INMUNOHEMATOLOGA

Salvador Camacho Garrido

REACCIONES Ag-Ac
Tanto la respuesta humoral como la celular
suponen el reconocimiento de determinadas
estructuras qumicas en la superficie de
macromolculas extraas, los antgenos
Las zonas del antgeno que se unen
especficamente con el anticuerpo o con el
receptor de un linfocito, se denominan
determinantes antignicos
Cada antgeno puede presentar varios
determinantes antignicos diferentes que
estimulan la produccin de anticuerpos y la
repuesta de los linfocitos T
Estas estructuras qumicas, los determinantes
antignicos, son los responsables de la
especificidad de la respuesta inmunitaria

CONTACTO
Cuando se ponen en contacto un
antgeno con el anticuerpo especfico,
reaccionan unindose mediante un
enlace no covalente y se
desencadenan una serie de procesos
capaces de neutralizarlo y eliminarlo
La combinacin del anticuerpo con el
antgeno desencadena una serie de
procesos capaces de neutralizar y
eliminar a una sustancia extraa

ANTGENOS
Toda sustancia que, introducida en un organismo que no
la posea, provoca en l la formacin de un anticuerpo
especfico con el cual puede combinarse de forma
electiva
Pueden ser cuerpos figurados vivos o muertos (clulas
de los tejidos, elementos de una clula, microbios) o sus
productos de elaboracin (secreciones celulares,
toxinas), o compuestos orgnicos (albminas, nuclenas)
Antgeno eritrocitario. Antgeno presente en los
glbulos rojos y tambin en los leucocitos (ver leucocito)
y en diferentes tejidos del organismo
Existen ms de 130 antgenos eritrocitarios pero en la
prctica slo dos son importantes: el antgeno
eritrocitario A y el antgeno eritrocitario B, cuya presencia
o ausencia caracteriza a los grupos sanguneos y regula
las incompatibilidades sangunea e hstica y el
denominado factor Rh

Antgenos eritrocitarios

ANTGENOS ABH
GEN
A
B
H

ENZIMA

AZCAR

1,3N-acetilgalactosaminiltransferasa N-acetilgalactosamina
1,3 Galactosiltransferasa
Galactosa
1,2 Fucosiltransferasa
Fucosa

Fenotipo Bombay

Productos codificados por los genes ABO y H

6
1
D-Galactosa

4
3

1
6

N-acetil-glucosamina
enlace alfa 1-3

NHCOH3

D-Galactosa

CADENA PRECURSORA
TIPO 1

Glucosa

6
1

D-Galactosa

4
3

N-acetil-glucosamina
enlace 1-4

NHCOH3

D-Galactosa

CADENA PRECURSORA
TIPO 2

Glucosa

Fuc

1,2 Fucosiltransferasa
6

Gal

SUSTANCIA H
TIPO 1

enlace alfa 1-3

11
6

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

1,3 N-acetilgalactosaminiltransferasa

NAcGal

Fuc
6

Gal

ANTGENO A
(H 1)

enlace alfa 1-3

11
6

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

Gal
l
1,3 Galactosiltransferasa

ANTGENO B
(H 1)

Fuc
6

Gal

enlace alfa 1-3

11
6

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

1,2 Fucosiltransferasa

Fuc

Gal

4
3

enlace alfa 1-4

SUSTANCIA H
TIPO 2

1
6

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

1,3 N-acetilgalactosaminiltransferasa

NAcGal

Fuc
5

Gal

4
3

enlace alfa 1-4

ANTGENO A
(H 2)

1
6

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

Gal
l

Fuc
5

1,3 Galactosiltransferasa Gal

enlace alfa 1-4

ANTGENO B
(H 2)

NAcGlc

1
2

NHCOH3

Gal
Glu

FENOTIPO
FRECUENCIA

A1
A2
80%
20%
SUST PRECURSORA
H1
H1
(tipo II)
H2
H2
H3
H4
SITIOS ANTIGNICOS 850,000
240,000
ANTICUERPOS (SUERO) ANTI-B
ANTI-B
ANTI-A1(3 %)

GRUPO O POR MUTACIN

Se han aislado los ADN de las enzimas responsables de
la biosntesis de los antgenos sanguneos.
Dos aminocidos (leucina 266 y glicina 268) hacen a la
enzima A capaz de reconocer la N-acetilgalactosamina.
Dos aminocidos (metionina 266 y alanina 268) hacen a
la enzima capaz de reconocer la galactosa.
Los ADN de las clulas O por mutaciones carecen de la
sntesis de una enzima.
Los grupos O pudieron tener esa prdida por mutacin
de los grupos A y/o B.

