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Bacteriologa
Unidad Temtica I
PLAN 2010
Segundo ao
2013-2014
FACULTAD DE MEDICINA
Director
Secretario General
Coordinadora de Enseanza
Coordinadora de Evaluacin
Coordinador de Investigacin
Colaboradora de la Coordinacin
Colaborador de la Coordinacin
Visin
La Facultad de Medicina ejercer el liderazgo intelectual y tecnolgico en las ciencias de la salud en
el mbito nacional e internacional, mediante la educacin innovadora y la investigacin creativa
aplicadas al bienestar del ser humano.
Coordinacin de Enseanza,
Departamento de Microbiologa y
Parasitologa
Terica Prctica (40-60%)
Ubicacin
2 ao
Duracin
Anual
Nmero de horas
Crditos
Carcter
Obligatorio
Clave
1231
Requisitos acadmicos
Bacteriologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 5 de agosto
Viernes 11 de octubre
EXMENES ORDINARIOS
Primero:
Lunes 5 de mayo
De: 08:00 a 15:00 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Martes 20 de mayo
De: 08:00 a 12:30 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Virologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 14 de octubre
Viernes 22 de noviembre
Segundo:
Micologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 25 de noviembre
Viernes 24 de enero
Parasitologa
Inicio:
Trmino:
Lunes 27 de enero
Viernes 11 de abril
EXAMEN EXTRAORDINARIO
Mircoles 11 de junio
De: 08:00 a 12:30 h
Sede: Unidad Tlatelolco
EXMENES PARCIALES
Primero: jueves 31 de octubre
Bacteriologa
10:00 a 12:00 h
Sede: Facultad de Medicina
VACACIONES
Del 16 de diciembre de 2013 al 04 de enero de
2014.
Semana Santa del 14 al 18 de abril de 2014.
Del 07 al 25 de julio de 2014.
4. Sealar
el
tratamiento
antimicrobiano
especfico
para
las
enfermedades
bacterianas ms frecuentes, el mecanismo de
accin de los mismos.
Materiales
1. Microscopios
2. Proyectores
3. Epidiascopios
4. Transparencias
5. Preparaciones para la observacin al
microscopio
6. Audiovisuales
7. Pelculas
8. Micoteca.
9. Equipo y material de laboratorio
OBRAS DE CONSULTA
Fuentes de informacin electrnica
1. Recursos en Microbiologa y Parasitologa
del Depto. de Microbiologa y Parasitologa,
Fac. de Medicina, UNAM en:
www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/
Libros
1. Champoux JJ, Neidhart FC, Drew L, Plorde
JJ. Microbiologa Mdica 4a.ed. Mxico:
McGraw-Hill Interamericana Editores; 2004.
2. Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA, Brooks
GF, Butel JS, Ornston LN. Microbiologa
mdica. Mxico; Manual moderno; 2005.
3. Molina LJ, Manjarrez ZM, Tay ZJ.
Microbiologa:Bacteriologa y Virologa. 1 ed.
Mxico; Mndez Cervantes; 2010
4. Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS,
Pfaller MA. Microbiologa Mdica .5a ed.
Mxico; McGraw Hill Interamericana; 2006.
5. Ryan KJ, Ray Sherris CG. Microbiologa
Mdica. 4a ed. Mxico; McGraw-Hill
Interamericana; 2004.
6. Tay ZJ, Gutirrez QM, Lpez MR, Manjarrez
ZMA, Molina LJ. Microbiologa y Parasitologa
Mdica. Mxico; Mndez Cervantes; 2012.
CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD
TEMTICA (Bacteriologa)
EL CALENDARIO SE ENCUENTRA EN LA PAGINA WEB DEL DEPARTAMENTO COMO ARCHIVO
INDEPENDIENTE
PRESENTACIN
EL
PROPSITO
FUNDAMENTAL
DEL
Aunque
resulte
reiterativo,
es
importante
considerado
constantes
bacteriologa.
inmune.
de
travs
los
de
la
diversos
respuesta
agentes
bacterianos
terminal,
cambios
ya
que
que
se
tanto
dan
el
en
referencias
su
diagnstico
etiolgico
medidas
de
de
Internet
que
contienen
prevencin y tratamiento.
NDICE
GUIONES PRCTICOS
Pg.
Directorio .. 2
Misin y Visin de la Facultad.. 3
Calendario escolar 2013-2014 .. 5
Objetivos de rea . 6
Actividades del proceso enseanzaaprendizaje . 7
GUIONES TERICOS
1. Introduccin a la Relacin hospederoparsito . 11
2. Introduccin a la Bacteriologa ....... 12
3. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto respiratorio ...... 13
4. Bacterias causantes de Infecciones de
tejidos superficiales y profundos .. 17
5. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto gastrointestinal .... 19
10
de
las
enfermedades
11
2. INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Las bacterias son clulas procariotas y
pequeas que solo se pueden observar con la
ayuda del microscopio, presentan diferentes
formas, carecen de ncleo y de organelos
celulares. Tienen estructuras nicas como la pared
celular que contiene peptidoglicano con o sin
lipopolisacridos. Tpicamente, el cromosoma
bacteriano es solo uno y es una molcula circular
de ADN de doble cadena que contiene
aproximadamente 5 millones de pares de bases.
Las bacterias tienen ribosomas 70S que son
diferentes a los de las clulas eucariotas pero que
realizan la misma funcin. Aunque las bacterias se
dividen por fisin binaria, han desarrollado
mecanismos
para
intercambiar
informacin
gentica, lo que les ha permitido adaptarse mejor al
medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir
en medios hostiles como en los que la presin
osmtica es muy baja o en temperaturas extremas
y pueden usar diversas fuentes de energa para su
metabolismo. Es indudable que el conocimiento de
las bacterias, desde el punto de vista gentico,
metablico y estructural, constituye un elemento
fundamental para poder realizar una clasificacin
til en la prctica mdica, as como comprender la
participacin de la expresin de los factores de
patogenicidad en la relacin husped bacteria.
2.1 Antecedentes histricos de la Bacteriologa
2.2 Formas bacterianas
2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos
2.4
2.5
Gentica bacteriana
2.5.1 Replicacin del cromosoma
2.5.2 Informacin gentica: genes (estructura
y funcin: transcripcin, traduccin).
2.5.3 Mecanismos de intercambio de
informacin
gentica
entre
las
bacterias: conjugacin, transformacin,
transduccin.
2.5.4. Rearreglos
cromosmicos
por
transferencia horizontal de genes:
transposones, secuencias de insercin
y eventos de recombinacin.
2.5.5 Tipos de mutaciones, factores fsicos y
qumicos que intervienen en la
induccin de mutaciones.
2.6
Metabolismo bacteriano
2.6.1 Auttrofos,
Hetertrofos,
Quimiottrofos y Littrofos
2.6.2 Aerobios, Anaerobios, Facultativos y
Microaeroflicos
2.6.3 Metabolismo fermentativo y oxidativo
2.6.4 Cultivo de bacterias. Curva de
crecimiento bacteriano.
12
Streptococcus pyogenes
3.1.1 Caractersticas del microorganismo
3.1.1.1 Microscpicas
3.1.1.2 Antignicas
3.1.2 Factores de virulencia
3.1.2.1 Adherencia
al
epitelio
(protena M, ALT y F).
3.1.2.2 Evasin de la fagocitosis
(protena M y cpsula)
3.1.2.3 Dao al husped por enzimas
(hialuronidasa, DNAsas, C5a
peptidasas, estreptocinasas,
estreptolisisnas S y O) y
exotoxinas pirognicas A, B y
C.
3.1.3 Epidemiologa
3.1.3.1 Transmisin por contacto
directo
y
secreciones
farngeas.
3.1.3.2 Incidencia de la faringitis
en los grupos de edad 5-15
aos. Importancia de cuadros
clnicos de repeticin.
3.1.3.3 Serotipos
asociados
a
faringoamigdalitis,
fiebre
reumtica,
enfermedades
infecciosas de piel, sndrome
de choque txico.
3.1.4 Patognesis
3.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
3.1.4.2 Faringitis.
3.1.4.3 Enfermedades producidas por
toxinas
(Escarlatina
y
Sndrome de Choque txico
estreptoccico).
3.1.4.4 Otitis media, adenitis cervical
supurativa, angina de Ludwig,
sinusitis aguda.
3.1.4.5 Otras
enfermedades
asociadas a estreptococos
(infecciones
de
tejidos
blandos).
3.1.4.6 Complicaciones: secuelas
posestreptoccicas (fiebre
reumtica aguda y
glomerulonefritis aguda),
sndrome de choque
estreptocccico.
3.1.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones.
3.1.6 Diagnstico de laboratorio
3.1.6.1 Cultivo en agar sangre
3.1.6.2 Aglutinacin con anticuerpos
contra el antgeno del grupo A
3.1.6.3 Pruebas
serolgicas
(deteccin de anticuerpos
anti-estreptolisina
O,
anti
DNasas y anti hialuronidasa)
3.1.7 Diagnstico diferencial
3.1.7.1 Faringitis de origen viral y
bacteriano
3.1.7.2 Escarlatina
con
otras
enfermedades exantemticas
3.1.7.3 Fiebre reumtica aguda con
enfermedades autoinmunes
3.1.8 Estrategias de Tratamiento
3.1.8.1 Antimicrobiano
3.1.8.2 Tratamientos
de
fiebre
reumtica y glomerulonefritis.
