ANLISIS DE LQUIDO CEREBROESPINAL.

3, 12,13
Los problemas neurolgicos son relativamente frecuentes, ya sea de tipo infeccioso,
metablico, traumtico, degenerativo, hemorrgico o por invasin tumoral. Es por ello que en el
estudio del lquido cerebroespinal tiene gran valor como medio diagnstico directo o indirecto en
muchos padecimientos del sistema nervioso central, sobre todo cuando son realizados
adecuadamente y los resultados son interpretados en relacin con las manifestaciones clnicas.
Por otra parte su estudio tiene un valor adicional en la evaluacin del tratamiento y su pronstico.
En esta unidad se incluyen las pruebas de laboratorio ms utilizadas en el estudio del LCR,
omitindose lo relativo al examen microbiolgico e inmunolgico que no se revisan en esta
experiencia educativa, ya que se consideran ampliamente en sus respectivas experiencias.
El anlisis del lquido cerebroespinal incluyen las siguientes determinaciones:
I.

Examen Fsico
a) Volumen
b) Presin
c) Color
d) Aspecto
e) Coagulacin

2. Examen qumico
a) Glucosa
b) Protenas globulinas
c) Enzimas
d) Cloruros
3. Examen microscpico
a) Recuento celular total
b) Recuento diferencial

OBTENCIN DE MUESTRAS

Normalmente el LCR se extrae por puncin lumbar (puncin espinal) entre la III y IV o IV y
V vrtebras lumbares. Es el medio ms comn para recolectar una muestra de LCR y sta slo
debe realizarse por un mdico con experiencia. Debe realizarse en el consultorio o en el
laboratorio, pero es recomendable hacerla en el hospital pues conviene que el paciente
permanezca por lo menos 8 horas en cama despus de la extraccin del lquido para evitar
complicaciones posteriores.

10

El paciente deber estar en una posicin adecuada, esto es sentado

o mejor an acostado en decbito lateral sobre todo cuando los pacientes son nios o adultos
encamados.1 Se debe pedir al paciente que se acueste de lado con las rodillas encogidas hacia el
abdomen y la barbilla pegada al trax. (Ocasionalmente, este procedimiento se realiza con la
persona sentada y doblada hacia adelante).
El clnico deber estar en condiciones aspticas y usar medidas de seguridad. Se
proceder a desinfectar perfectamente la piel del paciente previa localizacin de la zona
intervertebral. La puncin debe hacerse con o sin anestesia local (novocana al 0.1%). La
penetracin de la aguja se hace suavemente, una sensacin de vaco (resistencia que cede)
implica que la aguja se encuentra en el espacio subaracnoideo o bien, para comprobar si
efectivamente se encuentra en este lugar de vez en cuando se saca el mandril o estilete de la
aguja, la salida de liquido la confirma, en los casos de no salir lquido lo que se hace es girar la
aguja e introducir otros milmetros mas hasta la salida de este. Una vez que se ha insertado la
aguja adecuadamente en el espacio subaracnoideo, se mide la presin inicial del lquido, si es
normal la presin se extrae de 10 a 20 ml si hay hipertensin solo se extraen unos pocos ml.
Se recolecta el lquido en tres tubos estriles uno para las pruebas fsicas, otro con
anticoagulante para evitar coagulacin, en esta muestra se realizan las pruebas qumicas as como
las microscpicas y el tercer tubo se utiliza para un examen microbiolgico. Despus de recolectar
la muestra, se mide la presin nuevamente y se retira la aguja, se limpia el rea y se aplica un
vendaje. El paciente debe permanecer acostado o casi acostado por al menos seis u ocho horas
despus del examen.
La puncin lumbar con recoleccin de lquido puede ser tambin una parte de otros
procedimientos, particularmente de un mielograma (radiografa o TC despus de que se ha
introducido el medio de contraste en el LCR)., para medir presin del LCR y detectar alteraciones
en el flujo del mismo ,introducir anestsicos y/o medicamentos.

NO DEBE PRACTICARSE LA PUNCIN LUMBAR CUANDO:

Proceso infeccioso en sitio de puncin
Septicemia
Sospecha de equipo no estril
Desarrollo de tumor dermoide
Presin > de 150 mm H20
Paciente NO apto
Los mtodos alternativos para obtener el LCR son pocas veces utilizados, pero pueden ser
recomendables si el paciente presenta un problema como deformidad lumbar o infeccin, lo cual
puede imposibilitar la puncin lumbar o hacerla no confiable.
La puncin cisternal implica la insercin de una aguja debajo del hueso occipital (parte
posterior del crneo). Esto puede ser peligroso porque la aguja se inserta cerca del tronco
enceflico.(4)
La puncin ventricular es an menos comn, pero se puede recomendar cuando es
necesario obtener la muestra de LCR en personas con posible hernia cerebral inminente y se
realiza generalmente en el quirfano. Se perfora un orificio en el crneo y se inserta una aguja
directamente en el ventrculo lateral del cerebro.

