Cintica de un substrato:

Principales hechos experimentales: debemos sealar como un prembulo

la necesidad absoluta de que las enzimas sean puras y desprovistas de
actividad parasita.
Los tres hechos experimentales principales, en que se basan las leyes
generales de de la cintica enzimtica son:
a) El substrato S, forma con la enzima, E, un complejo intermediario
transitorio ES. este complejo resulta de una complementaria de la
estructura entre el sitio activo de la enzima y d la molcula del
substrato.
b) La velocidad de la reaccin en el tiempo t, es decir la velocidad de la

desaparicin del substrato, -

dS
dt

, o de aparicin del producto,

dP
dt

que

se representa por la pendiente de la tangente a la curva, P o S = f(t)

no es constante para las concentraciones dadas en enzimas o en
substrato (fig. 6-6), y disminuye en funcin del tiempo debido a la
desaparicin del substrato en el curso de desarrollo de la reaccin.
Siempre al principio de la reaccin, se puede considerar que la
tangente a la curva se confunde con aquella en que la velocidad
permanece constante.
Los estudios de cintica enzimtica corresponden siempre a esta
parte lineal de la curva; lo que implica el trabajar a velocidades
inciales. En estas condiciones, al principio de la reaccin, la
concentracin en

producto es muy dbil; puede despreciarse, as

como la reaccin inversa de transformacin del producto en

substrato. Entonces se puede escribir:

ES

k1
ES K 3 E P
k 2

c) Por otra parte, para una concentracin dada de substrato, el estudio

de las variaciones de la velocidad inicial de reaccin en funcin de la
concentracin de enzimas (fig. 6-7) muestra que esta variacin no es
lineal. La curva presenta un trazo hiperblico corre3spondiente al
hecho de que para una cierta concentracin de enzima, la totalidad

del substrato se encuentra bajo la forma de complejo enzimasubstrato; de lo que resulta que la velocidad inicial, funcin de la
concentracin de este complejo, permanece constante. Para los
estudios cinticos, es necesario situarse en las condiciones que
corresponden al principio de la curva, donde es lineal, es decir a
concentracin bajas de enzimas.
En otros trminos, al cantidad de enzima debe ser pequea en
comparacin a la concentracin del substrato, de tal manera, que la
formacin del complejo enzima substrato, ES, no modifica, o
modifica poco la concentracin del substrato.

Reactores con enzimas inmovilizadas:

Por ser este tipo de reactores nicos en cuanto a sus caractersticas y en

virtud de que la ingeniera de enzimas inmovilizadas an se encuentra en
sus inicios, es muy difcil establecer generalizaciones, pues en el mejor de
los casos la experiencia es limitada.
En cierta forma los problemas son parecidos a los de la catlisis
heterognea clsica, pero como existen pocos casos prcticos, se toman
stos a manera de ejemplos ilustrativos.

El tipo de reactor,

su

comportamiento cintico y la transferencia de masa son factores que

afectan y determinan el proceso enzimtico y su operacin.

Comportamiento de reactores de enzimas inmovilizadas:

Se puede anticipar el comportamiento de reactores ideales conociendo la

cintica de la reaccin y el modo de operacin del reactor. Ya han sido
considerados dos tipos de reactor; solo resta por analizar el batch. Los
otros reactores, no ideales, generalmente se comportan en regiones
delimitadas por los casos ideales.
Para un reactor batch, considerando una cintica de tipo MichaelisMenten, se puede obtener la ecuacin integrada entre el tiempo cero al
tiempo t:

ket S0 X
=
ln ( 1X )
K m Km

Donde t= tiempo para alcanzar la conversin X

Se pueden obtener ecuaciones similares para una cintica de tipo
Michaelis-Menten reversible, para casos de inhibicin competitiva por
producto e inhibicin por sustrato.

MTODO DE LOS INVERSOS O LINEWEAVER

BURKE
Emplearemos el mtodo de los inversos o Lineweaver Burke, para
un modelo cintico simple.

El diagrama de Lineweaver-Burk se emplea como herramienta grfica para

calcular los parmetros cinticos de una enzima.
Su utilidad consiste en que el recproco de la cintica de Michaelis-Menten es
fcilmente representable y que de l emanan mucha informacin de inters.

Cuyo recproco es:

Donde V es la velocidad de reaccin, Km es la constante de Michaelis-

Menten, Vmax es la velocidad mxima, y [S] es la concentracin de sustrato.

La representacin grfica de Lineweaver-Burk permite identificar el Km y Vmax;

el punto de corte con el eje de ordenadas es el equivalente a la inversa de
Vmax, y el de abscisas el valor de -1/Km. Fuente: Lineweaver, H; and Burk,
D. (1934). The Determination of Enzyme Dissociation Constants.
Journal of the American Chemical Society 56: 658666.

INCONVENIENTES DEL MTODO

Como requiere de dobles inversos, pequeos errores experimentales

pueden conducir a grandes errores.

A altas concentraciones los puntos se aglutinan al principio de la

grfica.