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Facultad De Qumica
Qumico Farmacutico Bilogo
Farmacologa Avanzada.
Reporte no. 1
Manejo de animales de experimentacin en estudios
preclnicos.
Imparte:
Dr. Juan Carlos Snchez Meza
M en SHO. Juan Jaime Guerrero Daz del Castillo
Alumnos:
Castillo Huitrn Humberto Rafael
Lpez Linares Rodolfo
Prez Alcntara Valeria Itzel
Romero Garca Juan Manuel
Reyes Valdez Devi
Grupo 73
Objetivos
Observar la diferencia en la absorcin y distribucin de sustancias administradas
por diferentes vas, as como un reconocimiento interno y comparacin de la
anatoma de roedores empleados en los estudios farmacolgicos.
Obtener experiencia en la manipulacin de los animales de laboratorio, el clculo y
administracin de una dosis a travs de diferentes vas y el reconocimiento de la
anatoma comparada de los animales de laboratorio.
Marco Terico
El Animal de laboratorio es cualquier especie animal que se mantiene bajo condiciones
determinadas y se utiliza con fines cientficos. (2)
El animal de laboratorio es una de las piezas as fundamentales en las ciencias
biomdicas. Son usados como modelos para investigar y comprender las causas,
diagnstico y tratamiento de enfermedades que afectan al humano y a los animales,
adems de sus importantes aportes a la docencia biolgica y en el desarrollo, produccin
y control de medicamentos, alimentos y otros insumos donde en muchos casos hasta la
fecho son insustituibles. (2)
Los animales en el laboratorio se han utilizado para suplir necesidades requeridas, tales
como:
1. Materia prima: para ser expuesto a variables experimentales, donde se espera un
resultado
2. Reactivo biolgico: Por tratarse de un sujeto experimental se le llama sustrato (animal)
que se le aade otro reactivo (tratamiento) y posteriormente se observa el producto de la
reaccin (cambio en variables biolgicas), siendo capaz de generar una respuesta
confiable, reproducible y comparable.
3. Modelo biolgico: Cuando se utiliza para extrapolar resultados de una especie animal a
otra (incluido el hombre), en busca de mejoramiento de las pautas de tratamiento
existentes. (1)
Por otra parte se debe cumplir con parmetros como: calidad gentica y ambiental, el
modelo experimental debe ser claro y adecuado para la especie utilizada, se realizara el
clculo preciso del tamao de la muestra a utilizar, de acuerdo con el tipo de estudio y
finalmente desde el inicio de la investigacin se plantean los principios ticos.
(1)
En 1959 William Russell y Rex Burch, en su libro The principles of humane animal
experimental techniques definen claramente las normas en las que se basan los
principios ticos en la investigacin con animales: las tres Rs: Reducir, Reemplazar y
Mtodo
PARTE
EXPERIMENTAL
Al primer grupo se le administrar por va oral (orl), por medio de una cnula,
fluorescena en una dosis de 2mg/Kg. de peso
4.- Al segundo grupo se le administrar por va intraperitoneal (ip), por medio de una
jeringa, fluorescena en una dosis de 2mg/Kg. de peso.
5.- Al tercer grupo se le administrar por va subcutnea (scu), por medio de una jeringa,
fluorescena en una dosis de 2mg/Kg. de peso.
Al cuarto grupo se le administrar por va intravenosa (IV), por medio de una jeringa,
fluorescena en una dosis de 2mg/Kg. de peso
4.- Al quinto grupo se le administrar por va intramuscular (IM), por medio de una
jeringa, fluorescena en una dosis de 2mg/Kg. de peso.
