Bacteriologia 2013-2014

1
Programa acadmico de la asignatura

de Microbiologa y Parasitologa

Bacteriologa
Unidad Temtica I

PLAN 2010

Segundo ao
2013-2014

Departamento de Microbiologa y Parasitologa
Facultad de Medicina
Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Ciudad Universitaria, D.F., julio de 2013.

Manuales Departamentales
2

Dr. Enrique Graue Wiechers Director
Dra. Rosalinda Guevara Guzmn Secretario General
Dr. Pelayo Vilar Puig Jefe de la Divisin de Estudios de Posgrado
E Investigacin
Dr. Leobardo Ruz Prez Secretaria de Enseanza Clnica, Internado
Y Servicio Social
Dra. Irene Durante Montiel Secretaria Tcnica del H. Consejo Tcnico
Dr. Melchor Snchez Mendiola Secretario de Educacin Mdica
Dr. Ricardo Valdivieso Caldern Secretario de Servicios Escolares
Dr. Jaime Mas Oliva Coordinador de Investigacin
Dra. Teresa Fortoul van der Goes Coordinadora de Ciencias Bsicas
Dr. Arturo Ruiz Ruisnchez Coordinador de Servicios a la Comunidad
Lic. Graciela Zuiga Gonzlez Secretaria Administrativa
Lic. Ral A. Aguilar Tamayo Secretario Jurdico y de Control Administrativo
Dra. Ma. Eugenia Ponce De Len
Castaeda
Coordinacin de Modificacin del Plan de
Estudios

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

Dra. Patricia M. Tato Zaldivar Jefa del Departamento
Q.F.B. Yolanda Garca Yez Coordinadora de Enseanza
M.C. Beatriz Meraz Ros Coordinadora de Evaluacin
Dr. Javier R. Ambrosio Hernndez Coordinador de Investigacin
M. en C. Aurora Candil Ruiz Colaboradora de la Coordinacin
M. en C. Rafael Garca Gonzlez

Colaborador de la Coordinacin

FACULTAD DE MEDICINA

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ACTUALIZACIN Y REVISIN DE LOS GUIONES

Dr. en C. Gonzalo Castillo Rojas Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa
M. en C. Estrella Cervantes Garca Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa
M. en C. Rafael Garca Gonzlez Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa
Dra. en C. Lilian Hernndez Mendoza Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa
Dra. en C. Patricia Tato Zaldivar Profesora Titular de Bacteriologa y Virologa
M. en C. Jorge Villaseca Flores

Profesor Titular de Bacteriologa y Virologa

Misin y Visin de la Facultad de Medicina
Misin

La Facultad de Medicina como parte de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico es una
institucin pblica dedicada a formar profesionales lderes en las ciencias de la salud, altamente
calificados, capaces de generar investigacin y difundir el conocimiento. Sus programas estn
centrados en el estudiante, promueven el aprendizaje autorregulado y la actualizacin permanente
con nfasis en la conducta tica, el profesionalismo y el compromiso con la sociedad mexicana.

Visin

La Facultad de Medicina ejercer el liderazgo intelectual y tecnolgico en las ciencias de la salud en
el mbito nacional e internacional, mediante la educacin innovadora y la investigacin creativa
aplicadas al bienestar del ser humano.
4

DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA

Coordinacin del programa

Coordinacin de Enseanza,
Departamento de Microbiologa y
Parasitologa
Tipo de asignatura

Terica Prctica (40-60%)

Ubicacin

2ao

Duracin

Anual

Nmero de horas

Teora 102 h. (3h/sem)
Prctica 136 h. (4h/sem)
Crditos

17

Carcter

Obligatorio

Clave

1231

Requisitos acadmicos

Acreditacin total de las
asignaturas de 1ao

5

CALENDARIO ESCOLAR 2013-2014
PLAN 2010

Bacteriologa EXMENES ORDINARIOS
Inicio: Lunes 5 de agosto
Trmino: Viernes 11 de octubre Primero: Lunes 5 de mayo
De: 08:00 a 15:00 h
Sede: Unidad Tlatelolco Virologa

Inicio: Lunes 14 de octubre Segundo: Martes 20 de mayo
Trmino: Viernes 22 de noviembre De: 08:00 a 12:30 h
Sede: Unidad Tlatelolco
Micologa
Inicio: Lunes 25 de noviembre EXAMEN EXTRAORDINARIO
Trmino: Viernes 24 de enero Mircoles 11 de junio
De: 08:00 a 12:30 h
Parasitologa Sede: Unidad Tlatelolco
Inicio: Lunes 27 de enero
Trmino: Viernes 11 de abril VACACIONES
Del 16 de diciembre de 2013 al 04 de enero de
2014.
EXMENES PARCIALES
Semana Santa del 14 al 18 de abril de 2014.
Primero: jueves 31 de octubre
Bacteriologa Del 07 al 25 de julio de 2014.
10:00 a 12:00 h
Sede: Facultad de Medicina

Segundo: lunes 9 de diciembre
Virologa
10:00 a 12:00 h
Sede: Facultad de Medicina

Tercero: martes 4 de febrero
Micologa
8:00 a 15:00 h

Cuarto: Mircoles 23 de abril
Parasitologa
8:00 a 15:00 h

I. BACTERIOLOGA SEGUNDO AO, 2013-2014
6
PROGRAMA ACADMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

OBJETIVOS DEL REA

OBJETIVOS DEL REA DE BACTERIOLOGA
MDICA

1. Sealar los microorganismos mas frecuentes
asociados a enfermedades infecciosas de los
diferentes aparatos y sistemas.

2. Explicar los mecanismos moleculares y
factores de virulencia que ejercen las
bacterias para producir enfermedad.

3. Describir los mecanismos moleculares
desencadenados en el husped para
defenderse de los microorganismos
responsables de enfermedad.

4. Sealar el tratamiento antimicrobiano
especfico para las enfermedades
bacterianas ms frecuentes, el mecanismo de
accin de los mismos.

5. Informar de los mtodos diagnsticos
utilizados, para la identificacin del
agente etiolgico de una enfermedad
infecciosa bacteriana.

6. Establecer diagnsticos clnicos y etio-
lgicos diferenciales en una enfermedad
infecciosa.

7

ACTIVIDADES DEL PROCESO ENSEANZA-APRENDIZAJE

DEL PROFESOR TITULAR

1. Discusin dirigida
2. Seminarios
3. Dinmica de grupos
4. Evaluacin

DEL PROFESOR DE PRCTICAS

1. Discusin dirigida
2. Demostracin
3. Evaluacin

DEL ALUMNO

1. Preparacin del tema
2. Revisin bibliogrfica
3. Desarrollo de habilidades y destrezas
4. Participacin en las clases tericas y prcticas

PERFIL DEL DOCENTE

1. Tener una licenciatura en medicina o reas
afines
2. Demostrar aptitud para la docencia
3. Tener preparacin en el rea docente por
impartir
4. Enriquecer sus conocimientos en la materia
que imparta.
5. Contar con solvencia moral, tica y profesional
6. Realizar trabajo en equipo
7. Capacidad para conducir grupos de alumnos

MATERIAL DE APOYO A LA DOCENCIA

Fsicos

1. Laboratorio
2. Proyectores

Materiales

1. Microscopios
2. Proyectores
3. Epidiascopios
4. Transparencias
5. Preparaciones para la observacin al
microscopio
6. Audiovisuales
7. Pelculas
8. Micoteca.
9. Equipo y material de laboratorio

OBRAS DE CONSULTA

Fuentes de informacin electrnica

1. Recursos en Microbiologa y Parasitologa
del Depto. de Microbiologa y Parasitologa,
Fac. de Medicina, UNAM en:
www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/

Libros
1. Champoux JJ, Neidhart FC, Drew L, Plorde
JJ. Microbiologa Mdica 4a.ed. Mxico:
McGraw-Hill Interamericana Editores; 2004.
2. Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA, Brooks
GF, Butel JS, Ornston LN. Microbiologa
mdica. Mxico; Manual moderno; 2005.
3. Molina LJ, Manjarrez ZM, Tay ZJ.
Microbiologa:Bacteriologa y Virologa. 1 ed.
Mxico; Mndez Cervantes; 2010
4. Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS,
Pfaller MA. Microbiologa Mdica .5a ed.
Mxico; McGraw Hill Interamericana; 2006.
5. Ryan KJ, Ray Sherris CG. Microbiologa
Mdica. 4a ed. Mxico; McGraw-Hill
Interamericana; 2004.
6. Tay ZJ, Gutirrez QM, Lpez MR, Manjarrez
ZMA, Molina LJ. Microbiologa y Parasitologa
Mdica. Mxico; Mndez Cervantes; 2012.

8

CALENDARIO DE ACTIVIDADES:
CALENDARIO SUGERIDO PARA CUBRIR LAS ACTIVIDADES DE LA PRIMERA UNIDAD
TEMTICA (Bacteriologa)

EL CALENDARIO SE ENCUENTRA EN LA PAGINA WEB DEL DEPARTAMENTO COMO ARCHIVO
INDEPENDIENTE
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PRESENTACIN

EL PROPSITO FUNDAMENTAL DEL
CURSO de bacteriologa para los estudiantes
de segundo ao de la carrera de Mdico
Cirujano de la Facultad de Medicina de la
Universidad Nacional Autnoma de Mxico es
el de proporcionar al estudiante, la informacin
necesaria para entender el comportamiento de
la bacteria como organismo vivo y su relacin
con el ambiente que le rodea. Para este fin, se
abordarn temas de bacteriologa bsica, que
incluirn; estructura bacteriana, funcin de los
componentes celulares, gentica, metabolismo
y mecanismos de resistencia bacteriana. As
como el conocimiento de las bases biolgicas
de la interaccin del patgeno con el husped
a travs de la respuesta inmune.
Constituyendo la base para el entendimiento
de los diversos agentes bacterianos
productores de enfermedades infecciosas en
diferentes sitios del cuerpo humano., as como
su diagnstico etiolgico y medidas de
prevencin y tratamiento.

Aunque resulte reiterativo, es importante
mencionar que este curso no debe ser
considerado terminal, ya que tanto el
estudiante como el mdico deben mantenerse
constantemente actualizados, debido a los
constantes cambios que se dan en
Microbiologa, de la que forma parte la
bacteriologa.
El presente edicin del Manual presenta una
organizacin temtica, en la que incluye once
guiones; dos guiones de bacteriologa bsica
y ocho en la que se abordan las diferentes
bacterias organizadas en base al aparato o
sistema que se ven afectados por ellas y
finalizamos con un guin relacionado con la
respuesta inmune inducida por las bacterias.
Se incluye adems, referencias especficas
sobre el rea en estudio y una lista de
referencias de Internet que contienen
informacin sobre bacteriologa mdica, con el
fin de orientar al estudiante.
10

NDICE

Pg.
Directorio .. 2
Misin y Visin de la Facultad.. 3
Calendario escolar 2013-2014 .. 5
Objetivos de rea . 6
Actividades del proceso enseanza-
aprendizaje . 7

GUIONES TERICOS

1. Introduccin a la Relacin hospedero-
parsito . 11
2. Introduccin a la Bacteriologa ....... 12
3. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto respiratorio ...... 13
4. Bacterias causantes de Infecciones de
tejidos superficiales y profundos .. 17
5. Bacterias causantes de Infecciones del
tracto gastrointestinal .... 19

GUIONES PRCTICOS

Introduccin a las prcticas de
Laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa . 37
Prctica No. 1 Bioseguridad . 38
Prctica No. 2 Manejo y cuidado del
microscopio . 41
Prctica No. 3 Introduccin a la Bacteriologa.. 43
Prctica No. 4 Infecciones de vas
respiratorias 46
Prctica No. 5 Infecciones de tejidos blandos . 48
Prctica No. 6 Infecciones del tracto
gastrointestinal 50
Prctica No. 7 Infecciones sistmicas 53
Prctica No. 8 Infecciones de vas urinarias . 55
Prctica No. 9 Infecciones de transmisin
Sexual .. 59
Prctica No. 10 Infecciones del SNC ... 60
Anexo: Determinacin de sensibilidad a
antimicrobianos .... 62
6. Bacterias causantes de Infecciones
Sistmicas . 22
del tracto urinario ..... 25
de transmisin sexual .. 27
del sistema nervioso central ... 31
10. Agentes Bacterianos productores de
neurotoxinas .33
11. Respuesta inmune hacia las bacterias 35

11

1. INTRODUCCIN A LA RELACIN HOSPEDERO-PARSITO

La Microbiologa mdica estudia los
microorganismos que son responsables de las
principales enfermedades infecciosas de los
humanos. Podemos considerar como agentes
infecciosos a los priones, virus, bacterias, hongos y
parsitos. Las enfermedades infecciosas son muy
frecuentes, pueden ser graves e incluso causar la
muerte. En general son fcilmente diagnosticables
y curables, algunas son prevenibles y muchas de
ellas tienen importantes consecuencias sociales y
econmicas. Los diferentes agentes infecciosos
presentan factores de virulencia que les permiten
colonizar al hospedero y causar enfermedad. La
mayora son transmitidos por alimentos o agua
contaminados, por fmites, por contacto directo, por
la sangre o secreciones, y algunos de ellos,
necesitan de vectores para poder infectar al
humano. Las bacterias, los virus y los parsitos
transportados por el agua, provocan cerca de
cuatro millones de muertes por ao en el mundo.
Quienes ms riesgo corren son los 1,100 millones
de personas que carecen de acceso a agua potable
y segura y los 2,400 millones sin instalaciones de
servicios de salud adecuadas.

1.1 Importancia de las enfermedades
infecciosas

1.2 Caractersticas de los agentes infecciosos

1.3 Relaciones interespecficas de los seres
vivos
1.3.1 Simbiosis
1.3.1.1 Foresis
1.3.1.2 Comensalismo
1.3.1.3 Parasitismo
1.3.1.4 Mutualismo

1.4 Relacin husped-parsito
1.4.1 Factores del husped
1.4.2 Factores del parsito
1.4.3 Factores del ambiente

1.5 Etiologa de las enfermedades infecciosas
1.5.1 Postulados de Koch (clsicos y
moleculares).

1.6 Mecanismos de transmisin

1.7 Vas de diseminacin

1.8 Eliminacin

1.9 Control de enfermedades infecciosas

1.10 Generalidades de los factores de virulencia
y patogenicidad de bacterias, virus,
hongos y parsitos

1.11 Conceptos bsicos de la Microbiologa y
Parasitologa mdicas
1.11.1 Infeccin, enfermedad, signo, sntoma
y sndrome
1.11.2 Historia natural de la enfermedad:
periodo de incubacin, prodrmico, de
estado, convalecencia y recada
1.11.3 Enfermedad: aguda, latente, crnica,
sistmica, primaria y secundaria.
1.11.4 Morbilidad y mortalidad
1.11.5 Oportunismo
1.11.6 Emergencia y re-emergencia
1.11.7 Trasmisores biolgicos y mecnicos

12

2. INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA

Las bacterias son clulas procariotas y
pequeas que solo se pueden observar con la
ayuda del microscopio, presentan diferentes
formas, carecen de ncleo y de organelos
celulares. Tienen estructuras nicas como la pared
celular que contiene peptidoglicano con o sin
lipopolisacridos. Tpicamente, el cromosoma
bacteriano es solo uno y es una molcula circular
de ADN de doble cadena que contiene
aproximadamente 5 millones de pares de bases.
Las bacterias tienen ribosomas 70S que son
diferentes a los de las clulas eucariotas pero que
realizan la misma funcin. Aunque las bacterias se
dividen por fisin binaria, han desarrollado
mecanismos para intercambiar informacin
gentica, lo que les ha permitido adaptarse mejor al
medio ambiente. Las bacterias pueden sobrevivir
en medios hostiles como en los que la presin
osmtica es muy baja o en temperaturas extremas
y pueden usar diversas fuentes de energa para su
metabolismo. Es indudable que el conocimiento de
las bacterias, desde el punto de vista gentico,
metablico y estructural, constituye un elemento
fundamental para poder realizar una clasificacin
til en la prctica mdica, as como comprender la
participacin de la expresin de los factores de
patogenicidad en la relacin husped bacteria.

