CAPTULO CUARTO

Bionanomaquinas: Nanotecnologa Natural

A. Amadeus Castro V.
Ingeniero Qumico, Arte y Ciencia, Buinaima-Equipo de Nanotecnociencias aacastrov@unal.edu.co http://www.arteyciencia.gq.nu La naturaleza establece una transicin tan gradual entre lo inanimado y lo animado que las fronteras que separan ambos reinos son indistintas y ambiguas La naturaleza no hace nada en vano Aristteles Estagirita

4.1

INTRODUCCION

Si se permitiera definir a la nanotecnologa como el conjunto de tcnicas que se utilizan para manipular la materia en la escala de los tomos y las molculas, podra, quizs, un lector profano en estos temas percibirse a tal ciencia como entrada a una nueva era de avances cientficos y tecnolgicos, si considerara que esto nunca haba sido posible por el hombre. Para la naturaleza, la nanotecnologa es tema viejo, y sin duda alguna una prctica fcil. Dicho conjunto de tcnicas existe desde el instante en que la vida se hizo realidad sobre nuestro planeta. Los primeros aminocidos se agruparon en protenas y conformaron desde pocas arcicas el ejemplo elemental de nanomquina. En la actualidad, cada una de nuestras funciones vitales est gobernada y compuesta por el encadenamiento de movimientos imperceptibles que son ejecutados por elementos nanoescalares. Tal actividad la proporcionan motores moleculares, brazos mviles, compuertas, sensores y otros tipos de nanoestructuras, cuyos movimientos o desplazamientos son amplificados tantas veces como sea necesario, para lograr movimientos, reacciones o sensaciones macroscpicas perceptibles. Esta ciencia primitiva es la llave de la nanotecnologa y la principal herramienta al alcance nuestro. Pocas veces meditamos sobre cuanto ocurre continuamente en nuestro interior en el mbito atmico. All se presenta la manipulacin individual de tomos y molculas en cada instante: luces, motores, sensores, baterias, mensajeros, bombas, celdas solares y otros dispositivos ms que han permanecido durante dcadas en la imaginacin de los hombres de ciencia. Existen bionanomquinas que cumplen aquellas funciones tan anheladas por quienes desean hacer sintticamente nanomquinas (biologa sinttica) o al menos realizar una

integracin de partes vivas y no vivas mediante nanotecnologa (bionanotecnologa). La bionanotecnologa o nanobiotecnologa (como prefiera decirse!), es una rama de la nanotecnociencia que ha basado su crecimiento en el uso de estructuras biolgicas tales como el ADN, protenas, y toda clase de molculas orgnicas; ya sea en forma individual, ensambladas, o en combinacin con materiales inorgnicos y compuestos metlicos. Esta ingeniera de nanopartculas requiere la imitacin de los ambientes tpicos en un ser vivo (agua, flujo de iones, uso ptimo y racional de la energa) para la reproduccin o invencin de bionanodispositivos, los cuales son el paso fundamental para el xito de la nanomedicina. La creencia de que una bionanomquina es, o se asemeja, a una nanomquina viva puede ser un error desde su propia concepcin, ya que las bionanomquinas no son entes en busca de sustento, sino que requieren interactuar con seres vivos u otras bionanomquinas para poder desempear las tareas especficas que son capaces de realizar. Las bionanomquinas sintticas han sido creadas (diseo e ingeniera) para que permanezcan programadas con tareas encomendadas; no pueden (al menos hasta ahora!), decidir por s mismas la funcin a cumplir. Slo una visin arriesgada y futurista podra permitirnos imaginar que es posible recrear clulas completas mediante bionanotecnologa. Por ahora solo se imitan algunas funciones. Las nanomquinas vivas tendrn que esperar una nueva revolucin cientfica 4.2 La supervivencia de las bionanomquinas

En el nivel atmico, en el cual se presentan las interacciones de las bionanomquinas, la consideracin de animal o vegetal desaparece, porque el conjunto es el que conlleva a la forma. Es natural que una bionanomquina no tenga gnero y especie, es simplemente una estructura. Tomemos por ejemplo a los bacterifagos, unos virus altamente indeseables en la industria lechera, pues atacan y virtualmente se comen a las bacterias que cumplen tareas de fermentacin y produccin de metabolitos en la fabricacin de quesos, yoghurt, etc. El bacterifago es un virus, una cadena de ADN (que contiene su informacin gentica) rodeada por una coraza protectora de protenas. Por s mismo es inerte, pero cuando entra en contacto con una bacteria, la infecta con su ADN y fuerza a la clula a replicar su informacin incluidas las protenas de su coraza protectora y de esta manera se reproduce, tal como lo hara un organismo vivo1. La coraza protenica del bacterifago (denominada cpside) est diseada para encontrar clulas bacteriales. Este diseo es sencillamente una distribucin de grupos qumicos superficiales que poseen actividad electrnica, afinidad qumica y complementariedad geomtrica respecto de los grupos qumicos que hay en la pared celular
1

Para efectuar la infeccin, un virus debe interactuar con los receptores extrernos del husped y acoplarse a ellos. En nanbiotecnologa, es posible intervenir en este proceso e impedir que tal fenomeno suceda. Por ejemplo, se ha encontrado que nanoparticulas de plata (1-10 nm) pueden tambien interactuar con las glicoproteinas receptores del virus VIH-1, fijarse a ellas e inhibir el virus, de forma que este ya no puede infectar a un posible huesped.

de los huspedes potenciales. Los bacterifagos no son exclusivos de las clulas lcteas. Por ejemplo: las bacterias patgenas tambin son atacadas por los bacterifagos y pasan de ser victimarios a vctimas.

(A) (B) (C) Figura 1. Estructura de la coraza protenica del virus de polio (A), influenza (B) y bacterifago X174 (C)2. En este ltimo virus se muestra separado uno de sus 60 capsmeros. Fuente: adaptado de www.rcsb.org (ver notas al final) EL bacterifago phiX174 est diseado para atacar a las bacterias de Escherichia Coli, su coraza se compone de 60 mdulos idnticos que al ensamblarse conforman un icosaedro; en cada mdulo hay puntas que sirven de ancla con la clula vctima. Cuando el virus se ha adherido, se introduce y libera sus 11 genes. La clula desafortunada se encarga de reproducir el ADN y los mdulos de su coraza (capsmeros). stos mdulos estn compuestos por protenas, los cuales tienen intencionalmente grupos qumicos con la ya mencionada actividad, afinidad y complementariedad. Estas caractersticas conllevan a un plegamiento espontneo debido a atracciones y repulsiones qumicas que resultan en la conformacin de mdulos. Cada uno de estos mdulos o capsmeros muestra en su cara externa los grupos qumicos que son afines al ADN que deben proteger y adicionalmente les permitir orientarse y acercarse a los dems mdulos hasta formar el icosaedro protector. La figura 1-C esquematiza dicha coraza. Es frecuente que la naturaleza pueda replicar nanomquinas o componentes de stas. Por ende, el objetivo ambicioso de quienes dedican sus esfuerzos a su fabricacin es dar uso industrial a la plataforma existente de manufactura de molculas especficas o bionanomquinas. Los siguientes son algunos ejemplos de nanomquinas biolgicas o hbridas de material biolgico: 1.El ADN de algunos virus puede ser modificado para que, al atacar a sus clulas huspedes, induzcan la construccin de nano-alambres. Se espera que estos filamentos sean tiles como contactos en circuitos electrnicos de alta velocidad.
2

El smbolo se pronuncia fi

2.El avance de los inconvenientes del efecto invernadero ha motivado los intentos de creacin de bacterias modificadas (ADN artificial) para absorber y fijar o transformar el dixido de carbono excedente en la atmsfera. 3.Desde 2005, existen tcnicas automatizadas para crear molculas de ADN, lo cual permite crear pequeos genomas. Esto es, a su vez, una muestra de que las bionanomquinas pueden programarse para cualquier funcin, tanto benficas, como destructivas. El 'virus del simio' (SV-40) es otro ejemplo de la manera de proceder de una bionanomquina. En este oscuro caso, la consecuencia es la muerte de una clula. Este virus tiene una coraza de 360 unidades en la que mantiene una especie de 'microcromosoma' (de por s no es micro sino nano) que, en un ciclo de vida normal del virus, entra a la clula, estimula la generacin de nuevos virus y destroza la clula husped mientras las copias salen de ella. Este virus ataca clulas de primates (de ah su nombre), pero cuando ataca a otros mamferos, el virus ya no es capaz de reproducirse. An as, sigue siendo muy amenazante, porque la secuencia de aminocidos que indican el inicio de la codificacin de sus copias (Tiamina-Adenina-Tiamina-Adenina) puede generar una cadena de ARN mensajero y que sta ordene la elaboracin de una molcula de antgeno T. Este bionanodispositivo, eventualmente, puede convertir la clula husped en una clula cancerosa porque bloquea el normal funcionamiento del control de crecimiento. Lo anterior es una muestra de la especificidad de este tipo de bionanomquinas. nicamente son capaces de reproducirse dentro de la clula que pueden reconocer y penetrar. Existen virus ms pequeos y ms simplificados, como el del polio o el de la influenza (figura 1), los cuales no contienen ADN sino una cadena de ARN mensajero. sta 'quita' el control a la clula, y le ordena operar para crear copias del material necesario para reproducir el virus. Estas bionanomquinas se han especializado en atacar clulas humanas, pero con una diferencia, el poliovirus solo puede atacar una vez. Tpicamente genera un malestar similar a una gripa que es combatida gracias a la accin de anticuerpos, aunque en 1 de cada 100 casos puede extender su efecto a las clulas nerviosas que controlan msculos y causar la conocida parlisis denominada 'polio-mielitis'. Los diferentes virus de la influenza pueden atacar a una persona repetidas veces durante su vida. En cada ocasin, los linfocitos (otras bionanomquinas encargadas de generar anticuerpos) producen los anticuerpos que bloquean los receptores protenicos del virus; pero en una prxima ocasin, podramos ser vctimas de otra forma de virus de influenza (rinovirus) o que sea casi el mismo virus 'escondido' tras mutaciones en su coraza. 100 billones de formas de aniquilar una bionanomquina. Para una bionanomquina que busca a sus vctimas a tientas, la mejor forma de evitar su accin es bloquear sus sentidos. stos, como hemos dicho, son protenas con actividad electrnica, afinidad qumica y geometra complementaria con las protenas superficiales de las clulas. Existen otras protenas que pueden acoplarse a los virus e

impedir que puedan disponer de material de construccin y trabajo gratuito. Estas bionanomquinas son los anticuerpos, los cuales recorren permanentemente el torrente sanguneo en busca de un virus o una bacteria a la que corresponda, en primera instancia, su afinidad qumica. Los anticuerpos son voluminosos, en comparacin con los receptores de los virus, y ocasionan un gran estorbo, de manera tal, que con menos de una decena de stos se puede cumplir la tarea de inhibir (figura 2). En el caso de bacterias, los anticuerpos se fijan y funcionan como avisos de alerta, para que el sistema inmunolgico acte.

