APOPTOSIS

La apoptosis es uno de los principales tipos de muerte celular programada (PCD). Como tal es un conjunto de reacciones bioqumicas que ocurre en las clulas de un organismo pluricelular, encaminadas a producir la muerte de la clula de manera controlada, a diferencia de la necrosis. La apoptosis puede tener dos motivos fundamentales, como parte del desarrollo de estructuras corporales o bien para eliminar clulas que supongan una amenaza para la integridad del organismo. Se caracteriza por hipereosinofilia y retraccin citoplasmtica con fragmentacin nuclear (cariorrexis), desencadenada por seales celulares controladas genticamente. Estas seales pueden originarse en la clula misma o de la interaccin con otras clulas. La apoptosis es un fenmeno biolgico fundamental, permanente, dinmico e interactivo. Existen mecanismos pro- o anti-apoptticos, regulados genticamente, que actan de forma activa (pues consumen energa) y equilibrada. Como funcin necesaria para evitar la sobreproduccin celular se sospechaba de su existencia, pero es un proceso ordenado y "silencioso" que no produce reaccin tisular y por ello difcil de captar. En 1972, Kerr y col., estudiando orgnulos en clulas neoplsicas, detectaron que muchas clulas desaparecan en los cultivos. Esto llev al estudio de imgenes cinemticas que mostraron mediante microscopa electrnica las alteraciones que sufre la clula en un proceso que es de corta duracin, durando en tales cultivos menos de una hora. La apoptosis puede estar frenada, en equilibrio o estimulada. Por ejemplo, est frenada durante el desarrollo de espermatogonias, en las criptas de las glndulas intestinales (que es un epitelio de crecimiento rpido) y durante la lactancia en su perodo preparatorio, en que el tejido mamario aumenta su masa celular. Est en equilibrio respecto de la mitosis en los tejidos adultos sanos. Es muy significativo su rol homeosttico en la mdula sea, donde debe destruir de manera constante la mitad de una inmensa cantidad de clulas que slo en leucocitos significa 5 x 10 11 cada 24 h. Est estimulada cuando existen clulas envejecidas, mutadas, neoplsicas o no neoplsicas, alteradas por txicos y las que estn en proceso de metamorfosis o atresia. Se ha estudiado esta condicin en neutrfilos envejecidos, en megacariocitos con citoplasma agotado por produccin excesiva de plaquetas, en la atresia folicular del ovario, en folculos pilosos en evolucin y en la mama durante la involucin postlactancia. A diferencia de la apoptosis, la necrosis es una forma de muerte celular que resulta de un proceso pasivo, accidental y que es consecuencia de la destruccin progresiva de la estructura con alteracin definitiva de la funcin normal en un dao irreversible. Este dao est desencadenado por cambios ambientales como la isquemia, temperaturas extremas y traumatismos mecnicos. En la apoptosis el proceso afecta a determinadas clulas, no necesariamente contiguas, y no a todas en un rea tisular. La membrana celular no se destruye, lo que impide el escape al espacio extracelular

de su contenido resultando un proceso "silencioso" sin inflamacin. En el citoplasma se produce granulacin fina, con conservacin de algunos orgnulos, en especial las mitocondrias que tienen un rol interactivo importante. A nivel nuclear la cromatina se condensa agrupada en varios sectores formando cuerpos apoptticos. La membrana celular se recoge sobre las eminencias globuliformes que forman los elementos deteriorados del citoplasma y ncleo. Finalmente, fagocitos captan la clula en su totalidad impidiendo que se produzca alarma en el resto del tejido. Se ha demostrado, al menos en tejidos epiteliales, que si algo de material apopttico escapa a la accin de los fagocitos es captado por clulas vecinas. La participacin de clulas vecinas en este proceso se manifiesta adems por la capacidad de stas de enviar seales moleculares a la clula que debe morir como mecanismo complementario al que desarrolla la clula misma cuando se determina molecularmente su autodestruccin. El proceso de apoptosis dura entre 30 y 60 minutos en clulas en cultivo. Uno de los ms lentos se produce en clulas hepticas empleando como promedio 3 horas. El estudio e identificacin especfico de cuerpos apoptticos se ha logrado con tinciones derivadas de la uridina (TUNEL en que la U corresponde a uridina). Sin embargo, en algunas clulas como las neuronas, la uridina tie tambin tejidos necrticos perdiendo la especificidad. En tales casos se recurre a anticuerpos monoclonales capaces de reconocer fragmentos de ADN integrados en los cuerpos apoptticos. La imagen que da la apoptosis al microscopio electrnico se caracteriza por la presencia de fragmentos de cromatina agrupados en conglomerados globuliformes, la granulacin fina del contenido citoplasmtico, la persistencia de algunos orgnulos hasta el final del proceso, como las mitocondrias, y la integridad de la membrana celular.

