PROTENA C REACTIVA (CRP)

Dr. Fernando Semprtegui

Octubre 2011.

1. CRP e infeccin
La protena C reactiva (CRP) es de origen heptico y su produccin se incrementa por accin de
las citocinas pro-inflamatorias: TNF-, IL-6, IL-1. Estas citocinas son, a su vez, producidas por
fagocitos activados: macrfagos y clulas dendrticas. Los fagocitos se activan cuando contactan
con patgenos va toll-like receptors (TLRs). El contacto con TLRs provoca una seal de
membrana que conduce a la activacin de factores de transcripcin como el NF-B el cual, al
translocarse al ncleo, participa en la transcripcin de los genes de citocinas pro-inflamatorias.
De modo que el incremento de CRP en el suero sanguneo es un indicador de actividad de
fagocitos debida a infeccin bacteriana o viral. Debe tenerse en cuenta, precisamente, que hay
TLRs para bacterias y virus. En general los TLRs para virus son intracelulares, como el TLR3
para RNA viral de doble cinta y el TLR7 para el RNA viral de una sola cinta. Precisamente, el
virus del sarampin es un virus RNA de una sola cinta. El RNA viral en contacto con los TLRs
intracelulares provoca una seal de membrana que conduce a la activacin de factores de
transcripcin como el NF-B ya mencionado y el dmero IRF3-IRF7 que permite la expresin de
interferones alfa y beta que desencadenan mecanismos antivirales.
La CRP y otras protena de origen heptico que tambin se producen por accin de las citocinas
pro-inflamatorias, salen a la circulacin y funcionan como opsoninas para favorecer la actividad
fagoctica de macrfagos, clulas dendrticas y polimorfonucleares neutrfilos (PMNs).
2. CRP e inflamacin
CRP podra estar incrementada en ausencia de infeccin bacteriana o viral. Se trata de estados de
inflamacin crnica en los que se mantiene incrementada produccin de citocinas. En estas
situaciones debe sospecharse la presencia de focos ocultos de inflamacin, tales como los de las
clulas espumosas (macrfagos activados por LDL) que se encuentran en la ntima de los vasos
sanguneos como parte de los ateromas. En sujetos con inflamacin crnica la absorcin de
hierro podra afectarse debido al incremento de hepcidina (Wang 2011). En nuestros estudios en
Quito, en adultos mayores con sobrepeso/obesidad, hemos encontrado altas concentraciones de
CRP (Sempertegui 2011) asociadas con aumentada concentracin de hepcidina en el suero y
anemia (Dao 2011). La accin sostenida de las citocinas pro-inflamatorias en estos individuos
conduce a prdida de la protena muscular. Recprocamente, el ejercicio puede recuperar el
msculo y disminuir los niveles de CRP (Ogawa 2010). En adultos mayores, la elevada
concentracin de CRP se relaciona con mayor mortalidad (Giovannini 2011). Aunque los focos
inflamatorios vasculares son una fuente de citocinas pro-inflamatorias en esta edad, hay otras
situaciones como la adiposidad pues las clulas adiposas pueden producir IL-6 y TNF- (Meijer
2011), disminucin de las hormonas esteroideas, depresin, enfermedad peri-odontal, asociadas a
inflamacin crnica (Singh 2010). Sin embargo, en diversos estudios epidemiolgicos no se ha
podido establecer la causa de persistente inflamacin en el envejecimiento.
3. Protocolo para medicin semi-cuantitativa de CRP en suero sanguneo
Usaremos suero sanguneo fresco: Extraer 5 mL de sangre venosa, permitir que se retariga el
cogulo, centrifugar y separar el suero en otro tubo.
Preparar dos diluciones de suero con solucin salina isotnica: 1/2 y 1/4. Para eso, tomar 100 L
de suero y aadir 100 L de solucin salina (dilucin 1/2) y disponer en un tubo rotulado. Luego,
tomar 100 uL de suero y aadir 300 L de solucin salina (dilucin 1/4) y disponer en otro tubo
rotulado.
De cada tubo tomar 50 L con micropipeta y disponer sobre una placa de vidrio limpia en la que
previamente se han delimitado dos crculos con marcador. Agitar el reactivo de ltex (usaremos
un kit fabricado por la empresa Omega Diagnostics, Scotland, UK) y disponer una gota con el
gotero sobre el suero ya depositado en cada crculo. Mezclar con un palillo diferente en cada
crculo hasta que el reactivo cubra todo el crculo. Suavemente rote la placa por dos minutos y
examine visualmente si hay aglutinacin. Corra simultneamente un control negativo y uno
positivo. El control negativo debe ser negativo en las dos diluciones. El control positivo debe ser
positivo en las dos diluciones.
El lmite de sensibilidad del kit es de 6 mg/litro. Es decir, si no hay aglutinacin en ninguna de
las dos diluciones la concentracin de CRP es 6mg/litro. Si hay aglutinacin en una o en las
dos diluciones se tomar la dilucin como factor de clculo. Si, por ejemplo, la prueba es
positiva en la dilucin 1/2, se multiplicar 2X6= 12 mg/litro de CRP. Si la prueba es positiva en
las dos diluciones, entonces la concentracin de CRP es 4X6=24 mg/litro. En este ltimo
ejemplo lo aconsejable es realizar una dilucin mayor (1/8), pero no lo haremos por dos razones:
una, el kit es costoso y, otra, 24 mg/litro es alta concentracin de CRP y nos proporciona una
idea acerca de los mecanismos inflamatorios asociados a su produccin el lmite normal es
6mg/litro).
En una hoja aparte discuta los resultados de su muestra y entregue al ayudante cuando l seale.
Referencias
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