Tema 1: Estructura y funcin de las proteinas, aminocidos.

Protenas: son las macromolculas ms verstiles de los seres vivos y sus funciones son: Actuar como catalizadores Transporte de molec. Apoyo mecnico y protecc inmunolgica. Transmiten impulsos nerviosos Controlan el crecimiento y diferenciacin Reserva: como la ovolalbmina del huevo o la caseina de la leche. Propiedades: Son polmeros lineales constitudos a partir de monmeros=aa. La funcin de la proteina depende directamente de los aa que la compongan, ya que les indicar como han de plegarse sobre s mismas. Por lo tanto, las proteinas representan la transicin desde el mundo unidimensional (seca a) hasta el mundo tridimensional (prot plegada sobre s misma). Las proteinas tienen muchos grupos funcionales, que incluyen alcoholes, tioles, tiosteres.cuando se combinan esta diversidad de grupos es la responsable del amplio espectro de lsd fx de las prot. Las proteinas pueden interaccionar entre si y con otras macromolculas para formar asociaciones complejas. Algunas proteinas son muy rigidas, mientras que otras presentan una flexibilidad limitada, las rgidas pueden funcionar como elementos estructurales (ej: citoesqueleto) y las flexibles como bisagras, muelles.. Aminocidos: constan de un carbono central (llamado carbono alfa) unido a un grupo amino, un grupo cido carboxlico, un tomo de hidrgeno y un grupo R caracterstico (cadena lateral). Slo los aa L son los aa constituyentes de las protenas. Los aa en disolucin a pH neutro existen como aa bipolares conocidos tambin como Zwitteriones. Estructura Zwiterion

Clasificacin aa: Grupos R no polares o hidrfobos:

En las protenas se encuentran a veces aa no estndar que resultan de la transformacin de los aa anteriores: Metilaciones: Para que algo se metile necesitamos OH o NH Carboxilaciones: NO lo hacen nunca Hidroxilaciones: tpico de prolinas y lisinas Glicosilaciones: enganchan 1 azcar. Necesitan amida (Asn y Gln) Fosforilaciones: Se necesita OH (borracho)-- Ser,Thr y Tyr. Los enzimas que fosforilan se llaman quinasas. Formacin de puentes disulfuro: SLO pueden hacerlo las Cys!. o Entre 2 cadenas: Inter. 1 cys o Entre 1 misma cadena: intra 2 cys.

Estructura de los aa 1. Est., primaria

La est. Primaria se define como la secuencia de aa que define la est de la protena. Las protenas son polmeros lineales formados por la unin del grupo alfa carboxilo de un aa al grupo alfa amino de otro aa mediante un enlace peptdico. Este enlace forma un dipptido que se acompaa con la prdida de una molcula de agua. Una serie de enlaces aa unidos por enlaces peptdicos forman una cadena polipeptdica y cada unidad aminoacdica en un polipptido se conoce como residuo. Una cadena polilpep. Tiene polaridad porque sus extremos son diferentes (extremo amino terminal y carboxi term). Est formada por una parte inmvil= cadena principal y una parte variable=cadena lateral. El enlace peptdico tiene carcter parcial de doble enlace por lo que hace que se impida la rotacin a su alrededor y es la causa de la planaridad del enlace. Un enlace peptdico tiene dos configuraciones posibles, la trans y la cis; Trans: Los t de carbono alfa estn en lados opuestos del enlace peptdico. Cys: Estn en el mismo lado del enlace peptdico. Casi todos los enlaces en las protenas son trans. A diferencia del enlace peptdico, los enlaces entre el grupo amino y el grupo carbonilo de otro aa presentan libertad de rotacin lo que permite a las protenas plegarse de forma diversa.

El ngulo de giro alrededor del enlace entre el t de N y el de C alfa se conoce como fi, mientras que el del carbono alfa y el carbonilo se llama psi. Estos ngulos determinan la arquitectura de la cadena polipeptdica. RAMACHANDRAN descubre que no todos los ngulos de giro son posibles debido a choques estricos entre t. La exclusin estrica, el hecho que dos t no puedan estar en el mismo sitio al mismo tiempo, puede ser un poderoso pp organizativo. 2. Est. Secundaria: Se refiere al ordenamiento espacial de los residuos de los aa que estn cerca de la secuencia. a. Hlice alfa: Est. Helicoidal estabilizada por puentes de H intracatenarios. Es una estructura en forma de cilindro formada por: i. Esqueleto Helicoidal: plegado que forma la parte interior del cilindro. ii. Cadenas laterales: se extienden hacia fuera de forma helicoidal. Se encuentra estabilizada por puentes de H entre los grupos NH y CO de la cadena principal a excepcin de los aa que estn cercanos al final de una hlice alfa. Las hlices pueden ser dextrogiras o levogiras, pero las hlices alfa presentes en las protenas slo son DEXTROGIRAS. N aa por vuelta: 3,6 aa Grado de rotacin: 100 Altura del giro: 5,4 Amstrongs Distancia entre aas adyacentes: 1,5 A. Disposicin de las cadenas: SIEMPRE paralela. Puentes de H: Intracatenarios (dentro de la hlice) Puentes disulfuro: Intercatenarios. Las hlices alfa estn desestabilizadas por la presencia de: Prolina: debido a que es rgida. Aa cargados + o Aa voluminosos Presencia de Gly: es tan flexible que lo desestabiliza todo.

Las hlices alfa estn favorecidas por la presencia de: Aa con residuo cargado neg en el extremo N terminal Aa residuo cargado pos en el extremo C terminal Presencia de cisterna, que favorece la formacin de puentes S-S b. Lmina Beta: Se estabilizan por puentes de H entre las cadenas polipeptdicas. La hebra beta es una cadena polipeptdica que forma parte de una hoja beta y est casi completamente extendida en vez de estar enrollada o empaquetada como la hlice alfa. Disposicin de las cadenas:

Disposicin entre cadenas: 7 Amstrongs

Distancia entre aa adyacentes: 3,5 A Puentes de H: Intermoleculares NO EXISTEN puentes disulfuro Giros beta: Cuando las protenas alfa se disponen en beta, ricas en pro y lis. 3. Est. Terciaria: Es la disposicin en 3D en el espacio de la protena, las prot solubles en agua se pliegan en est compactas con un ncleo no polar. La forma global de la cadena polipeptdica se la protena se conoce como est.terciaria. El interior de la cadena est formado por residuos NO POLARES (como valina, leucina, metionina y fenilalanina) mientras que el exterior est formado por R. POLARES. Slo hay 2 compuestos POLARES en el interior de la prot, que son dos residuos de histidina, que desempean funciones vitales para la unin del hierro y O2 en el caso de la mioglobina. Dominios: Existen cadenas polipeptdicas que se pliegan en dos o ms regiones compactas pudiendo estar conectadas por un segmento flexible de la cadena polipeptidica, como si fuese un collar de perlas a ello se le llama dominio y tienen un tamao entre 30 y 400 residuos de aa. Est. Cuaternaria: No la tienen todas y depende de si la proteina tiene varias subunidades (protenas oligomricas Hb), Mb no tiene est cuaternaria porque slo tiene una subunidad mientras que Hb tiene 4. Por lo que la est. Cuaternaria se refiere al ordenamiento espacial de las subunidades y la naturaleza de sus interacciones . La forma ms simple de est. Cuaternaria es un Dmero que consta de 2 subunidades idnticas.

4.

Desnaturalizar: es perder la estructura nativa, entendemos por est. Nativa como mnimo el conjunto de est 1, 2 y 3, algunas pueden tener hasta 4. Agentes desnaturalizantes: pH extremos T Detergentes orgnicos (etanol, acetona) Urea Clorhidrato de guanidina Beta mercaptoetanol: rompe los enlaces disulfuro en condiciones reductoras. Las desnaturalizaciones suelen ser Reversibles a no ser que nos pasemos. Mtodos de separacin de las protenas Dilisis: membrana semipermeable que separa segn el tamao. Precipitacin selectiva: Se les aade (NH4)2SO4 , que es un agente precipitante y van cayendo proporcionalmente segn su tamao, primero caen las ms gordas. Centrifugacin: Tambin se basa en el tamao, precipitan segn el tamao. Cromatografa de intercambio inico: Separa en funcin de la carga. o Carboximetilcelulosa: se quedan enganchadas Las protenas positivas liberando H+ por eso La disolucin sale cida, se produce intercambio Catinico. DEAE-Celulosa: retiene las Cargas neg liberando OH- produciendo Medio bsico, hay intercambio aninico.

Cromatografa de gel de filtracin ( cromatografa en columna): separa segn el tamao, primero caen las ms grandes y luego las ms pequeas (porque estas se entretienen). Cromatografa de afinidad: Tcnica de Western Bloot: Se basan en el antgeno- anticuerpo, separa segn afinidad. Ag= prot Ac= anticuerpos. HPLC: cromatografa lquida de alta resolucin (alta presin).

Electroforesis: 3 tipos E. en gel de poliacrilamida= PAGE: Separa segn la carga y por el tamao, llegando primero las pequeas. E.PAGE-SDS (dodecilsulfato sdico): da carga neg a todas las prot, todas irn al nodo separando por tamao y por carga ya que unas son mas negativas que otras.

E.PAGE-SDS con previo tratamiento con betamercaptoetanol: provoca que se rompan los enlaces por puente disulfuro, en condiciones reductoras permite saber si una protena es oligomrica. Isoelectroenfoque: tcnica electrofortica que trabaja con un gradiente de pH y se basa en separar las protenas segn su PI, cuando pH=PI la prot se para. Determinacin de la composicin y secuenciacin: Reaccin de la ninhidrina: si tienes una muestra, le pones ninhidrina y sale azl es pq existen aa. Mtodo de la fluorescamina: si sale fluorescente es pq hay aa. Reaccin de la fluorodinitrobenceno (mtodo de Sanger): detecta el extremo amino. Reaccin con cloruro de dansilo o dabsilo: detecta tb el extremo amino. Reaccin con el enzima carboxipeptidasa: detecta el extremo carboxi Reaccin con hidracina: detecta el extremo carboxi. Reaccin con bromuro de ciangeno (BrCN): es un enzima que rompe por Lys o Arg por el extremo carboxi! Degradacin de Edman: secuenca las protenas rompindose los aa de uno en uno. o Fenilisotiocianato: reactivo que se engancha al extremo amino y forma un ciclo llamado fenilhidantoina. Espectroscopia de masas (EM-Maldi y EM-ESI) determinamos el PM de la molec. Cristalografia de rayos X: para saber la est 3D pero han de estar cristalizadas. Resonancia magntica nuclear: para saber la est 3D. Mtodos computacionales: para predecir la estructura de la molec. Tcnica ELISA: tcnica AC-AG.

PAGS DE LA 10 A 16 GRAPADAS.

Enzimas: Conceptos bsicos y cintica

Enzimas: son catalizadores de los sistemas biolgicos, se los considera como protenas con actividad cataltica. Las caractersticas ms importantes son su elevado poder cataltico y su elevada especificidad. La catlisis tiene lugar en el centro activo. Los ribosomas son un tipo de enzima que no se considera proteina. Propiedades: No se alteran No desplazan equilibrios Disminuyen la e de activacin T Son muy especficos con el sustrato. Elevada eficacia Poseen un centro activo en general. Isoenzimas: Son enzimas de estructura diferente que catalizan la misma reaccin, por ejemplo la hexoquinasa o la glucoquinasa. Isoformas: son las diferentes formas de una enzima que varian en la manera de enroscarse, puede variar en un aa. Zimgenos o proenzimas: es una est. Ms grande q el enzima que actuar, es una forma inactiva precursora que necesita de una protelisis para dar la enzima. La anhidrasa carbnica es uno de los enzimas ms rpidos que se conocen. Los enzimas pueden acelerar la reaccin hasta un milln de veces. Una enzima cataliza normalmente una sola reaccin qumica o un grupo de reacciones estrechamente relacionadas. Enzimas proteolticos: Se consideran aquellos enzimas que actan sobre un grupo prosttico y la reaccin catalizada por estos enzimas es la hidrlisis de un enlace peptdico o proteolisis. La especificidad de una enzima se debe a la interaccin precisa del sustrato con el enzima. Esta precisin es el resultado de la compleja est. Tridimensional de la prot enzimtica. Cofactores: es un tomo, in o molcula que participa en el proceso cataltico sin ser sustrato o enzima. Puede contribuir en la unin de lenzima al sustrato o en la catlisis. Una enzima sin su cofactor recibe el nombre de apoenzima, mientras que cuando tiene el cofactor se le llama holoenzima. Apoenzima + cofactor= holoenzima Coenzima: son aquellos cofactores formados por molculas orgnicas pequeas, normalmente derivados de las vitaminas, estos coenzimas pueden estar unidos a la enzima fuertemente o dbilmente. Si la unin es muy fuerte reciben el nombre de grupos prostticos, si son uniones dbiles reciben el nombre de cosustratos. Tipos de enzimas segn la reaccin que catalizan: o Oxidoreductasas: reacciones de oxidacin-reduccin, ej: lactatoDH o Transferasas: Transeferencia de grupos, ej: nuclesido monofosfato quinasa o Hidrolasas: reacciones de hidrlisis, ej quimiotripsina o Liasas: Adicin o separacin de grupos para formar enlaces dobles, ej: fumarasa o Isomerasas: Forman ismeros (transferencia intramolec de grupo), ej: triosa fosfato isomerasa o Ligasas: Uniones covalentes, ej: aminoacil- tRNA sintetasa.

