F a c u l t a d d e C i e n c i a y T e c n o l o g í a

Biorreactor de membrana extractiva para aguas residuales

industriales contaminadas con herbicidas fenoxialcanoicos
José F. Buenrostro1 y 2 y Rodrigo González1 y 2
1
Universidad Simón Bolívar, 2Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa

Resumen

El ácido 2,4-diclorofenoxiacé tico (2,4-D) es un compuesto muy utilizado en las formulaciones

comerciales de herbicidas. Las plantas industriales que manufacturan el 2,4-D –y otros herbici-
das–, descargan un agua residual agresiva y tóxica, rica en 2,4-D, con una elevada salinidad y bajo
pH. En este trabajo se determina la eficiencia de un reactor de membrana operando con un
efluente similar al del agua residual industrial. El trabajo experimental consistió en llevar a cabo
ensayos en continuo y en estado estacionario, empleando un influente con 2,4-D a 300 mg/l. El
reactor presentó reducciones unitarias en el rango de 0.4 a 0.9 mg/llumen.h (14.8 to 33.5 mg/h m2)
a tiempos de retención en el lumen de 4.1 a 15 min. En general, el reactor de membrana parece
ser una configuración efectiva para remover 2,4-D y además, al mismo tiempo, evita que la biomasa
activa se exponga al bajo pH y a la elevada salinidad del influente.

Abstract

The 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D) is very used compound for commercial herbicides
preparation. The industrial plants that manufactures 2,4-D and others herbicides, discharges
a low pH, high salinity and 2,4-D rich effluent; a very aggressive and toxic wastewater. This
research aimed at implementing and determining the performance of a membrane bioreactor
from an effluent similar to that industrial wastewater. The experimental work consisted of
continuous, steady-state assays were also run at influent 2,4-D concentration of 300 mg/l.
The reactor showed 2,4-D unit reductions in the range of 0.4 a 0.9 mg/llumen.h (14.8 to 33.5
mg/h.m2) at lumen retention times of 4.1 to 15 min. Overall, the membrane bioreactor seems
to be an effective configuration for removing 2,4-D while at the same time avoiding the
active biomass exposure to the low pH and high salinity concentration of the influent.

Introducción leza tóxica. En 1980, Saleh, Lee y Wolf reportaron

Los herbicidas de tipo orgánico son un grupo de
compuestos que incluyen al ácido 2,4-diclorofenoxi-
acético (2,4-D), al triclorofenoxiacético (2,4,5-T), la
atrazina, el dicamba, el paraquat y el linuron, entre
otros. A partir de su comercialización en la década
de 1940, el 2,4-D se convirtió en uno de los herbicidas
de mayor uso en todo el mundo y actualmente es
producido en grandes cantidades al igual que otros
herbicidas fenoxialcanóicos relacionados. Cuando
estos compuestos se incorporan a las aguas residua-
les que son tratadas en una planta municipal con
procesos tradicionales, presentan cierto carácter
recalcitrante a la biodegradación debido a su natura-
que en una planta de lodos activados de 3 mil 800
m3/día, sólo fue removido 25% del 2,4-D; en 1986,
Hill, McIntyre, Perry y Lester observaron que en
plantas de lodos activados no existe remoción para
el 2,4,5-T, sólo ligera remoción para el 2,4-D y 58%
para el ácido 4-clorofenoxiciacético, con lo cual con-
cluyeron que, en general, este tipo de procesos son
ineficientes para remover esta clase de herbicidas.
Es por ello que con base en estudios similares a los
antes referidos, la descarga a la red de alcantarillado
de este tipo de efluentes, que en las zonas urbanas
primordialmente se generan en la industria, son
objeto de regulación por la normatividad mexicana
en este rubro.

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 F a c u l t a d d e C i e n c i a y T e c n o l o g í a

El 2,4-D es un compuesto aromático halogenado que está sujeto al siguiente equilibrio ácido-base en solución
acuosa:

De acuerdo con esto, su solubilidad en agua depende marcadamente del valor de pH de la solución acuosa.