2.1 Antecedentes histricos de la Bacteriologa

2.2 Formas bacterianas
2.2.1 Cocos, bacilos y espirilos

2.3 Estructura y funcin de sus componentes
celulares
2.3.1 Cpsula
2.3.2 Pared celular bacterias gram-positivas
y gram negativas. Protoplastos,
esferoplastos y formas L
2.3.3 Membrana externa y membrana
plasmtica
2.3.4 Pili, fimbrias, flagelos
2.3.5 Citoplasma (ribosomas, cuerpos de
inclusin)
2.3.6 Cromosoma bacteriano, elementos
extracromosmicos
2.3.7 Esporas

2.4 Clasificacin. La clasificacin ms importante
para el mdico es la que permite hacer una
pronta y correcta identificacin del
microorganismo (morfologa, agrupacin, tipo
de tincin, identificacin serolgica,
metabolismo y gentica).

2.5 Gentica bacteriana
2.5.1 Replicacin del cromosoma
2.5.2 Informacin gentica: genes (estructura
y funcin: transcripcin, traduccin).
2.5.3 Mecanismos de intercambio de
informacin gentica entre las
bacterias: conjugacin, transformacin,
transduccin.
2.5.4. Rearreglos cromosmicos por
transferencia horizontal de genes:
transposones, secuencias de insercin
y eventos de recombinacin.
2.5.5 Tipos de mutaciones, factores fsicos y
qumicos que intervienen en la
induccin de mutaciones.

2.6 Metabolismo bacteriano
2.6.1 Auttrofos, Hetertrofos,
Quimiottrofos y Littrofos
2.6.2 Aerobios, Anaerobios, Facultativos y
Microaeroflicos
2.6.3 Metabolismo fermentativo y oxidativo
2.6.4 Cultivo de bacterias. Curva de
crecimiento bacteriano.

13

3. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL TRACTO
RESPIRATORIO

Las enfermedades del tracto respiratorio
superior representan una de las causas ms
frecuentes de consulta mdica. El tracto respiratorio
es un sitio comn para el establecimiento de
microorganismos patgenos debido al tropismo que
tienen ciertos microorganismos por el epitelio
respiratorio y por encontrarse en real comunicacin
con el medio ambiente. Las manifestaciones
clnicas de las infecciones depen del rgano blanco
del microorganismo (otitis media, sinusitis, faringitis,
amigdalitis, epiglotitis, bronquitis, neumona, etc.),
de la edad del paciente y de factores
predisponentes agregados que presente. En
general, las infecciones del tracto respiratorio las
podemos dividir en infecciones altas y bajas.
Aunque existen numerosas bacterias que pueden
producir enfermedad, aqu solo se har referencia a
aquellas que son ms importantes por su
frecuencia o por producir cuadros clnicos graves.
Un diagnstico etiolgico correcto har la
diferencia en el xito del tratamiento y evitar
complicaciones con secuelas importantes.

3.1 Streptococcus pyogenes
3.1.1 Caractersticas del microorganismo
3.1.1.1 Microscpicas
3.1.1.2 Antignicas
3.1.2 Factores de virulencia
3.1.2.1 Adherencia al epitelio
(protena M, ALT y F).
3.1.2.2 Evasin de la fagocitosis
(protena M y cpsula)
3.1.2.3 Dao al husped por enzimas
(hialuronidasa, DNAsas, C5a
peptidasas, estreptocinasas,
estreptolisisnas S y O) y
exotoxinas pirognicas A, B y
C.
3.1.3 Epidemiologa
3.1.3.1 Transmisin por contacto
directo y secreciones
farngeas.
3.1.3.2 Incidencia de la faringitis
en los grupos de edad 5-15
aos. Importancia de cuadros
clnicos de repeticin.
3.1.3.3 Serotipos asociados a
faringoamigdalitis, fiebre
reumtica, enfermedades
infecciosas de piel, sndrome
de choque txico.

3.1.4 Patognesis
3.1.4.1 Iniciacin del proceso
infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas.
3.1.4.2 Faringitis.
3.1.4.3 Enfermedades producidas por
toxinas (Escarlatina y
Sndrome de Choque txico
estreptoccico).
3.1.4.4 Otitis media, adenitis cervical
supurativa, angina de Ludwig,
sinusitis aguda.
3.1.4.5 Otras enfermedades
asociadas a estreptococos
(infecciones de tejidos
blandos).
3.1.4.6 Complicaciones: secuelas
posestreptoccicas (fiebre
reumtica aguda y
glomerulonefritis aguda),
sndrome de choque
estreptocccico.
3.1.5 Participacin de la respuesta inmune
en el control de las infecciones.
3.1.6 Diagnstico de laboratorio
3.1.6.1 Cultivo en agar sangre
3.1.6.2 Aglutinacin con anticuerpos
contra el antgeno del grupo A
3.1.6.3 Pruebas serolgicas
(deteccin de anticuerpos
anti-estreptolisina O, anti
DNasas y anti hialuronidasa)
3.1.7 Diagnstico diferencial
3.1.7.1 Faringitis de origen viral y
bacteriano
3.1.7.2 Escarlatina con otras
enfermedades exantemticas
3.1.7.3 Fiebre reumtica aguda con
enfermedades autoinmunes
3.1.8 Estrategias de Tratamiento
3.1.8.1 Antimicrobiano
3.1.8.2 Tratamientos de fiebre
reumtica y glomerulonefritis.
3.1.9 Prevencin y Control
3.1.9.1 Identificacin de portadores y
erradicacin del estado de
portador
3.1.9.2 Quimioprofilaxis en personas
que han padecido fiebre
reumtica.

14

3.2 Corynebacterium diphtheriae
3.2.1.1 Caractersticas de la pared
celular
3.2.1.2 Morfologa (forma
pleomrfica, presencia de
grnulos metacromticos)
3.2.1.3 Caractersticas tintoriales y
agrupacin
3.2.1.4 Cultivo
3.2.2.1 Toxina diftrica (tipo A-B).
Mecanismo de accin de la
toxina.
3.2.3 Epidemiologa
3.2.3.1 Distribucin
3.2.3.2 Portadores asintomticos
3.2.3.3 Transmisin
3.2.3.4 Reservorio
3.2.3.5 Grupo susceptible de
infeccin
3.2.3.6 Morbilidad y mortalidad
3.2.4 Patognesis
signos y sntomas
3.2.4.2 Difteria respiratoria
(pseudomembrana en faringe
y regiones aledaas)
3.2.4.3 Difteria cutnea
3.2.4.4 Complicaciones: obstruccin
respiratoria, arritmia cardaca
y coma.
3.2.5. Participacin de la respuesta inmune
en el control de las enfermedades
3.2.6.1 Streptococcus pyogenes
3.2.6.2 Haemophilus influenzae B
3.2.7.1 Cultivo
3.2.7.2 Identificacin microscpica y
macroscpica a partir del
aislamiento en Medio Lffler y
Agar cistena-telurito
3.2.7.3 Caracterizacin bioqumica:
catalasa y nitrato positivo,
fermentacin de glucosa y
maltosa
3.2.7.4 Pruebas de toxinogenicidad in
vivo e in vitro
3.2.8 Estrategias del tratamiento
3.2.8.1 Antitoxina diftrica
3.2.8.2 Antimicrobianos

3.2.9 Prevencin y control
3.2.9.1 Vacunacin con toxoide
diftrico (DPT)
3.2.9.2 Prueba de Schick
3.2.9.3 Profilaxis con antimicrobianos

3.3 Bordetella pertussis
3.3.1.1 Morfologa y tincin
3.3.1.2 Cultivo
3.3.1.3 Caractersticas antignicas
3.3.2 Epidemiologa
3.3.2.1 Distribucin de la enfermedad
3.3.2.3 Reservorio
3.3.2.4 Factores de riesgo para
desarrollar la enfermedad
3.3.2.5 Transmisin
3.3.3.1 Adhesinas fimbriales y no
fimbriales
3.3.3.2 Toxina pertussis
3.3.3.3 Toxina adenilatociclasa
3.3.3.4 Toxina dermonecrtica
3.3.3.5 Citotoxina traqueal
3.3.3.6 Lipopolisacrido
3.3.4 Patognesis
Infeccioso y desarrollo de
signos y sntomas
3.3.4.2 Tosferina
3.3.4.3 Complicaciones: anoxia del
SNC, neumona secundaria
por invasin de otros
microorganismos.
en el control de la enfermedad
3.3.6.1 Haemophilus influenzae
3.3.6.2 Streptococcus pneumoniae
3.3.6.3 Mycoplasma pneumoniae
3.3.7.1 Muestra: aspirado de
nasofaringe
3.3.7.2 Cultivo
3.3.7.3 Inmunofluorescencia
(deteccin de IgG e IgA
contra la hemaglutinina
filamentosa, IgG contra la
toxina pertussis)
3.3.8.1 Medidas de apoyo

15

3.3.9.1 Vacuna multivalente DPT
triple
3.3.9.2 Vacuna de antgenos
especficos como la
hemaglutinina filamentosa o la
toxina pertussis, aglutininas
fimbriales y pertactina
3.3.9.3 Profilaxis antibacteriana de
los contactos.

3.4 Streptococcus pneumoniae
3.4.1.1 Morfologa, agrupacin y
tincin
3.4.1.2 Serogrupos
3.4.2.1 Cpsula
3.4.2.2 Pared celular
3.4.2.3 Autolisina
3.4.2.4 Neumolisina
3.4.2.5 Factor purprico
3.4.2.6 Neuraminidasa
3.4.2.7 Amidasa.
3.4.2.8 Protenas de unin a colina
3.4.2.9 Peroxidasa
3.4.2.10 Proteasa de IgA
3.4.3 Epidemiologa
3.4.3.2 Transmisin
3.4.3.3 Factores predisponentes del
husped (edad susceptible)
3.4.3.4 Portadores sanos
3.4.4 Patognesis
signos y sntomas
3.4.4.2 Neumona
3.4.4.3 Bronquitis aguda
3.4.4.4 Bronquitis crnica
3.4.4.5 Complicaciones: derrame
pleural y bacteriemia
en contra de la infeccin
3.4.6.2 Chlamydophila pneumoniae
3.4.7.1 Tincin y agrupamiento
3.4.7.2 Reaccin de Qellung,
coaglutinacin
3.4.7.3 Cultivo
3.4.7.4 Susceptibilidad a optoquina y
solubilidad en sales biliares

3.4.8 Tratamiento
3.4.9.1 Vacuna 7-valente para
lactantes y nios. Vacuna 23-
valente para personas con
riesgo de desarrollar
enfermedad neumoccica.
3.4.10 Otras enfermedades producidas por S.
pneumoniae

3.5 Mycoplasma pneumoniae y Chlamydophila
pneumoniae
3.5.1 Caractersticas de los microorganismos
3.5.1.1 Envoltura celular
3.5.1.2 Parsitos intracelulares
obligados
3.5.1.3 Cultivo
3.5.3 Epidemiologa
3.5.3.1 Transmisin y factores
predisponentes
3.5.4 Patognesis
en el control de estas infecciones
3.5.6 Diagnstico etiolgico diferencial
3.5.6.2 Haemphilus influenzae
3.5.6.3 Chlamydophila pneumoniae
3.5.7.1 Cultivo
3.5.7.2 Serolgico
3.5.8 Tratamiento
3.5.9 Control y prevencin

3.6. Mycobacterium tuberculosis
3.6.1.1 Pared celular, morfologa y
metabolismo
3.6.1.2 Tincin
3.6.1.3 Cultivo
3.6.1.4 Componentes antignicos
3.6.2.1 Factor cordn
3.6.2.2 Supervivencia en macrfagos
3.6.2.3 Componentes que
intervienen en la activacin
de macrfagos
3.6.2.4 Induccin de
inmunopatologa
3.6.2.5 Desarrollo de resistencia a
drogas antituberculosas

16

3.6.3 Epidemiologa
3.6.3.2 Incidencia nacional y mundial
3.6.3.3 Infeccin emergente (husped
inmunocomprometidos)
3.6.3.4 Transmisin
3.6.4 Patognesis
signos y sntomas
3.6.4.2 Formas clnicas y
complicaciones
3.6.4.3 Primo infeccin
3.6.4.4 Tuberculosis primaria
3.6.4.5 Tuberculosis secundaria
3.6.4.6 Meningoencefalitis
tuberculosa
3.6.4.7 Tuberculosis diseminada
en el control de la infeccin
3.6.6.1 Otras micobacterias: M. bovis,
M. avium. Destacar la
importancia de estas
micobacterias no tuberculosas
en pacientes
inmunodeprimidos por SIDA o
drogas inmunosupresoras.
3.6.6.2 Cncer pulmonar
3.6.7 Diagnstico de laboratorio y de
gabinete
3.6.7.1 Baciloscopa
3.6.7.2 Cultivo
3.6.7.3 Mtodos moleculares
3.6.7.4 Valoracin del PPD
3.6.7.5 Radiografa de trax
3.6.7.6 Otras tcnicas de gabinete
3.6.8 Estrategia de tratamiento
3.6.8.1 Esquema de tratamiento
antifmico (Norma Oficial
Mexicana)
3.6.9 Control y prevencin
3.6.9.1 Vacuna BCG
3.6.9.2 Otras medidas de prevencin

17

4. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TEJIDOS
SUPERFICIALES Y PROFUNDOS

La piel es el rgano ms extenso de nuestro
cuerpo, sus principales funciones son cubrir y
proteger nuestra superficie corporal. Acta como
una barrera fsica contra el medio ambiente y es la
primera lnea de defensa del organismo contra la
invasin de cualquier microorganismo. Cuando la
piel es daada, esta barrera se rompe, haciendo
susceptible al organismo a la entrada de bacterias
(patgenas o de la flora normal) hacia la dermis y
capas ms profundas y produciendo una serie de
patologas en cada uno de estos tejidos.

