Coeficiente volumtrico de

transferencia de O2 (KLa)
Alejandra Bosch
Claudio Voget
Claudia Prieto

Transporte de Oxgeno en un cultivo microbiano

Baja solubilidad del O2 en agua (7 mg/l a 35C)

+
Los microorganismos usan solamente el O2 disuelto
+
-10 g/L levaduras
El O2 es un macronutriente (10-4 M)

-1000 mg O2/Lh
-Si hay 8 mg disueltos
en 25 segundos los
consume

El O2 debe ser suministrado permanentemente tratando que

las burbujas queden temporalmente retenidas en el seno
del lquido para que el O2 se transfiera a la fase lquida.
MAYOR TIEMPO DE
RETENCIN DE LAS
BURBUJAS

MAYOR
TRANSFERENCIA
DE O2

Formas de suministrar O2 en un cultivo

Sistemas aireados

con agitacin mecnica

sin agitacin mecnica

-tanque agitado

-air lift

-erlenmeyer

Transferencia de oxgeno - Modelo de la pelcula o del film estanco

Transporte de los compuestos en un cultivo ocurre por el movimiento del fluido
y por difusin ( gradiente de concentracin)

Gas
Burbuja
1
de aire

G-L

Lquido
L-S
4 5 Clula S
6
7

2
3

1- Difusin del seno del gas a la interfase gas-lquido.

2- Movimiento a travs de la interfase G-L
3- Transporte convectivo en el seno del lquido
4- Difusin a travs del film lquido estanco (interfase L-S)
5- Transporte a travs de la membrana
6- Difusin intracelular hacia el sitio de la reaccin qumica
7- Transporte y reaccin qumica

Transferencia G-L . Modelo de la pelcula

PO2

La resistencia ms importante
es atravesar la interfase G-L

C*
Fase gaseosa

Seno de la fase lquida

CL

Pelcula lquida estanca

PO2 = H . C*
Ley de Henry
(solubilidad de un gas)

dC
NO 2 D
dx
Ley de Fick
Flujo por difusin

No2: moles O2/rea / tiempo

D: coeficiente de difusin del O2
dCO2/dx: gradiente de concentracin que impulsa la transferencia

Transferencia G-L . Modelo de la pelcula

Si CL < C*

NO2

moles O2/rea / tiempo

(C * CL )
DO2
L

KL=DO2/L

N O2 K L (C * CL )

KL=coeficiente de transferencia de materia

A
a
V

rea
interfacial por
unidad de
volumen

RO2
KLa

A
V

RO2=NO2 . a

RO2 KL.a(C * CL)

RO2 KLa (C * CL)

velocidad de transferencia de O2 [moles O2/L/h]

coeficiente volumtrico de transferencia de O2

depende de la difusividad (D) del oxgeno en el medio
y la turbulencia del lquido (L)

Transferencia G-L . Modelo de la pelcula

Resumiendo

RO2 KLa (C * CL)

- La concentracin de oxgeno CL en el seno del lquido aumenta
hasta alcanzar el valor de C*, de modo que la transferencia de O2
hacia el seno del lquido (NO2) se anula cuando C*=CL,cuando se
anula el gradiente.
- Para que la transferencia de oxgeno no se anule, el O2 debe ser
permanentemente consumido ya sea por un microorganismo o una
reaccin qumica.

KLa

se determina globalmente
Unidades: [h-1]

El valor de KLa est directamente relacionado con la

eficiencia de un biorreactor para transferir oxgeno.

FACTORES QUE AFECTAN LA TRANSFERENCIA DE O2

RO2=KLa (C*-CL)
KLa
KLa=D.a
L
Estado de agitacin
(agitacin aireacin)
Re=(nD2 )/
n=rpm
D=dimetro de las paletas
=densidad
=viscosidad
A > agitacin <L>KLa
Antiespumantes > L <Kla
Detergentes >L<KLa, pero >a>Kla

(C*-C)

Presin
C*=HPO2
>P >C*
Temperatura
>T < C*
>T >D
10C-40C: predomina >D, aum. RO2
>40C: predomina < C*, dismin. RO2

FACTORES QUE AFECTAN EL KL Y EL KLa

AGITACION:

1- aumenta el rea de intercambio por ruptura de las burbujas aumenta rea

por unidad de volumen
2- Disminuye el espesor de la pelculas (L) por lo que aumenta el KL.

AIREACION: aumenta el numero de burbujas aumenta el a y disminuye el L.

TEMPERATURA: afecta el coeficiente de difusin y la solubilidad (cte de

Henry).

VISCOSIDAD: a mayor viscosidad, mayor resistencia a la transferencia (ver

nmero de Reinols)

TENSIACTIVOS: afectan el rea de trasferencia y el KL y el efecto global

depende de la concentracin
burbujas mas pequeas aumento del rea y del KLa.
aumento de la resistencia de la pelcula disminuye el KL

SUSTANCIAS ORGANICAS : antiespumantes: disminuyen el KLa

peptonas , micelio, biomasa : disminuyen el KLa

alcoholes, cetonas y esteres: aumentan el KLa

Cmo seleccionar el KLa apropiado?

