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RESULTADOS.

De acuerdo a la experimentacin realizada en laboratorio se obtuvo, de una


colonia de bacterias jvenes resistente a un antibitico (ampicilina), ARN
maduro libre de residuos bacterianos, molculas orgnicas u otro factor que
pueda alterar la muestra.
Esto se logra comprobar debido a que las condiciones del laboratorio fueron las
ms apropiadas para la realizacin de la extraccin de ARN. Estas condiciones
se refieren a temperaturas apropiadas, cuidados en el manejo de instrumentos
y utilizacin de los materiales para evitar que la muestra se contamine. En otras
palabras, se trabajo a bajas temperaturas (4C) debido a que en estas
temperaturas se mantiene la composicin del ARN, aumenta el rendimiento de
las soluciones ocupadas y adems se inactivan las ARNasas (enzimas que
destruyen al ARN), se utilizaron instrumentos como puntas con filtro y guantes
para evitar que la muestra sea alterada por algn factor externo. Adems se
hizo uso de soluciones acuosas necesarias para aumentar la concentracin del
ARN, es decir, para que este sea ms puro. Se utilizaron soluciones como es el
trizol el cual causa a la bacteria la desnaturalizacin de sus protenas,
rompimiento de la membrana plasmtica (para que se libere todo el contenido
interno de la bacteria, que es donde se encuentra el ARN) y separacin del
ARN de los ribosomas.
Tambin se utilizo cloroformo ya que este ayuda a separar el fenol saturado
(que se encuentra en la solucin de trizol) en una fase orgnica y otra fase
acuosa, dejando el ADN y otras lipoprotenas en una lnea divisora separadas
del ARN.
Adems se ocupo alcohol ISO proplico (alcohol ramificado y miscible, es decir,
se puede mezclar con otra sustancia para formar una solucin homognea)
cuya funcin es principalmente hacer que el ARN se deshidrate y se forme un
precipitado (pellet) por efecto del centrifugado.
Se utiliz Etanol al 70% para mantener precipitado el ARN, logrando as que el
30% de agua que posee esta solucin disuelva las sales que se encuentran en
la muestra.
Finalmente se hizo uso del agua DEPC el cual es un compuesto cancerigeno
cuya funcin en la extraccin de ARN es eliminar las ARNasas (Ribonicleasas)
para que estas no logren degradar el ARN y se conserve una muestra pura de
ARN.

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