CONDICIONES DE EMBALAJE
1. El paciente deber llevar a cabo las mismas condiciones ptimas que se recomiendan para la
obtencin de muestras sanguneas.
2. Se anotara la hora en que se inicia y termina la extraccin, el estado del paciente, el aspecto del
LCR y las presiones de los lquidos.
3. Cada muestra de LCR debe ser tomada de manera asptica y recogida en 3 tubos estriles.
4. Las muestras obtenidas debern trasladarse al laboratorio lo ms pronto posible y procesarse de
inmediato, pues como liquido hipertnico modifica clulas produciendo lisis y esto altera
caractersticas fsicas, qumicas y microscpicas del LCR.
3. Es aconsejable para el examen Microbiolgico sembrar directamente LCR en un medio de
cultivo similar al utilizado para hemocultivos, el que debe remitirse al laboratorio
inmediatamente. El retraso en el envo puede ocasionar la muerte de grmenes patgenos
delicados. El material debe ser procesado y sembrado lo mas rpido posible. Si hubiera
inconvenientes, colocar u tubo con LCR en estufa a 37C o en un termo.

PRACTICA NO.
ANLISIS DE LQUIDO CEFALORRAQUDEO
EXAMEN FSICO
A)
B)
C)
D)

Volumen y presin
Color
Aspecto
Coagulacin
Densidad y pH

E)

MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIN

MATERIAL PARA LA PRUEBA

1

tubo de ensaye de 13 x 100 mm

portaobjetos

pipeta Pasteur con bulbo

gradilla
aplicadores de madera
papel pH

INSTRUMENTACIN
Refractmetro o densitmetro

A) VOLUMEN Y PRESIN
El volumen varia de 100 a 150 ml aproximadamente, es por ello que la extraccin de 10 a
12 ml es inocua. Antes de proceder a retirara cualquier cantidad de liquido deber medirse la
presin y observar la elevacin del mismo en el interior del manmetro graduado y esterilizado. La
presin normal en el adulto es de 70 a 150 mm de agua en posicin de decbito lateral, en posicin
sentada aumenta al doble.
Cuando la presin intracraneal esta elevada (mas de 200 mm de agua) debern extraerse
de

1 a 2 ml solamente. Si la presin desciende del 25 al 50% de la inicial es un dato

patognomnico de hernia cerebral o compresin de la columna vertebral, si esto es as no debe

extraerse mas liquido.
Una presin inferior a 50 o superior a 250 mm de agua puede considerarse patolgico,
siempre y cuando no se considere como dato aislado.
La tos o un esfuerzo violento, usualmente causan una elevacin rpida y una cada
subsiguiente de presin. Esto se debe a que la presin de liquido cefalorraqudeo esta relacionada

con venas yugulares y espinales y el crecimiento resultante de la presin en el contenido en el

espacio subaracnoideo.
El incremento patolgico de la presiona se debe generalmente a una inflamacin de las
meninges o la lesin que ocupa espacio, como puede ser un tumor, absceso, edema cerebral o
hemorragia intracerebral, insuficiencia cardiaca, congestiva, etc. Puede encontrarse una
hipotensin en casos de un obstruccin medular total, (tumores y en estado de deshidratacin).

B) COLOR
El lquido cefalorraqudeo normal es claro, incoloro e inodoro. Las diferentes coloraciones
que puede tener son producidas por alteraciones patolgicas excepto cuando la coloracin es
debida a la presencia de sangre como resultado de una puncin traumtica, esto se corrobora por
ausencia de hemlisis al centrifugarse el liquido, la presencia de esta es evidencia de hemorragia
menngea evidente.
A veces puede aparecer una coloracin amarilla que se denomina xantocroma (puede
aparecer un rosa plido o un naranja plido). Muchas veces esta xantocroma va acompaada de
coagulacin espontnea poco despus de la recoleccin. Las causas posibles de la xantocroma
son:

1. Protenas que sobrepasen los 100mg/100ml.

2. Puncin traumtica con lisis de eritrocitos.
3. Bilirrubina.
4. Por contaminacin de mertiolato que se empleo para la desinfeccin de la piel.
5. Hemorragia intracerebral o subaracnoidea.
6. Carotenemia o metahemoglobinemia.
7. Oxihemoglobinemia.
8. Presencia de tumores en las ltimas vrtebras lumbares.
C) ASPECTO
El aspecto del lquido cefalorraqudeo es transparente. Aparece el enturbiamiento como
resultado

de

elevadas densidad de poblacin de elementos celulares o por la presencia de

contaminacin bacteriana. La turbiedad del lquido puede variar desde una ligera opalescencia
tpica de la meningitis tuberculosa, hasta un aspecto ms o menos purulento como en algunos
casos de meningitis pigena.
En el reporte del resultado se anota si el lquido es transparente o turbio. Esta turbidez se valora
de 1 a 3 cruces.

