Desarrolla el procedimiento a seguir para el cultivo de microorganismos
patgenos presentes en muestras de lavado broncoalveolar, a fin de detectar microorganismos causantes de infecciones respiratorias bajas. Sacar de la heladera las placas y colocarlas un momento en la estufa de cultivo, semidestapadas. El material debe procesarse de inmediato dado que se alteran elementos celulares y se modifica el N real de especies bacterianas presentes. Homogeneizar la muestra recibida en frasco estril y sembrar 50 ul en media placa de ACHOC, AS y CLDE con pipeta automtica y tips estriles, diluir 1/10 y repetir la operacin sembrando 10 ul en cada media placa:. Centrifugar 10 ml en tubo Falcon estril a 2000 rpm por 5 minutos Del sedimento hacer exmen en fresco y frotis: GRAM ZIEHL-NELSSE (y Siembras para Koch si son solicitados). Si la muestra es de ms de 10 ml deben juntarse los sedimentos de toda la muestra centrifugada a 3000 rpm antes de hacer frotis y cultivos de Koch y frotis para coloraciones especiales: P. carinii siempre que sean solicitados para Huesped Inmunocomprometido. Llevar a estufa de cultivo 72 horas a 35-37 C en lata con vela. Incubar por lo menos tres das antes de descartar como negativos. Se hace el recuento de colonias CRITERIOS DE JERARQUIZACION: Citocentrifugacin de la segunda porcin Marcadores de contaminacin: clulas epiteliales (>1 %), clulas bronquiales Marcadores de infeccin: PMN (idealmente >50%, no <10%), sensible pero poco especifico. Bacterias intracelulares (2-25%), especifico pero poco sensible. Marcadores de presencia de muestra respiratoria, macrfagos alveolares. Tener en cuenta que no hay neumona sin neutrfilos /excepto neutropnicos). La inversa no es cierto. RESULTADOS: Los resultados obtenidos son volcados en el libro correspondiente de pacientes ambulatorios o internados. Si no hay desarrollo de microorganismos, se informa negativo.