Biodegradacin de Contaminantes Orgnicos

Peligrosos: Introduccin

Jim Field, Universidad de Arizona, Dpto Ingeniera Qumica y

Medioambiental

http://superfund.pharmacy.arizona.edu/outreach.html

Definiciones de Biodegradacin
Biodegradacin: transformacin catalizada biolgicamente de
un compuesto a formas mas simple
Mineralizacin: transformacin biolgica de un compuesto
orgnico a formas minerales
Cl
p.e. clorofenol a HCl y CO2

Cl- + CO2

OH

Tpicamente el compuesto utilizado como

sustrato primario es mineralizado

Biotransformacin: Transformacin de contaminante por

un proceso biolgico
NO 2
Conversin de trinitrotolueno
a triamino-toluene

O 2N

NH 2

H 2N
NO 2

NH 2

Esquema General de Biodegradacin

Contaminante como Sustrato de Crecimiento (primario):
Sustrato que sirve como fuente primaria de carbono y energa

Definiciones de Biodegradacin
Cosustrato, Cometabolismo: transformacin microbiana de un
compuesto que no sirve como fuente primaria de carbono y energa
p.e. cooxidacin de cloruro de
vinylo con monooxigenasa de
metano MMO

CO2

CH4
MMO
Cl

Otro compuesto sirve como sustrato

primario (p.e. metano)

+ Cl

Aceptor de Electrones: Compuesto que recibe los electrones

de la oxidacin del sustrato primario
Aceptores de electrones
comunes

O2, NO3-, Fe3+, SO42-, CO2

Aceptor de electrones se O2 H2O; NO3- N2; Fe3+ Fe2+;

reduce biolgicamente
SO42- H2S; CO2 CH4

Definiciones de Biodegradacin
Donador de Electrones : El compuesto que dona electrones

(compuesto que se oxida)

Donador de Electrones se
oxida

CH3(CH2)nCH3 CO2

Tpicamente un compuesto orgnico

Ejemplo de reaccin de bioremediacin

Donador de Electrones
oxidacin

CH3(CH2)nCH3 + O2 CO2 + H2O

reduccin
Aceptor de Electrones

Terminologia: Aceptores de Electrones

Respiracin : Aceptor de electrones tiene origen fuera de clula
Respiracin Aerbica: Reaccin biolgica que utiliza oxgeno
como aceptor de electrones
Respiracin Anaerbica: Microorganismos que utilizan otro
aceptor de electrones en lugar de oxgeno
p.e. nitrato, sulfato, CO2 (reaccion anxica o anaerobia)

Fermentacin: El sustrato sirve como donador y aceptor de

electrones (aceptor de electrones es interno)
Primero hay una oxidacin parcial a un producto intermedio oxidado
Despues hay una reduccin del intermedio oxidado para regenerar
los cofactores portadores de electrones

Esquema General de Fermentacin y

Respiracin
Fermentacin
Compuesto orgnico

piruvato

etanol

flujo de electrones

Compuesto
orgnico
parcialmente
oxidado

Compuesto
orgnico
flujo de electrones

flujo de carbn

glucosa

Respiracin

portador de NADH
electrones

O2

H2O

NO3-

N2

SO42-

H2S

CO2

CH4

Compuesto orgnico reducido

anaerbica

flujo de carbn

CO2

Terminologia: Desclorinacin
Desclorinacin Reductiva : Una reaccin biolgica en que un
grupo cloro es reemplazado por un grupo de hidrgeno
La reaccin involucra transferencia de 2 electrones

R-Cl + 2e- + 2H+ R-H + HCl

Halorespiracin: Una reaccin biolgica en que un hidrocarburo
clorado es utilizado como aceptor de electrones (respiracin
anaerobia) para apoyar el crecimiento microbiano
Requiere donadores de electrones simples (p.e. H2)

H2
Cl

Cl
C

Cl

HCl
Cl

H
C

Cl

Cl

E' = 0.57 V

C
Cl

Esquema General de Biodegradacin

Contaminante como Aceptor de Electrones: Sustrato que sirve
como aceptor de electrones de respiracin apoyando crecimiento

Torre de Electrones (Potencial de Reduccin)

Donadores de Electrones

Aceptores de Electrones

Relacin G con E
Potencial de Reduccin Estandardizado (E) se puede utilizar
para calcular el Cambio de Energia Libre de Gibbs
Estandardizado (G)

G' = -n f E
E = E e aceptor - E e donador
f = constante faraday, 96.48 kJ/Ve- eq
n = # equivalentes electrones (e- eq) transferido