(A) (B) Figura 2. El virus utiliza sus receptores protenicos para contactar a su desafortunado husped (A) e introducirse, pero si los receptores se bloquean con anticuerpos, el virus no puede utilizar huspedes para reproducirse (B) y resulta inhibido permanentemente. Fuente: adaptado de www.rcsb.org (ver notas al final) Cuando una molcula extraa se introduce a nuestro cuerpo, los linfocitos buscan en su biblioteca personal y empiezan a generar los anticuerpos adecuados para bloquearla. Del mismo modo, si de alguna manera este tipo de bloqueos o avisos moleculares pueden elaborarse artificialmente para evitar que algn proceso biolgico se desarrolle, se est creando y trabajando bionanotecnologa. Actualmente se obtienen anticuerpos producidos en conejos y ratones que son de uso comercial3. Por lo anterior, se puede observar en la bionanotecnologa una poderosa herramienta para combatir enfermedades. Por ejemplo: si se fusiona un anticuerpo con protenas txicas (toxinas), se obtiene una inmunotoxina. La inmunotoxina puede ser diseada (programada) para ubicar clulas de tipo canceroso, adherirse a ellas y utilizar la protena txica para matar individualmente a la clula. El uso de este tipo de bionanomquinas es efectivo y permite reducir la intensidad y efectos colaterales de la quimioterapia en pacientes enfermos de cncer.

El precio de un anticuerpo es an muy elevado, pues una masa de 0.1 miligramos (100 microgramos) se obtiene desde 60 hasta 350 dlares segn la dificultad de obtencin. Otro valor de referencia que puede considerarse al entrar en temas posteriores, es el costo de una secuencia de ADN purificada, la cual puede comercializarse desde 3 hasta 150 dlares por microgramos.

Un anticuerpo puede ser diseado y sometido a ingeniera, de forma que se le ligue una protena luminiscente txica, una molcula coloreada o elemento radioactivo que sirva de sensor (nanosensor), o transmisor. Estos nanoelementos vislumbran un futuro tecnolgico y mdico en el cual ser posible monitorear y perseguir clulas intrusas y enfermas, nuevos virus, o encontrar utilidad como partes de las anheladas nanomquinas que hagan realidad algunas esperanzas, como evitar la descalcificacin que presentan los astronautas cuando permanecen largos tiempos en ausencia de gravedad. En este panorama, una molcula diseada para monitorear el estado de la calcificacin de huesos y dar aviso a hormonas u otras nanomquinas que empezaran a proliferarse y retornar a valores normales la estructura sea. Los anticuerpos son los mejores nanosensores, conforman aproximadamente el 20% de las protenas del plasma sanguneo, son virtualmente capaces de reconocer cualquier molcula y constituyen los potenciales ojos, odos y olfato de nuestro universo interior y de las nanomquinas del futuro prximo; en verdad no tan prximo, pues en la actualidad el hombre se vale de nanosensores para verificar algunas tareas. Un ejemplo cercano es el de las pruebas de embarazo: stas contienen un anticuerpo con molculas de selenio adheridas a su estructura. Por s mismas no nos dicen nada, pero cuando encuentran molculas de gonadotropina corinica una hormona presente en la orina de mujeres embarazadas el conjunto se colorea de rojo brillante y seala visiblemente, una condicin que est bajo la tutela del nanomundo. 4.3 Bionanomotores y bombeo de iones

En nuestro macrocosmos, el movimiento artificial se origin mediante las palancas y las ruedas. Ya deca en pocas precristianas un reconocido ingenio griego: dadme un punto de apoyo y mover el mundo. Con el advenimiento de los siglos XIX y XX se han popularizado los motores y en la prctica actual no hay aplicacin tecnolgica que los excluya, as como en el nanocosmos proliferan los bionanomotores. Desde el inicio de la vida hasta finales del siglo XX se ignor que cada microorganismo que se desplaza por medio de flagelos utiliza nanomotores en beneficio propio, al igual que todo ser viviente o proceso vital. Esta bionanomquina es la ATPSintetasa (tambin nombrada ATP-asa); una molcula que puede hacerse funcionar (girar), incluso fuera de un ser vivo, y es la mquina energticamente ms eficiente que hasta el momento se conozca. En el motor rotatorio de ATP4 se combinan, en realidad, dos mecanismos que alternadamente sirven el uno al otro como generador de movimiento. El ms pequeo es impulsado por iones (potasio o hidronio) y est comunicado con un motor algo ms grande que se impulsa por ruptura y expulsin de molculas de ATP. El enlace fosfato es altamente energtico y su creacin debe ser asistida, cosa que se favorece por el movimiento rotacional. En el primer motor (el inferior si de alguna manera puede llamrsele), toda la molcula est inserta en una membrana grasa, de forma que cada uno de los extremos de la
4

ATP es la sigla inglesa de para Adenin-Tri-Fosfato (AdeninTriPhosphate)

bionanomquina puede estar sometido a condiciones distintas gracias al aislamiento debido a la membrana. De hecho, esto sucede. A un extremo lo circunda un ambiente rico en iones mientras el otro extremo carece de ellos. Las paredes del motor que est en contacto con la membrana son polares (son iones negativos de aspartame), y esta condicin electrnica no permite que pueda existir interaccin con la membrana, porque ella es neutra. Frente al rotor hay una protena inmvil que acta como vlvula, cuando un ion positivo (hidronio o potasio) entra, pasa al rotor y neutraliza un ion aspartato; aqu empieza a aplicarse la condicin universal de que debe siempre debe existir un equilibrio o estado de menor esfuerzo, y esta razn hace que los efectos de repulsin hagan girar al motor para colocar al ion neutralizado en una posicin que reestablezca el equilibrio. Este giro hace que, frente a la vlvula, se acople otro ion aspartato y tambin sea neutralizado, de forma que, uno a uno, cada neutralizacin ocasiona un giro de 25.09 o 36 (segn la especie biolgica). Al completar una revolucin, el ion positivo resulta transportado al otro extremo de la membrana, donde hay escasez de stos, y es fcilmente liberado, dejando disponible un nuevo ion aspartato que contribuye a los efectos de repulsin (para alcanzar la condicin de equilibrio mencionada) y el giro inducido lo acerca nuevamente a la vlvula donde reinicia el ciclo. El motor de iones (protones) descrito est conectado a otra molcula que gira en consonancia con el primer motor, y con este giro adquiere la facticidad de ligar una molcula de ADP y permitir con esto la accin de sitios activos (enzimas) que crean un nuevo enlace fosfato, y posteriormente expulsa una molcula de ATP cada 120 de giro. Este proceso es reversible, de forma que si el ambiente circundante dispone de un exceso de ATP, ste puede ligarse a un segmento distinto del motor, en donde los sitios activos rompen un enlace fosfato y expulsan una molcula de ADP, proporcionando un giro de 120 y comunicndolo al motor de iones, que se convierte entonces en una bomba de iones.

Figura 3. Esquema de funcionamiento del conjunto de protenas denominado Motor de ATP o Bomba de Protones. Un motor de iones est inserto en una membrana grasa, que permite la existencia de un gradiente electroqumico que le sirve de alimentacin. Fuente: adaptado (ver notas al final). de Goodsell

La rotacin de la ATP-Sintetasa se propuso durante la dcada de 1970, pero su observacin directa solo se hizo hasta 1997 mediante un experimento en el cual se fabric un nanomotor hbrido: se inmoviliz un extremo de la molcula por medio de adicin de cuerdas de histidina, las cuales se fijan fcilmente al nquel, ste, como es de suponer, fue el material de soporte. En el otro extremo se lig una nanobarra de vidrio recubierta de nquel, y esta a su vez se sujet a una modificacin de streptavidina (una protena) que poda girar en el eje de la ATP-Sintetasa. El resultado motiv otros experimentos similares que han logrado obtener verdaderos propulsores nanomtricos; estas partes mviles necesarias en bionanotecnologa pueden obtenerse ahora fcilmente, si se le compara con el procedimiento que sera necesario para construir un nanomotor a partir de todas sus partes elementales. Bionanomotores fuera de borda. En algunas bacterias, el movimiento de todo el organismo es proporcionado por bionanomquinas insertadas en la pared celular, ese tipo de propulsores se denomina motor flagelar bacterial y su funcionamiento es idntico al de la bomba de iones en la ATP-Sintetasa. Cada bionanomotor proporciona rotacin a un prolongado filamento helicoidal, el cual utiliza la clula para nadar. El flujo de iones se da desde un lado de una membrana grasa (tal como en la ATP-Sintetasa) en la que se encuentra embebido el motor hacia el interior de la clula (citoplasma). ste, por su gran volumen, en comparacin con el que hay entre la membrana grasa y la pared celular, tiene una concentracin baja de los iones necesarios para propulsin (sodio o hidronio) sta condicin habilita un gradiente electroqumico apto para hacer girar el motor flagelar bacterial. El gradiente electroqumico, an no explicado a fondo, consiste de un componente elctrico (voltaje) y un gradiente de concentraciones. Al interior de una bacteria tpica, el potencial elctrico es aproximadamente 150 milivoltios (mV) inferior que en el exterior de ella, y adicionalmente, como se explic, el interior de la clula es diluido en iones sodio e hidronio. Estas dos condiciones permiten entender con ms claridad por qu el ion que entra en el motor se desplaza de un lado de la membrana hacia el otro, pues se dirige al sitio de menor potencial para igualar los voltajes. El movimiento del motor est relacionado directamente con el torque que deba ejercer; es as como, si el flagelo est libre, pueden presenciarse giros desde 300 revoluciones por segundo (o dicho de una forma ms correcta: 1000 Hertz (Hz). Si el flagelo se atasca o inmoviliza, el giro de esta poderosa bionanomquina es capaz de hacer girar la bacteria entera a una velocidad aproximada de 10 Hz. Todo esto es hecho por una agrupacin de molculas (entre 10 y 18 protenas) que en conjunto apenas alcanzan 45 nanmetros de dimetro (figura 4). Existen bacterias en las que el motor flagelar bacterial logra velocidades de hasta 1700 Hz (cuando el ion es sodio) De aqu debe resultar claro lo dicho referente a la eficiencia de esta mquina, pues ese sorprendente trabajo se realiza consumiendo alrededor de 1000 iones en cada revolucin o giro, lo que aporta una energa de 2.5*10-17 julios al mecanismo del motor. Dicho

mecanismo es capaz de generar una potencia mxima de 10-15 Watios. Busca en los motores a tu alrededor; averigua, si puedes: cul es su potencia consumida, y la mxima velocidad que puede alcanzar? Alguno se le parece? Seguramente no! Existen casos en los cuales la eficiencia del motor flagelar bacterial es superior al 50% y puede alcanzar casi el 100%; esto quiere decir que aproximadamente TODA la energa qumica que est disponible para mover el nanomotor, es transformada en mecnica (movimiento), sin alguna prdida apreciable en friccin5, sonido, u otra forma de energa, a las que s debemos atender en nuestro macrocosmos. Existen microorganismos (Rhodobacter sphaeroides) en los que la corriente de electrones es proporcionada por un fenmeno similar a la fotosntesis. Son como un motor accionado con fotoceldas. Las consideraciones asociadas al circuito fotoqumico se discutirn posteriormente.

