Extraccin de pectina mediante el mtodo de hidrlisis cida
en frutos de maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M.
Badillo) provenientes del distrito de San Miguel de Soloco, regin Amazonas Extractin of pectin by acid hydrolysis method in fruit maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo) from the district of San Miguel de Soloco, Amazon region. 1 1 2 3 4 5 Yojani Maldonado Culquimboz ; Sarita M. Salazar Ocampo ; Carlos E. Millones Ch. ; Elena V. Torres M. & Ernestina R. Vsquez C. RESUMEN Esta investigacin se realiz como aporte a la industria de los alimentos que fue la extraccin de pectina mediante el mtodo de hidrlisis cida en frutos de maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo) en dos ndices de madurez, provenientes del distrito de San Miguel de Soloco, regin Amazonas; para lo cual se recolect frutos de maushan con ndice de madurez 3,64 y 6,51 respectivamente; empleando el mtodo de hidrlisis cida con tres tipos de cidos (cido clorhdrico, cido fosfrico y cido ctrico, en tres niveles de pH del agua acidulada 2,0; 2,5 y 3,0) para la extraccin de pectina; evalundose rendimiento, porcentaje de cido galacturnico y tiempo de gelificacin de la pectina extrada mediante un experimento factorial del tipo 2AX3BX3C bajo un DCA con 3 repeticiones; para el procesamiento de los datos se utiliz el paquete estadstico SAS (Statical Analysis System) for Window V8. Los mayores rendimientos de pectina, menores tiempos de gelificacin se registraron en frutos de maushan en estado de sazn y empleando cido fosfrico y cido ctrico en el agua acidulada. Palabras clave: Pectina, Hidrlisis cida, Vasconcellea weberbaueri. ABSTRACT This research was conducted as a contribution to the food industry. It consisted on the extraction of pectin by acid hydrolysis in maushan fruit (Vasconcellea weberbaueri (Harms) VM Badillo) on two maturity indexes from the district of San Miguel of Soloco, Amazonas region; for which we collected maushan fruit with maturity index of 3.64 and 6.51 respectively, using the acid hydrolysis method with three kinds of acids (hydrochloric acid, phosphoric acid and citric acid in three levels of acidic water pH 2.0, 2.5 and 3.0) for the extraction of pectin, evaluating the performance, percentage of galacturonic acid and gel time of pectin extracted using a factorial experiment of type 2AX3BX3C under a CRD with 3 replications. For data processing we used the SAS statistical package (Statical Analysis System) for Windows V8. The highest yield of pectin, and lower gel times were recorded in maushan fruit seasoning state using phosphoric acid and citric acid in acidulated water. Keywords: Pectin; Acid Hydrolysis; Vasconcellea weberbaueri. 1 Facultad de Ingeniera, Universidad Nacional Toribio Rodrguez de Mendoza de Amazonas. ARTCULO ORIGINAL Recibido, 30/09/2010 Aceptado, 17/12/2010 177 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X INTRODUCCIN agregado. La pectina es una sustancia de origen vegetal, presente en las plantas, principalmente en sus frutos; su caracterstica principal es ser un gelificante natural. Las pectinas son hidrocoloides el ndice de madurez, tipo de cido (HCl, que en solucin acuosa presentan propiedades H PO y cido ctrico), y pH del agua acidulada para 3 4 espesantes, estabilizantes y sobre todo gelificantes; la extraccin de pectina en fruto de maushan son insolubles en alcoholes y disolventes orgnicos (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M Badillo). corrientes, parcialmente solubles en jarabes ricos en azcares, Amos (1969). MATERIALES Y MTODOS Las pectinas se obtienen de recursos vegetales que tienen un alto contenido de stas, tales como En la presente investigacin se emple como manzanas, frutas ctricas, pia, guayaba dulce, materia