Reporte cientfico

Introduccin
Toxina antrxica
Bacillus
anthracis es
una especie del gnero de bacterias Gram
positivas Bacillus. La bacteria
fue identificada simultnea e
independientemente
por
primera
vez
por Aloys
Pollender,
en Alemania,
y
en Francia por Pierre
Rayer y Casimir Davaine. Fue
la
primera
bacteria
con
demostracin
patgena
demostrada
de
forma
concluyente
en
1877
por Robert Koch, quien tambin
logr
su
cultivo
y
el
descubrimiento del fenmeno
de esporulacin.1 El nombre de
la especie, anthracis, proviene del griego anthrakis(), "carbn", y se
refiere al carbunco cutneo, la patologa ms comn producida por la bacteria,
en el cual se forma una gran lesin negra en la piel. El carbunco es
una zoonosis que afecta tanto a humanos como a animales; segn la va de
infeccin se clasifica en tres tipos: carbunco cutneo, pulmonar y digestivo. 2

Estructura de la protena CapD del Bacillus anthracis.

A diferencia de la mayor parte de las especies del gnero, Bacillus anthracis es
inmvil y capsulada. La endospora caracterstica de Bacillus es de forma
redondeada y de situacin central, sin deformar la clula. Cada clula mide
entre 1 y 6 m. Las esporas son muy resistentes a la temperatura y a los
desinfectantes qumicos, aunque se muestran muy sensibles a la penicilina. Es
frecuente
encontrar esporas en
productos
derivados
de
animales
como lana opienso. El proceso de esporulacin se realiza siempre fuera del
animal infectado. Las esporas se transforman en la forma vegetativa en medios
favorables como la sangre y otros tejidos biolgicos, ya sea animales o
humanos, en particular ricos en aminocidos, nucletidos y en glucosa.
El Bacillus anthracis es un organismo aerobio.

Desarrollo

Las esporas suelen encontrarse en suelos alcalinos, y se cree que la

germinacin est relacionada con cambios bruscos de temperatura. Las
bacterias penetran a travs de heridas (carbunco cutneo), va oral (carbunco
gastrointestinal) o por inhalacin (carbunco inhalatorio), y ste ltimo es el
ms grave. Una vez dentro del husped, las bacterias se difunden y se
multiplican en los ganglios linfticos hasta que alcanzan el torrente sanguneo.

Estructura del Bacillus anthracis.

En condiciones de estrs ambiental, las bacterias de B. anthracis naturalmente
producen endosporas, los cuales descansan en la tierra y pueden sobrevivir por
dcadas. Cuando son ingeridas por vacas, por ovejas o por otros herbvoros, la
bacteria comienza a reproducirse dentro del animal, y puede llegar a
provocarle la muerte, para luego continuar reproducindose en el cuerpo sin
vida. Una vez que los nutrientes se agotan, se producen nuevas esporas y
el ciclo de vida se repite.4
La accin patgena del Bacillus anthracis est mediada principalmente por dos
factores de virulencia:

Sustancia
P:
un polipptido cpsular,
compuesto
por polmeros de cido D-glutmico. Tiene propiedades antifagocitarias,
lo
que
promueve
la
invasin
bacteriana.
De
hecho,
las cepas acapsuladas no son virulentas.

Factor B: una exotoxina de naturaleza proteica, responsable de los

sntomas clnicos.5 Son tres constituyentes proticos en la toxina del
bacilo: el antgeno protector, sin el que la toxina no causa efectos;
el factor
edematoso,
una adenilciclasa dependiente
de
la calmodulina que
aumenta
las
concentraciones
de adenosn
monofosfato cclico (AMPc) con la consiguiente alteracin de la
homeostasis
del
agua,
que
causa edema;
y
el factor
letal, metaloproteinasa con zinc que inhibe la va MAPK, lo que provoca
la muerte sbita. La deficiencia de estos elementos proticos reduce la
virulencia del organismo en un factor de 1000. Existe tambin un factor

A antignico pero carece de importancia inmunolgica ya que no

genera anticuerpos.
Estas protenas son codificadas por el plsmido pXO1 (182 kb) y el plsmido
pXO2 (95 kb). El plsmido pXO1 contiene los genes lef, cya y pag, que codifican
para la toxina fraccin letal, la fraccin edematosa y el factor protector. El
plsmido pXO2 contiene los genes capA, capB y capC, necesarios para la
formacin de la cpsula.6
El organismo puede cultivarse en medios de cultivo con nutrientes ordinarios
en condiciones tanto aerbicas como anaerbicas. Las infecciones con B.
anthracis se pueden tratar con penicilina y con otros antibiticos activos en
contra de las infecciones con bacterias Gram positivas.
Agente etiolgico

El ntrax es una enfermedad infecciosa aguda causada por Bacillus anthracis,

una bacteria Gram positiva, aerobia formadora de endoesporas, encapsulada,
que puede cultivarse en medio ordinario. La clula vegetativa es grande (1-8
m en longitud, 1-1.5 m en anchura). el tamao de la Espora es
aproximadamente 1 m. Las esporas crecen rpidamente en todos los medios
de cultivo ordinarios de laboratorio a 37C.

