Alba Alonso Couso Mara lvarez Daz

RECOGIDA, TRANSPORTE, CONSERVACIN Y MANIPULACIN DE MUESTRAS PARA ANLISIS

CLNICO

Curso 2011/2012

NDICE
Obtencin de muestras biolgicas para anlisis clnicos Solicitud de pruebas analticas Recogida de muestras de sangre Recogida de muestras de orina Recogida de muestras de heces Recogida de otras muestras Manipulacin de muestras biolgicas Sistema de transporte de muestras Procesamiento de las muestras Efectos de la conservacin sobre las muestras

INTRODUCCIN
El diagnstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los sntomas y signos clnicos, as como en el conocimiento del microorganismo causante de la enfermedad o de la respuesta del sistema inmune frente a este. Para ello, es necesario recoger adecuadamente una muestra y analizarla en el laboratorio. Toda la informacin diagnstica que el laboratorio puede proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. El trmino calidad incluye la seleccin apropiada de la muestra, la recogida, el transporte al laboratorio y su conservacin, despus de una adecuada manipulacin. Por ello, una muestra mal tomada, escasa o mal transportada, determinar un posible fallo en la recuperacin de los agentes patgenos, que puede inducir a errores diagnsticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo.

RECOGIDA DE MUESTRAS PARA ANLISIS CLNICOS

El laboratorio de anlisis se utiliza para establecer el diagnstico y el tratamiento de un paciente con el fin de aportar informes analticos. As que los tcnicos de laboratorio deben hacer una correcta utilizacin del material y de los reactivos. Son fundamentales la recogida, la manipulacin, el procesamiento y la conservacin de las muestras.

SOLICITUD DE LAS PRUEBAS ANALTICAS

Los clnicos la realizan normalmente a travs de un impreso especial donde se incluyen: Una relacin de pruebas Los datos del paciente (identificacin, edad, fecha de solicitud) Facultativo que hace la peticin A veces otros datos que pide el laboratorio tales como si es urgente, tratamiento del paciente, historia clnica La mayora de las veces los impresos son diferentes segn el tipo de anlisis que se solicite pero a veces un nico impreso es para todas las peticiones sean del tipo que sean. El paciente no hospitalizado acude al laboratorio con cita previa y entrega su impreso en la zona de administracin del laboratorio donde debe ser informado del lugar de recogida de muestras. All se le asignar un nmero de entrada que figurar en todos los impresos y tubos o recipientes de muestras de dicho paciente. En caso de estar hospitalizado

el personal sanitario de la planta se ocupa de llevar la peticin analtica al laboratorio y las muestras.

RECOGIDA DE MUESTRAS DE SANGRE

La sangre es el fludo ms utilizado dentro del laboratorio con el fin de ser analizado. Para hacerlo se pueden utilizar 3 procedimientos: puncin cutnea, venosa o arterial. La extracin se lleva a cabo por una serie de etapas que empiezan identificando y asignando un nmero al paciente. Se debe informar al mismo que para algunas pruebas conviene o estar en ayunas o haber realizado una dieta previa antes del anlisis de lo cual el tcnico del laboratorio debe cerciorarse antes de comenzar la toma adems de tranquilizar al paciente. Para realizar dicha recogida debe colocarse al paciente tumbado o sentado de manera confortable con el brazo extendido. Se realizar con: Tubos de recogida, Compresor, Alcohol 96-70, Jeringas (para la extraccin de pacientes con venas finas o fragiles) o sistema de vaco (la forma ms frecuente de extraccin y que permite el paso de la sangre directamente al tubo y que permite la rapida mezcla con el anticoagulante), Lancetas, Algodn y gasa. El procedimiento de la puncin cutnea es el mtodo ms utilizado en los nios (en los mayores de un ao en la superficie palmar de la ltima falange de los dedos 2 a 4 y a profundidad menor de 3,1 mm), sobretodo recin nacidos (en la zona del taln a una profundidad menor de 2,4 mm) o a veces en pacientes geritricos. En esta tcnica se seguirn estos pasos: 1. Hay que seleccionar el punto adecuado de puncin segn las caractersticas del paciente 2. Calentar la zonar a menos de 42C para aumentar el flujo de sangre 3. Se limpia con alcohol de 70 o isoproplico y se deja secar 4. Se realiza la puncin con una lanceta estril de forma rpida y paralela a la piel 5. Desechamos la primera gota de sengre, con una presin muy suave en el dedo pulgar 6. Se sella el capilar con plastilina 7. Se lava la zona y se coloca una gasa estril y se efecta una leve presin.

