CICLODEDIVISIONCELULAR

FACTORESQUECONTROLANELCICLO:FACTORESEXTERNOSYFACTORESDIFUSIBLES
INTERFASE
MITOSIS
MEIOSIS
GAMETOGENESIS
ESPERMATOGENESIS
OOGENESIS
FECUNDACION
FORMACIONDELABLASTULA
HOJASEMBRIONARIAS:ECTODERMO,MESODERMOYENDODERMO
HISTOLOGIA
TEJIDOEPITELIAL
TEJIDOCONJUNTIVO
TEJIDOMUSCULAR
TEJIDONERVIOSO
Bibliograa:
CICLOCELULAR
LACELULAG.M.COOPERS
BIOLOGIACELULARYMOLECULARH.LODISH,J.DARNELL
BIOLOGIAMOLECULARDELACELULAB.ALBERTS

El ciclo celular

Pluricelulares:Paraladivisinesimprescindible
ReplicarADN
Segregacindeloscromosomasreplicados
Repartodelmaterialgen>coequita>vamente
Aumentardetamao
Duplicarorgnulos
Reorganizarcitoesqueleto

Sociedadcelular:colec>vidad;unasclulassedividenotrasno;equilibrio
entremuerteydivisin.
NecesidaddeFactoresdeControlenelciclodedivisincelular:

Molculas de Permiso

Go

FORMACIN DE HETEROCARIONTE

AUTORRADIOGRAFIA CON H3-dT

Factores Difusibles del Ciclo de Divisin Celular

Los sucesos del ciclo estn encadenados independientemente.
Factor Activador de la fase S
Factor Inhibidor de la Re-replicacin
Factor de Retraso de la Fase M
Factor Promotor de la Fase M (MPF)
Los tiempos intervalos que median entre sus apariciones durante el ciclo de divisin
celular, determina la longitud de dicho ciclo celular.
Las relaciones causales entre los factores difusibles hacen que los sucesos del
ciclo cromosmico (replicacin-Mitosis) ocurran en un orden fijo:

MPF;

- La clula no puede entrar en fase M hasta que no se produzca

- MPF no puede ser producido hasta que el Factor de Retraso de

Fase M y el
Activador de Fase S no se hayan desactivado;
- El Factor de Retraso de Fase M y el Activador de Fase S no se
desactivan hasta que
la sntesis de ADN haya concluido;
La sntesis de ADN no acaba hasta que todo el DNA haya
terminado de replicar;
- El ADN no comienza a replicar hasta que el bloqueo de la Rereplicacin del ADN
haya sido eliminado mediante el paso de la clula
por Fase M hasta llegar a la fase G1;
- La clula no puede pasar desde la Fase M a G1 hasta que los
cromosomas se hayan segregado en el huso mittico;
Las cromtidas hermanas no se separan hasta que no se
produzca el MPF.
Los procesos del Ciclo Cromosmico estn relacionados entre si a
travs de una Secuencia Dependiente.

Clulas en Fase S

hasta cuando?

hasta cuando?

(MPF)
Oocito de Xenopus leavis

1,5 mm.

Cls. Humanas en metafase

Cls. PtK en interfase

Materiales experimentales que contribuyeron a identificar las molculas clave responsables

de la regulacin del ciclo celular:
Oocitos de sapo, levaduras mutantes y embriones tempranos de erizos de mar
A)1971
Oocitos de Xenopus en G2
Seal hormonal
Entrada en Fase M

G2

factor hormonal
G2

Inyeccin de citoplasma de oocitos estimulados

hormonalmente para su paso a fase M

Entran en Mitosis

Un factor citoplsmico contenido en los oocitos tratados hormonalmente

era suficiente para inducir la transicin de G2 a M.
FACTOR PROMOTOR DE MADURACIN (MPF).
No solo en oocitos, tambin en clulas somticas:

MPF: Regulador General del paso de G2 a M

B)1972: anlisis gentico de levaduras, Saccharomyces cerevisiae (gemacin) y

S. Pombe (fisin)
Levaduras mutantes sensibles a temperatura
Mutantes que se detenan en diferentes puntos del ciclo, denominados cdc (mutantes del
Ciclo de Divisin Celular).
-cdc2: detenidos en G1 y G2/M; requieren protena cdc2 para superarlo. (s.pombe)
-cdc28: detenido en Start; requieren protena cdc28 para superarlo. (s.cerevisiae)
Se aisla el gen cdc2: codifica para una Quinasa; 1 evidencia de fosforilacin de protenas
en la regulacin del ciclo.
Se identifica un gen humano relacionado con cdc2 que es tambin funcional en levaduras:
Conservacin evolutiva.
Se postula que las protenas quinasa son las reguladoras del ciclo,
y se les llama: Kinasas del Ciclo de Divisin : CDK (equivalentes a las cdc).
La nomenclatura de la quinasa cambia con los
conocimientos de su funcin en el ciclo
Cdc= ciclo divisin celular
Cdk= kinasa de ciclo de divisin
Cdk= kinasa dependiente de cilina
Como Cdc2 fue la 1 conocida se llama Cdk1,
mientras las otras identificadas se designan por
Cdk2 hasta Cdk8.

C)1983-1986
Estudios de sntesis de protenas en embriones tempranos de erizos de mar.
Sufren mltiples divisiones mitticas tras la fecundacin.
La entrada en cada mitosis requiere sntesis previa de protenas
Se identifican 2 protenas que mostraban un patrn peridico de acumulacin y
degradacin
Se les llamo CICLINAS.
Se acumulan durante interfase
Se degradan rpidamente, al final de fase M
Se
sugiri
que
eran
Controladores de Mitosis:
- su acumulacin controlara
la Entrada en Fase M
- su degradacin controlara la
Salida de Fase M

1971: Factor Promotor de Maduracin (MPF) que controla el paso a Fase M.