prima frutos de maushan (Vasconcellea tomate de rbol, maracuy, remolacha etc. Durante weberbaueri (Harms) V.M. Badillo), provenientes el desarrollo y maduracin de las frutas se efecta el del distrito de San Miguel de Soloco, provincia de rompimiento, por hidrlisis, de estos compuestos Chachapoyas, regin Amazonas; en dos estados de para formar azcares y cidos y consecuentemente madurez (sazn y maduro) a partir de los cuales se la cantidad y calidad de la pectina extrada extrajo pectina mediante el mtodo de hidrlisis depender, entre otras cosas de la edad y madurez de cida. La obtencin y anlisis de la pectina fueron sus fuentes, Francis (1975). realizados en los Laboratorios de Tecnologa Agroindustrial y Laboratorio de Biologa de la La extraccin se basa en una hidrlisis, separacin y Universidad Nacional Toribio Rodrguez de recuperacin de la pectina; la protopectina se Mendoza de Amazonas. hidroliza en medio cido diluido, en caliente, removiendo as, no slo la pectina, sino tambin, El procedimiento para la obtencin de bagazo de otros productos tales como polisacridos neutros y frutos de maushan se muestra en la Figura 1, cuyas gomas. El grado de esterificacin final, depende de etapas fueron las siguientes: La materia estuvo la temperatura, del pH y de la duracin del constituida por frutos de maushan sin magulladura, tratamiento cido; pudiendo obtenerse pectinas libres de plagas, enfermedades y en dos estados de fuertemente metiladas o pectinas dbilmente madurez (sazn y maduro); los cuales se lavaron metiladas, Hart y Fisher (1991). con agua corriente por varias veces para eliminar las impurezas, realizando un enjuague final con agua Las especies del gnero Vasconcellea estn destilada para evitar la presencia de metales constituidas por un grupo de papayas de montaa, pesados. Los frutos se trozaron empleando cuchillos que se encuentran en los climas sub tropicales de la de acero inoxidable para facilitar la extraccin de Cordillera de los Andes de Amrica del Sur, semillas y pednculos. La fruta se someti por 10 particularmente en Colombia y Ecuador; estas minutos a 85C, para controlar la proliferacin de papayas son comparables a su pariente tropical la microorganismos y bloquear la actividad papaya (Carica papaya L.); pero son ms enzimtica. El pulpeado se realiz usando una pequeas, poco suculentas y a menudo con un sabor licuadora industrial marca ETDISA modelo LAR- muy placentero. Las especies nativas del gnero 25 de 20 kg, obtenindose un bagazo de tamao Vasconcellea se distribuyen al sur del Ecuador, reducido, el cual se tamiz para eliminar el agua sobre los 1000 msnm, entre las que destacan empleando una malla de nylon. El bagazo obtenido Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo, se lav con agua destilada a 60C hasta registrar Scheldeman et al, (2003). 0Brix. Se realiz un segundo tamizado del bagazo con una malla de nylon para facilitar la filtracin y En el distrito de San Miguel de Soloco, regin prensado, procediendo posteriormente al Amazonas crecen naturalmente plantas de deshidratado empleando una estufa marca Raypa, maushan, cuyos pobladores utilizan el fruto modelo DO-9D; extendindose la muestra sobre artesanalmente en la elaboracin de dulce y una bandeja y sometida a 80C por 12 horas, hasta conserva para autoconsumo, no siendo hasta la obtener un bagazo con 8% de humedad. fecha industrializado para obtener un valor De este modo, el aprovechamiento del fruto de maushan para la obtencin de pectina como alternativa rentable al creciente desarrollo agroindustrial, hizo necesario evaluar la cantidad y calidad de pectina presente en el fruto; por tal razn, se evalu Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 178 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X El procedimiento para