DESCRIPCIN DE LAS ACTIVIDADES.

Semana 1 (adecuacin del rea de laboratorio 07/05/2012-11/05/2012)

Con la ayuda de los compaeros se adecu y limpi el laboratorio para que se trabajara con una mejor comodidad y tener suficiente espacio disponible a la hora de preparar soluciones de gran riesgo.

Semana 2 y 3 (asignacin del tema, revisin bibliogrfica y preparacin de soluciones 14/05/2012-25/05/2012)

En esta semana se seleccion el tema, el procedimiento y el mtodo ms adecuado tomando en cuenta los equipos, reactivos y condiciones del laboratorio, as como tambin se elaboro una serie de reactivos necesarios para realizar los experimentos.

Semana 4 y 5 (elaboracin de la curva de calibracin, peso y almacenaje de cada una de las muestras de compost de alimentos 28/05/2012- 08/06/2012)

Se prepar la solucin de cloruro de amonio esta se enraso con una solucin de cloruro de potasio luego se la aadi 9 ml agua destilada ,5 ml de una solucin sdica de salicilato- nitroprusiato- hidrxido y 2ml de hipoclorito de sodio con la finalidad de determinar la absorbancia para luego estos datos ser graficados y obtener la curva de calibracin. Luego se procedi al peso y almacenaje de cada una de las muestras a utilizar en los experimentos

Semana 6 y 7 (determinacin de la actividad enzimtica ureasa en muestras de suelo tratadas con compost de alimentos 11/06/2012-22/06/2012)

Se empieza a trabajar con las muestras ya pesadas en el laboratorio, en el cual se tomaron 3 muestras para cada tipo de suelo contaminado con hidrocarburo, residuos frescos, compost de lombriz y compost de residuos orgnicos , a cada una de las muestras se le midi su absorbancia para saber si estaban dentro del rango de la curva de calibracin y dio como resultando que si estuvieron dentro de dicho rango, luego fueron suministrado los porcentajes de humedad por el laboratorio de luz, y as proceder a realizar cada clculo para obtener la actividad enzimtica ureasa correspondiente a las diferentes tipos de muestras el cual se ve reflejado un clculo tpico en el apndice. La actividad enzimtica ureasa se determin para saber qu cantidad de esta se encontraba en cada una de las muestras, y el mtodo utilizado fue el de Kandeler y Gerber, (1988), el cual est basado en la determinacin del amonio liberado a partir de una solucin de urea por la actividad uresica, cuando es incubada durante 2 horas a 37C, midiendo la absorbancia al in amonio cuando reacciona con el hipoclorito de sodio en presencia de un fenol a 690 nm (en este caso el salicilato) formndose primeramente una monocloramina y despus un compuesto de indofenol a pH bsico . Para la calibracin se us una curva patrn elaborada con cloruro de amonio (NH4Cl).

Semana 8 (elaboracin y entrega de informe final 25/06/2012-29/06/2012)

Una vez obtenidos los valores de la actividad enzimtica ureasa se procedi a la elaboracin del informe de pasantas segn la estructura suministrada por el departamento de pasantas industriales de la Universidad Experimental Francisco de Miranda.

TABLAS Y RESULTADOS.

Tabla 1. Valores obtenidos del Promedio de AU Desviacin Estndar, n=3. Muestras Suelo sano Suelo poco contaminado Suelo medio contaminado Suelo muy contaminado Residuos frescos Compost de Residuos de Alimentos Compost lombriz Tratamiento de suelo sano CA 5% Tratamiento de suelo poco contaminado CA 5% Tratamiento de suelo medio contaminado CA 5% Tratamiento suelo muy contaminado CA 5% Tratamiento de suelo sano CA 10% 4,282,14 Tratamiento de suelo poco contaminado CA10% Tratamiento de suelo medio contaminado CA 10% Tratamiento de suelo muy contaminado CA 10% 7,940,48 7,852,73 5,512,26 3,990,28 8,560,18 6,220,70 AU Desv Std 6,790,40 5,460,16 3,821,81 3,060,14 32,352,19 4,780,32 6,30,48 6,540,23

ANLISIS DE RESULTADOS

La actividad enzimtica del suelo es importante porque refleja el estado en el que se encuentran sus poblaciones microbianas y su relacin con la biologa del suelo, la produccin de biomasa, la degradacin de contaminantes y la conservacin de ecosistemas Las enzimas en el suelo tienen un gran potencial para evaluar el impacto de los hidrocarburos y de la fertilizacin de los microorganismos en el suelo y son una herramienta til para monitorear las primeras etapas de la biorremediacin de los suelos contaminados. En la tabla 1 se observan los valores de la actividad enzimtica ureasa en el cual se ven reflejado los suelos contaminados sin compost 6,790,40; 5,460,16; 3,821,81; 3,060,14gN-NH4/g; mientras que los suelos mezclados con compost al 5% 6,540,23; 6,220,70; 8,560,18; 3,990,28 gN-NH4/g; compost al 10% 4,82,14; y con respecto a los suelos mezclados con 7,852,73; 7,940,48 gN-NH4/g