Al sexto grupo se le considerar como control y solo se le administrar solucin
fisiolgica por las diferentes vas
NOTA: para determinacin de dosis se tom en cuenta al ratn de mayor peso
Al cabo de 5 minutos despus de la administracin de fluorescena, se sacrifican la mitad de los animales de cada grupo por
mtodo qumico (anestesia con ter) o bien por dislocacin cervical) y se les coloca en una tabla de diseccin. La otra mitad se
sacrifica a los 15 minutos posterior a la administracin de fluorescena
Resultados
1.- Con los datos obtenidos de cada grupo se construyen las siguientes tablas:
Tabla 5.1. Presencia de fluorescena en los rganos internos (Valoracin cualitativa de la intensidad indicando un signo + +++
dependiendo de una menor o mayor intensidad
No. De
animal
Sexo
Pc(g)
Tiempo
(min)
Va
de
ad
Hgado
Bazo
Pulmones
Corazn
RI
RD
Testculos/
Ovarios
Intestino
Vejiga
Vescula
Macho*
9.4
SC
Macho*
13.5
IM
Macho*
14.4
IP
Macho
19.9
15
Oral
++
Macho
22.5
15
IV
22.8
IP
6
7
Macho
23
15
IP
+++
Hembra*
23.5
IV
Macho
23.6
IV
10
Hembra
24.1
IP
+++
+++
11
Hembra
24.4
15
Sc
+++
12
Hembra
24.5
Sc
13
Hembra
24.55
15
Oral
14
Macho
24.6
15
IM
+++
+++
15
Macho
26.1
Oral
++
16
Macho
26.55
IV
27.4
15
IM
17
18
Macho*
27.6
IV
19
Hembra
27.6
Oral
20
Hembra
29.05
Sc
21
Macho
31
IM
22
SD
22.8
IP
+++
+++
23
SD
27.4
15
IM
++
24
Macho
23.6
IV
+++
+++
*Controles biolgicos.
Sexo
Pc(g)
Hembr
a
Hembr
a
Hembr
a
2
3
Va de
administra
cin
Sc
Hga
do
Baz
o
Pulmon
es
Coraz
n
RI
RD
24.4
Tiemp
o
(min)
15
1.81
0.16
0.18
0.12
0.16
24.5
Sc
1.47
0.17
0.22
0.11
29.1
Sc
1.03
0.08
0.13
0.22
Testcu
los
Intesti
no
Ovari
os
0.15
2.53
0.10
0.17
0.19
2.96
0.02
0.20
0.24
2.76
0.03
Sexo
Pc(
g)
Macho
Hembr
a
Macho
19.
9
24.
6
26.
1
27.
6
3
4
Hembr
a
Tiemp
o
(min)
15
Va de
administra
cin
Oral
Hga
do
Baz
o
Pulmo
nes
Coraz
n
RI
RD
Testcul
os
Intesti
no
1.81
0.12
0.18
0.12
0.18
0.15
2.17
15
Oral
1.14
0.12
0.16
0.13
Oral
1.86
0.22
0.17
0.14
Oral
3.25
0.29
0.23
0.17
0.1
9
0.2
1
0.2
0
0.2
3
0.25
0.21
Ovarios
1.91
0.49
0.24
0.02
2.87
3.76
0.19
Sexo
Pc(
g)
Macho
22.
5
Tiemp
o
(min)
15
Va de
administrac
in
IV
Hga
do
Bazo
Pulmo
nes
Corazn
RI
RD
Testcu
los
Intesti
no
1.30
0.19
0.22
0.12
0.22
0.18
0.20
1.61
Ovari
os
Macho
Macho
Macho
23.
6
23.
6
26.