Energia libre de una enzima: o Una reaccin puede tener lugar espontneamente slo si AG es negativo (reacciones exergnicas) o Un sistema est en equilibrio y no tiene lugar un cambio neto si AG es cero. o Una reaccin no puede transcurrir espontneamente si AG es positivo, se requiere un aporte de energa para que se de la reaccin (reacciones endergnicas). o El AG de una reaccin SLO depende de la energia libre de los productos (estado final) la e. Libre de los reactivos (e inicial) AG= E final E incial. o El AG de una reaccin es independiente del camino de la transformacin. o AG No proporciona informacin sobre la v de reaccin. o Un AG negativo indica que la reacc puede llevarse a cabo espontneamente pero no indica que se pueda llevar a cabo a v apreciable. o Los enzimas aceleran las reacciones mediante una disminucin de la AG. El cambio de E libre de una reacc est relacionada con la cte de eq.

FORMUPUNTS O PAG 194 Los enzimas modifican slo la v de reacc y no alteran el eq de la reacc. Una enzima no puede modificar una reaccin simplemente aumentar su velocidad ni tampoco su posicin, la posicin del equilibrio es una funcin que depende slo de la diferencia de E libre entre los reactantes y los productos.

Catlisis enzimtica:
Se divide en diferentes pasos: Formacin de un complejo enzima-sustrato: o El centro activo es una hendidura tridimensional formada por unos grupos que provienen de diferentes partes de la secuencia lineal de aa. o El centro activo supone una porcin relativamente pequea del volumen total del enzima o Los sustratos se unen a los enzimas por fuerzas dbiles. o La especificidad del enlace depende de la disposicin exactamente definida de los at del centro activo. Modelo Michaelis- Menten o KM: es aquella concentracin de sustrato a la cual la velocidad de reaccin se hace la mitad de su valor mximo. Casi todos tenemos dos formas de acetaldehdo deshidrogenasa: una forma mitocondrial de baja KM y una forma citoslica de alta KM. En las personas sensibles al alcohol el enzima mitocondrial es menos activo debido a la sustitucin de un slo aa y por lo tanto el acetaldehdo se transforma slo por el enzima citoslico. Como esta enzima tiene una KM alta, conviete menos cantidad de acetaldehdo en acetato, este pasa a la sangre y se genera una patologa. Nmero de recambio de la enzima: es el nmero de molculas de sustrato convertidas en producto por unidad de tiempo. Tambin se le llama Kcat. Depende de la concentracin de enzima pero a la inversa, es decir necesitamos poca concentracin de enzima para que funcione. Desplazamiento secuencial: Todos los sustratos se unen a la enzima antes de que se libere cualquier producto, consecuentemente, en una reacc bisustrato se forma un complejo ternario entre el enzima y otros sustratos. Existen dos tipos de mecanismos secuenciales: ordenado, cuando el sustrato se une al enzima en una secuencia definida, y al azar. En el ordenado, el coenzima se une siempre primero y el lactato se libera siempre el primero. Reacciones de doble desplazamiento (reacciones ping-pong): uno o ms productos se liberan antes de que todos los sustratos se unan al enzima. La caracterstica definitiva de las reacc de doble desplazamiento es la existencia de un intermediario del enzima sustituido, en el cual el enzima se modifica temporalmente.

Los enzimas alostricos no siguen la ecuacin ni la grfica de Michaelis-Menten, debido a que tienen varias subunidades y varios centros activos, suelen representarse como curvas sigmoideas. Una posible consecuencia de esta interaccin entre subunidades es que la unin del sustrato de transforme en cooperativa, es decir, la unin del sustrato a un centro activo del enzima facilita la unin del sustrato a otros centros activos.

Inhibicin de las enzimas Puede ser de dos tipos: Irreversible: el inhibidor queda, covalentemente o no, unido al enzima o ligado tan fuertemente a l que su disociacin es muy lenta. Ej: penicilina. Reversible: se caracteriza por el contraste por la rpida disociacin del complejo enzima-inhibidor. 2 tipos de inhibicin reversible: Competitiva: el enzima puede unirse al sustrato formando el complejo ES o al inhibidor formando el EI pero no a los dos a la vez. Un inhibidor competitivo disminuye la v de catlisis reduciendo la proporcin molculas de enzima que quedan ligadas al sustrato. Puede contrarestarse si se aumenta la concentracin de sustrato. Si (S)= el inhibidor se va (reversible) No competitiva: el inhibidor y el sustrato pueden unirse simultneamente a una molcula de enzima en diferentes centros de unin, este acta disminuyendo el nmero de recambio de la enzima, en vez de disminuir la proporcin de molculas enzimticas que se han ligado al sustrato. (S)= el inhibidor no se va (reversible)

Si

La racemizacin de las prolinas tiene lugar a travs de un estado de transicin en el que el tomo de carbono alfa tetradrico se convierte en trigonal por la prdida de un protn.En este enlace trigonal sus tres enlaces estn en el mismo plano. Anlogos del sistema de transicin: funciones: Proporcionan conocimientos sobre los estados catalticos Sirven como inhibidores potentes y especficos de las enzimas Pueden emplearse como inmungenos para generar una amplia gama de nuevos catalizadores.

Vitaminas: Se consideran con frecuencia las precursoras de las enzima. Las vitaminas hidrosolubles funcionan como coenzimas mientras que las liposolubles actan en procesos de coagulacin de la sangre y de la visin.

Metabolismo: conceptos bsicos.

Se entiende por metabolismo el conjunto de reacciones y procesos fsico-qumicos que tienen lugar dentro de la clula. Los seres vivos necesitan E para: La realizacin del trabajo mecnico para la contraccin muscular Transporte activo de iones y molculas Sntesis de macromolculas y biomolculas a partir de precursores sencillos. El metabolismo est formado por un conjunto de reacciones que en muchas ocasiones tienen relacin entre si y estn interconectadas. Estas reacciones se clasifican en la clula en dos tipos de vas: Aquellas que convierten la energa en energa celular= reacciones catablicas (catabolismo) Aquellas que precisan de un aporte energtico para su

funcionamiento=reacciones anablicas (anabolismo).

Las formas tiles de energa producidas en el catabolismo se pueden utilizar en el anabolismo para generar estr. Complejas a partir de sencillas. En la mayora de las vas se utiliza un nmero reducido de transportadores activos como el ATP, el NADPH o el Acetil-Coa. Una reaccin termodinmicamente desfavorable puede ir dirigida por otra favorable, para ello se han de cumplir 2 requisitos: Las reacciones individuales han de ser especficas El conjunto que de las reacc. Que forman la va debe ser termodinmicamente favorable. El cambio de energa libre total para una serie de reacciones acopladas qumicamente es igual a la suma de los cambios de energa libre en las etapas individuales. Es decir, la E. total es la suma de las e. parciales, pudiendo ser una de las e parciales termodinmicamente desfavorable, pero si la suma de las dos E da negativo se convierte en una reaccin termodinmicamente favorable. ATP (Adenosin Trifosfato): formado por una adenina, una ribosa y un complejo trifosfato. La forma activa del ATP es un complejo de ATP con Mg2+ o Mn2+.El ATP se considera una molcula rica en energa porque su componente trifosfato contiene dos enlaces anhdrido fosfrico. La energa libre desprendida en la hidrlisis del ATP se utiliza para impulsar reacciones que requieren un aporte de energa libre, como son las de la contraccin muscular. A su vez, se forma ATP a partir de ADP y Pi cuando se oxidan las molculas combustibles en los seres quimiotrofos. Este ciclo ADP-ATP es la forma fundamental de intercambio de energa en los seres vivos.

La transferencia de grupos fosfato es una forma comn de acoplamiento energtico, al igual que la hidrlisis del ATP y se usa para la transmisin intracelular de informacin. El ATP se diferencia de el resto de grupos trifosfato de otras molculas (Ej G3P) debido a que este tiene un mayor potencial de transferencia de fosforilos. Se ha observado que el ATP no es la molcula que tiene una mayor transferencia de grupos fosforilo, algunos compuestos como: Fosfoenolpiruvato (PEP) 1,3 bisfosfoglicerato (1,3 BPG) Creatina fosfato tienen una mayor transferencia de grupos fosforilo, por lo que hace que el ATP tenga una posicin intermedia de transferencia de grupos fosforilo, lo que le permite funcionar perfectamente. La creatina fosfato en el msculo de los vertebrados es un reservorio de grupos fosforilo de alta E. que puede transferirse a ATP para regenerar el ATP a ADP en situaciones de ejercicio intenso, esta reaccin est catalizada por la creatina quinasa.

Etapas de la extraccin de energa de los alimentos: Las molculas de los alimentos se fragmentan hasta unidades ms pequeas Estas molculas se degradan hasta unas unidades simples que desempean fx en el metabolismo. Se produce ATP a partir de la oxidacin completa del Acetil- Coa a partir del ciclo del cido ctrico y la fosforilacin oxidativa.

Las reacciones clave del metabolismo siempre se repiten: Reacciones de oxidacin-reduccin: que forman parte del ciclo del cido ctrico, donde se oxida completamente el fragmento activado de dos carbonos de Acetil-CoA hasta dos molculas de CO2. Reacciones para la formacin de enlaces que utilizan con frecuencia la E. libre obtenida con la hidrlisis del ATP. Reacciones de isomerizacin: reorganizan algunos tomos dentro de la molcula preparndola para reacciones posteriores como por ejemplo, ox-red. Reacciones de transferencia de grupos: desempean fx diversas segn que grupos se transfieran Reacciones de hidrlisis: rompen enlaces mediante la adicin de agua. La hidrlisis es una forma habitual para fragmentar molculas grandes. Reacciones de adicin de grupos funcionales a un doble enlace o las de eliminacin de grupos para formar dobles enlaces.

Gluclisis.
Gluclisis: es la secuencia de reacciones que convierte una molcula de glucosa en dos molculas de piruvato con la produccin neta de dos molculas de ATP. Es un proceso anaerbico. El piruvato se puede convertir posteriormente de forma anaerbica (a travs de la fermentacin) a lactato (fermentacin lctica) o a alcohol (fermentacin alcohlica). En condiciones aerbicas el piruvato puede oxidarse a CO2. La gluclisis se puede sintetizar a partir de precursores no glicdicos, como el piruvato y el cido lctico conociendose como gluconeognesis. SE HA DE TENER en cuenta que la gluconeo y la gluclisis NO son la inversa una de la otra, tienen 3 reacciones que NO son iguales. La glucosa es importante en el mbito nutricional ya que es el nico alimento que utiliza el cerebro en condiciones normales, es decir, de buena alimentacin. Esto es debido a varias razones: La glucosa es uno de los monosacridos que se forma en condiciones prebiticas a partir de formaldehdo, as que podra haber resultado til en los organismos primitivos. La glucosa tiene una pequea tendencia a glicosilar protenas de modo no enzimtico.

La glucosa tiene una fuerte tendencia a presentarse como anillo y como consecuencia, tiene una menor tendencia relativa a modificar protenas.

Fermentaciones: Suministran energa en ausencia de oxgeno. En situaciones aerbicas, el piruvato se metaboliza a CO2 y H2O a travs del cido ctrico y de la cadena transportadora de electrones. En ausencia de este se produce la fermentacin produciendo una menor energa y haciendo que el piruvato pase a cido lctico o etanol dependiendo de qu fermentacin haga, La produccin de cido lctico tiene lugar en el msculo esqueltico en sobreesfuerzos. En los animales la fermentacin slo funciona durante perodos cortos (ya que necesitamos oxgeno ) pero en los organismos anaerobios estrictos o facultativos puede tener una duracin mucho mayor. PASOS DE LA GLUCLISIS:

1.

HEXOQUINASA: retiene la glucosa en la clula. Todas las quinasas catalizan los grupos fosforilo del ATP a un aceptor. La hexoquinasa, cataliza la transferencia de un grupo fosforilo del ATP a una serie de azcares de seis carbonos (glucosa). La hexoquinasa al igual que todas las quinasas requiere Mg2+ para su actividad. Los cambios estructurales al unirse a una glucosa se observan claramente: El entorno de la glucosa pasa a ser mucho ms apolar, lo que favorece la recepcin del grupo fosforilo terminal del ATP.

 2.

Los cambios conformacionales en la quinasa inducidos por el sustrato le permiten excluir el H2O como posible sustrato.