El hecho de que 2,4-D sea un compuesto con carácter recalcitrante a la biodegradación en condiciones normales
no significa que no sea transformado por ciertas especies microbianas que poseen la herramienta metabólica
para ello. A continuación, se presenta el esquema de una de las propuestas sobre las rutas de degradación
aerobia, la cual se ha observado en diferentes especies microbianas (Ahlborg y Thunberg, 1980):

COOH COOH

OH OH
O O OH
Cl Cl OH Cl
COOH 5-cloro-2hidroxi-muconico
semialdheido
2,4-dehalogenasa 4-clorofenoxiacetato 2,4-diclorofenol 4-clorocatecol CHO dehalogenasa
monooxigenasa hidrolasa 2,3-dioxigenasa
Cl Cl Cl
Cl Cl
ácido 2,4-dicloro ácido 4-cloro 4-clorofenol 4-clorocatecol 5-cloro-2-hidroxi OH
fenoxiacético (2,4-D) fenoxiacético muconico semialdheido
4-clorocatecol
COOH 1,2-dioxigenasa COOH
CHO
Cl
2-hidroximuconico
muconato semialdheido
O cicloisomerasa
células O O COOH muconato semialdheido
hidrolasa
3-cloro-cis-cis-muconato
protoanemonin Cl cloromuconato OH
cicloisomerasa Cl
COOH
O
O COOH
2-hidroxi-2,4-pentadionato
cis-4-carboximetileno-but-
2-ene-4-olido 2-hidroxi-2,4-pentadionato
dienelectona hidrolasa
hidrolasa
COOH
COOH
COOH OH O
4-hidroxi-2-oxavalerato

O oxovalerato aldolasa
melayacetato
melayacetato O
reductasa
O
COOH
COOH O

piruvato

O
3-oxo-adipato

intermediario metabólico

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 F a c u l t a d
Así mismo, la reacción propuesta para la minerali-
zación completa del ácido 2,4-D en condiciones
aerobias es la siguiente (Yadav y Reddy, 1993):
La mayoría de los trabajos realizados sobre la
degradación del 2,4-D se han llevado a cabo con
cultivos aerobios, y se ha identificado que varios
parámetros del medio ambiente de crecimiento
afectan las tasas de degradación; algunos de ellos
son el pH, la temperatura, la aereación, la concentra-
ción del sustrato y los nutrientes suplementarios.
En general, existe una mejor degradación del 2,4-D y
compuestos relacionados en los rangos de pH que se
encuentran muy cerca de la neutralidad. Las tem-
peraturas en las que se presentan las más altas tasas
de degradación se ubican en el rango mesófilo (Sinton,
Erickson y Lee, 1986; Papanastasiou y Maier, 1982;
Yadav y Reddy, 1993 y Ohron, Talinli y Tünay, 1989).
También se sabe que cuando los cultivos aclimatados
a 2,4-D se ponen en presencia de sustratos alternos
más fácilmente asimilables –como la glucosa–, pueden
presentarse modificaciones en las tasas de degra-
dación previamente observadas. Así mismo, se repor-
ta que en los cultivos mixtos aclimatados, las veloci-
dades de degradación del 2,4-D y otros compuestos
recalcitrantes pueden incrementarse si los cultivos
están conformados por organismos que han sido ex-
puestos repetidas veces a estos compuestos. Cuando
los microorganismos son expuestos por primera vez
al 2,4-D, la fase de adaptación es grande, mientras
que cuando ha recibido repetidas exposiciones esta
disminuye (Papanastasiou y Maier, 1982).
En relación con el comportamiento cinético de la bio-
degradación del 2,4-D por cultivos mixtos en suspen-
sión, aerobios o anaerobios, se ha identificado que
éste puede ser descrito por modelos simples de inhibi-
ción por sustrato del tipo Andrews (Papanastasiou y
Maier, 1982, Bolle et al., 1986), lo cual justifica su cla-
sificación como compuesto orgánico potencialmente
tóxico para la microflora existente en una planta de
tratamiento de aguas residuales municipales.
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d e C i e n c i a y T e c n o l o g í a
Sin embargo, no basta con tener el cultivo mixto acli-
matado, ya que para sustentar el crecimiento micro-
biano y llevar a cabo la biodegradación del 2,4-D,
también deben tomarse en cuenta las condiciones
necesarias en el efluente. En el caso de los efluentes
industriales que se generan en la manufactura de este
herbicida, los valores extremos de salinidad y de pH
representan severos impedimentos para aplicar un
método de tratamiento biológico de contacto directo.
Una alternativa es utilizar un sistema de contacto que
emplea una barrera física (membrana hidrofóbica), la
cual mantiene separado al sistema biológico del
efluente industrial y permite la permeación selectiva
del aromático halogenado. La configuración de este
sistema –denominado biorreactor de membrana
extractiva– ofrece la posibilidad de controlar las con-
diciones de crecimiento de los microorganismos inde-
pendientemente de las condiciones predominantes en
el efluente a tratar –que en algunas ocasiones pueden
ser desfavorables–, para modificar las tasas de de-
gradación de los cultivos previamente observadas
(Livingston, 1991; Han, Castelo y Livingston, 2001).
El sistema biorreactor de membrana extractiva funcio-
na de la siguiente manera: primero se separan los
contaminantes orgánicos de las aguas residuales
mediante una membrana de permeación selectiva y,
posteriormente, son biodegradados en otro comparti-
mento del biorreactor donde prevalecen condiciones
fisicoquímicas adecuadas para la proliferación de los
cultivos microbianos (Livingston, 1991; Livingston,
1993; Ferreira y Livingston, 2000). De esta manera, los
microorganismos son inmovilizados en la superficie
de la membrana y con esto se mantiene la fuerza im-
pulsora para la transferencia de masa basada en los
fenómenos de difusión-biodegradación que se pre-
sentan en el sistema.
De igual manera, se señala que el tiempo de resi-
dencia celular puede ser manipulado de manera
independiente del tiempo de retención hidráulico.
Estas particularidades del sistema de contacto traen
como consecuencia un incremento en los porcen-
tajes de mineralización. Así, en estos trabajos, se
reporta que aproximadamente 80% del carbono
que ingresa a la zona biológica es transformado a
bióxido de carbono, lo cual representa una gran
ventaja en términos de disminución de la tasa de
generación de biomasa, que, a su vez, tiene una
importante repercusión económica por costos de
disposición final.
37
 F a c u l t a d d e C i e n c i a y T e c n o l o g í a