la obtencin de pectina a Para evaluar el porcentaje de rendimiento, partir del bagazo desecado de frutos de maushan se porcentaje de cido galacturnico y tiempo de muestra en la Figura 2, cuyas etapas se describen a gelificacin de la pectina obtenida a partir del continuacin: Para la solubilizacin cida, el mesocarpio del fruto de maushan, se emple un bagazo se someti a una hidrlisis cida, durante 80 Experimento Factorial 2Ax3Bx3C bajo un Diseo minutos, en un baomaria marca Quimis, modelo Completamente al Azar (DCA) con 03 JSIB-50T, adicionando agua acidulada con niveles repeticiones, donde el Factor A: ndice de madurez, de pH 2,0; 2,5 y 3,0; adems, se emple cido a1: estado sazn y a2: estado maduro; Factor B: tipo clorhdrico, cido fosfrico y cido ctrico, en una de cido, b1: HCl, b2: H PO y b3: cido ctrico; y el 3 4 relacin de 50g de bagazo/3L de agua acidulada a Factor C: pH del agua acidulada, c1: 2,0, c2: 2,5 y 85C y agitacin constante. La solucin resultante c3: 3,0; con un nivel de significacin del 0,05. En la de la hidrlisis se enfri y se filtr con ayuda de una comparacin de medias se emple la prueba Tukey; malla procurando obtener la mayor cantidad de con un nivel de significancia del 0,05. Los datos solucin pctica. Para la concentracin se evapor fueron procesados empleando el paquete estadstico hasta aproximadamente 1/4 1/5 del volumen SAS (Statical Analysis Sistem) for Window V8. inicial del filtrado, este proceso se realiz en una estufa a 60C. En la coagulacin de la pectina, al RESULTADOS concentrado se agreg el doble en volumen de alcohol etlico de 96 con ayuda de una probeta. Se En la Figura 1 se muestra que el mejor rendimiento agit suavemente (tapando e invirtiendo la probeta de pectina, porcentaje de cido galacturnico y un par de veces), se dej en reposo durante 4 horas; menor tiempo de gelificacin registrados fueron en posteriormente, se realiz una segunda filtracin, frutos de maushan en estado de sazn. El mayor donde el cogulo fue separado de los componentes rendimiento de pectina se registr cuando se emple lquidos (agua y alcohol). En la etapa de lavado del un pH 2,0 del agua acidulada con cido ctrico y filtrado pctico se emple alcohol etlico 70 y se cido fosfrico, obtenindose un 2,15% y 2,10% de filtr; repitiendo el lavado con alcohol etlico a 96. rendimiento de pectina, respectivamente. La pectina coagulada se sec en una estufa marca Nahita, modelo 632/13, a una temperatura de 55C, Los mayores porcentajes de cido galacturnico se hasta humedad constante. La pectina obtenida se registraron cuando se emple pH 2,0 y 2,5 en el agua envas en recipientes y se sellaron estos acidulada con cido ctrico y cido fosfrico, hermticamente para su posterior evaluacin. obteniendo porcentajes de cido galacturnico de
25,86% a 28,5%. De la pectina obtenida a partir de frutos de maushan se determin el porcentaje de cido galacturnico El menor tiempo de gelificacin (5,63 minutos) se empleando el mtodo desarrollado por Untiveros registr cuando se emple agua acidulada con cido (2003) y el tiempo de gelificacin empleando el ctrico a pH 2,0 (Figura 3). mtodo desarrollado por Joseph y Baier (1949). Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 179 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X Rendimiento (%) Figura 1. Rendimiento de la Pectina DISCUSIN hidrlisis cida para la extraccin de pectina utilizando como agentes de extraccin cido clorhdrico, cido fosfrico y cido ctrico a pH de Los frutos de maushan (Vasconcellea weberbaueri 2,0; 2,5; 3,0 y una relacin de 1/16 (kg de bagazo/L (Harms) V.M Badillo) se recolectaron en el estado de agua acidulada) se obtiene un mayor de sazn y maduro, registrndose un ndice de rendimiento; el empleo de relaciones menores no madurez qumico en el estado sazn de 3,64 y