El 2 procedimiento: la puncin venosa es el principal mtodo para la obtencin de sangre en el laboratorio y se siguen estos pasos: 1. Elegir la vena adecuada y si no es posible en la vena elegida puede ser en la femoral o en la yugular en el caso de los nios 2. Limpiar con alcohol y dejar secar 3. Se aplica un compresor colocndolo varios centmetros por la zona de puncin con un nudo fcil de soltar. Esto facilita la visin de las venas y la puncin pero no debe estar colocado ms de 2 minutos. 4. Se pide al paciente que cierre el puo para que las venas sean ms palpables 5. Se fijan las venas por encima y debajo de la zona de puncin mediante los dedos ndice y pulgar 6. Se realiza la puncin con un ngulo de 30 y el bisel de la aguja hacia arriba 7. La extraccin puede ser con una jeringa o sistema de vaco. Si es con jeringa una vez entrado en la vena se tira del mbolo suavemente hasta que entre dentro la sangre y si es con sistema de vaco se introduce el tubo dentro del portatubos se perfora el tapn y la sangre entra, una vez lleno se cambia y se repite el proceso. 8. Se retira el compresor, se pide al paciente que abra la mano y se saca la aguja 9. Con un algodn se presiona la zona de la puncin y se mantiene unos minutos. En una extraccin se puede producir una hemlisis (desintegracin de los eritrocitos) lo cual altera muchas pruebas por: Forzar el paso de la sangre Agitar los tubos enrgicamente No dejar secar el desinfectante Sacar sangre de un hematoma La puncin arterial sirve para la determinacin de gases (O2, CO2) en sangre que a veces es imprescindible para el diagnstico de algunas enfermedades (neumonas, embolia pulmonar) Es ms difcil que la venosa y sigue los siguientes pasos: 1. Tranquilizar al paciente y tenerlo en posicin de descanso durante unos minutos 2. Se selecciona o la radial o la femoral 3. Se suele anestesiar al paciente para evitar hiperventilacin

4. Se realiza con una jeringa con heparina. Se realiza la prueba de Allen comprimiendo las aterias radial y cubital hasta que la mano palidezca, sino vuelve a enrojecer no se puede pinchar en esa arteria 5. Se palpa la arteria, se limpia la zona y colocamos el dedo sobre la arteria. Cuando entre la sangre en la jeringa presionamos el mbolo 6. Retiramos la jeringa y con una gasa presionamos unos segundos 7. Expulsamos las burbujas de aire si las hubiera 8. Retiramos la aguja, tapamos la jeringa y con un movimiento suave de inversin se mezcla la sangre con el anticoagulante. La muestra se debe llevar rapidamente al laboratorio con un bao de hielo a veces y debe ser rpidamente analizada porque los leucocitos consumen el O2 y se altera el resultado.