Productos codificados por los genes ABO y H

LEWIS
Los grupos sanguneos Lewis a, b, c, d y x, y
derivan respectivamente de las cadenas 1 y 2, por
adicin de una fucosa, o de un cido silico en los
derivados sialilados
Su presencia depende de la naturaleza de la cadena
oligosacrida bsica, de las enzimas presentes en
una clula dada y de otros parmetros genticos del
sujeto
La cadena tipo 1 est presente en mayor parte en los
epitelios secretores
La cadena tipo 2 est presente en los glbulos rojos
y en otras clulas sanguneas y epiteliales

SISTEMA ABO
Y LEWIS

Le(b)

Le(a)

enzima HE

antgeno B

enzima Le

Gen Se

enzima B

tipo 1
enzima H1

Le(c)

antgeno H
Le(d)

antgeno A

enzima Le

SLe(a)

SISTEMA ABO
Y LEWIS

Le(y)

antgeno B

antgeno A

enzima X

enzima X

enzima Hll

enzima B

enzima A

tipo 2

antgeno A2
enzima A1

enzima ST

enzima X

SLe(x)

antgeno A1

GENES SE Y se
75% Excretan antgenos A, B y H en leche, saliva, jugo
gstrico, esperma, etc.. Se les dice Secretores
La secrecin est relacionada con la presencia de un Se,
en secretores y se, en los no secretores
El gen Se dirige la produccin de una fucosiltransferasa
especfica de la cadena tipo 1. Mientras que otro gen H
proporciona la enzima especfica de la cadena de tipo 2
El estado de secrecin y no secrecin influye en la
distribucin de los grupos Lewis
Por ejemplo, los antgenos Le(a) o Le(c) estn en los no
secretores (25 al 30%). Los antgenos Le(b) o Le(d) estn
en los secretores (70 al 75%)

ANTICUERPOS
Los anticuerpos son glucoprotenas secretadas
por las clulas plasmticas, que reciben
colectivamente el nombre de inmunoglobulinas
(abreviadamente Ig)
La especificidad de estas protenas ante los
diferentes antgenos es semejante a la de la
enzima con respecto a su sustrato
Los anticuerpos circulan por la sangre y
penetran en los fluidos corporales donde se
unen especficamente al antgeno que provoc
su formacin

ESTRUCTURA
Las inmunoglobulinas son molculas que tienen forma
de Y constituida por cuatro cadenas polipeptdicas
iguales dos a dos. Dos cadenas pesadas o cadenas H
(del ingls heavy) y dos cadenas ligeras o cadenas L
(light) de menor peso molecular. Las uniones entre las
cadenas se hacen mediante puentes disulfuros (-S-S-)
Las zonas amino terminales de las cadenas H y L
constituyen las regiones variables cuya secuencia de
aminocidos es especfica de cada anticuerpo (por ellas
se unen a los antgenos)
La porcin carboxilo terminales corresponden a las
regiones constantes, que varan muy poco dentro de
cada tipo de inmunoglobulina

Alotipos de las inmunoglobulinas (Grupos GM)

ANTICUERPOS
TIPOS

% EN
SUERO

FUNCIN

LOCALIZACIN

Ig G

80

Pueden atravesar la placenta y pasar al

embrin. Facilita la fagocitosis.

Sangre y leche
materna

5 - 10

Son los primeros que se producen ante

la presencia de antgenos.
Facilita la fagocitosis y la lisis celular.

Suero y membrana
de los linfocitos B

10 - 15

Protege las cavidades externas del

cuerpo.

Saliva, lgrimas,
mucus respiratorio,
leche, etc.

Su funcin es poco conocida. Se cree

que estimula a los linfocitos B a
producir anticuerpo.

Membranas de los
linfocitos B

Interviene en las infecciones

parasitarias y en fenmenos alrgicos.