en el permite continuar con el proceso, debido a la alta estado maduro de 6,51; valores dentro de los rangos viscosidad de la solucin pctica. De acuerdo a reportados por Torres y Vsquez (2009). Kelco (2005), a nivel industrial suele realizarse con agua caliente acidificada (hidrlisis cida); sta se Pilnik y Voragen (1970), manifiesta que son varias realiza con cido diluido (pH 1,5 3,0), en un rango las formas de determinar las sustancias pcticas en de temperatura de 60-100C. El extracto es filtrado y el material vegetal, y se divide fundamentalmente la pectina es precipitada, con lo cual se logra separar los mtodos que aplican la extraccin del material la pectina presente del resto de los compuestos de la pctico y su posterior anlisis; es as, que debido a la cscara, para luego secarla y molerla hasta obtener naturaleza heterognea de las sustancias pcticas, un fino polvo listo para comercializarlo, Charchalac los resultados varan de un mtodo a otro, estado de (2008). la pectina, el tipo de tejido vegetal, entre otros; en la presente investigacin al emplear el mtodo de Figura 3. Valores promedios de rendimiento, porcentaje de cido galacturnico y tiempo de gelificacin de la pectina extrada de frutos de maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo), proveniente del distrito de San Miguel de Soloco. Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 180 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X % cido Galacturnico Figura 2. Valores de cida galacturnico Tiempo de Gelificacin (s) Pilnik y Voragen (1970), mencionan que los tratamiento T16 (25,86%); porcentajes de cido rendimientos al precipitar la pectina de un extracto galacturnico por debajo a los registrados por hidrolizado, proporcionan cantidades de material D'Addosio et al (2005), quienes obtuvieron hasta en un 30% mayor que el contenido de cido porcentajes de cido galacturnico de 71,65 y 78% galacturnico (AAG) presente. Segn los datos en corteza de limn y parchita, respectivamente; los mostrados en la Tabla 1. Tambin identificaron que bajos porcentajes de cido galacturnico en la la precipitacin con alcohol es un ndice confiable presente investigacin pudieron deberse a del contenido terico de pectina extrable, donde interferencias de las impurezas tales como azcares Pilnik y Voragen (1970), manifiestan que: los neutros asociados, ltex, gomas y dems polisacridos complejos extrados de las plantas, compuestos presentes en la estructura de la cscara poseen un alto contenido de cido galacturnico. de maushan que pudieron hidrolizarse junto con la pectina extrada. Loesecke (1949) obtuvo 10,19% En la Tabla 1 se muestra que los mayores de cido galacturnico en bananos, porcentaje de rendimientos de pectina extrada de frutos de cido galacturnico, por debajo a lo obtenido en la maushan se registraron en frutos en estado de sazn pectina de frutos de maushan. en comparacin con el estado maduro siendo significativa la prueba; lo cual concuerda con Flores (1996), manifiesta que la velocidad o tiempo Proctor y Peng (1989), quienes manifiestan que de gelificacin depende en gran parte de la cuando la fruta va madurando los componentes de la velocidad de enfriamiento del gel; al enfriar pared celular y de la lmina media de la clula lentamente se logran gelificaciones a temperaturas vegetal experimentan notables variaciones ms altas, por esta razn la velocidad de gelificacin estructurales que ocasionan cambios en la textura de se determina a temperatura constante, debido a que la fruta; las sustancias pcticas hemicelulosa y es un parmetro importante para la caracterizacin cel ul os a s on s omet i dos a pr oces o de de la pectina; en nuestra investigacin los menores despolimerizacin que contribuye al ablandamiento tiempos de gelificacin se registraron