-El tipo de clula: las bacterias, hongos, cl. animales crecen a distinta
, por lo tanto tendrn distintas qO2.
-La concentracin de biomasa final alcanzada.
-La susceptibilidad de las clulas a las fuerzas de corte.

Tipo celular

Xf (g/l)

(h-1)

KLa (h-1)

Tipo de
reactor

Animal

0.5

0.01-0.04

1-25

Tubo ensayo
inmvil

Vegetal

10-15

0.007-0.03

20-30

Tubo-erlen

Levadura
Hongo

10-30

0.2-0.6

100-1000

Erlen-reactor

bacteria

10-20

0.6-1.4

100-1000

Erlen-reactor

Cmo seleccionar el sistema de cultivo apropiado?

Sistema

volumen medio

condiciones
operacin

transferencia O2
RO2 (mmol/lh)

Tubo

10 ml

agitacin rotatoria

27

Erlen 500 ml

50 ml

200 rpm

40

50 ml

300 rpm

48

200 rpm

33

100 ml

300 rpm

42

Erlen 1000 ml

100 ml

200 rpm

40.8

Tanque agitado

12 l

500 rpm
caudal aire 2 vvm

432

100 ml

CONSUMO O DEMANDA DE OXGENO (rO2)

La demanda o consumo de oxgeno vara con el tiempo
La concentracin de oxgeno disuelto (CL) depende de las
velocidades de transferencia y consumo
ln X

x = f (t)
qO2 = f (t)

demanda
ro2= qo2. X
X = biomasa

CL
qo2 = demanda especfica
El
microorganism
o mantiene un
estado cuasiTiempo estacionario

rO2 - es proporcional al crecimiento

qO2 depende de la concentracin de oxigeno disuelto [O2], la
edad del cultivo, fase de crecimiento (qO2 es mxima cuando
es mxima, es decir durante la fase exponencial) , tipo de cultivo,
etc.

TRANSFERENCIA (RO2) - DEMANDA (rO2)

Demanda de Oxigeno: rO2 = dCL / dt = X. qO2

Transferencia de Oxigeno: RO2 = dCL / dt = KLa (C* -CL)
La transferencia debe ser mayor que la demanda
para evitar limitacin de oxigeno.
Cmo aumentar la transferencia de oxgeno?
1- aumentando el KLa

condiciones de operacin (caudal de aire, agitacin, etc)

diseo del reactor (paletas, buffles)

reologa del cultivo

2- aumentando la fuerza impulsora

aumentar C*

Relacin entre demanda y transferencia de O2

Transferencia o suministro

RO2= KL.a . (C* CL)

Consumo o demanda
rO 2

= qO 2 . x = b. rS =

rO 2 =

rx

Yx / o

b. rx
Yx/ s

max. b
Yx / s

max. x
=
Yx / o

El microorganismo mantiene un estado cuasi-estacionario

a mayor consumo, mayor transferencia

RO2= rO

Para que no exista limitacin de oxgeno

Si RO2 > rO2 , no se limita

qO2
qO2max

CL Ccrit

Si RO2 < rO2 , se limita en O2

Para la mayora
de los microorganismos

Si se limita

Ccrit~ 5 - 10% C*

CL ~ 0

Ccrit

RO2=Kla.C*

qo2 = qo2max Co2L

Ko2 + Co2L

CL

RO2=Kla(C*-Ccrit)

Cmo seleccionar el KLa para cubrir las necesidades del cultivo?

Para que no exista limitacin por O2 en ningn momento
CLO2 > Ccrit en todo momento

cultivo de levaduras
Qu KLa requiere?

Xf=10 g/l
qO2=200 ml O2/gh

C*= 6 ml O2/l

El microorganismo mantiene un estado cuasi-estacionario

transf. O2= consumo
RO2= rO2
KLa(C*-C)=qO2X

Se debe calcular el requerimiento de O2 cuando el consumo sea mximo

X=Xmax qO2=qO2 max
KLa (C*- C) = 200 mlO2/gh . 10 g/l

10% C*

Kla = 2000 mlO2/lh /(6-0.6)mlO2/l

KLa= 400 h-1

Nos aseguramos que el

suministro de O2 sea suficiente an en
la etapa de mx consumo

Limitacin por Oxgeno -

8
8
7

Sustrato
Biomasa
Biomasa
Biomasa

fase estacionaria

O2

xL

x/o

fase exponencial

4
3

21

K L a .C * .Y x / o . dt

mx
Crecimiento
lineal

Crecimiento
exponencial

2
3
2

0
0

5
5

10
10

10

x x + K a . C * .Y

fase lag

0
0

K a .C *

15
15

20
20

25
25

30
30

35
35

25

30

35

x /o

dx
x/o

.t

TiempoTiempo
(hs)
(hs)

15

tL

20

Tiempo (hs)