Su morfologa celular y colonial permite su identificacin por un microbilogo

experimentado, aunque pocos microbilogos fuera de la comunidad veterinaria
han visto colonias del ntrax mas que en libros de texto.
Los tres factores de virulencia son: la toxina del edema, la toxina letal y un
antgeno capsular.
Etimologa : Anthracis deriva de la palabra griega para carbn, anthrakis,
porque la enfermedad causa lesiones superficiales negras como el carbn.

Patogenicidad

No se reconocieron las propiedades toxicas de B. anthracis hasta 1954.

Anteriormente, debido al tremendo nmero de bacterias observado en sangre
de animales infectados (>109 bacteria/ml), se supona que la muerte era
debida a la obstruccin capilar.

Pero experimentalmente se demostr que slo aproximadamente 3 millones

de clulas/ml son necesarias para causar la muerte del animal. Adems, el
plasma de clulas de animales infectados tiene una toxina que causa los
sntomas del ntrax cuando es inyectada en los conejos normales. De estas
observaciones se deduce que una exotoxina juega un papel importante en la
patognicidad del ntrax.
Cepas: Hay dos variantes coloniales Liso (S) a spero (R) que estn
relacionadas con la habilidad de formar la cpsula. Las variantes de R son
relativamente avirulentas.
La cpsula no es toxica, acta como proteccin contra la fagocitosis, y juega
su papel ms importante durante el establecimiento de la infeccin, y un papel
menos significante en las fases terminales de la enfermedad que es mediada
por la toxina del ntrax.
Un componente de la toxina del ntrax tiene un modo de accin letal no
descubierto en este momento. La muerte es aparentemente debida a la falta
de oxigeno, shock secundario, permeabilidad vascular aumentada, fallo
respiratorio y fallo cardaco. La muerte en humanos y en animales
experimentales frecuentemente ocurre de repente e inesperadamente.

Modo de transmisin

Los modos de transmisin del ntrax en situaciones normales son:

El Cutneo por contacto con tejidos de animales (ganado, oveja, cabras,

caballos, cerdos y otros) infectados, por contacto con pelo contaminado,
lana, o los productos fabricados con ellos, como tambores, cepillos o
alfombras, o por contacto con tierra asociada con animales infectados.
Los artculos y tierra contaminadas con esporas pueden seguir siendo
infectivos durante dcadas.
El ntrax por inhalacin es el resultado de la inhalacin de esporas en
procesos industriales arriesgados, como curtir pieles y procesar lana.
El ntrax intestinal se debe a la ingestin de carne sin cocinar
contaminada; no hay ninguna evidencia que la leche de los animales
infectados transmita ntrax.

La transmisin de persona a persona es muy rara.

Existe una variacin considerable en la susceptibilidad gentica al ntrax
entre las especies animales. Los animales resistentes entran en dos grupos: (1)

resistente al establecimiento de ntrax pero sensible a la toxina y (2) resistente

a la toxina pero susceptible al establecimiento de enfermedad.
Los animales que sobreviven al ntrax adquirido naturalmente son inmunes a
la reinfeccin. Segundos ataques son sumamente raros. La inmunidad
permanente al ntrax parece requerir anticuerpos a la toxina y al polipptido
capsular, pero la importancia relativa de los dos tipos de anticuerpos parece
variar ampliamente en animales diferentes.

Clnica
El ntrax humano tiene tres formas clnicas: cutnea, por inhalacin, y
gastrointestinal.
El ntrax cutneo resulta de la introduccin de la espora a travs de la piel; el
ntrax de la inhalacin es a travs del tracto respiratorio, y el ntrax
gastrointestinal por ingestin.

En el cutneo primero se produce picor superficial en la zona donde se produce

la penetracin, seguido por una lesin que se vuelve papular, despus
vesicular y en 2-6 das desarrolla un chancro negro deprimido. El chancro
normalmente se rodea por un edema de moderado a severo y muy extenso, a
veces con vesculas secundarias pequeas.
Las infecciones no tratadas pueden extenderse a los nodos de la linfa
regionales y al torrente sanguneo con una septicemia aplastante. El ntrax
cutneo no tratado tiene una proporcin de muertes entre el 5% y el 20%,
pero con terapia antibitica eficaz, ocurren pocas muertes.