El proyecto considera una fase de aclimatación en cultivo sumergido del consorcio microbiano aerobio capaz
de llevar a cabo la mineralización del 2,4-D, la caracterización de las propiedades de transporte de la mem-
brana de hule-silicón y la posterior inoculación del cultivo en un biorreactor de membrana extractiva, cuya
finalidad es estimar eficiencias de remoción del herbicida en función de los tiempos de retención hidráulicos.
Este proyecto pretende caracterizar operativamente sistemas de contacto indirecto adecuados para la remoción
biológica de este tipo de contaminantes en la fuente donde son generados, es decir, en los efluentes de la
industria química de síntesis orgánica.

Objetivo
El objetivo de este trabajo es realizar un estudio sobre el comportamiento cinético de las concentraciones de
las principales especies químicas involucradas en la degradación aerobia del ácido 2,4-diclorofenoxiacético
(2,4-D), mediante un biorreactor de membrana extractiva, operando en continuo en la zona abiótica, a diferentes
tiempos de retención hidráulica, y por lote en la zona de crecimiento microbiano.

Metodología
Se utilizó un fermentador Bioflo III New Brunswick de 3 l. para construir un biorreactor de membrana extractiva
(BME) por inclusión de un módulo helicoidal de membrana tubular de hule-silicón de 573.5 cm X 0.1473 cm X
0.0483 cm. Este material es permeable al 2,4-D y su constitución impide el paso a iones inorgánicos.

1. Preparación de un medio de cultivo mínimo sin fuente de carbono y de energía e inoculación en el

BME, del cultivo mixto previamente aclimatado a la degradación del 2,4-D (Sandoval, 1996).

2. Preparación de agua residual sintética, que consistió de una solución salina (5000 ppm NaCl) de 2,4-D a
300 ppm y pH de 1.

3. Operación del BME a tres diferentes tiempos de retención hidráulicos (tRH): 4.073, 8.146 y 15.038 min.
Manteniendo constantes la temperatura (25 °C), el valor de pH del medio de cultivo (7), la agitación
(100 rpm) y la tasa de aereación (1 vvm).

4. Monitoreo del comportamiento cinético de las principales especies químicas involucradas en la

biodegradación del 2,4-D en este sistema:

2,4-D en medio de fermentación Cromatografía de líquidos (HPLC)

2,4-D en agua residual Espectrofotometría UV-Vis

Ion cloruro Determinación colorimétrica (Livingston, 1994)

Ion amonio Determinación colorimétrica Nessler

Resultados
En la Figura 1 puede apreciarse que para los ensayos realizados a los diferentes tRH, los perfiles temporales de
la generación de cloruros, no obstante presentar oscilaciones en su ascenso, en promedio mantienen mayores
tasas en los ensayos realizados a tRH de 8.146 min.