1972: 1 evidencia de Fosforilacin en el Ciclo.- Quinasas de Ciclo de Divisin (Cdk).
1986: Las ciclinas se sintetizan y se destruyen durante el ciclo.
1988: se purifica el MPF y se relaciona con las Quinasas y las Ciclinas

D) 1988
Se Purifica el MPF en Oocitos de ranas
2 subunidades:
Cdc2: Una Quinasa con actividad cataltica dependiente de ciclina.
Ciclina B: subunidad reguladora que se requiere para la actividad cataltica de la
quinasa cdc2 (cdk)
El MPF tiene dos estados, dependiendo de la concentracin de Ciclina B:
. a concentraciones bajas de Ciclina B en la clula, es Inactivo;
. a concentraciones ms alta se vuelve Activo.

La Ciclina B se degradar cuando el MPF est activo y lo har debido a

actividad cataltica que posee la quinasa cdc2 (cdk1).

la

a) En mamferos la sntesis de Ciclina B comienza en fase S, se acumula, y se

une con cdk1 para forma el complejo MPF inactivo, durante S y G2.
b) A medida que se sintetiza ms ciclina se activa el MPF.
c) Se inicia la Fase M, se hacen las pertinentes fosforilaciones y se Activa el
Complejo Promotor de la Anafase.

- cdk1 forma complejo con la ciclina B

durante S y G2, y al formar complejo, cdk1
es fosforilada en la treonina-161, esta
fosforilacin es requerida para la actividad
cataltica (degradacin posterior de la ciclina
B) de cdk1 (cdc2).
- Tambin se fosforila en la tirosina-15 (y
treonina
14
en
vertebrados),
estas
fosforilaciones inhiben la actividad Quinasa
de la cdk1 y lleva a que se acumule
complejo MPF inactivo.
- Llegado cierto umbral de sntesis de Ciclina
B, se activa una Fosfatasa, la cdc25, y
desfosforila a Tirosina 15 (y treonina 14 en
vetebrados). Entrada en Fase M
- Esto hace que se active el MPF y se inicie la Mitosis, fosforilando a diferentes substratos.
Uno de los substratos es la COHESINA, que une cromtidas hermanas, y al fosforilarse se
activa el Complejo Promotor de la Anafase.
Se produce entonces la Degradacin de la Ciclina B debido a la actividad cataltica
de cdk1 (via de la degradacin proteica por ubiquitina-proteasoma).
e) Inactivacin del MPF y desfosforilacin de la treonina 161
por desaparecer la ciclina.
f) Salida de la fase M

fosfatasa
Cdc25

P
P

Complejos
Cdk/ciclina

Fase que
controla

Cdk1/ciclina B

G2

Cdk4/ciclina D

G1

Cdk6/ciclinaD

G1

Cdk2/ciclina E G1/S
Cdk2/
ciclina A S

Complejos Reguladores Ciclina-Cdk

-Factor Promotor de la Mitosis:MPF (Mphase promoting factor):

-Ciclina G1-Cdk: Interviene en el inicio de la fase S

La actividades de las CDKs se regulan por

cuatro mecanismos moleculares

CICLO DE DIVISIN CELULAR

LAS RELACIONES CUSALES ENTRE
LOS FACTORES DIFUSIBLES HACEN
QUE LOS SUCESOS DEL CICLO
CROMOSOMICO* OCURRAN EN UN
ORDEN FIJO
*[REPLICACIONMITOSIS]

- 4 procesos: Crecimiento celular

Replicacin del ADN
Distribucin de cromosomas
Divisin del citoplasma
- 3 conceptos de Ciclo celular:
Sntesis de ADN

Cromosmico

segregacin exacta de ADN

Segregacin de cromosomas
Centrosmico

Divisin precisa del centrosoma

Citoplsmico

Aumento de volumen

Crecimiento celular
Citosinesis

Factores de control

Punto de restriccin :

Externos

factores de crecimiento
inhibicin por contacto
anclaje al substrato
tamao celular

Internos

factores difusibles (calendario estricto)

G1

G2

Cl. Quiescente
Diferenciacin
Muerte

G1

G2

G1

G2

paro

Go

S
G2

G1

paro

G2
cariocinesis
citocinesis

G1

M
paro

DETERMINACION DEL TIEMPO DE CICLO CELULAR EN CELULAS EM9

A 10 placas con cultivos de clulas EM9, hemos suministrado un pulso de deoxitimidina
tritiada (H3-dT) durante 5 minutos; hemos posteriormente hemos fijado las placas de cultivos
cada hora previa administracin de colcemida para parar el ciclo en metafase mittica. Tras
revelar la autorradiografa obtenemos la siguiente grfica.

100%
% de metafases
Marcadas con
H3-dT
50%

1h

2h

5h

7h

Tiempo, en horas despus del pulso con H3-dT

Cada cultivo duplica su poblacin cada 16 horas.

Las clulas EM9 tardan 1 hora en realizar la Fase M.
Si queremos estudiar el efecto de un nuevo producto quimico sobre el ADN, Cunto
tiempo (en horas), antes de la observacin, en metafase, del posible dao producido por
el qumico en el ADN, tendremos que suministrar dicho qumico.