Los sntomas iniciales del ntrax por inhalacin son apacibles y no especficos y
pueden incluir fiebre, malestar y tos apacible o dolor del pecho; los sntomas
agudos de dolor respiratorio, fiebre y shock aparecen en 3-5 das,
producindose la muerte rpidamente despus de esto.
El ntrax pulmonar se adquiere inhalando esporas del bacilo que son lo
suficientemente pequeas como para penetrar muy adentro en los pulmones,
aparece despus de la rpida multiplicacin de las esporas en los ganglios
linfticos del mediastino. Se desarrolla una linfadenitis hemorrgica necrosante
severa que se extiende por las estructuras mediastnicas adyacentes. Hay
trasudado serosanguinolento, edema pulmonar y derrame pleural. Los
sntomas iniciales son insidiosos . Al principio, la enfermedad tiene sntomas
parecidos a los de una gripe severa: tos, dolor muscular, de cabeza y de pecho;
luego la enfermedad se torna ms severa, hasta producir un estado de shock
en el cual muere el 95% de los afectados. La radiografa de trax muestra una
infiltracin difusa en placas; el mediastino se encuentra ensanchado a causa
de las adenomegalias hemorrgicas. La enfermedad slo puede controlarse si
se empieza un tratamiento drstico con antibiticos dentro de las primeras 48
horas de iniciarse los sntomas. Sin embargo, debido a que en sus primeras
etapas la enfermedad es difcil de diagnosticar, generalmente los afectados
pocas veces reciben el tratamiento oportuno.
El ntrax intestinal es raro y ms difcil reconocer.
La confirmacin de laboratorio se hace por aislamiento de B. anthracis de la
sangre, lesiones superficiales, o las secreciones respiratorias mediante tincin
con azul de metileno (M'Fadyean), o por cultivo o inoculacin en ratones, o
conejos. Se puede realizar la identificacin rpida del organismo por
immunodiagnstico, ELISA y PCR.

Diagnstico.

La historia clnica, que incluya la profesin del paciente y el contacto con

posibles animales enfermos, es fundamental. En el carbunco cutneo la lesin
descrita es altamente sospechosa del cuadro. Se debe obtener una muestra a
partir de la serosidad o del lquido de las vesculas y someterla a una tincin
para observar los tpicos bacilos antes descritos. Puede emplearse una tincin
de Gram con anticuerpos fluorescentes. En todos los casos hay que realizar un
cultivo en medios habituales para comprobar que estos bacilos esporulados
son aerobios, inmviles, capsulados, se lisan por fagos especficos (g, W y L) y
producen un poder patgeno experimental en el cobayo. Todo ello diferencia a
B. anthracis de las numerosas especies saprofitas del gnero Bacillus,
denominadas "antracoides". De la misma forma se deben procesar las
muestras de esputo, lquido pleural, vmitos, heces, LCR y sangre (el
hemocultivo se har sistemticamente), segn las sospechas del cuadro
clnico.
El diagnstico indirecto mediante microhemaglutinacin en muestras dobles
de suero permite comprobar el aumento del ttulo de anticuerpos, que por otra
parte puede estar elevado en individuos recin vacunados.

Tratamiento.

El antibitico de eleccin es la penicilina G, que debe administrarse lo ms

precozmente posible, en dosis de 2-3 millones de unidades, cada 4-6 horas, al
menos durante 7 das, tambien son utiles los macrolidos y quinolonas como la
criprofloxacina. Si el cuadro es grave o se trata de localizaciones no cutneas,

como el ntrax pulmonar, un tratamiento i.v. precoz con 20 millones U/d de

penicilina G puede salvar la vida del paciente. Este frmaco se ha utilizado en
combinacin con la estreptomicina, a dosis de 500 mg i.m. c 8 h en los adultos
y de 25 mg/kg/d en los nios. Los corticoides podran tener alguna utilidad,
pero no se han evaluado adecuadamente. Si el tratamiento fracasa, en general
a causa de un error diagnstico, es probable que sobrevenga la muerte del
paciente.

Profilaxis.
Las mejores medidas para la prevencin de la enfermedad en los individuos
expuestos son la proteccin de piel y mucosas y la vacunacin. Es importante
el uso de guantes y mascarillas, para lo cual se requiere una educacin
sanitaria.

