Instituto Politcnico Nacional

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIA BIOLGICAS

Seccin de Qumica Orgnica
Laboratorio de Qumica Orgnica para Ingenieros en Bioqumica

Prctica 12. Hidrlisis de una protena y ensayos para Protenas y

Aminocidos
Fecha de realizacin: 02/06/2015

Grupo:2IM2

Seccin: 2
Nmero de equipo: 18
Nombres de los integrantes del equipo:

Canova Ortega Sharon Michel

Prez Domnguez Citlali Yamile

OBJETIVOS:
Objetivo General:
Efectuar la hidrlisis total de una protena
Objetivos Particulares:
Identificar algunos aminocidos presentes en un hidrolizado de protena, por medio de sus
propiedades fsico-qumicas
Identificar por cromatografa en placa fina algunos de los aminocidos presentes en un
hidrolizado de protena.

RESULTADOS Y DISCUSIN

Observaciones:
Resultados:
1. Reaccin Xantoproteca
Reaccin General

Mecanismo

SUSTRATO
Solucin
A
Solucin
D

OBSERVACIONES
Este tubo no cambi su coloracin, prueba (-)
El tubo se torn color amarillo, prueba (+)

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2. Reaccin de Precipitacin
Reaccin General

Mecanismo

SUSTRATO
Solucin
A
Solucin
D

OBSERVACIONES
No hubo cambio de coloracin en el tubo, prueba (-)
Se form un precipitado negro, prueba (+)

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3. Reaccin de Biuret
Reaccin General

SUSTRATO
Agua
destilada
Solucin A

Solucin C
Solucin D

4.

OBSERVACIONES
En el agua destilada no hubo cambio de coloracin solo
se aprecia la intensificacin del color con el NaOH, y
esto sirve como testigo Prueba (-)
En el tubo 4 y 6 no hubo cambio de coloracin aun
cuando se agrego NaOH el cambio fue muy tenue, tal
como se puede apreciar en la imagen, prueba (-)
El tubo 2 si present cambio de coloracin, prueba (+)
Esta prueba fue positiva en el tubo 3 y en el 5 se
agrego NaOH para intensificar la coloracin , prueba
(+)

Reaccin con Ninhidrina

Reaccin General
Mecanismo
SUSTRATO
Agua
destilada
Solucin B
Solucin C
Solucin D
Solucin
Aminocido
Patrn

OBSERVACIONES
No hubo cambio de coloracin, prueba (-)
Cambio a color vire purpura, pero tard en cambiar ,
prueba (+)
No present cambio de coloracin, prueba (-)
Cambio a color prpura, fue mas rpido que el tubo 2,
prueba (+)
Fue donde se intensifico mas la coloracin purpura,
prueba (+)

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5.

Reaccin con cido Nitroso

Reaccin General

Mecanismo
SUSTRATO
Agua
destilada
Solucin A
Solucin C
Solucin D

OBSERVACIONES
No hubo desprendimiento de burbujas, prueba (-)
Se puede apreciar un ligero burbujeo y cambio de
coloracin
Se puede apreciar ligero burbujeo pero no hay cambio
de coloracin
Burbujeo bastante notorio, prueba (+)

6. Accin Reguladora de Aminocidos

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Solucin
Agua destilada
Solucin B
Gotas NaOH 0.1N
Agua Destilada
Solucin B

Indicador
Rojo Congo
Rojo Congo

Color Inicial
Naranja
Amarillo

Gotas HCl 0.1N

1 gota
5 gotas

Color Final
Morado
Morado

Fenolftalena
0.1%
Fenolftalena
0.1%

Incoloro

1 gota

Rosa

Incoloro

1 gota

Rosa

7. Cromatografa en placa fina

Solucin B
Mancha No.1
Mancha No.2
Mancha No.3
Mancha No.4
Aminocido Patrn
1. Fenilalanina
2. Valina
3. Alanina

Discusin
El
cido
reacciona

Frente del Disolvente

4.1
4.1
4.1
4.1

Frente de la Mancha
2.2
1.25
1.05
0.6

Relacin de frente
0.53
0.30
0.256
0.146
.70
.29
.26

de

resultados:
ntrico
(HNO3)
con
el
radical fenilo de los
aminocidos de la
albmina,
radical
que
se
transforma
en
hidroxi-benceno, que da el color
amarillo
caracterstico de esta reaccin, debido a la formacin de
un compuesto aromtico nitrado, por medio de sustitucin nucleoflica, lo que
indica la presencia de protenas con aminocidos portadores de anillos aromticos.
Con la reaccin xantoproteica tuvimos un color amarillento como lo cita Guarnizo
(2003), esto nos quiere decir que en la reaccin se produjo un resultado positivo en
las protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos, especialmente
con presencia de tirosina
Los enlaces peptdicos se hidrolizan con facilidad al calentarse, es por eso que se
someti el tubo de ensayo con ovoalbmina e hidrxido de sodio a bao Mara. La
mezcla de la protena con hidrxido de sodio form una precipitacin lechosa tal
como se observa en la figura 7, la reaccin sucedida se describe a continuacin: RSH + 2 NaOH
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R-OH + SNa2 + H2O La ecuacin nos muestra que el hidrxido de sodio reacciona
con el aminocido correspondiente (metionina o cistena) separando el azufre que
ste contiene, cuando agregamos las gotas de acetato de plomo, observamos el
cambio de color en la muestra de protena, mientras que en el agua permaneci
incoloro. Este cambio de color se debe a la formacin de un precipitado de aspecto
negruzco llamado sulfuro de plomo, el cual fue el producto final de la reaccin de
ovoalbmina con hidrxido de sodio y acetato de plomo. De esta manera se pudo
comprobar que la ovoalbmina contiene aminocidos azufrados (cistena o
metionina). Por medio de la reaccin para compuestos azufrados tuvimos un color
negruzco, esto nos indica que la reaccin tiene en su composicin aminocidos con
azufre tal como lo cita Flanzy (2003), estos aminocidos son la metionina y la
cistena
Anexos: Cuestionarios experimentales que son una gua para poder interpretar los resultados de la
prctica. (1.5 Puntos)
CONCLUSIONES

Detallar si se cumpli con el objetivo del experimento. Especificar qu se aprendi y puedes

agregar si te sera de utilidad cuando trabajes en la industria o en investigacin y explicar por
qu. En las conclusiones aterrizan las observaciones en la teora y son de carcter
cientfico y acadmico. .(2.0 Puntos)

BIBLIOGRAFA DE CONSULTA:
Medios impresos: Apellido del autor editor, Inciales del nombre del mismo; "Nombre del libro o
enciclopedia"; Edicin; Editorial; Lugar; Volumen; Paginas; (Ao).
Medios electrnicos: Apellido del autor editor (si est disponible), Inciales del nombre del mismo (si
est disponible); "Ttulo de la pgina"; Organizacin o individuo que mantiene la pgina; Direccin
absoluta (URL) de Internet .(1.0 Punto)

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