Uso Preferencial de Aceptores de Electrones

Segn la Energa Libre Disponible

Esquema de Biodegradacin de Compuestos Xenobiticos

Primero: perdida de carcter xenobitico; Despus: metabolismo tpico

Ruta Alta

Compuesto
Xenobitico

monooxigenasas
dioxigenasas

NH4+, Cl-, SO42-

enzimas
especificas
catabolicas

hidrolasas
dehidrogenasas
amidasas
transferasas

Ruta Baja

Intermediario
Metablico
acceptor de electrones
O2, NO3-, SO42NAD(P)H
ATP
Productos Mineralizados
Celulas, Crecimiento
CO2, H2O

Razones para Resistencia a Biodegradacin 1

Estructura Qumica
Reaccin imposible termodinmicamente
No se forma enlace entre enzima y sustrato (impedimento estrico )
Demasiado grande para acumulacin bacteriana

Biodisponibilidad
Baja solubilidad acuosa
Adsorcin a partculas del suelo
Absorcin a lquidos de fase no acuosos (NAPL)
Contaminacin envejecida

Toxicidad
Directamente o por productos de biotransformacin

Razones por Resistencia a Biodegradacin 2

Competicin con Reaccin Qumica
Polimerizacin oxidativa a compuestos humicos inertes

Factor Ambiental Limitante

Concentracin de sustrato (contaminante) demasiado bajo
Limitacin de nutriente, vitamina , aceptor de electrones o cosustrato
Extremo en temperatura, humedad o pH

Microorganismo o Enzima
Biocatalizador no existe
No enriquecimiento previo de microorganismos en el sitio

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas
Aumento en el numero de grupos atractores de electrones
Tasas disminuyan con el aumento de grupos nitro (R-NO2)
Tasas disminuyan con el aumento de grupos cloro (R-Cl)
Tasas disminuyan con el aumento de grupos azo (R-N=N-R)
Tasas disminuyan con el aumento de grupos sulfonato (R-SO3-)
Eliminacin de Bifeniles
Policlorados (PCBs) en
Lodos Activados como
Funcin de Grado de
Cloracin (Tucker et al
1975)
Cl

Cl

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas (continuacin)
Posicin de grupo sustituyente
Carbn terminal () comparado con carbn o
R
fenoxy
R ==ClCl
or o
phenoxy

COOH

degradacin
lenta
slow degradation

COOH

degradacin
rpida
faster degradation

Ramificacin
Aumento en la ramificacin ---- aumenta la resistencia a
biodegradacin
Alkyl
sulfonatos
lineares
biodegradable

Alkyl
sulfonatos
ramificados
SO3H

poco biodegradable

SO3H

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte I: Tendencias Aerbicas (continuacin)
Peso Molecular de Polmeros No Hidrolizables
Como regla general, los polmeros con peso molecular > 1000- 3000 g/mol
no son transportados al interior de las celulas bacterianas
Ejemplo de plstico
polyethylene

polypropylene

polystyrene

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas
Aumento en el numero de grupos atractores de electrones
aumentan la tasa de biotransformaciones reductivas
Aumentan las tasas con el aumento de grupos nitro (R-NO2)
Aumentan las tasas con el aumento de grupos cloro (R-Cl)
Aumentan las tasas con el aumento de grupos azo (R-N=N-R)
Ejemplo: Nitroaromtico
Tasa de reduccin de
grupo nitro por extractos
de clulas de Vielonella
alcalescens en condiciones
anaerbicas en funcin del
numero de grupos nitro
(McCormick et al 1976)

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)

Ejemplo: Disolvente Clorados

Tasa de descloracin
reductiva de disolventes
clorados en lodo anaerobio
(Van Eekert, 1999)

rate (nmol (g VSS)-1 day-1)

105
104
103
102
101
100
0

# Cl atoms
cloroetanos
clorometanos
cloroetenos

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)
Ejemplo: Aromticos
Clorados
Revisin de Literatura
(Field et al 1995)

Tendencias Generales Estructura-Biodegradacin

Parte II: Tendencias Anaerbicas (continuacin)
Ausencia general de grupos sustituyentes oxigenados
Alcanos no sustituidos son muy resistentes a la biodegradacin
anaerbica (especialmente alcanos con menos de 6 carbonos)
CH 4
m ethane
metano

OH

butane
butano

ethene
eteno

hexadecano
hexadecane

Biodegradacin anaerbica de compuestos aromticos en funcin

del grado de sustitucin
OH
OH

Degradado muy rapido

Degradado aveces

Sin Fase de Latencia

Fase de Latencia Largo

tolueno

pirogalol
OH

COOH
Degradados rapidos

Resistente a Degradacion

Pequeno Fase de Latencia

fenol

benzoato

Anaerobica
benceno

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tipos de Limitaciones en Biodisponibilidad
Compuesto hidrofbico
con baja solubilidad
acuosa
Precipitado en suspensin
Compuesto con Log P
elevado se adsorbe a
partculas del suelo o
sedimento
Adsorcin a partculas de suelo
Compuesto con Log P
elevado se absorbe en
los fases lquidas no
acuosas (NAPL)
Absorcin por NAPL