Mecanismo de accin de la Apoptosis Dado que la apoptosis acta como oponente a la mitosis, es muy importante su relacin con el ciclo celular. En el ciclo celular hay cuatro fases: mitosis (M), fase de control celular G1, sntesis de ADN (S) y fase de control G2. La apoptosis puede iniciarse en el tercio final de G1 para impedir que una clula daada ingrese a la fase de sntesis de manera que las mutaciones no se reproduzcan durante la replicacin del ADN y en la fase G2 para impedir que las clulas que no hayan llegado a la madurez entren en mitosis. Los motores del ciclo celular son complejos proteicos formados por subunidades llamadas ciclinas y kinasas dependientes de ciclinas (CDK), sintetizados por genes especficos. La sntesis de estos complejos es constante porque son altamente inestables, de ah que el nivel de ellos vare de acuerdo al momento evolutivo de la fase a que estn asignados. As en el avance de la fase G1 a la S acta la ciclina D asociada a las kinasas ciclinodependientes 2, 4 y 6 (cdk 2 4 6). En la segunda mitad del G1 aumenta la presencia de ciclina E con la kinasa ciclinodependiente 2. En la fase de sntesis acta la ciclina A con cdk 2 y en la fase G2, la ciclina B con cdk 2. En la fase G1 se han podido determinar dos puntos importantes: G0 (en la mitad de la fase) donde el ciclo puede detenerse y la clula bloquea su crecimiento pero se mantiene metablicamente activa y un punto de restriccin (en unin de los 2/3 con 1/3 final de esta fase) en que se puede detener el ciclo para corregir defectos celulares (en especial de su ADN), lo que si no se consigue induce el mecanismo de muerte celular. En la fase G2 tambin existen elementos de deteccin de inmadurez celular que inducen la apoptosis cuando la clula no est capacitada para entrar en mitosis. De esta manera, durante el ciclo celular se determina cundo la clula debe entrar en el proceso de autodestruccin o continuar el ciclo y dividirse. Se ejerce as un balance entre mitosis y apoptosis, regulando la poblacin celular de cada tejido. En el mecanismo molecular que controla la apoptosis actan varios agentes, de los cuales uno de los ms importantes y mejor estudiados es el complejo de cisteinilaspartato proteasas (caspasas). Se han descrito 11 caspasas en clulas humanas que provocan una degradacin proteica bien definida hasta llegar a la formacin de cuerpos apoptticos. Algunas caspasas son "iniciadoras" y otras "efectoras" del proceso cataltico, actuando sobre endonucleasas que son las responsables directas de la fragmentacin del ADN. La cadena de degradacin proteica tiene sucesivos clivajes dependientes de la ubicacin del cido asprtico que se repite en la estructura de la enzima. Se han descrito hasta 40 sustratos en la catlisis, proceso que en clulas cultivadas dura entre 30 y 40 minutos. La activacin de las caspasas, que existen en calidad de pro-caspasas inactivas, se produce por diversas vas en que participan varios complejos moleculares. FASES DE LA APOPTOSIS El proceso apoptotico puede ser dividido en tres etapas: la primera fase es la de iniciacin, en la cual la clula recibe el estimulo que la conduce a la muerte; en la segunda o fase de ejecucin, se dan la mayor parte de los cambios morfolgicos y