Vacunacin

La vacuna, realizada con el antgeno protector purificado, requiere tres

inyecciones subcutneas de 0,5 mL con 2 semanas de intervalo, y una dosis de
recuerdo anual.
Vacunas compuestas del bacilo muerto y/o los antgenos capsulares no
producen inmunidad. La cadena externa de B. anthracis produce cantidades
subletales de la toxina que induce la formacin del anticuerpo proteccionista.
La vacuna del ntrax para humanos que se usa en EE.UU. es una preparacin
del antgeno proteccionista recuperada del filtrado de un cultivo avirulento. El
producto final contiene no ms de 2.4 mg de hidrxido de aluminio
Actualmente la vacuna del ntrax se fabrica y es distribuida por BioPort
Corporation, Lansing, Michigan, bajo contrato con el
departamento de
Defensa, y se producen slo cantidades pequeas disponibles para individuos
que estn expuestos al ntrax en su ambiente de trabajo
La vacuna est indicada para individuos que entran contacto en el lugar de
trabajo con pieles de animales importadas, deshuese, carne, lana, pelo animal

(sobre todo el pelo de la cabra) y cerdas; y para individuos comprometidos en

diagnstico o actividades de investigacin que pueden entrar en contacto con
esporas del ntrax, como veterinarios, empleados de laboratorios y a el
personal militar destinado a reas con alto riesgo a la exposicin al organismo
(como cuando se usa como una arma de guerra biolgica).
La vacuna slo debe administrarse a los individuos saludables de 18 a 65 aos
de edad. No se sabe si la vacuna del ntrax puede causar dao fetal, y no
deben vacunarse mujeres embarazadas. La inmunizacin consiste en tres
inyecciones hipodrmicas cada dos semanas, seguidas por tres inyecciones
hipodrmicas adicionales cada 6, 12, y 18 meses. Se exigen inyecciones de
recuerdo anuales de la vacuna para mantener la inmunidad. Y genera una
inmunidad cercana al 93%
Toxina del ntrax es una toxina A/B
Curiosamente, cada protena de la toxina del ntrax individuo es, de hecho, no
txico. Los sntomas txicos no se observan cuando estas protenas se inyectan
individualmente en animales de laboratorio. Sin embargo, la co-inyeccin de PA
y EF causa el edema, y la co-inyeccin de PA y LF es letal. La primera
combinacin se denomina toxina edema, y la ltima combinacin se llama
toxina letal. Por lo tanto la manifestacin de los sntomas fisiolgicos requiere
PA, en cualquiera de los casos.
El requisito PA observado en experimentos animales modelo demuestra un
paradigma comn para las toxinas bacterianas, llamado el paradigma A/B. El
componente A es enzimticamente activa, y el componente B es el
componente de unin celular. La toxina del ntrax, de hecho, es de la forma
A2B, donde las dos enzimas, EF y LF, son los componentes A y PA es el
componente B. Por lo tanto PA acta como un caballo de Troya, que lleva EF y
LF a travs de la membrana plasmtica en el citosol, donde a continuacin,
pueden catalizar reacciones que perturban la fisiologa celular normal.

Conclusin

Toxina del ntrax es una exotoxina de tres protena secretada por cepas

virulentas de la bacteria, el Bacillus anthracis-agente causal del ntrax. La

toxina fue descubierto por Harry Smith en 1954. La toxina del ntrax se
compone de una protena de unin a clulas, conocido como antgeno
protector, y dos componentes enzimticos, llamada factor edema y factor letal.
Estos tres componentes de las protenas actan juntas para impartir sus
efectos fisiolgicos. Complejos ensamblados que contienen los componentes
de la toxina se endocitosis. En el endosoma, los componentes enzimticos de
la toxina translocan en el citoplasma de una clula diana. Una vez en el citosol,
los componentes enzimticos de la toxina interrumpe diversas funciones de las
clulas inmunitarias, es decir, sealizacin celular y la migracin celular. La
toxina puede incluso inducir la lisis celular, como se observa para las clulas de
macrfagos. La toxina del ntrax en ltima instancia, permite que las bacterias
para evadir el sistema inmune, proliferar, y en ltima instancia matar el animal
husped. La investigacin sobre la toxina del ntrax tambin proporciona
informacin sobre la generacin de conjuntos macromoleculares, y en la
translocacin de protenas, la formacin de poros, la endocitosis, y otros
procesos bioqumicos.
El ntrax es una enfermedad causada por el Bacillus anthracis, una bacteria
formadora de esporas, gram positiva, en forma de varilla. La letalidad de la
enfermedad es causada por dos factores principales de virulencia de la
bacteria: la cpsula de cido poliglutmico, que es anti-fagoctica, y la toxina
de la protena tripartita, llaman la toxina del ntrax. Toxina del ntrax es una
mezcla de tres componentes de la protena: antgeno protector, factor de
edema y factor letal.