UNIDAD 4. ACTIVIDAD 4.

PRCTICA 1: CUANTIFICACIN GLUCOSA EN MERMELADAS

MARCO TEORICO La concentracin del complejo coloreado se puede determinar con el espectrofotmetro usando el LED azul (430 nm). La concentracin inicial de azcar en las muestras de mermelada se puede obtener de la curva de calibracin creada a partir de concentraciones de glucosa conocida. El propsito es determinar la concentracin de azcares de una sustancia orgnica, por medio de un procedimiento espectrofotomtrico.

Los espectrofotmetros de reflectancia miden la cantidad proporcional de luz reflejada por una superficie como una funcin de las longitudes de onda para producir un espectro de reflectancia. El espectro de reflectancia de una muestra se puede usar, junto con la funcin del observador estndar CIE y la distribucin relativa de energa espectral de un iluminante para calcular los valores triestmulos CIE XYZ para esa muestra bajo ese iluminante. La reflectancia de una muestra se expresa como una fraccin entre 0 y 1, o como un porcentaje entre 0 y 100. Es importante darse cuenta de que los valores de reflectancia obtenidos son valores relativos y, para muestras no fluorescentes, son independientes de la calidad y cantidad de la luz usada para iluminar la muestra. As, aunque los factores de reflectancia se midan usando una fuente de luz concreta, es perfectamente correcto calcular los valores colorimtricos para cualquier iluminante conocido. Fuente de luz La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral

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continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lmpara de wolframio (tambin llamado tungsteno), lmpara de arco de xenn y lmpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atmicos. Monocromador El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromtica. Est constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.

Espectrofotometro

Tartrato de sodio y potasio

Glucosa

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PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES Reactivo DNSA: para preparar el reactivo DNSA, disolver 10 g de DNSA en 200 ml de solucin NaOH (aproximadamente 2 moles/l). Calentar la solucin y mezclar perfectamente. Disolver 300 g de tartrato de sodio y potasio en 500 ml de agua destilada para obtener un estabilizante de color. Mezclar las dos soluciones, agitar y enrasar a 1 l con agua destilada. Mermelada (sucres): pesar 1-2 g de mermelada en un erlenmeyer y aadir 10 ml de cido sulfrico. Calentar en el bao de agua hirviendo durante 20 min., agitando peridicamente hasta que la hidrlisis sea completa. Dejar enfriar la muestra y aadir cuidadosamente 12 ml de hidrxido de sodio. Agitar y filtrar a un matraz aforado de 100 ml, enrasar con agua destilada a 100 ml. Usando una pipeta, transferir 10 ml de esta solucin a otro matraz aforado de 100 ml y enrasar a 100 ml con agua destilada para obtener la solucin de medida. Agitar.

0 (Blanco) 0.30 0.45 0.90 1.20

27.54 23.44 20.04 18.21 15.13

0.56 0.63 0.69 0.74 0.82

0 0.07 0.13 0.18 0.26

14.45 0.84 0.28 1.50 Tabla 3: curva de calibracin- medidas de absorbancia de las muestras de diferentes concentraciones de glucosa

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Figura 4: Curva de calibracin de les muestras- absorbancia especfica de la glucosa contra concentracin de glucosa

BIBLIOGRAFIA Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: www.liceoagb.es/quimiorg/uv2.html Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: gusgsm.com/funciona_espectrofotometro_reflectancia Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: es.wikipedia.org/wiki/Espectrofotmetro Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: Se recupero el 11 de Septiembre del 2013 de: