Cromatografía de gases. Principios de la CG.

„ Volumen de retención: Se tienen en cuenta los

Cap. 27 efectos de presión y temperatura.
„ Existen dos tipos generales de
cromatografía de gases (CG): VR= tR ·F VM= tM ·F
Retenida no retenida
– Cromatografía Gas-Sólido
• Fase estacionaria: Sólido
F=flujo volumétrico promedio (mL/min), se estima
midiendo la velocidad del gas de salida de la
– Cromatografía Gas-Liquido columna usando un medidor de pompas de jabón.
• Fase estacionaria: Liquido inmovilizado Pero medir VR y VM depende de
• la presión dentro de la columna
• la temperatura de la columna

Principios de CG
„ VR y VM dependen de la presión promedio
dentro de la columna

„ La columna tiene una resistencia al flujo

– En la entrada, P= alta, F= bajo P·F= constante
– En la salida, P= baja, F= alto

„ El factor de la caída de presión j se usa para

calcular la presión promedio desde la presión
de entrada Pinlet y la presión de salida Poutlet

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Principios de CG Principios de CG
ƒ Factor de caida de presion j:
3[(Pinlet/Poutlet)2-1] „ Volumen de retención especifico
j= V0R- V0M 273
2[(Pinlet/Poutlet)3-1] x
Vg=
W Tcolumna
ƒ Volumen de retencion corregido:
V0R= j·tR·F V0M= j·tM· F Correccion para la
Masa de la fase Temperatura (K)
estacionaria

Relacion entre Vg y K Cromatografía de gases

Esquema general de un cromatógrafo de gases

K 273
Vg= x
ρFe Tcolumna
„ ρFe=densidad
Fe=densidad de la fase estacionaria
„ Vg es un a parametro util para
identificar especies
„ Vg depende de la constante de
distribucion para una T dada

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Cromatografia de gases
Sistema de Inyección
„ En general, se inyecta la muestra con
una micro jeringa a través de un
septum.
„ El septum, esta situado en una cámara
de vaporización instantánea en la
cabeza de la columna.
„ La cámara debe estar a 50 ºC por
encima del punto de ebullición del
compuesto mas volátil.
Sistema de Inyección
„ La eficacia de la columna requiere que
la muestra sea de un tamaño
apropiado.
„ Es necesario que la muestra sea como
un tapón de vapor.
„ La inyección lenta de muestras
demasiado grandes provoca un
ensanchamiento de las bandas y una
mala resolución
Sistema de inyección
„ Split: Método de rutina
– 0.1-1% de la muestra va a la columna
– Resto a desperdicios
„ Splitless: Toda la muestra va a la columna
– Ideal para análisis cuantitativo
– Solo para análisis de trazas o muestras de baja
concentración
„ On-column: Para muestras que se descomponen
por encima de su punto de ebullición- portal de
inyección no calentado
– La columna debe encontrarse a una temperatura baja
para condensar la muestra en una banda estrecha
– Al calentar la columna la cromatografía comienza.
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CG. Sistema de Inyección CG. Sistema de Inyeccion

Configuración del horno

„ La temperatura de la columna
depende del punto de ebullición
de la muestra y del grado de
separación requerido.
„ Programa de temperaturas: se
utiliza para muestras con un
amplio intervalo de puntos de
ebullición.

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Elución isotérmica
Programa de temperatura
„ A medida que la temperatura aumenta,
la presión de vapor del analito aumenta
y se eluye mas rápidamente.
„ La columna alcanza la temperatura
durante la separación y las especies se
separan según su rango de polaridades
o presión de vapor.
Programa de temperaturas
Detectores.Características
„ NECESARIO
– Adecuada sensibilidad (10-8-10-15 g soluto/s)
– Buena estabilidad y reproducibilidad
– Respuesta lineal a varios ordenes de magnitud
– Intervalo de temperaturas (0- 400oC)
„ DESEADO
– Tiempo de respuesta corto
– Alta fiabilidad y manejo sencillo
– Respuesta semejante para todos los analitos
– No destructivo de la muestra
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 Detector de Ionizacion de Llama (FID)