Kla . (C* - CL) = rO2 = qO2 mx.x

qO2
qCO2 = ctes y mx
qs
rx
rO2
rCO2 ctes
rS

RO2mx = Kla . C* = rO2

qO2
qCO2
qs
rx
rO2
rCO2
rS

mx=

ctes,

= ctes

qO2 .x

dx
.
dt

Mtodo del sulfito para la determinacin del KLa

Es un mtodo para determinar KLa en ausencia de microorganismos
Se basa en que el Na2SO3 (0.015 M) en presencia de Cu++ o Co++ reacciona
rpidamente con el O2 disuelto en el seno del lquido.
Na2SO3 + O2

Na2SO4

(1)

Cu++ o Co++ aprox. 0.5 2.10-3 M, pH 8

La velocidad de reaccin (1) es rpida pero < que la velocidad de difusin del O2

En el film no hay reaccin

el O2 difunde a travs de la pelcula

reacciona rpidamente con Na2SO3

CLO2=0
Velocidad de consumo de O2 = velocidad de transferencia
RO2= KLa C*

Que ocurre en cultivos con agregados celulares ?

Si la unidad cataltica es una clula:

Cultivos lquidos con bacterias no agregadas

Vp

Volumen celular

No existe restriccin en la transferencia L-S

Lquido
Gas G-L

La principal resistencia a la transferencia de

oxgeno es la pelcula estanca G-L

Burbuja
1
de aire

Clula
2
3

TRANSFERENCIA ES PROPORCIONAL AL KLa

La unidad cataltica es un pellet o biofilm

Vp

> Volumen celular

El oxgeno detectado en la interfase S-L

depender del TAMAO del partcula
El oxgeno disuelto en el INTERIOR
depender de la resistencia interna de la
partcula

Flculos, agregados celulares, cultivos en biofilm

Vp variable

Que ocurre en cultivos con agregados celulares ?

Esquema del transporte G-L-S

Que ocurre en cultivos con agregados celulares ? Vp

> Volumen celular

Film estanco lquido alrededor de la

partcula cataltica (interfase S-L)

Concentracin en
el seno del lquido
Perfil de concentracin en el film
lquido cuando hay resistencia
difusional en la interfase
Perfiles de concentracin de oxgeno
dentro de la partcula cuando existe
limitacin difusional interna
1

No hay restriccin difusional ni

externa ni interna

Hay restriccin difusional interna

solamente

No hay restriccin difusional ni

externa ni interna

Caractersticas de los fenmenos de transporte en cultivos

Los metabolitos y sustratos polimricos y la formacin de micelio

pueden producir medios muy viscosos, generalmente no newtonianos,
que limitan la transferencia de materia
La formacin de aglomerados celulares (flocs, pellets) y biofilms
determina la existencia de restricciones difusionales externas e
internas. Las ltimas dan lugar a condiciones de anoxia, restriccin
severa de nutrientes, intoxicacin por productos y lisis celular
Las concentraciones de nutrientes y productos en los medios son
normalmente bajos, por lo tanto los gradientes de concentracin para
la transferencia es limitada

CLCULOS - Velocidades de transferencia

Batch

F2 Y2

F1 C1

F1,C1
VL
C

Mezclado perfecto

VG
Y

C2=C

F2 C2

F1 Y1

F2,C

interfase
G-L

Ecuaciones de balance de materia

Fase lquida

dCVL
FC
1
1
dt

Fase gaseosa dYVG

dt

FC
+ rpVL
2

rC VL

transfiere

FY
F2 Y + transfiere
1 1

dCVL
FC
FC
+ rpVL r VL + transfiere
1 1
2
C
dt

Balance para el Oxgeno

Balance FL

Balance FG

dCLVL
F1 .C * F2 .CL + VL KL a(C * CL ) rO2 .VL
dt
dXO2 VG
dt

= F1 . X1 O - F2. X2 O - VL . K L a( C * - CL )
2
2

dC V
0
dt

Estado cuasiestacionario
Transferencia=consumo

KL a(C * CL ) rO2

F 1 .X 1O

- F .X
2
2O

VL
F 1 .X 1O

- F .X
2
2O
VL

= K a (C * - C )
L
L

= r
O

Mtodo del sulfito para la determinacin del KLa

rpm

%O2

rO2

KLa

300
400
500

500 + deterg
500 +
antiesp

Ln KLa

Ln rpm

Ln KLa

ln rpm

Estimacin de KL - Parmetros adimensionales

Los parmetros adimensionales del sistema de cultivo se agrupan en
nmeros adimensionales caractersticos
Se pueden establecer correlaciones de Kl con los
nmeros adimensionales que describen la fluidodinamia

Para una determinada caracterstica de la partcula Vp, el factor

determinante de KL es la fluidodinamia alrededor de la misma

NUMEROS ADIMENSIONALES
SHERGOOD- Estima la magnitud del transporte total de materia en
relacin a la difusividad
REYNOLS Refleja el rgimen fluido dinmico alrededor de slido.
Asociado a turbulencia
SCHMIDT - Refleja las propiedades del fluido