bioquimicos caractersticos de la apoptosis; y por ultimo en la etapa de eliminacin, los restos celulares son degradados por los macrfagos y clulas adyacentes. 1.- Fase de iniciacin o efectora; La muerte apoptotica puede ser desencadenada por diferentes seales intra o extracelulares. Las primeras son, en muchos casos, originadas por estrs biolgico, el cual provoca la liberacin de citocromo C de la mitocondria (va intrnseca), mientras que algunas de las seales extracelulares desencadenan el proceso apoptotico al unirse a su ligando presente en la membrana plasmtica de la clula blanco (va extrnseca). La naturaleza de los inductores puede ser fisiolgica ( hormonas, citosina), biolgica (bacterias, virus, parsitos), qumica (frmacos) o fsica (radiaciones), pudiendo un mismo estimulo generar efectos diferentes y gasta opuestos en distintos tipos celulares, e incluso en clulas del mismo tipo pero que se encuentren en diferente etapa de desarrollo. Es por lo tanto la adopcin sin retorno del compromiso hacia la muerte. Se caracteriza por el aumento en el contenido de Ca++ intracelular, que origina la activacin de ciertos grupos enzimticos (endonucleasas y proteasas -caspasas), junto con cambios en el citoesqueleto celular produciendo cambios en el tamao y forma celular. 2.- Fase de ejecucin o degradativa: La clula que ha recibido una seal que le induce apoptosis, pierde contacto con las clulas vecinas y el citoplasma se contrae provocando una disminucin en el tamao celular. Los organelos citoplasmticos permanecen intactos, sin embargo en la mitocondria se dan cambios como la reduccin del potencial transmembranal, el desacoplamiento de la cadena de transporte de electrones para la sntesis de ATP y el incremento en la generacin de especies reactivas del oxigeno. En etapas posteriores la cromatina se condensa y se fragmenta. Finalmente la clula genera un numero variable de vesculas de diferentes tamaos (cuerpos apoptticos) rodeados de membrana plasmtica ntegra, que contienen parte de la cromatina y de los organelos celulares. A nivel bioqumico, cuando un inductor llega a su clula blanco, avanza a travs de ella gracias a intermediarios que dirigen dicha seal hacia la maquinaria enzimatica responsable de los cambios . esta maquinaria la constituyen principalmente las caspasas, tanto la apoptosis va intrnseca como la va extrnseca, provoca la activacin de estas enzimas. Las caspasas activadas dependen del estimulo. Las caspasas constituyen una familia de proteasas de cistena que muestran entre si similitud en la secuencia de aminocidos, en estructura y en especificidad; sus sustratos deben contener una molcula de cido aspartico y requieren del reconocimiento de almenos otros cuatro aminocidos en el sitio de ruptura. Adems de especfica la ruptura es muy eficiente. De hecho algunas caspasas pueden ser sustrato de otras as como de si mismas va auto procesamiento. Las caspasas son sintetizadas como zimgenos, por lo que requieren de un procesamiento proteo ltico para volverse activas. Los precursores de las caspasas estn constitutivamente expresadas en las clulas vivas y su actitud esta regulada por una combinacin de proteasas regulatorias, cofactores, umbrales y mecanismos de retroalimentacin. Dentro de las funciones de las caspasas destacan la inactivacin de protenas que normalmente protegen a la clula de la muerte apoptotica, de aquellas involucradas en la reparacin de DNA y de las encargadas de la organizacin del cito esqueleto; participan en la destruccin de la lamina nuclear, en la activacin de CAD, e inducen a

