CINTICA DE CULTIVO CELULAR POR LOTES

Daremos a conocer los datos obtenidos en todo el desarrollo fermentativo de la cepa

Ralstonia eutropha NRRL B-14690, utilizando como fuente de carbono a la Glucosa.
TABLA 01: VALORES DE ASORA!"#A VS EL $#E%&O
No Tiempo Absorbanc
ia
1 0 0.008
2 1 0.012
3 2.5 0.02
4 4 0.028
5 0.03
! 6 0.033
" 7.5 0.041
# 8.5 0.024
$ 9.5 0.011
Fig. 1. Presenta la curva de crecimiento de la Ralstonia
eutropha NRRL B-14690
CURVA DE CALI%RADO DE %IO&ASA
NU&ERO
DE
CAPAC'
O
A%SOR%A
NCIA
PESO
INICIAL
()*
PESO
+INAL
()*
PESO
SECO(
)*
CONCENTRACIO
N(),L*
A1-1 0.039 0.1914 0.1957 0.0043 1.075
A1-2 0.041 0.1517 0.1572 0.0055 1.375
A1-3 0.04 0.1689 0.1744 0.0055 1.375
A%S
PRO&ED
O
./.4 ./..
1
1/2"
Como sacamos 4 ml = 0.004 !ara "allar el !eso seco entonces
!ara "allar la concentraci#n se tiene$ g de !eso seco% 0.004
&'(' 02. 3 )e!eticiones sin diluir
&'(' 02. Para *allar nuestra curva de cali+rado !ara de a", ver el
crecimiento de la +iomasa a trav-s del tiem!o.
NU&ER
O DE
CAPAC'
O
DILUCI
ON
DILUCION A%SOR%A
NCIA
PESO
SECO
()*
CONCENTRA
CION (),L*
PRO&E
DIO
1 . 1. 4 inoculo/ 0
agua
./.4 0.0051 1/2"
A1-4 1 . 2. 2.5 inoculo/2.5
agua
0.028 0.0058 1.16
A1- 1 . 3. 2 inoculo/4
agua
0.022 0.0062 1.033333333
A1-! 1 . 4. 1 inoculo/3
agua
0.018 0.0032 0.8
A1-" 1 . 5. 1 inoculo / 4
agua
0.012 0.0038 0.76
%LANCO 0 0
CINETICA DE CRECI&IENTO DE %IO&ASA
Con la ecuaci#n "allamos el valor de la concentraci#n !ara
"allar el crecimiento de +iomasa a trav-s del tiem!o.
No Tiempo Absorba
ncia
Concen0raci1
n(),2*
1 0 0.008 0.355
0 = 0.0281.
0.003
&'(' 04. 2os muestra la Concentraci#n 3ue 4ue
"allada con la ecuaci#n anterior5 tomando como dato
la a+sor+ancia.
Fig.02 6eterminaci#n de la concentraci#n
celular
2 1 0.012 0.484
3 2.5 0.02 0.742
4 4 0.028 1.000
5 0.03 1.065
! 6 0.033 1.161
" 7.5 0.041 1.419
# 8.5 0.024 0.871
$ 9.5 0.011 0.452
El crecimiento microbiano se'(n se muestra en nuestra 'rafica se observa un
primer crecimiento notorio )asta las * )oras apro+imadamente, es en este
intervalo ,ue se manifiesta el crecimiento - se puede determinar el .
%,
para la
cepa Ralstonia eutropha NRRL B-14690, m/s el crecimiento ,ue se observa en
adelante refle0ar1a el crecimiento de microor'anismos ,ue contaminaron e
infectaron nuestro medio de fermentaci2n alternado nuestros datos - )aciendo
,ue nuestros resultados no fuesen los adecuados.

Fig. 03. Se observ2 ,ue el crecimiento celular se realiz2 r/pidamente, esto
probablemente ocurri2 por la disponibilidad de la fuente de carbono utilizada,
Glucosa.
La concentraci2n de sustrato en inversamente proporcional al tiempo - a la
absorbancia, es decir ,ue mientras el tiempo aumenta la concentraci2n de
sustrato disminu-e.
La suspensi2n celular aparece turbia por,ue las c3lulas dispersan la luz ,ue
atraviesa la suspensi2n. Esto se demuestra con las lecturas en el
espectrofot2metro al inicio la lectura es de 4,445 - nos representa 05004 '6L de
biomasa - a medida ,ue aumenta la absorbancia tambi3n aumenta la biomasa,
es decir ,ue tienen una relaci2n directa, lo mismo ocurre con el tiempo.
DETER&INACI3N DE m45
No Tiempo Absorba
ncia
Concen0rac
ion (),2*
Ln
(6,6.*
1 0 0.008 0.393 0.000
2 1 0.012 0.536 0.310
&'(' 05. 2os muestra la n71%108 3ue 4ue "allada
con la Concentraci#n 9nal e inicial
3 2.5 0.02 0.821 0.738
4 4 0.028 1.107 1.036
5 0.03 1.179 1.099
! 6 0.033 1.286 1.186
" 7.5 0.041 1.571 1.386
# 8.5 0.024 0.964 0.898
$ 9.5 0.011 0.500 0.241
'l gra9car todo esto o+tendremos la siguiente gr:9ca$
6e esta gr:9ca solo tomaremos la 4ase de crecimiento es decir los 4
!rimeros !untos !ara as, !oder determinar el m:;.$
No Tiempo Concen0rac
i1n (),2*
Ln
(6,6.*
1 0 0.355 0.000
2 1 0.484 0.310
3 2.5 0.742 0.738
4 4 1.000 1.036
Fig. 04. Grafica para poder obtener mis puntos de cual
obtendr3 mi m45/
&'(' 05. Puntos !ara "allar mi
m:;.$
6e <ste =ra9co 6eterminamos 7
m
3ue viene a ser la !endiente de
la curva$
CALCULO DEL TIEMPO DE DUPLICACION
Fig. 05. ineali>aci#n de la 4ase
e;!onencial del crecimiento micro+iano
7
m
8 ./2!.9
-1
<n este gra9co se o+serva 3ue la cin-tica de consumo de la =lucosa se
encuentra en 4unci#n a la velocidad de crecimiento de la ce!a Ralstonia
eutropha NRRL B-146905 !ro+a+lemente de+ido a 3ue la 4uente de
car+ono es destinado a la 4ormaci#n de !roductos ? a la manutenci#n de
las c-lulas !or esta ra>#n el crecimiento se ve a4ectado.
<n este gra9co se o+serva 3ue la cin-tica de consumo de la =lucosa se
encuentra en 4unci#n a la velocidad de crecimiento de la ce!a Ralstonia
eutropha NRRL B-146905 !ro+a+lemente de+ido a 3ue la 4uente de
car+ono es destinado a la 4ormaci#n de !roductos ? a la manutenci#n de
las c-lulas !or esta ra>#n el crecimiento se ve a4ectado.