~45 nm

Figura 4. Representacin del funcionamiento de un motor-propulsor del flagelo de un microorganismo. Fuente: adaptado de www.scb.org.br/inspiracao/naturezaviva/2k20105.asp. La unin hace la fuerza Todos los movimientos que realizamos sean voluntarios o no son potenciados por millones de millones de nanomquinas que pueden ser motores cclicos o lineales. Uno de ellos (por cierto, muy importante) es el motor de miosina. La miosina es un msculo molecular que utiliza cambios en energa qumica para producir movimientos deliberados. Estos cambios de energa se deben a la captura/enlace o liberacin de molculas de ATP (entran nuevamente en escena). En este caso, la adicin o liberacin de una molcula que apenas mide 0.5 nanmetros la de fosfato puede ocasionar cambios energticos tales que la fuerza provocada por este proceso se puede amplificar hasta lograr un cambio en la conformacin de la bionanomquina de 36 nanmetros. Por supuesto, un movimiento tan pequeo no es significante en nuestro macromundo; pero cuando estos movimientos se suman millones de veces, se tienen efectos asombrosos (aunque para nuestros ojos no

Esta ausencia de friccin es previsible, pues es una situacin inherente a la materia cuando su dimensin est prxima o debajo de 100 nm.

impresionen tanto) como lo son el movimiento de nuestros brazos, ojos y, en general, una gran estructura como es nuestro cuerpo. La fuerza ejercida por una de estas bionanomquinas es igualmente insignificante: presenta valores comprendidos entre 1 a 10 piconewtons6 (pN). Pero si juntamos tantos motores como sea posible para lograr un efecto visible a nuestros ojos, bastarn 2 millones de millones de motores de miosina para poder levantar un baln que pese un kilogramo. Esto puede parecer exagerado. Pero en el nanomundo estas mquinas pueden ejercer funciones tan exigentes como mover y transportar objetos varias veces ms grandes que ellos mismos, a travs de un medio viscoso como lo es el citoplasma de una clula. Por ejemplo: en el caso visto del motor de ATP-Sintetasa, si se liga una vara metlica de unos cuantos nanmetros a uno de sus ejes, el motor puede mover esta vara tan velozmente, que es como si una persona comn pudiera hacer girar con sus manos a una velocidad de 150 revoluciones por segundo un riel de acero que midiera 100 metros de longitud. Lo anterior nos demuestra nuevamente que en el nanomundo la eficiencia energtica es extraordinaria. En la naturaleza existen hasta ahora tres tipos de bionanomotores lineales: miosina, kinesina y dineina. El primero emplea los cambios energticos proporcionados por unin y liberacin de ATP para crear un desplazamiento a travs de una carretera compuesta por filamentos de actina. Las kinesinas y dineinas realizan movimientos a travs de nanotubos (o mejor, nanotbulos), arrastrando su carga durante su trnsito al interior de estos nanoconductos. Nanovlvulas Existen otros tipos de molculas que actan como una combinacin de filtro y vlvula. Estos bionanoaccesorios (como los de una instalacin hidrulica) son componentes prefabricados y trabajan independientemente, pero interactan con y a favor de otras bionanomquinas. Un conjunto de este tipo debe contenerse o encapsularse, permitendo de alguna manera que existan flujos desde y hacia el interior de las clulas; el corral lo constituyen las membranas7, pero un encerramiento total nunca o casi nunca es deseable. Algn tipo de porosidad sera til para el paso de iones, pero no ofrecen selectividad alguna, excepto por la diferencias de tamao. Esta es la razn para que existan vlvulas de entrada y salida. Estas bionanomquinas generalmente son protenas embebidas en la
6

Un piconewton (pN) es la billonsima parte de un newton (N); es decir, un pN es la millonsima parte de una millonsima parte de un newton. (Para levantar un masa de aproximadamente 1 kg es necesaria una fuerza de aproximadamente 10 N.) 7 Una membrana es, en biologa; y por extensin, en la nanotecnologa, cualquier capa delgada de un material que cubre, delimita o reviste a otras estructuras y organismos. Podra escribirse un apartado extenso sobre este tipo de mquinas delgadas, pero no es objeto de este captulo. Las membranas son semipermeables, es decir, permiten el paso de molculas y esta particularidad las hace aplicables en diversos procesos como la nutricin, respiracin e intercambio de elementos y sustancias como azcares, sales, iones, e incluso otras bionanomquinas (protenas pequeas). En los dominios de la nanotecnologa, se centra el inters cientfico en el desarrollo de estructuras que se asemejen a las membranas biolgicas y puedan funcionar con la misma selectividad y eficiencia.

membrana que recurren a trucos electroqumicos o mecanismos de tipo interruptor para seleccionar qu entra y qu no. En una situacin cotidiana, como oler nuestro desayuno o saludar a otra persona, las seales nerviosas se propagan por medio del bombeo de iones (sodio y potasio), lo que desarrolla diferencias de potencial elctrico en las membranas celulares (cosa ya vista en el caso de los bionanomotores). Como respuesta, vlvulas o canales de sodio se abren para equilibrar los voltajes; pero como la diferencia de potencial es necesaria, otras vlvulas los canales de potasio se abren para restablecer el voltaje original. Los canales de potasio estn diseados para permitir el flujo de iones a travs de membranas, pero de forma selectiva, en particular, de iones sodio. Estos canales se componen de dos partes: un filtro (que selecciona los iones) y una compuerta, la cual abre o cierra el canal segn las condiciones circundantes. Las diferencias de tamao son relevantes en la tarea de seleccin; el modo de operar de estas bionanovlvulas es el esquematizado en la figura 5, y se resume de la siguiente forma: 1. Cuando un ion se aproxima, arrastra consigo un conglomerado de molculas de agua atradas por su carga electrnica (iones positivos atraen el dipolo negativo del oxgeno en el agua). 2. El interior del filtro est mostrando tomos de oxgeno de los aminocidos que constituyen la entrada, el tamao de la entrada es tal que, cuando un ion potasio se acerca, debe zafarse de sus aguas coordinadas; pero mientras entra, 'siente' la misma atraccin electrnica estable y homognea por los tomos de oxgeno de los aminocidos y se introduce. La condicin electrnica del tnel de entrada (filtro) da por descartado que iones negativos logren entrar debido a la repulsin de cargas semejantes la cual efecta la tarea de seleccin. Cuando un ion sodio se acerca, tambin deja atrs sus molculas de agua coordinadas, pero su tamao levemente inferior (el dimetro inico es 0.133 nm para el potasio y 0.095 nm para el sodio) le impide establecer interacciones homogneas en todo su alrededor y fcilmente se neutraliza, es entonces rechazado a causa de su nueva condicin electrnica. Este modo de seleccin permite que por cada 100.000 iones potasio que pasan, solo logre entrar uno de sodio.

(A) (B) Figura 5. Ilustracin del fenmeno de seleccin de iones a travs de un Canal de Potasio. En la situacin marcada como (A), un ion potasio se acerca a la entrada del filtro, el cual posee tomos de oxgeno de cara al ion para atraer y conducir al ion dentro de la membrana (banda coloreada horizontal). En la situacin (B), el ion ha entrado y otros ms se dirigen a la entrada de la vlvula para repetir el proceso. Mientras el cuerpo de la vlvula permanezca abierto (grupo inferior de protenas en posicin horizontal), el flujo y bombeo de iones potasio ocurrir. El bombeo se detiene si la vlvula se cierra (giro a posicin vertical). Fuente: adaptado (en parte) de www.rscb.org. Cientos de diferentes canales de iones estn presentes en los organismos vivos y constituyen un amplio inventario de material prefabricado listo para ser empleados. Si es posible utilizarlos para que sean selectivos a cualquier tipo de iones para los cuales estn programados, se debe salvar posteriormente la tarea de abrir y cerrar para dosificar el paso de iones. Esto requiere la implementacin de molculas que amplifiquen un cambio electrnico en forma similar como sucede con el retinal (visto en el siguiente apartado de ste capitulo) y desencadenen un movimiento de tipo vlvula. Otra tarea a encomendar es evitar que la entrada del filtro sea obstruida, cosa que es posible que suceda. Un ejemplo claro de esto es la habilidad que tiene el veneno de los escorpiones para hacer este dao. La toxina de este veneno se denomina caribdotoxina, es extremadamente pequea (del tamao de la entrada del canal de potasio) y su nica habilidad radica en poseer puntas de aminocidos cargadas positivamente, que, como es de esperar, se acercan al canal de potasio, son fuertemente atrados por los tomos de oxgeno de la entrada, cumpliendo as con la obstruccin. Este taponamiento impide el flujo normal de potasio, con la consecuente deficiencia en la propagacin de impulsos nerviosos y la inmovilizacin de las vctimas del escorpin. Para el correcto funcionamiento de tareas programadas, se requieren otros tipos de vlvulas, como la de calcio (protena moduladora de calcio). Cuando el calcio se bombea o admite dentro de las clulas, se disparan una serie de diferentes efectos: se ocasiona la contraccin de los msculos, se induce la expulsin de insulina desde el pncreas o se evita que espermatozoides adicionales entren a un vulo cuando el primero ya ha logrado entrar y fertilizar. Tan variadas y valiosas son las funciones de las bionanovlvulas, que su uso debe ser obligatorio cuando se pretenda crear o modificar un sistema nanotecnolgico programado. La manufactura en nanoescala requiere el uso preciso, ingenioso y controlado de herramientas nanomtricas, las cuales se han pretendido crear, pero insistentemente hay un aviso de que la direccin correcta ya existe y trabaja a diario las bionanomquinas que son fciles de disear (programar), construir y ensamblar. La facticidad de esto depende de las capacidades para avanzar en el entendimiento del cmo funcionan las construcciones moleculares de los seres vivos, o de manera ms precisa, de las nanofbricas biolgicas. Algunas vlvulas no funcionan como se ha expuesto hasta ahora, y su construccin se puede simplificar hasta una estructura tan elemental como la siguiente: visualicemos un anillo elstico, que permanece cerrado y solo abre si se empuja (as como sucede con un

tubo de fibras tejidas o trenzadas). Algunas bacterias utilizan este tipo de vlvulas y un tamao normal de esta abertura puede ser 0.2 nm. Por este orificio apenas podran pasar iones. Pero si fuera necesario que una molcula voluminosa pasara por la vlvula, solo hay que estar ubicado en la posicin correcta, para que un choque oprima la Compuerta y sta se ensanche (hasta 4 nm!) y cree suficiente espacio para que pasen por ella carbohidratos, metabolitos e incluso otras protenas. 4.4 Nanoceldas solares y luces biolgicas

De alguna forma, toda la energa que el ser humano ha utilizado y puede utilizar proviene del sol y la cantidad de energa que recibe la atmsfera terrestre supera en ms de 10.000 veces la demanda energtica total de la humanidad. La totalidad de la energa til en fotosntesis es aproximadamente 1367W/m (energa con longitud de onda menor a 400nm). sta energa solar podra utilizarse para su transformacin, si existiera algn mecanismo el cual pudiera colectarla totalmente. Gran parte de esta energa se pierde (figura 6) y solo un 29% (aproximadamente 95x1015W) queda en nuestro planeta de la cual una muy reducida fraccin (~0,1x1015W) es interceptada por algunas bionanomquinas y utilizada para el proceso de fotosntesis.
100% de la radiacin solar incidente (1367W/m) 23% reflejada por las nubes 18% perdida como radiacin de onda larga (>4mm) 7% reflejado por el suelo terrestre 6% perdido en difusin de vapor
~2000km

