Gua: Microscopio

ESCUELA SALUD

GUA
MICROSCOPIO

Microscopio de Hooke (izquierda) y Microscopio de Leeuwenhoek (derecha), creadores de

los primeros microscopios.

DIRIGIDO A ALUMNOS DE:

Tcnico de Laboratorio Clnico y Banco de Sangre
Tcnico Superior de Enfermera
Tcnico de Radiodiagnstico y Radioterapia
Informtico Biomdico

PRE-REQUISITO:
No tiene
.INTRODUCCIN
Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes
EU. Eliana Escudero
DuocUC
CODIGO: CEBMS110001

Gua: Microscopio

La microscopa ptica es una de las herramientas ms utilizadas en el Laboratorio,

tanto Clnico, como de otra ndole. Est ampliamente distribuido en las reas de la
microbiologa y la hematologa.
Tambin es posible encontrar microscopa ms compleja en los Laboratorios, en
las reas de la inmunologa, de la histologa o de la biologa celular. Este tipo de
microscopa se diferencian de la microscopa ptica no slo en lo que respecta al
instrumento en s, mucho ms complejo y costoso, sino que tambin en sus
fundamentos tericos.

OBJETIVOS
Al finalizar el taller el alumno ser capaz de:
Reconocer las distintas partes principales de un microscopio ptico, sus
nombres y funciones.
Realizar correctamente la simulacin de observacin.
Realizar la correcta limpieza de las superficies de un microscopio ptico.
Realizar la correcta limpieza de los objetivos y oculares de un microscopio
ptico.
Manipular material delicado propio de un laboratorio.

REALIZADO POR:
Tecnlogo Mdico, Bioqumico, Qumico Farmacutico, Mdico Laboratorista,
Bilogo.

DURACION:
90 minutos.

NUMERO DE ALUMNOS POR DOCENTE:

20 alumnos

Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes

EU. Eliana Escudero
DuocUC
CODIGO: CEBMS110001

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MARCO TEORICO:
Los diversos elementos que existen en la naturaleza, presentan tamaos, formas y
composiciones distintas, la mayora de ellas pueden verse, algunas a simple vista,
y otras mediante instrumentos.

El microscopio ptico es un instrumento de precisin que permite ampliar la

imagen de los objetos que no son visibles para el ojo humano. En el microscopio,
la luz atraviesa de abajo a arriba el objeto a estudiar. Para ver con el microscopio
un objeto, ste debe ser lo ms fino posible. Si no lo atraviesa la luz se ver slo
un grumo deforme y opaco.
Tiene un lmite resolucin de cerca de 200 nm (0.2 m), es decir la distancia
mnima a la que se pueden ver dos objetos separados. Este microscopio utiliza
luz visible. Las clulas observadas bajo el microscopio ptico pueden estar vivas o
fijadas y teidas. Las muestras son depositadas en una lmina de vidrio
denominada PORTAOBJETO, de unos 5 cm de largo por 2 cm de ancho. En el
lugar del portaobjetos donde se puso la muestra puede, adems, ponerse una
laminilla muy fina de vidrio llamada CUBREOBJETO.
Los oculares proporcionan diez aumentos de la imagen, y viene expresado x10 en
la carcasa del ocular. Tambin los hay x20.
Los objetivos (generalmente cuatro), suelen tener aumentos de x4, x10, x40 y
x100. La ampliacin de la imagen resultante al multiplicar los aumentos que
proporciona el ocular y el objetivo sern de 40, 100, 400 y 1000 aumentos.
Ejemplo: Ampliacin de 40 aumentos:
Objetivo x4: aumenta 4 veces la imagen
Ocular x10: aumenta 10 veces la imagen ya aumentada 4 veces por el
objetivo
Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes
EU. Eliana Escudero
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Resultado: 4 aumentos x10 aumentos = 40 aumentos
Lo objetivos x4, x10 y x40, se denominan objetivos secos, porque entre la lente y
la preparacin a observar, la luz atraviesa el aire proporcionando una imagen
ntida. El objetivo x100, se denomina objetivo de inmersin, porque para proveer
imgenes ntidas, la lente debe estar inmersa en un lquido (aceite de cedro o
similar), con un ndice de refraccin igual al vidrio, lo que permite evitar la
dispersin de los rayos luminosos. Siempre que utilicemos el objetivo x100
debemos colocar una gota de aceite de inmersin sobre la preparacin a
observar.