4.1 Staphylococcus aureus
4.1.2.1 Protena A
4.1.2.2 Pptidoglicano y cido
teicoico
4.1.2.3 Cpsula
4.1.2.4 Protena fijadora de
fibronectina
4.1.2.5 Factor de agregacin
4.1.2.6 Toxinas: exfoliativa, toxina de
sndrome de choque txico,
enterotoxinas
4.1.2.7 Citotoxinas: hemolisinas,
leucocidina
4.1.2.8 Enzimas: coagulasa, catalasa,
colagenasa, hialuronidasa,
DNasas, fibrinolisina,
penicilinasas, nucleasas
4.1.3 Epidemiologa
4.1.3.1 Importancia del estado de
portador
4.1.4 Patognesis
signos y sntomas
4.1.4.2 Factores predisponentes para
adquirir la infeccin y
desarrollar la enfermedad:
Sndrome de piel escaldada,
foliculitis, fornculos, ntrax,
carbunco y acn.
4.1.6 Diagnstico diferencial Streptococcus
pyogenes, Clostridium perfringens

4.1.7 Otras Enfermedades Asociadas a S.
aureus
4.1.7.1 Osteomielitis
4.1.7.2 Intoxicacin alimentaria
4.1.7.3 Infecciones en pacientes
inmunocomprometidos o con
factores de riesgo agregado
(infecciones intrahospitalarias)
4.1.8.1 Frotis y tincin
4.1.8.2 Cultivo
4.1.8.3 Pruebas bioqumicas
especficas y diferenciales
4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos

4.2 Clostridium perfringens
4.2.1.1 Produccin de esporas
4.2.2.1 Toxinas: alfa, beta, epsilon,
iota, delta, theta, kappa,
lambda, miu, enterotoxina
4.2.2.2 Neuraminidasa
4.2.3 Epidemiologa
4.2.3.1 Presencia en el intestino de
mamferos
4.2.3.2 Vas de entrada y transmisin
4.2.4 Patognesis
signos y sntomas
4.2.4.2 Gangrena gaseosa (signos y
sntomas de las enfermedades)
4.2.5 Participacin de la respuesta inmune en
el control de estas infecciones
4.2.6 Diagnstico diferencial Streptococcus
pyogenes, Staphylococcus aureus
4.2.7 Otras enfermedades causadas por C.
perfringens
4.2.7.1 Intoxicacin alimentaria
4.2.7.2 Colitis ulcerativa
4.2.7.3 Endometritis

18

4.1.8.1 Frotis y tincin
4.1.8.2 Cultivo
especficas y diferenciales
4.1.8.4 Pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos

4.3 Otros microorganismos asociados a
infecciones de tejidos superficiales y
profundos
4.3.1 Streptococcus pyogenes
4.3.1.1 Fiebre escarlatina
4.3.1.2 Erisipela
4.3.1.3 Eccema
4.3.1.4 Artritis septica
4.3.1.5 Celulitis
4.3.1.6 Fasciitis necrozante
4.3.1.7 Miositis
4.3.2 Streptococcus y Staphylococcus
4.3.2.1 Imptigo
4.3.2.3 Artritis sptica
4.3.2.4 Celulitis
4.3.2.5 Fascitis necrozante
4.3.2.6 Miositis
4.3.3 Propionibacterium acnes
4.3.3.1 Acn

4.4 Mycobacterium leprae
4.4.1.1 Morfologa y metabolismo
4.4.1.2 Envoltura celular y tincin
4.4.1.3 Estructuras antignicas de
superficie
4.4.1.4 Desarrollo en un modelo
animal
4.4.2.1 Tropismo por clulas
especficas
4.4.2.2 Sobrevivencia y multiplicacin
intracelular
4.4.2.3 Estructuras de superficie en el
microorganismo responsables
de activar la respuesta
inmune humoral y celular
4.4.2.4 Mecanismos por los cuales se
produce el dao en los tejidos
4.4.3 Epidemiologa
4.4.3.1 Morbilidad y mortalidad de los
leprosos en Mxico y otros
pases
4.4.3.2 Transmisin
4.4.3.3 Reservorio natural
4.4.3.4 Distribucin geogrfica

4.4.3.5 Factores de riesgo del
individuo ante la exposicin
4.4.4 Patognesis
signos y sntomas.
4.4.4.2 Invasin de nervios sensitivos
perifricos produciendo
anestesia
4.4.4.2 Respuesta inmune hacia el
bacilo
4.4.4.3 Factores de resistencia del
husped ante la infeccin:
especficos (inmunidad) e
inespecficos (HLA-DR3).
4.4.4.4 Formas y manifestaciones
clnicas (Lepra lepromatosa,
tuberculoide e indeterminada)
4.4.4.5 Relacin de cada una de las
formas de lepra con la
respuesta inmune celular.
4.4.4.6 Afeccin ocular en la lepra.
4.4.4.7 Discapacidades fsicas
en la evolucin de la enfermedad
4.4.6 Diagnstico diferencial de las formas de
lepra
4.4.6.1 Clasificacin bacilar de la lepra
4.4.7 Diagnstico de laboratorio y gabinete
4.4.7.1 Laboratorio: bsqueda de
bacilos en muestras obtenidas
de raspado de lesiones (en
particular mucosa nasal y
orejas).
4.4.7.2 Estudio histopatolgico de
biopsias cutneas.
4.4.7.3 Pruebas serolgicas con
PGL-1.
4.4.7.4 Pruebas cutneas: Lepromina
4.4.7.5 Valor diagnstico de la
reaccin de Mitsuda y
reaccin de Fernndez
4.4.8 Estrategias del Tratamiento.
4.4.8.1 Norma Mexicana para el
tratamiento de la lepra
4.4.9.1 Profilaxis en contactos con
enfermos de lepra.
4.4.10 Otras micobacterias que producen
infecciones en piel y tejido subcutneo:
4.4.10.1 M. marinum
4.4.10.2 M. ulcerans
4.4.10.3 M. tuberculosis

4.5 OTRAS BACTERIAS QUE PRODUCEN
INFECCIONES EN PIEL.
4.5.1 Nocardia brasiliensis
4.5.2 Nocardia otitidiscaviarum
4.5.3 Nocardia asteroides
19

GASTROINTESTINAL

En nuestro pas, las diarreas siguen siendo una
causa comn de consulta con el mdico general.
Aunque, generalmente son enfermedades que se
autolimitan, es importante mantener el buen estado
de hidratacin y de nutricin del paciente para
evitar serias complicaciones. La mayora de las
diarreas no requieren del uso de antimicrobianos
para su tratamiento. Sin embargo, existen
patgenos importantes que producen diarrea
acompaada de moco y sangre produciendo dao
en la mucosa o en el epitelio intestinal, que pueden
llevar al paciente a presentar complicaciones
graves. En estos casos de diarrea, el tratamiento
correcto comprende la administracin de
antibiticos, adems, de las medidas generales
para obtener la completa recuperacin del paciente.
Por tal motivo, el mdico debe de saber cules son
los microorganismos causales en diarreas acuosas
y cules son productores de diarrea con sangre,
con el fin de hacer un diagnstico etiolgico
correcto e instalar el tratamiento adecuado.

ESTOMAGO Y DUODENO

5.1 Helicobacter pylori
5.1.1.1 Morfologa
5.1.1.2 Diversidad gentica
5.1.1.3 Variacin antignica
5.1.2.1 Ureasa
5.1.2.2 Antgenos de Lewis
5.1.2.3 Adhesinas
5.1.2.4 Isla de patogenicidad cag
5.1.2.5 Protena CagA
5.1.2.6 Citotoxina vacuolizante
5.1.3 Epidemiologa
5.1.3.1 Frecuencia de la infeccin a
nivel nacional y mundial
adquirir la infeccin
5.1.3.3 Va de transmisin
5.1.5 Patognesis
signos y sntomas.
5.1.5.2 Gastritis
5.1.5.3 Ulcera pptica
5.1.5.4 Asociacin con desarrollo de
cncer

5.1.6.1 Mtodos invasivos
5.1.6.2 Mtodos no invasivos
5.1.7 Estrategia de Tratamiento
5.1.7.1 Terapia triple
5.1.7.2 Terapia cudruple

INTESTINOS DELGADO Y GRUESO

5.2 Escherichia coli enterotoxignica
Escherichia coli enteroagregativa
Escherichia coli enteropatgena
Escherichia coli enteroinvasiva
Escherichia coli enterohemorrgica
5.2.1.1 Morfologa
5.2.1.2 Metabolismo y medios de
cultivo diferenciales para su
crecimiento
5.2.1.3 Caractersticas bioqumicas
diferenciales
5.2.1.4 Estructuras antignicas base
de su clasificacin serolgica
(antgenos K, O y H)
5.2.2.1 Escherichia coli
enterotoxignica
- Toxinas termoestables (STa
y STb)
- Toxinas termolbiles (LT-1 y
LT-2)
- Adhesinas CFA/I, /II, /III
enteroagregativa
- Plsmido que codifica para
la expresin de una fimbria
(GVVPQ) que media la unin
con la mucosa intestinal.
- Patrn de adherencia
(formando agregados)
- Toxina EAST (parecida a
la LT)
- Hemolisina (formadora de
poros en la membrana de las
clulas husped.

20

enteropatgena
- Plsmido EAF que codifica
para una adhesina Bfp (pili) al
parecer media la interaccin
bacteria-bacteria.
- Intimina codificada por el gen
eae que favorece la unin
ntima entre la bacteria y la
clula. Produce el fenmeno
llamado unin y esfacelacin
de las microvellosidades.
-isla de patogenicidad LEE.
5.2.2.4 Escherichia coli enteroinvasiva
- Caractersticas genticas que
le confieren el fenotipo de
invasin.
- Mecanismo de invasin las
clulas del coln.
- Distribucin lateralmente a
clulas adyacentes.
enterohemorrgica
- Serotipo representativo
importante
- Intimina
- Toxina Shiga-like (SLT)
5.2.3 Epidemiologa
5.2.3.2 Poblacin susceptible
5.2.3.3 Distribucin mundial
5.2.3.4 Grupos de edad afectados
5.2.5 Patognesis
signos y sntomas.
5.2.5.2 Diarrea del viajero y diarrea
infantil
5.2.5.3 Diarrea acuosa persistente
5.2.6 Complicaciones
5.2.5.1 Deshidratacin
5.2.5.2 Desnutricin
5.2.5.3 Muerte
5.2.7.1 Aislamiento del
microorganismo a partir de
heces en medios de cultivos
selectivos.
5.2.7.2 Pruebas bioqumicas y
serolgicas

5.2.8.1 Tratamiento de apoyo: atender
el desequilibrio
hidroelectroltico
5.2.8.2 Tratamiento antimicrobiano
para clera.

5.3 Vibrio cholerae
5.3.1 Patognesis
signos y sntomas.
5.2.5.2 Diarrea grave (clera)
5.2.2.3 Vibrio cholerae
- Toxina colrica
- Pili Tcp
5.2.8.1 Tratamiento de apoyo: atender
el desequilibrio
hidroelectroltico.
para clera.

5.4 Campylobacter spp.
Shigella spp.
Salmonella enteritidis.
Clostridium difficile
5.4.1.1 Morfologa colonial y
microscpica
crecimiento
diferenciales
5.4.2.1 Campylobacter jejuni
- Enterotoxina
- Toxinas citopticas
- Adhesinas
- Movilidad.
5.4.2.2 Shigella dysenteriae
- Toxina Shiga
- Protenas que participan en la
adhesin, invasin y
proliferacin
5.4.2.3 Salmonella enteritidis
- Protenas A-H
- Enzimas: catalasa,
superxido dismutasa
- Antigeno Vi,
- LPS

21

5.4.2.4 Clostridium difficile
- Citotoxina
- Enterotoxina
5.4.3 Epidemiologa
5.4.3.1 Enfermedades frecuentes en
pases no industrializados
5.4.3.2 Vas de transmisin
5.4.3.3 Reservorios animales
5.4.4 Patognesis
signos y sntomas
5.4.4.2 Gastroenteritis
5.4.4.3 Disentera
5.4.4.4 Colitis ulcerosa
5.4.4.5 Complicaciones: Sndrome
urmico hemoltico (SUH),
colitis psuedomembranosa,
Sndrome de Guillain-Barr,
artritis reactiva.
5.4.5 Participacin de la respuesta
inmune en el control de estas
infecciones.
5.4.6.1 Coprocultivo
5.4.7 Estrategia de Tratamiento
5.4.7.1 Antimicrobiano de eleccin
5.4.7.2 Prevencin y Control

OTRAS BACTERIAS PRODUCTORAS DE
DIARREA POR INTOXICACIN ALIMENTICIA

5.5 Microorganismos Gram positivos
5.5.1 No productores de esporas
5.5.1.1 Staphylococcus aureus
5.5.2 Productores de esporas
5.5.2.1 Bacillus cereus

22

6. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES SISTMICAS

Cualquier infeccin localizada puede
complicarse cuando los agentes causales acceden
al torrente sanguneo y se extienden por todo el
cuerpo. Este proceso es un signo de mal pronstico
en la evolucin de la enfermedad infecciosa. La
presencia transitoria de patgenos en la sangre es
referida como bacteriemia, la cual no suele tener
trascendencia clnica ya que los grmenes son
eliminados rpidamente por los mecanismos de
defensa y puede diagnsticarse a travs de un
hemocultivo. La presencia permanente de bacterias
en sangre resultado de una infeccin generalizada
o sistmica es referida como sepsis o septicemia.
El sistema circulatorio funciona como dispersante
de los microorganismos que pueden colonizar y
producir dao en otras localizaciones anatmicas
alejadas del foco primario. Los sntomas de las
sepsis son bastante inespecficos, pero destacan la
fiebre alta y los escalofros. De estas infecciones
sistmicas, las ms comunes son las producidas
por bacterias Gram negativas. Entre las bacterias
Gram-negativas encontramos a Salmonella entrica
serotipo Typhi que produce la fiebre tifoidea que se
adquiere por consumir agua y alimentos
contaminados. Como efectos secundarios de las
septicemias pueden aparecer inflamacin vascular
(tromboflebitis) y endocarditis. En ocasiones, los
episodios de sepsis se producen como
consecuencia de la contaminacin de prtesis. Las
infecciones intraabdominales como la peritonitis y
los abscesos de glndulas abdominales, as como
las infecciones en huesos y articulaciones tambin
son consideradas sistmicas. Adems de los
microorganismos Gram positivos y Gram negativos,
existe bacterias que ocasionan un grupo de
enfermedades infecciosas, transmitidas por
animales (zoonosis) que provocan infecciones
sistmicas. Destacan entre ellas, la brucelosis
(Brucella), enfermedad de Lyme (Borrelia),
Leptospirosis (Leptospira) y las enfermedades
producidas por rickettsias.

6.1 Salmonella entrica sero tipo Typhi
6.1.1.1 Morfologa colonial y
microscpica
crecimiento
diferenciales.
6.1.1.4 Estructuras antignicas como
base de su clasificacin
serolgica
6.1.2.1 Adherencia e invasin
6.1.2.2 Plsmidos de virulencia
6.1.2.3 Resistencia al suero
6.1.2.4 LPS
6.1.2.5 Regulacin de los genes de
virulencia
6.1.2.6 Genes de invasividad
6.1.2.7 Genes spv
6.1.2.8 Sobrevivencia en los fagocitos
6.1.2.9 Sensibilidad al pH cido
6.1.3 Epidemiologa
6.1.3.3 Importancia del portador
asintomtico
6.1.4 Patognesis
signos y sntomas.
6.1.4.2 Fiebre tifoidea. Cuadro clnico
6.1.4.3 Complicaciones: megacolon,
perforacin intestinal con
abdomen agudo.
6.1.6 Otras infecciones producidas por
Salmonella Typhi
6.1.6.1 Septicemia
6.1.6.2 Infeccin urinaria
6.1.7.1 Brucelosis
6.1.7.2 Faringoamigdalitis
estreptocccica
6.1.7.3 Tifo
6.1.8 Diagnstico de Laboratorio
6.1.8.1 Cultivos de mdula sea,
sangre, heces, u orina
dependiendo del tiempo de
evolucin.
6.1.10.1 Vacuna

23

6.2 Brucella
6.2.1 Caractersticas generales
6.2.1.1 Morfologa
6.2.1.2 Antgenos A y M.
6.2.1.3 Diferentes especies de
Brucella y especificidad de
husped.
6.2.2 Factores de virulencia.
6.2.3 Epidemiologa de la brucelosis
6.2.3.1 Mecanismos de transmisin.
6.2.3.2 Reservorios animales
6.2.3.3 Distribucin mundial y estado
actual en Mxico.
6.2.4 Patognesis
signos y sntomas.
6.2.4.2 Brucelosis: manifestaciones
clnicas agudas, subagudas y
crnicas.
6.2.4.3 Complicaciones: artritis,
osteomielitis, meningitis,
cistitis, nefritis,
orquiepididimitis, endocarditis
e hiperesplenismo.
6.2.6.1 Fiebre Tifoidea
6.2.6.2 Tifo
6.2.7.1 Cultivo de sangre, medula
sea o tejidos infectados.
6.2.7.2 Serologa: Prueba de
aglutinacin con rosa de
Bengala, Prueba de
Huddleson, ELISA (deteccin
de anticuerpos IgM e IgG).