ESCALA DE PONDERACIONES DE ALGUNOS PARMETROS

PONDERACIN

ASPECTO

RECUENTO CELULAR

TRANSPARENTE

< 5 CELULAS /mm3

LIGERAMENTE TURBIO

< 200 CELULAS / /mm3

++

MODERADAMENTE TURBIO
XANTOCRMICO

500 A 2000 CLULA/mm3

++

TURBIO
HEMORRAGICO

2000 A 6000 CLULAS //mm3

D) COAGULACIN
Normalmente el lquido cefalorraqudeo carece de coagulacin. Esta puede ocurrir debido a
una puncin traumtica o atribuirse a un nivel muy elevado de protena asociado con meningitis
tuberculosa.
La deteccin de fibrina se manifiesta por la presencia de un retculo. En la meningitis
tuberculosa puede aparecer formada dicha pelcula. En la meningitis purulenta puede aparecer
cogulos poco despus de obtenida la muestra, mientras que en la meningitis tuberculosa la
coagulacin es tarda.

E) DENSIDAD y pH
El LCR es semejante en su composicin al plasma, con un contenido mayor de agua y una
densidad de 1.007, lo que hace de su contenido de molculas en general sea ligeramente inferior
al plasma. Carece casi totalmente de clulas, tiene pocas protenas y abundantes cloruros.
Slo en eventos patolgicos se altera la cantidad de solutos en el LCR como en alteraciones de la
barrera hematoenceflica, inflamaciones de meninges, rompimiento de vasos sanguneos, entre
otros.
El pH del LCR es 7.40 7.50 se determina con el potencimetro o en su defecto con papel
pH.

EXAMEN QUMICO
A)

DETERMINACIN DE GLUCOSA

B)

DETERMINACIN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE PROTENAS

C)

DETERMINACIN DE CLORUROS

MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIN

MATERIAL PARA LA PRUEBA

15

clnicas

tubos de ensaye de 13 x100 mm

pipetas lineales de 10 ml

pipetas lineales de 5 ml

6
3

pipetas lineales de 1 ml
pipetas lineales de 0.2 ml (1/10)

pipeta lineal de 2.0 ml (1/100)

matraces Erlen Meyer de 25 ml

ENTACI

vaso de precipitado de 50 ml

pipeta Pasteur con bulbo

Centrifuga

vidrio de reloj
gradilla

Bao

INSTRUM

Mara

perilla
precalentado a 37oC
Espectrofotmetro - celdillas

A) DETERMINACIN CUANTITATIVA DE GLUCOSA.

La cuantificacin de glucosa en LCR se hace igual que en las tcnicas descritas para suero
y/o sangre completa. La glucosa en el LCR existe en cantidades muy bajas comparada con la
concentracin de glucosa sangunea (aproximadamente 20% menos).

TCNICA
Revisar la tcnica disponible.

VALORES DE REFERENCIA

En adultos la cantidad normal

de glucosa varia de 50 a 75 mg/100 ml de lquido

cefalorraqudeo, en los nios hasta los 10 aos es de 70 a 90 mg/100ml.

INTERPRETACIN CLNICA
El aumento de glucosa en lquido cefalorraqudeo se conoce como hiperglucorraquia, se
encuentra en todos los procesos hiperglucmicos, una ligera hiperglucorraquia puede observarse
en encefalitis epidmica y en la poliomielitis.
Cuando hay meningitis bacteriana, tuberculosa, mictica o carcinomatosa, la concentracin
de glucosa suele estar disminuida (hipoglucorraquia), en el mecanismo de produccin de la
hipoglucorraquia puede intervenir la intensa actividad metablica de las clulas en rpido
crecimiento (neoplsicas y microorganismos), la fagocitosis y trastornos de la glucosa.

COMENTARIOS.
La cuantificacin de la glucosa en LCR tiene las mismas variaciones que la glucosa
sangunea, por ello es preferible que la extraccin del LCR sea despus de un periodo de ayuno. Al
igual que la sangre el LCR posee otras sustancias reductoras que aumentan el nivel de glucosa
real. Cuando la concentracin de protenas esta elevada es comn observar una variacin en la
glucorraquia.

B) DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES

El estudio de las protenas del LCR es muy til, se cuantifican a partir de 1 ml de LCR, si las
cifras son bajas, son insuficientes para el equilibrio cido-bsico del LCR, por tanto como
mecanismo compensatorio para los cationes se elevan los cloruros. Las determinaciones de
protenas individuales como albmina se hace por mtodos enzimticos preferentemente y para
globulinas se recomienda por inmunodifusin radial o turbidimetra por las cantidades tan bajas que
se cuantifican. Los mtodos presentados aqu para globulinas son de inters por su facilidad
operativa.

B1. DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES POR BIURET MODIFICADO

FUNDAMENTO
La reaccin de Biuret se basa en la formacin de un complejo de iones de cobre II con 4
tomos de N peptdico en medio alcalino. Reacciona especficamente con los pptidos,
polipptidos y protenas, excepto con amoniaco, urea, aminocidos y otros compuestos
nitrogenados simples. Desarrollando un complejo colorido azul, cuya intensidad de color es

directamente proporcional al nmero de uniones peptdicas (cantidad de protenas) presentes en la

muestra. La adicin de urea impide el efecto Tyndall (turbidez leve).

REACTIVOS
1. REACTIVO PRECIPITANTE (FOSFOTNGSTICO)
2. REACTIVO BSICO.
3. REACTIVO DE BIURET - MODIFICADO
4. PROTENA ESTNDAR 50 mg/100 ml.
TCNICA
1.