la clula a expresar seales que la marcan para ser fagocitadas. Uno de los eventos caractersticos es la fragmentacin del DNA por la nucleasa CAD. La va extrnseca puede ejemplificarse con la seal pro apoptptica que se desencadena por la unin de Fas con su ligando. FasL (CD95L) es un trmero que al unirse con Fas (CD95 o APO-1) induce la trimerizacion de este. Esta unin provoca el reclutamiento del complejo DISC al dominio citoplasmtico de Fas. DISC contiene protenas adaptadoras que permiten la unin de la pro- caspasa 8 favoreciendo su auto activacin, la caspasa 8 puede entonces activar a las caspasas efectoras 3, 6 y 7, adems puede activar a Bid y esta inducir la liberacin del citocromo C y Apaf-1 de la mitocondria para formar el apoptosoma y activar tambin la va intrnseca. La va intrnseca o mitocondrial se activa por estrs, y otras seales que provocan la translocacion a la mitocondria de miembros por apoptticos. Lo anterior provoca la liberacin de citocromo C al citosol, lo cual se acompaa de perdida del potencial de membrana mitocondrial y desestabilizacin de la membrana externa de la mitocondria. En el citosol el citocromo C se une a Apaf-1 en presencia de ATP y forma el complejo conocido como apoptosoma, el cual activa a la pro-caspasa 9, la cual puede activar a las caspasas 3, 6 y 7, estas son las principales responsables de los cambios morfolgicos y bioquimicos que ocurren el la clula apoptotica ya que entre sus sustratos se encuentran protenas del cito esqueleto, de la membrana nuclear y las encargadas de la reparacin del DNA entre otras. En otras palabras se degradan los cidos nucleicos y hay ms cambios en la membrana celular. Los cuerpos apoptticos son fagocitados por macrfagos impidiendo la salida del contenido celular al exterior y evitando inflamacin. En esta fase se activan las endonucleasas que se encargan de fragmentar el DNA; adems se producen cambios marcados en el citoesqueleto, y se condensa la cromatina. 3.- Fase de eliminacin: Aunque la muerte celular ocurre de manera constante en un organismo, las clulas que estn muriendo por apoptosis son rara vez vistas in situ debido a que son rpida y eficientemente removidas por clulas fagocticas. Los responsables de esto son los fagotitos profesionales, pero existen evidencias de que fagotitos no profesionales, como las clulas dendrticas, epiteliales y fibroblastos tambin participan en la remocin. Son varios los mecanismos de reconocimiento de las clulas apoptoticas, lo cual parece ser un evento conjunto que involucra varios receptores, que pueden funcionar aislada, simultnea o secuencial mente. La existencia de ms de un mecanismo de reconocimiento asegura la remocin eficiente, disminuyendo la posibilidad de que estas clulas liberen su contenido citoplasmtico y causen dao. Es posible que sea el estimulo que causo la muerte de la clula, el tipo de clula apoptotica y la naturaleza del fagocito involucrado, lo que pueda regular el o los mecanismos utilizados para remover la clula. In requerimiento esencial para que las clulas sean reconocidas y fagocitadas es la expresin de un ligando adecuado en la superficie celular y de su contraparte en el fagocito. Se ha observado que varias molculas de superficie en las clulas fagocticas median el reconocimiento y la internalizacion de las clulas apoptoticas. Entre ellas se puede citar algunas lectinas, integrinas, receptores scavenger, ABC transportadores, CD14 y receptores del complemento. En algunos casos la presencia o ausencia de estas molculas dependen del origen del fagocito, de su distribucin anatmica y de su estado de activacin. Uno de los mecanismos mas estudiados y que al parecer es una seal que siempre esta presente en los