6.3 Rickettsia prowasekii
6.3.1.1 Estructura
6.3.1.2 Parsito intracelular
6.3.3 Epidemiologa
6.3.3.1 Enfermedad re-emergente.
6.3.3.2 Distribucin geogrfica a nivel
mundial y en Mxico
6.3.3.3 Estacin del ao
6.3.3.4 Condiciones favorables para
su transmisin

6.3.3.5 Reservorio y vector
6.3.3.6 Poblacin susceptible
6.3.3.7 Vas de transmisin
6.3.3.8 Vas de entrada
6.3.4 Patognesis
signos y sntomas
6.3.4.2 Ciclo de vida
6.3.4.3 Tifo epidmico y Enfermedad
de Brill-Zinsser
6.3.4.4 Complicaciones
en el control de la enfermedad.
6.3.6.1 Brucelosis
6.3.6.2 Fiebre tifoidea
6.3.7.1 Cultivo
6.3.7.3 Pruebas moleculares
6.3.8 Estrategias de tratamiento

6.4 Leptospira interrogans
6.4.1.1 Estructura
6.4.1.2 Antgenos
6.4.1.3 Serovares de Leptospira
interrogans.
6.4.3 Epidemiologa
en el control de la enfermedad.
6.4.5 Patognesis
signos y sntomas
6.4.5.2 Leptospirosis anictrica e
icterica.
6.4.6 Diagnstico diferencial.
6.4.6.1 Hepatitis, fiebre amarilla y
dengue
6.4.7.1 Microscopa. Tincin con
Giemsa o Wright
6.4.7.2 Cultivo
6.4.7.3 Serologa.
6.4.7.4 Prueba de ELISA (deteccin
de antgeno) y Western blot
(prueba confirmatoria).
6.4.7.5 Microscopia de campo oscuro

24

6.5 Borrelia recurrentis

6.5.1.1 Estructura
6.5.1.2 Cultivo y desarrollo
6.5.2.2 Liberacin de endotoxina.
6.5.3 Epidemiologa
6.5.3.1 El humano como nico
husped.
6.5.3.2 Vectores: piojo (Pediculus
humanus) y garrapata
(Ornithodorus).
6.5.4 Patognesis
signos y sntomas.
6.5.4.2 Fiebre recurrente endmica y
epidmica.
6.5.4.2 Complicaciones: Insuficiencia
cardiaca, necrosis heptica,
hemorragia, alteraciones
cerebrales.
en el control de la Infeccin.
Tifo
Fiebre tifoidea
Salmonelosis
Paludismo
Dengue
Leptospirosis
Fiebres hemorrgicas virales
Tuberculosis
6.5.7 Diagnstico de laboratorio.
6.5.7.1 Frotis y visualizacin en
campo oscuro o tincin de
Giemsa o Wright de sangre
en episodios febriles.
6.5.7.2 Cultivo.
6.5.7.3 Pruebas serolgicas.
6.5.7.4 Pruebas moleculares.
6.5.8 Estrategias del tratamiento.
6.5.9.1 Control de vectores.
6.5.10 Otras especies importantes; Borrelia
burgdorferi

25

URINARIO

Las infecciones del tracto urinario (ITU) son
causa frecuente de consulta con el mdico general.
Se ha estimado que aproximadamente 30% de las
mujeres sufre una infeccin de vas urinarias en
algn momento de su vida, aumentando esta
frecuencia en mujeres con vida sexual activa. Las
bacterias que ms frecuentemente se asocian a
ITU en mujeres jvenes son Escherichia coli (80-
90%), Staphylococcus saprophyticus y otras
enterobacterias. Existen ciertos factores
predisponentes en el husped que favorecen las
ITU por microorganismos, en su mayora, de la
familia Enterobacteriaceae. Estos factores incluyen
la permanencia de sondas utilizadas para drenar la
orina, una estancia prolongada en el hospital y
septicemia. La infeccin bacteriana se adquiere
habitualmente por va ascendente desde la uretra a
la vejiga y en ocasiones hasta el rin.
Ocasionalmente, durante una infeccin del tracto
urinario, las bacterias invaden la sangre
produciendo septicemia. Con menos frecuencia, la
infeccin puede ser consecuencia de la
diseminacin hematgena de un microorganismo al
rin y ser en este rgano donde ocurra la primo
infeccin. Cuando ha habido diseminacin
hematgena al tracto urinario pueden encontrarse
otras especies involucradas, por ejemplo
Salmonella entrica sero tipo Typhi,
Staphylococcus aureus y Mycobacterium
tuberculosis (tuberculosis renal).

7.1 Bacilos Gram negativos
7.1.1 Escherichia coli (agente etiolgico ms
frecuente).
7.1.2 Klebsiella pneumoniae (asociado a
infecciones urinarias en pacientes
hospitalizados).
7.1.3 Proteus mirabilis (produce una orina
alcalina, est asociado a la presencia
de piedras en la vejiga).
7.1.4 Enterobacter sp
7.1.5 Citrobacter sp
7.1.6 Pseudomonas aeruginosa generalmente
en pacientes inmunocomprometidos).

7.2 Cocos Gram positivos
7.2.1 Staphylococcus saprophyticus
(coagulasa negativa, segunda causa
de infeccin de vas urinarias en
mujeres con vida sexual activa).

7.2.2 Staphylococcus epidermidis (causa de
infeccin urinaria adquirida en hospital).
7.2.3 Staphylococcus aureus (generalmente se
establece por va sistmica).
7.2.4 Enterococos del grupo D de Lancefield
7.2.5 Enterococos: Streptococcus faecalis,
Streptococcus faecium.

7.3 Factores de virulencia de cada uno de los
enteropatgenos y sus mecanismos de
accin.
7.3.1 Escherichia coli: adhesina, Pili P, AFAI,
AFAII, hemolisina, HIyA.
7.3.2 Pseudomonas aeruginosa: hemolisina,
colagenasa, elastasa, fibrinolisina,
fosfolipasa C, DNAasa, algunas cepas
poseen cpsula.
7.3.3 Klebsiella pneumoniae: Cpsula
7.3.4 Proteus mirabilis: Flagelos, ureasa.

7.4 Epidemiologa.
7.4.1 Transmisin; ascendente y hematgena
7.4.2 Factores predisponentes
7.4.3 Pacientes hospitalizados
7.4.4 Instalacin de sondas de Foley
7.4.5 Inmunosupresin
7.4.6 Diabetes
7.4.7 Malformaciones congnitas
7.4.8 Embarazo
7.4.9 Patognesis
signos y sntomas.
7.4.9.2 Infeccin de vas urinarias bajas:
Cistitis, uretritis.
7.4.9.3 Infeccin de vas urinarias altas:
Pielonefritis, pielitis, salpingitis.

7.5 Participacin de la respuesta inmune en el
control de las infecciones

7.6 Diagnstico de laboratorio
7.6.1 Toma adecuada de muestra clnica:
Chorro medio, aspiracin suprapbica,
empleo de sonda, uso de bolsa
recolectora.
7.6.2 Urocultivo
7.6.3 Interpretacin del urocultivo: Criterios de
Kass.

26

7.7 Diagnstico de gabinete

7.7.1 Urografa excretora

7.8 Estrategias de tratamiento
7.8.1 Criterios
7.8.2 Antimicrobianos de eleccin

7.9 Prevencin y control

27

8. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DE TRANSMISIN
SEXUAL

Tradicionalmente, las infecciones de
transmisin sexual (ITS) se han mantenido como un
problema importante de Salud Pblica. La sfilis y la
gonorrea han ido de la mano con la historia del
hombre. El surgimiento del VIH ha favorecido la
difusin y promocin de las medidas de control de
las ITS con resultados controversiales. Los agentes
bacterianos responsables son muy variados
incluyendo patgenos como Treponema pallidum,
Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis,
Haemophilus ducreyi, Mycoplasma hominis,
Ureaplasma urealyticum y oportunistas como
Gardnerella vaginalis y Klebsiella granulomatis.
Dependiendo del agente, la enfermedad puede ser
local o sistmica u ocasionar infeccin neonatal. De
acuerdo a los reportes de Estados Unidos, las tres
principales causas de ITS son Chlamydia
trachomatis, Treponema pallidum y Neisseria
gonorrhoeae con una incidencia anual de 4
millones, 400 mil y 50 nuevos casos
respectivamente. Las infecciones por clamidia se
han considerado una epidemia silenciosa, su
elevada incidencia radica en la dificultad para la
deteccin clnica y de laboratorio; pueden
ocasionar; inflamacin plvica con secuelas de
infertilidad y embarazos ectpicos, endometritis
postpartum, as como linfogranuloma venreo y
uretritis en los hombres. La vaginosis bacteriana
debido al sobre crecimiento de la flora vaginal,
representa la forma ms frecuente en la mujer, el
principal agente involucrado es Gardnerella
vaginalis (90%). El tratamiento de las ITS depende
del agente involucrado lo que destaca la
importancia de un diagnstico diferencial apropiado.

8.1 Neisseria gonorrhoeae
tincin de Gram.
8.1.1.2 Estructura y variacin
antignica
8.1.1.3 Condiciones de crecimiento y
Metabolismo.
8.1.2.1 Estructuras involucradas en la
adherencia e invasividad: LOS
y protenas de superficie
(pilinas, Por, Opa, Rmp,
ionforos, proteasas y
lactamasas).

8.1.3 Epidemiologa
8.1.3.1 Gonorrea como problema de salud
pblica.
8.1.3.2 El hombre como hospedero
natural.
8.1.3.3 Factores de riesgo
8.1.4 Patognesis
infeccioso y desarrollo de signos y
sntomas.
8.1.4.2 Infecciones localizadas
En la mujer: Endometritis,
salpingitis, cervicitis, vulvovaginitis,
enfermedad plvica inflamatoria,
gonorrea ano-rectal.
En el hombre: uretritis, epididimitis
y gonorrea ano-rectal.
Conjuntivitis purulenta en el recin
nacido.
8.1.4.3 Infecciones sistmicas:
Meningitis, endocarditis, artritis
sptica, dermatitis
8.1.4.4 Otras enfermedades:
Infeccin de vas urinarias,
faringoamigdalitis.
8.1.4.5 Complicaciones: Esterilidad y
embarazo ectpico, artritis,
perihepatitis, dermatitis en mujeres;
estrechamiento uretral,
rectal, abscesos y fstulas peri-
rectales en hombres.
8.1.5 Participacin de la respuesta inmune en el
control de las infecciones por gonococos.
8.1.6.1 Tincin y microscopa
8.1.6.2 Cultivo e identificacin
bioqumica
8.1.6.3 Deteccin antignica
8.1.7.1 Uretritis no gonoccica
8.1.7.1 Antimicrobiano de eleccin
8.1.9.1 Uso de condn en personas con
vida sexual activa, sexo seguro.
8.1.9.2 Terapia preventiva con
antimicrobianos.

28

8.2 Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma
hominis.
8.2.1.1 Morfologa, envoltura celular,
actividad enzimtica.
8.2.1.2 Medio de cultivo y desarrollo
8.2.2.1 Protenas de superficie
8.2.2.2 Induccin de citocinas
proinflamatorias por
macrfagos.
8.2.3 Epidemiologa
8.2.3.1 Incidencia y distribucin
8.2.3.2 Poblacin en riesgo
8.2.4 Patognesis
signos y sntomas.
8.2.4.2 Uretritis no gonoccica.
8.2.4.3 Enfermedad inflamatoria
plvica
8.2.4.4 Complicaciones: ruptura
prematura de membranas,
parto prematuro, neonatos
con bajo peso al nacer
e infertilidad.
en el control de la Infeccin.
8.2.6 Estrategias del tratamiento
Antimicrobianos
8.2.7.2 Control de personas
Infectadas.

8.3 Chlamydia trachomatis
8.3.1.1 Microscpicas
8.3.1.2 Ciclo de replicacin
8.3.1.3 Parsito intracelular obligado
8.3.1.4 Serotipos causantes de
diferentes entidades clnicas
8.3.1.5 Caractersticas de tincin
8.3.2.1 Tropismo celular (cuerpo
elemental y reticular).
8.3.2.2 Estrategias empleadas en la
invasin celular.
8.3.3 Epidemiologa
8.3.3.2 Poblacin afectada
8.3.3.3 Factores predisponentes,
distribucin y edad.
8.3.4 Patognesis
signos y sntomas.

8.3.4.2 Infeccin asintomtica y
serotipos asociados
8.3.4.3 Cervicitis, salpingitis, uretritis y
enfermedad inflamatoria
plvica en mujeres.
8.3.4.4 Uretritis no gonoccica y
ocasionalmente, epididimitis
en hombres Linfogranuloma
venreo.
8.3.4.5 Otras enfermedades
asociadas a clamidias:
Tracoma, conjuntivitis de
inclusin y
neumona en neonato.
8.3.4.6 Complicaciones: esterilidad,
embarazo ectpico y
enfermedad inflamatoria
plvica en mujeres;
estrechamiento uretral, rectal,
abscesos y fstulas
perirectales y Sndrome de
Reiter en hombres.
en el control de las infecciones
8.3.6.1 Citologa
8.3.6.2 Cultivo en lneas celulares,
HeLa, McCoy, HEp-2 y otras
8.3.6.3 Deteccin antignica
8.3.7.1 Uretritis gonoccica
8.3.7.2 Uretritis no gonoccica
8.3.7.3 Ulceras genitales por T
pallidum, H ducreyi,
Calymmatobacterium
granulomatis y por
virus de herpes simple 1 y 2.
Antimicrobianos.
8.3.9.2 Control de personas infectadas

8.4 Treponema pallidum
8.4.1.1 Morfologa, envoltura celular,
endoflagelo, protenas
externas.
8.4.2.1 Movilidad y quimiotaxis
8.4.2.2 Capacidad de adherencia
mediada por protenas de
membrana externa.
8.4.2.3 Invasin y sobrevivencia
Intracelular.
29

8.4.2.4 Estimulacin de la respuesta
inflamatoria
8.4.3 Epidemiologa
8.4.3.1 La sfilis como problema de
salud pblica
8.4.3.2 Frecuencia en la ltima
dcada
8.4.3.3 El hombre como nico
hospedero natural
8.4.3.5 Factores de riesgo
8.4.4 Patognesis
signos y sntomas.
8.4.4.2 Cuadro clnico:
Sfilis primaria
Sfilis secundaria
Sfilis terciaria o tarda
Sfilis congnita.
8.4.4.3 Complicaciones: neurosfilis,
glomerulonefritis y sndrome
nefrtico.
8.4.6.1 Microscopa de campo
oscuro
inespecficas: VDRL
(Venereal Disease Research
Laboratory)
RPR (Prueba rpida de la
reagina en plasma).
especficas:
FAT-ABS (Prueba de
absorcin de anticuerpos
treponmicos fluorescentes)
MHA-TP: (Prueba de
microaglutinacin para T.
pallidum)
TPI: (Prueba de
inmovilizacin de T.
pallidum).
8.4.7.1 Chancroide
8.4.7.2 Linfogranuloma venreo
8.4.7.3 Herpes simple 1 y 2
8.4.9.1 Control de personas con vida
sexual activa
antimicrobianos

8.5 Haemophilus ducreyi
tincin de Gram
8.5.1.2 Condiciones de crecimiento
y metabolismo
8.5.2.1 Protenas de superficie
involucradas en la adherencia
a clulas epiteliales y matriz
extracelular.
8.5.2.2 Enzimas y toxinas que
intervienen en el dao celular
8.5.3 Epidemiologa
8.5.3.1 Prevalencia y distribucin
8.5.4 Patognesis
signos y sntomas.
8.5.4.2 Chancro blando
8.5.6.1 Cultivo e identificacin
Bioqumica
8.5.7.1 Sfilis primaria y secundaria
8.5.8.2 Linfogranuloma venreo
8.5.8.3 lceras de Herpes simple
1 y 2
8.5.9.1 Uso de condn en personas
con vida sexual activa, sexo
seguro
antimicrobianos