FORMACIN DE FRUCTOSA 1,6 BISFOSFATO A PARTIR DE GLUCOSA 6 FOSFATO La etapa siguiente a la gliclisis es la isomerizacin de la glucosa 6 fosfato a fructosa 6 fosfato a partir de la conversin de una aldosa en cetosa. El enzima debe abrir primero el anillo de seis miembros de la glucosa 6-fosfato, catalizar la isomerizacin, y despus. Promover la formacin de un anillo de cinco miembros de lafructosa 6- fosfato. A la etapa de isomerizacin le sigue la etapa de fosforilacin. El ATP fosforila a la fructosa 6fosfato hasta fructosa 1,6 bisfosfato. La fosfofructoquinasa (PFK), es un enzim alostrico que marca el ritmo de la gliclisis y cataliza su reaccin. LA ALDOLASA ESCIENDE EL AZCAR DE SEIS CARBONOS EN DOS FRAGMENTOS DE TRES CARBONOS. La segunda etapa de la gliclisis comienza con la divisin de la fructosa 1,6 bisfosfato en gliceraldehdo 3- fosfato (GAP) y en dihidroxiacetona fosfato (DHAP). Esta reaccin se encuentra catalizada por la aldolasa. LA TRIOSA FOSFATO ISOMERASA RECUPERA UN FRAGMENTO DE TRES CARBONOS La triosa fosfato isomerasa cataliza la isomerizacin de los azcares fosforilados de tres carbonos. Esta reaccin es muy rpida y reversible. Sin embargo, la reaccin discurre fcilmente desde la dihidroxiacetona fosfato hacia gliceraldehdo 3 fosfato porque las reacciones siguientes eliminan este producto. Por tanto, se forman dos molculas de gliceraldehdo 3 fosfato a partir de una molcula de fructosa 1,6 bisfosfato por la accin secuencial de la aldolasa y la triosa fosfato isomerasa. La isomerasa canaliza la dihidroxiacetona fosfato hacia la va principal de la gliclisis haciendo que no requiera una serie deparasa de reacciones. TRANSFORMACIN DE LA ENERGA: LA FOSFORILACIN EST ACOPLADA A LA OXIDACIN DEL GLICERALDEHDO 3 FOSFATO POR UN INTERMEDIARIO TIOSTER. La reaccin inicial de esta secuencia es la conversin del gliceraldehdo 3 fosfato en 1,3 bisfosfoglicerato, reaccin catalizada por la gliceraldehdo 3 fosfato DH. La reaccin catalizada por la (G3P DH) es la suma de dos procesos: La oxidacin del aldehdo a un c. Carboxlico por el NAD+ Y la unin del cido carboxlico con el ortofosfato para formar el producto acilfosfato. La primera reaccin es muy favorable termodinmicamente, mientras que la segunda es muy desfavorable. Estos dos procesos deben estar acoplados de modo que la oxidacin favorable del aldehdo se pueda utilizar para dirigir la formacin del acilfosfato. El acoplamiento de estas reacciones se establece a partir de un intermediario que forma la oxidacin del aldehdo y reacciona con el ortofosfato para formar el producto acilfosfato. FORMACIN DE ATP A PARTIR DE 1,3 BISFOSFOGLICERATO La etapa final de la gliclisis es la generacin de ATP a partir de los metablitos de tres carbonos fosforilados de la glucosa. La fosfoglicerato quinasa cataliza la transferencia del grupo fosforilo del 1,3 bisfosfoglicerato al ADP a partir del acilfosfato. Los productos son ATP y 3fosfoglicerato. El resultado neto de las reacciones catalizadas por el G3P DH y la fosforila quinasa es: G3P, un aldehdo, se oxida a 3- fosfoglicerato, un cido carboxlico. NAD+ se reduce a NADH. Se forma ATP a partir de Pi y ADP. FORMACIN DE OTRO ATP Y FORMACIN DE PIRUVATO El 3-fosfoglicerato se convierte en piruvato con la correspondiente conversin del ADP a ATP. La primera reaccin es un reordenamiento . La posicin del grupo fosforilo se desplaza en la conversin del 3- fosfoglicerato en 2 fosfoglicerato, reaccin que se cataliza por la fosfoglicerato mutasa.En general, una mutasa es una enzima que cataliza un cambio de ubicacin intramolecular de un grupo qumico.

3.

4.

5.

6.

7.

Observamos que la mutasa acta como una fosfatasa, ya que convierte el 2,3 Bisfosfoglicerato en 2- fosfoglicerato pero el grupo fosforilo sigue unido al enzima transfirindose al 3- fosfoglicerato para regenerar 2,3 bisfosfoglicerato. En la siguiente reaccin se forma un enol por la deshidratacin del 2 fosfoglicerato. La enolasa cataliza la formacin de fosfoenolpiruvato (PEP). La gran fuerza impulsora de la conversin ulterior de enol a cetona proporciona al fosfoenolpiruvato su alto potencial de transferencia de su grupo fosforilo. De este modo se forma piruvato y posteriormente ATP. RENDIMIENTO DE ENERGA DE LA CONVERSIN DE GLUCOSA EN PIRUVATO. La reaccin global de la transformacin de glucosa en piruvato es: Glucosa + 2 Pi+ 2ADP+ 2NAD+ 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2H2O As pues, en la conversin de glucosa en dos molculas de piruvato se generan 2 ATP. MANTENIMIENTO DEL BALANCE REDOX: LOS DIVERSOS DESTINOS DEL PIRUVATO. La actividad de la gliceraldehido 3 fosfato DH, adems de generar un compuesto con un alto potencial de transferencia del grupo fosforilo, provoca la reduccin del NAD+, derivada de la vitamina niacina.En consecuencia ha de regenerarse en NAD para que contine la gliclisis, por lo que el proceso final de la va es la regeneracin del NAD a travs del metabolismo del piruvato.Hay 3 reacciones importantes del piruvato: El etanol se forma a partir del piruvato en levaduras y en otros microorg. El primer paso es la descarboxilacin del piruvato por la piruvato descarboxilasa, la cual necesita del coenzima tiamina pirofosfato que cataliza la reaccin. El segundo paso es la reduccin de acetaldehdo a etanol por el NADH, mediante la reaccin catalizada por la alcohol DH. Este proceso regenera NAD+. La conversin de glucosa a etanol se conoce como fermentacin alcohlica.El producto de la reaccin es: Glucosa + 2Pi+ 2ADP+ 2H+ 2 etanol + 2CO2+ 2 ATP+ 2H2O El NAD ni el NADH aparecen en la ecuacin debido a que no hay oxidacin-reduccin neta. El lactato se encuentra relacionado con la fermentacin lctica. La reduccin del piruvato por el NADH para formar lactato est catalizada por la lactato DH.El producto de la reaccin es: Glucosa + 2Pi + 2 ADP 2 lactato + 2 ATP + 2H2O Al igual que en la anterior no existe REDOX neta. Solamente una pequea fraccin de energa de la glucosa se libera para formar lactato o etanol. Se puede extraer mucha ms energa por la va aerbica que no por la anaerbica como las dos anteriores por la va del cido ctrico y por la cadena transportadora de e. El punto de entrada de esta va oxidativa es el acetilcoenzima A (Acetil-CoA), que se forma en el interior de la mitocondria por descarboxilacin oxidativa del piruvato,

El centro de unin del NAD+ es similar a muchas DH

Las 3 DH de la gliclisis (gliceraldehido 3 fosfato DH, alcohol DH y lactat DH) tienen en comn el dominio de unin para el NAD+. Esta regin de unin est formada por 4 hlices alfa y una hoja beta de seis hebras paralelas.Adems, el NAD+ unido muestra casi la misma conformacin en todos los casos. Este dominio estructural comn se denomina plegamiento de Rossman.

Entrada de glucosa y galactosa en la gluclisis

La mayor parte de la fructosa ingerida se metaboliza en el hgado utilizando la va de la fructosa 1-fosfato. Los pasos para la insercin de la fructosa son las de la figura 16.15. En el hgado se forma poca cantidad de fructosa 6 fosfato debido a que hay mucha mayor cantidad de glucosa en este rgano, adems como combustible preferido, se consume tambin en el msculo por la reaccin de la hexoquinasa. Debido a que tanto el msculo como el hgado fosforilan ms glucosa que fructosa, el tejido adiposo tiene mayor accesibilidad a la fructosa que a la glucosa. NO EXISTEN vas catablicas que metabolicen la galactosa, as que la estrategia es convertir la galactosa en un metablito de la glucosa. La galactosa se convierte en glucosa 6 fosfato en 4 pasos: Fosforilacin de la galactosa a galactosa 1 fosfato DH a travs de la galactoquinas. La galactosa 1-fosfato incorpora un grupo uridilo procedente de la uridina difosfoglucosa (UDP-glucosa) formando UDP-galactosa y glucosa 1-fosfato a travs de la galactosa 1-fosfato uridiltransferasa. El componente galactosa cuando est unido al UDP se epimeriza hasta glucosa, la UDP-galactosa 4 epimerasa invierte la configuracin del grupo hidroxilo del carbono 4. La conversin de la UDP-glucosa a UDP- galactosa es esencial para la sntesis de residuos galactosilo en polisacridos complejos y en glicoprotenas si la cantidad de galactosa en la dieta es insuficiente para cubrir dichas necesidades. Por ltimo, la glucosa 1- fosfato formada a partir de galactosa, se isomeriza a glucosa 6 fosfato por accin de la fosfoglucomutasa. Parntesis; Muchos adultos son intolerantes a la leche porque son deficientes de lactasa. La alteracin del metabolismo de la galactosa se conoce como galactosemia y es una deficiencia hereditaria de la actividad de la galactosa 1 fosfato uridiltransferasa.

Control de la gliclisis LA FOSFOFRUCTOQUINASA es el enzima clave para la regulacin de la gliclisis. La fructosa 2,6-bisfosfato es un potente activador de la fosfofructoquinasa que desplaza el equilibrio conformacional de ese enzima tetramrico de la forma T a la forma R. La fosfofructoquinasa se inhibe con la presencia de citrato.
La HEXOQUINASA tambin regula la gliclisis pero es menos importante que la fosfofructoquinasa. La hexoquinasa es la enzima que cataliza la primera etapa de la gliclisis. Altas concentraciones de esta molcula indican que la clula no requiere ms glucosa. Adems la inhibicin de la fosfofructoquinasa conduce a la inhibicin de la hexoquinasa. LA GLUCOQUINASA(es la especializacin de la hexoquinasa en el hgado) localizada en el hgado, slo fosforila glucosa cuando es muy abundante y no resulta inhibida por la glucosa 6 fosfato.Su funcin es suministrar glucosa 6 fosfato para la sntesis de glucgeno. La baja afinidad de la glucoquinasa del hgado sobre la glucosa confiere al cerebro y al msculo preferencia sobre la utilizacin de la glucosa cuando el suministro es limitado. LA PIRUVATO QUINASA es la enzima que regula la tercera y ltima etapa de la gliclisis. Se presenta en dos formas: -La forma L que se encuentra en el hgado. -La forma M que se encuentra en el msculo y el cerebro. Ambas formas se unen cooperativamente al fosfoenolpiruvato. La fructosa 1,6 bisfosfato activa ambas formas para permitirles mantener la catllisis con una elevada entrada de flujos intermediarios.Cuando la carga energtica es alta, el ATP inhibe alostricamente las dos formas para desacelerar la gliclisis.Igual efecto tiene la presencia de alanina.

Gluconeognesis
Se conoce como gluconeognesis la sntesis de glucosa a partir de precursores no carbohidratados. Esta va es importante porque el cerebro depende de glucosa como combustible primario y los eritrocitos utilizan glucosa como combustible nico. El cerebro requiere diariamente 120g de glucosa y en total el organismo requiere 160g. La gluconeognesis convierte el piruvato en glucosa.Los precursores ms importantes no carbohidratados son El lactato: que se convierte rpidamente en piruvato por la lactato deshidrogenasa. Los aa: derivan de las protenas de la dieta y durante el ayuno, de la destruccin de las protenas en el msculo esqueltico. El glicerol: no se puede convertir en glucosa, lo encontramos en los AG. Este puede entrar tanto en la va glucoltica como en la va gluconeognica a travs de la dihidroxiacetona fosfato. El principal rgano donde se da la gluconeognesis es el hgado y en menor cantidad en el rin. En el cerebro, en el msculo esqueltico y en el cardaco se da la gluconeognesis pero en muy poca cantidad.

Podemos decir que, la gluconeognesis ayuda a mantener el nivel de glucosa sangunea de modo que el cerebro y el msculo puedan extraer suficiente glucosa para poder hacer sus funciones. La GLUCONEOGNESIS NO ES LA INVERSA DE LA GLICLISIS ya que el equilibrio est muy desplazado hacia la formacin de piruvato. Encontramos 3 reacciones que no son iguales que en la gliclisis: El fosfoenolpiruvato se forma a partir del piruvato por la va del oxalacetato por la accin de la piruvato carboxilasa y la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa.

La fructosa 6- fosfato se forma a partir de fructosa 1,6 bisfosfato por hidrlisis del ster fosfato del carbono 1. Esta hidrlisis exergnica est catalizada por la fructosa 1,6 bisfosfatasa. Fructosa 1,6 Bisfosfato + H2O fructosa 6 fosfato+ Pi

Por hidrlisis de la glucosa 6 fosfato se forma la glucosa, es una reaccin catalizada por la glucosa 6 fosfatasa. Glucosa 6 fosfato + H2O glucosa + Pi.