3.1.9 Prevencin y Control
3.1.9.1 Identificacin de portadores y
erradicacin del estado de
portador
3.1.9.2 Quimioprofilaxis en personas
que han padecido fiebre
reumtica.
13
14
3.4.8 Tratamiento
3.4.8.1 Antimicrobianos
3.4.9 Prevencin y control
3.4.9.1 Vacuna
7-valente
para
lactantes y nios. Vacuna 23valente para personas con
riesgo
de
desarrollar
enfermedad neumoccica.
3.4.10 Otras enfermedades producidas por S.
pneumoniae
3.5
15
3.6.3 Epidemiologa
3.6.3.1 Morbilidad y mortalidad
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infeccin emergente (husped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisin
3.6.4 Patognesis
3.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
3.6.4.2 Formas clnicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infeccin
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
3.6.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la infeccin
3.6.6 Diagnstico diferencial
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M.
avium.
Destacar
la
importancia
de
estas
micobacterias no tuberculosas
en
pacientes
inmunodeprimidos por SIDA o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cncer pulmonar
3.6.7 Diagnstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopa
3.6.7.2 Cultivo
3.6.7.3 Mtodos moleculares
3.6.7.4 Valoracin del PPD
3.6.7.5 Radiografa de trax
3.6.7.6 Otras tcnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema
de
tratamiento
antifmico
(Norma
Oficial
Mexicana)
3.6.9 Control y prevencin
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevencin
16
Staphylococcus aureus
4.1.1 Caractersticas del microorganismo
4.1.2 Factores de virulencia
4.1.2.1 Protena A
4.1.2.2 Pptidoglicano
y
cido
teicoico
4.1.2.3 Cpsula
4.1.2.4 Protena
fijadora
de
fibronectina
4.1.2.5 Factor de agregacin
4.1.2.6 Toxinas: exfoliativa, toxina de
sndrome de choque txico,
enterotoxinas
4.1.2.7 Citotoxinas:
hemolisinas,
leucocidina
4.1.2.8 Enzimas: coagulasa, catalasa,
colagenasa,
hialuronidasa,
DNasas,
fibrinolisina,
penicilinasas, nucleasas
4.1.3 Epidemiologa
4.1.3.1 Importancia del estado de
portador
4.1.4 Patognesis
4.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
4.1.4.2 Factores predisponentes para
adquirir
la
infeccin
y
desarrollar la enfermedad:
Sndrome de piel escaldada,
foliculitis, fornculos, ntrax,
carbunco y acn.
4.1.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de estas infecciones
4.1.6 Diagnstico diferencial Streptococcus
pyogenes, Clostridium perfringens
17
Factores
de
riesgo
del
individuo ante la exposicin
4.4.4 Patognesis
4.4.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
4.4.4.2 Invasin de nervios sensitivos
perifricos produciendo
anestesia
4.4.4.2 Respuesta inmune hacia el
bacilo
4.4.4.3 Factores de resistencia del
husped ante la infeccin:
especficos (inmunidad) e
inespecficos (HLA-DR3).
4.4.4.4 Formas y manifestaciones
clnicas (Lepra lepromatosa,
tuberculoide e indeterminada)
4.4.4.5 Relacin de cada una de las
formas de lepra con la
respuesta inmune celular.
4.4.4.6 Afeccin ocular en la lepra.
4.4.4.7 Discapacidades fsicas
4.4.5 Participacin de la respuesta inmune
en la evolucin de la enfermedad
4.4.6 Diagnstico diferencial de las formas de
lepra
4.4.6.1 Clasificacin bacilar de la lepra
4.4.7 Diagnstico de laboratorio y gabinete
4.4.7.1 Laboratorio: bsqueda de
bacilos en muestras obtenidas
de raspado de lesiones (en
particular mucosa nasal y
orejas).
4.4.7.2 Estudio histopatolgico de
biopsias cutneas.
4.4.7.3 Pruebas
serolgicas
con
PGL-1.
4.4.7.4 Pruebas cutneas: Lepromina
4.4.7.5 Valor diagnstico de la
reaccin
de
Mitsuda
y
reaccin de Fernndez
4.4.8 Estrategias del Tratamiento.
4.4.8.1 Norma Mexicana para el
tratamiento de la lepra
4.4.9 Prevencin y control
4.4.9.1 Profilaxis en contactos con
enfermos de lepra.
4.4.10 Otras micobacterias que producen
infecciones en piel y tejido subcutneo:
4.4.10.1 M. marinum
4.4.10.2 M. ulcerans
4.4.10.3 M. tuberculosis
a
y
4.5
18
19
5.2.3
5.2.4
5.2.5
5.2.6
5.2.7
5.2.2.3 Escherichia
coli
enteropatgena
- Plsmido EAF que codifica
para una adhesina Bfp (pili) al
parecer media la interaccin
bacteria-bacteria.
- Intimina codificada por el gen
eae que favorece la unin
ntima entre la bacteria y la
clula. Produce el fenmeno
llamado unin y esfacelacin
de las microvellosidades.
-isla de patogenicidad LEE.
5.2.2.4 Escherichia coli enteroinvasiva
- Caractersticas genticas que
le confieren el fenotipo de
invasin.
- Mecanismo de invasin las
clulas del coln.
- Distribucin lateralmente a
clulas adyacentes.
5.2.2.5 Escherichia coli
enterohemorrgica
Serotipo
representativo
importante
- Intimina
- Toxina Shiga-like (SLT)
Epidemiologa
5.2.3.1 Va de transmisin
5.2.3.2 Poblacin susceptible
5.2.3.3 Distribucin mundial
5.2.3.4 Grupos de edad afectados
Participacin de la respuesta inmune
en el control de estas infecciones
Patognesis
5.2.5.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
5.2.5.2 Diarrea del viajero y diarrea
infantil
5.2.5.3 Diarrea acuosa persistente
Complicaciones
5.2.5.1 Deshidratacin
5.2.5.2 Desnutricin
5.2.5.3 Muerte
Diagnstico de laboratorio
5.2.7.1 Aislamiento
del
microorganismo a partir de
heces en medios de cultivos
selectivos.
5.2.7.2 Pruebas
bioqumicas
y
serolgicas
Campylobacter spp.
Shigella spp.
Salmonella enteritidis.
Clostridium difficile
5.4.1 Caractersticas de los microorganismos
5.4.1.1 Morfologa
colonial
y
microscpica
5.4.1.2 Metabolismo y medios de
cultivo diferenciales para su
crecimiento
5.4.1.3 Caractersticas
bioqumicas
diferenciales
5.4.2 Factores de virulencia
5.4.2.1 Campylobacter jejuni
- Enterotoxina
- Toxinas citopticas
- Adhesinas
- Movilidad.
5.4.2.2 Shigella dysenteriae
- Toxina Shiga
- Protenas que participan en la
adhesin,
invasin
y
proliferacin
5.4.2.3 Salmonella enteritidis
- Protenas A-H
- Enzimas: catalasa,
superxido dismutasa
- Antigeno Vi,
- LPS
20
5.4.2.4
5.4.3
5.4.4
5.4.5
5.4.6
5.4.7
Clostridium difficile
- Citotoxina
- Enterotoxina
Epidemiologa
5.4.3.1 Enfermedades frecuentes en
pases no industrializados
5.4.3.2 Vas de transmisin
5.4.3.3 Reservorios animales
Patognesis
5.4.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
5.4.4.2 Gastroenteritis
5.4.4.3 Disentera
5.4.4.4 Colitis ulcerosa
5.4.4.5 Complicaciones: Sndrome
urmico hemoltico (SUH),
colitis
psuedomembranosa,
Sndrome de Guillain-Barr,
artritis reactiva.
Participacin de la respuesta
inmune en el control de estas
infecciones.
Diagnstico de laboratorio
5.4.6.1 Coprocultivo
5.4.6.2 Pruebas bioqumicas
5.4.6.3 Pruebas serolgicas
Estrategia de Tratamiento
5.4.7.1 Antimicrobiano de eleccin
5.4.7.2 Prevencin y Control
OTRAS
BACTERIAS
PRODUCTORAS
DE
DIARREA POR INTOXICACIN ALIMENTICIA
5.5
21
6.1.1.4
22
6.2
Brucella
6.2.1 Caractersticas generales
6.2.1.1 Morfologa
6.2.1.2 Antgenos A y M.
6.2.1.3 Diferentes
especies
de
Brucella y especificidad de
husped.
6.2.2 Factores de virulencia.
6.2.3 Epidemiologa de la brucelosis
6.2.3.1 Mecanismos de transmisin.
6.2.3.2 Reservorios animales
6.2.3.3 Distribucin mundial y estado
actual en Mxico.