En 3 tubos de ensaye previamente marcados, medir:

PROBLEMA (ml)

2.

ESTNDAR (ml)

BLANCO (ml)

Ac. Fosfotngstico

0.5

0.5

Liq. Cerebroespinal

0.5

Estndar

0.5

Mezclar durante 1 minuto continuamente. Deje reposar 15 minutos (hasta que comience a
precipitarse). Centrifugue durante 5 minutos. Retire el sobrenadante cuidadosamente, sin
resuspender el precipitado que es lo que vamos a cuantificar. Una vez eliminado el
sobrenadante resuspenda el precipitado enrgicamente. Contine como se indica a
continuacin
Precipitado

+++

+++

Agua destilada

0.2

Reactivo bsico

0.5

0.5

0.5

3.

Mezclar el precipitado el tiempo necesario (1-2 min.) para lograr una completa resolubilizacin
del precipitado.

4.

Agregar a cada uno de los 3 tubos 0.5 ml del reactivo de Biuret.

5.

Mezcle y deje en reposos durante 30 min, a temperatura ambiente o 10 minutos a 37 oC. Lea
el Problema, Estndar y el Blanco de reactivos ajustando a cero con agua destilada a 546
nm.

CLCULO
mg / 100 ml = EP

EB X 50

EE

EB

VALORES DE REFERENCIA
La informacin que se tiene al respecto es poco precisa por lo que se recomienda obtener
los valores de referencia en base a la poblacin en estudio, no obstante se presentan los
siguientes valores a considerar en cuanto a las concentraciones de protenas de lquido
cefalorraqudeo y a sus diferentes fracciones. En recin nacidos hasta con un mes de vida se
consideran normales valores de hasta 100 mg/100ml; edades posteriores pueden ser normales
concentraciones que oscilan entre 20 a 44 mg/100ml. La cantidad de albmina es de 15 a 30 mg%
y la de globulinas de 4 a 9 mg%, no detectadas por las tcnicas habituales.

COMENTARIOS
1. El mtodo descrito es lineal hasta concentraciones de 600 mg%.
2. Se recomienda efectuar una determinacin cualitativa mediante una tira de prueba. Si la
concentracin proteica es de 3+, se preparar la determinacin con menos LCR. Si por el
contrario, se encuentran solo vestigios, su precipitacin puede mejorarse utilizando 1 ml de
cido fosfotngstico

B2.

DETERMINACIN DE GLOBULINAS (MTODO DE NONNE ALPET). 9, 14

FUNDAMENTO
Las globulinas son insolubles en agua pura, pero solubles en soluciones neutras diluidas
de sales de lcalis y cidos y coagulan por el calor. Precipitan en la solucin por semisaturacin
con sulfato amnico.

REACTIVOS.
1. SOLUCIN SATURADA DE AMONIACO
TCNICA.

1. Homogeneizar muy bien la muestra de LCR. En un tubo de ensaye se mide 1 ml de la solucin

saturada de sulfato de amonio.

2. Sobre esta se deposita con precaucin por las paredes y sin que se mezcle 1 ml de LCR. Se
deja reposar 5 min.

3. Cuando existe un exceso de globulina aparece un anillo blanco o gris en la zona de contacto
de los dos lquidos.

VALORES DE REFERENCIA.
Globulinas negativas.

B3. DETERMINACIN DE GLOBULINAS POR LA REACCION DE PANDY.5

FUNDAMENTO
Las globulinas representadas principalmente por la fraccin de Inmunoglobulinas, en una
solucin saturada de fenol acuosa precipitan, produciendo una turbidez visible microscpicamente.

REACTIVO.
1. SOLUCIN SATURADA DE FENOL
TCNICA.

1. En un tubo de ensaye se coloca 1 ml de reactivo y se agrega una gota de LCR.

2. Si el lquido es normal no aparece enturbamiento o bien slo se origina una ligera opalinidad.
3. Si la opalinidad es marcada o aparece enturbiamiento dbil, marcado o lechoso se establecen
los 3 grados de positividad correspondiente a +, ++, +++ en ese orden.

4. Esta reaccin puede hacerse en vidrios de reloj, facilitndose la lectura sobre un fondo negro.
VALORES DE REFERENCIA
Negativo

INTERPRETACIN CLNICA
Los aumentos de protenas de lquido cefalorraqudeo se presenta en cualquier
enfermedad inflamatoria aguda o crnica, enfermedades degenerativas (esclerosis mltiple),
alteraciones de la barrera hemato-enceflica y en muchos casos de tumores cerebrales. El
incremento suele ser leve, moderado y elevado de acuerdo a la evolucin del padecimiento.
Un aumento notable se da en los casos de compresin medular con obstruccin total
acompaado de coagulacin masiva y xantocrmica (sndrome de Froin) y por lo general cifras
bajas de elementos celulares.
La meningitis aguda presenta elevacin de las protenas acompaada de pleocitosis
proporcional. En la meningitis crnica, principalmente las sifilticas se observan aumentos
moderados de protenas.
Puede observarse un ascenso ligero de la proteinorraquia con aumento desproporcionado
de elementos celulares en algunos procesos inflamatorios agudos no infecciosos. Cuando las

globulinas son positivas se revela que el proceso pas a ser crnico. El ndice de suero/LCR es til
para valorar dao en barrera y sntesis local (tabla 1). Los siguientes padecimientos son
considerados afectaciones de barrera.
LCR/ suero < 160:

Meningitis viral (neutrfilos y clulas mononucleares)

Estados iniciales de meningitis bacterianas

Accidentes de padecimientos no vasculares, inflamatorios polineuropatas

Enfermedades degenerativas (esclerosis lateral amiotrpica, tumores cerebrales

malignos y benignos

Hernia de disco vertebral

TABLA 1. DAO DE BARRERA LCR/ SUERO EN ESCLEROSIS MLTIPLE

Suero (mg/dl)

LCR (mg/dl)

ndice Suero/LCR

Albmina

3420

24.30

141

IgG

1250

11.5

109

IgA

185

0.34

544

IgM

326

0.67

487

COMENTARIOS.
1. Los valores normales de protenas en lquido cefalorraqudeo varian segn la edad del
paciente y el mtodo utilizado.
2. Las tcnicas para la investigacin cualitativa de las globulinas no son aplicables a los lquidos
cefalorraqudeos que contengan sangre.,
3. Las protenas estn constituidas por albminas y globulinas, en relacin de 5 a 1.

C) DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CLORUROS. METODO DE MOHR. 1

FUNDAMENTO
Se basa en el papel del in cloro presente en le liquido cefalorraqudeo desproteinizado,
como cloruro de plata, despus de reaccionar con una solucin de nitrato de plata, usndose como
indicador el cromato de potasio. El exceso de AgNO 3 se identifica por el cambio de color del
indicador.

REACTIVOS

1. SOLUCIN DE NITRATO DE PLATA 0.0342 N

2. SOLUCIN DE CROMATO DE POTASIO AL 48.33%
3. SOLUCIN DE TUNGSTATO DE SODIO AL 10%
4. SOLUCIN DE CIDO SULFRICO 2 / 3N
TCNICA
1. En un matraz Erlen- Meyer (o en un tubo dependiendo de los volmenes a mezclar) se colocan
2 ml de LCR con 14 ml de agua destilada, 2 ml de solucin. De tungstato de sodio al 10% y 2 ml
de cido Sulfrico 2/3 N, se agita y se filtra o centrifugar por 10 minutos a 3400 rpm.
2. Se miden 10 ml de filtrado o sobrenadante (que equivalen a un mililitro de LCR) y colocar en un
matraz Erlen Meyer.
3. Se aaden 10 gotas de solucin de cromato y 20 ml de agua destilada.
4. Se titulan con una solucin de nitrato de plata hasta una coloracin roja.

CLCULOS
Los mililitros gastados de la solucin de AgNO 3 se multiplican por 0.002 y por 2000 para
obtener el valor de los cloruros en gramos por litro.

VALORES DE REFRERENCIA
Las cifras de cloruros en el liquido cefalorraqudeo, clorurorraquia, es un promedio de 125
a 135 meq/l o de 7.30 g / l expresado como cloruro de sodio o de 700 a 760 mg %.

INTERPRETACIN CLNICA
Las alteraciones en la concentracin de cloruros generalmente se presentan como
disminucin de los niveles de ellos en el LCR. Los descensos muy marcados de los niveles de
cloruros en este liquido es frecuente observarlos en los casos de meningitis tuberculosa,
disminuciones modernamente marcadas se observaran en meningitis aguda excepto en los tipos
sifilticos.
Esta disminucin, puede ser el resultado de la hipocloremia debido a vmitos intenso,
lesiones en la barrera hematocerebral y tambin puede ser causado por la sustitucin osmtica de
los cloruros por protenas en valores elevados.

EXAMEN MICROSCOPICO
A) RECUENTO TOTAL DE CLULAS
B) RECUENTO DIFERENCIAL CON PREPARACIONES TEIDAS
(Por tinciones hematolgicas y/o bacteriolgicas)

A) RECUENTO TOTAL DE CLULAS

La celularidad se efecta por el conteo total y diferencial de la muestra obtenida de LCR,
normalmente se encuentras de 0 a 5 clulas /mm3, elevndole en cualquier proceso inflamatorio
Es recomendable practicarlo dentro de una o dos horas de obtenido el LCR, ya que los
elementos celulares sufren modificaciones importantes. El recuento celular debe efectuarse en
forma minuciosa cuando el nmero de clulas est levemente o moderadamente elevados.
Proporciona un dato diagnstico diferencial de los casos de meningitis tuberculosa, poliomielitis
aguda, sfilis del SNC y encefalitis letal. y se clasifica como sigue:
Leve

de 5 a 50

clulas /mm 3

Moderada de 50 a 200 clulas /mm3

Grave

ms de 200

clulas /mm3

Cuando los LCR muestren macroscpicamente la presencia de sangre, no se les debe

practicar recuento celular. Pues se encontraran cifras elevadas.
Para el recuento celular pueden utilizarse comnmente dos tcnicas a elegir dependiendo del
volumen de LCR con el que se cuente, con liquido de dilucin se emplea mayor volumen o la carga
de la muestra homogeneizada directamente en la cmara de Neubauer.