8.6 Gardnerella vaginalis
tincin
de Gram
8.6.1.2 Condiciones de crecimiento y
metabolismo
8.6.2.1 Sialidasa
8.6.2.2 Biopelcula

30

8.6.3 Epidemiologa
8.6.3.1 Prevalencia y distribucin.
8.6.4 Patognesis
signos y sntomas.
8.6.4.2 Vaginosis bacteriana
8.6.4.3 Infeccin de vas urinarias
8.6.5 Participacin de la respuesta inmune en
el control de las infecciones

8.6.6.1 Cultivo e identificacin bioqumica
8.6.6.2 Citologa; clulas clave
8.6.6.3 Criterios de Amsel
8.6.7.1 Candidiasis
8.6.7.2 Tricomoniasis
8.6.7.3 Vaginitis atrfica

31

9. BACTERIAS CAUSANTES DE INFECCIONES DEL SISTEMA
NERVIOSO CENTRAL

La meningitis bacteriana sigue siendo una
enfermedad grave con un alto porcentaje de
mortalidad y de secuelas neurolgicas que
imposibilitan al paciente en su desarrollo social y
econmico de por vida. Los agentes bacterianos
responsables son variados con predominio de
algunos dependiendo de la edad. Por ejemplo,
bacterias gram negativas como Salmonella spp.,
Klebsiella spp., y E. coli K1 son los patgenos ms
frecuentes en neonatos. En nios mayores, la
meningitis bacteriana se presentaba ms
frecuentemente asociada a Haemophilus influenzae
tipo b, pero a partir de la aplicacin universal de la
vacuna contra este microorganismo, los agentes
bacterianos que prevalecen ahora son
Streptococcus pneumoniae, seguido de Neisseria
meningitidis y Mycobacterium tuberculosis. La
instalacin de otros microorganismos considerados
oportunistas como causa de meningitis bacteriana
son de difcil diagnstico, por no ser considerados
en los laboratorios como responsables en esta
patologa clnica. Adems, el alto consumo en
tiempo para la identificacin microbiana y el
incremento de multi resistencia de las cepas de
origen intrahospitalario asociada a meningitis en
pacientes susceptibles puede agravar el problema.

9.1 Haemophilus influenzae serotipo b
9.1.1.1 Morfologa, tincin de Gram y
agrupacin
9.1.1.2 Caractersticas estructurales;
pared y cpsula, serotipos
(antgenos capsulares; a-f).
9.1.1.3 Cultivo: factores de crecimiento
(satelitismo) y condiciones de
Incubacin.
fimbriales
9.1.2.2 Componente capsular (poliribitol
fosfato)
9.1.2.3 Endotoxina (LPS) induccin de
altos niveles de secrecin de
citocinas (IL-6 e IL-8)
9.1.2.4 Proteasa de IgA
9.1.2.5 Variacin de fase

9.1.3 Epidemiologa
9.1.3.1 Incidencia
9.1.3.4 Portador asintomtico
9.1.3.5 Mecanismo de transmisin
9.1.4 Patognesis
signos y sntomas.
9.1.4.2 Meningoencefalitis
9.1.4.3 Otras infecciones asociadas al
microorganismo: sepsis y
epiglotitis.
9.1.4.4 Haemophilus influenzae no
capsulados; sinusitis, otitis
media y neumona.
9.1.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves
como hidrocefalia, sordera y
retraso mental y prpura
trombocitopnica.
9.1.5 Participacin de la inmunidad en el
control de la infeccin
9.1.6.1 Neisseria meningitidis
9.1.7.1 Frote y tincin de Gram
9.1.7.2 Cultivo de LCR
9.1.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.1.9.1 Vacuna
9.1.10 Otras enfermedades causadas por
H. influenzae.
9.1.10.1 Conjuntivitis, epiglotitis,
celulitis, otitis media,
sinusitis, neumona,
bronquitis y artritis.

32

9.2 Neisseria meningitidis
9.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram y
Agrupacin
9.2.1.2 Caractersticas estructurales
9.2.1.3 Cultivo: factores de
crecimiento y condiciones de
incubacin
9.2.2. Factores de virulencia
fimbriales
9.2.2.2 Componente capsular
9.2.2.3 Endotoxina (LOS),
superantgenos
9.2.3 Epidemiologa
9.2.3.1 Incidencia
9.2.3.4 Portador asintomtico
9.2.3.5 Mecanismo de transmisin
9.2.4 Patognesis
signos y sntomas.
9.2.4.2 Meningitis. Mencionar las
diferencias sobresalientes que
orienten al diagnstico clnico
por este microorganismo.
9.2.4.3 Meningococcemia
9.2.4.4 Otras infecciones asociadas al
microorganismo: artritis,
uretritis y neumona.
9.2.4.5 Complicaciones: edema
cerebral, alteraciones en la
excitabilidad neuronal,
secuelas neurolgicas graves:
hidrocefalia, sordera, retraso
mental y prpura
trobocitopnica
9.2.7.1 Frote y tincin de Gram
9.2.7.2 Cultivo de LCR
9.2.7.3 Anlisis citoqumico de LCR
9.2.7.4 Deteccin de antgenos


9.3 Otros microorganismos que
producen infeccin del sistema
nervioso central
9.3.1 Streptococcus pneumoniae
9.3.2 Mycobacterium tuberculosis

33

10. AGENTES BACTERIANOS PRODUCTORES
DE NEUROTOXINAS

Bacterias esporuladas. El gnero Clostridium se
encuentra constituido por bacilos Gram positivos,
anaerobios estrictos y formadores de esporas. La
mayora de las especies de Clostridium son
saprfitas, pero algunas de ellas son patgenas del
humano como Clostridium botulinum y Clostridium
tetani productores de botulismo y ttanos
respectivamente.
Desde finales del siglo XVIII en que aparecieron los
primeros reportes de botulismo, ste ha llamado la
atencin tanto entre los productores de alimentos
como en los consumidores, pero principalmente por
ser causa de muerte en bebes y drogadictos. El
botulismo es causado por la toxina botulnica, tipo
A-B con actividad neurotxica, altamente potente,
formada durante el desarrollo de C botulinum, y
considerada como el denominador comn de todas
las cepas de esta especie. El mecanismo de accin
es a travs de la inactivacin de protenas que
intervienen en la regulacin de la acetilcolina,
produciendo parlisis flcida.
C. tetani es causa de toxicidad grave en humanos.
Provoca ttanos generalizado, ceflico, neonatal y
de las heridas a travs de la tetanoespasmina,
neurotoxina termolbil, elaborada en la clula
vegetativa bajo el control de un plsmido que, una
vez liberada, experimenta una autolisis produciendo
una molcula que bloquea la liberacin de
neurotransmisores inhibidores de la contraccin
muscular. Como consecuencia se produce una
contraccin continua que conduce a la llamada
contraccin tetnica. El ttanos es una enfermedad
de distribucin mundial, que provoca al ao ms de
un milln de muertes en el mundo, la mayora de
ellas en pases en vas de desarrollo por la escasa
inmunizacin, contaminacin de heridas en los
medios agrcolas y rurales, administracin de
drogas y abortos. La toxina producida en las
heridas se une a los terminales de las neuronas
motoras perifricas, entra en el axn y es
transportada a la mdula espinal y al cerebro a
travs del cuerpo de la neurona.

10.1 Clostridium tetani
10.1.1.1 Morfologia, tincin de Gram
10.1.1.2 Caractersticas
estructurales.
Esporas
crecimiento y condiciones
de incubacin
10.1.2.1 Tetanolisina
10.1.2.2 Tetanoespasmina
(neurotoxina)
10.1.3 Epidemiologa
10.1.3.1 Mecanismo de infeccin
10.1.3.3 Incidencia
10.1.4 Patognesis
signos y sntomas.
10.1.4.2 Ttanos generalizado
10.1.4.3 Ttanos localizado
10.1.4.4 Ttanos ceflico
10.1.4.5 Ttanos neonatal
10.1.4.6 Complicaciones: paro
respiratorio y falla cardiaca.
10.1.6.1 Rabia
10.1.6.2 Hipocalcemia
10.1.6.3 Intoxicacin con veneno
10.1.7.2 Prueba de neutralizacin
de toxina
10.1.8.2 Inmunizacin pasiva con
suero antitetnico
10.1.8.3 Tratamiento quirrgico
10.1.9 Prevencin y control.
10.1.9.1 Vacunacin con toroide
tetnico

34

10.2 Clostridium botulinum
10.2.1.1 Morfologa, tincin de Gram
10.2.1.2 Esporas
crecimiento y condiciones
de incubacin.
10.2.2.1 Neurotoxina (tipos A-G)
mecanismo de accin y
propiedades fenotpicas.
10.2.3 Epidemiologa
10.2.3.2 Mecanismo de infeccin o
transmisin
10.2.3.3 Diseminacin
10.2.4 Patognesis
signos y sntomas
10.2.4.2 Botulismo clsico
10.2.4.3 Botulismo del lactante
10.2.4.4 Botulismo de heridas
10.2.4.5 Botulismo por inhalacin
10.2.4.6 Complicaciones: parlisis
Respiratoria
10.2.6 Diagnstico clnico
10.2.6.1 Criterios clnicos que
permiten diagnosticar
botulismo.
10.2.6.2 Diagnstico diferencial:
Myasthenia gravis,
Sndrome de Guillain Barr
y poliomielitis.
10.2.7.1 Cultivo de heces y
alimento contaminado
10.2.7.2 Deteccin de la toxina
en suero
10.2.7.3 Demostracin de
actividad de la toxina
(bioensayo en ratn)
10.2.7.1 Tratamiento de soporte
10.2.7.2 Lavado gstrico
10.2.7.4 Antitoxina botulnica
trivalente

10.2.9.1 Vacunacin con toroide
Tetnico
10.2.9.2 Medidas preventivas.
10.2.10 Otras patologas causadas
por C. botulimun
10.2.10.1 Diarreas
35

11. RESPUESTA INMUNE HACIA LAS BACTERIAS

La respuesta inmune es muy importante para
evitar, controlar y erradicar las infecciones
bacterianas. Las barreras fsicas, qumicas y
biolgicas (microbiota normal); la fagocitosis y el
complemento forman parte de la inmunidad innata,
al igual que las clulas NK o asesinas naturales.
Las diferentes funciones de estos componentes,
evitan que se produzcan infecciones aparentes
controlando a los microorganismos desde el
momento en que entran en contacto con el
organismo. Sin embargo, si los microorganismos
logran colonizar, establecerse y causar
enfermedad, nuestro cuerpo establece la respuesta
inmune adquirida que puede ser de tipo humoral
(anticuerpos) y celular (linfocitos T) y que ayuda,
junto con el tratamiento antimicrobiano, a resolver
la infeccin. La inmunidad innata est ntimamente
relacionada con la inmunidad adquirida, de hecho el
establecimiento de la segunda depende de la
primera. As, las clulas presentadoras de antgeno
de la inmunidad innata (clulas dendrticas y
macrfagos) pueden activar a los linfocitos para
que respondan con sus mecanismos efectores y
resuelvan la infeccin y formen, adems, clulas de
memoria.
Las vacunas tienen como objetivo inducir
respuestas inmunes y, sobre todo, clulas de
memoria que respondan rpidamente cuando el
organismo se expone a la bacteria patgena. En el
caso de bacterias, cuyos factores principales de
virulencia son toxinas, se inmuniza con toxoides
para inducir anticuerpos que neutralizen las toxinas
y eviten que se produzca su efecto (toxoide
tetnico). Las infecciones tambin inducen la
formacin de clulas de memoria que, muchas
veces, nos protegen de infecciones con el mismo
serotipo. La respuesta inmune tambin es usada
para realizar el diagnstico inmunolgico que
consiste en detectar anticuerpos especficos o bien
la presencia de antgenos bacterianos. La utilidad
de la respuesta inmune en el diagnstico ha sido
tratada en los temas anteriores.
Finalmente, la respuesta inmune puede ser
responsable de parte de la patologa observada en
algunas infecciones bacterianas como la
tuberculosis, donde los granulomas son resultado
de la respuesta celular hacia Mycobacterium
tuberculosis.

11.1 Respuesta inmune innata contra:
11.1.1 Bacterias intracelulares
11.1.2 Bacterias extracelulares

11.2 Respuesta inmune adquirida contra:
11.2.1 Bacterias intracelulares
11.2.2 Bacterias extracelulares
11.2.3 Toxinas bacterianas

11.3 Evasin de la respuesta inmune por las
bacterias

11.4 Inmunopatologa: Tuberculosis, fiebre
reumtica y glomerulonefritis.

36

GUIONES PRCTICOS
37

INTRODUCCIN A LAS PRCTICAS DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA

Objetivos del laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa en la carrera de Medicina.

Al finalizar el curso, el alumno sabr cules son los
procedimientos que sigue el laboratorio de
Bacteriologa, Virologa, Micologa y Parasitologa,
as como el tiempo que se requiere para llegar a la
identificacin completa del organismo.

Comprender la importancia de acompaar su
solicitud con un diagnstico clnico presuntivo.

Conocer la importancia que tiene la correcta toma
de una muestra clnica para el xito en la
identificacin del organismo asociado a la
enfermedad infecciosa.

Valorar el riesgo de establecer una terapia
inadecuada en contra de organismos patgenos.

Desarrollo de las Prcticas
Se sugiere la participacin de los profesores
titulares durante la ejecucin de la prctica en el
laboratorio.

38

PRCTICA No. 1
BIOSEGURIDAD

Objetivos generales
Establecer las medidas de bioseguridad que se
emplean en los laboratorios de Microbiologa y
Parasitologa.

Identificar los riesgos que se presentan en el
manejo del material que se utiliza en un laboratorio
de Microbiologa y Parasitologa.

Antecedentes
Es aconsejable que toda persona que labore en un
laboratorio de Bacteriologa o en cualquier otra rea
de la Microbiologa, no tenga riesgos innecesarios
ya que el descuido, la negligencia y las prcticas
poco seguras pueden causar daos serios, no solo
en los individuos, sino tambin en los
colaboradores o en los pacientes. Es decir, cada
profesional de la salud es responsable por su
seguridad y la de sus compaeros (Organizacin
Mundial de la Salud).
La bioseguridad se entiende como el conjunto de
polticas destinadas a mantener la vigilancia, para
proteger el medio ambiente, la salud y la seguridad
de los profesionales de la salud que realizan
actividades frente a riesgos ocupacionales
procedentes de agentes biolgicos, fsicos o
qumicos. Su objetivo es implementar una serie de
acciones que garanticen una mejor calidad de vida.
Por lo cual, se han llevado a cabo una serie de
normas, tendientes a disminuir el riesgo de
transmisin de microorganismos a partir de fuentes
reconocidas o no reconocidas de infeccin en
Servicios de Salud, relacionadas con accidentes
por exposicin a sustancias, sangre y fluidos
corporales potencialmente peligrosos.