Detector de Ionizacion de Llama (FID) Detector de Conductividad Térmica

„ Utiliza cambios en la
„ Los compuestos orgánicos se pirolizan en llama de (TCD) conductividad térmica de la
H2/Aire, produciendo iones y electrones que conduce corriente de gas ocasionados
la electricidad a través de la llama por las moléculas de analito
„ La señal depende del numero de átomos de C que (catarómetro).
entra por unidad de tiempo..Detector sensible a la „ Elemento (Pt, Au, W) calentado
masa eléctricamente cuya
temperatura depende de la
„ Se aplica a compuestos orgánicos. Poco sensible a conductividad térmica (CT) del
grupos carbonilos, aminas, alcoholes. gas ( resistencia).
„ No sensitivo a no-combustibles-H2O, CO2, SO2, NOx „ La CT de He o H2 es elevada.
„ Elevada sensibilidad (10-13 g/s) En presencia de compuestos
orgánicos la CT disminuye y
„ Gran intervalo lineal, (107) aumenta la temp.
„ Bajo ruido „ Simplicidad, amplio rango
„ Destructivo de la muestra. lineal(105).
„ No destructivo
„ Baja sensibilidad(10-8 g/s)

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GC-MS (espectrometría de masa)
„ MS: mide la razón masa/radio (m/z) de los iones
producidos por la muestra.
„ La mayoría de los iones que se generan estan
univalentemente cargados.

Detector Quimiluminiscente de
Azufre (SCD)
„ Se basa en una reacción entre ciertos
compuestos de azufre y ozono. El eluente
se mezcla con H2y aire y se queman en un
FID. Los gases resultantes se mezclan
con ozono generando luminiscencia.
„ La intensidad de luminiscencia es
proporcional a la concentración de azufre.
„ Útil para cuantificar mercaptanos

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 Detector de captura de electrones
(ECD) Detector de emisión atómica
„ El eluente pasa sobre un emisor beta ( Ni-63) y
provoca la ionización del gas portador.
„ En ausencia de especies orgánicas se obtiene una „ El eluyente se introduce en una plasma
corriente constante. de He obtenido por microondas, que se
„ La corriente disminuye en presencia de moléculas acopla a un espectrofotómetro de
orgánicas que tienden a capturar los electrones. emisión
„ Selectivo a compuestos con grupos funcionales
„ Aplicación al análisis de los
electronegativos ( halógenos, quinonas, nitros,
peróxidos) componentes de la gasolina y
„ Altamente sensibles, bajo rango lineal derivados.
„ No alteran la muestra significativamente.

Detector Termoiónico (TID)

Detector de emisión atómica
„ Detector selectivo para compuestos
orgánicos que contienen P y N.
„ Útil en la determinación de pesticidas.
„ Semejante a FID. El fluyente se quema en
una llama que fluye alrededor de una bola
de silicato de rubidio calentada
eléctricamente (600-800 C).
„ No esta bien establecido el mecanismo
pero eso hace que se produzcan gran
cantidad de iones a partir de las moléculas
que contienen P y N.

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 Columnas y fases estacionarias en CG
Otros Detectores
„ Dos tipos de columnas
– Empaquetadas
„ Detector de fotoionización
• Material de soporte sólido formado por
– El eluyente se irradia con luz UV partículas de sílice recubiertas con liquido
provocando la ionización de las moléculas (,100-300 µm diámetro) en un tubo de
vidrio.
„ Detector fotométrico de llama
– Análisis de pesticidas e hidrocarburos
• Ideal para gran escala pero lenta e
– Selectivo a compuestos que contienen S y ineficiente
P.
– Capilares/ tubulares abiertas

Columnas capilares/tubulares abiertas

ƒ Ideal para una mayor velocidad de análisis y
eficacia pero solo aplicable a muestras
pequeñas

ƒ WCOT (wall coated open tubular) < 1 µm de

liquido recubriendo el interior de un tubo de
sílice. Actualmente, se utilizan capilares de sílice
fundida con un recubrimiento externo protector
de poliimida
ƒ SCOT ( support coated open tubular ) 30 µm
de liquido soportado en el interior de un tubo de
sílice. La superficie interna esta revestida de una
capa fina tal como tierra de diatomeas.