6.2.4 Patognesis
6.2.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones
clnicas agudas, subagudas y
crnicas.
6.2.4.3 Complicaciones: artritis,
osteomielitis,
meningitis,
cistitis,
nefritis,
orquiepididimitis, endocarditis
e hiperesplenismo.
6.2.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la infeccin
6.2.6 Diagnstico diferencial
6.2.6.1 Fiebre Tifoidea
6.2.6.2 Tifo
6.2.7 Diagnstico de laboratorio
6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula
sea o tejidos infectados.
6.2.7.2 Serologa:
Prueba
de
aglutinacin con rosa de
Bengala,
Prueba
de
Huddleson, ELISA (deteccin
de anticuerpos IgM e IgG).
6.2.8 Estrategias de Tratamiento
6.2.9 Prevencin y control
6.3.3.5
6.3.3.6
6.3.4
6.3.5
6.3.6
6.3.7
6.3.8
6.3.9
6.4
Leptospira interrogans
6.4.1 Caractersticas del microorganismo
6.4.1.1 Estructura
6.4.1.2 Antgenos
6.4.1.3 Serovares
de
Leptospira
interrogans.
6.4.2 Factores de virulencia
6.4.3 Epidemiologa
6.4.4 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la enfermedad.
6.4.5 Patognesis
6.4.5.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
6.4.5.2 Leptospirosis anictrica e
icterica.
6.4.6 Diagnstico diferencial.
6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y
dengue
6.4.7 Diagnstico de laboratorio
6.4.7.1 Microscopa.
Tincin
con
Giemsa o Wright
6.4.7.2 Cultivo
6.4.7.3 Serologa.
6.4.7.4 Prueba de ELISA (deteccin
de antgeno) y Western blot
(prueba confirmatoria).
6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro
6.4.8 Estrategias de Tratamiento
6.4.9 Prevencin y control
Reservorio y vector
Poblacin susceptible
23
Borrelia recurrentis
6.5.1 Caractersticas del microorganismo
6.5.1.1 Estructura
6.5.1.2 Cultivo y desarrollo
6.5.2 Factores de virulencia
6.5.2.1 Variacin antignica
6.5.2.2 Liberacin de endotoxina.
6.5.3 Epidemiologa
6.5.3.1 El humano como nico
husped.
6.5.3.2 Vectores: piojo (Pediculus
humanus)
y
garrapata
(Ornithodorus).
6.5.4 Patognesis
6.5.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
6.5.4.2 Fiebre recurrente endmica y
epidmica.
6.5.4.2 Complicaciones: Insuficiencia
cardiaca, necrosis heptica,
hemorragia,
alteraciones
cerebrales.
6.5.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de la Infeccin.
6.5.6 Diagnstico diferencial
Tifo
Fiebre tifoidea
Salmonelosis
Paludismo
Dengue
Leptospirosis
Fiebres hemorrgicas virales
Tuberculosis
6.5.7 Diagnstico de laboratorio.
6.5.7.1 Frotis y visualizacin en
campo oscuro o tincin de
Giemsa o Wright de sangre
en episodios febriles.
6.5.7.2 Cultivo.
6.5.7.3 Pruebas serolgicas.
6.5.7.4 Pruebas moleculares.
6.5.8 Estrategias del tratamiento.
6.5.9 Prevencin y control
6.5.9.1 Control de vectores.
6.5.10 Otras especies importantes; Borrelia
burgdorferi
24
7.4
Epidemiologa.
7.4.1 Transmisin; ascendente y hematgena
7.4.2 Factores predisponentes
7.4.3 Pacientes hospitalizados
7.4.4 Instalacin de sondas de Foley
7.4.5 Inmunosupresin
7.4.6 Diabetes
7.4.7 Malformaciones congnitas
7.4.8 Embarazo
7.4.9 Patognesis
7.4.9.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
7.4.9.2 Infeccin de vas urinarias bajas:
Cistitis, uretritis.
7.4.9.3 Infeccin de vas urinarias altas:
Pielonefritis, pielitis, salpingitis.
7.5
7.6
Diagnstico de laboratorio
7.6.1 Toma adecuada de muestra clnica:
Chorro medio, aspiracin suprapbica,
empleo de sonda, uso de bolsa
recolectora.
7.6.2
Urocultivo
7.6.3 Interpretacin del urocultivo: Criterios de
Kass.
25
Diagnstico de gabinete
7.7.1 Urografa excretora
7.8
Estrategias de tratamiento
7.8.1 Criterios
7.8.2 Antimicrobianos de eleccin
7.9
Prevencin y control
26
Neisseria gonorrhoeae
8.1.1 Caractersticas del microorganismo
8.1.1.1 Morfologa,
agrupacin
y
tincin de Gram.
8.1.1.2 Estructura y variacin
antignica
8.1.1.3 Condiciones de crecimiento y
Metabolismo.
8.1.2 Factores de virulencia
8.1.2.1 Estructuras involucradas en la
adherencia e invasividad: LOS
y protenas de superficie
(pilinas, Por, Opa, Rmp,
ionforos,
proteasas y
lactamasas).
8.1.3
8.1.4
8.1.5
8.1.6
8.1.7
8.1.8
8.1.9
Epidemiologa
8.1.3.1 Gonorrea como problema de salud
pblica.
8.1.3.2 El
hombre como hospedero
natural.
8.1.3.3 Factores de riesgo
Patognesis
8.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de signos y
sntomas.
8.1.4.2 Infecciones localizadas
En
la
mujer:
Endometritis,
salpingitis, cervicitis, vulvovaginitis,
enfermedad plvica
inflamatoria,
gonorrea ano-rectal.
En el hombre: uretritis, epididimitis
y gonorrea ano-rectal.
Conjuntivitis purulenta en el recin
nacido.
8.1.4.3 Infecciones sistmicas:
Meningitis, endocarditis, artritis
sptica, dermatitis
8.1.4.4 Otras enfermedades:
Infeccin
de
vas
urinarias,
faringoamigdalitis.
8.1.4.5 Complicaciones: Esterilidad y
embarazo
ectpico,
artritis,
perihepatitis, dermatitis en mujeres;
estrechamiento
uretral,
rectal, abscesos y fstulas perirectales en hombres.
Participacin de la respuesta inmune en el
control de las infecciones por gonococos.
Diagnstico de laboratorio
8.1.6.1 Tincin y microscopa
8.1.6.2 Cultivo e identificacin
bioqumica
8.1.6.3 Deteccin antignica
8.1.6.4 Pruebas moleculares
Diagnstico diferencial
8.1.7.1 Uretritis no gonoccica
Estrategias de Tratamiento
8.1.7.1 Antimicrobiano de eleccin
Prevencin y Control
8.1.9.1 Uso de condn en personas con
vida sexual activa, sexo seguro.
8.1.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos.
27
8.3
8.3.4.2
8.3.5
8.3.6
8.3.7
8.3.8
8.3.9
8.4
Infeccin asintomtica y
serotipos asociados
8.3.4.3 Cervicitis, salpingitis, uretritis y
enfermedad
inflamatoria
plvica en mujeres.
8.3.4.4 Uretritis no gonoccica y
ocasionalmente, epididimitis
en hombres Linfogranuloma
venreo.
8.3.4.5 Otras enfermedades
asociadas
a
clamidias:
Tracoma,
conjuntivitis
de
inclusin y
neumona en neonato.
8.3.4.6 Complicaciones: esterilidad,
embarazo
ectpico
y
enfermedad
inflamatoria
plvica
en
mujeres;
estrechamiento uretral, rectal,
abscesos
y
fstulas
perirectales y Sndrome de
Reiter en hombres.
Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones
Diagnstico de laboratorio
8.3.6.1 Citologa
8.3.6.2 Cultivo en lneas celulares,
HeLa, McCoy, HEp-2 y otras
8.3.6.3 Deteccin antignica
8.3.6.4 Pruebas moleculares
8.3.6.5 Pruebas serolgicas
Diagnstico diferencial
8.3.7.1 Uretritis gonoccica
8.3.7.2 Uretritis no gonoccica
8.3.7.3 Ulceras genitales por T
pallidum,
H
ducreyi,
Calymmatobacterium
y
por
granulomatis
virus de herpes simple 1 y 2.
Estrategias de Tratamiento
Prevencin y Control
8.3.9.1 Terapia preventiva con
Antimicrobianos.
8.3.9.2 Control de personas infectadas
Treponema pallidum
8.4.1 Caractersticas del microorganismo
8.4.1.1 Morfologa, envoltura celular,
endoflagelo,
protenas
externas.
8.4.2 Factores de virulencia
8.4.2.1 Movilidad y quimiotaxis
8.4.2.2 Capacidad de adherencia
mediada por protenas de
membrana externa.
8.4.2.3 Invasin y sobrevivencia
Intracelular.