linfocitos apoptticos, es la perdida de la asimetra de la membrana celular, la cual tiene como consecuencia la exposicin en la membrana externa de molculas de fosfatidilserina (FS), que de manera normal estn restringidas a la parte interna. Se ha expuesto que la exposicin de la FS es una seal suficiente para inducir la fagocitosis de las clulas que la expresan Va extrnseca La va extrnseca o de los "receptores de muerte" establece conexiones con el espacio extracelular, recibiendo seales proapoptticas desde el exterior y de las clulas vecinas. Dos familias de receptores se han identificado con estas caractersticas: la protena Fas y el factor de necrosis tumoral (TNF). La protena transmembrana Fas en su porcin intracelular enlaza con un factor intermedio denominado FADD (factor associated death domain), nombre que slo seala que est comprometido con la zona de la molcula Fas que participa en la muerte celular, activando las caspasas-8 y -10. En cambio, si la parte interna de la molcula se asocia a otro factor llamado DaXX, se activan proten-kinasas que conducen al efecto contrario, es decir, estimulan el ciclo celular y la mitosis. Esta va Fas permanece inactiva hasta que se produce en su parte externa el enlace con un cofactor llamado ligando Fas, protena que acta como detonador que enciende una va en que slo las caspasas estn inactivas y el resto de la cadena est preparado para recibir el enlace exterior. Esta caracterstica permite actuar con gran rapidez sin necesidad de sintetizar otros factores. Algo similar sucede con el otro receptor de membrana TNF. Su porcin intracelular conecta con complejos intermedios como el Tradd (TNF receptor associated death domain) y Raidd (receptor associated interleukine death domain) que activan caspasas "iniciadoras" de la apoptosis. Pero si se asocian a otro complejo llamado Traf (TNF receptor associated factor) activan proten-kinasas y estimulan la proliferacin celular, es decir, el efecto contrario. Las alternativas de una misma va de actuar en pro o en contra de la apoptosis se repite en otros mecanismos. Va intrnseca o mitocondrial Otra va de induccin de apoptosis es la va llamada mitocondrial. Las protenas de la familia de Bcl-2 regulan la apoptosis ejerciendo su accin sobre la mitocondria. La activacin de protenas pro-apoptticas de la familia de Bcl-2 produce un poro en la membrana externa de las mitocondrias que permite la liberacin de numerosas protenas del espacio intermembrana; entre ellas, el citocromo c. El citocromo c, una vez en el citosol, activa un complejo proteico llamado "apoptosoma", que activa directamente a la caspasa-9. Una vez que la caspasa-9 est activada, sta activa a las caspasas efectoras como la caspasa-3, lo que desencadena las ltimas fases de la apoptosis. Las protenas de la familia de Bcl-2 se agrupan en tres familias: la familia de las protenas antiapoptticas (Bcl-2, Bcl-Xl, Mcl-1 y otras); la familia de protenas proapoptticas de tipo "multidominio" (Bax y Bak) y las protenas proapoptticas de tipo "BH3-only" (Bid, Bim, Bad y otras). Las protenas tipo multidominio pueden producir poros por si solas en liposomas, lo que indica que probablemente son suficientes para formar el poro mitocondrial que permite la liberacin del citocromo c.