6
IV
1.57
IV
1.57
IV
2.05
0.59
0.18
0.17
0.17
0.15
2.08
SD
0.59
0.18
0.17
0.17
0.15
2.08
0.10
0.18
0.12
0.27
0.26
0.66
2.09
Sexo
Pc(g
)
SD
SD
Macho
22.8
0
22.8
0
23.0
0
Tiem
po
(min)
5
Va de
administr
acin
IP
Hga
do
Baz
o
Pulmon
es
Corazn
RI
RD
Testcu
los
Intest
ino
1.62
SD
0.14
0.09
0.17
0.16
IP
1.62
SD
0.14
0.09
0.17
0.16
SD
2.60
15
IP
1.25
0.15
0.19
0.12
0.17
0.18
0.13
2.47
Ovari
os
2.60
SD
Sexo
Pc(
g)
Mach
o
SD
SD
Mach
o
2
3
4
Va de
administraci
n
IM
Hgad
o
Bazo
Pulmo
nes
Coraz
n
RI
RD
Testculos
Intesti
no
24.6
Tiemp
o
(min)
15
2.06
0.12
0.12
0.13
0.19
0.22
0.34
2.42
27.4
27.4
31.0
15
15
5
IM
IM
IM
2.08
2.08
1.13
SD
0.10
0.34
0.34
0.23
0.13
0.13
0.18
0.23
0.23
0.35
0.23
0.23
0.29
SD
0.43
2.53
2.53
2.67
Ovari
os
SD
0.00
Grupo CONTROLES
No. De
animal
Sexo
Pc(g)
Tiempo
(min)
1
2
3
4
5
Macho
Macho
Macho
Hembra
Macho
9.40
13.50
14.40
23.50
27.60
5
5
5
5
5
Va de
administra
cin
SC
IM
IP
IV
IV
Hga
do
Bazo
Pulmo
nes
Coraz
n
RI
RD
Testcu
los
Intesti
no
0.51
0.87
1.33
1.96
2.19
0.47
0.07
0.10
0.14
0.23
0.11
0.17
0.14
0.18
0.27
0.06
0.07
0.08
0.12
0.18
0.07
0.09
0.10
0.17
0.23
0.07
0.10
0.11
0.19
0.25
0.05
0.09
0.09
0.92
1.57
1.71
2.21
2.90
0.25
Ovari
os
0.11
2.- Obtenga el porcentaje (%) en peso de cada rgano tomando como referencia el peso absoluto de cada animal y
construya una tabla similar a la tabla 5.2.
Grupo No. 1 Va de administracin: Subcutnea
No. De
animal
Sexo
1
2
3
Hembra
Hembra
Hembra
Pc(g)
24.4
24.5
29.1
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
Hgado
Bazo
15
5
5
Sc
Sc
Sc
7.41
5.99
3.56
0.67
0.67
0.29
Pulmo Coraz
nes
n
0.72
0.47
0.91
0.46
0.46
0.74
RI
RD
0.64
0.71
0.69
0.63
0.79
0.81
Sexo
1
2
Macho
Hembra
Pc(g)
19.9
24.6
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
Hgado
Bazo
15
15
Oral
Oral
9.1
4.63
0.6
0.49
Pulmo
nes
0.9
0.64
Coraz
n
0.6
0.53
RI
RD
0.95
0.87
0.9
1.01
3
4
Macho
Hembra
26.1
27.6
5
5
Oral
Oral
7.11
11.78
0.84
1.05
0.64
0.82
0.52
0.6
0.76
0.85
0.81
0.88
1.89
0
10.99
13.63
0
0.68
RI
RD
0.99
0.7
0.7
1.03
0.78
0.73
0.73
0.96
Sexo
1
2
3
4
Macho
Macho
Macho
Macho
Pc(g)
22.5
23.6
23.6
26.6
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
Hgado
Bazo
15
5
5
5
IV
IV
IV
IV
5.8
6.66
6.66
7.72
0.84
0
0.38
Pulmo Coraz
nes
n
1
0.52
2.48
0.76
2.48
0.76
0.68
0.44
Sexo
SD
2
3
4
Pc(g)
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
22.8
IP
Hgad
o
7.1
SD
22.8
IP
7.1
Macho
Hembr
a
23
15
IP
5.42
24.1
IP
8.67
%
Bazo
0
Pulmo Coraz
nes
n
0.6
0.41
RI
RD
0.73
0.69
0.6
0.41
0.73
0.69
0.67
0.8
0.5
0.72
0.77
0.55
10.73
0.95
0.78
0.6
0.89
0.91
13.88
0.67
No. De
animal
Sexo
16
19
20
24
Macho
SD
SD
Macho
Pc(g)
24.6
27.4
27.4
31
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
15
15
15
5
IM
IM
IM
IM
%
Hgad
o
8.36
7.59
7.59
3.66
%
Bazo
0.48
0
0.32
Pulmo Coraz
nes
n
0.5
0.52
1.25
0.47
1.25
0.47
0.75
0.57
RI
RD
0.79
0.85
0.85
1.12
0.91
0.84
0.84
0.94
RI
RD
0.74
0.68
0.67
0.74
0.72
0.76
Grupo CONTROLES
No. De
animal
Sexo
1
2
3
Macho*
Macho*
Macho*
Hembr
a*
Macho*
9
21
Pc(g)
Tiemp
o
Va
(min)
de ad
9.4
13.5
14.4
5
5
5
SC
IM
IP
Hgad
o
5.43
6.45
9.24
23.5
IV
8.32
0.59
0.75
0.52
0.72
0.79
9.4
0.47
27.6
IV
7.93
0.83
0.97
0.65
0.83
0.91
0.91
10.51
Bazo
5
0.53
0.7
Pulmo Coraz
nes
n
1.17
0.64
1.23
0.51
0.96
0.56
3.- Compare estadsticamente los valores promedio de los pesos (absolutos y relativos) de cada rgano entre los grupos
tratados, usando la prueba de t de Student y elabore la tabla 5.3 con la informacin sealada, indicando en ella si existen
diferencias entre los grupos tratados con respecto al grupo control mediante un asterisco.