28
8.4.2.4
8.4.3
8.4.4
8.4.5
8.4.6
8.4.7
8.4.8
8.4.9
Estimulacin de la respuesta
inflamatoria
Epidemiologa
8.4.3.1 La sfilis como problema de
salud pblica
8.4.3.2 Frecuencia en la ltima
dcada
8.4.3.3 El hombre como nico
hospedero natural
8.4.3.4 Va de transmisin
8.4.3.5 Factores de riesgo
Patognesis
8.4.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.4.4.2 Cuadro clnico:
Sfilis primaria
Sfilis secundaria
Sfilis terciaria o tarda
Sfilis congnita.
8.4.4.3 Complicaciones: neurosfilis,
glomerulonefritis y sndrome
nefrtico.
Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones
Diagnstico de laboratorio
8.4.6.1 Microscopa de campo
oscuro
8.4.6.2 Pruebas serolgicas
inespecficas: VDRL
(Venereal Disease Research
Laboratory)
RPR (Prueba rpida de la
reagina en plasma).
8.4.6.3 Pruebas
serolgicas
especficas:
FAT-ABS
(Prueba
de
absorcin de anticuerpos
treponmicos fluorescentes)
MHA-TP:
(Prueba
de
microaglutinacin para T.
pallidum)
TPI:
(Prueba
de
inmovilizacin
de
T.
pallidum).
8.4.6.4 Pruebas moleculares
Diagnstico diferencial
8.4.7.1 Chancroide
8.4.7.2 Linfogranuloma venreo
8.4.7.3 Herpes simple 1 y 2
Estrategias de Tratamiento
Prevencin y Control
8.4.9.1 Control de personas con vida
sexual activa
8.4.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos
8.5
Haemophilus ducreyi
8.5.1 Caractersticas del microorganismo
8.5.1.1 Morfologa, agrupacin y
tincin de Gram
8.5.1.2 Condiciones de crecimiento
y metabolismo
8.5.2 Factores de virulencia
8.5.2.1 Protenas de superficie
involucradas en la adherencia
a clulas epiteliales y matriz
extracelular.
8.5.2.2 Enzimas y toxinas que
intervienen en el dao celular
8.5.3 Epidemiologa
8.5.3.1 Prevalencia y distribucin
8.5.3.2 Poblacin en riesgo
8.5.3.3 Factores predisponentes para
adquirir la infeccin
8.5.4 Patognesis
8.5.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.5.4.2 Chancro blando
8.5.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones
8.5.6 Diagnstico de laboratorio
8.5.6.1 Cultivo e identificacin
Bioqumica
8.5.6.2 Pruebas moleculares
8.5.6.3 Pruebas serolgicas
8.5.7 Diagnstico diferencial
8.5.7.1 Sfilis primaria y secundaria
8.5.8.2 Linfogranuloma venreo
8.5.8.3 lceras de Herpes simple
1y2
8.5.8 Estrategias de Tratamiento
8.5.9 Prevencin y Control
8.5.9.1 Uso de condn en personas
con vida sexual activa, sexo
seguro
8.5.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos
8.6
Gardnerella vaginalis
8.6.1 Caractersticas del microorganismo
8.6.1.1 Morfologa, agrupacin y
tincin
de Gram
8.6.1.2 Condiciones de crecimiento y
metabolismo
8.6.2 Factores de virulencia
8.6.2.1 Sialidasa
8.6.2.2 Biopelcula
29
8.6.3 Epidemiologa
8.6.3.1 Prevalencia y distribucin.
8.6.3.2 Poblacin en riesgo
8.6.3.3 Factores predisponentes para
adquirir la infeccin
8.6.4 Patognesis
8.6.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
8.6.4.2 Vaginosis bacteriana
8.6.4.3 Infeccin de vas urinarias
8.6.5 Participacin de la respuesta inmune en
el control de las infecciones
8.6.6 Diagnstico de laboratorio
8.6.6.1 Cultivo e identificacin bioqumica
8.6.6.2 Citologa; clulas clave
8.6.6.3 Criterios de Amsel
8.6.7 Diagnstico diferencial
8.6.7.1 Candidiasis
8.6.7.2 Tricomoniasis
8.6.7.3 Vaginitis atrfica
8.6.8 Estrategias de tratamiento
8.6.9 Prevencin y control
30
9.1.3 Epidemiologa
9.1.3.1 Incidencia
9.1.3.2 Morbilidad y mortalidad
9.1.3.3 Poblacin en riesgo
9.1.3.4 Portador asintomtico
9.1.3.5 Mecanismo de transmisin
9.1.4 Patognesis
9.1.4.1 Iniciacin del proceso
Infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
9.1.4.2 Meningoencefalitis
9.1.4.3 Otras infecciones asociadas al
microorganismo: sepsis y
epiglotitis.
9.1.4.4 Haemophilus influenzae no
capsulados; sinusitis, otitis
media y neumona.
9.1.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves
como hidrocefalia, sordera y
retraso mental y prpura
trombocitopnica.
9.1.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
9.1.6 Diagnstico diferencial
9.1.6.1 Neisseria meningitidis
9.1.6.2 Streptococcus pneumoniae
9.1.7 Diagnstico de laboratorio
9.1.7.1 Frote y tincin de Gram
9.1.7.2 Cultivo de LCR
9.1.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.1.7.4 Pruebas serolgicas
9.1.7.5 Pruebas moleculares
9.1.8 Estrategias de tratamiento
9.1.9 Prevencin y control
9.1.9.1 Vacuna
9.1.10 Otras enfermedades causadas por
H. influenzae.
9.1.10.1 Conjuntivitis, epiglotitis,
celulitis, otitis media,
sinusitis, neumona,
bronquitis y artritis.
31
9.2
Neisseria meningitidis
9.2.1 Caractersticas del microorganismo
9.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram y
Agrupacin
9.2.1.2 Caractersticas estructurales
9.2.1.3 Cultivo: factores de
crecimiento y condiciones de
incubacin
9.2.2. Factores de virulencia
9.2.2.1 Adhesinas fimbriales y no
fimbriales
9.2.2.2 Componente capsular
9.2.2.3 Endotoxina (LOS),
superantgenos
9.2.3 Epidemiologa
9.2.3.1 Incidencia
9.2.3.2 Morbilidad y mortalidad
9.2.3.3 Poblacin en riesgo
9.2.3.4 Portador asintomtico
9.2.3.5 Mecanismo de transmisin
9.2.4 Patognesis
9.2.4.1 Iniciacin del proceso
Infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
9.2.4.2 Meningitis. Mencionar las
diferencias sobresalientes que
orienten al diagnstico clnico
por este microorganismo.
9.2.4.3 Meningococcemia
9.2.4.4 Otras infecciones asociadas al
microorganismo:
artritis,
uretritis y neumona.
9.2.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves:
hidrocefalia, sordera, retraso
mental y prpura
trobocitopnica
9.2.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
9.2.6 Diagnstico diferencial
9.2.6.1 Haemophilus influenzae
9.2.6.2 Streptococcus pneumoniae
9.2.7 Diagnstico de laboratorio
9.2.7.1 Frote y tincin de Gram
9.2.7.2 Cultivo de LCR
9.2.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.2.7.4 Deteccin de antgenos
9.2.7.5 Pruebas moleculares
9.2.8
9.2.9
9.3
Estrategias de tratamiento
Prevencin y control
32
33
10.2
Clostridium botulinum
10.2.1 Caractersticas del microorganismo
10.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram
10.2.1.2 Esporas
10.2.1.3 Cultivo: factores de
crecimiento y condiciones
de incubacin.
10.2.2 Factores de virulencia
10.2.2.1 Neurotoxina (tipos A-G)
mecanismo de accin y
propiedades fenotpicas.
10.2.3 Epidemiologa
10.2.3.1 Poblacin en riesgo
10.2.3.2 Mecanismo de infeccin o
transmisin
10.2.3.3 Diseminacin
10.2.3.4 Morbilidad y mortalidad
10.2.4 Patognesis
10.2.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
10.2.4.2 Botulismo clsico
10.2.4.3 Botulismo del lactante
10.2.4.4 Botulismo de heridas
10.2.4.5 Botulismo por inhalacin
10.2.4.6 Complicaciones: parlisis
Respiratoria
10.2.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
10.2.6 Diagnstico clnico
10.2.6.1 Criterios clnicos que
permiten diagnosticar
botulismo.
10.2.6.2 Diagnstico diferencial:
Myasthenia gravis,
Sndrome de Guillain Barr
y poliomielitis.
10.2.7 Diagnstico de laboratorio
10.2.7.1 Cultivo de heces y
alimento contaminado
10.2.7.2 Deteccin de la toxina
en suero
10.2.7.3 Demostracin de
actividad de la toxina
(bioensayo en ratn)
10.2.8 Estrategias de tratamiento
10.2.7.1 Tratamiento de soporte
10.2.7.2 Lavado gstrico
10.2.7.3 Antimicrobianos
10.2.7.4 Antitoxina botulnica
trivalente
10.2.9
Prevencin y control
10.2.9.1 Vacunacin con toroide
Tetnico
10.2.9.2 Medidas preventivas.
10.2.10 Otras patologas causadas
por C. botulimun
10.2.10.1 Diarreas
34
11.2
11.3
11.4
35
GUIONES PRCTICOS
36
37
PRCTICA No. 1
BIOSEGURIDAD
Objetivos generales
Establecer las medidas de bioseguridad que se
emplean en los laboratorios de Microbiologa y
Parasitologa.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
38
6.