REACTIVOS
1. LQUIDO DE DILUCIN CRISTAL VIOLETA
MATERIAL, EQUIPO E INSTRUMENTACIN

MATERIAL PARA LA PRUEBA

1
tubo de ensaye de 13 X 100 mm
1 pipeta Pasteur con bulbo
10 portaobjetos
5 cubreobjetos
1 cmara de Neubauer
1 pipeta de Thoma para leucocitos con boquilla
Gradilla
Perilla
Puente de tincin

Aplicadores de madera
Papel Parafilm

INSTRUMENTACIN
Microscopio binocular con iluminacin Koheler

TCNICA A
1. Se aspira lquido de dilucin hasta la marca de pipeta 0.5
2. Aspirar LCR previamente homogeneizado hasta la seal 11, se agita por 1 minuto
mecnicamente y se desechan las dos o tres primeras gotas.
3. Se carga la cmara de Neubauer y se esperan unos 5 minutos, para que sedimenten las
clulas y se efecta el recuento.
4. Se cuentan todas las clulas contenidas en 9 cuadros grandes del numero de clulas se divide
entre 9 y se multiplica por 10 para obtener el valor correspondiente a un mm 3.

TCNICA B
1. Se homogeniza muy bien el LCR y se carga la cmara de Neubauer y se esperan unos 5
minutos, para que sedimenten las clulas y se efecta el recuento.
2. Se cuentan todas las clulas contenidas en 4 cuadros grandes (divididos en 16 cuadros
pequeos) del numero de clulas se divide entre 4 y se multiplica por 10 para obtener el valor
correspondiente a un mm3.

VALORES DE REFERENCIA.
De 0 a 5 clulas / mm3.

INTERPRETACIN CLINICA
Se denomina pleocitosis al nmero elevado de clulas el LCR, es comn encontrar cifras
elevadas en las enfermedades neurolgicas.
Un incremento de 10 a 100 clulas /mm 3

se encuentran en casos de meningitis

tuberculosa, poliomielitis, neurosifilis, tumores cerebrales y medulares, etc. Se observa un

predominio de linfocitos.
Una pleocitosis de 100 a 500 clulas o mas /mm 3 es frecuente observarla en las formas de
meningitis con predominio de polimorfonuclerares.

B) RECUENTO DIFERENCIAL CON PREPARACIONES TEIDAS

(Por tinciones hematolgicas y/o bacteriolgicas)
1 ) TINCIONES HEMATOLGICAS

La formula celular en muchos casos proporciona datos de importancia diagnstica, a ste

recuento se le denomina citodiagnstico

REACTIVOS.
1.
2.
3.
4.
5.
6.

COLORANTE PARA TINCIN DE MAY GRUENWALD GIEMSA

COLORANTE PARA TINCIN DE WRIGHT
SOLUCIN BUFFER DE FOSFATOS PARA T INCIN DE WRIGHT
CITRATO DE SODIO
ACEITE DE INMERSIN EN FRASCO GOTERO
SOLUCIN SALINA DE CLORURO DE SODIO

A) Preparacin de la muestra
La muestra de LCR se centrifuga durante 10 minutos por 2500 rpm, no conviene centrifugar a
mayor velocidad por el riesgo de hemlisis. El lquido sobrenadante se separa cuidadosamente y
es el que se emplea para las determinaciones qumicas, mientras que el sedimento se emplea para
las preparaciones a teir.

TCNICA
1. Depositar una pequea gota de material a estudiar sobre el portaobjeto limpio y seco.
2. Hacer un extendido delgado tipo hematolgico o bacteriolgico.
3. Dejar secar a temperatura ambiente. Y teir con la tcnica de May Gruenwald Giemsa para
efectuar la diferenciacin celular.
4. Puede teirse con Wright, Papanicolaou, etc. Una vez seca la preparacin examnela al
microscopio con objetivo inmersin, cuente de 100 a 500 clulas (leucocitos) distinguindolos.

VALORES DE REFERENCIA.
Generalmente solo ser encuentran linfocitos y clulas epiteliales.

INTERPRETACIN CLINICA.
Una pleocitosis menor de 300 clulas / mm 3 suele ser linfocitaria y una pleocitosis mayor
o excesiva generalmente existe predominio de granulocitos neutrfilos.
Cuando predominan los linfocitos (linfocitosis) se trata de procesos subagudos o crnicos,
como meningitis tuberculosa, reacciones agudas no bacterianas, neurosifilis, etc.
Predomina una neutrofilia en los procesos spticos agudos atribuido a meningococos,
estreptococos, neumococos, entre otros procesos.
La aparicin de Eosinfilos tiene valor significativo en el diagnstico de cisticercosis cerebral.