La conversin de piruvato a fosfoenolpiruvato comienza con la formacin de oxalacetato La biotina es un grupo prosttico que se une covalentemente y sirve como transportador del CO2 activado. El oxalacetato se transporta al citosol y se convierte en fosfoenolpiruvato por la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa.Las descarboxilaciones facilitan reacciones que seran altamente endergnicas. La conversin de fructosa 1,6 bisfosfato en fructosa 6 fosfato y ortofosfato es un paso irreversible. El enzima responsable de este paso es la fructosa 1,6 bifosfatasa. La generacin de glucosa libre es un importante punto de control. La fructosa 6-fosfato generada por la fructosa 1,6 bosfosfatasa se convierte rpidamente en glucosa 6 fosfato. En la mayora de los tx, la gluconeognesis finaliza en este punto. No se produce glucosa libre, es decir, la glucosa 6 fosfato pasa a formar glucgeno. Para mantener la glucosa dentro de la clula se controla de dos maneras: o El enzima responsable de la conversin de glucosa 6 fosfato en glucosa es la glucosa 6 fosfatasa o El enzima que se encuentra presente solamente en tejidos en los que la fx metablica es mantener la homeostasis de glucosa en sangre. El ltimo paso en la generacin de glucosa NO TIENE lugar en el citosol si no que la glucosa 6 fosfato se transporta al lumen del retculo endoplasmtico. En la sntesis de glucosa a partir de piruvato se consumen seis grupos fosforilo de alto potencial de transferencia. En la sntesis de glucosa a partir de piruvato (gluconeognesis) se hidrolizan seis molculas de nuclesido trifosfato, mientras que en la conversin de glucosa a piruvato (gliclisis) slo se generan dos molculas de ATP. Por tanto, el coste extra de la gluconeognesis es de cuatro molculas de alto potencial de transferencia de grupo fosforilo por cada molcula de glucosa

sintetitzada a partir de piruvato, se necesitan estas 4 molculas para convertir este proceso en un proceso favorable.

La gluconeognesis y la gliclisis se regulan de forma recproca.

Estn coordinadas de modo que una de las vas es relativamente inactiva mientras que la otra presenta una elevada actividad. Si las 2 fueran activas al mismo tiempo, el resultado neto sera la hidrlisis de cuatro nuclesidos fosfato (dos ATPs y dos GTPs) por cada ciclo de reaccin. La fosfofructoquinasa y la fructosa 1,6-bisfosfatasa estn controladas por la fructosa 2,6bisfosfato en el hgado. El nivel de fructosa 2,6 bisfosfato es bajo durante el ayuno y alto en situacin de buena alimentacin, debido a los efectos antagonistas del glucagn y de la insulina en la produccin y degradacin de esta molcula. La fructosa 2,6 bisfosfato estimula enrgicamente a la fosfofructoquinasa e inhibe a la fructosa 1,6 bisfosfatasa. En una buena nutricin la gliclisis se acelera y la gluconeognesis disminuye. La interconversin entre fosfoenolpiruvato y piruvato tambin est regulada. El enzima del hgado se inhibe por niveles elevados de ATP y alanina. Inversamente, la piruvato carboxilasa, que cataliza el primer paso de la gluconeognesis a partir de piruvato, se activa por acetil CoA y se inhibe por ADP. En consecuencia, la gluconeognesis resulta favorecida cuando la clula es rica en precursores para la biosntesis y en ATP. Tanto las cantidades como las actividades de estos enzimas clave estn sometidos a la regulacin a partir de hormonas. La insulina aumentada dp de la ingestin de alimentos, estimula la expresin de la fosfofructoquinasa, la piruvato quinasa y el enzima bifuncional que sintetitza y degrada la F2,6BP. El glucagn, cuyos niveles aumentan en el ayuno, inhibe la produccin de dos enzimas claves en la gluconeognesis: la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa y la fructosa 1,6 bisfosfatasa. TEMA 17

EL CICLO DEL CIDO CTRICO

El acetil-CoA es el combustible del cido ctrico. Esta molcula se obtiene mediante la hidrlisis del glucgeno (almacn de glucosa), de las grasas y de muchos aa. Formacin de acetilcoenzima A a partir de piruvato: La formacin del Acetil-Coa desde los carbohidratos es menos directa que desde las grasas. En condiciones anaerobias el piruvato se transforma en cido lctico o en entanol, mientras que en condiciones aerobias se transporta al interior de la mitocondria mediante el transportador de piruvato con intercambio de OH-. En la matriz mitocondrial el piruvato mediante el complejo piruvato DH sufre una descarboxilacin oxidativa para dar Acetil CoA. Piruvato + CoA + NAD+ Acetil CoA + CO2 + NADH Esta reaccin irreversible es el enlace entre la gliclisis y el ciclo del cido ctrico. El complejo piruvato DH es un complejo grande formado por tres enzimas y cinco coenzimas: tiamina pirofosfato (TPP) , cido lipoico y FAD como cofactores catalticos y de CoA y NAD+ como cofactores estequiomtricos. La conversin de piruvato en Acetil CoA tiene lugar en tres etapas:

Estas etapas deben estar acopladas para conservar le E libre derivada de la descarboxilacin y permitir la formacin del NADH y acetil CoA. Primero, el piruvato se combina con TPP y se descarboxila, una caracterstica importante de la TPP es que el grupo prosttico del componente piruvato DH del t. De carbono se encuentra entre los 2 t. De nitgeno y azufre en el anillo de tiazol haciendo que sea mucho ms cido que la mayora de los grupos CH- von un valor prximo a 10. Este grupo se ioniza para formar un carboanin que rpidamente se une al grupo carbonilo del piruvato. Esta adicin va seguida por la descarboxilacin del piruvato haciendo que el anillo del TPP (carga +) estabilice la carga negativa que se transfiere al anillo en la descarboxilacin, formando el hidroxietil TPP. Segundo, el grupo hidroxietil TPP se oxida para formar el grupo acetilo y acto seguido se transfiere a la lipoamida. El producto de esta reaccin que tb cataliza el componenete piruvato DH E1 es la acetil lipoamida. Tercero, se transfiere el grupo acetilo desde la acetil lipoamida al CoA para formar Acetil-CoA, esta reacc est catalizada por la dihidrolipoilo transacetilasa (E2). El complejo piruvato DH no puede realizar otro ciclo cataltico hasta que la dihidrolipoamida sea oxidada a lipoamida. Cuarto, se regenera la forma oxidada de la lipoamida mediante la dihidrolipoilo DH (E2). Los enlaces flexibles permiten a la lipoamida desplazarse entre distintos centros activos (CA): E2 constituye el ncleo del complejo. La transacetilasa est formada por ocho trmeros catalticos ensamblados que forman un cubo hueco. En el extremo amino terminal se encuentra un pequeo dominio con un cofactor lipoamida unido a un residuo de lisina, que es anlogo a los dominios de unin de biotina tales como el de piruvato carboxilasa. Cmo actan conjuntamente los 3 CA? o El piruvato se descarboxila en el CA de E1, mediante la formacin del intermediario de TPP sustituido, y como primer producto se libera CO2. o E2 inserta la rama lipoil-lisina de la lipoamida en el canal E1. o E1 cataliza la transferencia del grupo acetilo a la lipoamida. Entonces la rama lipoillisina acetilada abandona E1 y se introduce en el cubo E2 situndose en su CA. o En ese momento se transfiere el residuo acetilo al CoA y, el segundo producto, acetil CoA se desprende del cubo. Entonces la rama lipoil-lisina reducida se desplaza al CA de la flavoprotena E3. o E n el CA de E3, el coenzima FAD oxida al cido lipoamida. o El producto final, NADH, se obtiene en la reoxidacin del FADH2 y la lipoamida regenerada est preparada para iniciar otro ciclo de reaccin. La intengracin estruc. De 3 clases de enzimas hace posible la catlisis coordinada de una reacc. Compleja. La proximidad de una enzima a otra aumenta la velocidad de la reaccin total y reduce al mnimo las reacciones colaterales. Todos los intermediarios de la descarboxilacin oxidativa del piruvato quedan estrechamente ligados al complejo y se transfieren con rapidez debido a la capacidad de la rama lipoil-lisina de E2 para desplazarse de un CA a otro en cada vuelta del ciclo. La citrato sintasa produce citrato a partir de oxalacetato y acetil CoA: El ciclo del cido ctrico comienza con la condensacin de una unidad de cuatro carbonos, oxalacetato, con una unidad de dos carbonos, el grupo acetilo del acetil CoA. El oxalacetato reacciona con el acetil CoA y H2O para dar citrato y CoA.

Esta reaccin est catalizada por la citrato sintasa. La citrato sintasa muestra una cintica secuencial ordenada: primero se une al oxalacetato y despus al Acetil CoA. La razn de este procedimiento ordenado es que el oxalacetato induce en el enzima una profunda reorganizacin estructural que lleva a la creacin de un centro de enlace para el acetil CoA. La forma abierta de la enzima en ausencia de ligandos, se convierte en una forma cerrada cuando se une al oxalacetato. La citrato sintasa cataliza la reaccin de condensacin al situar a los sustratos en estrecha proximidad, orientarlos y polarizar determinados enlaces. Para evitar la hidrlisis intil del CoA. La citrato sintasa est diseada para hidrolizar al citril CoA pero NO para hidrolizar el Acetil CoA. El isocitrato se oxida y descarboxila hasta alfa cetoglutarato: La descarboxilacin oxidativa del isotiocitrato est catalizada por la citrato DH.

Isocitrato + NAD+ Alfa cetoglutarato + CO2 + NADH El intermediario de la reaccin es el oxalsuccianato, un beta cetocido inestable. Mientras est ligado al enzima pierde CO2 para dar alfa cetoglutarato. Por la descarboxilacin oxidativa del alfa cetoglutarato se forma succinil-coenzima A: La conversin del isocitrato en alfa cetoglutarato va seguida de una segunda descarboxilacin oxidativa, la produccin de succinil CoA a partir del alfa cetoglutarato. Esta reacc est catalizada por el alfa-cetoglutarato DH.

A partir del succinil-coenzima A se genera un compuesto con alto potencial de transferencia de grupos fosfato: En la reaccin de la citrato sintasa, la rotura del enlace tioester proporciona la E para la sntesis del citrato de 6 C a partir del oxalacetato de 4 C y un grupo de 2 C. La rotura del enlace tioster del succinil CoA se acopla a la fosforilacin de un nuclesido difosfato de purina, normalmente GDP. Est reaccin est catalizada por la succinil CoA sintetasa. El oxalacetato se regenera por oxidacin del succinato: La etapa final del ciclo del cido ctrico (la regeneracin del oxalacetato) est formada por una serie de reacc. De compuestos de 4C.

La transformacin de un grupo metileno (CH2) en un grupo carbonilo (C-,-O) tiene lugar en 3 etapas; Oxidacin Hidratacin Oxidacin En cada vuelta del ciclo no slo se regenera oxalacetato sino que tambin se acumula E en forma de FADH2 y NADH. El succinato se oxida a fumarato mediante la succinato DH, que es una ferro-sulfoprotena y est directamente unida a la cadena de transporte de electrones , cada cadena constituye el nexo de unin entre el ciclo del cido ctrico y la formacin de ATP. El FADH2 producido por la oxidacin del succinato no se disocia del enzima, a diferencia del NADH producido en otras reacc. De oxidacin-reduccin. La siguiente etapa del ciclo es la hidratacin de fumarato para formar L-Malato. La fumarasa cataliza una adicin estereoespecfica en trans de un tomo de hidrgeno y un grupo hidroxilo. El grupo hidroxilo se aade solamente a un lado del doble enlace del fumarato; por tanto slo se forma el ismero L del malato. Finalmente el malato se oxida para formar oxalacetato, esta reaccin es catalizada por la Malato DH.

Estequiometrica delciclo del cido ctrico:

Las reacciones que se producen en el ciclo son: o o En la condensacin de una unidad de acetilo con el oxalacetato entran en el ciclo 2 t de C. Por las descarboxilaciones sucesivas catalizadas por la isocitrato DH y la alfa cetoglutarato DH salen del ciclo dos carbonos en forma de CO2. En las cuatro reacciones de oxidacin salen del ciclo cuatro pares de t. De H. En las descarboxilaciones oxidativas del isocitrato y del alfa cetoglutarato se reducen dos molculas de NAD+, en la oxidacin del succinato se reduce una molcula de FAD y en la oxidacin del malato se reduce otra molcula de NAD+. A partir del enlace tioster del succinil CoA se genera un compuesto, normalmente GTP, con un enlace fosfato con alto potencial de transferencia. Se consumen dos molculas de agua; una en las sntesis del citrato por hidrlisis del citril CoA, y la otra en la hidratacin del fumarato.

o o

La agrupacin de los enzimas participantes en el cido ctrico puede incrementar su eficacia recibiendo el nombre de METABOLN. La gliclisis puede ser tanto aerobia como anaerobia mientras que el ciclo del cido ctrico slo puede ser aerobio.

Regulacin del cido ctrico.