Manipulacin de desperdicios
Agujas y material de vidrio
1. Desechar todo material de vidrio que est
quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes
adecuados.
2. Recoger los vidrios rotos con escobilln y pala;
no hacerlo con la mano.
3. Los artculos de vidrio no deben ser arrojados a
la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de
desperdicios en el que se arrojan artculos de
papel.
4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse
en recipientes para agujas usadas para ser
eliminados de manera adecuada.
5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o
intercambiar las agujas de las jeringas. La
prctica de cambiar las agujas antes de
descartar la sangre extrada de la vena dentro
de la botella de cultivo ha sido abandonada por
la mayora de los hospitales.
Manejo de muestras y derrames
1. Las muestras se deben de recolectar en
recipientes slidos, con cierres adecuados para
evitar derrames y prdidas. Todas las
muestras
deben
ser
consideradas
potencialmente peligrosas.
2. Las cortaduras en las manos debern ser
adecuadamente protegidas con tela adhesiva.
Si la actividad laboral implica el manejo de
sangre, suero, plasma u otras muestras, se
debe de usar guantes desechables.
3. Si una muestra presenta evidencia de rotura,
derrame o suciedad dentro del recipiente,
ponerse guantes.
4. Las muestras contaminadas con sangre deben
ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes.
Notificar este hecho como peligroso para la
salud.
5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y
jabn varias veces al da, en particular despus
de manipular las muestras y antes de retirarse.
1.
2.
3.
4.
5.
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1.
El profesor definir el concepto de
bioseguridad.
2.
Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn
las normas a seguir en el laboratorio.
3.
El profesor dirigir la discusin sobre:
a) Manipulacin de agujas y material de
vidrio.
b) Manejo de muestras y derrames
c) Manipulacin
de
material
infectocontagioso.
NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
estn dirigidas al manejo adecuado de
productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
Txico, Inflamables, Biolgicos-infecciosos
(CRETIB) y Radioactivos con el fin de
evitar riesgos.
39
40
PRCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO
Objetivos generales
Mencionar
las
partes
fundamentales
microscopio y sus funciones.
del
41
Resumen de la prctica
El profesor, junto con los alumnos, elaborar las
conclusiones del tema.
Desarrollo de la prctica
Material
1. Microscopios compuestos.
2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos,
hongos y artrpodos de importancia
mdica.
3. Preparaciones en fresco (cultivo de paja).
4. Portaobjetos.
5. Cubreobjetos.
6. Aceite de inmersin.
7. Papel seda.
8. Diapositivas.
Mtodo
1. El profesor explicar la diferencia entre una
preparacin en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Cul es la utilidad del microscopio en el
estudio de la Microbiologa y Parasitologa?
2. Cul es el poder de resolucin del
microscopio ptico al emplear el objetivo de
inmersin?
3. Mencione tres tipos de microscopios y su
utilidad.
Preguntas
orientadas
para
evaluar
el
conocimiento adquirido
1. Qu objetivo se utiliza para observar una
preparacin en fresco?
2. Mencione tres medidas para mantener
limpio el microscopio compuesto.
3. Con qu se deben limpiar los objetivos de
inmersin despus de la observacin?
4. Qu cuidados se deben tener con el
microscopio al terminar la observacin?
42
PRCTICA No. 3
INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia en el estudio
de la Bacteriologa clnica.
Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio
de bacteriologa para la realizacin de tinciones y
cultivos bacteriolgicos, empleados en la
identificacin de una bacteria.
Explicar la importancia que tiene el laboratorio de
bacteriologa clnica, en la determinacin del
diagnstico etiolgico correcto para establecer la
terapia antimicrobiana especfica.
Antecedentes
14
El cuerpo humano se encuentra formado por 10
clulas. De las que solo, aproximadamente, el
10% son humanas. El resto son microorganismos
asociados. Desde el momento de su nacimiento,
el individuo establece una relacin con
microorganismos del ambiente que formarn la
microbiota. Dependiendo del sitio del cuerpo ser
el tipo de microorganismo que lo colonice. La
microbiota es benfica para el humano, salvo en
el momento en que se presente algn factor de
oportunismo que favorezca el crecimiento inusual
de los microorganismos y produzca dao. Por lo
tanto, en la mayora de los casos, esta interaccin
es benfica.
El conocimiento de la microbiota permite
diferenciar los microorganismos patgenos de los
no patgenos. Por otro lado, debido a que se han
incrementado los factores de oportunismo que
favorecen
las
patologas
por
estos
microorganismos, las infecciones que producen
representan, en la actualidad, un problema de
diagnstico.
En el estudio bacteriolgico de un caso clnico, se
sigue la secuencia siguiente:
A).
B).
43
D).
Identificacin bacteriolgica.
Procedimiento que se efectuar con base
en la fisiologa bacteriana para reconocer
los productos del metabolismo de sta;
produccin de cido y gas a partir del
empleo de carbohidratos; glucosa, lactosa
o sacarosa. Presencia de productos
liberados por la presencia de enzimas que
desdoblan aminocidos (triptfano, cistina,
metionina, ornitina, arginina y lisina) como
sera la produccin de indol, H2S, etc. de
protenas (gelatina, caseina). As como
hemolisinas que lisan glbulos rojos
(produciendo hemlisis , , y ) o
ausencia de hemlisis.
Tcnicas de Tincin
La falta de contraste entre la bacteria y el
medio que la rodea hace necesario de la
coloracin de stas, con el fin de aumentar
el contraste y poder observarlas con el
microscopio ptico, lo que permite
distinguir los diferentes tipos celulares.
La mayora de los colorantes son
compuestos
orgnicos,
cargados
positivamente (cationes), como el azul de
metileno, cristal violeta y safranina, que se
combinan con constituyentes celulares
cargados negativamente (aniones).
Las tinciones pueden ser simples cuando
se emplea un solo colorante y compuestas
cuando se utilizan varios colorantes
combinados, ejemplo de stas son la
tincin de Gram y la de Ziehl-Neelsen
Desarrollo de la prctica.
Sesin I
1. El profesor apoyado con material
didctico explicar de manera terica y
prctica el desarrollo de la prctica.
2. Los alumnos, en grupos pequeos,
revisarn el material que se emplear
durante el desarrollo de la prctica.
3. Los alumnos bajo, vigilancia del
profesor, realizarn la prctica.
Material
1. Medio de transporte.
2. Placas de Eosina azul de metileno
(EMB), Salmonella-Shigella agar (SS),
agar sangre y agar chocolate.
3. Tubos de agar hierro triple azcar (TSI),
agar hierro lisina (LIA), agar movilidad,
indol, lisina (MIO), tubos de citrato de
Simmons.
4. Tubos con caldo nutritivo.
5. Asas bacteriolgicas.
6. Placas de agar nutritivo.
7. Hisopo estril.
8. Tubo con agua destilada estril.
9. Marcador (el alumno deber traerlo).
10. Mechero.
Mtodo
Manos sin lavar.
1. Humedecer el hisopo estril con agua.
2. Con el hisopo humedecido, tomar la
muestra de los pliegues interdigitales,
dorso y palma.
3. Sembrar con el hisopo en un extremo
de la placa con agar nutritivo.
4. Realizar estriado para obtener colonias
aisladas.
5. Rotular la caja de petri.
6. Incubar a 35-37C durante 24-48 horas.
Manos lavadas.
1. Realizar el aseo de manos con agua y
jabn de manera tradicional.
2. Frotar las manos enjabonadas durante
30 segundos.
3. Humedecer el hisopo estril con agua.
4. Tomar la muestra de los espacios
interdigitales, del dorso y palmas.
5. Sembrar en las placas de agar nutritivo
como en el caso anterior.
6. Rotular la caja de petri.
7. Incubar a 35-37C durante 24-48 horas.
Sesin II
Material
1. Cajas de petri sembradas por los
alumnos
2. Equipo para tincin de Gram
3. Portaobjeto
4. Aceite de inmersin
5. Microscopio
6. Asa bacteriolgica
7. Placas y tubos sembrados
(demostrativos)
44
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn, macroscopicamente, los cultivos
(morfologa colonial)
2.
Realizarn tincin de Gram a partir de
colonias aisladas desarrolladas.
3. Realizarn observacin microscpica.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Mencionar bacterias que forman parte de la
microbiota.
2. Indicar los recursos de laboratorio que se
utilizan para el diagnstico de infecciones
bacterianas.
3. Qu importancia tiene el hacer el diagnstico
etiolgico
en
casos
de
infecciones
bacterianas?
Preguntas
orientadas
conocimiento adquirido.
para
evaluar
el
45
PRACTICA No.4
INFECCIONES DE VAS RESPIRATORIAS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones bacterianas de vas respiratorias.
Identificar los principales agentes etiolgicos que
producen infecciones de vas respiratorias.