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 F a c u l t a d
Figura 1. Monitoreo del comportamiento cinético de cloruros
generados durante la fermentación a diferentes tRH
En la Figura 2 se muestra el comportamiento cinético
del consumo de ion amonio presente en el medio
de cultivo. También se observa que, en promedio,
se presentan mayores tasas de consumo a medida
que el tiempo de retención hidráulica disminuye.
Figura 2. Monitoreo del comportamiento cinético del ion amonio
consumido durante la fermentación a diferentes tRH
La remoción del 2,4-D durante los ensayos reali-
zados, quedó expresada en términos de las diferen-
cias de absorbancia en el ultravioleta, entre la
entrada y la salida (∆A2,4-D) del agua residual sintética
que fluía a través del módulo de membrana.
Al comparar los perfiles temporales observados para
las ∆A2,4-D en los diferentes tiempos de retención
hidráulicos (Figura 3), se observa una proporcio-
nalidad directa entre los dos parámetros y, al mismo
tiempo, se identifica en todos los casos una tendencia
a la estabilización de los valores de ∆A2,4-D, al menos
para los intervalos de operación ensayados. El hecho
de que el parámetro indicativo de la remoción del
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herbicida mantenga valores constantes dentro de
ciertos rangos, es un indicio de que la operación se
está llevando a cabo en condiciones de estado
pseudoestacionario.
Figura 3. Monitoreo del comportamiento cinético del ácido 2,4-
diclorofenoxiacético a diferentes tRH
Posteriormente, utilizando valores promedio de
∆A2,4-D, se estimaron las eficiencias de remoción vo-
lumétricas (∆V) y de superficie (∆S) para los dife-
rentes tRH. En la Figura 4 se presentan los resultados;
sobresalen los valores máximos de ∆V y ∆S para el tRH
de 8.14 min. El área de la membrana utilizada es
de 0.03478 m2 y el volumen de 9.77x10-6 m3. El coe-
ficiente de partición del 2,4-D en el sistema mem-
brana de hule-silicón-agua residual, tiene un valor
de 9.8.
Figura 4. Eficiencias de remoción volumétricas (ηv) y de superficie (ηs)
del ácido 2,4-diclorofenoxiacético a diferentes tRH
Discusión
Los resultados obtenidos sugieren que no obstante
presentar oscilaciones en su ascenso, el parámetro
indicativo (Yadav, 1993) de la transformación micro-
biológica del herbicida (ion cloruro), en promedio
mantiene mayores tasas de generación en los ensa-
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yos realizados a tRH de 8.146 minutos. En este senti-
do se observa concordancia con las eficiencias de
remoción del herbicida, que presentan un valor
máximo a este tiempo de retención hidráulico. Sin
embargo, el parámetro indicativo de la asimilación
de nitrógeno (consumo de ion amonio), muestra que
el cultivo microbiano tiene actividad metabólica más
intensa a medida que el tiempo de retención hidráu-
lico disminuye.
De esta manera: a tRH de 8.146 minutos la transfor-
mación del herbicida se lleva a cabo por un metabo-
lismo microbiano orientado a tener mayores tasas de
respiración que de crecimiento. Para dar mayor sus-
tento a esta consideración, baste recordar que el com-
portamiento cinético de la biodegradación del 2,4-D
en cultivo sumergido ha sido descrito (Papanastasiou,
1982), por un modelo simple de inhibición por sustra-
to y al tiempo de retención mencionado, se mantie-
nen mayores concentraciones de herbicida.
Conclusiones
Durante los intervalos de operación y no obstante
la multiplicidad de fenómenos involucrados duran-
te la biodegradación del herbicida por el cultivo in-
movilizado, el biorreactor de membrana extractiva
tiende a alcanzar un estado pseudo-estacionario.
Esta multiplicidad se ve reflejada en el comporta-
miento de las eficiencias de remoción volumétricas
y de superficie en función de los tRH, las cuales no
presentan un comportamiento monotónico.
Por lo anterior, se considera que el biorreactor de
membrana extractiva es un contactor adecuado para
dar tratamiento biológico directo a las aguas resi-
duales industriales que se generan en la síntesis del
2,4-D, sin necesidad de requerir una etapa previa
de separación, debido a las condiciones fisicoquími-
cas que prevalecen en el efluente.
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