Anlisis Microbiolgicos Los anlisis Microbiolgicos se realizaron en base a la NOM-110-SSA11994. Bienes y servicios.

Preparacin y dilucin de muestras de alimentos para su anlisis microbiolgico Para el anlisis de mesfilos aerobios, hongos y levaduras se utiliza como diluyente la solucin reguladora de fosfatos. Para la Solucin reguladora de fosfatos (concentrada) se diluyo 34 g de fosfato de sodio monobsico en 500 ml de agua y se ajust el pH a 7.2 0,1 con hidrxido de sodio 1 N, finalmente se aforo a un litro y se esteriliz 15 minutos a 121 C. La solucin de trabajo se obtuvo diluyendo 1.25 ml de la solucin concentrada de fosfatos en 1 L de agua, la cual se distribuy en porciones de 90 ml y 9 ml segn se requiri y se esteriliz a 121 1 C por 15 min. El manejo de la muestra fue de la siguiente manera: se pes 10 g de muestra directamente en el frasco con 90 ml del diluyente, homogenizando con la ayuda de una licuadora marca osterizer durante 1.5 minutos, luego se transfiri 1 ml de la solucin primaria (1:10) a un tubo que contenga 9 ml del diluyente estril (dilucin 1:100) y se homogenizo, de este diluyente se tomo nuevamente 1 ml y se transfiri a otro tubo con 9 ml de diluyente (dilucin 1:1000), finalmente se realiz una dilucin mas de la anterior y as se obtuvo una dilucin mas (dilucin 1:10000). Mesfilos Aerobios En base a la NOM-092-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo para la cuenta de bacterias aerobias en placa. La tcnica consisti en contar las colonias, que se desarrollan en el medio de eleccin despus de 48 h y a temperatura de 35 2 C.. El medio de cultivo utilizado para la cuenta de mesfilos aerobios es el Agar triptona-extracto de levadura a un pH de 7.0 0.2 a 25 C ajustado con hidrxido de sodio 1 N y esterilizado a 121 2 C durante 15 min. El medio se mantuvo a una temperatura 45 5 C en bao de agua hasta antes de su uso. Se utiliz clorhidrato de trifenil tetra zolium al 1 %

sigma para facilitar el conteo permitiendo ver las colonias color rojo. Se inocul 1 ml de las diluciones de la muestra en la caja petri, y se agreg de 15 a 20 ml del medio, se mezclo cuidadosamente segn la tcnica y se dej solidificar para finalmente incubarlo en posicin invertida. Mohos y levaduras En base a la NOM-111-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo para la cuenta de mohos y levaduras en alimentos. El mtodo consisti en inoculara 1 ml de las diluciones de la muestra en 15 a 20 ml medio selectivo especfico en este caso Agar papa dextrosa (PDA) esterilizado a 121 0.1 C por 15 min., y acidificado a un pH 3,5 con 1.3 ml de cido tartrico al 10% previamente estilizado por cada 100 ml de medio y enfriado en un bao de agua a 45C, despus del vaciado se mezclo segn la tcnica descrita, dejando gelificar para luego incubarlo a una temperatura de 25 1C, durante 5 das. Coliformes totales En base a la NOM-113-SSA1-1994. Bienes y servicios. Mtodo para la cuenta de microorganismos coliformes totales en placa. El mtodo permite determinar el nmero de microorganismos coliformes presentes en una muestra, utilizando un medio selectivo estril en este caso agar rojo violeta bilis ajustado previamente a pH 7,4 1 con cido clorhdrico 0,1 N o con hidrxido de sodio 0,1 N, primero se inocula 1 ml de la dilucin de la muestra, luego se vierte de 10 a 15 ml de medio mantenido a 45 1 C en bao de agua, se homogeniz mezclando segn la tcnica y se deja solidificar, una vez que gelifico el medio se vertieron de 5 a 8 ml mas de medio RVBA se deja solidificar y se incuba invertidas las placas en el que se desarrollan bacterias a 35 2 C en aproximadamente 24 hrs, dando como resultado la produccin de gas y cidos orgnicos, los cuales viran el indicador de pH y precipitan las sales biliares.