Gua de Manejo del Microscopio Confocal Leica TCS-SP5

Microscopio Leica DMI6000

Filtros Disponibles para epifluorescencia:
1 - A: Excitacin 340-380nm / Emisin 425 (DAPI)
2 I3: Excitacin 450-490nm / Emisin 515 (FITC, GFP)
3 N2.1: Excitacin 515-560nm / Emisin 590nm (TRITC, Cy3, Texas Red)
Objetivos Disponibles:

20X NA 0.70 INMERSIN EN AGUA / GLICEROL /ACEITE

63X NA 1.42 INMERSIN EN ACEITE

Lseres Disponibles
Argn 488nm: 458/476/488/496/514
HeNe 543nm
HeNe 594nm
HeNe 633nm
IZQUIERDA

Tornillo de ajuste de foco

TL/IL: switch entre luz transmitida y luz incidente

AP: diafragma de apertura

FD: diafragma de campo

INT: intensidad de luz transmitida

Change CS: cambia de confocal a epifluorescencia

Cube: cambia los filtros

Chg TL: cambia luz transmitida

Fluo: Cambia a epifluorescencia

DERECHA

Tornillo de ajuste de foco

Brazo para mover la platina

Change Obj: cambia objetivos

Z fine/coarse

Z set
PARTE DELANTERA
Panel de Control

Shutter

Filtros

Botones circulares con bombita: regula intensidad de la luz blanca

Botones FOCUS: ajuste de foco

PROGRAMA LASAF
CONFIGURATION:

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Lser: Encender lo lseres a utilizar.

El lser de Argn (488) se debe marcar, esperar 1-2 minutos y luego subir la
potencia hasta 30-40%.
Settings: Marcar la opcin line average during live acquisition.
ACQUIRE:
Beam Path Settings: - Activar Visible
- Control de potencia de lasers
- Sliders AOBS
- Voltage PMT (se sugiere empezar en 800V)
Acquisition: -

Scan mode (xyz, xzy, xt, xyt, xyzt, etc.)

Resolucin (256x256, 512x512, 1024x1024, etc)
Z stack
Secuencial Scan
Line Average / Frame Average
Zoom

EXPERIMENTS
Esta pestaa genera una carpeta Experiment en donde se van generando archivos
de todas las imgenes obtenidas, ya sea un stack o una captura simple, y permite:
renombrar, borrar, exportar (tiff, jpg o avi) y guardar los cambios.
PROCESS
Esta pestaa permite hacer anlisis sobre las imgenes generadas y tiene
herramientas tales como: - Edit (crop, resize, combine, merge)
- Adjust
- Noise Reduction
- Segmentation
- Visualization
- Dye Separation
- 3D reconstruction

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