00
% 30,00
20,00
10,00
0,00
CTHG ASP1 ASCB AMRW LFSC LDST LOCC EIFQ ASP3 LGSP CPLC LSP2 LCTC CSP3
AMRW y CHTG disminuyen en la época seca en un 35% y 2%, mientras que ASCB
aumenta en cerca del 30%.
Fueron 14 las especies de HMA asociadas al maní forrajero en las épocas climáticas,
sin embargo, sólo tres fueron comunes en invierno y verano, como se puede apreciar
en la figura 50. En la época seca se puede notar la dominancia de ASCB (40.35%)
frente a las demás especies. Aunque AMRW presenta un nivel relativamente alto en
verano (19.3%), en la época lluviosa alcanza el 40% del total de la población. LOCC y
Lsp1 no aparecen asociadas al maní en la época seca, sin embargo en la húmeda
alcanzan valores cercanos al 27% y 11% respectivamente. Caso contrario de LGSP y
ASCB, que están en verano y desaparecieron con las lluvias.
104
Figura 50. Comportamiento de las especies asociadas a A. pintoi
45
40
E. Húmeda
E. seca
35
30
25
%
20
15
10
0
CTHG AMRW LFSC LOCC ASP3 LSP1 CSVN ASCB LGSP EIFQ LIVM
En las parcelas manejadas con herbicida se pudo notar variabilidad de especies pese
a que se suponía lo contrario. En la época húmeda se observó un número superior de
especies, sin embargo en su mayoría desaparecieron en el verano como se denota en
la figura 51. Tres especies tuvieron comportamiento similar en la época lluviosa:
CHTG, Lsp1 y CSVN, alcanzando cada una cerca del 23% de la población total de esa
evaluación. No obstante la única que prevaleció en el verano fue S. heterogama con
una participación del 22%. Por otra parte AMRW y ASCB disminuyeron en un 33% y
9% en la época húmeda.
105
Figura 51. Comportamiento de las especies asociadas al control químico
40,00
E. Húmeda
E. seca
35,00
30,00
25,00
% 20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
CTHG ASP1 ASCB AMRW LOCC LSP1 CSVN CSP2 EIFQ ASP3 ADTC
106
Un comportamiento similar pero inverso, tienen CHTG y Lsp1, cuyos porcentajes de
esporas en el suelo de las parcelas manejadas mecánicamente se incrementaron
notablemente con la llegada de las lluvias (32%).
Al igual que en las parcelas de control químico, las malezas predominantes durante la
época húmeda en el control mecánico fueron Rottboellia exaltata, Brachiaria
decumbens y Paspalum sp; mientras que en la época seca Euphorbia schlechtendalii y
Sida rhombifolia representaron cerca del 60 % de la población total de malezas.
(Anexo H)
40,00
E. Húmeda
E. seca
35,00
30,00
25,00
% 20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
CTHG ASP1 ASCB AMRW LSP1 CSVN LGSP LSP2 ASP3 ADTC LCTC LSP3 EIFQ
Por otra parte AMRW mantiene una proporción muy similar de esporas en las dos
épocas evaluadas (21% en promedio).
107
CHTG y AMRW es superior a las demás en el invierno y verano, alcanzando valores
más altos en la última evaluación 46.5 % y 25.19 % cada una. Así mismo CHTG
disminuye en cerca del 23% en la época húmeda, mientras que AMRW aumenta en un
19%.
50,00
E. Húmeda
45,00 E. seca
40,00
35,00
30,00
% 25,00
20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
ASCB ASP4 ASP1 CHTG AMRW LGSP ASP2 EIFQ ASP3 LMCC LOCC LSP1 CSVN LMAG
Las parcelas con pasto guinea fueron las que menos especies reportaron en las dos
evaluaciones realizadas. Sin embargo, se puede notar en la figura 54, la dominancia
de CHTG en la época seca, representando el 60% de la población total en esa
evaluación. Se aprecia de la misma forma durante la época lluviosa una disminución
del 31% en CHTG y un aumento del 16% en ASCB y Asp3.
108
Figura 54. Comportamiento de las especies asociadas a P. maximum
70,00
E. Húmeda
60,00
E. seca
50,00
40,00
%
30,00
20,00
10,00
0,00
ASCB CHTG AMRW LGSP ASp3 ASP1 LDST CSP2
Como se observa en la tabla 13, las coberturas que presentaron un mayor número de
especies en total fueron en su orden: P. notatum con 20 especies, B. dictyoneura con
19, B. brizantha con 18, el control mecánico con 16, A. pintoi y el control químico con
14 y por último D. ovalifolium y P. maximum con tan solo 13 y 11 especies
respectivamente.
109
Tabla 13. Número de especies de HMA encontrados en las coberturas evaluadas.