Partes de un Microscopio ptico:

Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes

EU. Eliana Escudero
DuocUC
CODIGO: CEBMS110001

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a) Sistema ptico
Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del
objetivo.
Objetivo: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
Sus aumentos de menor a mayor son 4x, 10x, 40x, 100x. Si se utiliza el
aumento 100x es necesario agregar a la preparacin aceite de inmersin.
cuya funcin es evitar la dispersin de los rayos luminosos.
Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin.
Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Oculares y objetivos

b) Sistema mecnico
Soporte: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el
brazo.
Platina: Lugar donde se deposita la preparacin.
Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,
binocular.
Revlver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,
cambiar los objetivos.
Tornillos de enfoque: El Tornillo Macromtrico que aproxima el enfoque y el
Tornillo Micromtrico que consigue el enfoque correcto.

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Microscopio conectado a TV

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INSUMOS Y EQUIPOS REQUERIDOS

Sala de simulacin de Laboratorio clnico.

Microscopios pticos binocular, 1 por cada 2 alumnos ( minimo)
Portaobjetos: 1 por alumno
Cubreobjetos: 1 caja por taller
Pao o toalla de papel suave para limpiar: 1 por alumno
Aceite de inmersin
Solventes para limpieza de lentes: alcohol: acetona (7:3) o xilol
(precaucin: muy txico)
Frontis sanguneo teido ( preparados listos)
Caja de bioseguridad para eliminacin de material cortopunzante
Recipiente con solucin detergente para portaobjetos sucios.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO:

NOTA: Recuerde usar su delantal, pelo tomado, sin joyas en las manos, y
realizar lavado de manos al ingresar al laboratorio
Manejo y uso del microscopio ptico:
1. Colocar el objetivo de menor aumento (4x) en posicin de empleo y bajar la
platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en
el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas
metlicas.
3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o
colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque seguir los siguientes pasos:
Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el
tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a
travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la
preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el
objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo
ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y
suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el
enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es
preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin
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desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la
preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances:
incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y
mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se
enfoc con el objetivo de inmersin.
6. Empleo del objetivo de inmersin:
Bajar totalmente la platina.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que
nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite.
Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino
entre ste y el de x40.
Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de
inmersin.
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la
lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota
ascendiera y se adosara a la lente.
Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre
el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el
de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se
puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de
aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y
repetir la operacin desde el paso 3.
Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se
coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento
ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersin en posicin de observacin.
Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial
para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente
limpio.
Mantenimiento y precauciones:
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en
posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina
no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto
con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a
usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario
para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas
muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes
EU. Eliana Escudero
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4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que
queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o papel muy
suave, que no deje pelusas. En cualquier caso se pasar el papel por la
lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y
pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcoholacetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si
se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su
sujecin.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico
7. Una vez finalizada la observacin, el cubreobjeto debe ser depositado en
una caja para material cortopunzante (safe box) y el portaobjeto se deja en
un bandeja con solucin de limpieza, dispuesta en el laboratorio.

ACTIVIDADES
Actividad 1:
El docente realiza el procedimiento de mantencin de las superficies y
lentes del microscopio.
Actividad 2:
El docente realiza el procedimiento de simulacin de observacin,
describiendo en detalle la forma correcta de poner la preparacin y
enfocarla.
Actividad 3:
Cada alumno realiza, las veces que sea necesario las actividades 1 y 2. El
docente observa y corrige las actividades de los alumnos.

Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes

EU. Eliana Escudero
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BIBLIOGRAFIA
http://www.angelfire.com/bc2/biologia/microscopia.htm (VISITA 28/12/2004)
http://www.joseacortes.com/practicas/microscopio.htm (VISITA 28/12/2004 )
http://www.shimadzu.com.br/analitica/port/Produtos/Microscopio/images/ss550.jpg (visita 2/1/2005)
http://www3.unileon.es/ins/insaiem/images/microscopio%20electronico.jpg
(visita 2/1/2005)

METODOLOGIA DE EVALUACION
El taller se evala a travs de una pauta de competencias logradas de
acuerdo a los objetivos planteados:

Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes

EU. Eliana Escudero
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Nombre del alumno:..............................................

Fecha:............................................Nota.......................

Microscopio
1. Su presentacin personal es correcta para el
taller
2. Identifica al menos 3 partes del microscopio
3. Sabe colocar el aceite en el lugar correcto del
microscopio
4 Usa el microscopio en el orden secuencial
indicado
5. Coloca el porta objeto en el lugar correcto del
microscopio, porque sabe su funcin.
4. Cumple con el orden y limpieza indicado por el
docente al finalizar el taller
5. Realiza la tcnica de mantencin del
microscopio

C: competente
MC: medianamente competente
NC: no competente

Autor: BQ Cecilia Lpez Reyes

EU. Eliana Escudero
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MC

NC