HALLAZGOS EN EL EXAMEN CITOQUMICO DEL LCR EN INFECCIONES DEL SNC

PARMETROS
MENINGITIS
Clulas / mm

PURULENTA

TUBERCULOSA

VIRAL

100 a 10 000

200 a 1000

50 a 100

Protenas (mg/dl)
Glucosa (mg/dl)

100 a 599

100 a 200

50 a 90

10 a 40

21 a 40

40 a 50

OBSERVACIN MICROSCPICA DE MUESTRAS TEIDAS

II) TINCIONES BACTERIOLGICAS
Se usan las tinciones Gram y Ziehl Neelsen para teir los frotis.
REACTIVOS
1. TINCIN DE GRAM
CRISTAL VIOLETA
LUGOL
ALCOHOL ACETONA
SAFRANINA
2. TINCION DE ZIEHL NEELSEN (BAAR)
FUCSINA FENICADA
ALCOHOL CIDO
AZUL DE METILENO
TINCIN DE GRAM
1. Se prepara el extendido bacteriolgico (del sedimento obtenido en la centrifugacin de la
muestra) y se deja secar al aire, se fija por calor suave sobre a la flama de un mechero
Bunsen y luego pasadas a travs de ella (debe tenerse cuidado para evitar calor excesivo, que
altere morfologa bacteriana).
2. La preparacin se coloca en un puente de tincin y se cubre con cristal violeta tiendo por un
minuto, se escurre.
3. Se cubre con lugol por un minuto, se escurre y se decolora con alcohol acetona en 2 tiempos de
15 segundos cada uno enjuagando entre ellos con agua de la llave (para no exceder la
decoloracin), se contra tie con Safranina de 30 a 60 segundos. Se escurre se enjuaga con
agua, se deja secar y se observa al microscopio con inmersin.

TINCION DE ZIEHL NEELSEN

1. Se efecta un extendido delgado del material a teir, sobre un portaobjetos NUEVO, se deja
secar al aire y se fija a la flama.
2.

Se coloca sobre un puente, se cubre con solucin de fucsina fenicada y se calienta

suavemente hasta emisin de vapores dejando actuar por 5 minutos calentando varias veces,
reponiendo el colorante que se pierda por evaporacin.

3. Se lava con agua, se decolora con alcohol acido hasta que el extendido tome un color rosa
plido, se neutraliza con agua de la llave.
4. Se cubre con azul de metileno por 1 minuto, se escurre, se lava con agua, se deja secar y se
observa en inmersin.

TCNICA
1. Seguir los procedimientos habituales de cada tincin y observar las preparaciones con aceite
de inmersin en el microscopio.
2. Al trmino de la observacin asegrese de dejar limpios los objetivos y la platina. As como
colocar en posicin de transporte segura el microscopio.

EXAMEN MICROBIOLGICO
El estudio bacteriolgico del LCR es esencial en el diagnstico etiolgico de las meningitis
infecciosas. En las meningitis bacterianas el LCR frecuentemente es purulento, con celularidad
mayor

de 1000/mm3 y predominio de polimorfonucleares, la concentracin de glucosa est

disminuida y la cuenta bacteriana es superior a 10 UFC/ml (Unidades Formadoras de Colonias).

En la meningitis causada por Mycobacterium tuberculosis, virus, hongos y parsitos, el LCR suele
no ser purulento, la pleocitosis es discreta con predominio de mononucleares y la concentracin de
glucosa es normal o ligeramente disminuida, la cuenta bacteriana es inferior a las 10 UFC.

TABLA NO. 2AGENTES INFECCIOSOS ASOCIADOS A MENINGITIS

BACTERIAS

HONGOS

VIRUS

PARSITOS

Mycobacterium Tb

Criptococcus

De Parotiditis

Toxoplasma

Streptococcus

Coccidioides
neoformans
Histoplasma
inmitis

Enterovirus

Cisticerco

Blastomyces
capsulatum

Herpes
virus Acantamoeba
simples
Arbovirus
Hartmanella
Zoster

Haemophilus
pneumoniae
Enterobacterias
influenzae
Pseudomonas

dermatitidis

Herpes

virus Naegleria

Sthaphilococcus
Streptococcus
aureus
agalactiae
COMENTARIOS
1. Volumen ptimo requerido de LCR es de 7 ml y mnimo aceptable de 2 ml
2. Algunos agentes infecciosos son lbiles a temperatura ambiente. La muestra no deber
refrigerarse antes del examen microbiolgico.

3. Los frotis debern realizarse en portaobjetos nuevos.

EXAMEN INMUNOLGICO

El diagnstico temprano de las enfermedades infecciosas del SNC influye directamente en la

evolucin y el pronstico del paciente, por ello se han diseado varios procedimientos de
diagnstico temprano como son deteccin de endotoxinas, de anticuerpos y de fracciones
antignicas en el LCR. Con los cuales es posible hacer el diagnstico especfico en unos cuantos
minutos.
Los procedimientos actualmente en uso son:
A) Deteccin de endotoxina por ensayo lmulus
- Bacilos Gram-negativos
B) Deteccin de Antgenos
- Por tcnicas de Coaglutinacin (o aglutinacin de ltex)

Haemophilus influenzae tipo B

Streptococcus pneumoniae
Neisseria meningitidis

Streptococcus agalactiae grupo B

Cryptococcus neoformans
- Por tcnica de ELISA

Mycobacterium tuberculosis

Cisticerco

La muestra del LCR puede filtrarse o centrifugarse, y el sobrenadante se utilizar para las
determinaciones inmunolgicas