Piel

Ig M

Ig A

Ig D

Ig E

< 1

Reacciones antgeno-anticuerpo
Tanto la respuesta humoral como la celular suponen el
reconocimiento de determinadas estructuras qumicas en la
superficie de macromolculas extraas, los antgenos. Las
zonas del antgeno que se unen especficamente con el
anticuerpo o con el receptor de un linfocito, se denominan
determinantes antignicos
Cada antgeno puede presentar varios determinantes
antignicos diferentes que estimulan la produccin de
anticuerpos y la repuesta de los linfocitos T. Estas estructuras
qumicas, los determinantes antignicos, son los
responsables de la especificidad de la respuesta inmunitaria
Cuando se ponen en contacto un antgeno con el anticuerpo
especfico, reaccionan unindose mediante un enlace no
covalente y se desencadenan una serie de procesos capaces
de neutralizarlo y eliminarlo
La combinacin del anticuerpo con el antgeno desencadena
una serie de procesos capaces de neutralizar y eliminar a una
sustancia extraa

Reacciones ms importantes
Precipitacin
Aglutinacin
Neutralizacin
Opsonizacin

Precipitacin
Al unirse antgenos y anticuerpos solubles forman
agregados insolubles que precipitan, lo que inactiva a
los antgenos.

Aglutinacin
El anticuerpo se une a antgenos situados en la superficie de
una clula. Como los anticuerpos tienen dos puntos de unin,
los microorganismos forman agregados y ya no pueden infectar
otras las clulas
La hemoaglutinacin se produce entre los anticuerpos del
plasma sanguneo y los antgenos de los glbulos rojos de la
sangre de diferente grupo sanguneo. Esta prueba es
fundamental en la determinacin de los grupos sanguneos
ABO

Neutralizacin
La unin del anticuerpo bloquea la accin de los
antgenos contra la clula. As, los antgenos no se
pueden unir a las clulas y matarlas

Opsonizacin
Producida por unos anticuerpos especiales (opsoninas),
que se fijan sobre la superficie del antgeno facilitando la
accin de clulas fagocitaras y clulas asesinas
naturales (NK)

DETERMINACIONES
TRANSFUSIONALES
Los mdicos necesitan conocer el tipo de sangre de una persona
cuando se van a someter a una transfusin de sangre o a un
trasplante, debido a que no todos los tipos de sangre son compatibles
entre s.
Por ejemplo:
Si una persona tiene sangre tipo A, nicamente puede recibir sangre
tipo A y tipo O.
Si una persona tiene sangre tipo B, nicamente puede recibir sangre
tipo B y tipo O.
Si una persona tiene sangre tipo AB, nicamente puede recibir
sangre tipo A, B, AB y O.
Si una persona tiene sangre tipo O, nicamente puede recibir sangre
tipo O.
La sangre tipo O se le puede dar a alguien con cualquier tipo de
sangre, razn por la cual este tipo de personas son llamadas
donantes universales.

GRUPO SANGUNEO AB0

La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con
el sistema ABO
Este mtodo separa los tipos de sangre en
cuatro categoras:
Tipo A
Tipo B
Tipo AB
Tipo O
El tipo de sangre (o grupo sanguneo) de una
persona tambin depende de lo que ha
heredado de sus padres.

Donantes: 6 346

Grupo
sanguneo

3 096

48,79

2 231

35,15

774

12,20

227

AB

3,58

14

A2B

0,22

A2BHw

0,03

Ael

0,01

Aint

0,01

DETERMINACIN DIRECTA
La sangre se extrae de una vena
El sitio de puncin se limpia con un antisptico
Se coloca una banda elstica
Se introduce una aguja en la vena y se recoge la sangre
Se retira la banda para restablecer la circulacin
La sangre se puede recoger en una pipeta (tubo
pequeo de vidrio), en una lmina portaobjetos, en una
tirilla de examen o en un recipiente pequeo
La sangre de la persona se mezcla con anticuerpos
contra sangre tipo A y tipo B, y la muestra se revisa para
ver si los glbulos sanguneos se pegan o aglutinan.
Si dichos glbulos se aglutinan, eso significa que la
sangre reaccion con uno de los anticuerpos

Valores normales
Si los glbulos sanguneos se pegan o aglutinan
al mezclarse con:
Suero anti-A, la persona posee sangre tipo A.
Suero anti-B, la persona posee sangre tipo B.
Sueros anti-A y anti-B, entonces la persona
posee sangre tipo AB.
Si los glbulos sanguneos no se pegan o
aglutinan cuando se agrega suero anti-A y antiB, la persona tiene sangre tipo O.