Revisar los recursos de laboratorio para el
diagnstico de las infecciones bacterianas de vas
respiratorias.
Antecedentes
Entre los microorganismos involucrados en
procesos infecciosos de vas respiratorias, se
encuentra; Streptococcus pyogenes tambin
llamado Estreptococo beta hemoltico del grupo A
de Lancefield. As como estreptococos del grupo C,
D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium
haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria
gonorrhoeae,
Corynebacterium
diphtheriae,
Haemophilus influenzae tipo B, Bordetella pertussis,
Borrelia
vincenti,
Fusobacterium
sp
y
Mycobacterium
tuberculosis.
Es
importante
mencionar
que
en
caso
de
pacientes
inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella
pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa.
Entre los virus tenemos una alta participacin de
Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes
simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B,
Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus.
Las muestras que se emplean en infecciones de
vas respiratorias incluyen, exudado farngeo,
exudado nasal, exudado nasofarngeo, lavado
nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras.
En presencia de patologa pulmonar, el estudio
bacteriolgico de una muestra de esputo
(expectoracin) debe constituir el examen inicial. La
calidad de la muestra es ms importante que el
volumen obtenido. Para un diagnstico confiable, el
material debe ser representativo de vas areas
inferiores,
debindose
caracterizar,
macroscpicamente por la presencia de material
mucoide, aspecto herrumbroso propio del inicio de
neumona y microscpicamente por la presencia de
macrfagos, eritrocitos y/o clulas glandulares.
Desarrollo de la prctica
Sesin I:
El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisar un caso clnico de infecciones de
vas respiratorias e identificarn:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnsticos clnicos.
c) Productos biolgicos empleados para el
diagnstico de laboratorio.
46
Prctica
1. Por razones de seguridad nicamente se
realizar la tincin de Ziehl-Neelsen de un frote
con la bacteria previamente fijada al
portaobjeto.
2. Una vez teida la laminilla, observar al
microscopio.
Interpretacin de resultados
Medio de Lowenstein-Jensen: Observar la
morfologa colonial, determinar la presencia o no de
pigmentacin.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Mencione tres bacterias que se asocian a
enfermedades de vas respiratorias.
2. Indique los recursos de laboratorio que se
utilizan para el diagnstico de infecciones
bacterianas de las vas respiratorias.
3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico
etiolgico en las infecciones bacterianas de
vas respiratorias?
Preguntas orientadas para evaluar el
conocimiento adquirido
1. Qu utilidad tiene el tipo de pigmento
observado en los tubos con medio de
Lowenstein-Jensen?
2. Qu bacteria se aisl en el cuadro clnico
estudiado?
3. Qu aplicacin tienen los anlisis serolgicos
en el diagnstico de infecciones bacterianas de
las vas respiratorias?
Resumen de la prctica
El profesor junto con los alumnos correlacionar el
caso clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico.
47
PRCTICA No.5
INFECCIONES DE TEJIDOS BLANDOS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de infecciones bacterianas de tejidos blandos
superficiales y profundos.
Identificar los principales agentes bacterianos
causantes de infeccin de tejidos blandos
superficiales y profundos.
Revisar los recursos para el diagnstico de
bacterias que causan infeccin de tejidos blandos
superficiales y profundos.
Antecedentes
La superficie de la piel normal se encuentra
colonizada por bacterias, clasificadas en dos
grandes grupos; microbiota residente y microbiota
transitoria o temporal.
Esta ltima cobra
importancia por que no solo es capaz de desarrollar
lesiones en el individuo, sino tambin por
transformar a ste en un portador sano. Entre los
microorganismos que la integran se encuentra con
elevada incidencia a Staphylococcus aureus y
Streptococcus pyogenes. Con menor frecuencia
estn bacterias Gram negativas. La distribucin de
estas dos especies de cocos Gram positivos en la
superficie de la piel es preferencial, encontrndose
en espacios interdigitales de pies, ombligo, axilas,
cara interna de muslos, ingle, cuello y cara. En
relacin a la cara se localizan en sitios cercanos a
los grandes orificios (boca y nariz), en tanto que las
bacterias
Gram
negativas
se
ubican
preferentemente en ambientes hmedos y con
cierto grado de maceracin.
La piel constituye una barrera natural a la infeccin,
sin embargo, puede ser vencida, tanto por la
capacidad de multiplicacin bacteriana como por
los factores de virulencia del microorganismo.
Existen zonas susceptibles a la infeccin como son
los folculos pilosebceos y las glndulas
sudorparas apcrifas, cuya estructura anatmica
los convierte en verdaderos fondos de saco,
favoreciendo la accin de las bacterias (S aureus, S
pyogenes, Corynebacterium sp y en ocasiones
bacterias Gram negativas).
48
Mtodo
1. Humedecer el hisopo estril con la muestra
problema
2. El hisopo se descargar en las cajas que
contienen los tres medios en la zona indicada
por el profesor de laboratorio
3 Con el empleo del asa
bacteriolgica
previamente esterilizada y fra, se harn las
estras tendientes para lograr el aislamiento
bacteriano.
4. Incubar a 3537C durante 24 a 48 horas.
Preguntas
orientadas
para
evaluar
el
conocimiento adquirido
1. Qu estudios se realizaron para llegar al
diagnstico en el caso clnico revisado?
2. Qu agente etiolgico fue responsable de la
patologa en el caso clnico revisado?
3. Qu bacterias se identificaron en el cultivo de
piel que realizaron.
Resumen de la prctica:
El profesor con los alumnos correlacionar el caso
clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico.
Sesin II
Material
1. Cajas de petri sembradas por los alumnos.
2. Medios de cultivo; aislamiento e identificacin
bioqumicas demostrativas.
3. Equipo para tincin de Gram.
4. Portaobjetos
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscopicamente los cultivos
(morfologa colonial).
2. Realizarn frote y tincin de Gram a partir de
las colonias previamente identificadas y
anotarn sus caractersticas tintoriales.
3. Interpretar las pruebas bioqumicas junto con
los dems datos para llegar al diagnstico
etiolgico.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Mencione las bacterias que se asocian a
cuadros de piodermia.
2. Indicar los recursos de laboratorio que se
Utilizan para el diagnstico de infecciones
bacterianas de tejidos blandos superficiales y
profundos.
3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico
etiolgico en las infecciones de tejidos blandos
superficiales y profundos?
49
PRCTICA No. 6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de
infecciones
bacterianas
del
tracto
gastrointestinal.
3.
4.
5.
6.
7.
50
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1.
El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarn un caso clnico de
gastroenteritis bacteriana e identificarn:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnsticos clnicos.
c) Productos biolgicos a utilizar para el
diagnstico de laboratorio.
d) Exmenes de laboratorio tiles para
confirmar el diagnstico clnico.
2.
Realizarn un coprocultivo.
3.
Interpretacin de bioqumicas
Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para
diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato
como nica fuente de carbono y energa.
Tiene como indicador, al colorante azul de
bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales
de amonio, que hace que el medio vire a un color
azul, cuando es positivo.
Material
1.
Placas Eosina Azul de Metileno (EMB),
Salmonella-Shigella (SS).
2.
Tubos de citrato de Simmons, Agar hierro
triple azcar (TSI), Agar hierro lisina (LIA),
Agar Movilidad Indol Ornitina (MIO)
3.
Asas bacteriolgicas
4.
Problema
Mtodo
1.
Obtener una muestra de materia fecal en un
frasco estril y de aqu tomar una pequea
porcin con un hisopo estril, de preferencia
de los sitios con moco y sangre.
2.
Con el hisopo, inocular las siguientes medios:
EMB y SS, seguir el procedimiento por estras
en placa para el aislamiento de colonias
3.
Incubar a 37 C durante 24 horas
4.
Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y
MIO, la bacteria problema, como lo indique el
profesor, incubar a 37 C durante 24 horas.
5.
Identificar al o los microorganismos con las
pruebas bioqumicas.
Sesin II
Material
1.
Cultivos demostrativos y de la prctica
anterior.
2.
Pruebas bioqumicas demostrativas y de la
prctica anterior.
3.
Reactivo de Kovac
Metodologa
Los alumnos:
1.
Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn colonias
lactosa positivas de las negativas.
2.
Realizarn tinciones de Gram a partir de
colonias previamente identificadas y anotarn
sus caractersticas tintoriales.
51
52
PRCTICA No. 7
INFECCIONES SISTMICAS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de infecciones sistmicas de origen bacterianas.
Identificar las bacterias causantes de infecciones
sistmicas.
Revisar los recursos para el diagnstico de
infecciones sistmicas.
Antecedentes.
Una infeccin sistmica es definida como aquella
que se encuentra en el torrente circulatorio.
53
Desarrollo de la prctica
Sesin I:
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisaran un caso clnico de infecciones
sistmicas e identificarn:
2. Datos relevantes del caso.
3. Posibles diagnsticos clnicos.
4. Productos biolgicos empleados para el
diagnstico de laboratorio.
5. Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el
diagnstico clnico.
Interpretacin de resultados.