HGADO
GRUPO
1
2
3
4
5
control
GRUPO
1
2
3
4
5
control
GRUPO
1
2
3
4
5
PESO
PESO
t DE HGADO
ABOSLUTO
RELATIVO
1.44
5.65
3.54982E-08
2.01
8.16
1.62
6.71
1.64
7.07
1.84
6.80
1.37
7.47
BAZO
PESO
PESO
t de BAZO
ABOSLUTO
RELATIVO
0.14
0.54 0.031824085
0.19
0.75
0.07
0.31
0.10
0.41
0.05
0.20
0.20
1.53
RD
PESO
PESO
t DE RD
ABOSLUTO
RELATIVO
0.19
0.74
1.51741E-09
0.22
0.90
0.19
0.80
0.18
0.77
0.24
0.88
control
GRUPO
1
2
3
4
5
control
GRUPO
1
2
3
4
5
control
GRUPO
1
2
0.14
PULMONES
PESO
ABOSLUTO
0.18
0.18
0.39
0.16
0.26
0.17
0.78
PESO
RELATIVO
0.70
0.75
1.66
0.70
0.94
1.02
t de
PULMONES
0.00078231
CORAZN
PESO
PESO
t de
ABOSLUTO
RELATIVO
CORAZN
0.15
0.56
3.32957E-09
0.14
0.56
0.15
0.62
0.11
0.48
0.14
0.51
0.10
0.58
RI
PESO
PESO
t DE RI
ABOSLUTO
RELATIVO
0.18
0.68
2.49094E-08
0.21
0.86
3
4
5
control
GRUPO
1
2
3
4
5
control
GRUPO
1
2
3
4
5
control
0.21
0.18
0.25
0.13
0.86
0.77
0.90
0.73
TESTCULOS
PESO
PESO
t DE
ABOSLUTO
RELATIVO
TESTCULOS
0.00
0.00 0.045375208
0.16
0.66
0.29
1.17
0.03
0.14
0.19
0.69
0.10
0.55
INTESTINO
PESO
PESO
t DE
ABOSLUTO
RELATIVO
INTESTINO
2.75
10.65
7.22367E-08
2.68
10.82
1.96
8.16
2.75
11.84
2.54
9.22
1.86
10.64
GRUPO
1
2
3
4
5
control
OVARIOS
PESO
PESO
t DE OVARIOS
ABOSLUTO
RELATIVO
0.05
0.20 0.062865733
0.05
0.20
0.00
0.00
0.04
0.17
0.00
0.00
0.02
0.09
Anlisis de resultados:
En base a las observaciones realizadas en los rganos internos de los ratones posteriores
a la administracin de la solucin de fluorescena y la irradiacin de luz UV podemos
deducir que existen 2 factores importantes a analizar: el tiempo que permaneci la
fluorescena en el cuerpo del ratn y la va utilizada para su administracin. En este
experimento no hubo una gran cantidad de resultados positivos en cuanto a la presencia
de la florescencia, sin embargo se pueden rescatar algunos aspectos, se observ
coloracin intensa en los intestinos al aplicar la fluorescena por va intraperitoneal, este
debido a la distribucin se dio en el rea cercana a donde fue administrada, en la va oral
se observ ligera coloracin en los intestinos, esto debido a que la fluorescena paso por
el tracto gastrointestinal , en el caso de la va intramuscular se vio irrigacin en la vescula
e intestino, esto seguramente debido a que la administracin se dio en un zona cercana.