Sugerencias generales e informacin
Las siguientes consideraciones generales pueden
hacer menos riesgosas las actividades a realizar en
el laboratorio:

1. Cada persona que labore en el laboratorio,
debe ser informada acerca de la ubicacin y la
operacin de cada uno de los equipos de
seguridad y de las instalaciones, tales como
extinguidores, duchas y lava ojos, los cuales
deben ser fcilmente accesibles en el
laboratorio.
2. Los equipos de proteccin personal, que
incluyen entre otros guantes y bata, deben ser
utilizados cuando sea indicado. La bata debe
estar cerrada (abotonada) en todo momento y
es necesario quitrsela al abandonar el
laboratorio.
3. Los hbitos y el arreglo personal debe de
tomarse en cuenta. El cabello largo debe
atarse, de modo que no interfiera con el
trabajo. Se debe evitar la aplicacin de
cosmticos dentro del rea de trabajo. Las
sandalias y zapatos abiertos estn
contraindicados ya que no protegen al pie. En
lo posible, no llevarse los dedos y los lpices a
la boca.
4. Es aconsejable no llevar lentes de contacto
puestos en el laboratorio ya que absorben
solventes. Es recomendable usar lentes de
seguridad cuando se trabaja con material
custico o infeccioso.
5. Est prohibido comer o almacenar alimentos y
bebidas en el laboratorio o en el refrigerador
del laboratorio. Por tal motivo, se debe
designar un refrigerador especfico para
almacenar alimentos del empleado.
6. Esta absolutamente prohibido pipetear con la
boca cualquier material. Por lo que se
aconseja emplear accesorios para pipetas.
7. Cada sesin de laboratorio deber iniciarse
con una explicacin y tiempo de instrucciones.
8. No empiece a trabajar hasta que haya recibido
las instrucciones.
9. Pregunte cuando no entienda el mtodo o la
finalidad de algn experimento.
10. La buena tcnica de laboratorio depende
primordialmente de que se conozca lo que se
va a hacer.
11. Anote cuidadosamente todas las
observaciones en el momento de hacerlas.

Normas a seguir en el laboratorio

1. Limpie la superficie de su mesa con una
solucin germicida, al principio y al final de
cada sesin de laboratorio.
2. Mantenga la mesa libre de todo lo que no sea
esencial y al final de la sesin djela limpia y
libre de material y equipo.
3. Ponga todo el material slido en las
canastillas para este fin y el material de vidrio
en las gradillas.
4. Debido a que algunos de los microorganismos
con que se va a trabajar son patgenos en
potencia, es necesario desarrollar tcnicas de
asepsia al manejarlos y transferirlos.
39

5. Evite el contacto de la boca con las manos,
comer o humedecer las etiquetas con la lengua.
6. Informe inmediatamente al instructor de
cualquier accidente tal como cortaduras,
quemaduras o derrame de cultivos.
7. Tome todas las precauciones posibles para
evitar estos accidentes.

Precauciones sistemticas de seguridad

Agujas y material de vidrio

1. Desechar todo material de vidrio que est
quebrado o rajado, y colocarlo en recipientes
adecuados.
2. Recoger los vidrios rotos con escobilln y pala;
no hacerlo con la mano.
3. Los artculos de vidrio no deben ser arrojados a
la pileta ni arrojarlos sueltos a un cesto de
desperdicios en el que se arrojan artculos de
papel.
4. Las agujas y lancetas usadas deben colocarse
en recipientes para agujas usadas para ser
eliminados de manera adecuada.
5. Evitar, siempre que sea posible, quitar o
intercambiar las agujas de las jeringas. La
prctica de cambiar las agujas antes de
descartar la sangre extrada de la vena dentro
de la botella de cultivo ha sido abandonada por
la mayora de los hospitales.

Manejo de muestras y derrames

1. Las muestras se deben de recolectar en
recipientes slidos, con cierres adecuados para
evitar derrames y prdidas. Todas las
muestras deben ser consideradas
potencialmente peligrosas.
2. Las cortaduras en las manos debern ser
adecuadamente protegidas con tela adhesiva.
Si la actividad laboral implica el manejo de
sangre, suero, plasma u otras muestras, se
debe de usar guantes desechables.
3. Si una muestra presenta evidencia de rotura,
derrame o suciedad dentro del recipiente,
ponerse guantes.
4. Las muestras contaminadas con sangre deben
ser rechazadas. Manipularlas solo con guantes.
Notificar este hecho como peligroso para la
salud.
5. Lavarse las manos minuciosamente con agua y
jabn varias veces al da, en particular despus
de manipular las muestras y antes de retirarse.

6. Inunde con solucin desinfectante cualquier
rea donde haya ocurrido un derrame de
sangre o suero. Utilice guantes, toallas de
papel o gasa para absorber el lquido, y luego
realice un lavado minucioso con agua. Guarde
en una bolsa todo el material empleado
contaminado, para eliminarlo como material
infeccioso.

Manipulacin de desperdicios

1. Reserve algunas de las piletas del laboratorio
para eliminar muestras de sangre y orina. No
permitir el lavado de manos en estas piletas.
2. Eliminar en recipientes adecuados y rotulados:
tubos con sangre, pipetas, puntas y agujas.
3. El material de vidrio o cortante debe ser
eliminado en recipientes adecuados de
paredes slidas.
4. Llevar estos recipientes al rea de desecho
con la frecuencia necesaria para evitar su
acumulacin.
5. Sumerja el material de vidrio contaminado en
solucin desinfectante. Enjuague
minuciosamente con agua y esterilcelo antes
de usarlo otra vez.

Desarrollo de la prctica
Sesin I
1. El profesor definir el concepto de
bioseguridad.
2. Los alumnos, en grupos pequeos, revisarn
las normas a seguir en el laboratorio.
3. El profesor dirigir la discusin sobre:
a) Manipulacin de agujas y material de
vidrio.
b) Manejo de muestras y derrames
c) Manipulacin de material infecto-
contagioso.

NOTA: Recuerde que las medidas de seguridad
estn dirigidas al manejo adecuado de
productos Corrosivo, Reactivos. Explosivos,
Txico, Inflamables, Biolgicos-infecciosos
(CRETIB) y Radioactivos con el fin de
evitar riesgos.

40

Preguntas orientadas para consolidar el
conocimiento
1. Qu medidas de proteccin personal se deben
emplear en un laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa?
2. Cul es el manejo correcto de los desechos
infecto-contagiosos?
3. Por qu se usan contenedores para la
eliminacin de punzocortantes?

Preguntas orientadas para evaluar el
conocimiento adquirido
1. Por qu no se deben ingerir alimentos en los
laboratorios?
2. Cules son las normas empleadas en la
manipulacin de muestras clnicas y derrame
de las mismas?
3. Cul es la indicacin para el uso de bata en el
laboratorio?

Resumen de la prctica
El profesor, junto con los alumnos, elaborar las
conclusiones sobre las medidas de seguridad que
se deben seguir en el laboratorio de Microbiologa y
Parasitologa.

41

PRCTICA No. 2
MANEJO Y CUIDADO DEL MICROSCOPIO

Objetivos generales
Mencionar las partes fundamentales del
microscopio y sus funciones.

Sealar el manejo y los cuidados que se deben
tener con el microscopio compuesto.

Observacin de preparaciones.

Antecedentes
El microscopio es un instrumento de gran utilidad
en el estudio de la Microbiologa y Parasitologa;
puede ser simple, cuando su sistema se basa en
una lente biconvexa o compuesto cuando utiliza
dos sistemas de lentes que se encuentran
separados, consiguiendo con ello un mayor
aumento. Entre los microscopios compuestos el
ms usado es el de luz, el cual emplea fotones de
luz visible para formar imgenes. Sin embargo, el
tipo de luz empleada y cmo se manipula puede
variar. Los tipos de microscopios de luz ms
comunes son: campo brillante, campo oscuro,
contraste de fase y de fluorescencia.
El microscopio de luz brillante se encuentra
constituido por tres sistemas:
1. ptico.
2. Mecnico
3. Iluminacin

Cuidados que hay que tener con el microscopio

1. El microscopio debe guardarse protegido de la
humedad y el polvo.
2. Al trasladarlo, debe sujetarse de su brazo y del
soporte o base.
3. Antes de usarlo, debe cerciorarse de que las
lentes accesibles (objetivos, oculares y
condensador) estn limpias, de no ser as, hay
que limpiarlas con papel seda especial para
evitar su deterioro.
4. No tocar nunca las lentes.
5. No dejar el portaobjeto puesto cuando no se
est usando el microscopio.
6. Al terminar la observacin con el objetivo de
inmersin debe retirarse el aceite utilizando
papel seda o un lienzo suave, limpio y seco,
porque de no hacerlo se reseca, dificultando su
limpieza y causando deterioro del lente.

7. Si los objetivos de poco aumento se
manchan con aceite, limpiarlos
inmediatamente con papel seda.
8. Si el aceite se ha secado o endurecido en
las lentes, se puede limpiar con papel
humedecido con xilol. Tener precaucin, ya
que al emplear un exceso de xilol podra
disolver el cemento que une las lentes.
9. Las lentes de los objetivos, el condensador
y los oculares han sido cuidadosamente
ajustados en la fbrica de origen, por lo
tanto, no deben ser desarmados por el
observador. Recuerde que el poder de
resolucin del microscopio depende de que
todas las lentes estn centradas y a la
distancia correcta unas de otras.
10. Los objetivos, el condensador y los
oculares pueden limpiarse con agua
destilada; la lente de inmersin y la parte
superior del condensador con xilol, pero
con poca cantidad, humedeciendo
ligeramente un lienzo y pasndolo
suavemente por la superficie del lente. No
usar este solvente en exceso, porque las
lentes vienen montadas con blsamo de
Canad, el cual puede disolverse.
11. Mantener seca y limpia la platina del
microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarla con un pao. Si se mancha
con aceite, limpiarla con un pao
humedecido con xilol.
12. La superficie del microscopio se puede
limpiar con un lienzo humedecido con agua.
La cremallera del tornillo macromtrico
debe limpiarse ocasionalmente con una
pequea cantidad de aceite o grasa
delgada. El tornillo micromtrico no
necesita aceite.
13. No inclinar el microscopio cuando se est
trabajando con aceite de inmersin. Este
puede caer al sistema mecnico de la
platina donde es difcil limpiarlo, o puede
gotear al condensador y ah solidificarse.
14. Cuando no se usa el microcopio, guardarlo
cubierto y en su caja.
42

Para evitar rotura del microscopio

1. No forzarlo nunca.
2. Las lentes objetivo no deben tocar nunca
los portaobjetos.
3. No bajar el tubo del microscopio con el
tornillo de enfoque macromtrico mientras
se est mirando por el ocular.
4. No intercambiar los objetivos o los oculares
de microscopios distintos y, bajo ninguna
circunstancia, se deben separar las lentes
frontales de los objetivos.


Material
1. Microscopios compuestos.
2. Preparaciones fijas de bacterias, protozoos,
hongos y artrpodos de importancia
mdica.
3. Preparaciones en fresco (cultivo de paja).
4. Portaobjetos.
5. Cubreobjetos.
6. Aceite de inmersin.
7. Papel seda.
8. Diapositivas.

Mtodo
1. El profesor explicar la diferencia entre una
preparacin en fresco y una fija.
2. Observar preparaciones en fresco con los
objetivos de 10X y 40X
3. Observar preparaciones fijas con los
objetivos de 10X, 40X y 100X

conocimiento
1. Cul es la utilidad del microscopio en el
estudio de la Microbiologa y Parasitologa?
2. Cul es el poder de resolucin del
microscopio ptico al emplear el objetivo de
inmersin?
3. Mencione tres tipos de microscopios y su
utilidad.

1. Qu objetivo se utiliza para observar una
preparacin en fresco?
2. Mencione tres medidas para mantener
limpio el microscopio compuesto.
3. Con qu se deben limpiar los objetivos de
inmersin despus de la observacin?
4. Qu cuidados se deben tener con el
microscopio al terminar la observacin?

El profesor, junto con los alumnos, elaborar las
conclusiones del tema.
43
PRCTICA No. 3
INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA

Objetivos generales
Establecer un marco de referencia en el estudio
de la Bacteriologa clnica.

Revisar los recursos con que cuenta el laboratorio
de bacteriologa para la realizacin de tinciones y
cultivos bacteriolgicos, empleados en la
identificacin de una bacteria.

Explicar la importancia que tiene el laboratorio de
bacteriologa clnica, en la determinacin del
diagnstico etiolgico correcto para establecer la
terapia antimicrobiana especfica.

Antecedentes
El cuerpo humano se encuentra formado por 10
14

clulas. De las que solo, aproximadamente, el
10% son humanas. El resto son microorganismos
asociados. Desde el momento de su nacimiento,
el individuo establece una relacin con
microorganismos del ambiente que formarn la
microbiota. Dependiendo del sitio del cuerpo ser
el tipo de microorganismo que lo colonice. La
microbiota es benfica para el humano, salvo en
el momento en que se presente algn factor de
oportunismo que favorezca el crecimiento inusual
de los microorganismos y produzca dao. Por lo
tanto, en la mayora de los casos, esta interaccin
es benfica.
El conocimiento de la microbiota permite
diferenciar los microorganismos patgenos de los
no patgenos. Por otro lado, debido a que se han
incrementado los factores de oportunismo que
favorecen las patologas por estos
microorganismos, las infecciones que producen
representan, en la actualidad, un problema de
diagnstico.
En el estudio bacteriolgico de un caso clnico, se
sigue la secuencia siguiente:

A). Toma de productos: Es importante el
conocimiento del sitio de donde se
tomar la muestra. A las bacterias se les
puede aislar prcticamente de cualquier
sitio (piel, mucosas y secreciones), sin
que estn produciendo procesos
patolgicos. En otras ocasiones, se
presenta la necesidad de aislar bacterias
a partir de tejidos lesionados o productos
patolgicos. En el caso de infecciones de
vas respiratorias, se tomar exudado
farngeo, nasal o muestras obtenidas por
lavado bronquial o esputo. En enfermos
del tracto gastrointestinal, se tomar
materia fecal o bien muestras con hisopo
estril por va rectal o directamente
utilizando rectosigmoidoscopa. En casos
de infecciones de vas urinarias, la
muestra til es la orina recolectada en
condiciones de esterilidad y, en
infecciones localizadas, como es el caso
de pstulas, fornculos, fstulas, otitis,
lesiones oculares, etc., el producto a
tomar ser el exudado de esas lesiones.
En caso necesario, se emplear un medio
de transporte que permitir sobrevivir a la
bacteria antes de ser sembrada en un
medio de cultivo.
B). Aislamiento: Proceso necesario para
identificar al microorganismo. Para lo cual,
se emplean diferentes medios de cultivo,
que proporcionarn los requerimientos
nutritivos necesarios (carbono, nitrgeno,
electrolitos, agua y, en algunos casos,
sustancias de enriquecimiento como es la
sangre) para el crecimiento y
reproduccin de la bacteria.
Atendiendo a su estado fsico, los medios
de cultivo pueden ser lquidos,
semislidos y slidos. Los slidos son
empleados en el aislamiento y
caracterizacin de la morfologa colonial
del microorganismo.
De acuerdo con su utilidad prctica,
pueden ser selectivos, no selectivos,
enriquecidos y para aislamiento
especializado. Los selectivos son aquellos
que promueven el desarrollo de ciertas
bacterias, inhibiendo otras. En tanto que
los no selectivos estn libres de
inhibidores lo cual, permiten el desarrollo
de una gran cantidad de bacterias.
Entre los empleados para la identificacin
se cuenta con los medios diferenciales.
Mtodos de aislamiento y observacin de
la morfologa colonial.
La tcnica de aislamiento ms
frecuentemente usada es por estras en
medio de cultivo slido en placa de petri.
Con este procedimiento se logra obtener
un cultivo puro. Es decir, se logra separar
un tipo de bacteria de otras presentes en
la misma muestra clnica. Tambin se
cuenta con el mtodo de dilucin con asa
calibrada (cultivo de orina) o la de
medicin con pipeta graduada.
44
La inspeccin de las caractersticas
macroscpicas de las colonias (tamao,
forma, elevacin, margen, color, superficie,
densidad, consistencia, produccin de
pigmento y hemlisis en caso de haberse
empleado agar sangre) se efecta con el
examen visual del desarrollo en la
superficie de las placas de agar.