Material
1. Hemocultivos demostrativos.
2. Placas de agar sangre.
3. Asa bacteriolgica.
4. Cultivo problema
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los
hemocultivos.
2. A partir del problema realizar un cultivo en
agar sangre, con la tcnica de estras para
lograr el aislamiento del microorganismo.
3. Incubarn las placas a 35-37C durante 24-48
horas.
Resumen de la prctica
El profesor junto con los alumnos correlacionar el
caso clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico.
Sesin II
Material
1. Placas de agar sangre inoculadas.
2. Equipo de Tincin de Gram
3. Preparaciones fijas
4. Portaobjetos
5. Cubreobjetos
6. Microscopio
7. Aceite de inmersin
8. Papel para la limpieza del microscopio
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos y
diferenciarn la morfologa colonial.
2. Realizarn tinciones de Gram a partir de
colonias previamente identificadas y anotarn
sus caractersticas tintoriales.
54
PRCTICA NM. 8
INFECCIONES DE VAS URINARIAS
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de infecciones bacterianas de vas urinarias.
Identificar las bacterias causantes de infecciones de
vas urinarias.
Revisar los recursos para el diagnstico de
infecciones de vas urinarias.
Antecedentes
Las infecciones urinarias son de las ms
importantes en el ser humano, afectan ms a las
mujeres, se adquieren con mayor frecuencia por va
ascendente exgena que por endgena. Se
asocian a la falta de higiene, malformaciones,
uropata obstructiva, alteraciones neurognicas de
vejiga, cateterismo uretral, diabetes mellitus,
embarazo,
hipertensin
arterial,
neoplasias,
alteraciones de los mecanismos de defensa
especficos e inespecficos. Uno de los riesgos ms
serios de las infecciones urinarias radica en que,
cualquiera de las zonas afectadas del tracto,
constituye un importante foco a partir del cual los
microorganismos responsables pueden diseminarse
hasta el rin e inclusive migrar de ste hacia la
sangre, comprometiendo en ambos casos, la vida
del enfermo.
En la mujer, la uretrocistitis es la entidad clnica
ms frecuente y generalmente cursa en forma
aguda. En el hombre, tambin se presenta
prostatitis. Estas infecciones son de difcil curacin
y causan frecuentes recadas. La pielonefritis
representa en ambos sexos la entidad de mayor
gravedad y se debe en un 10 % de los casos a ms
de una especie bacteriana, sobre todo cuando se
trata de pacientes sometidos a cateterismo
permanente o quienes presentan lesiones
obstructivas en el tracto urinario.
Los principales agentes etiolgicos de infecciones
del tracto urinario estn limitados a unos cuantos
microorganismos
de
crecimiento
rpido.
Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella
pneumoniae,
Enterobacter sp, Proteus sp,
Pseudomonas
sp.,
estafilococos
coagulasa
negativa, S. saprophyticus, y ocasionalmente
Candida albicans, as como otros microorganismos
oportunistas, tanto en pacientes hospitalizados
como externos.
55
Tcnica
1. Colocar 10 microlitros de orina no centrifugada
y bien mezclada sobre un portaobjetos de vidrio
y dejar secar al aire sin extender
2. Fijar, teir e identificar al microorganismo.
3. Determinar el nmero de microorganismos por
campo utilizando el objetivo de inmersin
Interpretacin:
1. Reportar el nmero de microorganismos: la
presencia de uno o ms microorganismos por
5
campo se correlaciona con una cuenta 10
UFC/ml.
2. La presencia de muchas clulas epiteliales
escamosas y diferentes morfotipos microbianos
indica contaminacin y requiere repetir la
muestra.
Mtodos de cultivo
1. Mtodo de estriado en superficie con asa
calibrada.
Las asas calibradas presentan caractersticas
especficas que las habilitan para recoger, si
solo se introduce a la muestra la parte circular,
un volumen conocido de orina. La siembra se
realiza descargando su contenido en toda la
superficie del medio seleccionado.
Cabe sealar que la eleccin de los medios es
importante. No debe faltar una gelosa sangre u
otro medio en el que pueda desarrollar el
agente etiolgico, aunque este sea exigente en
cuanto a sus requerimientos nutricionales, y
algunos otros medios con caractersticas
diferenciales y/o selectivas, que permitan el
desarrollo de los patgenos, inhibiendo a los
contaminantes.
Las placas sembradas se incuban a 35 C en
aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido
el tiempo, se analizan las caractersticas
macroscpicas obtenidas, poniendo especial
cuidado en detectar si estn presentes uno o
ms microorganismos diferentes y en realizar el
recuento correspondiente.
Como las asas comerciales ms utilizadas son
las que recogen un volumen de 0.001 ml de
orina, el nmero de colonias de cada caja
deber multiplicarse por 1000 para conocer la
cantidad de microorganismos o de UFC que la
muestra contiene por mililitro.
Adicionalmente, deben someterse a pruebas de
identificacin, tomando en cuenta que las
infecciones urinarias son causadas, en el 85 a
90 % de los casos, por una sola especie
bacteriana.
56
INTERPRETACIN
Infeccin activa
Dudosa*
Contaminacin de la
muestra
*Debe analizarse otra muestra del paciente.
Considerar
Los falsos negativos pueden obtenerse cuando
a) El paciente se encuentra bajo tratamiento
antimicrobiano poco antes o durante la
recoleccin de la muestra:
b) El microorganismo causante del cuadro es
incapaz de desarrollarse en los medios
utilizados o bajo las condiciones de incubacin
que se seleccionaron
c) La muestra analizada no fue la primera de la
maana
d) El depsito en el que se recoge el espcimen
contiene restos de detergente o desinfectante
e) El enfermo se encontraba recibiendo lquidos
intravenosos
f) La calidad y/o la preparacin de los medios no
es la adecuada
g) El asa calibrada recoge volmenes menores a
los esperados
h) La muestra no se homogeniz antes
de introducir el asa
i) La alcuota descargada en la superficie del
medio no se distribuy adecuadamente.
Los falsos positivos pueden ocurrir cuando
a) El paciente no efecta la limpieza previa en
forma adecuada
b) El espcimen se siembra despus de haber
permanecido dos horas o ms a temperatura
ambiente
c) El depsito en el que se recoge la muestra se
encuentra contaminado
d) El asa calibrada recoge mayores cantidades
que las esperadas
e) La paciente suspendi la miccin para
recolectar la parte media
f) El catter se encontraba contaminado
57
2. Realizarn un urocultivo.
Material
1. Placa de Eosina Azul de Metileno (EMB) y
gelosa sangre.
2. Asa calibrada de 0.001 ml
3. Orina problema
Mtodo
1
Sesin II
Material
1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior
2. Equipo para tincin de Gram
Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn las
colonias.
2. Contarn el nmero de colonias que se
desarrollaron en las cajas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el nmero de bacterias es 100 000 UFC/ml,
se proceder a identificar l o los
microorganismos por los mtodos usuales.
4. Realizarn tincion de Gram a partir de colonias
previamente identificadas y anotarn sus
caractersticas.
5. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto con
los dems datos para llegar al diagnstico
etiolgico.
58
PRCTICA NO. 9
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL
Objetivos generales:
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones de transmisin sexual.
Identificar los principales agentes de infecciones de
transmisin sexual.
Revisar los recursos para el diagnstico de las
infecciones de transmisin sexual de etiologa
bacterianas.
Antecedentes.
Las enfermedades de transmisin sexual (ETS) son
un
conjunto
de
afecciones
clnicas
infectocontagiosas, transmitidas de persona a
persona durante el acto sexual. Sin embargo, su
transmisin tambin puede realizarse a travs del
empleo de jeringas contaminadas, por transfusin
sangunea o durante el embarazo o parto. Las ETS
son causadas principalmente por bacterias y virus,
aunque tambin pueden ser ocasionadas por
hongos y protozoarios.
En la etiologa bacteriana, se cuenta con; Neisseria
gonorrhoeae, Mycoplasma homimis, Ureaplasma
urealyticum, Chlamydia trachomatis, Treponema
pallidum y Haemophilus ducreyi, productoras de
uretritis y/o lesiones ulcerativas. Otro cuadro clnico,
que no necesariamente es ocasionada por
transmisin sexual es la vaginosis bacteriana, la
cual
se presenta como una alteracin en la
microbiota vaginal, con sobrecrecimiento de
Gardnerella vaginalis, junto con bacterias
anaerobias y disminucin de lactobacilos.
Aproximadamente el 50% de las pacientes cursan
asintomticas y se diagnostican durante una
exploracin o al realizar citologa de rutina. El
sntoma fundamental es leucorrea blanco-griscea,
adherente a las paredes vaginales, maloliente (olor
a pescado), al no existir proceso inflamatorio las
pacientes no refieren prurito, dispareunia ni disuria.
El diagnstico se realiza si se cumplen 3 de los 4
criterios diagnsticos de Amsel, que son los
siguientes:1) Secrecin caracterstica. 2) pH >4.5.
3) Olor a aminas de la secrecin despus de
agregarle KOH. 4) Clulas clave (clulas del epitelio
vaginal recubiertas de bacterias, que le dan un
aspecto granular).