110
Tabla 14. Distribución de las especies de HMA hallados en cada cobertura para las
dos épocas climáticas evaluadas
Así mismo LOCC no presentó asociaciones con las parcelas de control mecánico, D.
ovalifolium y P. maximum en el invierno, mientras que en las coberturas de P. notatum
y B. dictyoneura se observó durante las dos evaluaciones realizadas. Por su parte
EIFQ, no se observó durante la época seca en D. ovalifolium y P. maximum, mientras
que en B. dictyoneura se observó durante las dos épocas evaluadas.
LFSC que sólo se evidenció en la época húmeda, hizo presencia únicamente en las
parcelas de D. ovalifolium, P. notatum, B. dictyoneura y A. pintoi. Mientras que AMLL
se observó en las parcelas de P. notatum y B. dictyoneura únicamente en la época
seca.
111
se encontró durante la época seca en P. notatum, B. dictyoneura y en las parcelas de
control mecánico.
Por otra parte Csp2 sólo se presenta en la época lluviosa y se asoció únicamente con
las parcelas de control químico y P. maximum. Mientras que ADTC sólo estuvo
presente en los tratamientos de control mecánico y químico durante la época seca.
De las 7 especies ocasionales (HMA que se hallaron en sólo una época climática y
asociados a una cobertura específica), solo una se presentó en la época húmeda
(LMAG); y en las parcelas de control químico, D. ovalifolium y P. maximum no se
observaron micorrizas de este tipo.
145
ODUM, P.O. 1998. Ecología. El vínculo entre las ciencias naturales y las sociales. Editora continental,
S.A. de C.V. México. 71-75p.
112
Figura 55. Índice de Shannon de los HMA encontrados en cada cobertura.
Entre tanto en la época seca, la mayor diversidad de HMA fue alcanzada por B.
brizantha, el control mecánico, B. dictyoneura y P. notatum con valores del 63%, 59%
y de 58% para los dos últimos. Así mismo las parcelas de control químico y de P.
maximum, obtuvieron los valores mínimos de diversidad para la época de verano (36-
37%).
Si se aprecian los valores de diversidad de cada cobertura durante las dos épocas
climáticas evaluadas, se puede notar la estabilidad de P. notatum, B. dictyoneura y B.
brizantha cuya diversidad tuvo variaciones del 1 al 5%. Caso contrario de las parcelas
de control químico, A. pintoi y D. ovalifolium que presentaron disminuciones en la
diversidad del 19%, 15% y 7% durante la época húmeda.
113
El índice de diversidad de especies de HMA hallado en los tratamientos químico y
mecánico se debe posiblemente a la interacción de las micorrizas con los hospederos
temporales que se hallaron durante las dos épocas climáticas, ya que, aunque se
realizaron las prácticas de control mencionadas con anterioridad, hubo algunas
especies de plantas persistentes que aparecieron en determinadas épocas y sectores
en las parcelas. En el anexo H, se puede apreciar la composición botánica de las
parcelas de control químico y mecánico para las dos épocas evaluadas. En donde
Rottboellia exaltata (caminadora), representó entre el 35 y el 50 % de la población de
malezas en los dos testigos durante la época húmeda. Mientras que el escobo (Sida
rhombifolia) representó cerca del 30% de la población de malezas del control
mecánico y químico durante el verano.
Heijden146, indica que la dependencia micorrícica de las plantas puede usarse para
estimar cómo la población de micorrizas, influye en la estructura poblacional de las
plantas, diversidad y funcionamiento del ecosistema.
Hart y Klironomos147, señalan la importancia que tienen los HMA como organismos
funcionales dentro de un ecosistema, siendo herramientas de restauración ecológica y
regulando la estructura de la comunidad y su producción a través de la diferenciación
entre hongos ocasionando diversos efectos en las plantas.
146
M.G.A. van der HEIJDEN. Arbuscular Mycorrhizal Fungi as a Determinant of Plant Diversity: in
Search of Underlying Mechanism and general principles. En: M.G.A. van der HEIJDEN y SANDERS, I.
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147
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functioning. En: M.G.A. van der HEIJDEN y SANDERS, I. 2002. Mycorrhizal Ecology. Springer-
Verlag Berlin Heidelberg. 225-239p
114
115
4. CONCLUSIONES
116
El porcentaje de colonización en la época húmeda osciló entre el 47% y el
94%. Aunque B. brizantha presentó los valores más altos de colonización
(91.4%), sólo hubo diferencias significativas con el control químico (59%).
117
En el tratamiento de control mecánico Asp3, ASCB y AMRW representan
más del 80% de la población de HMA durante la época seca, así mismo
CHTG y Lsp1 abarcan el 61% de las micorrizas halladas en la estación
húmeda.
118
solución de tinta y ácido acético es apropiada para raíces finas, no es tóxica
y es más económica que la usada tradicionalmente.