17% absorbido en la atm sfera

Figura 6. Prdidas energticas ocasionadas por el paso de la luz y la radiacin a travs de la atmsfera terrestre. Fuente: Elaborado con datos de Tonda y Luijkx Pese a que la fotosntesis es un proceso con un rendimiento muy bajo (entre 0.5 y 2.5%), la operacin resulta rentable debido a que la energa solar la recibimos completamente gratis (eso creemos!). El inmenso reactor solar plantado sobre la tierra realiza como principal funcin convertir dixido de carbono en carbohidratos y desprende

como residuo molculas de oxgeno. Este proceso se denomina fotosntesis y un vistazo al interior de l nos permitir encontrar bionanomquinas que suelen denominarse centros de reaccin fotosintticos. Estos centros son protenas que capturan fotones individuales y los utilizan para generar la potencia que requieren las reacciones qumicas cotidianas; se encuentran suspendidos en una membrana dentro de las clulas vegetales y se soportan o suspenden entre una inmensa cantidad de molculas coloreadas (clorofila y carotenoides) que permiten la absorcin de diferentes ondas de luz. Para el caso de la clorofila, sta molcula absorbe las frecuencias correspondientes al color azul y rojo, retornando la reconocida frecuencia del color verde. Los carotenoides retienen las frecuencias de la luz azul y verde, reflejando la gama de colores que va desde al amarillo hasta el rojo. La energa asociada a esta frecuencia de luz absorbida8 es la que se transmite y utiliza para realizar fotosntesis. En la figura 7 se representa uno de estos centros. Al interior de esta bionanomquina, se encuentra un conjunto que acta como cadena de transferencia de electrones. Est compuesto por una cadena de molculas de clorofila-filoquinona y encima de ella hay tres grupos de tomos de hierro y azufre. En esta cadena de transferencia, la clorofila absorbe fotones de luz y algunos electrones de la molcula son excitados hacia estados energticos superiores (orbitales de mayor energa). Cuando el electrn decae a su estado original, re-emite la energa en forma de calor y un nuevo fotn de menor energa; pero, antes de que esto suceda, el electrn es transferido a los grupos hierro-azufre, y estos lo transfieren a otras bionanomquinas9: molculas de ferredoxina. Estas molculas complementan la cadena y emplean estos electrones excitados en otras etapas de la fotosntesis. El electrn perdido en esta cadena de transferencia es reemplazado por uno proveniente de una molcula denominada plastocianina. La pareja ferredoxina-plastociana es complementaria, pues sus diseos particulares les otorgan propiedades opuestas: La ferredoxina difcilmente acepta y retiene electrones, pero se ve forzada a realizar esta accin debido al impulso energtico que lo precede (la excitacin del electrn). Por otra parte, la plastocianina puede emitir y recibir fcilmente electrones, por lo que arrebata con destreza electrones a la molcula de ferredoxina y el equilibrio electrnico se restituye para iniciar un nuevo ciclo. Todo lo anterior suministra una la ganancia energtica explicada por el efecto fotoelctrico, y que es suficiente para lograr el avance de muchos tipos de reacciones qumicas al interior de la planta.

La cantidad de energa asociada a una frecuencia de luz est dada E=h, donde h es la constante de Planck (h=6,6256*10-27ergio-segundo), y es la frecuencia de la onda de luz. Esta definicin se abord con anterioridad en la introduccin a este libro.
9

En nanotecnologa, el efecto de que un fotn sea capaz de arrancar electrones se denomina Efecto Fotoelctrico, descrito por Albert Einstein en 1905. Este efecto se ha descrito en el volumen #1 de la serie de Monografas BUINAIMA (disponible en lnea en www.buinaima.org/docs/Revista_Centenario.pdf ).

(A) (B) Figura 7. Esquema de centro de reaccin fotosinttico. Se resaltan en tono oscuro la cadena de transferencia de electrones compuesta por clorofila-filoquinona (A) o de clorofila-plastoquinonas (B). Fuente: adaptado de www.rscb.org El centro de reaccin fotosinttico explicado est presente en las plantas denominadas superiores, las algas y algunas bacterias, pero existe otra forma de funcionamiento basado en una estructura similar, en la que el electrn excitado que viaja a travs de la cadena de transferencia es reemplazado por una molcula de agua. Durante este proceso la molcula se descompone y se libera oxgeno, el cual respiramos los humanos. En esta variacin de foto-bionanomquina encontramos de nuevo un centro donde la clorofila absorbe fotones de luz y/o energa transmitida por una gran vecindad de otras clorofilas y carotenoides. Un nuevo electrn es excitado a niveles energticos superiores, y cuando decae, es transferido a dos tipos de plastoquinonas (tipo A y tipo B). El proceso continua y las plastoquinonas reciben electrones hasta donde su capacidad lo permite y reemiten todos estos electrones a otras bionanomquinas de la cadena fotosinttica. Nuevamente, las bionanomquinas permiten una ganancia energtica debida al efecto fotoelctrico. Como se dijo en el prrafo anterior, el electrn de reemplazo para la clorofila proviene de molculas de agua, las cuales son capturadas por aminocidos (tirosina) y son transferidas hacia las clorofilas, colocndolas en una situacin apropiada para reiniciar la absorcin de un fotn. Recordemos que, el rendimiento termodinmico (energtico) de esta reaccin es muy bajo (0.5 - 2.5%) respecto de la cantidad de fotones que logran llegar a las capas bajas de la atmsfera. El centro de reaccin fotosinttico debe tener una actitud conforme y esperar hasta que el azar provea un fotn que inicie el proceso. Afortunadamente, la energa que se obtiene durante la transferencia del electrn se puede transferir de un modo fcil entre molculas por procesos de resonancia. Estos fenmenos recaen en los dominios de la

mecnica cuntica (omnipresente siempre que ha de referirse a nanotecnologa). Todos estos electrones sirven a las plantas para enviarlos a enzimas que metabolizan carbohidratos u otras molculas, y bombear iones a travs de membranas, proporcionando potencia a una popular bionanomquina: El motor molecular de ATP. Si este sistema de transferencia de electrones circuito molecular es adecuado para impulsar funciones de trabajo o reacciones qumicas biolgicas, puede serlo tambin en el campo tecnolgico (o nanobiotecnolgico), cuyos resultados ya son de dominio pblico. Un ejemplo de esto es la creacin de circuitos electrnicos a partir de cloroplastos de espinaca, lo que ha dado como resultado la primer celda solar fotosinttica en estado slido. Dado que los cloroplastos son material biolgico y su desempeo existe en medio acuoso, este conjunto de protenas y agentes cromforos10 (clorofilas y carotenoides) debe ser estabilizado en un soporte orgnico que imite el ambiente natural. Este soporte, por ahora, consiste de pptidos que se autoensamblan para formar vesculas (lase mejor como vejigas) y nanotubos que emulan una membrana celular (esto se logra gracias a sus caractersticas de agente tensoactivo, como lo son algunos jabones). Los cloroplastos embebidos en este soporte pueden ejercer su funcin fotosinttica y desarrollo de un circuito elctrico. Es exclusiva la fotosntesis de las plantas? Para los animales, el efecto de absorber fotones para excitar electrones y re-emitir fotones de menor energa, no ocasiona procesos metablicos, sino que es utilizado como mecanismo de atraccin o defensa. En algunos peces y medusas, una protena denominada aequorina, absorbe luz ultravioleta par excitar electrones. Como es de suponerse, re-emite fotones de menor energa. Y el resultado es luz visible. En algunas bacterias (protena rhodopsina), y en el ojo humano (opsina), las complejas bionanomquinas encargadas de detectar luz y transmitir algn tipo de seal, se apoyan en el efecto que tiene la luz sobre una molcula especial: el retinal (la forma activa de la vitamina A1). sta molcula presenta una actividad extica. Fcilmente absorbe y re-emite fotones gracias a su conjunto de dobles enlaces conjugados (figura 8). Durante este proceso de absorcin/emisin, el retinol cambia la posicin de sus enlaces y se obliga tambin a cambiar su forma que pasa de ligeramente recta, a una forma curvada. En el caso de la visin humana, este movimiento se transmite y amplifica hasta lograr el movimiento de otras molculas que ocasionan la generacin de impulsos nerviosos. Algunas especies han simplificado estos procesos y la bionanomquina se transforma en una estructura de muy pocas molculas. Un caso para mencionar es la medusa. Ella no emplea molculas complicadas que acten como agente cromforo para re-emitir fotones
10

Crmoforo es una molcula o agente que otorga color. Su significado proviene del griego [croma]: color, y [forein]: llevar.

como luz. Se vale de una serie de tres aminocidos: serina-tirosina-glicina, o treoninatirosina-glicina. Cuando estos aminocidos se enrollan apropiada y espontneamente, la glicina forma enlaces qumicos con la serina, forma un anillo adicional y pierde una molcula de agua (se deshidrata). Si una molcula de oxgeno reacciona con la tirosina, esta genera nuevos enlaces y en ese preciso momento se crea una molcula con propiedades cromforas. (A, Retinol)
H3C CH3 CH3 CH3 OH CH3 Enzima H3C CH3

(B, Retinal)
CH3 CH3 O CH3

+ H2O

Fotn 1 CH3 CH3 OH CH3 CH3 CH3 CH3 Fotn 2 OH

H3C

CH3

H3C

CH3

(C, Estado normal) (D, Estado excitado) Figura 8. El retinol o vitamina A1 (A) se activa por deshidratacin en su respectivo aldehdo (B). En su estado normal es excitado tras recibir un fotn ultravioleta (C). Cuando el electrn decae, el retinal re-emite un fotn de menor energa (luz visible) y hace posible que la molcula cromfora sea luminiscente. El conjunto de protenas-retinol-agente cromforo existente en las medusas se ha denominado protena verde fluorescente, y su uso comercial es extenso, ya que permite observar directamente dentro de clulas gracias a su luminiscencia. En muchos casos, ha sido fcil hacer ingeniera gentica con sta mini-bionanomquina; pues si se estimula la creacin de la protena que contiene la cadena serina-tirosina-glicina y se introduce retinol, la bionanomquina fluorescente aparece al enrollarse en forma espontnea y es apta para trabajar. Solo se requiere una fuente de luz ultravioleta para hacer que reluzca, y como ya se ha visto, es posible adherirla a otras molculas (como anticuerpos) o a virus, y tras 'alumbrar' con luz ultravioleta, ser fcil observar los trayectos y sitios hacia los que los incautos transportadores se mueven acarreando un faro nanomtrico. Las protenas luminiscentes pueden ser modificadas para que la estructura final absorba y re-emita fotones en diferentes longitudes de onda, esto quiere decir, que es posible obtener luces en todo el espectro visible, y los cambios pueden suceder en tiempo real, por variaciones de pH o concentracin de algn elemento o molcula. Este desempeo es el de un nanosensor y sus aplicaciones pueden ser miles, ya que sirven para identificar diversas condiciones, y brindan informacin en nuestro macrocosmos sobre lo que sucede a nivel nanoscpico.

4.5

Sensores y otras bionanomquinas

Cada molcula natural, artificial, o un hbrido de stas, tiene el potencial de ser empleada como bionanomquina. Y una de las ms satisfactorias aplicaciones hasta el momento ha sido, quiz, el segmento de bionanosensores. Aqu, las nanopartculas biolgicas que exhiben exticas propiedades (o ms bien, propiedades convenientes) han sido aplicadas en su forma pura o modificada para detectar y transmitir informacin sobre situaciones de tipo electroqumico, ptico, acstico, e incluso magntico. En el campo ptico, las bionanomquinas no son exclusivamente de tipo biolgico, sino, por ejemplo, conglomerados metlicos que sirven para monitorear comportamientos de sistemas orgnicos. En estos casos, nanopartculas de metal se ligan a una molcula o se disocian dentro de un sistema en observacin. Cuando cambian las condiciones energticas (lumnicas, qumicas o electrnicas), stas interacciones son fcilmente perceptibles por nuestra visin, ya sea bajo luz visible u otro tipo de agente revelador. Por ejemplo, el avance en el reconocimiento de cadenas de ADN normal o con mutaciones se ha podido lograr mediante el uso de nanomquinas hbridas, consistentes en oligonucletidos (figura 9) que en un extremo tienen grupos azufrados y en el otro una protena fluorescente inhibida. Esta molcula se adhiere fcilmente a nanopartculas de oro (por el extremo con azufre) y se autoensambla para formar arcos alrededor del oro. El oligonucletido se ha programado (diseado) de tal forma que, cuando el bionanosensor encuentra una secuencia de ADN mutante, se adhiere a ella y la protena fluorescente se restaura, mostrando con su luminiscencia el hallazgo.
NH2 N N N CH N O O HO P O OH HN O N O O HO P O OH O CH3