El complejo piruvato DH se regula alostricamente mediante la fosforilacin reversible El ciclo del cido ctrico est controlado en varios puntos:

PAG 481 Los puntos primarios de control son los enzimas alostricos isocitrato DH y alfa cetoglutarato DH. El ADP estimula aolstricamente a la isocitrato DH, porque aumenta su afinidad por los sustratos. La unin del isocitrato NAD+, MG2+ y ADP es cooperativa. Por el contrario, el NADH inhibe la isocitrato DH desplazando directamente al NAD+. El ATP tambin acta como inhibidor. Un segundo punto de control es la alfa cetoglutarato DH, que se encuentra inhibida por el succinil CoA y por el NADH, que son los productos de la reaccin que cataliza. Adems, la alfa cetoglutarato DH se inhibe por una carga energtica alta. Por tanto, la velocidad del ciclo se reduce cuando la clula dispone de un elevado nivel de ATP. La interrupcin del metabolismo del piruvato es la causa del beriberi y del envenenamiento por mercurio y arsnico. El beri beri es una enfermedad causada por la deficiencia de tiamina (Vitamina B1), esta enfermedad la encontramos en pases consumidores casi exclusivamente de arroz, ya que tiene un nivel de tiamina muy bajo. La tiamina pirofosfato es el grupo prosttico de 3 enzimas: la privuato DH, la alfa cetoglutarato DH y la transcetolasa. El aspecto comn de las reacc. Enzimticas que utilizan TPP es la transferencia de una unidad activada de aldehido.

Ciclo del glioxilato permite a las plantas y bacterias crecer en acetato.

El ciclo del glioxlico, al igual que el del cido ctrico, comienza con la condensacin del Acetil-CoA y oxalacetato para formar citrato, el cual se isomeriza a isocitrato. ste, en vez de descarboxilarse, se esciende en succinato y glioxilato por la isocitrato liasa. Las etapas siguientes regeneran el oxalacetato a partir de glioxilato. El acetil CoA se condensa con el glioxilato para formar malato, en una reaccin catalizada por la malato sintasa. Finalmente el malato se oxida a oxalacetato al igual que en el ciclo del cido ctrico. La ecuacin global de estas reacc es: 2 Acetil CoA + NAD+ + 2H2O succinato + 2CoA+ NADH+ 2H+. En las plantas estas reacciones tienen lugar en unos orgnulos llamados glioxisomas. Las bacterias y las plantas pueden sintetizar acetil CoA a partir de acetato y CoA, mediante una reaccin dirigida por la hidrlisis de ATP y catalizada por la Acetil- CoA sintetasa. Acetato + CoA + ATP Acetil-CoA + AMP + PPi.

LA FOSFORILACIN OXIDATIVA (cadena transportadora de e-)

Es el proceso mediante el cual se genera ATP como resultado de la transferencia de electrones desde el NADH o el FADH2 al O2 a travs de una serie de transportadores de electrones. Este proceso TIENE LUGAR EN LA MITOCONDRIA Y constituye la fuente ms importante de ATP en los organismos aerobios. La fosforilacin oxidativa constituye la culminacin de una serie de transformaciones energticas que, en conjunto reciben el nombre de respiracin. En eucariotas, la fosforilacin oxidativa tiene lugar en las mitocondrias: en las mitocondrias encontramos la cadena respiratoria, los enzimas del cido ctrico y los enzimas de la oxidacin de los cidos grasos. o Las mitocondrias estn rodeadas por una doble membrana: Membrana mitocondrial interna: muy extensa formada por numerosos pliegues, llamados crestas. Membrana mitocondrial externa. La fosforilacin oxidativa tiene lugar en la membrana mitocondrial interna, a diferencia de la mayor parte de las reacciones del cido ctrico y de la oxidacin de los cidos grasos que tienen lugar en la matriz. La membrana externa es bastante permeable frente a un gran nmero de iones y molculas pequeas, ya que contiene muchas copias de porina mitocondrial, una protena que forma poros y que tambin se conoce como VDAC, interviniendo en el flujo regulado de metablitos. Las mitocondrias son el resultado de una endosimbiosis: Las mitocondrias son orgnulos semiautnomos que mantienen una relacin endosimbitica con la clula husped. Un

evento endosimbitico puede tener lugar a partir del momento en que un organismo libre capaz de realizar la fosforilacin oxidativa fue entullecido por otra clula. La fosforilacin oxidativa requiere la transferencia de electrones: a travs de la cadena transportadora de electrones. o Electrones de alta energa: potenciales redox y cambios de la E libre: En la fosforilacin oxidativa, el potencial de transferencia de electrones del NADH o del FADH2 se convierte en el potencial de transferencia de grupos fosforilo del ATP. La expresin anloga para el potencial de transferencia de electrones es el potencial de reduccin. Un potencial de reduccin negativo indica que la forma reducida de una sustancia tiene menos afinidad hacia los electrones que el H2. Un agente fuertemente reductor como el NADH est obligado a ceder electrones y tiene un potencial de reduccin negativo, mientras que un agente fuertemente oxidante (como el O2) est dispuesto a aceptar electrones y tiene un potencial de reduccin positivo. Una diferencia de potencial de 1,14 voltios entre el NADH y el O2 impulsa el transporte de electrones a travs de la cadena y permite la fosforilacin de un gradiente de protones: cada protn transportado desde la matriz al lado citoslico representa una E libre de 5,2 Kcal/mol.

La CADENA RESPIRATORIA est formada por cuatro complejos: 3 bombas de protones y una conexin fsica con el ciclo del cido ctrico: Los electrones se transfieren del NADH al O2 a travs de una cadena de tres grandes complejos protecos llamados NADH-Q oxidorrecductasa, Q-citoctomo c oxidoreductasa y citocromo c oxidasa. El flujo de electrones entre estos complejos transmembranales provoca el transporte de protons a travs de la membrana mitocondrial interna. Los electrones se transfieren desde la NADH-Q oxidoreductasa hacia la Qcitocromo c oxidorreductasa, el segundo complejo de la cadena mediante la forma reducida de la coenzima Q (ubiquinona) que tambin transporta electrones provenientes del FADH2, generados por la succinato DH en el ciclo del cido ctrico, hacia la Q-citocromo c oxidoreductasa a travs de la succinato Q reductasa. El coenzima Q es un derivado de la quinona con una larga cadena isoprenoide. Las quinonas pueden presentar 3 estados de oxidacin, en el estado totalmente oxidado (Q), el coenzima Q presenta dos grupos ceto. La adicin de un protn y un electrn origina la forma semiquinona (QH). La forma semiquinona pierde un protn con relativa facilidad para dar lugar al radical aninico de la semiquinina. La adicin de un segundo protn da lugar al ubiquinol. Por tanto en las quinonas, las reacciones de transferencia de electrones estn acopladas a la unin y liberacin de protones. Los electrones de alto potencial del NADH entran en la cadena respiratoria por la NADH-Q oxidorreductasa: Los electrones del NADH entran en la cadena por la NADH-Q oxidorreductasa (tambin llamada NADH DH). La construccin de esta bomba de protones, es el resultado del trabajo conjunto de genes que residen en la mitocondria y de genes residentes en el ncleo. La NADH DH tiene forma L, con un brazo horizontal anclado en la membrana y un brazo vertical que se proyecta hacia la matriz.

La etapa inicial consiste en la unin del NADH y la transferencia de sus dos electrones de alto potencial al flavina mononucleotido (FMN), que es el grupo prosttico del complejo, para dar lugar a la forma reducida FMNH2.Al igual que las quinonas, las flavinas slo aceptan protones cuando se reducen. El FMN tambin puede aceptar un solo electrn en vez de dos y formar un intermediario (el radical semiquinona). El aceptor de electrones del FMN, el anillo isoaloxazina, es idntico al del FAD. Posteriormente, los electrones se transfieren desde el FMNH2 a unos complejos hierro-azufre (protenas de hierro no htico). Los electrones de los complejos hierro-azufre de la nADH-Q oxidorreductasa se transfieren al coenzima Q. El flujo de electrones desde el NADH al coenzima Q a travs de la nADH-Q oxidorreductasa provoca el bombeo de cuatro iones hidrgeno hacia el exterior de la matriz de la mitocondria. El ubiquinol es el punto de entrada para los electrones procedentes del FADH2 de las flavoprotenas: la succinato DH forma parte del complejo succinato Q reductasa (Complejo II), una protena integral de la membrana mitocondrial interna. El FADH2 no abandona el complejo, en vez de ello, sus electrones se transfieren a complejos FE-S y all se incorporan a la cadena respiratoria. De manera anloga, la glicerol fosfato DH y la acil CoA DH de AG transfieren sus electrones de alto potencial desde el FADH2 a Q para formar ubiquinol. Consecuentemente, se forma menos ATP a partir de la oxidacin del FADH2 que a partir del NADH. Los electrones fluyen desde el ubiquinol al citocromo c a travs de la Q-citocromo c oxidorreductasa: De las tres bombbas de protones, la Q citocromo c oxidorreductasa es la segunda (conocida tambin como complejo III o citocromo reductasa). Durante el transporte de electrones, el in hierro alterna de un estado reducido (2+) a un estado frrico (3+). La fx de la citocromo Q c oxidorreductasa es catalizar la transferencia de electrones desde QH2 al citocromo c oxidado, una protena soluble en agua que bombea protones hacia el exterior de la matriz mitocondrial. Transporte de protones a travs de la membrana: El ciclo Q. El mecanismo que acopla la transferencia de electrones desde Q hasta el citocromo c con el transporte de protones a travs de la membrana se denomina ciclo Q. Este facilita el trnsito desde ubiquinol, que transporta dos electrones, hasta el citocromo C, que transporta un solo electrn. El ciclo comienza cuando el ubiquinol (QH2) se une al sitio Q0. El ubiquinol transfiere sus electrones de uno en uno.

La citocromo c oxidasa cataliza la reduccin del oxgeno molecular a agua: La etapa final de la cadena transportadora de electrones consiste en la oxidacin del citocromo c reducido generado por el Complejo III y la consiguiente reduccin del O2 a dos molculas de H2O. Esta reaccin est catalizada por la citocromo c oxidasa (Complejo IV). La citocromo c oxidasa contiene dos grupos hemo de tipo A y tres iones de cobre distrubudos en dos centros de cobre llamados A y B. El grupo hemo del grupo A se diferencia de los grupos hemos de los citocromos c y c1 en tres aspectos: o Un grupo formilo reemplaza a un grupo metilo o Una cadena hidrocarbonatada de 15 C sustituye uno de los grupos vinilo o El hemo NO est unido covalentemente a la protena. Las dos molculas hemo de tipo A (hemo A y hemo A3) tienen pp diferentes pq se encuentran localizadas en diferentes entornos dentro de la citocromo c oxidasa. o A: su fx consiste en transportar los electrones procedentes de CuA/CuA o A3: cede los electrones al centro CuB adyacente. En conjunto forman el centro activo donde O2 se reduce a H2O. El ciclo cataltico comienza con el enzima en su estado oxidado. En ppio, la molcula de citocromo c reducido transfiere un electrn CuA/CuA. A partir de aqu, el electrn se desplaza hacia el hemo a, luego al hemo a3 y por ltimo al CuB, que se reduce del estado Cu2+ al estado Cu+ (de cprico a cuproso). Una segunda molcula de citocromo c aporta un segundo electrn que sigue la misma ruta y se detiene en el hemo a3, que se reduce al estado Fe2+.La proximidad entre el CuB en estado reducido y el complejo hemo a3-oxgeno favorece la reduccin del oxgeno a perxido que establece un puente entre el Fe3+ del hemo a3 y el CuB 2+.La adicin final de otro electrn procedente del citocromo c y de un segundo protn reduce el grupo ferrilo a Fe3+-OH.La reaccin con otros protones da lugar a la liberacin de dos molculas de agua y el enzima recupera su estado inicial, totalmente oxidado..

Los derivados txicos del oxgeno molecular como el radical superxido son neutralizados mediante enzimas protectores: resulta inevitable que se generen pequeas cantidades de anin superxido y perxido de H, se les conoce como derivados reactivos del oxgeno. La enzima ms importante que los neutraliza es la superxido dismutasa, una enzima que neutraliza los radicales en superxido al catalizar la conversin de dos de estos radicales en perxido de hidrgeno y oxgeno molecular.

LAS LANZADERAS PERMITEN ATRAVESAR MEMBRANAS MITOCONDRIALES: La membrana mitocondrial interna debe ser impermeable para la mayora de las molculas.

Los electrones del NADH citoslico entran en las mitocondrias mediante lanzaderas: La primera etapa de la lanzadera consiste en la transferencia de un par de electrones desde el NADH a la dihidroxiacetona fosfato, un intermediario de la gliclisis, para formar glicerol 3 fosfato. Este, se reoxida a dihidroxiacetona fosfato en la cara externa de la membrana mitocondrial interna mediante un isoenzima de la glicerol 3 fosfato DH unido a la membrana. Un par de electrones del glicerol 3 fosfato se transfieren al grupo prosttico FAD de este enzima para formar FADH2. Esta reaccin regenera tambin la dihiroxiacetona fosfato. Cuando la cadena respiratoria oxida el NADH citoslico que transporta la lanzadera de glicerol 3 fosfato, se forman 1,5 ATPs en vez de 2,5. El rendimiento es menor porque en la glicerol 3 fosfato DH mitocondrial el aceptor de electrones es el FAD y no el NAD+. La utilizacin del FAD permite que los electrones del NADH citoslico se transporten hacia las mitocondrias en contra de un gradiente de concentracin de NADH. En el msculo, la lanzadera de glicerol 3- fosfato es la ms importante, ya que le permite realizar la fosforilacin oxidativa a una velocidad muy alta. En corazn e hgado, los electrones del NADH citoslico entran en las mitocondrias por medio de la lanzadera malato-aspartato en la que intervienen dos transportadores de membrana y cuatro enzimas. Esta lanzadera tambin facilita el intercambio de intermediarios clave entre las mitocondrias y el citosol.

