Corporacin Tecnolgica de Bogot. Tecnologa en Qumica Industrial. Sexto Semestre
Materiales y mtodos:
Preparacin de medios de cultivo
1. Caldo nutritivo Se peso 0.54 g del caldo nutritivo, luego se disolvi en 40 ml de agua, posteriormente se distribuy en 4 tubos grandes, despus se esterilizo por 15 minutos a 120 C y 15 lb de presin. Finalmente se llevo a incubar por 24 horas a 37 C.
2. Agar Nutritivo
3. Agar Saburn
Siembras
1. Siembra en Medio Lquido Se esteriliz el asa redonda calentndola al rojo vivo, luego se tomo una gota de E.Coli, se coloc en el medio inoculado y se coloc en el medio (tioglicolato), se calent nuevamente el asa el rojo vivo y finalmente se llevo a incubar a 37 C por 24 horas Se repiti el procedimiento con S. Aureus.
2. Siembra en Medio Semi Solido Se calent el asa recta al rojo vivo para esterilizarla, despus se tomo la bacteria a sembrar (E.Coli y S. Aureus) del Agar. Posteriormente, se saco un pequeo inculo y se introdujo al medio por puncin, evitando el movimiento al sacarlo. Finalmente se esterilizo nuevamente el asa y se llevo a incubar por 24 horas a 37 C.
3. Siembra en Medio Solido
3.1. En Tubos Se calent el asa recta al rojo vivo para esterilizarla, despus se tomo la bacteria a sembrar (E.Coli y S. Aureus) del Agar. Luego, se introdujo al medio por puncin continuada por un espiral en la parte inclinada. Finalmente se esterilizo nuevamente el asa y se llevo a incubar por 24 horas a 37 C.
3.2. En Cajas de Petri
3.2.1. Masivo Se sumergi el escobilln en el medio lquido que contena la bacteria E.Coli. Posteriormente se esparci por toda la caja de petri en forma de espiral, tanto horizontal como verticalmente. Finalmente se llevo a incubar por 24 horas a 37 C. Se repiti el procedimiento con S. Aureus
3.2.2. Aislamiento Dividimos la caja de petri en 4 zonas. S esterilizo el asa al rojo vivo, despus se tomo la bacteria E.Coli del Agar, y se esparci en los bordes de la zona 1 de la caja de petri. Se repiti el mismo procedimiento en la zona 2 y 3.En la divisin de la zona 1 y 2, se inoculo la bacteria trazando 3 lneas. Entre la zona 2 y 3, se inoculo la bacteria trazando 2 lneas. Entre la zona 3 y 4 se inoculo la bacteria trazando 1 lnea. En la zona 4, se esparci la bacteria por toda la zona evitando que se alteren las otras zonas de la caja de petri. Finalmente se llevo a incubar por 24 horas a 37 C. Se repiti el procedimiento con S. Aureus