C). Identificacin bacteriolgica.
Procedimiento que se efectuar con base
en la fisiologa bacteriana para reconocer
los productos del metabolismo de sta;
produccin de cido y gas a partir del
empleo de carbohidratos; glucosa, lactosa
o sacarosa. Presencia de productos
liberados por la presencia de enzimas que
desdoblan aminocidos (triptfano, cistina,
metionina, ornitina, arginina y lisina) como
sera la produccin de indol, H
2
S, etc. de
protenas (gelatina, caseina). As como
hemolisinas que lisan glbulos rojos
(produciendo hemlisis , , y ) o
ausencia de hemlisis.

D). Tcnicas de Tincin
La falta de contraste entre la bacteria y el
medio que la rodea hace necesario de la
coloracin de stas, con el fin de aumentar
el contraste y poder observarlas con el
microscopio ptico, lo que permite
distinguir los diferentes tipos celulares.
La mayora de los colorantes son
compuestos orgnicos, cargados
positivamente (cationes), como el azul de
metileno, cristal violeta y safranina, que se
combinan con constituyentes celulares
cargados negativamente (aniones).
Las tinciones pueden ser simples cuando
se emplea un solo colorante y compuestas
cuando se utilizan varios colorantes
combinados, ejemplo de stas son la
tincin de Gram y la de Ziehl-Neelsen

Desarrollo de la prctica.
Sesin I

1. El profesor apoyado con material
didctico explicar de manera terica y
prctica el desarrollo de la prctica.
2. Los alumnos, en grupos pequeos,
revisarn el material que se emplear
durante el desarrollo de la prctica.
3. Los alumnos bajo, vigilancia del
profesor, realizarn la prctica.

Material
1. Medio de transporte.
2. Placas de Eosina azul de metileno
(EMB), Salmonella-Shigella agar (SS),
agar sangre y agar chocolate.
3. Tubos de agar hierro triple azcar (TSI),
agar hierro lisina (LIA), agar movilidad,
indol, lisina (MIO), tubos de citrato de
Simmons.
4. Tubos con caldo nutritivo.
5. Asas bacteriolgicas.
6. Placas de agar nutritivo.
7. Hisopo estril.
8. Tubo con agua destilada estril.
9. Marcador (el alumno deber traerlo).
10. Mechero.

Mtodo
Manos sin lavar.
1. Humedecer el hisopo estril con agua.
2. Con el hisopo humedecido, tomar la
muestra de los pliegues interdigitales,
dorso y palma.
3. Sembrar con el hisopo en un extremo
de la placa con agar nutritivo.
4. Realizar estriado para obtener colonias
aisladas.
5. Rotular la caja de petri.
6. Incubar a 35-37C durante 24-48 horas.

Manos lavadas.
1. Realizar el aseo de manos con agua y
jabn de manera tradicional.
2. Frotar las manos enjabonadas durante
30 segundos.
3. Humedecer el hisopo estril con agua.
4. Tomar la muestra de los espacios
interdigitales, del dorso y palmas.
5. Sembrar en las placas de agar nutritivo
como en el caso anterior.
6. Rotular la caja de petri.
7. Incubar a 35-37C durante 24-48 horas.

Sesin II

Material
1. Cajas de petri sembradas por los
alumnos
2. Equipo para tincin de Gram
3. Portaobjeto
4. Aceite de inmersin
5. Microscopio
6. Asa bacteriolgica
7. Placas y tubos sembrados
(demostrativos)

45

Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn, macroscopicamente, los cultivos
(morfologa colonial)
2. Realizarn tincin de Gram a partir de
colonias aisladas desarrolladas.
3. Realizarn observacin microscpica.

conocimiento
1. Mencionar bacterias que forman parte de la
microbiota.
2. Indicar los recursos de laboratorio que se
utilizan para el diagnstico de infecciones
bacterianas.
3. Qu importancia tiene el hacer el diagnstico
etiolgico en casos de infecciones
bacterianas?

conocimiento adquirido.

1. Cul es el motivo para emplear un medio de
transporte?
2. Cul es el motivo para sembrar por estras en
un medio de cultivo slido?
3. Qu fin se persigue con el empleo de medios
diferenciales?

Resumen de la prctica:
El profesor, junto con los alumnos, discutir la
utilidad del empleo de las tcnicas usadas en
bacteriologa diagnstica.
.
46

PRACTICA No.4
INFECCIONES DE VAS RESPIRATORIAS

Objetivos generales
Establecer un marco de referencia para el estudio
de las infecciones bacterianas de vas respiratorias.
Identificar los principales agentes etiolgicos que
producen infecciones de vas respiratorias.
Revisar los recursos de laboratorio para el
diagnstico de las infecciones bacterianas de vas
respiratorias.

Antecedentes
Entre los microorganismos involucrados en
procesos infecciosos de vas respiratorias, se
encuentra; Streptococcus pyogenes tambin
llamado Estreptococo beta hemoltico del grupo A
de Lancefield. As como estreptococos del grupo C,
D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium
haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria
gonorrhoeae, Corynebacterium diphtheriae,
Haemophilus influenzae tipo B, Bordetella pertussis,
Borrelia vincenti, Fusobacterium sp y
Mycobacterium tuberculosis. Es importante
mencionar que en caso de pacientes
inmunocomprometidos pueden participar Klebsiella
pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa.
Entre los virus tenemos una alta participacin de
Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes
simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B,
Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus.
Las muestras que se emplean en infecciones de
vas respiratorias incluyen, exudado farngeo,
exudado nasal, exudado nasofarngeo, lavado
nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras.
En presencia de patologa pulmonar, el estudio
bacteriolgico de una muestra de esputo
(expectoracin) debe constituir el examen inicial. La
calidad de la muestra es ms importante que el
volumen obtenido. Para un diagnstico confiable, el
material debe ser representativo de vas areas
inferiores, debindose caracterizar,
macroscpicamente por la presencia de material
mucoide, aspecto herrumbroso propio del inicio de
neumona y microscpicamente por la presencia de
macrfagos, eritrocitos y/o clulas glandulares.

Sesin I:
El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisar un caso clnico de infecciones de
vas respiratorias e identificarn:
a) Datos relevantes del caso.
b) Posibles diagnsticos clnicos.
c) Productos biolgicos empleados para el
diagnstico de laboratorio.

d) Exmenes de laboratorio tiles para confirmar
el diagnstico clnico.
e) Realizarn estudio bacteriolgico de esputo.

Material
- Frotes preparados.
- Mecheros.
- Equipo de Tincin de Ziehl-Neelsen y Gram.
- Diapositivas.
- Microscopio
- Aceite de inmersin.

Mtodo
1. Para realizar el aislamiento de la o las bacterias
(BAAR positivas) a partir de esputo, se realizar
previamente la descontaminacin y
concentracin de la muestra que se vaya a
emplear.
2. Toma de muestra: se le pide al paciente que la
recoleccin se haga por la maana. Sin
necesidad de realizar limpieza de los dientes y
encas. Se har un enjuague con agua
nicamente.
3. Inmediatamente pedirle realizar inspiraciones
profundas para provocar un acceso de tos que el
paciente aprovechar para expulsar un esputo
de su rbol bronquial.
4. Depositar el esputo en un frasco estril de boca
ancha, proporcionado por el laboratorio.
5. En la mayora de los casos el tamao de la
muestra ser de una cucharadita, cantidad
suficiente para el estudio.
6. En caso de que no se cultive inmediatamente, la
muestra podr mantenerse 24 horas, en el
refrigerador.

Siembra
1. La siembra de la muestra se realizar en una
campana de proteccin con los cuidados
adecuados, evitando la produccin de aerosoles.
2. Se emplear una pipeta Pasteur estril para
colocar la muestra en un tubo con medio de
Lowenstein-Jensen o los que se requieran.
3. De la misma muestra se realiza un frote en un
porta objeto (laminilla).
4. Este cultivo se incubar a 37C., con tubo
inclinado y su tapn ligeramente apretado.
5. Se debe vigilar el desarrollo en los medios
inoculados e incubados durante un perodo de 6
a 8 semanas.

47

Prctica

1. Por razones de seguridad nicamente se
realizar la tincin de Ziehl-Neelsen de un frote
con la bacteria previamente fijada al
portaobjeto.
2. Una vez teida la laminilla, observar al
microscopio.

Interpretacin de resultados
Medio de Lowenstein-Jensen: Observar la
morfologa colonial, determinar la presencia o no de
pigmentacin.

conocimiento
1. Mencione tres bacterias que se asocian a
enfermedades de vas respiratorias.
2. Indique los recursos de laboratorio que se
bacterianas de las vas respiratorias.
3. Qu importancia tiene hacer el diagnstico
etiolgico en las infecciones bacterianas de
vas respiratorias?

1. Qu utilidad tiene el tipo de pigmento
observado en los tubos con medio de
Lowenstein-Jensen?
2. Qu bacteria se aisl en el cuadro clnico
estudiado?
3. Qu aplicacin tienen los anlisis serolgicos
en el diagnstico de infecciones bacterianas de
las vas respiratorias?

El profesor junto con los alumnos correlacionar el
caso clnico con el diagnstico de laboratorio y
elaborarn un esquema grfico.

.

48

PRCTICA No.5
INFECCIONES DE TEJIDOS BLANDOS

Objetivos generales
de infecciones bacterianas de tejidos blandos
superficiales y profundos.

Identificar los principales agentes bacterianos
causantes de infeccin de tejidos blandos

Revisar los recursos para el diagnstico de
bacterias que causan infeccin de tejidos blandos

Antecedentes
La superficie de la piel normal se encuentra
colonizada por bacterias, clasificadas en dos
grandes grupos; microbiota residente y microbiota
transitoria o temporal. Esta ltima cobra
importancia por que no solo es capaz de desarrollar
lesiones en el individuo, sino tambin por
transformar a ste en un portador sano. Entre los
microorganismos que la integran se encuentra con
elevada incidencia a Staphylococcus aureus y
Streptococcus pyogenes. Con menor frecuencia
estn bacterias Gram negativas. La distribucin de
estas dos especies de cocos Gram positivos en la
superficie de la piel es preferencial, encontrndose
en espacios interdigitales de pies, ombligo, axilas,
cara interna de muslos, ingle, cuello y cara. En
relacin a la cara se localizan en sitios cercanos a
los grandes orificios (boca y nariz), en tanto que las
bacterias Gram negativas se ubican
preferentemente en ambientes hmedos y con
cierto grado de maceracin.
La piel constituye una barrera natural a la infeccin,
sin embargo, puede ser vencida, tanto por la
capacidad de multiplicacin bacteriana como por
los factores de virulencia del microorganismo.
Existen zonas susceptibles a la infeccin como son
los folculos pilosebceos y las glndulas
sudorparas apcrifas, cuya estructura anatmica
los convierte en verdaderos fondos de saco,
favoreciendo la accin de las bacterias (S aureus, S
pyogenes, Corynebacterium sp y en ocasiones
bacterias Gram negativas).

Entre los efectos de estos microorganismos se
encuentran las infecciones primarias, tal es el caso
de pioderma (infecciones de piel y anexos),
localizadas al inicio en un tegumento previamente
normal, aunque pueden dar sintomatologa
posteriormente a distancia. La pioderma produce
cuadros clnicos muy variados. Cuando afecta la
superficie cutnea se genera; imptigo, sndrome
de la piel escaldada, estima, erisipela, la pioderma
que afecta anexos; foliculitis, porofoliculitis, ntrax
y piodermas atpicas; chancriforma, vegetante.
El diagnstico etiolgico de estos cuadros se
realiza a travs del cultivo de la muestra clnica,
tendiente al aislamiento e identificacin del o de los
microorganismos causantes de la lesin.

Desarrollo de la prctica.
Sesin I
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con
los alumnos revisarn un caso clnico de
infeccin bacteriana de tejidos blandos
superficiales o profundos e identificar:
c) Productos biolgicos a utilizar para el
d) Exmenes de laboratorio tiles para
confirmar el diagnstico clnico.
2. Realizar un cultivo del material obtenido.

Material
1. Hisopo estril.
2. Placas de agar sangre, sal manitol y EMB.
3. Tubo problema
4. Asa bacteriolgica.
5. Marcador.
6. Mechero.
7. Equipo para tincin de Gram.
8. Portaobjetos.
9. Aceite de inmersin.
10. Microscopio.

49

Mtodo
1. Humedecer el hisopo estril con la muestra
problema
2. El hisopo se descargar en las cajas que
contienen los tres medios en la zona indicada
por el profesor de laboratorio
3 Con el empleo del asa bacteriolgica
previamente esterilizada y fra, se harn las
estras tendientes para lograr el aislamiento
bacteriano.
4. Incubar a 3537C durante 24 a 48 horas.

Sesin II

Material
1. Cajas de petri sembradas por los alumnos.
2. Medios de cultivo; aislamiento e identificacin
bioqumicas demostrativas.
4. Portaobjetos

Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscopicamente los cultivos
(morfologa colonial).
2. Realizarn frote y tincin de Gram a partir de
las colonias previamente identificadas y
anotarn sus caractersticas tintoriales.
3. Interpretar las pruebas bioqumicas junto con
los dems datos para llegar al diagnstico
etiolgico.

conocimiento
1. Mencione las bacterias que se asocian a
cuadros de piodermia.
Utilizan para el diagnstico de infecciones
bacterianas de tejidos blandos superficiales y
profundos.
etiolgico en las infecciones de tejidos blandos
superficiales y profundos?

1. Qu estudios se realizaron para llegar al
diagnstico en el caso clnico revisado?
2. Qu agente etiolgico fue responsable de la
patologa en el caso clnico revisado?
3. Qu bacterias se identificaron en el cultivo de
piel que realizaron.

El profesor con los alumnos correlacionar el caso
clnico con el diagnstico de laboratorio y

50

PRCTICA No. 6
INFECCIONES DEL TRACTO GASTROINTESTINAL

Objetivos generales
de infecciones bacterianas del tracto
gastrointestinal.

Identificar los principales agentes causantes de
infecciones bacterianas del tracto gastrointestinal.

Revisar los recursos para el diagnstico de las
infecciones bacterianas del tracto gastrointestinal.

Antecedentes
La microbiota normal del tracto gastrointestinal,
esta constituida por una gran diversidad de
especies bacterianas, entre las que se encuentran
bacterias de la familia Enterobacteriaceae. Sin
embargo, algunos gneros de esta familia son
agentes etiolgicos de padecimientos como son;
gastroenteritis y disentera bacilar.
Las bacterias patgenas del tracto gastrointestinal,
las podemos dividen en: Bacterias enteroinvasivas:
E. coli enteroptogena (ECEP), E. coli
enteroagregativa (ECEA), E. coli enteroinvasiva
(ECEI), Salmonella enteritidis (con numerosos
serovares), Shigella sp., Yersinia enterocolitica y
Campylobacter jejuni.
Bacterias enterotoxignicas: E coli enterotoxigenica
(ECET), E. coli enterohemorrgica (ECEH), Vibrio
cholerae, V. mimicus, V. vulnificus, V.
parahemolyticus y Clostridium difficile. Todos estos
microorganismos ocasionan afecciones entricas a
travs de la elaboracin de toxinas, cuya liberacin
ocurre despus de la colonizacin del intestino.
El diagnstico etiolgico, se realiza mediante el
cultivo de los microorganismos presentes en la
materia fecal, procedimiento denominado
coprocultivo, a travs del cual se logra, inicialmente
el aislamiento y para posteriormente realizar la
identificacin bioqumica y serolgica de las
bacterias presentes (ver diagrama)

Para realizar con xito este mtodo se recomienda:
1. Que el paciente no se encuentre en tratamiento
antimicrobiano, antes de recolectar la muestra.
2. El recipiente para la muestra debe ser un frasco
con tapn de rosca, absolutamente limpio,
estril y exento de desinfectantes, detergentes
o jabones.