RECOGIDA DE MUESTRAS DE ORINA

Son para diagnosticar y controlar el tratamiento de enfermedades del tracto urinario o el rin o algunas alteraciones metablicas. El examen se puede realizar bajo tres puntos de vista: Bioqumico para analizar niveles de metabolitos Bacteriolgico para verificar la presencia de microorganismos contaminantes Microscpico para comprobar los elementos formes en la orina La recogida de una muestra puede realizarse al azar, en una sola miccin o en un tiempo predeterminado, de una forma u otra segn el parmetro que utilicemos. Debemos utilizar un recipiente esteril si es microbiolgico y quimicamente limpio para otro tipo de anlisis. La extraccin al azar es la indicada para los anlisis de rutina y se prefiere que no sea la primera miccin sin importar el volumen. Sirve para analizar glucosa, protenas, pH, hemates Para realizar la recogida de esta debe ser en condiciones higinicas enjuagndose los genitales con agua y jabn, se debe hacer directamente en el recipiente con una tapa que se ajuste bien y con la identificacin del paciente. Si es recogida en un tiempo predeterminado se realiza a un horario previsto y es importante que el paciente este bien informado para atenerse a este as como de la dieta previa que debe hacer. Es importante tanto la hora como el volumen recogido. Un caso de esta modalidad es la recogida de orina de 24 h. donde se debe despreciar la primera orina de la maana, recogiendo todas las dems micciones incluida la primera de la siguiente maana y luego sern todas ellas trasladadas al laboratorio. Otra prueba es

la SOG (sobrecarga oral de glucosa) que sirve al mdico para determinar diabetes y se le administra al paciente una cantidad de glucosa haciendo distintas tomas de orina y de sangre a lo largo de la prueba con una duracin de ms o menos 3 horas.

RECOGIDA DE MUESTRAS DE HECES

Es til para el diagnstico de enfermedades parasitarias, diarrea, casos de malabsorcin, ictericia destructiva El examen comprende: La observacin macroscpica Anlisis qumicos Examen bacteriolgico y parasitolgico de las heces La cantidad, el color, la forma y la presencia de moco son datos a tener en cuenta. Se recoge la muestra en un recipiente limpio evitando que se contamine con orina ya que podra afectar. Se recoge hacia un utensilio de transporte con un depresor lingual limpio. En nios menores de 2 aos se utiliza un sistema de bolsa de plstico que se adhiere a la goma anal del nio y as no hay contaminacin posible. La cantidad de heces en 24 h. no est relacionada con la comida ingerida porque el aparato gastrointestinal no puede realizarse completamente por eso se hace de 3 das seguidos la recogida y luego se realiza un promedio de los resultados.

RECOGIDA DE OTRAS MUESTRAS Exudados corporales: la llevarn a cabo los laboratorios de microbiologa.
Exudados farngeos: se utiliza para el diagnstico de faringitis estreptoccica. La tcnica para la recogida de la muestra es la siguiente: bajar la lengua mediante un depresor y con un hisopo raspar una pequea zona con exudado. En lo posible no tocar la mucosa oral, la vula, la lengua ni los dientes. N TRANSPORTE Y CONSERVACION: Envo inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas). Si no es posible, conservar en heladera a 4C hasta 12 horas. Exudados nasal: esta muestra solo se utiliza para buscar portadores de Staphylococcus aureus o en el diagnstico de imptigo. La tcnica es la siguiente: con un hisopo de algodn se toma una muestra

profunda de ambas fosas nasales con el mismo hisopo, previamente embebido en suero fisiolgico. N TRANSPORTE Y CONSERVACIN: Envo inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas)

Exudados conjuntivales: Este tipo de muestras sirve para el diagnstico de conjuntivitis de causa bacteriana. De todas maneras se solicita que se haga la toma de muestra de ambos sacos conjuntivales por separado. La tcnica es la siguiente: con un hisopo mojado en suero fisiolgico se frota sobre la conjuntiva tarsal inferior de afuera hacia adentro. Se debe utilizar un hisopo para cada ojo. N TRANSPORTE Y CONSERVACIN: El transporte deber ser inmediato. Cuando no sea posible se utilizarn hisopos con medios de transporte, que se mantendrn a temperatura ambiente. Exudado tico: Solo se utiliza para conocer la etiologa en caso de otitis externa. Suele tratarse de muestras de mala calidad y en ningn caso resultan representativas de los microorganismos existentes en el odo medio. La tcnica es la siguiente: se limpia el canal auditivo con un desinfectante, porque tiene gran cantidad de contaminantes, y se introduce un hisopo estril con cuidado de no daar el tmpano y arrastramos una pequea cantidad de exudado. Se tendr en cuenta utilizar hisopos distintos para cada odo, as como distintas siembras para cada odo. N TRANSPORTE Y CONSERVACIN: Envo inmediato al laboratorio (no superior a 2 horas)

Esputos: Dan informacin sobre neumona y tuberculosis. La muestra vlida

es la que procede de la primera expectoracin del da, porque es la que tiene mayor contenido purulento o mucoso. La tcnica es la siguiente: el paciente recoger la muestra en un recipiente estril, descartndose las que tienen saliva, y la lleva al laboratorio para que se procese.