O HN H2N N N N CH
O N

NH2 HN N O O HO P O OH O

N O O HO P O OH

O O HO P O OH

Adenina

Timina

Guanina

Citosina

Urcilo

Figura 9. Los nucletidos del ADN y el ARN son 5. Naturalmente se polimerizan por medio del enlace fosfato y luego se ensamblan por medio de atracciones de los grupos nitrogenados y oxigenados. Si se crean oligonucletidos (polmeros cortos) con complementariedad hacia secuencias anormales de ADN; se tiene el principio de una bionanomquina til como detector en tiempo real de cadenas mutantes de ADN. En el rea acstica, los mecanismos piezoelctricos (cuarzo cristalino) sirven para verificar la masa de las bionanomquinas que se pudieran crear. Pues dada la sensibilidad de estos mecanismos, se ha considerado que la superficie de un electrodo de cuarzo puede

ser diseada para poder acomplejar11 sobre ella molculas biolgicas como por ejemplo, anticuerpos. Y la masa de cada bionanomquina se traduce e identifica, ya que esta afecta notablemente la frecuencia de oscilacin del sensor. Un bionanosensor magntico puede hacerse con la leve modificacin de algn tipo de bionanomquina. Por ejemplo, ligar a ella alguna forma de ferrita o un derivado magntico o paramagntico. Aprovechando los principios ya mencionados para que exista interaccin entre bionanomquinas (actividad electrnica, afinidad qumica y complementariedad geomtrica), se han programado sensores para reconocimiento de otras molculas o individuos (microorganismos), y cuando esto ha sucedido, los sensores se acoplan a su objetivo son retirados, o ms bien atrados, por una fuente magntica externa. Ya hecho esto, los objetivos capturados pueden recuperarse y pasar a la tarea de regenerar el sensor. Otra posibilidad consiste en permitir que los nano-buscadores permanezcan ligados a sus objetivos y observarlos bajo un microscopio con dispositivos de interferencia cuntica de superconductividad. Si en nuestros sensores se utilizaran nanopartculas con propiedades paramagnticas, la relajacin de Nel12 ocasionada por la unin sensor-objetivo es observable como disminuciones del flujo magntico. Los bionanosensores electroqumicos son los ms abundantes y sus ejemplos no estn necesariamente en laboratorios, aunque casos muy elaborados nunca salen de all. Tal es el caso de la computacin basada en procesadores de ADN y otros casos selectos. Consideremos una enzima cualquiera, con una funcin caracterstica ejecutada en un ambiente propicio. Estas protenas son modificadas con adhesin o reaccin con metales, y su comportamiento es modificable hacia el reconocimiento de sustancias qumicas. Por ejemplo, y recurriendo nuevamente a partculas de oro nanomtricas, es posible crear coloides de enzimas hbridas que son capaces de sealar la presencia de agua oxigenada, azcares, u otros metabolitos, hasta concentraciones tan dbiles como 0.4 micromoles 13. Esto quiere decir, para el caso de la glucosa (peso molecular de 180 g/mol), que el bionanosensor puede detectar tal azcar, aunque se encuentren tan solo 0,000072 gramos en un litro. Dicho de otra manera, equivale a encontrar evidencia de que una cucharada de azcar se disolvi en 100 toneladas de agua. (si se tuviera una piscina de 10 metros en cada lado y 1 metro de profundidad, all habran 100 toneladas de agua!).
11

El fenomeno de acomplejamiento sucede por un efecto atractivo de un agente o sustancia, sobre un medio circundante (del latin complexus, de complecti, enlazar). Sobre un electrodo de cuarzo, como sucede en este caso, se debe formar un conglomerado de particulas que son atraidas o adheridas. 12 Una relajacin es una prdida; que en este caso es una prdida electromagntica. Para una partcula nanomtrica, la relajacin puede suceder por medio del giro propio, para orientarse hacia una fuente magntica (relajacin de Brown), o por medio del giro del momento magntico al interior de la partcula (Relajacin de Nel). La relajacin de Nel ocurre para partculas en medio acuoso, de tamao inferior a 10 nm y en presencia de campos magnticos con frecuencias mayores a 1 MHz. Estas relajaciones ocurren para toda nanopartcula metlica que se adhiere a un material orgnico.
13

Un micromol es la millonsima parte de un mol. Se plantea aqu como caso de comparacin al azcar de mesa (glucosa), para la que un mol son 180 gramos.

En muchos bionanosensores es recurrente el uso de oro, debido a su facilidad para permitir la transferencia de electrones y quiz ms propiedades que se modifican drsticamente cuando la partcula se vuelve nanopartcula (tamao <100 nm). El autoensamblado es, en muchos casos, la situacin limitante , dado que un bionanosensor debe desempearse, o imitar al que pudiera ser hecho por un organismo vivo: generarse con el material disponible y adquirir su configuracin definitiva ms estable y til. El auto ensamblado es la llave para unir la fsica, la qumica y la biologa, o dicho en otras palabras, que es la clave de la nanotecnologa. Quiz para el lector de este captulo es claro hasta este punto que las bionanomquinas s se autoensamblan, y deben ser el ejemplo a seguir para los entusiastas de la bionanotecnologa. Bionanomquinas completamente orgnicas tambin sirven de sensores. Una toxina elemental, como la de la planta de higuerilla o ricino (toxina denominada ricin), enlaza los receptores del azcar galactosa de las clulas. Luego de acoplarse, introduce dentro de ella pptidos desensamblados e interfiere en la sntesis de protenas. Cuando estas mismas acciones se usan para hacer que la toxina se una a cadenas de ADN tpicas del virus VIH1, la bionanomquina pasa de ser destructiva hacia la forma de un excelente nanosensor, pues este acoplamiento virus-ricin, desencadena reacciones y productos intermedios que son coloreados (y por lo tanto: observables) an cuando la concentracin del virus sea muy baja. Mensajeros en el nanomundo Como en cualquier sistema interactivo, existe un modo de comunicacin o transmisin de informacin. En el caso de las clulas nerviosas, la comunicacin es hecha por el envo y recepcin de nanopartculas llamadas neurotransmisores (como la acetilcolina, o serotonina). Estas molculas se difunden hasta que encuentran receptores especiales en otras bionanomquinas. Las bionanomquinas con receptores se abren como vlvulas y permiten que ocurran flujos de iones, con la consecuente cascada de efectos electroqumicos involucrados. Los receptores se encuentran siempre en el exterior de las clulas y deben tambin encontrarse en todo tipo de bionanomquinas. Este fenmeno constituye el primer contacto con el entorno. Las protenas mismas pueden convertirse en receptores, y para dar un paso ms en la escala de complejidad, son tambin sensores los conjuntos de ellas. Si autoensamblamos protenas en forma de tubos y luego los colocamos o insertamos en membranas (recurriendo al principio inviolable de la existencia de actividad electrnica, afinidad qumica y complementariedad geomtrica), se presenta un efecto como el que se vio con el retinal: la configuracin del receptor cambia sutilmente, pero suficiente para transmitir cambios relevantes. En este caso, el tubo se expande y el flujo de iones se establece a travs de la membrana (iones sodio, potasio, o calcio, por ejemplo).

Para un caso particular, como el de las clulas musculosas, ellas estn bombeando permanentemente iones de sodio fuera de su estructura, pero si el neurotransmisor adecuado se inserta en su receptor personal (acetilcolina, figura 10-B), el flujo de iones se invierte y promueve el proceso de contraccin muscular.

(A) (B) (C) Figura 10. Representacin del receptor de acetilcolina, La parte (B) muestra su posicin en una membrana, y las partes (A) y (C) son las vistas superiores cuando el receptor est cerrado y abierto (respectivamente) al paso de iones. Cuando el receptor se modifica por adicin de protenas txicas, resultando un receptor paralizado que permanece abierto como en el estado (C). Fuente: adaptado de www.rcsb.org (ver notas al final) Este tipo de bionanomquinas los receptores de neurotransmisores sirven para muchas ms funciones. En las rayas elctricas y anguilas, el receptor de acetilcolina se encuentra en cantidades enormes en los rganos elctricos. En estos curiosos casos de la evolucin, las clulas musculares son planas y se agrupan en capas. Se crea una diferencia de voltaje en la membrana de las clulas (ver el caso del motor flagelar bacterial) y se controla por la abertura y cierre del receptor de acetilcolina. La suma en serie de estas diferencias (causada por el empaquetado de clulas en capas) se incrementa en escala progresiva hasta que es suficientemente grande para vencer la resistencia del organismo propio, y descargarse como un choque elctrico; frecuentemente sobre una presa o intruso. Tan simple como importante es la funcin de los neurotransmisores (o sencillamente transmisores) as como la de los receptores, los cuales podemos manipular con sencillez. Si una molcula txica es adherida al receptor de acetilcolina, puede evitarse que se abra el conducto. El flujo de iones nunca ocurre y la cascada de estmulos se detiene. Esto es fcil de ver en el casos de algunos venenos, como el de la serpiente cobra. Ella sintetiza y suministra a su veneno ciertas molculas (toxinas) que se pegan alrededor del receptor de acetilcolina y lo paralizan (figura 10-C).

Es importante programar un mensaje de forma que solo acte en el tiempo adecuado y luego sea retirado (o destruido). En el caso de la acetilcolina, esta se destruye por hidrlisis, con lo cual cambia su identidad qumica (se transforma en cido actico y colina) y el receptor se cierra nuevamente. Esto puede darnos una nocin de otra forma para estropear un receptor: si se evita que el transmisor sea destruido, el receptor permanece abierto y nuevamente se logra paralizar al sistema. La bionanotecnologa se vale de este tipo de nanoestructuras para aliviar enfermedades relacionadas con la relacin existente entre transmisor y receptor. En el mal de Alzheimer, las clulas nerviosas se pierden progresivamente mientras que la enfermedad avanza. Hoy da en vez de realizar alguna obra fantstica como los primeros ideales nanotecnolgicos de pretender viajar al interior del cuerpo y reparar la clula. Se trata a los pacientes con inhibidores del proceso de destruccin de acetilcolina (que bien pueden ser protenas que obstaculizan el trabajo de la enzima que la hidroliza, como la acetilcolinaestearasa). Este proceso de hidrlisis dura 80 microsegundos en los humanos, pero si se evita en algo su destruccin, el exceso de transmisores suple al defecto de receptores y la cadena de impulsos nerviosos es parcialmente compensada en pacientes con este tipo de degeneracin. Luces del nanomundo La bioluminiscencia es luz producida por medio de reacciones qumicas; alguna vez fue una gran paradoja, que la fsica, la qumica y la biologa se encargaron de resolver. En una situacin comn, como la que nos invade desde la invencin de la bombilla elctrica o incandescente se debe hacer que un filamento metlico o gas enrarecido deba calentarse o excitarse hasta que la radiacin emitida sobrepase el espectro infrarrojo. Slo as la luz emitida es visible para nuestros ojos. Pero aquella travesa por bajas longitudes de onda hasta el infrarrojo involucra perdidas de energa en forma de calor y otras radiaciones, las cuales son un enorme desperdicio que consume casi la totalidad de la energa destinada a producir luz. Cuando se puede producir luz sin tener que generar este desperdicio de calor, nos referimos al fenmeno de luminiscencia, que es parcialmente lo opuesto a la incandescencia. La luminiscencia biolgica no es ms que una herramienta qumica de la que se vale una especie biolgica es la emisin de fotones durante una reaccin qumica, que casi siempre es una reaccin de oxidacin. La luz producida por este medio es luz real: puede reflejarse, difractarse y polarizarse, tambin puede ser interferida y fotografiada. Existen casos en los que son tan intensas las emisiones de luz, que basta un conjunto luminiscente de alrededor de 2 metros de dimetro, para que se pueda leer dentro de una habitacin que tenga dos metros de altura. Con los mecanismos adecuados de enfoque, direccin, reflexin, lentes para concentrar el haz luminoso y filtros para controlar el color de la luz, pueden elaborarse nanolinternas para usos tecnolgicos (o nanotecnolgicos).