119
5. RECOMENDACIONES
120
BIBLIOGRAFIA
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129
ANEXO A. ESQUEMA DE LA DISTRIBUCIÓN DE TRATAMIENTOS EN CAMPO
4m
6m
6 10m 7 2
8m
2m
1 5 1
7 4 7
2 3 4
8 1 6
4 8 3
3 6 8
6 2 5
130
ANEXO B. DETALLE DE LA UNIDAD DE MUESTREO EN CADA PARCELA
1.5 m
Sm3 Sm4
10 metros
8m
Sm5 Sm6
Sm7 Sm8
Sm9 Sm10
3m
4 metros
Sm = Submuestras
131
ANEXO C. ANÁLISIS QUÍMICO DE SUELOS PARA LAS DOS ÉPOCAS
EVUALADAS
132
ANEXO D. ANÁLISIS DE VARIANZA Y PRUEBA DE COMPARACIÓN DE MEDIAS
PARA EL NÚMERO DE ESPORAS /100g SUELO SECO EN ÉPOCA HÚMEDA
133
ANEXO E. ANÁLISIS DE VARIANZA Y PRUEBA DE COMPARACIÓN DE MEDIAS
PARA EL NÚMERO DE ESPORAS /100g SUELO SECO EN ÉPOCA SECA
134
ANEXO F. ANÁLISIS DE VARIANZA, PRUEBA DE NORMALIDAD Y
COMPARACIÓN DE MEDIAS PARA EL PORCENTAJE DE COLONIZACIÓN DE
20CM DE RAÍZ EN LA ÉPOCA HÚMEDA.
135
136
137
ANEXO G. ANÁLISIS DE VARIANZA, PRUEBA DE NORMALIDAD Y
COMPARACIÓN DE MEDIAS PARA EL PORCENTAJE DE COLONIZACIÓN DE
20CM DE RAÍZ EN LA ÉPOCA SECA.
138
139
140
ANEXO H. COMPOSICIÓN BOTÁNICA DE LAS PARCELAS DE CONTROL
QUÍMICO Y MECÁNICO
CQh = Control químico época húmeda, CQs = Control químico época seca, CMh = Control Mecánico época húmeda,
CMs = Control Mecánico época seca
141
ANEXO I. CUADRO RESUMEN DE LAS PRINCIPALES CARACTERISTICAS ENCONTRADAS EN LA ÉPOCA HÚMEDA
Época Húmeda
Cobertura Nº esporas / % Colonización Nº Especies Índice de Especies encontradas
100g SS* en 20 cm raíz* encontradas shannon
D. ovalifolium 55 81,52 6 0,38 ASP2, LFSC, CHTG, ASCB, AMRW, ASP1
LFSC, LSP1, CSVN, CHTG, ASCB, AMRW,
P. notatum 243 72,15 8 0,57
ASP2, LOCC
ASP1, ASP3, LFSC, LDST, CHTG, ASCB,
B. dyctioneura 300 89,70 9 0,63
AMRW, LOCC, EIFQ
LFSC, LOCC, ASP3, LSP1, CSVN, CHTG,
A. pintoi 73 86,11 7 0,34
AMRW
ASP1, LOCC, LSP1, CSVN, CSP2, CHTG,
C. Químico 63 58,92 8 0,46
ASCB, AMRW
C. Mecánico 72 66,59 6 0,4 ASP1, LSP1, CSVN, CHTG, ASCB, AMRW
LSP1, LOCC, CSVN, LMAG, CHTG, ASCB,
B. brizantha 169 91,41 8 0,58
AMRW
P. maximum 116 89,11 6 0,49 ASP3, ASP1, LDST, CSP2, CHTG, ASCB
Promedios 136 79,44 0,48
142
ANEXO J. CUADRO RESUMEN DE LAS PRINCIPALES CARACTERISTICAS ENCONTRADAS EN LA ÉPOCA SECA
Época Seca
%
Cobertura Nº esporas / Nº Especies Índice de Especies encontradas
Colonización
100g SS* en 20 cm raíz* encontradas shannon
D. ovalifolium 199 49,71 7 0,45 AMLL, ASP4, Lsp3, CHTG, ASCB, AMRW, ASP2.
AMLL, LGSP, CSP1, EIFQ, ASP3, LSP2, LMCC
P. notatum 155 83,46 12 0,58
CHTG, ASCB, AMRW, ASP2, LOCC
LGSP, CPLC, LSP2, Csp3, LCTC, CHTG, ASCB,
B. dyctioneura 133 77,18 10 0,58
AMRW, LOCC, EIFQ
A. pintoi 115 50,57 7 0,49 ASCB, LGSP, EIFQ, LIVN, Asp3, CHTG, AMRW
C. Químico 72 18,85 6 0,36 EIFQ, ASP3, ADTC, CHTG, ASCB, AMRW
LGSP, LSP2, ASP3, ADTC, LCTC, LSP3, EIFQ,
C. Mecánico 133 26,81 10 0,59
CHTG, ASCB, AMRW
LGSP, ASP1, ASP2, ASP3, ASP4, EIFQ, LMCC,
B. brizantha 276 39,49 10 0,63
CHTG, ASCB, AMRW
P. maximum 152 67,98 5 0,37 LGSP, AMRW, CHTG, ASCB. Asp3
Promedios 154 51,76 0,51
* Promedio de tres repeticiones
143