Hemocultivos: La presencia de microorganismos en sangre refleja que hay

una infeccin activa y diseminada cara otros tejidos. Esta tcnica se llevar a cabo en pacientes con fiebre de origen desconocida y de ms de 3 das, cuando hay un cuadro de septicemia, enfermos debilitados o despus de una intervencin quirrgica.

No se debe realizar un hemocultivo si el paciente est con un tratamiento antibitico, porque este hace que los grmenes supervivientes no crezcan bien en los medios de cultivo aunque s sean capaces de restablecer el cuadro. La tcnica para un hemocultivo es la siguiente: 1. Colocar al paciente preferiblemente en decbito supino. 2. Limpiar la zona de puncin con el antisptico haciendo movimientos circulares de dentro hacia fuera y la membrana de los frascos de hemocultivo con el desinfectante. 3. Realizar la extraccin, adultos entre 5- 10 ml y nios entre 1-4 ml. 4. Terminada la extraccin, retirar la aguja y jeringa, comprimir el punto de puncin y colocar el aposito. 5. Inocular sangre extrada en dos frascos primero en el anaerobio y luego en el aerobio, en el primero sacar aguja y jeringa al mismo tiempo para evitar que entre aire en el frasco 6. Mover suavemente el frasco para mezclar el contenido y evitar la coagulacin. 7. Etiquetar correctamente la muestra. Cualquier vena asequible servir para hacer la extraccin, pero en los nios se preferir la vena yugular.

MANIPULACIN DE MUESTRAS BIOLGICAS

Una vez que la muestra se obtuvo esta tiene que llegar al laboratorio adecuado, esta etapa es delicada para muestras como por ejemplo la sangre porque las clulas sanguneas y elementos formes son muy frgiles. Durante la manipulacin de las muestras se ha de ser cuidadoso para evitar prdidas o derrames, cambios de identificacin, rotura de tubos Adems los tcnicos que operan con las muestras deben protegerse con equipos adecuados. Para evitar fallos en los laboratorios, estos establecen unos criterios de rechazo de las muestras mediante los cuales se solicita una nueva muestra. Estos criterios son: Muestra no etiquetada o etiquetada de forma que puede llevar a confusin Transporte inadecuado Tiempo excesivo desde la obtencin de la muestra Contenedor inadecuado o no estril Contenedor roto o muestra derramada Muestras con contaminacin evidente Contaminacin exgena obvia

 Muestras duplicadas tomadas a la vez Muestras recogidas en el mismo da con la misma peticin (excepto sangre para cultivo) Muestras no adecuadas para la peticin realizada Cantidad insuficiente para el estudio solicitado Toda muestra biolgica previamente manipulada.