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tasa de biodegradacin controlada por la tasa de disolucin

rTA = KLa(Cs Cb)

Donde:

Ecuacin de disolucin

rTA = tasa de disolucin (mg L-1 s-1):

KL = coeficiente de transferencia de masas (m s-1)
a = superficie especifica (m2 m-3)
Cs = solubilidad acuosa mxima
Cb = concentracin actual

Se asume que durante la biodegradacin:

Cs-Cb = Cs
es decir, que hay biodegradacion de alta afinidad
Cb se aproxima cero

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

Tasa de biodegradacin controlada por la tasa de disolucin

Concentracin

rTA = KLa(Cs Cb)

concentracin
acuosa de
contaminante

Cintica de
disolucin

produccin de CO2
de contaminante

Tiempo

Biodisponibilidad de Compuestos Hidrofbicos

La Relacin de la Solubilidad Acuosa de Hidrocarburos
Aromticos Policclicos (PAH) con la Biodegradacin de PAH
despus de 1.5 aos de Bioremediacin

Toxicidad de Compuestos Hidrofbicos

Toxicidad a Membranas

Relacin de hidrofobicidad (Log P) y

toxicidad (concentracin causante de
50% inhibicin a metanognesis (50%
IC)) (Sierra et al. 1991)

Definiciones de Bioremediacin
Bioremediacin: La destruccin o transformacin por
microorganismos de contaminantes peligrosos a compuestos
menos peligrosos; con el fin de limpiar un sitio contaminado (u
efluente)
Bioremediacion de Intervencin Tcnica: La biodegradacin o
biotransformacin se estimula por intervencin tcnica
Proveer nutrientes (p.e. N) y aceptores de electrones (p.e. O2), en
algunos casos donadores de electrones o cosustratos
Adicin de surfactantes para aumentar la biodisponibilidad
En algunos casos aadir microorganismos (bioaugmentacin) para
mejorar la biodegradacin

Definiciones de Bioremediacin
Bioremediacin Intrnsica: La biodegradacin o biotransformacin de
compuestos peligrosos sin intervencin tcnica. La tecnologia se limita al
monitoreo y predicciones del procesos naturales.
Tpicamente la ocurrencia de biodegradacin se demuestra en varios
formas independientes
Disminucin de la concentracin de contaminante
Cambio en concentraciones de aceptores de electrones
Aumento de la poblacin microbiana responsable por la degradacin
Los procesos de bioremediacin intrnsicos suelen ser anaerbicos

Atenuacin Natural: El concepto de bioremediacin expandido

para incluir otros procesos naturales adems de la
biodegradacin (dilucin, adsorcin, volatilizacin, reacciones
qumicas)

Bioremediacin de Intervencin Tcnica

comparada con Bioremediacin Intrnsica

Interrelacin de Componentes que Determina

el xito de Bioremediacin
Bioaugmentacin
aadir
microorganismos

d
da
ili
on
sp d )
di
io ida
( B bi l
o

d)
a
lid

bi
a
ad
r
eg
d
io
(B

Surfactantes,
Cosolventes,
Quelatos

Sustrato
(Contaminante)

Microorganismos

Medio Ambiente

(Requisitos Fisiolgicos)

Factores
Ambientales
H2O, T, pH

Nutrientes
N, P,
vitaminas

Aceptores de
electrones
O2, NO3-

Donadores de
Electrones/Cosustratos
H2/CH4

Tipos de Bioremediacin
In Situ: El tratamiento de agua subterrnea o suelo sin excavar.
Tpicamente se trata de la inyeccin de nutrientes y aceptores de
electrones en pozos de infiltracion combinados con pozos de
extraccin para controlar la zona hidrulica
Bioventilacion: Una forma de bioremediacin in situ - Se inyecta
y extrae aire en lugar de agua. Aplicado a zonas vadosas.
Pilas Biolgicas: El tratamiento de suelos en pilas con
suministro activo de aire, humedad y nutrientes. Tpicamente se
aade un material poroso ligero para facilitar la aeracion.
Barreras Biolgicas: Una trinchera para interceptar y tratar una
pluma contaminada. La trinchera se rellena con materiales que
estimulan la actividad biolgica.

In Situ Bioremediacin
Nutrientes, aire y/o aceptor de
electrones alternativos

Descarga

Tratamiento
de agua
Bomba

Pozo de
inyeccin

Tanque de mezcla

Deposito subterrneo con

fuga

Nivel de agua
subterrnea

Flujo de agua subterrnea

Pozo de
extraccin

Bioventilacin

Pila Biolgica

Barrera Biolgica