Las bionanomquinas luminiscentes estn compuestas por dos molculas: luciferina (la que produce la luz) y luciferasa (la enzima protena que cataliza o facilita la reaccin que produce luz). La protena catalizador no toma parte permanente en la reaccin de oxidacin/emisin de luz; pero su sola presencia es suficiente para que la reaccin suceda. En las reacciones 'normales' de oxidacin con incandescencia por ejemplo: quemar un papel los productos de oxidacin son dixido de carbono y agua; pero en la bioluminiscencia, el producto de reaccin es oxiluciferina, la cual puede regenerarse para repetir el ciclo de emisin de luz, el cual puede repetirse ms de un milln de veces por segundo. El secreto de estas luces est en el mismo efecto fotoelctrico, solo que en este fenmeno, la emisin del fotn se debe al decaimiento de un electrn que perteneca a un enlace altamente energtico y que tras la hidrlisis de la oxiluciferina, pertenece a un enlace que le exige menor energa (figura 11). Aunque la luminiscencia qumica posee rendimientos energticos de alrededor de 25%, esto es sorprendentemente ms elevado que el 1 o 2% que proporciona la incandescencia. Estas bionanomquinas luminiscentes ya tienen aplicacin en elementos recreativos y de emergencia, pero su uso ms interesante est en el nanomundo, pues la aparicin de luz, adems de iluminar, sirve para la deteccin de aquellas molculas que son necesarias para la reaccin, esto quiere decir, que nuevamente usamos una bionanomquina como sensor, y en este caso ha sido til para detectar sustancias como ATP, NADH (una importante enzima) y oxgeno.
Luciferima N NH3 D-cistena
H2N HS O OH

O N S OH O2 + ATP

HO

Enzima Luciferasa

CO2 + AMP

N N N HO S
O HS OH

N S

OH

HO H2O + LUZ (~490-560nm)

Oxiluciferima

cido tiogliclico

Figura 11. Reacciones de oxidacin de luciferina hacia oxiluciferina, y reduccin (regeneracin) enzimtica durante un ciclo de generacin de luz. 4.6 Presente y futuro

Es posible que en el ao de 1986 se haya iniciado la nanotecnologa tal como la conocemos actualmente, un poco filosfica, pero al fin y al cabo, construida con ideas que poco a poco y con gran cantidad de fracasos, han podido hacerse realidad. Eric Drexler parafraseaba algunas afirmaciones de personajes que investigaban en la fsica, la qumica y la biologa. Estas reas cientficas ensambladas (o autoensambladas?) son el soporte de la nanotecnologa. Una de tantas frases citadas por Drexler, es la siguiente: La Ingeniera de protenas representa un primer paso importante hacia una capacidad ms general para la ingeniera molecular, la que nos permitir estructurar la materia tomo a tomo. Esta frase de Kevin Ulmer, aparecida en un texto de Science (volumen 219, febrero de 1983) parece recoger la intencin de ste captulo. Pero, sin embargo, las protenas tal como se han visto hasta el momento: bajo la perspectiva de bionanomquinas, son el fundamento de la primera ola nanotecnolgica, pero la segunda ola, tal como se ha predicho, debe orientarse a la generacin de nanomquinas hbridas, que se valgan del mecanismo de autoensamblado orgnico pero con estabilidad persistente en el tiempo. Las bionanomquinas solo pueden ser tiles en el medio adecuado, es decir, con agua y la temperatura correcta. Los dispositivos nanotecnolgicos de inicio del siglo XXI utilizan membranas sintticas autoensambladas para contener las nanopartculas y simular el ambiente celular. Estas pelculas (membranas celulares sintticas) y liposomas se hacen de fosfolpidos y otras clases de molculas amfiflicas (como un tensoactivo). La ubicacin estratgica de sitios hidroflicos e hidrofbicos son los causantes del autoensamblado u organizacin espontnea Cuando una partcula se reduce de tamao, tanto que se considera nanomtrica, el comportamiento tpico que exhiba en el macrocosmos se desvanece y da paso al comportamiento cuntico. Esta puede ser la razn ms fuerte para denominar puntos cunticos a un arreglo controladamente organizado de partculas nanomtricas, que pueden ser biolgicas, hbridas o inorgnicas. Esta organizacin controlada, tanto en una como tres dimensiones, es la base de funcionamiento de los dispositivos de memoria y lgicos. Muchos de estos dispositivos se fabrican actualmente por medio de litografa micro y nanomtrica, que han evolucionado hasta alcanzar una densidad elevada y tamaos verdaderamente reducidos, pero a medida que se alcanza el lmite micromtrico (1000 nm) y ms all (nanomundo o inferior a 100 nm), estos procedimientos se hacen muy costosos, limitantes, y los efectos cunticos son realmente evidentes. Esto motiva la arquitectura en nanoescala por medio de nanopartculas e incluso tomos individuales, como ocurre con los transistores atmicos. Uno de estos tipos de arreglos se hace con protenas modificadas e incluso ADN. Estas se asocian naturalmente en estructuras de forma anular que se denominan chaperoninas y de acuerdo a las modificaciones o propiedades naturales e intrnsecas de estas bionanomquinas (algunas de las cuales se han relatado a lo largo de ste capitulo) constituyen verdaderos sitios reactivos a un sinnmero de alteraciones pticas, qumicas, magnticas, etc.

Protenas chaperonas de tamao de 3 hasta 9 nanmetros pueden ensamblarse en anillos con forma de poro que cristalizan en modelos bidimensionales o placas de hasta 10 micras de dimetro. En el interior del poro pueden ligarse selectivamente ms nanopartculas reactivas como oro, seleniuro de cadmio-sulfuro de zinc (CdSe-ZnS). Estos puntos cunticos modificados se vislumbran como la prxima generacin de todo tipo de dispositivos para caracterizacin ptica y electrnica, ya que como se dijo, constituyen verdaderos sitios reactivos a todo tipo de alteraciones pticas, qumicas, magnticas, e incluso biolgicas. Pueden llegar a utilizarse para detectar enfermedades antes de que se manifiesten, ubicar mutaciones, cncer y todas las dems posibilidades que puedan encontrarse. En la figura 12 se esquematiza el posible funcionamiento de una placa de puntos cunticos reales, hechos con anillos del aminocido cistena, los cuales se modifican para presentar cambios de apariencia ante alteraciones qumicas.

(A) (B) Figura 12. Puntos cunticos de cistena (A), cuando una modificacin qumica sucede, el anillo de aminocidos cambia su conformacin y se abre (B), al estilo de los neuroreceptores, y evidencia macroscpicamente un suceso qumico no fcilmente detectable. Fuente: adaptado de bionanex.arc.nasa.gov/projects.html Las investigaciones en el rea de catlisis han posibilitado obtener molculas que cumplen las mismas funciones que las enzimas biolgicas, que aunque muy tiles, solo se desempean en las condiciones satisfactorias y en muchos casos sera maravilloso si pudieran trabajar tambin en ambientes extremos y exigentes. Molculas simples son diseadas para cumplir las mismas funciones que hara una bionanomquina - hasta donde fuere posible - como, por ejemplo, la sntesis selectiva de aminocidos y la imitacin del mecanismo de ruptura de ADN. Desde la dcada de 1980 se trabaja en este frente, y los trabajos incluyen molculas que no son protenas, pero que todava son orgnicas. Para discusin de un caso particular pueden presentarse como nanomquinas moleculares a las ciclodextrinas; unas molculas de apenas 0.5-0.9 nm, solubles en agua pero con propiedades hidrofbicas en su interior que son tiles, pues esto ofrece la posibilidad de extraer y retener en su interior materiales que tambin son hidrofbicos y transportarlos tal como lo hiciera una enzima con una sustancia que debe modificar. Otras molculas como el piridoxal y sus derivados sirven para ejecutar tareas de modificacin de otras molculas, e incluso protenas. El xito de

estas funciones se soporta en un principio muchas veces mencionado (actividad electrnica, afinidad qumica y complementariedad geomtrica), pero la pequeez de las nuevas nanomquinas podra permitir trabajar sin que sea necesaria la complementariedad geomtrica ya que la construccin de las molculas para seleccionar el objetivo es suficiente. Funciones hasta ahora exclusivas de bionanomquinas, como la ruptura controlada de ADN, pueden repetirse sin que intervengan ya estas molculas (ribonucleasa, para este caso). El aprendizaje del funcionamiento de la bionanomquina original, ha permitido ubicar las molculas que son responsables de las tareas principales. Y ahora solo es necesario ubicar estas molculas en un soporte ms modesto y ms pequeo (nuevamente ciclodextrina) que pueda llegar hasta su destino y/o alojarlo para iniciar las tareas programadas. Veamos un claro ejemplo del uso de bionanomquinas en beneficio nuestro. En pginas anteriores se mencion la posibilidad de utilizar centros de reaccin fotosintticos para crear fotoceldas. La forma en que pude fabricarse uno es la siguiente: a. Cloroplastos de un vegetal (espinaca) se depositan en un soporte de vidrio una placa y para preservar el entorno acuoso, se coloca sobre los cloroplastos una pelcula de pptidos autoensamblados, que se asemejan a la proteccin que ofrece una membrana celular. Los cloroplastos se protegen para no secarse. b. Para crear los electrodos, las capas de cloroplastos se depositan sobre un vidrio recubierto por un material metlico transparente en lugar de un vidrio simple. ste recubrimiento/electrodo es una mezcla de oxido de indio y estao. c. El conjunto se humecta para que haya conduccin y del otro lado de los cloroplastos protegidos se coloca una pelcula de plata que sirve como segundo electrodo. Todo esto, produce el mismo resultado que si sucediera fotosntesis, pero el fin es distinto: cuando un haz de luz visible atraviesa la placa de vidrio con el primer electrodo de xidos metlicos, las protenas de fotosntesis absorben fotones y los electrones excitados son despedidos; pero ahora el receptor de stos es el electrodo de plata y si entre los dos electrodos conectamos un dispositivo que consuma energa (un radio pequeo, por ejemplo) el circuito se cierra y la corriente creada retorna los electrones a los centros de reaccin fotosintticos. El proceso se esquematiza en la figura 13.

Placa de vidrio Cloroplastos Membrana

Electrodo positivo

Electrodo negativo

Figura 13. Esquema de un fragmento de una fotocelda elaborada con cloroplastos vegetales. Fuente: elaborado a partir de datos de Das R. Estos dispositivos nanotecnolgicos, que no necesariamente son tan diminutos (pero si sus componentes), pueden ajustarse para que sean ms eficientes, como por ejemplo: hacer rugoso el vidrio, para poder contener ms cloroplastos. La gran ventaja de estas fotoceldas frente a otras que pudieran ser ms eficientes, es la posibilidad de autoregeneracin que brindan los cloroplastos. El orden de magnitud de las posibles aplicaciones debidas a la transferencia del conocimiento obtenido de las bionanomquinas hacia los nuevos materiales moleculares es tan numeroso como el conjunto de nanmetros que caben en un metro. Las exticas propiedades moleculares y supramolculares de estos dispositivos tendrn aplicacin en la electrnica molecular, biomedicina y maquinaria electrnica: pero en estos casos ya no se habla de bionanomquinas individuales sino sistemas de bionanomquinas engranadas o ligadas a otras semejantes (y complementarias), que seguramente encontrarn su campo de aplicacin en la construccin y autoensamblado de mecanismos de transporte molecular, deteccin o almacenamiento de informacin, solo por citar algunas posibilidades. 4.7 A manera de conclusin.