SISTEMA DE TRANSPORTE DE MUESTRAS

El laboratorio donde se realiza el anlisis de la muestra puede estar ms o menos alejado del centro donde se hace la recogida y la extraccin de la muestra, y esto va a condicionar el sistema de transporte. As por ejemplo en un hospital las muestras se suelen transportar utilizando un sistema de tubos neumticos, y esto son unos compartimentos forrados de goma espuma de unos 10 cm con capacidad para varias muestras, y se desplazan a lo largo de una especie de tubera, que van desde donde se hace la toma de muestras hasta el laboratorio. Las condiciones de transporte con el tubo neumtico estn controladas y son parecidas independientemente de donde venga la muestra. En otros hospitales se utilizan la entrega en mano, en la que una persona del centro se encarga de recoger las muestras y las lleva personalmente al laboratorio, pero esto conlleva mayor tiempo en el transporte, y por lo tanto ms posibilidades de accidentes con las muestras y mayor exposicin de la muestra a cosas no controladas. En el caso en el que las muestras vienen a un laboratorio centralizado desde zonas que estn situadas fuera del centro, para eso se utilizan unas cajas de transporte resistentes y reutilizables. En este caso los tubos se meten en gradillas, y se meten en las cajas de transporte. Los envases grandes se transportan en una especie de bolsas de plstico cerradas. Cuando la muestra necesita refrigeracin se usan cajas en las que el interior es de acero inoxidable y se coloca un refrigerante comercial. En el caso de que las muestras tengan un agente infeccioso el tapn del contenedor primario tiene que ir sellado con una especie de cinta adhesiva. Adems ese contenedor tiene que ir enrollado en un material absorbente y luego se introducen en otro contenedor. Si se enva una muestra de un laboratorio a otro el que lo enva tiene que facilitar informacin e instrucciones para su manipulacin que el laboratorio que lo recibe tiene que cumplir.

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PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Se entiende por procesamiento de las muestras el perodo de tiempo comprendido desde que las muestras llegan al laboratorio hasta que son analizadas. Este proceso consta de una serie de etapas que son tcnicas preparatorias de las muestras. 1. Se comienza por sacar las muestras de las cajas. 2. Se marcan las muestras con etiquetas, que normalmente se utilizan etiquetas con cdigos de barras, as se identifican fracciones alcuotas de las muestras, porque una muestra se puede utilizar en varias secciones. 3. Se separan las muestras urgentes para que sean analizadas y procesadas con prioridad. 4. Precentrifugacin, que consiste en clasificar las muestras segn el tipo de procesado que les vayamos a dar y eso va a depender de las determinaciones que vayamos a realizar. 5. Centrifugacin, es necesaria en todo procesamiento, se realiza con las centrfugas y en condiciones estndar, as se obtiene distintas fracciones en funcin del gradiente de densidad. Una vez clasificadas y centrifugadas se distribuyen en tubos, que previamente estn identificados. 6. Por ltimo, se colocan esas fracciones de muestra en gradillas y se reparten por las distintas secciones del laboratorio. A temperatura ambiente las reacciones biolgicas transcurren unas 4 veces ms rpidas que como lo hacen en el organismo, as que las muestras se conserva bien si el tiempo desde que se obtuvieron hasta que se hace el anlisis no es mayor a 1 h. De no ser as la muestra se debe mantener refrigerada entre 4-6 C pero no se debe refrigerar la sangre para preparar suero o plasma porque podra aumentar mucho los niveles de potasio debido a que el fro frena o inhibe la bomba Na/K. La conservacin de la muestra de orina es esencial para su integridad porque la orina sufre descomposicin microbiolgica y alteraciones qumicas. Normalmente se refrigeran o se les aade un conservante. Si se va a analizar en la orina sustancias que son sensibles a la luz la orina se recoge en un recipiente de color mbar y sino en un recipiente envuelto con papel de aluminio. Algunos elementos que puede haber en la orina como hemates, leucocitos o bilirrubina se pueden descomponer rpidamente. Las heces y otras muestras biolgicas, sobre todo cuando son destinadas para anlisis bacteriolgicos o parasicolgicos deben conservarse en unas condiciones requeridas por el germen a estudiar.

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EFECTOS DE LA CONSERVACIN SOBRE LAS MUESTRAS

En las muestras conservadas en refrigerador durante mucho tiempo se va a producir una proliferacin bacteriana y este aumento va a producir una degradacin sobre la muestra. La congelacin a largo plazo tambin origina alteraciones en las muestras porque acta sobre sistemas enzimticos y adems produce cambios en la concentracin de algunos componentes, por ejemplo las protenas que son molculas grandes pueden sufrir cambios en su estructura debido a los cristales de hielo que se originan al congelar. La descongelacin de la muestra ha de hacerse lo ms rpidamente posible.

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