Las protenas tipo BH3-only activan a estas protenas, y las antiapoptticas inhiben la formacin del poro. Estas protenas son los reguladores ms importantes del proceso de apoptosis. La va mitocondrial puede conectarse tambin con la va de receptores de muerte, ya que una vez activada la caspasa-8 por dichos receptores, esta caspasa activa a la protena Bid, lo que provoca la apertura del poro mitocondrial y la activacin de la caspasa-9. Funciones de la apoptosis Eliminacin de tejidos daados o infectados La apoptosis puede ocurrir, por ejemplo, cuando una clula se halla daada y no tiene posibilidades de ser reparada, o cuando ha sido infectada por un virus. La "decisin" de iniciar la apoptosis puede provenir de la clula misma, del tejido circundante o de una reaccin proveniente del sistema inmune. Cuando la capacidad de una clula para realizar la apoptosis se encuentra daada (por ejemplo, debido a una mutacin), o si el inicio de la apoptosis ha sido bloqueado (por un virus), la clula daada puede continuar dividindose sin mayor restriccin, resultando en un tumor que puede ser de carcter canceroso. Por ejemplo, como parte del "secuestro" del sistema gentico de la clula llevado a cabo por los papillomavirus humanos (HPV), un gen denominado E6 se expresa originando un producto que degrada la protena p53, vital para la ruta apopttica. Tambin condiciones de stress como la falta de alimentos, as como el dao del ADN provocado por txicos o radiacin, pueden inducir a la clula a comenzar un proceso apopttico. Una ejemplo sera la apoptosis mediada por la enzima nuclear, poli-ADPribosa polimerasa-1 (PARP-1), crucial en el mantenimiento de la integridad genmica. Un activacin masiva de dicha enzima puede deplecionar la clula de nucletidos ricos en energa, provocando una cadena de transduccin de seales del ncleo a la mitocondria que iniciara la apoptosis. Desarrollo La muerte celular programada es parte integral del desarrollo de los tejidos tanto de plantas (viridiplantae) como de animales pluricelulares (metazoa), y no provoca la respuesta inflamatoria caracterstica de la necrosis. En otras palabras, la apoptosis no se parece al tipo de reaccin resultante del dao a los tejidos debido a infecciones patognicas o accidentes. En lugar de hincharse y reventar -y, por tanto, derramar su contenido, posiblemente daino, hacia el espacio intercelular-, las clulas en proceso de apoptosis y sus ncleos se encogen, y con frecuencia se fragmentan. De esta manera, pueden ser eficientemente englobadas va fagocitosis y, consecuentemente, sus componentes son reutilizados por macrfagos o por clulas del tejido adyacente. Homeostasis En un organismo adulto, la cantidad de clulas que componen un rgano o tejido debe permanecer constante, dentro de ciertos lmites. Las clulas de la sangre y de piel, por ejemplo, son constantemente renovadas por sus respectivas clulas progenitoras. Por lo tanto, esta proliferacin de nuevas clulas tiene que ser compensada por la muerte de otras clulas. A este proceso se le conoce como homeostasis, aunque algunos

autores e investigadores como Steven Rose y Antonio Damasio han sugerido homeocinesis como un trmino ms preciso y elocuente. La homeostasis se logra cuando la relacin entre la mitosis y la muerte celular se encuentra en equilibrio. Si este equilibrio se rompe, pueden ocurrir dos cosas:

Las clulas se dividen ms rpido de lo que mueren, desarrollando un tumor. Las clulas se dividen ms lentamente de lo que mueren, producindose un grave trastorno de prdida celular.

Ambos estados pueden ser fatales o potencialmente dainos. Regulacin del sistema inmunitario Ciertas clulas del sistema inmunitario, los linfocitos B y linfocitos T, son sofisticados agentes de la respuesta defensiva del organismo frente a infecciones as como clulas propias que hayan adquirido o desarrollado algn tipo de malignidad. Para llevar a cabo su trabajo, las clulas B y T deben tener la habilidad de discriminar lo propio de lo extrao y lo sano de lo enfermo, gracias a la especialidad de sus receptores. De hecho, los linfocitos T citotxicos pueden ser activados por fragmentos de protenas expresadas inapropiadamente (derivadas, por ejemplo, de una mutacin maligna) o por antgenos extraos producidos como consecuencia de una infeccin intracelular. Despus de activarse tienen la capacidad de migrar, proliferar y reconocer las clulas afectadas, induciendo una respuesta de muerte celular programada. Los receptores de las clulas B y T inmaduras no se generan por procesos de una elevada precisin, sino por procesos aleatorios de elevada capacidad para generar variabilidad. Esto significa que muchas de estas clulas inmaduras pueden no ser efectivas (porque su receptor no sea capaz de unir ningn antgeno conocido) o ser peligrosas para el propio organismo porque sus receptores sean capaces de reconocer con elevada afinidad antgenos propios. Si estas clulas fuesen liberadas sin otros procesamientos, muchas podran volverse autorreactivas y atacar clulas sanas. El mecanismo por el que el sistema inmune regula este proceso es la eliminacin tanto de los no efectivos como los potencialmente autorreactivos mediante apoptosis. Como se ha descrito en los anteriores apartados, todos los tejidos dependen de una continua recepcin de seales de supervivencia. En el caso de las clulas T, mientras se desarrollan y maduran en el timo, las seales de supervivencia dependen de su capacidad para reconocer antgenos extraos. Aquellas que no superan esta prueba, alrededor de un 97 % de las clulas T producidas, son eliminadas por apoptosis. Las supervivientes son testadas a su vez frente a antgenos propios, y aquellas que reconocen estos antgenos con elevada afinidad son eliminadas de la misma manera. Por lo tanto, el desarrollo de un sistema inmune maduro y efectivo depende de una serie de reguladores positivos y negativos de las vas de apoptosis. GENES QUE PARTICIPAN EN LA APOPTOSIS CELULAR