DETERMINACIN INVERSA
Si la sangre se aglutina cuando se agregan clulas
B a la muestra, la persona tiene sangre tipo A.
Si la sangre se aglutina cuando se agregan clulas
A a la muestra, la persona tiene sangre tipo B.
Si la sangre se aglutina cuando se agregan ambos
tipos de clulas a la muestra, la persona tiene
sangre tipo O.
La falta de aglutinacin de los glbulos sanguneos
cuando la muestra se mezcla con ambos tipos de
sangre indica que la sangre es tipo AB.

Tipificacin del Rh
Si los glbulos sanguneos se pegan o
aglutinan al mezclarlos con suero antiRh (anti-D), el tipo de sangre es Rh
positivo
Si la sangre no se coagula al mezclarse
con suero anti-Rh, el tipo de sangre es
Rh negativo

IMPORTANCIA
Si una persona es Rh(+), puede recibir sangre Rh(+)
o Rh(-), pero si es Rh(-), nicamente puede recibir
sangre Rh(-)
La determinacin del grupo sanguneo es
especialmente importante durante el embarazo.
Si la madre posee sangre Rh negativa, entonces el
padre tambin debe ser evaluado
Si el padre tiene sangre Rh positiva, entonces la
madre necesita recibir un tratamiento para ayudar a
prevenir el desarrollo de sustancias que le pueden
hacer dao al feto

D
R
AB+
ABA+
AB+
BO+
O-

O-

O+

B-

B+

A-

A+

AB-

AB+

X
X
X
X
X
X
X
X

X
X

X
X
X
X

X
X

X
X
X

X
X

CONSIDERACIONES
Muchos antgenos menores no se detectan
rutinariamente durante la determinacin del
grupo sanguneo
Si no se detectan, la persona puede
experimentar una reaccin al recibir ciertos tipos
de sangre
Un proceso llamado pruebas cruzadas, seguido
de una prueba de Coombs, puede ayudar a
detectar estos antgenos menores
Adems se puede estudiar el factor DU o Rh(+)
dbil.

Hemlisis
La hemlisis (eritrocateresis) es el fenmeno de
la desintegracin de los eritrocitos (glbulos
rojos o hemates)
En determinadas situaciones patolgicas hay un
aumento de la destruccin de los eritrocitos intra
o extravascular, como consecuencia de:
unin antgeno-anticuerpo (reaccin
transfusional,), de lesiones mecnicas (como en
el fallo de las prtesis valvular cardiaca)
trastornos osmticos
trastornos enzimticos
trastornos txicos
alteraciones congnitas de los eritrocitos (en
anomalas de la hemoglobina o en infecciones)

Hemoaglutinacin directa
Mientras que el entrecruzamiento de los antgenos
proteicos multivalentes con el anticuerpo produce una
precipitacin, la interrelacin entre clulas o partculas
de gran tamao con los anticuerpos dirigidos contra los
antgenos de superficie conducen a una aglutinacin
Dado que la mayora de las clulas poseen cargas
elctricas, se requiere una cantidad razonable de
anticuerpos entre dos clulas antes de que se supere la
repulsin mutua con un reactivo antiglobulina
La presencia de antgenos en la superficie de los
glbulos rojos se puede detectar por la
hemoaglutinacin producida cuando se aade un
antisuero con anticuerpos frente a dichos antgenos

Testdirectodeaglutinacin

Eritrocitosaglutinados

TestindirectodeCoombs

Anticuerpos

Eritrocitos

Antiglobulina

Test de
Commbs

2 GOTAS HR
5 % EN SS

2 GOTAS HR
5 % EN SS

2-3 GOTAS SR

ALBMINA
2 GOTAS

2 GOTAS anti D

ALBMINA
2 GOTAS

37 C 15 minutos
Hemantgenos
I, II y III

1 GOTA

Determinacin
de Du

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

lavado

Tamb. 30 minutos
37 C 15 minutos

Determinacin
de anticuerpos
irregulares.
Test de
Coombs
Indirecto

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE
lavado

2 GOTAS anti IgG-C3d

COMPATIBLE

1 GOTA Control Coombs

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

centrifugar
resuspender

COMPATIBLE

inconcluyente

2 GOTAS SR

1 GOTA HD

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

salino inmediato

2 GOTAS albmina

PRUEBA CRUZADA
MAYOR EN TUBO

centrifugar
resuspender

albmina inmediata

37 C
albmina incubada

INCOMPATIBLE

30 minutos

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

lavado

2 GOTAS anti IgG-C3d

COMPATIBLE

1 GOTA Control Coombs

centrifugar
resuspender

INCOMPATIBLE

centrifugar
resuspender

COMPATIBLE

inconcluyente