en el de la fruta, por lo cual el contenido de pectina va tratamiento T7 (5,63 minutos), lo cual se aproxim disminuyendo; lo cual puede haber ocurrido al a la pectina comercial (4,0 minutos). El mayor hallar un menor rendimiento de pectina al emplear tiempo de gelificacin obtenido en la pectina frutos de maushan en estado maduro. extrado de frutos de maushan posiblemente es atribuida al mayor tamao de partcula, debido a que El rendimiento de la pectina extrada de frutos de en la molienda de la pectina obtenida del fruto de maushan, para el estado de sazn estuvo en un rango maushan se emple un mortero, obteniendo de 2,15% y 1,11% mientras que para el estado tamaos de partculas heterogneas, siendo maduro estuvo entre 1,13% a 0,59%; similares adecuado reducirlas hasta su paso por una malla 60 rendimientos encontr Lima (1999), empleando mesh, Kelco (2005). tambin el mtodo de hidrlisis cida en frutos de maracuy, obteniendo alrededor de 2%, porcentaje menor al rendimiento obtenido en el tratamiento T7 CONCLUSIONES del fruto de maushan en estado de sazn (Tabla 1). El empleo de cido ctrico y cido fosfrico en el 1. Los mejores valores de rendimiento, porcentaje agua acidulada y fruto en estado de sazn de cido galacturnico y menor tiempo de registraron los mayores rendimientos de pectina; gelificacin en pectina de frutos de maushan se resultados que coinciden con el estudio realizado lograron cuando se emple frutos de maushan por Schemin (2005), quienes al extraer pectina de en estado de sazn, pH 2,0 del agua acidulada pulpa de manzana obtuvieron un mayor rendimiento con cido ctrico y cido fosfrico. en el agua acidulada con cido ctrico. 2. La pectina obtenida del mesocarpio del fruto del En el porcentaje de cido galacturnico de la pectina maushan en el estado de sazn se obtuvo con los mayores rendimientos (1,37% - 2,15%) y los obtenida en frutos de maushan se observ que el menores tiempos de gelificacin (5,63 6,04 estado de sazn registr los ms altos porcentajes en minutos) empleando cido ctrico y cido los tratamientos T1, T4, T5, T7 y T8; mientras que fosfrico. en el estado maduro slo se registr en el Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 181 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS and other uronides. En Hulme, A. C. ed. The Biochemistry of Fruits and their products. London, Amos, A.J. 1969.- Manual de industrias de los Academic Press. Vol. 1. Pp. 53-80. alimentos.- Pectina. pp.135 136. Proctor, A. y L.C. Peng 1989. Pectin trantions Charchalac, Lilian Raquel. 2008. Efecto del agente during Blueberry fruit development and ripening. 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Se retira el corazn con semillas y
pednculos
Materia Prima
Lavado
Cortado
Escaldado
85C/10min.
Pulpeado
Tamizado I
Lavado
Deshidratado
80C/112h
Tamizado II
Bagazo desecado
Figura 1. Diagrama de flujo para la obtencin de bagazo desecado a partir de fruto de Maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo), proveniente del distrito de San Miguel de Soloco, regin Amazonas. Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 183 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X
Bagazo
Bagazo
pH:2,0
pH:2,5
pH:3,0
pH:2,0 pH:2,5
pH:3,0
Hasta 1/4
1/5 del
volumen
inicial
OH 96 por 4 horas
OH 70 y OH 96
T = 55 C
Bagazo desecado
Solubilizacin cida
Sazn
Maduro
H 3
PO 4
cido Ctrico
HCl
Filtracin I
Concentracin
Coagulacin-Pectina
Filtracin II
Lavado
Secado
Almacenamiento
HCl
H 3
PO 4
cido Ctrico
Figura 2. Diagrama de flujo para la extraccin de pectina a partir de frutos de maushan (Vasconcellea weberbaueri (Harms) V.M. Badillo), proveniente del distrito de San Miguel de Soloco, regin Amazonas. Maldonado Y. Extraccin de pectina mediante el mtodo 184 Rev. Aporte Santiaguino 2010; 3(2): 177-184. ISSN 2070-836X