5,512,26;

respectivamente para cada muestra de suelo tratado con compost y sin compost. En el suelo sano sin compost la actividad uresica fue mayor 6,790,40gNNH4/g, diferencindose significativamente de los suelos poco, medio y muy contaminado, los cuales registraron los menores valores (5,460,16; 3,821,81; 3,060,14gN-NH4/g respectivamente) y sin diferencias significativas. Todos los suelos mezclados con compost de alimentos aumentaron significativamente la actividad uresica, aunque no se registraron diferencias significativas entre los suelos al 5 y 10% , el suelo sano al 5% + compost de alimento 6,540,23; suelo poco contaminado al 5% + compost de alimento 6,220,70; suelo medio contaminado al 5% + compost de alimento 3,990,28 y suelos muy contaminado al 5% + compost 8,560,18; con respecto a los suelos sano al 10% + compost de alimento 4,82,14; suelo poco contaminado al 10%+ compost de alimento

5,512,26; suelo medio contaminado al 10% +compost de alimento 7,852,73 y suelo muy contaminado al 10% + compost de alimento 7,940,4840gN-NH4/g. Los incrementos de las actividades enzimticas pueden conducir a mayores concentraciones de nutrientes y mejorar la eficiencia de uso de los fertilizantes y la

calidad del suelo. Se aplica el proceso de biorremediacin en los suelos para disminuir los contaminantes q se encuentren en el. En el proceso de compostaje es importante que la humedad alcance unos niveles ptimos del 40 y 60%. Si el contenido de humedad es mayor, el agua ocupara todos los poros y por lo tanto el proceso se volver anaerbico, es decir se producira una putrefaccin de la materia orgnica. Si la humedad es excesivamente baja se disminuye la actividad de los microorganismos y el proceso es ms lento. En la tabla 7 se reflejan los valores de compost de residuos de alimentos; se muestra la absorbancia vs concentracin, en la cual se puede observar que estas dos son proporcionales, es decir, a medida que aumenta la concentracin de g N-NH4/g aumenta tambin la absorbancia en las muestras. Los resultados obtenidos de la actividad Uresica promedio arrojaron valores bajos, esto se debe a que el compost libera mayor cantidad de Amonio; esta disminucin de la actividad es favorable ya que la prdida de amonio ser menor, con lo cual ayuda a la capacidad productiva de los suelos. La tecnologa de Biorremediacin con Compostaje se fundamenta en la estimulacin de la actividad biodegradadora de las poblaciones microbianas presentes en un suelo contaminado, mediante la adicin de un compost, diseado a medida segn las caractersticas y requerimientos de cada suelo contaminado a tratar y enriquecido en poblaciones microbianas degradadoras de los

contaminantes presentes en dicho suelo. Los suelos contaminados suelen tener una actividad microbiana baja, bsicamente debido a la falta de condiciones ambientales favorables, como la baja concentracin de materia orgnica, oxgeno, nitrgeno y/o fsforo. Los suelos contaminados, de compost diseados a medida, enriquecidos en poblaciones microbianas biodegradadoras y con un alto porcentaje de materia orgnica biodegradable, provocar un aumento de la capacidad biorremediadora intrnseca de cada suelo contaminado, acelerando as el proceso de recuperacin del emplazamiento hidrocarburos. Se analiza la biorremediacin como una alternativa saludable frente al deterioro progresivo de la calidad del medio ambiente por el derramamiento de hidrocarburos, ya que esta problemtica genera una amenaza real a la salud pblica, as como a la extincin de gran variedad de especies animales y vegetales.

CONCLUSIONES

La mayor concentracin de actividad enzimtica ureasa se encuentra en la muestra de residuos frescos esto es debido al incremento de nutrientes.. Los resultados obtenidos de la actividad Uresica promedio arrojaron valores bajos, esto se debe a que el compost libera mayor cantidad de Amonio; esta disminucin de la actividad es favorable ya que la prdida de amonio ser menor, con lo cual ayuda a la capacidad productiva de los suelos. Los suelos contaminados suelen tener una actividad microbiana baja, bsicamente debido a la falta de condiciones ambientales favorables, como la baja concentracin de materia orgnica, oxgeno, nitrgeno y/o fsforo.