La entrada del ADP a las mitocondrias est acoplada a la salida del ATP gracias a la ATP-ADP translocasa: La principal fx de la fosforilacin oxidativa es generar ATP a partir de ADP. La ATP-ADP translocasa es una protena que permite que el ATP y el ADP puedan atravesar la barrera de permeabilidad. El ATP entra en la matriz mitocondrial slo si el ADP sale y viceversa.

Cuando la glucosa se oxida por completo se forman aproximadamente 30 molculas de ATP. La fosforilacin oxidativa se puede inhibir en muchas de sus etapas: La fosforilacin oxidativa puede interrumpirse en cualquiera de sus etapas:

o o o

Rotenona y amital: bloquean la transferencia de los electrones en la NADH-Q oxidorreductasa y por tanto, impiden la utilizacin del NADH como sustrato. Antimicina A: interrumpe el flujo de los electrones a la altura del citocromo bH de la Q- citocromo c oxidorreductasa. ATP sintasa: la oligomicina y la diciclohexilcarbodiimida (DCCD) impiden la entrada de protones a travs de la ATP sintasa. Al tratar mitocondrias que estn respirando de forma activa con un inhibidor de la ATP sintasa, la cadena transportadora de electrones deja de funcionar. Este ntimo acoplamiento entre el transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa en las mitocondrias se puede eliminar (desacoplar) mediante la 2,4dinitrofenol y algn otro compuesto aromtico. Estas sustancias transportan protones a travs de la membrana mitocondrial interna.

TEMA 21. METABOLISMO DEL GLUCGENO El glucgeno es una forma de almacenamiento de glucosa fcilmente movilizable. Es un residuo grande y ramificado de residuos de glucosa que se puede romper para dar lugar a molculas de glucosa cuando el consumo de energa es necesario. Los lugares principales de almacenamiento de glucgeno son EL HGADO Y EL MSCULO ESQUELTICO. La concentracin de glucgeno es superior en el hgado que en el msculo. El glucgeno est presente en el citosol en forma de grnulos con un dimetro variable entre 10 y 40nm. Una visin general del metabolismo del glucgeno: La degradacin del glucgeno consta de 3 pasos: o Liberacin de glucosa 1-fosfato del glucgeno o La remodelacin del sustrato glucgeno para permitir la degradacin posterior o Conversin de glucosa 1-fosfato en glucosa 6-fosfato para su metabolismo. La glucosa 6 fosfato proveniente de la ruptura del glucgeno y tiene 3 destinos: o Es el sustrato inicial de la gluclisis o Puede procesarse por la ruta de las pentosas fosfato para generar NADPH y derivados de la ribosa o Puede convertirse en glucosa libre para liberarse al torrente sanguneo. Estas transformaciones tienen lugar en el hgado y en menor cantidad en intestino y rin. La regulacin hormonal permite ajustar el metabolismo del glucgeno a las necesidades del organismo entero.

La degradacin del glucgeno requiere la intervencin de varios enzimas: La fosforilasa cataliza la escisin fosforoltica del glucgeno para dar glucosa 1 fosfato: La glucgeno fosforilasa es la enzima clave en la ruptura del glucgeno, esciende el sustrato mediante la adicin del ortofosfato (Pi) para producir glucosa 1 fosfato. La ruptura de un enlace por la adicin de ortofosfato se reconoce como fosforilasa. La fosforilasa cataliza la eliminacin secuencial de residuos glucoslicos desde los extremos no reductores de la molcula de glucgeno. Concretamente, rompe el enlace entre el C-1 y el tomo de oxgeno glucosdico, de modo que la configuracin alfa en C-1 se mantiene. La escisin fosforoltica del glucgeno es enegticamente ventajosa porque el azcar que se libera est fosforilado y no puede difundirse fuera de la clula debido a su carga negativa. Por el contrario, una escisin hidroltica producira glucosa, la cual tendra que ser fosforilada a expensas de la hidrlisis de una molcula de ATP para entrar en la va glucoltica. La fosfoglucomutasa convierta la glucosa 1- fosfato en glucosa 6 fosfato: La glucosa 1 fosfato formada por la escisin fosforoltica del glucgeno debe convertirse en glucosa 6 fosfato para poder entrar en la corriente metablica principal. Este desplazamiento del grupo fosforilo est catalizado por la fosfoglucomutasa. El hgado contiene glucosa 6-fosfatasa, un enzima hidroltico ausente en el msculo: Una funcin importante del hgado es mantener relativamente constante el nivel de glucosa en sangre.Sin embargo, la glucosa fosforilada producida por la degradacin del glucgeno, al contrario de la glucosa libre, no se transporta con facilidad fuera de las clulas. El hgado contiene la glucosa 6 fosfatasa, que esciende el grupo fosforilo y produce glucosa libre y ortofosfato.Esta glucosa 6-fosfatasa, que est localizada en el RE liso, es el mismo enzima que libera la glucosa al final de la gluconeognesis. El piridoxalfosfato participa en la escisin fosforoltica del glucgeno. La fosforilasa se regula por interacciones alostricas y fosforilacin reversible: La fosforilasa est regulada por varios efectores alostricos que reflejan el estado energtico de la clula as como la fosforilacin reversible, la cual responde a hormonas tales como insulina, adrenalina y glucagn. La fosforilasa del msculo se regula por la carga energtica intracelular: La fosforilasa del msculo esqueltico dimrica existe en dos formas interconversitbles: la fosforilasa a (generalmente activa) y la fosforilasa b (generalmente inactiva). Estas se diferencian por un nico fosforilo en cada subunidad.La B se convierta en A cuando se fosforila en un nico residuo de serina en cada subunidad. El enzima regulador es la fosforilasa quinasa.Estas dos formas existen en equlibrio entre un estado relajado activo R y un estado tenso menos activo T. La fosforilasa a favorece R y la b favorece T. La fosforilasa b muscular SOLAMENTE es activa en presencia de altas concentraciones de AMP. El ATP acta como efector alostrico negativo compitiendo con el AMP y favoreciendo el estado T. Por tanto, la alternancia de las formas T y

R de la fosforilasa b est controlada por la carga energtica de la clula muscular. Bajo la mayora de las condiciones fisiolgicas, la fosforilasa b es inactiva debido a los efectos inhibidores del ATP y la glucosa 6-fosfato. Por el contrario la fosforilasa a es plenamente activa a pesar de los niveles de AMP, ATP y glucosa 6-fosfato.En el msculo en reposo, la mayor parte del enzima se encuentra en la forma b inactiva, cuando se hace ejercicio el AMP conduce a la activacin de la fosforilasa b. La fosforilasa del hgado genera glucosa para su uso en otros tejidos: La regulacin de la glucgeno fosforilasa del hgado con la del msculo son semejantes en un 90% respecto a la secuencia aminoacdica. Las diferencias son pocas pero importantes: o o Al contrario que el enzima del msculo, la forma a de la fosforilasa del hgado pero no la b muestra una muy sensible transicin del estado T al R. El papel de la degradacin del glucgeno en el hgado es producir glucosa para exportarla a otros tejidos cuando los niveles de glucosa en sangre son bajos.De este modo, si hay glucosa proveniente de otras fuentes como puede ser la dieta, no hay necesidad de movilizar glucgeno. Contrariamente al enzima muscular, la fosforilasa heptica NO es sensible a la regulacin por AMP debido a que el hgado no se dan cambios drsticos en la carga energtica a diferencia de la contraccin muscular.

La fosforilasa quinasa se activa por la fosforilacin y por los iones calcio: La fosforilasa quinasa es una protena muy grande con una composicin de subunidades en el msculo esqueltico de (alfabetaygriegagamma)4 y una masa de 1200kd. La actividad cataltica reside en la unidad Y mientras que el resuto de las subunidades tienen una funcin reguladora. Esta quinasa se regula por la fosforilacin: la quinasa se convierte de una forma de baja actividad a otra de actividad elevada por la fosforilacin de la subunidad beta. La enzima que cataliza la activacin de la fosforilasa quinasa es la protena quinasa. La fosforilasa quinasa tambien puede activarse parcialmente por niveles de Ca2+ del rden de 1micrometro. La subunidad gamma es la calmodulina, un sensor de calcio que estimula a muchas clulas eucariotas . La fosforilasa quinasa tiene su mxima actividad cuando hay presencia de Ca2+ y cuando hay la fosforilacin de la subunidad beta (los dos juntos).

La adrenalina y el glucagn son seales para la degradacin del glucgeno: Las protenas G transmiten la seal para el inicio de la degradacin del glucgeno: El glucagn y la adrenalina desencaden la lisis del glucgeno. La actividad muscular produce la liberacin de adrenalina (epinefrina), una catecolamina derivada de la tirosina. La adrenalina estimula la ruptura del glucgeno en msculo y en menor grado hgado. El hgado es ms sensible a glucagn.

o o o

Las molculas seal, adrenalina y glucagn, se unen a receptores 7TM especficos de las membranas plasmticas de las clulas de msculo e hgado. La adrenalina se une al receptor beta-adrenrgico del msculo, mientras que el glucagn se une al receptor del glucagn. Estas uniones activan a la subunidad beta de la protena G. La forma unida a GTP de la subunidad alfa de Gs activa a la adenilato ciclasa, una protena transmembranal que cataliza la formacin del segundo mensajero AMP cclico a partir del ATP. El elevado nivel de AMP cclico en el citosol activa a la protena quinasa A a travs de la unin del AMP cclico a las subunidades reguladoras, las cuales se disocian de las subunidades catalticas. Las subunidades catalticas libres son ahora activas. La protena quinasa A fosforila a la subunidad beta de la fosforilasa quinasa que activa a la glucgeno fosforilasa.

La cascada de AMP cclico amplifica de forma espectacular los efectos de las hormonas. Los procesos de transduccin de seales del hgado son ms complejos que los del msculo. La adrenalina tambin puede desencadenar la degradacin del glucgeno en el hgado. Sin embargo, adems de unirse al receptor beta-adrenrgico, se une al receptor 7TM el cual activa la fosfolipasa C y as inicia la cascada del fosfoinostido. La degradacin del glucgeno debe poderse desactivar rpidamente: La protena A establece las condiciones para bloquear la degradacin del glucgeno mediante la adicin de un grupo fosforilo a la subunidad alfa de la fosforilasa quinasa, despus de haber fosforilado la subunidad beta. Esta adicin de grupos fosforilo convierte al enzima en mejor sustrato para la desfosforilacin y la consiguiente inactivacin por el enzima protena fosfatasa 1 (PP1). La PP1 tambin elimina el grupo fosforilo de la glucgeno fosforilasa, lo que convierte al enzima a su forma b inactiva.

El glucgeno se sintetiza y degrada por diferentes vias: La UDP-Glucosa es una forma activada de la glucosa:La UDP-Glucosa es la forma activada de la glucosa , como el ATP y el Acetil- CoA son formas activadas del ortofosfato y del acetato.

La UDP-Glucosa se sintetiza a partir de glucosa 1-fosfato y uridina trifosfato (UTP) en una reaccin catalizada por la UDP-Glucosa pirofosforilasa. El pirofosfato liberado en esta reaccin proviene de los dos residuos fosforilo externos del UTP.

La glucgeno sintasa cataliza la transferencia de glucosa desde UDP-glucosa a una cadena en crecimiento: La unidad glucosilo activada de la UDP-glucosa se transfiere al grupo hidroxilo de un C-4 terminal del glucgeno para formar un anlace alfa 1,4 glicosdico. En la elongacin, desplaza al UDP el grupo hidroxilo terminal de la molcula de glucgeno en crecimiento. Esta reaccin est catalizada por la glucgeno sintasa, el enzima regulador clave en la sntesis del glucgeno. La glucgeno sintasa solamente puede aadir residuos glucosilo si la cadena de polisacrido ya contiene ms de cuatro residuos. As pues, la glucgeno sintasa requiere un iniciador o cebador (primer que suele ser la glucogenina). Un enzima ramificante forma los enlaces alfa 1.6: La glucgeno sintasa cataliza solamente la sntesis de enlaces alfa 1,4. La ramificacin tiene lugar despus de que un cierto nmero de residuos glucosilo se hayan unido mediante enlaces alfa 1,4 y por la formacin de un enlace alfa 1,6. La ramificacin es importante porque incrementa la solubilidad del glucgeno . As pues, la ramificacin incrementa la velocidad de sntesis y degradacin del glucgeno. La glucgeno sintasa es el enzima regulador clave en la sntesis de glucgeno: La glucgeno sintasa se fosforila en mltiples puntos por la accin de la protena quinasa A y otras quinasas. La alteracin resultante de las cargas en la protena conduce a su inactivacin. La fosforilacin produce efectos antagnicos sobre las actividades enzimticas de la glucgeno sintasa y de la fosforilasa. La fosforilacin convierte la forma activa a de la sintasa en una forma b normalmente inactiva. La forma b fosforilada requiere un alto nivel del activador alostrico glucosa 6 fosfato para activarse, mientras que la forma a es activa est presente o no la glucosa 6 fosfato.