La va intravenosa tiene un anlisis especial pues si bien en los rganos que se nos
solicitaban en la tabla slo se observ ligera coloracin en el hgado, al irradiar el
organismo con la luz UV se observaba coloracin en el torrente sanguneo e incluso en las
patas del animal, esto porque la fluorescena ingreso directamente al torrente sanguneo.
Los casos de mayor intensidad de color se dieron a un tiempo de 15 minutos, pues se
favorece mayormente la distribucin de la sustancia a travs del organismo. Un dato muy
importante es que en la mayora de los casos donde se present coloracin muy intensa ,
esta se dio en la vejiga por lo cual podemos deducir que la fluorescena se excreta por va
renal a travs de la orina .
En cuanto a la comparacin de los pesos absolutos y relativos de los rganos de cada animal
se puede observar que no existe una variacin considerable entre el peso de los rganos de
los organismos expuestos a la fluorescena y aquellos que fueron considerados como control,
si bien existe una variacin esto se debe al tamao que presentaba cada ratn, con el empleo
de la distribucin t de student se puede comprobar esto, pues la variacin no fue muy
significativa en cuanto a alteraciones de peso a causa de la fluorescena utilizada
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Realizar un diagrama de flujo sobre los pasos a seguir para la manipulacin de un
animal de experimentacin
Mantener a los
animales de
experimentacin
en las
condiciones
adecuadas para
su desarrollo.
Identificar a
cada uno de los
animales.
En todo
momento se
deber tener el
mayor respeto y
trato digno a los
animales que
dan su vida a
favor del
desarrollo del
estudio
farmacolgico
En caso de
sacrificar a los
animales de
experimentaci
n, hacerlo de las
maneras
establecidas por
la NOM-062
causando el
menor
sufrimiento
posible.
Evitar un
ambiente de
estrs o de
dao para el
animal.
Realizar el
procedimiento
intentando
causar el menor
dao posible al
animal
Tener
conocimiento
sobre su manejo
(forma correcta
de sostenerlo).
Conocer que
experimento se
va a realizar e
identificar
plenamente las
distintas vas de
administracin .
Vescula
biliar
Vejiga
6. Elabore un cuadro en el que se comparen las ventajas y usos de las diferentes vas de
administracin.
Va de administracin
Ventajas
Oral
Es de fcil ingestin, lo
puede realizar el propio
paciente sin ayuda
Intravenosa
Administracin directa al
torrente sanguneo , se
evita el proceso de
absorcin
Intraperitoneal
Intramuscular
Subcutnea
Epidural
Rectal
Tpica
Usos
Se utiliza para
tratamientos cotidianos,
con dosis fijas y donde no
hay problemas de
deglucin
Se utiliza para el alivio
del dolor agudo, o en
casos urgentes donde se
requiere que el frmaco
llegue lo ms rpido
posible a la circulacin
Se usa en preclnica
experimental
Se utiliza cuando se
requiere una absorcin
ms rpida que la oral o
la subcutnea
Se utiliza para la
aplicacin de
hiposensibilizantes,
alrgenos, aplicacin de
insulina
Se utiliza en partos o
cirugas donde se
requiere anestesia de la
cintura para abajo
Se utiliza cuando el
paciente tenga vmito,
nuseas o rechace la
medicacin va oral
Se utiliza para conseguir
efectos localizados
Bibliografa
BIOMDICA.
Jairo
Alfonso
Vsquez
Lpez.
Disponible
en:
NORMA
OFICIAL
MEXICANA
NOM-062-ZOO-1999,
ESPECIFICACIONES