Enzimas de restriccin

Tijeras Moleculares
Estudiante: Shary Garcia Alvarado
Carrera: Bioquimica y Farmacia
Materia: Gemtica y Biologa Molecular
Docente: Dra. Mireya Ola

ENDONUCLEASAS DE RESTRICCION
En 1968 se purific la primera endonucleasa de restriccin,
la K12 en E coli.
Cortaba fragmentos largos y concretos, por lo que se pens
que reconoca secuencias especficas del ADN.
Se abandon porque aunque reconoca una zona
determinada del ADN, cortaba al ADN a varias Kb de
distancia.
En 1970 se asla otra endonucleasa de restriccin en
Haemophilus influenzae, que reconoce y una secuencia en
un duplex de ADN y la rompe en ese lugar produciendo
fragmentos discretos de longitud y secuencia bien
definidos.

Fenmeno
de
restriccin:
reconocimiento por parte de una
bacteria de un ADN extrao y lisis del
mismo en pequeos fragmentos.
El fenmeno de restriccin se descubri
en E coli, cuando se hizo crecer el
bacterifago lambda. Si la bacteria
crece encontraremos varias colonias por
placa. Si no crece, no encontaremos
colonias.

Son nucleasas que reconocen las molculas de

ADN en sitios determinados, por medio del
reconocimiento de secuencias especficas
Las secuencias de reconocimiento son palindrmicas
Tipos de endonucleasas de restriccin:
tipoI y III: cortan el ADN en sitios poco especficos y
distantes del sitio de reconocimiento
tipo II: cortan las dos hebras de DNA en puntos
equivalentes, muy especficos, dentro de la secuencia
de reconocimiento. Son las ms

Mapa de Restriccin
muestra los sitios de reconocimiento
de enzimas de restriccin.