Bcl-2

El bcl-2 (B cell leukemia/lymphoma 2 genes) fue el primer proto-oncogen detectado y fue asociado con procesos malignos de las clulas B. Durante la maduracin de las clulas B puede ocurrir una traslocacin cromosomal en el gen bcl-2; ello provoca un aumento en la expresin de la protena citoplasmtica Bcl-2, que origina inhibicin de la apoptosis en clulas B y da por resultado la supervivencia de la clula transformada. Est demostrado que la sobre expresin del gen bcl-2 en linformas inducidos experimentalmente, se asocia con la proliferacin neoplsica por los efectos inhibitorios de Bcl-2 sobre las vas de apoptosis. Este gen facilita el aumento de la supervivencia de la clula transformada y de este modo aumenta la posibilidad de futuras aberraciones genticas que pueden conducir a la progresin maligna. La expresin de este gen en algunos tipos de cncer es un marcador de mal pronstico. El gen bcl-2 forma parte de una familia de genes que intervienen en la regulacin de la supervivencia de la clula. Los miembros de la familia Bcl-2 estn integrados por: Bcl-2, Bax, Bad, Bcl-X1, Bcl-Xs, Mcl-1. El destino de una clula de morir o sobrevivir est determinado por las diferencias en la expresin de estas protenas, actuando algunas como promotoras y otras como inhibidoras de las seales de apoptosis.

Apaf-1
La protena Apaf-1 (Apoptosis protease-activating factor-1) es un regulador clave de la va apopttica mitocondrial, siendo el elemento central del complejo multimrico denominado apoptosoma, formado tambin por la procaspasa-9 y el citocromo c. Las actividades Apaf se describieron por primera vez en experimentos in vitro para recuperar la actividad caspasa a partir de fracciones citoslicas de clulas HeLa. Apaf-1 result ser una molcula adaptadora con homologa con la protena CED-4 de C. elegans, mientras que Apaf-2 y Apaf-3 fueron identificados como el citocromo c y la caspasa-9 respectivamente

p53
El gen p53, tambin llamado el "guardin del genoma", se encuentra en el brazo corto del cromosoma 17 (17p13) y codifica una protena nuclear de 53 KDa, de ah su nombre. Resulta esencial para inducir la respuesta de la clula ante el dao del ADN, deteniendo el ciclo celular en caso de mutacin. El gen p53 es un gen supresor tumoral que, por lo tanto, desempea un papel importante en apoptosis y control del ciclo celular. P53 defectuoso podra permitir que las clulas anormales proliferen dando por resultado cncer (alrededor de un 50 % de todos los tumores humanos contienen mutaciones en p53). p53 tiene tres funciones importantes:

Detencin del ciclo celular en el punto de control G1/S si reconoce el dao en el ADN para evitar su replicacin.

Activacin de protenas de reparacin del ADN cuando reconoce dao o mutacin en el ADN. Iniciacin de la apoptosis si el dao en el ADN es irreparable para evitar as la proliferacin de las clulas que contienen ADN anormal.

PROMOTORES

INHIBIDORES

-P53 bcl-xs bax bak c-myc bad Nbk ced-3, R-ras CPP32 reaper TNF-R Fas/APO1/CD95 ICE nedd-2/ich-1 TX/Ich-2/ICErell ICErell-II

p55

bcl-xL bcl-w mcl-1 ced-9 E1B19K p35, crmA EBVBHRF-1 bag-1 Dad-1 A1

IAP