Las nanotcnicas involucran la creacin, caracterizacin y modificacin de nanomateriales organizados para la construccin de sistemas y dispositivos nano e incluso microscpicos. Se ha visto que los sistemas vivos contienen una extensa gama de nanomquinas y dispositivos altamente estructurados, pero an as, la nanotecnologa y la bionanotecnologa practica estn en su infancia y no es realista proponer, por ejemplo, el uso de nanomotores para ensamblar (en un tiempo cercano) nanomquinas propulsadas. Hechos menos vistosos hacen de la bionanotecnologa una prctica hbrida que puede incluso confundirse con la nanomedicina. El lector no debe olvidar algunas palabras del

comienzo de este captulo: las bionanomquinas no son por s mismas entes en busca de sustento, sino que requieren interactuar con seres vivos u otras bionanomquinas para poder desempear las tareas especficas que son capaces de realizar. Se puede ejemplificar esto por medio de la siguiente situacin: es posible utilizar nanodispositivos que actan como viajeros portadores de medicamentos de efecto especfico sobre ciertos tejidos y otras bionanomquinas, pero la opcin de utilizar bionanomquinas no es an visible o fcil. Que es bionanotecnologa? El prefijo 'bio' indica la intervencin de organismos vivos en alguna prctica o ambiente. Por ejemplo: bioacstica es el estudio de la relacin que existe entre los organismos vivos y el sonido; la biofsica estudia los fenmenos biolgicos y estructuras de los organismos vivos mediante los principios y mtodos de la fsica14. Siguiendo esta rutina, puede definirse bionanotecnologa (o nanobiotecnologa, segn quiera escribirse) al combinar las definiciones de nanotecnologa y biotecnologa. entonces se puede inferir que la bionanotecnologa es el estudio de los procedimientos tecnolgicos en los que intervienen organismos vivos (microorganismos) o sus componentes, bajo la interaccin o implantacin de nanopartculas. Como muchas de las bionanomquinas son componentes de los organismos vivos, tambin es lcito sugerir como definicin alternativa y algo coloquial, que la bionanotecnologa es el uso simultneo de bionanomquinas y nanomateriales (nanotubos, fullerenos, zeolitas, nanobarras y otras nanopartculas) Veamos algunos casos selectos que involucran bionanotecnologa, no pretenden generalizar sobre la prctica, pero pueden ser una va de iniciacin en el tema y quiz puedan formar en el lector una idea ms completa de los alcances de la fusin entre (bio)mquinas y materiales nanoescalares: Magnetomicelas para la liberacin a control remoto de medicamentos no solubles en agua se realizan exitosamente al encapsular nanopartculas magnticas junto con el medicamento dentro de micelas de un polmero (poliacrilato entrecruzado). El nanodispositivo puede entonces enviarse o inyectarse dentro del torrente sanguneo y cuando se ubican en el lugar objetivo se accionan por medio de un transmisor de radio (en kilohertz). De esta manera se calienta localmente la nanomquina sin afectar el tejido circundante y el medicamento acta exclusivamente sobre el tejido comprometido. En principio, los nanodispositivos deben guiarse hasta al rea de trabajo, pero puede ser ms fcil si la nanomquina se torna en bionanomquina, utilizando motores con capacidad de deteccin como el nanomotor que utiliza el virus 29 para empacar ADN. La bionanomquina en cuestin mide apenas 30 nanmetros y

14

Definiciones tomadas de la Enciclopedia Espasa 2007. Editorial Espasa Calpe, S.A., 2006.

est dotado de seis unidades de ARN-polimerasa con sitios de unin disponibles de ATP para propulsar el motor (para recordar la forma de locomocin, el lector puede referirse a la forma de operacin de motor de ATP-Sintetasa). Este tipo de nanomquina puede ser encendida y apagada a voluntad del operario (operario humano, por supuesto!). Las clulas pueden etiquetarse por medio de nanopartculas que pueden insertarse, ya como puntos cunticos, o como nanobarras, nanotubos o nanopartculas individuales. Un caso exitoso ha sido el reportado por el grupo de investigacin de Debabrata Mukhopadhyay, quienes han logrado internar nanobarras de ortofosfato de europio y terbio, dentro de clulas vivas y monitorearlas en tiempo real15, haciendo nfasis en casos de inters contemporneo como lo es el monitoreo de clulas cancergenas (clulas renales). Esta tcnica de identificacin de clulas vivas parece ser ms efectiva que algunas tcnicas de pigmentacin in vivo, pues las nanobarras retienen sus propiedades fluorescentes an dentro de clulas vivas del cuerpo humano16. Ests nanobarras pueden presentar dimetros de 10 a 60 nanmetros, un tamao similar al de muchas nanopartculas. Un material tan comn como la ferrita (xido de hierro magntico) puede ligarse a enzimas en cualquier sitio funcional que contenga un grupo aldehdo, previa activacin de la nanopartcula de ferrita con grupos funcionales carbo-diimida. Esta unin de nanopartculas y bionanomquinas mejora el desempeo natural de las ltimas, haciendola, Incluso, superior a otras bionanomquinas que pierden sus propiedades y actividad al someterse a valores de pH extremos y sustratos de dficil acceso17. En una anotacin anterior se hizo referencia a la afinidad que presentan las nanopartculas de plata por los receptores protenicos del virus VIH-1, pero la bionanotecnologa tambin ha avanzado hacia la generacin de nanopartculas por las misma bionanomquinas. Investigadores de la Univerisidad de Campinas (Brasil) han encontrado que el hongo Fusarium oxysporum puede ser una fuente de nanopartculas de plata18. Las enzimas reductoras en las clulas de estos hongos pueden convertir iones de soluciones de compuestos de plata (Ag+1) hacia la forma elemental (Ag0), formando coloides (hydrosoles) metlicos de tamaos comprendidos entre 20 y 50 nanmetros. La potencialidad de esta actividad extica de estas bionanomquinas puede servir para evolucionar en la lucha contra el sida y otras enfermedades, ya que las nanopartculas de plata tambin exhiben afinidad por otros microorganismos, pudiendo inhibirlos en sus actividades y desarrollo, es decir, se convierten en un agente antibacterial.
15 16

referencia 19 La fluorescencia no es evidente a simple vista, se requiere emplear equipos de espectroscopa de fluorescencia 17 referencia 20 18 referencia 21

Se ha encontrado que la conjuncin nanopartculas-bionanomquina es de amplia utilidad; los sistemas biolgicos son influenciados por tales materiales. El silicio, oro y xidos de hierro tambien presentan interacciones con algunas bacterias y pueden deprimir el carter txico de tales entes vivientes19. A pesar de que las bacterias son causantes de muchas enfermedades, a veces pueden ser tiles, y en lo que respecta a la bionanotecnologa, unas nanopartculas creadas por estos seres, son de un particular inters: las esporas bacteriales. Dichas partculas miden algunos cientos de nanmetros, parecen materiales inertes, pero no hay nada ms falso que eso. Son bionanomquinas muy robustas y resistentes que encierran en su estructura la vida letrgica de nuevas bacterias. Una espora posee una cubierta mltiple y flexible de protenas que es resistente a ambientes extremos, sobre todo a temperaturas elevadas, lo que hace que un procedimiento de esterilizacin deba ser muy exigente para poder destruir una espora. Estas caracteristicas que le permiten su supervivencia las hacen suceptibles para usar una espora, o su recubrimiento protenico, como vehculo para vacunas, drogas o enzimas20, aunque tambin es de gran inters recrear estructuras tan resistentes para producir bionanomquinas con el potencial de funcionar y sobrevivir en medios hostiles. La lista de nanomateriales en interaccin con bionanomquinas es extensa, para tratar de resumir, adems de las funciones de etiquetas biolgicas, deteccin de entes patgenos y medios de liberacin controlada de medicamentos, puede modificarse una bionanomquina (y tambin una nanopartcula) para detectar compuestos biolgicos como protenas, ADN, tumores, separar y purificar molculas. Es usual en bionanotecnologa, que la nanopartcula (por lo general inorgnica) se encuentre encerrada al interior de la bionanomquina. El tamao de dichas partculas es equiparable al que poseen diversas protenas como las enzimas, hormonas, antgenos y el ADN. La modificacin de las funciones de la bionanomquina estn regidas por los efectos cunticos correspondientes al tamao de la nanopartcula; por lo tanto, es muy importante, y distinto, el comportamiento que se obtiene al modificar el tamao del nanomaterial que interactua o contiene una bionanomquina. Un caso descriptivo para esta relacin tamao-efecto, se aprecia en una prctica comn, como la aplicacin de prtesis en huesos. Los osteoblastos, unas bionanomquinas encargadas del desarrollo de nuevas superficies en los huesos y su crecimiento, no proliferan en prtesis cuya rugosidad no es adecuada. Un implante debe poseer nanoestructuras que simulan la rugosidad sea natural para estimular la adherencia al hueso. Si un osteoblasto encuentra una superficie demasiado lisa o rugosa, el implante no es aceptado y habr inflamacin y quiz deba ser retirado. Si las nanoestructuras grabadas en la superficie del implantes poseen los nanmetros esperados, los osteoblastos sern generados y el implante se asimilar con mayor facilidad al cuerpo.
19 20

referencia 22 referencia 23

En la tabla 4.1 se listan algunas aplicaciones ms que se valen de bionanotecnologa y las empresas ms representativas que investigan en estos campos. Tabla 4.1. Aplicaciones selectas de bionanotecnologa y empresas vinculadas e estos proyectos. Prcticabionanotecnolgica Filtracindeendotoxinas,ADNy protenasencermicananoporosa. Nanominiaturizacindemedicamentos (50100nm)paraincrementarsu eficiencia. Empresasrepresentativas Argonide

EiffelTechnologies

Capturaselectivadeclulaspor nanopartculaspolimricasconunncleo Immunicon magticoyunrecubrimientode anticuerpos. Nanocristalesdeplataynanoemulsiones Smith&Nephew,NanoBio antibacteriales. Cortporation Encapsulamientodeprotenas,ADNy medicamentos,. CdigosdebarrashechosconADN NanoCarrierCo.Ltd, Nanoshpere,Inc.

Fuente: adaptado de O. V. Salata, Journal of Nanobiotechnology21.

De las ltimas aplicaciones de la tabla, se desprende un complejo, pero cautivante campo: la manipulacin de ADN. Algunas aplicaciones se exponen con mayor profundidad en un prximo captulo de este libro, pero en lo concerniente a bionanotecnologia y dejando un poco de lado las aplicaciones de avanzada, Es posible utilizar cadenas de ADN para crear estructuras y patrones geomtricos arbitrarios. Este tipo de aplicaciones suelen requerir secuencias de ADN muy puras, en concentraciones equimolares y adecuadamente diseadas para evitar interacciones no deseadas (nuevamente de vuelta a la idea de actividad electrnica, afinidad qumica y complementariedad geomtrica reiterada desde el comienzo de captulo). Pero la validez de las reglas necesarias para el auto-ensamblado de nanoestructuras puede trasgredir levemente algunas de las anteriores reglas. En algunos casos exitosos se ha visto como, a partir de molculas pequeas, se pueden obtener
21

El diario de bionanotecnologa (journal of bionanotechnology) puede ofrecer al lector algunos trabajos actuales de nanotecnologa con protenas, ADN, microorganismos, sensores biolgicos y en general, bionanomquinas funcionalizadas con nanopartculas. Los trabajos son de libre acceso. La direccin principal es http://www.jbionanotechnolology.com.

estructuras complejas obtenidas mediante organizacin espontnea22. El caso del plegamiento del ADN es un ejemplo preciso de la posibilidad fcil, reproducible y econmica de obtener nanoestructuras orgnicas complejas y arbitrarias. En la figura 14 se muestra una imagen generada por computador, de una secuencia de ADN del virus M13mp18 plegado por Paul Rothemund, el cual recrea (o imprime) una imagen. Es una especie de nanolitografa con ADN. El procedimiento que logra generar estas conformaciones arbitrarias puede ser transferido al dibujo de circuitos y otros dispositivos que incluyan la interaccin o uso de bionanomquinas.