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Columnas tubulares abiertas
Columnas empaquetadas.
Materiales de soporte sólidos
„ Sirven para retener y ubicar la fase
estacionaria
„ Partículas esféricas, pequeñas,
uniformes, buena resistencia física,
superficies especifica de 1m2/g.
„ Tierras de diatomeas: esqueletos de
miles de especies de plantas
unicelulares que habitaban mares y
lagos
Columnas empaquetadas
„ Se fabrican con tubos de vidrio, metal,
con longitud de 2 a 3 metros y diámetro
de 4 mm
„ Se empaquetan con un material de
relleno sólido finamente dividido y
homogéneo.
„ El material de relleno se puede recubrir
con una delgada capa de FE
liquida.(SCOT)
Columnas empaquetadas.
Tamaños de partículas
„ Eficacia aumenta con la disminución de
la partícula.
„ La diferencia de presión varia
inversamente con el cuadrado del
diámetro de la partícula.
„ No es conveniente trabajas con
presiones superiores a 50psi.
„ Las partículas son por lo general de
250-170 micrómetros
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Adsorción sobre los rellenos de la columna
empaquetada o las paredes de capilar
„ Se produce adsorción física de analitos
polares sobre las superficies de silicato.
„ Resultan picos distorsionados
„ La adsorción se produce por los grupos
silanol (SiOH) formados por la humedad y
tienen afinidad por moléculas orgánicas
polares.
„ Se desactivan con dimetilclorosilano y
posterior lavado con metanol.
„ La sílice fundida tiene menos problemas
de adsorción
POLISILOXANOS
La Fase Estacionaria Liquida
inmovilizada (SCOT)
„ Propiedades:
– Baja volatilidad ( punto de ebullición del liquido
debe ser al menos 100oC mayor que la
temperatura de trabajo máxima de la columna)
– Estabilidad térmica
– Químicamente Inerte
– Químicamente unida al soporte
– K’ y α para una buena resolución
– Muchas están basadas en polisiloxanos o
polietilenglicol (PEG)
HO-CH2-CH2-(O-CH2-CH2) n -OH
Polietilen glicol
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La Fase Estacionaria
Fases estacionarias

„ Las FE usualmente se inmovilizan

unidas (bonding) y/o se entrecruzan (
cross-linked).
– Unidas-unión covalente al soporte de la
fase estacionaria
– Entrecruzada- reacción de polimerización
después de unirse individualmente a las
moléculas de la FE

Fases estacionarias Fases estacionarias

„ FE no-polares ideales para analitos no
polares.
– Analitos no-polares retenidos preferentemente
„ FE polares ideales para analitos polares
– Analitos polares retenidos preferentemente
„ Espesor de la FE (0.1-5µm) afecta a la
retención y la resolución- películas mas
delgadas para analitos volátiles presentan
una resolución mas pobre.
„ Existen FE quirales desarrolladas para la
separación de enantiómeros (farmacéuticas).

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Aplicaciones de la cromatografía
Indice de retención
Gas-Liquido
„ Tiempos y volúmenes de retención
proporcionan identificación cualitativa
„ Alturas de pico o áreas proporcionan
información cuantitativa.
„ INDICE DE RETENCION (I)
– Kovats (1958)
– Es igual a 100 veces el numero de carbonos del compuesto
sin considerar el relleno de la columna, la temperatura u
otras condiciones cromatograficas
– Para una serie homologa la representación del log del
tiempo de retención ajustado frente al numero de carbonos
es lineal.

Cromatografía Gas-Sólido
„ Se basa en la absorción de sustancias
gaseosas sobre superficies sólidas
„ Se utilizan columnas de relleno o
capilares estas denominadas columnas
tubulares abiertas de capa porosa
(PLOT).
„ Tipos de adsorbentes:
– Tamices moleculares
– Polímeros porosos.

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Tamices moleculares
„ Son intercambiadores de iones de silicato de
aluminio.
„ Tamaño del poro depende del tipo de catión.
„ Se clasifican según el diámetro máximo de las
moléculas que pueden entrar en los poros ( 4, 5
10 y 13 Å)
„ Las moléculas mas pequeñas penetran en el
interior de las partículas donde tiene lugar la
adsorción
„ Se pueden utilizar para separar moléculas
pequeñas de grandes ( He, O2, N2, metano, CO)
Polímeros porosos
„ Se fabrican a partir de estireno
polimerizado con divinilbenceno.
„ El tamaño de poro en estas bolas es
uniforme y se controla por el grado de
polimerización.
„ Aplicación en la separación de especies
polares (H2S, óxidos de nitrógeno,
cloruro de vinilo).
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