La degradacin y sntesis del glucgeno se reuglan recprocamente: La protena fosfatasa 1 invierte los efectos reguladores de las quinasas en el metabolismo del glucgeno: Los cambios en la actividad enzimtica producidos por la protena quinasa pueden invertirse por la protena fosfatasa. Las protenas fosfatasas catalizan la hidrlisis de los residuos fosforilados de serina y treonina de las protenas. La PP1 (protena fosfatasa 1) se encarga de regular el metabolismo del glucgeno desactivando la fosforilasa quinasa y la fosforilasa a por desfosforilacin de estos enzimas. La PP1 disminuye la velocidad de degradacin del glucgeno (invierte los efectos de la cascada de fosforilacin). Adems, la PP1 elimina el grupo fosforilo de la glucogeno sintasa b para convertirla en la forma a que es mucho ms activa. La insulina estimula la sntesis del glucgeno al activar la protena fosfatasa 1: La presencia de glucagn seala el estado de ayuno e inicia la ruptura del glucgeno a la vez que se inhibe su sntesis. Cuando los niveles de glucosa en sangre son elevados, la insulina estimula la sntesis del glucgeno al impulsar una va que activa a la protena fosfatasa 1.

El metabolismo del glucgeno en el hgado regula el nivel de glucosa en sangre: Aunque la insulina es la primera seal para la sntesis de glucgeno, en el hgado tambin funcionan otros mecanismos NO hormonales. Una seal es la concentracin de glucosa en sangre que en c.n est entre 80-100mg por 100ml. El hgado detecta la concentracin de glucosa sangunea y, en consecuencia, consume o libera este azcar. Cuando se administra glucosa disminuye rpidamente la cantidad de fosfolipasa a heptica. Despus de un perodo de latencia, el total de glucgeno sintasa a aumenta, lo que da lugar a la sntesis del glucgeno. De hecho, la fosforilasa a es el sensor de glucosa en las clulas hepticas. La unin de glucosa a la fosforilasa a, desplaza el equilibrio alostrico desde la forma R activa a la forma T inactiva. Este cambio conformacional hace del grupo fosforilo de la serina 14 un sustrato de la protena fosfatasa 1. La fosforilasa b a diferencia de la fosforilasa a, no se une a la fosfatasa. En consecuencia, la conversin de la forma a a la forma b se acompaa de la liberacin de la PP1, la cual queda disponible para activar a la lgucgeno sintasa. As pues, la actividad de la glucgeno sintasa empieza a aumentar solo despus de que la mayor parte de la fosforilasa a se haya convertido en la forma b. Este sistema depende de 3 elementos clave: La comunicacin entre el centro alostrico para la glucosa y la serina fosfato La utilizacin de la PP1 para inactivar la fosforilasa y activar a la glucgeno sintasa La unin de la fosfatasa a la fosforilasa a para evitar la activacin prematura de la glucgeno sintasa.

METABOLISMO DE LOS CIDOS GRASOS

cido graso: son los que contienen una cadena larga hidrocarbonada y un grupo terminal carboxilato. Los AG tienen cuatro misiones ppales: Los AG forman parte de la estructura de los fosfolpidos y de los glicolpidos. Muchas protenas se modifican por la unin covalente de AG, que las dirigen hacia posiciones en las membranas. Los AG son molculas combustibles. Se almacenan como triacilgliceridos, llamados tambin grasas neutras. Los derivados de los AG actan como hormonas y mensajeros intracelulares. Visin general del metabolismo de los AG: La degradacin y la sntesis de AG son inversamente proporcionales. Degradacin: Un AG activado se oxida para introducir un doble enlace; el doble enlace se hidrata para introducir un oxgeno; el alcohol se oxida a cetona y se esciende un fragmento de dos carbonos mediante el coenzima A para formar acetil CoA y una cadena de AG dos carbonos ms corta. Si el AG tiene un nmero par de tomos de C y es saturado, el proceso se repite sencillamente hasta que el AG se convierte por completo en unidades de Acetil-CoA. Sntesis: La sntesis de AG es a la inversa de la degradacin. Debido a que el resultado es un polmero, el proceso comienza con los monmeros (unidades de Acilo y malonilo activadas). La unidad de malonilo se condensa con la unidad de acetilo, formndose un fragmento de cuatro C. Para producir la cadena hidrocarbonatada, el carbonilo ha de reducirse. El fragmento se reduce, se deshidrata y se reduce otra vez hasta formar el AG.

Los triacilgliceridos son depsitos de energa muy concentrada: los triacilglicridos son depsitos de energa metablica porque estn en forma reducida y anhidra. El rendimiento de la oxidacin de los AG es alrededor de los 9Kcal/g, a diferencia de las 4Kcal/g que se obtienen con los carbohidratos y con las protenas. Esta diferencia se debe a que los AG estn mucho ms reducidos. Adems, los triacilglicridos son apolares y por ello se almacenan en la forma anhidra mientras que las protenas y carbohidratos son mucho ms polares y estn hidratados en mayor grado. De hecho, un gramo de grasa prcticamente anhidra acumula ms de seis veces la energa de un gramo de glucgeno hidratado. En los mamferos, el centro principal de acumulacin de los triacilgliceridos est EN EL CITOPLASMA DE LAS CLULAS ADIPOSAS O ADIPOCITOS. Las clulas adiposas estn especializadas en la sntesis y almacenamiento de triacilgliceroles y en su movilizacin como molculas combustibles que se transportan por la sangre a otros tx. Los lpidos de la dieta se digieren mediante las lipasas pancreticas: La mayora de los lpidos se ingieren en forma de triacilgliceroles, pero para que el epitelio intestinal los absorba deben degradarse a AG. En la luz intestinal, los TG se incorporan a las micelas formadas a partir de las sales biliares= molculas amfipticas sintetizadas en el hgado a partir de colesterol y secretadas por la vescula biliar. La incorporacin de los lpidos a las micelas orienta los enlaces ster de los lpidos hacia la superficie de la micela, haciendo que los enlaces sean ms susceptibles a la digestin por parte de las lipasas pancreticas que estn en disolucin aquosa.

Steato de grasa: cuando la produccin de sales biliares no es adecuada como consecuencia de una enfermedad heptica excretndose grandes cantidades de grasa al da (30g/dia). Las lipasas digieren los TG hasta AG y monoglicerol. Estos productos de la digestin se transportan en las micelas al epitelio intestinal, donde se absorben a travs de la membrana plasmtica. o Los lpidos de la dieta se transportan en los quilomicrones: En las clulas de la mucosa intestinal, los TG se resintetizan a partir de los AG y monoacilgliceroles y, posteriormente, se empaquetan en las partculas de lipoprotena transportadoras denominadas quilomicrones. Estas partculas estn compuestas mayoritariamente por TG y contienen como principal componente proteco la APO B48.Los constituyentes proteicos de las partculas de lipoprotena se denominan apolipoprotenas. Los quilomicrones tambin sirven para transportar vitaminas liposolubles y colesterol.

Los quilomicrones se liberan al sistema linftico y despus pasan a la sangre. Estas partculas se unen a las lipoprotena lipasas ligadas a la membrana, principalmente del tx adiposo y msculo, donde una vez ms se degradan de TG a AG y monoglicerol para ser introducidos al msculo. La utilizacin de los AG como combustible requiere 3 etapas de procesamiento: En primer lugar, los lpidos deben movilizarse, en este proceso, los TG se degradan a AG y glicerol, que se liberan desde el tx adiposo y se transportan a los tx que requieren E. En segundo lugar, los AG deben activarse y transportarse al interior de la mitocondria para su degradacin. En tercer lugar, los AG se descomponen de manera secuencial en Acetil CoA, que posteriormente se procesa en el ciclo del cido ctrico. Las lipasas reguladas por AMP cclico hidrolizan a los TG: El acontecimiento inicial es la hidrlisis de los TG por las lipasas, proceso llamado Liplisis. La lipasa del tx adiposo se activa cuando estas clulas se tratan con las hormonas adrenalina, noradrenalina, glucagn y hormona adrenocorticotrpica. El nivel incrementado de AMPc estimula a la protena quinasa A, la cual activa a las lipasas por fosforilacin. Es decir, la adrenalina, la noradrenalina, glucagn y hormona adenocorticotrpica producen liplisis. La insulina por el contrario, inhibe la liplisis. El hgado catpa el glicerol formado en la lipolisis que se fosforila y oxida a hidroxiacetona fosfato la cual, se isomeriza a gliceraldehdo 3 fosfato. Esta molcula es un intermediario tanto de la va glicoltica como de la gluconeognica.

El proceso inverso puede ocurrir por reduccin de la dihidroxiacetona fosfato a glicerol 3fosfato. La hidrlisis mediante una fosfatasa libera glicerol. Por consiguiente, el glicerol y los intermediarios glicolticos son fcilmente interconvertibles. Los AG se unen al coenzima A antes de oxidarse: El ATP impulsa la formacin de un enlace tioster entre el grupo carboxilo de un AG y el grupo sulfhidrilo del CoA. Esta reaccin de activacin tiene lugar en la membrana externa mitocondrial donde la acil-CoA sintetasa la cataliza. La activacin del AG tiene lugar en 2 etapas: o El AG reacciona con ATP para formar aciladenilato. En este anhdrido mixto, el grupo carboxilo est enlazado al grupo fosforilo del AMP. Los otros dos grups fosforilo del ATP sustrato se liberan como pirofosfato. El grupo sulfhidrilo del CoA ataca al adenilato que est fuertemente unido al enzima, para formar acil-CoA y AMP. La carinitina transporta los AG de cadena larga activados hasta la matriz mitocondrial: Los AG se ACTIVAN EN LA MEMBRANA EXTERNA MITOCONDRIAL, PERO SE OXIDAN EN LA MATRIZ MITOCONDRIAL. Se necesita un mecanismo de transporte especial para que las molculas de acil-CoA de cadena larga crucen la membrana interna mitocondrial. Los AG de cadena larga activados son transportados, a travs de la membrana, conjugados con la carnitina. El gurpo acilo se transfiere desde el tomo de azufre del CoA al grupo hidroxilo de la carnitina para formar acilcarnitina. Esta reaccin est catalizada por la carnitina aciltransferasa 1 (tambin se llama pamitiltransferasa 1). La acilcarnitina acta como una lanzadera a travs de la membrana interna mitocondrial, por accin de una translocasa. El grupo acilo se transfiere de nuevo a un CoA situado en la cara de la matriz de la membrana. Esta reaccin est catalizada por la carnitina aciltransferasa 2, es simplemente la INVERSA de la reaccin que tiene lugar en el citosol. Como resultado, el enlace 0-Acilo de la carnitina tiene un elevado potencial de transferencia de grupo. Por ltimo, la translocasa devuelve la carnitina a la cara citoslica y se intercambia all otra acilcarnitina que entra. En cada vuelta de la oxidacin de los AG se genera Acetil-CoA,NADH Y FADH2: Los acilCoA saturados se degradan mediante una secuencia repetitiva de cuatro reacciones: o Oxidacin por flavina adenina dinucletido (FAD) o Hidratacin o Oxidacin por NAD+ o Tiolisis por CoA. Como resultado de estas 4 reacciones, la cadena del cido se acorta en dos tomos de carbono y se genera FADH2, NADH y acetil CoA. Esta serie de reacciones se conoce como la va de la beta-oxidacin porque tiene lugar en el carbono Beta. La oxidacin completa del palmitato rinde 106 molculas de ATP:La degradacin del palmitilCoA requiere siete ciclos de reaccin. En el sptimo ciclo, el cetoacil-CoA de 4 carbonos se tioliza para dar dos molculas de CoA. Algunos AG requieren etapas adicionales para su degradacin como por ejemplo los AG con dobles enlaces: Para la oxidacin de los AG insaturados se requieren una isomerasa y una reductasa : Consideramos por ejemplo, la reaccin del palmitoleato. El palmitil CoA experimenta despus de 3 ciclos de degradacin la oxidacin de los AG saturados. Una isomerasa convierte un doble