Figura 14. Silueta del mapa de Amrica elaborada con ADN plegado espontneamente. (reproducida con permiso de Paul W. K Rothemund). En el futuro prximo, se prev la posibilidad de utilizar todos estos nanodispositivos para beneficio de nuestra salud y desarrollo econmico, a la par que se continuen obteniendo nuevas tcnicas para la manipulacin nanoescalar de las molculas. Cmo quiz se pueda inferir de alguno de los anteriores casos de bionanotecnologa; sta apoya y se encadena a la nanomedicina, valindose de muchas propiedades que proporcionan los nanomateriales. Es una visin generalizada entre los cientficos dedicados a la bionanotecnologa, que en un mediano plazo (~10 aos) sea posible la programacin exitosa de nanomquinas y clulas. Ya no solo con fines mdicos, sino electrnicos, agrcolas y computacionales. En la bionanotecnologa ya no solo hay fragmentos de clulas o bionanomquinas individuales; cada vez se fusionan a la nanotecnologa disciplinas que, en apariencia, no preentaban conexiones, pero que se hacen vecinas al poseer en sus dominios la posibilidad de ofrecer respuestas. Al comenzar este captulo, se postul a la naturaleza misma como la
22

Ver referencias 24 a 28

pionera en nanotecnologa., siendo estos inicios, en realidad bionanotecnologa, la cual permaneci invisible a nuestros ojos durante siglos, aunque intuida permanentemente. Para finalizar, utilizar y adaptar una frase del Dr. Luis Echegoyen23: en (bio)nanotecnologa ocurren muchos fracasos, y gran parte de los pocos xitos se deben a la casualidad. Pero si no se fracasa, no se aprende la forma correcta de hacer este tipo de ciencia. No hemos acaso conocido de la ciencia y de la historia misma, cunto tiempo le tom a la naturaleza crear la primera bionanomquina! 4.8 Referencias y notas

Las imgenes de protenas utilizadas como suplemento y ambientacin en este captulo fueron (en su mayor parte) extradas y/o modificadas bajo autorizacin; a partir de modelos publicados en www.rscb.org/pdb/index.html. Agradezco al Doctor David S. Goodsell, del Scripps Research Institute, y su ilustrador, quienes son autores de algunas de las imgenes en mencin. Si el lector lo desea, puede acceder a la base de datos www.pdb.org y visualizar distintas opciones de dibujo de cada molcula. Los cdigos de identificacin de cada una para su bsqueda son los que se listan a continuacin: -Virus del polio: 2plv -Virus de la influenza (rinovirus): 4rhv -Anticuerpos: 1igt, 1fdl, 3hfl, 3hfm -ATP Sintetasa: 1e79 -Canal de potasio: 1k4c -Centros de reaccin fotosinttico: 1jb0, 1fe1, 1prc, 1s5l, 1rwt -Protenas fluorescentes: 1gfl, 1kys -Receptor de acetilcolina: 2bg9 Para visualizar correctamente las estructuras de las bionanomquinas, puede utilizarse un visualizador como RasMol, por ejemplo. Si se desea profundizar en los temas relacionados, se recomiendan los siguientes textos y documentos:
1.GOODSELL David. (2004), Bionanotechnology: Lessons from Nature, Wiley-Liss

(John Wiley and Sons), 2004, 352 pginas, New York, ISBN: 047141719X. 2.GOODSELL David. (1993), The Machinery of Life, Springer-Verlag Telos, 1993, 140 pginas, ISBN: 038797846. 3.TONDA Juan. (1998), El oro solar y otras fuentes de energa; Fondo de Cultura Econmica, Segunda edicin, 1998, Mxico D.F., Mxico.
23

El profesor Luis Echegoyen es especialista en qumica de fullerenos y nanotecnologa. Se desempea como docente e investigador en la Universidad de Clemson, en el Estado de Carolina del Sur (Estados Unidos de Norteamrica).

4.GOMI Keiko, KAJIYAMA Naoki. (2001), Oxyluciferin, a Luminescence Product of

Firefly Luciferase, Is Enzymatically Regenerated into Luciferin, En Journal of Biological Chemistry; Volumen 276, fascculo 39, pginas 36508-36513; Septiembre 28 de 2001. Disponible en: www.jbc.org/cgi/content/full/276/39. 5.DAS, R., ZHANG Shuguang, BALDO Marc. (2004), Integration of photosynthetic protein molecular complexes in solid-state electronic devices. En: Nano Letters, Volumen 4 (Junio de 2004), pginas 1079-1083. 6.VAUTHEY Sylvain, SANTOSO Steve, GONG Haiyan, et al. (2002), Molecular selfassembly of surfactant-like peptides to form nanotubes and nanovesicles. En: Proceedings of the National Academy of Sciences, Volumen 99 (abril 16 de 2002); pginas 355-5360. (Disponible en: www.pnas.org/cgi/content/full/99/8/5355) 7.UNIVERSIDAD DE OXFORD. (2005), Bacterial flagellar motor; En: Oxford Molecular Motors: (www.physics.ox.ac.uk/biophysics/research/flagellar.htm). Accedido en noviembre 17 de 2005. 8. MAGARIYAMA Y., SUGIYAMA S., MURAMOTO K., et al. (1994), Very fast flagellar rotation. En: Nature; Volumen 371 (1994), pgina 752. 9.NOJI H., YASUDA R., YOSHIDA, M., et al. (1997), Direct observation of the rotation of F1-ATPase. En: Nature; Volumen 386 (1997), pginas 299-302. 10.ETC Group; (2004); Manual de bolsillo en tecnologas nanoescalares y la teora del little bang, Grupo de Accin sobre Erosin, Tecnologa y Concentracin ETCGroup; Canada, 2004. Disponible en www.etcgroup.org . 11.JIARONG Chen, YUQING Miao, NOGYUE He, et al. (2004), Nanotechnology and biosensors, En: Biotechnology Advances; volumen 22 (2004), pginas 505-518. 12.BRESLOW Ronald; (2005) Artificial Enzymes. John Wiley and Sons; New York; (2005); ISBN: 3-527-31165-3 13.McCAPRA F. (1982); The chemistry of bioluminiscense; En: Proceedings of the Royal Society of London - Series B: Biological Sciences; Volumen 215, Nmero 1200, pginas 247-272. 1982. 14.LEHN Jean-Marie. (1985), Supramolecular chemistry: receptors, catalyst and carriers. En: Science; Volumen 227; Nmero 4689; pginas 849-856; febrero 22 de 1985. 15.JUNGE Wolfgang. (1999), ATP synthase and opther motor proteins; En: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America; Volumen 96, Nmero 11; pginas 4735-4737; Abril de 1999. 16.LUIJKX Gerardus. (1993), Hydrotermal conversin of carbohydrates and related compounds; Tesis Doctral en Ingeniera Quomica-Universidad Tcnica de Delft; 1993; Delft, Paises Bajos (Holanda). 17.VERA A., LEIJA L., SIDO M., et al. (2002), Utilizacin de materiales ferromagnticos y NaCl para el mejoramiento de la distribucin de la SAR en hipertermia oncolgica. En: Revista Mexicana de Ingeniera Biomdica; Volumen 23, Nmero 2 (2002), pginas 99 108. Mxico. 18.EURORESIDENTES. (2000), Diccionario de Nanociencia: que es. En: www.euroresidentes.com/futuro/nanotecnologia/diccionario/bionanotecnologia.htm; accedido en abril de 2006. 2000; Espaa. 19.ELECHIGUERA Jose, BURT Justin, MORONES Jose, CAMACHO-BRAGADO alejandra, GAO Xiaoxia, LARA Humberto, YACAMAN Miguel. (2005), Interaction of

silver nanopartiucles with HIV-1. En: Journal of nanobiotecnology. Volumen 3, numero 6 (2005). 20.PATRA Chitta-Ranjan, BHATTACHARYA Resham, PATRA Sujata, BASU Sujit, MUKHERJEE Priyabrata y MUKHOPADHYAY Debabrata. (2006), Inorganic phosphate nanorods are a novel fluorescent label in cell biology. En: Journal of Nanobiotechnology. Volumen 4, nmero 11 (2006). 21.KOUASSI Gilles, IRUDAYARAJ Joseph y MCCARTY Gregory. (2005), Examination of Cholesterol oxidase attachment to magnetic nanoparticles. En: Journal of Nanobiotechnology volumen 3, nmero 1 (2005) 22.DURN Nelson, MARCATO Priscyla, ALVES Oswaldo, DE SOUZA Gabriel y ESPOSITO Elisa. (2005), Mechanistic aspects of biosynthesis of silver nanoparticles by several Fusarium oxysporum strains. En: Journal of Nanobiotechnology. Volumen 3, nmero 8 ( 2005) 23.WILLIAMS Darryl, EHRMAN Sheryl, PULLIAM HOLOMAN Tracey. (2006), Evaluation of the microbial growth response to inorganic nanoparticles. En: Journal of Nanobiotechnology 2006, 4:3. 24.RICCA Ezio, CUTTING Simon. (2006), Emerging Applications of Bacterial Spores in Nanobiotechnology. En: Journal of Nanobiotechnology 2003, 1:6. 25.YOKOYAMA Takashi, YOKOHAMA Shiyoshi, KAMIKADO Toshiya, OKUNO Yoshishige MASHIKO Shinro. (2001), Self-assembly on a surface of supramolecular aggregates with controlled size and shape. En: Nature, volumen 413 (11 de octubre), pginas 619-621, 2001. 26.GHADIRI M. Reza, GRANJA Juan, MILLIGAN Ronald, MCREE Duncan, KHAZANOVICH Nina. (1993), Self-assembling organic nanotubes based on a cyclic peptide architecture,. En: Nature, volumen 366, nmero 6453 (25 de diciembre), pginas 324-327, 1993. 27.RINGLER P., SCHULZ G. (2003), Self-assembly of proteins into designed networks. En: Science, volumen 302, pginas 106-109, 2003. 28.C. B. Mao, D. J. Solis, B. D. Reiss, S. T. Kottmann, R. Y. Sweeney, A. Hayhurst, G. Georgiou, B. Iverson, and A. M. Belcher. (2004), Virus-based toolkit for the directed synthesis of magnetic and semiconducting nanowires. En: Science, volumen. 303, nmero 5655, pginas 213-217, 2004. 29.ROTHEMUND Paul W. K. (2006), Folding DNA to create nanoscale shapes and patterns. En: Nature, volumen 440 (16 de marzo) pginas 297-302, 2006. (version alterna disponible en el sitio www.dna.caltech.edu/Papers/rothemund-origami-iccad05.pdf) 30.FORBES Nancy. (2004), Imitation of Life: How Biology Is Inspiring Computing MIT Press, 2004, 146 pginas, ISBN: 0262062410. 31.AMOS Martyn. (2004), Cellular Computing (Genomics and Bioinformatics), Oxford University Press, 2004, 240 pginas, ISBN: 0195155408.