TABLA NO.3 DATOS INICIALES EN LQUIDO CEREBROESPINAL EN ENFERMEDADES SUPURADAS DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y
MENINGES. 12

PRESIN DE
AGUA (mm)

LEUCOCITOS/mm
3

PROTENAS
(mg%)

GLUCOSA
(mg%)

MENINGITIS
BACTERIANA

>300

200 60 000
CON PREDOMINIO DE
PMN

100 500
A VECES > 1000

< 40 EN MAS
DEL 50% DE
LOS CASOS

EMPIEMA SUBDURAL

PROMEDIO >
300

DE 100 A 500

NORMAL

ABSCESO
CEREBRAL

ELEVADO

DE 75 A 400

NORMAL

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVO

> 100

< 40

PRESENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVO

DE 200

NORMAL

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVO

ENFERMEDAD

EMPIEMA
VENTRICULAR
(ROTURA DE
ABSCESO
CEREBRAL)

MUY ELEVADA

ABSCESO
CEREBRAL
EPIDURAL

LIGERAMENTE
ELEVADA

ABSCESO EPIDURAL
ESPINAL

GENERALMENTE
REDUCIDA, CON
BLOQUEO
ESPINAL

TROMBOFLEBITIS

GENERALMENTE
ELEVADA

ENDOCARDITIS
BACTERIANA
ENCEFALITIS
HEMORRAGICA

NORMAL O
LIGERAMENTE
ELEVADA
GENERALMENTE
ELEVADA

< 100 HASTA UNOS

MILES,PREDOMINAN
PMN
DE 10 A 200, EN RAROS
CASOS ES ACELULAR,
PREDOMINIO PMN
DE MILES A 100 000,
GENERALMENTE
PREDOMINIO EN MAS
DEL 90% DE PMN
DE POCOS A VARIOS
CENTENARES
CON PREDOMINIO DE
LINFOCITOS
DE 10 A 100,
PREDOMINIO DE
LINFOCITOS

DATOS ESPECFICOS
MICROORGANISMOS GENERALMENTE
OBSERVADOS EN EL FROTIS,
OBTENIDOS POR CULTIVO EN MS DEL
90% DE LOS CASOS
AUSENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS O CULTIVO, A MENOS QUE HAYA
MENINGITIS

AUSECIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVOS, LA PUNCIN PUEDE
ENTRAR EN EL ABSCESO Y
PROPORCIONAR PUS

> 100

NORMAL

POCOS A VARIOS
CENTENARES DE PMN Y
LINFOCITOS

LIGERAMENTE
ELEVADO

NORMAL

POCOS A < DE 100,

LINFOCITOS Y PMN

LIGERAMENTE
ELEVADO

NORMAL

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS N
FROTIS Y CULTIVO

POCOS A MENOS DE MIL

PREDOMINIO PMN

MODERADAMENT
E ELEVADA

NORMAL

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVO.

AUSENCIA DE MICROORGANISMOS EN
FROTIS Y CULTIVO.

ENCEFALITIS
TUBERCULOSA

ENCEFALITIS
CRIPTOCOCCOCICA

GENERALMENTE
ELEVADA PERO
PUEDE SER
BAJA

ELEVADO
PROMEDIO 225

DE 25 A 100, ES RARO
MAS DE 500,
PREDOMINIO MN
EXCEPTO ETAPAS
INICIALES

DE 0 A 800,PREDOMINIO
MN

DE 100 200
O MAS

< DE 50 EN
EL 75%DE
LOS CASOS

PUIEDE ENCONTRARSE
MICROORGANISMOS BAAR, EN FROTIS
DE COGULOS U OBTENERSE POR
CULTIVO

DE 20 A 500

DE 30
EXCEPTO EN
PACIENTES
DIABETICOS

PRESENCIA DE MICROORGANISMOS
OBSERVADOS CON TINTA CHINA Y EN
CULTIVOS (SABOUREAUD, CRECEN EN
AGAR SANGRE Y PRODUCEN ALCOHOL
POR FERMENTACION DE GLUCOSA)

NORMAL

V.D.R.L. POSITIVO

DE 100,
PREDOMINIO
GAMMA
GLOBULINA

ENCEFALITIS
SIFILTICA

GENERALMENTE
ELEVADA

DE 500, PREDOMINIO DE
MN

SARCOIDE

NORMAL A
ELEVADA

DE 0 A < DE 100,
PREDOMINAN MN

LIGERAMENTE
ELEVADA

NORMAL

SIN SIGNOS ESPECFICOS

NEOPLASIA

GENERALMENTE
ELEVADA

DE 0 A VARIOS
CENTENARES DE
CELULAS, PREDOMINIO
MN

ELEVADA

NORMAL A
DISMINUIDA

PUEDEN IDENTIFICARSE CLULAS

NEOPLSICAS

VIRAL

NORMAL O
LIGERAMENTE
ELEVADA

DE 500 A MAS DE MIL

NORMAL O
LIGERAMNTE
ELEVADA

NORMAL O
DISMINUIDA

PUEDE OBSERVARSE EL VIRUS EN

CULTIVOS