Material
1. Placas de medio de cultivo sembradas
(demostrativo)
2. Laminillas con muestra clnica fijadas.
3. Equipo para tincin de Gram.
Desarrollo de la prctica
Sesin I
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarn un caso clnico de ETS e
identificar:
Mtodologa
1. Los alumnos observarn macroscpicamente
los cultivos (morfologa colonial).
2. Realizarn tinciones de Gram con las laminillas
facilitadas y anotarn las caractersticas
tintoriales y elementos observados.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Mencione las bacterias que se asocian a
cuadros de infecciones de transmisin sexual.
2. Indicar los recursos de laboratorio que se
utilizan para el diagnstico de infecciones de
transmisin sexual.
3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico
etiolgico de una infeccin de transmisin
sexual?
4. Qu importancia tienen los criterios de Amsel
en el caso clnico discutido?
Preguntas
orientadas
conocimiento adquirido.
para
evaluar
el
59
PRCTICA NO. 10
SISTEMA NERVIOSO CENTRAL
Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de infecciones bacterianas del sistema nervioso
central (SNC).
Identificar las bacterias causantes de infecciones
en el SNC
Revisar los recursos para el diagnstico de
infecciones del SNC
Antecedentes:
El sistema nervioso central (SNC), puede ser
infectado por diferentes microorganismos, entre los
que se encuentran bacterias consideradas
potencialmente patgenas como es el caso de
Streptococcus
pneumoniae,
Haemophilus
influenzae, Neisseria meningitidis y Mycobacterium
tuberculosis y aquellas pertenecientes a la
microbiota
transitoria
o
permanente.
La
participacin de estas va a depender de la edad,
estado inmunolgico e integridad anatmica del
SNC del paciente.
Entre los cuadros clnicos ocasionados; se
encuentran; meningitis aguda, crnica (tuberculosis,
brucelosis), absceso cerebral, infarto cerebral
embolico por endocarditis bacteriana y empiema
subdural.
La meningitis puede ser aguda o crnica,
dependiendo del agente infeccioso. Los principales
agentes bacterianos, en nios menores de cuatro
aos, son transmitidos por portadores sanos, que
tienen al microorganismo en las vas respiratorias
altas, que son: Haemophilus influenzae, Neisseria
meningitidis y Streptococcus pneumoniae y en la
crnica: Mycobacterium tuberculosis y Brucella sp.
El examen del lquido cefalorraqudeo (LCR) es
importante y fundamental en la valoracin del
paciente con una infeccin del SNC. Por lo quel se
requiere
realizar
una
puncin
raqudea
tcnicamente correcta y de un estudio meticuloso
del producto. Su anlisis incluye; la determinacin
de la presin de apertura, aspecto, recuento celular
y diferencial, glucosa y protenas. As como la
demostracin directa de patgenos a travs de la
microscopa y el empleo de tincin de Gram y/o
Ziehl Neelsen.
60
Sesin II
Material
1. Placas de medios de cultivo demostrativas y las
sembradas por los alumnos.
2. Pruebas bioqumicas demostrativas.
3. Equipo para tincin de Gram.
4. Asas bacteriolgicas.
Mtodo
El alumno:
1. Describir la morfologa colonial.
2. Comparar su aislado con las placas de
demostracin.
3. Leer las pruebas bioqumicas demostrativas.
4. Realizar frote y tincin de Gram a partir de los
aislados.
5. Identificar la especie bacteriana aislada.
Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Cules son los efectos que pueden producir
las bacterias que infectan al SNC?
2. Qu estudios de laboratorio permiten
establecer el diagnstico etiolgico de una
infeccin bacteriana?
3. Mencione una prueba serolgica que permita
realizar un diagnstico rpido de una infeccin
del SNC?
Preguntas
orientadas
para
evaluar
el
conocimiento adquirido.
1. Que utilidad tienen las pruebas rpidas en el
diagnstico de enfermedades de etiologa
bacteriana?
2. Qu estudios se utilizan para llegar al
diagnstico de meningoencefalitis?
3. Que muestras se deben tomar para realizar
los estudios de meningoencefalitis?
4. Qu mtodos directos se pueden emplear
para el diagnstico de origen bacteriano en el
laboratorio?
Resumen de la prctica
El profesor junto con los alumnos correlacionar el
caso clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico
61
ANEXO
DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
Objetivos
Identificar el efecto antibacteriano de los frmacos en
un cultivo de bacterias.
Demostrar la utilidad de la prueba de sensibilidad
antimicrobiana por difusin en disco.
Identificar la utilidad de las pruebas de sensibilidad a
los antimicrobianos en la clnica.
Antecedentes
La quimioterapia antimicrobiana ha desempeado un
papel vital en el tratamiento de las enfermedades
infecciosas durante el siglo XX. Desde el
descubrimiento de la penicilina, cientos de agentes
antimicrobianos han sido obtenidos a partir de
microorganismos o por sntesis. El uso de estas
sustancias ha permitido la seleccin de variantes
resistentes a los mismos.
Existen dos mecanismos principales por los cuales los
microorganismos cambian su sensibilidad hacia los
antimicrobianos y otras drogas utilizadas en la prctica
mdica: la mutacin e intercambio gentico
(conjugacin, transformacin o transduccin). La
resistencia a los antimicrobianos se manifiesta como
decremento de la permeabilidad al medicamento,
modificacin de su receptor, inactivacin enzimtica de
la droga, alteracin del blanco del antimicrobiano,
etctera.
Las pruebas in vitro de sensibilidad antimicrobiana
estn indicadas para determinar los frmacos de
eleccin
en
infecciones
producidas
por
microorganismos cuya sensibilidad es impredecible o
en infecciones que no responden al tratamiento
inicialmente elegido, infecciones intrahospitalarias,
infecciones crnicas o cuadros clnicos de repeticin; y
para seleccionar el antimicrobiano ms adecuado en
pacientes con problemas especficos como edad,
hipersensibilidad, tc. Algunos microorganismos que
con frecuencia desarrollan resistencia a los
antimicrobianos
son:
Staphylococcus
aureus,
Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae,
Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y
Proteus sp.
No est indicado solicitar pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos cuando no se ha reportado resistencia
al agente de eleccin o est se ha reportado slo
raramente.
Algunas de las pruebas de sensibilidad antimicrobiana
realizadas en los laboratorios clnicos son las
siguientes:
1. Difusin en disco:
procedimiento simple que
emplea agar Meller-Hinton, medio que permite el
crecimiento de la mayora de los microorganismos
para los cuales estas pruebas son relevantes. Est
tcnica es cualitativa, reproducible, econmica, no
requiere de equipo especial y est estandarizada
para probar bacterias de crecimiento rpido.
Determina sensibilidad, sensibilidad intermedia y
resistencia empleando un disco de papel filtro
impregnado con un antimicrobiano seleccionado
que se difunde a travs del medio.
Para efectuarla se inocula una placa de agar con el
microorganismo problema, a la que se le depositan
discos secos de papel filtro que contienen los
agentes antimicrobianos. Los discos adsorben
agua del medio, la droga se disuelve y difunde
hacia el medio adyacente siguiendo las leyes
fsicas que gobiernan la difusin de las molculas
a travs de agar. El resultado es un gradiente de
concentracin de la droga alrededor del disco. Las
clulas bacterianas que no son inhibidas por el
agente antibacteriano, sern capaces de crecer en
toda la zona alrededor del disco, mientras que en
las bacterias sensibles a la droga, no se observar
crecimiento en el rea donde las concentraciones
inhibitorias de la doga estn presentes. La zona de
inhibicin es afectada por la velocidad de difusin
de las diferentes drogas a travs del agar, por lo
que las zonas observadas con una droga no
pueden ser comparadas con las de otra droga. Sin
embargo, el dimetro de la zona de inhibicin es
inversamente proporcional al MIC.
Algunas de las limitaciones de este procedimiento
son:
a) El mtodo est estandarizado slo para
microorganismos aerobios de crecimiento
rpido
incluyendo
Enterococcus
sp.,
Staphylococcus sp. Pseudomonas aeruginosa,
Acinetobacter sp., algunos Streptococcus y
Listeria monocytogenes y con algunas
modificaciones ha sido utilizado para
microorganismos
exigentes
como
Haemophilus
sp.,
Neisseria
sp.
y
Streptococcus pneumoniae.
b) Organismos de crecimiento lento, anaerobios
obligados y aquellos que requieren CO2 para
su crecimiento no dan resultados confiables al
ser probados por este mtodo por lo que se
recomiendan mtodos de dilucin.
62
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Material
1. Cajas con gelosa Meller-Hinton con 4 mm de
grosor.
2. Tubo MacFarland de 0.5.
3. Tubos con solucin salina estril cada uno con 3
ml
4. Cultivos de 18 a 24 h en caldo nutritivo.
63
Primer da
Colonias puras (primoaislamiento) a partir de urocultivo, hemocultivo, heridas, LCR, etctera
Incubar a 37 C x 24 horas
Segundo da
64