enlace en un doble enlace trans para que las reacciones posteriores sean las de los AG saturados. Con la oxidacin de los AG poliinstaruados surge otro problema, partimos del linoleato (AG poliinstaturado de 18C). El doble enlace cis que aparece despus de 3 ciclos de beta-oxidacin se convierte en trans por accin de la isomerasa, igual que en el anterior. El acil-CoA que se produce en otro de los ciclos de la beta- oxidacin contiene un doble enlace cis. La DH de esta especie molecular por la Acil-CoA DH produce el 2,4 dienoil-intermediario, que no es un sustrato adecuado para la va de la beta-oxidacin. Este problema se soluciona gracias a la 2,4 dienoil reductasa que reduce el 2,4 dienoil intermediario a trans enoil CoA.La isomerasa manipula los dobles enlaces situados en posiciones impares y la reductasa y la isomerasa manipulan los situados en posiciones pares. Los AG de cadena impar producen propionil-coenzima A en la tiolisis en de la etapa final. El propionil CoA se convierte en succinil CoA en una reaccin que requiere vitamina B 12. Los AG tambin se oxidan en los peroxisomas: Peroxisoma: son orgnulos citoplasmticos muy comunes en forma de vesculas que contienen oxidasas y catalasas. Estas enzimas cumplen funciones de detoxificacin celular. Como todos los orgnulos, los peroxisomas solo se encuentran en clulas eucariontes. Estos orgnulos se caracterizan por elevadas concentraciones del enzima catalasa, que cataliza la disminucin del perxido de hidrgeno a agua y oxgeno molecular. La oxidacin de los AG en estos orgnulos, puede servir para acortar las cadenas largas y hacerlas mejores sustratos para la beta oxidacin mitocondrial. En los peroxisomas, una DH de flavoprotena transfiere los electrones al O2, lo que produce H2O2, en vez de formarse FADH2. La catalasa se necesita para convertir el perxido en Hidrgeno. Si predomina la degradacin de las grasas, a partir del acetil Coenzima A se forman cuerpos cetnicos: El acetil CoA formado en la oxidacin de los AG slo entra en el ciclo del cido Ctrico si la degradacin de las grasas y de los carbohidratos estn equilibradas. El acetoacetato, el D-3-hidroxibutirato y la acetona SE LLAMAN CUERPOS CETNICOS. Encontramos altas concentraciones de estos en personas que son diabticas sin tratamiento.El acetoacetato se forma a partir de acetil-CoA en tres etapas: o Se condensan dos molculas de Acetil-CoA, reaccin catalizada por la tiolasa. o El acetacetil CoA reacciona con acetil CoA y con agua para dar 3-hidroxi-3metilglutaril-CoA y CoA libre. o El 3 hidroxi-3-metilglutaril-CoA se esciende en acetil CoA y en acetato. La suma de las reacciones es: 2 Acetil CoA + H2O acetacetato+ 2CoA + H+. El 3-hidroxibutirato se forma por reduccin del acetato en la matriz mitocondrial por la d-3hidroxibutirato DH. El acetacetato tambin est sometido a una descarboxilacin lenta hasta cetona ya que es un beta-cetocido. En concentraciones elevadas lo podemos oler en el aliento, con olor a acetona. Los cuerpos cetnicos son un combustible importante en determinados tx: El hgado es el principal productor de acetacetato y 3-hidroxibutirato, estos son combustibles normales en el metabolismo aerbico y son importantes fuentes de energa. De hecho, el msculo cardaco y la corteza renal, utilizan acetoacetato con preferencia a la glucosa.Los cuerpos cetnicos pueden considerarse como una forma hidrosoluble y transportable de unidades acetilo. Esto es aprovechado por el tx adiposo donde los AG se convierten en unidades acetilo y se exportan como acetoacetato.Concentraciones altas de acetoacetato en sangre indican abundancia de unidades acetilo y provocan un decrecimiento en la velocidad de liplisis del tx adiposo. Los animales NO PUEDEN convertir los AG en glucosa. Los AG se sintetizan y degradan por vas diferentes: La sntesis de los AG no es simplemente la va inversa a la degradativa. Algunas diferencias entre las 2 vas son: o La sntesis se produce en el citosol a diferencia de la degradacin que se da en la matriz mitocondrial. o Los intermediarios de la sntesis de AG estn covalentemente unidos a los grupos sulhidrilo de la ACP, mientras que los intermediarios en la degradacin de los AG estn ligados covalentemente al grupo sulfhidrilo del coenzima A.

o o o o

En los organismos superiores, los enzimas de la sntesis de AG estn integrados en una nica cadena polipeptdica llamada cido graso sintetasa. Por lo contrario, los enzimas degradativos no estn asociados. La cadena de AG en crecimiento se alarga por la adicin secuencial de unidades de dos carbonos derivadas del acetil CoA. La reaccin de elongacin est dirigida por la eliminacin de CO2. El reductor en la sntesis de los AG es el NADPH mientras que el oxidante en la degradacin de los AG es el NAD+ y el FAD. La elongacin por el complejo AG sintetasa se detiene en la formacin de palmitato. La elongacin posterior y la insercin de dobles enlaces se llevan a cabo por otros sistemas enzimsticos.

La formacin de malonil-coenzima A es la etapa limitante en la sntesis de AG: La sntesis de AG comienza con la carboxilacin del acetil CoA hasta malonil CoA. Esta etapa IRREVERSIBLE es la etapa limitante en la sntesis de los AG.

La sntesis del malonil CoA est catalizada por la acetil CoA carboxilasa, que contiene una biotina como grupo prosttico. Los intermediarios en la sntesis de los AG estn unidos a una protena portadora de acilos: En concreto, los AG estn unidos al sulfhidrilo terminal de un grupo fosfopantetena, que est unido a un residuo de serina de la protena portadora de acilos. La ACP es una cadena polipeptdica de 77 acilos que puede considerarse como grupo prosttico gigante, un macro CoA. El ciclo de elongacin en la sntesis de los AG: El sistema enzimtico que cataliza la sntesis de AG de cadena larga saturada a partir de acetil CoA, malonil CoA y NADPH se conoce como cido graso sintetasa. La fase de elongacin de la sntesis de AG comienza con la formacin de acetil-ACP y malonil-ACP. La acetiltransacilasa y la maloniltransacilasa catalizan estas reacciones. Acetil-CoA + ACP Acetil-ACP + CoA Malonil-CoA + ACP Malonil-ACP + CoA La maloniltransacilasa es muy especfica, mientras que la acetiltransacilasa puede transferir grupos acilos diferentes al acetilo, aunque a una velocidad mucho ms lenta. Los AG de un nmero impar de tomos de carbono se sintetizan comenzando con el propionil-ACP, que se forma a partir del propionil-CoA por la acetil-transacetilasa. El acetil-ACP y el malonil-ACP reaccionan para formar el acetacetilACP. Esta reaccin est catalizada por el enzima condensante del acilmalonil-ACP. En la reaccin de condensacin, se forma una unidad de cuatro carbonos a partir de una unidad de dos carbonos y otra de tres mientras se libera CO2. La respuesta es que el equilibrio para la sntesis de acetacetil-ACP a partir de dos molculas de acetil-ACP es muy

desfavorable. Por el contrario, si el malonil-ACP es una de las sustancias reaccionantes, se favorece la reaccin porque su descarboxilacin contribuye a un decrecimiento sustancial en la energa libre. Las tres etapas siguientes de la sntesis de AG reducen el grupo ceto en C-3 hasta grupo metileno. Hemos de tener en cuenta que el NADPH se consume en las reacciones biosintticas, mientras que el NADH se genera en las reacciones productoras de energa. Adems, encontramos la enzima tioesterasa que acta como una regla para determinar la longitud de la cadena de AG. En los eucariotas los AG son sintetizados por un complejo enzimtico multifuncional: Las AG sintetasas en las eucariotas, al contrario de la E.Coli, tienen los componentes enzimticos unidos en una gran cadena polipeptdica. La AG sintetasa de mamferos es un dmero de 3 subunidades idnticas de 260Kd: o El dominio 1 es del de entrada de sustrato y condensacin, y contiene la acetiltransferasa, la maloniltransferasa y la beta acetoacetilsintetasa. o El dominio 2 es la unidad de reduccin, y contiene la protena portadora de acilos, la beta-cetoacilreductasa, la deshidratasa y la enoilreductasa. o El dominio 3 es la unidad de liberacin del palmitato, que contiene esterasa. A partir de estos dominios podemos decir que en una sola cadena polipeptdica hay 7 centros catalizadores. Una ventaja de esto es que la actividad de sntesis de los diferentes enzimas se realiza de forma coordinada. De hecho, un complejo multienzimtico formado por enzimas unidos covalentemente es ms estable que otro formado por uniones no covalentes. La unidad flexible de fosfopantetena de la ACP transporta el sustrato de un CA a otro. Estequiometra de la sntesis de los AG: La estequiometria de la sntesis de palmitato es: Acetil-CoA + 7 malonil-CoA + 14NADPH + 20H+ palmitato + 7CO2 + 14NADP+ + 8CoA + 6H2O La ecuacin para la sntesis de malonil CoA es: 7 Acetil-CoA + 7CO2 + 7ATP 7 malonil- CoA + 7ADP + 7Pi + 14H+ La Estequiometria TOTAL para la sntesis de palmitato sera: 8 Acetil-CoA + 7ATP + 14NADPH + 6H+ Palmitato + 14NADP+ + 8CoA + 6H2O + 7ADP + 7Pi El citrato transporta grupos acetilo desde la mitocondria hasta el citosol para la sntesis de AG: La sntesis de palmitato requiere una aportacin de 8 molculas de acetil-CoA, 14 deNADPH y 7 ATP. Los AG se SINTETIZAN EN EL CITOSOL, mientras que el acetil-CoA se forma a partir del piruvato en la mitocondria. Por lo que el acetil CoA se ha de pasar de la mitocondria al citosol, pero la mitocondria no es permeable al acetil CoA. La barrera para transportar el acetil-CoA queda salvada por el citrato, el cual transporta grupos acetilo a travs de la membrana interna mitocondrial. El citrato se forma en la matriz mitocondrial por condensacin del Acetil-CoA con oxalacetato. Cuando alcanza concentraciones altas, el citrato es transportado al citosol, donde se esciende por accin de la ATP-citrato liasa.

Fuentes de NADPH para la sntesis de AG: El oxalacetato formado en la transferencia de grupos acetilo al citosol ha de volver a la mitocondria. La membrana mitocondrial es tambin impermeable al oxalacetato, por lo que se necesitan diferentes reacciones: o Primero, el NADH reduce al oxalacetato a malato por la malato DH del citosol. o Segundo, el malato se descarboxila por un enzima mlico dependiente de NADP+. Malato + NADP+ piruvato + CO2 + NADPH o Tercero, el piruvato formado se difunde hacia la mitocondria, donde lo carboxila la piruvato carboxilasa hasta oxalacetato. La suma de las reacciones es: NADP+ + NADH + ATP + H2O NADPH + NAD+ + ADP + Pi + H+. As pues, se genera un NADPH por cada acetil- CoA transferido desde la mitocondria al citosol. Por lo tanto, se forman 8 molculas de NADPH cuando se transfieren 8 molculas de acetil-CoA al citosol para la sntesis de palmitato. Los 6 NADPH adicionales que se requieren para este proceso proceden de la va de las pentosas fosfato. La acetilcoenzima A carboxilasa ejerce una fx clave en el control del metabolismo de los AG: La sntesis de AG es mxima cuando abundan los carbohidratos y cuando escasean los AG. La acetil-CoA carboxilasa desempea un papel clave en la regulacin de la sntesis y degradacin de los AG. La carboxilasa est controlada por 3 seales: o Glucagn o Adrenalina o Insulina La insulina estimula la sntesis de los AG mediante la activacin de la carboxilasa, mientras que glucagn y adrenalina tienen el efecto opuesto. Regulacin global: La regulacin global se lleva a cabo por medio de la fosforilacin reversible. La acetil-CoA carboxilasa se inactiva por la fosforilacin y se activa por la desfosforilacin. La modificacin de un solo residuo de serina por una protena quinasa dependiente de AMP convierte a la carboxilasa en una forma inactiva. El grupo fosforilo de la carboxilasa inactiva se extrae mediante la protena fosfatasa 2A.

Regulacin local: La acetil CoA carboxilasa se estimula alostricamente por el citrato. El citrato facilita la polimerizacin de los octmeros inactivos a filamentos activos. La concentracin de citrato es alta, cuando el acetil CoA y el ATP son abundantes. Una concentracin elevada de citrato significa que hay disponibilidad de unidades de dos carbonos y ATP para la sntesis de AG. El efecto estimulador de citrato se ve contrarrestado por la presencia de palmitoil- CoA que est presente cuando hay excesos de AG. Regulacin a la dieta: La sntesis y degradacin de los AG se enucentran reguladas de modo que no pueden ser activas las 2 a la vez. Durante el ayuno, aumenta el nivel de los AG porque las hormonas como la adrenalina y el lgucagn estimulan a la lipasa de las clulas adiposas. La insulina por el contrario, inhibe la liplisis. El malonil CoA inhibe a la carnitina actiltransferasa 1, evitando el acceso de los AG a la matriz mitocondrial en momentos de plenitud. El control a largo plazo, est mediado por cambios en las velocidades de sntesis y degradacin de los enzimas que participan en la sntesis de los AG. Esta regulacin se llama control adaptativo. La elongacin y la insaturacin de los AG se realizan por sistemas enzimticos accesorios: El producto principal de la cido graso sintetasa es el palmitato. Las hormonas eicosanoideas derivan de los AG poliinsaturados: El araquidonato es el precursor ms importante de varias molculas seal: o Prostaglandinas o Tromboexanos o Leucotrienos Las prostaglandinas son AG de 20 C que contienen un anillo de 5 C. Las prostaglandinas y otros eicosanoides son HORMONAS LOCALES.

Coenzima: son cofactores orgnicos no proteicos, termoestables, que unidos a una apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalticamente activa de la enzima. Cofactor: es un componente no proteico, termoestable y de bajo peso molecular, necesario para la accin de una enzima. El cofactor se une a una estructura proteica denominada apoenzima, y a este complejo se le denomina holoenzima.