3. En pacientes peditricos, si la muestra no
puede obtenerse naturalmente, debe
introducirse un hisopo hasta rebasar el
esfnter anal y rotarlo suavemente. Cuando
sea posible recurrir a la proctoscopa o la
sigmoidoscopa, para obtener la muestra
procedente de la regin afectada.
4. Es conveniente analizar y sembrar la muestra
en cuanto sea recolectada, ya que la flora
intestinal puede continuar la fermentacin de
los carbohidratos, disminuyendo el pH y con
ello, afectando la viabilidad de algunos
patgenos delicados. Del mismo modo, las
temperaturas de refrigeracin suelen resultar
perjudiciales para algunas cepas de Shigella
sp.
5. Cuando la muestra no pueda analizarse
inmediatamente despus de haberse
obtenido, es oportuno el empleo de medios de
transporte, tales como el Cary Blair, que
carece de nutrimentos y cuyo contenido en
sales y tioglicolato preserva la viabilidad de los
microorganismos patgenos, sin que ocurra
un crecimiento considerable de ellos ni de los
miembros de la flora intestinal.
6. Si la evacuacin es slida, antes de la siembra
debe colocarse en solucin salina isotnica
buscando que quede en una proporcin de 1:8
a 1:10 aproximadamente.
7. Cuando la muestra presenta moco y/o sangre,
estos materiales son los que se siembran.

Los medios mas empleados en el coprocultivo para
el aislamiento e identificacin de bacterias, se
clasifican como selectivos y diferenciales, puesto
que contienen inhibidores para bacterias Gram
positivas y permiten diferenciar entre las colonias
lactosa positivas y lactosa negativas, debido a que
su formulacin incluye lactosa y un indicador que
detecta los cambios de pH.
Considerar que el pH de los medios mencionados
anteriormente es neutro, por lo tanto, su coloracin
inicial ser la de sus respectivos indicadores. Una
vez sembrados, las observaciones deben realizarse
24 horas despus ya que el indicador del medio
habr virado de acuerdo a la acidez o alcalinidad
formada.
Las pruebas bioqumicas son otro recurso para
poder identificar a las enterobacterias.

51

Sesin I
gastroenteritis bacteriana e identificarn:
2. Realizarn un coprocultivo.

Material
1. Placas Eosina Azul de Metileno (EMB),
Salmonella-Shigella (SS).
2. Tubos de citrato de Simmons, Agar hierro
triple azcar (TSI), Agar hierro lisina (LIA),
Agar Movilidad Indol Ornitina (MIO)
3. Asas bacteriolgicas
4. Problema
Mtodo
1. Obtener una muestra de materia fecal en un
frasco estril y de aqu tomar una pequea
porcin con un hisopo estril, de preferencia
de los sitios con moco y sangre.
2. Con el hisopo, inocular las siguientes medios:
EMB y SS, seguir el procedimiento por estras
en placa para el aislamiento de colonias
3. Incubar a 37C durante 24 horas
4. Sembrar en los tubos de citrato, TSI, LIA y
MIO, la bacteria problema, como lo indique el
profesor, incubar a 37C durante 24 horas.
5. Identificar al o los microorganismos con las
pruebas bioqumicas.

Sesin II
Material
1. Cultivos demostrativos y de la prctica
anterior.
2. Pruebas bioqumicas demostrativas y de la
prctica anterior.
3. Reactivo de Kovac

Metodologa
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn colonias
lactosa positivas de las negativas.
2. Realizarn tinciones de Gram a partir de
colonias previamente identificadas y anotarn
sus caractersticas tintoriales.

3. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto
con los dems datos para llegar al diagnstico
etiolgico.

Interpretacin de bioqumicas

Agar citrato de Simmons: Prueba empleada para
diferenciar aquellas bacterias que usan el citrato
como nica fuente de carbono y energa.
Tiene como indicador, al colorante azul de
bromotimol, que se alcaliniza al emplear las sales
de amonio, que hace que el medio vire a un color
azul, cuando es positivo.

TSI (Agar triple azcar-hierro).Prueba que
permite observar la fermentacin de glucosa,
lactosa y sacarosa as como la produccin de gas y
cido sulfhdrico.
La fermentacin acidifica el medio, haciendo que el
indicador (rojo de fenol) vire a amarillo. En tanto
que el tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de
hidrgeno que reacciona con sales de hierro,
proporcionando sulfuro de hierro de color negro.

LIA (Agar hierro lisina). Prueba basada en la
descarboxilacin y desaminacin de lisina, as
como en la produccin de cido sulfhdrico.
Descarboxilacin de la lisina positiva; Pico
violeta/fondo violeta. Prueba negativa: Pico violeta/
fondo amarillo.
Desaminacin de la lisina; Pico rojizo/fondo
amarillo, se presenta en Proteus, Providencia y
Morganella sp
Produccin de cido sulfhdrico: Ennegrecimiento
del medio (especialmente en el lmite entre el pico y
el fondo.
52

MIO (Agar hierro ornitina). Prueba que permite
detectar la movilidad del microorganismo,
produccin de indol y descarboxilacin de ornitina.
La fermentacin de la dextrosa hace que el medio
vire a un color amarillo.
La descarboxilacin de la ornitina alcaliniza el
medio dando un vire a color prpura.
La produccin de indol a partir del triptfano se
manifiesta al agregar el reactivo de Kovac o de
Erlich.

conocimiento
1. Mencione cuatro bacterias que se asocian a
cuadros de infecciones del tracto
gastrointestinal.
utilizan para el diagnstico de infecciones del
tracto gastrointestinal
etiolgico en una infeccin del tracto
gastrointestinal?
4. Qu importancia tiene la prueba de
fermentacin de la lactosa en la identificacin
de las enterobacterias?

1. Cul fue el agente etiolgico en el caso clnico
revisado?
2. Qu estudios se usaron para confirmar el
diagnstico clnico del caso revisado?
3. Qu utilidad tienen las pruebas bioqumicas
en la identificacin del agente etiolgico en el
caso clnico revisado?

elaborarn un esquema grfico

53

PRCTICA No. 7
INFECCIONES SISTMICAS

Objetivos generales
de infecciones sistmicas de origen bacterianas.
Identificar las bacterias causantes de infecciones
sistmicas.
infecciones sistmicas.
Antecedentes.
Una infeccin sistmica es definida como aquella
que se encuentra en el torrente circulatorio.

La presencia de bacterias en el sistema circulatorio
sin cuadro clnico, es referida como bacteriemia y
se clasifica en; a) transitoria (ocasionada por la
manipulacin de tejido infectado o procedimientos
quirrgicos. b) intermitente (asociada a infecciones
cerradas) y c) continua (caracterstica de
endocarditis infecciosa y otras infecciones
intravasculares; fiebre tifoidea y brucelosis).
La septicemia es definida como la presencia de la
bacteria o sus productos en el sistema vascular y
de una respuesta inflamatoria sistmica. Su origen
puede ser trauma quirrgico, quemaduras,
abscesos cutneos, aplicacin de sondas o
catteres. As como enfermedades localizadas;
gonorrea, neumona, tuberculosis, infecciones
urinarias.
Los agentes causales son mltiples entre los que
se incluyen, bacterias Gram positivas y Gram
negativas; Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,
Proteus sp, Serratia marcescens, Citrobacter
freundii, Staphylococcus aureus, Staphylococcus
coagulasa negativos, Streptococcus hemolitico,
Enterococcus faecalis Bacteroides fragilis,
Clostridium perfringens, Peptostreptococcus sp.,
Leptospira interrogans, Neisseria gonrorrhoeae,
Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae,
Haemophilus influenzae, Brucella sp, Salmonella
entericas serotipo Typhi. Segn el nmero de
especies de microorganismos encontrados, estas
pueden ser mono o polimicrobianas. De acuerdo al
lugar de adquisicin; extra o intrahospitalarias y
segn el foco, son primarias o secundarias.

El diagnstico es clnico (manifestaciones clnicas
de sepsis, sepsis grave, shock septico y
bacteremia) y de laboratorio: Este se realiza a
travs del cultivo de sangre (hemocultivo). La que
se obtiene por venopuncin e inoculacin en el
cultivo. Estrictamente hablando, la sangre obtenida
del paciente es cultivada en medios slidos
selectivos, y a partir de las colonias aisladas se
efectuarn las pruebas bioqumicas
correspondientes y la determinacin serolgica.
54

Sesin I:
1. El profesor de laboratorio conjuntamente con los
alumnos revisaran un caso clnico de infecciones
sistmicas e identificarn:
2. Datos relevantes del caso.
3. Posibles diagnsticos clnicos.
4. Productos biolgicos empleados para el
5. Exmenes de laboratorio tiles para confirmar el
diagnstico clnico.

Material
1. Hemocultivos demostrativos.
2. Placas de agar sangre.
4. Cultivo problema

Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los
hemocultivos.
2. A partir del problema realizar un cultivo en
agar sangre, con la tcnica de estras para
lograr el aislamiento del microorganismo.
3. Incubarn las placas a 35-37C durante 24-48
horas.

Sesin II
Material
1. Placas de agar sangre inoculadas.
2. Equipo de Tincin de Gram
3. Preparaciones fijas
4. Portaobjetos
5. Cubreobjetos
6. Microscopio
7. Aceite de inmersin
8. Papel para la limpieza del microscopio

Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos y
diferenciarn la morfologa colonial.
2. Realizarn tinciones de Gram a partir de
colonias previamente identificadas y anotarn
sus caractersticas tintoriales.

Interpretacin de resultados.

conocimiento
1. Mencione tres bacterias que se asocian a
enfermedades sistmicas.
2. Indique los recursos de laboratorio que se
sistmicas.
etiolgico en las infecciones sistmicas?

1. Qu utilidad tiene el hemocultivo?
2. Qu bacteria se aisl en el cuadro clnico
estudiado?
3. Qu aplicacin tienen los anlisis serolgicos
en el diagnstico de infecciones sistmicas?


55

PRCTICA NM. 8
INFECCIONES DE VAS URINARIAS

Objetivos generales
de infecciones bacterianas de vas urinarias.

Identificar las bacterias causantes de infecciones de
vas urinarias.

infecciones de vas urinarias.

Antecedentes
Las infecciones urinarias son de las ms
importantes en el ser humano, afectan ms a las
mujeres, se adquieren con mayor frecuencia por va
ascendente exgena que por endgena. Se
asocian a la falta de higiene, malformaciones,
uropata obstructiva, alteraciones neurognicas de
vejiga, cateterismo uretral, diabetes mellitus,
embarazo, hipertensin arterial, neoplasias,
alteraciones de los mecanismos de defensa
especficos e inespecficos. Uno de los riesgos ms
serios de las infecciones urinarias radica en que,
cualquiera de las zonas afectadas del tracto,
constituye un importante foco a partir del cual los
microorganismos responsables pueden diseminarse
hasta el rin e inclusive migrar de ste hacia la
sangre, comprometiendo en ambos casos, la vida
del enfermo.
En la mujer, la uretrocistitis es la entidad clnica
ms frecuente y generalmente cursa en forma
aguda. En el hombre, tambin se presenta
prostatitis. Estas infecciones son de difcil curacin
y causan frecuentes recadas. La pielonefritis
representa en ambos sexos la entidad de mayor
gravedad y se debe en un 10 % de los casos a ms
de una especie bacteriana, sobre todo cuando se
trata de pacientes sometidos a cateterismo
permanente o quienes presentan lesiones
obstructivas en el tracto urinario.

Los principales agentes etiolgicos de infecciones
del tracto urinario estn limitados a unos cuantos
microorganismos de crecimiento rpido.
Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Klebsiella
pneumoniae, Enterobacter sp, Proteus sp,
Pseudomonas sp., estafilococos coagulasa
negativa, S. saprophyticus, y ocasionalmente
Candida albicans, as como otros microorganismos
oportunistas, tanto en pacientes hospitalizados
como externos.

Las muestras de orina son remitidas para urocultivo
a partir de pacientes sintomticos con infecciones
del tracto urinario y de asintomticos con alto riesgo
de infeccin.
La recoleccin de la muestra se realiza mediante
varios mtodos, entre los que destacan el de la
media miccin, el cateterismo, la puncin
suprapbica, la habilitacin de los catteres
permanentes y el empleo de colectores peditricos.
Si la muestra no es colectada apropiadamente,
puede contaminarse con microorganismos de la
microbiota normal del perin, la prstata, la uretra o
la vagina.

Coleccin de la muestra
1. Chorro medio de orina emitido
espontneamente: mtodo que se realiza
regularmente, debido a que no representa
mayores problemas para el paciente.
Se recomienda que el paciente realice la
limpieza adecuada de las zonas cercanas a la
uretra. Una vez efectuada la limpieza, se
descarta en el inodoro la primera parte de la
miccin y, sin que esta se suspenda, se
recogen los 20 a 30 ml siguientes en un
recipiente de boca amplia, con tapn de rosca,
estril, sin trazas de detergente o
desinfectantes.
2. Cateterismo vesical: tcnica que aumenta el
riesgo de infecciones del tracto urinario ya
que, con frecuencia acta como vehculo para
que los microorganismos, presentes en la
sonda o en la porcin externa de la uretra,
alcancen vejiga, ureteros y rin, agravando la
condicin de los enfermos, por lo tanto, este
procedimiento no es recomendado de rutina.
3. Puncin suprapbica: orina colectada de la
vejiga, este mtodo es el preferido para
pacientes en estado de coma o cuando los
resultados obtenidos con otras tcnicas sean
confusos, ya que la muestra se obtiene
directamente de la vejiga y, bajo estas
condiciones, no se contamina con
microorganismos provenientes de otros sitios
(siempre que la asepsia previa se haya
realizado cuidadosamente).

56

4. Bolsas colectoras peditricas: son adecuadas
en los nios en quienes, debido a su corta
edad, no se puede emplear el mtodo de la
media miccin; dichos colectores se fijan a los
genitales sin resultar incmodos, dado que el
material con el que se confeccionan es blando y
plegable.
5. Las puntas de sondas de Foley no son
aceptables para cultivos.

Momento de la coleccin de la muestra
1. Obtener la primera orina de la maana.
2. La ingesta excesiva de lquidos, puede diluir la
orina y disminuir la cuenta de colonias a menos
de cien mil UFC/ml.
3. Colectar muestras durante tres das
consecutivos en pacientes asintomticos.
Transporte de muestras
1. Transportar la muestra al laboratorio tan pronto
como sea posible despus de la coleccin.
2. Cultivar las muestras dentro de las dos horas
posteriores a la coleccin, o refrigerarlas y
sembrarlas en un lapso no mayor de 8 horas.
3. Se requiere tomar una nueva muestra de orina
cuando no hay evidencia de refrigeracin, el
mtodo de coleccin no han sido el adecuado.
4. Si se trata de una muestra colectada,
transportada y manejada de manera
inadecuada y no puede ser reemplazada, se
documenta en el reporte final que la calidad de
la muestra no es la adecuada y se debern
tomar con reserva los resultados.
5. La refrigeracin no es necesaria si la muestra
de orina es colectada en tubos de transporte
con preservativos. Colocar cuando menos 3 ml
de orina en el tubo para evitar un efecto
inhibitorio o diluyente en los microorganismos.
Anlisis de las muestras.
Los mtodos para el anlisis de las muestras son
cuantitativos, debido a la elevada frecuencia con la
que estas se contaminan durante su obtencin o
cualitativos en los casos de recoleccin
suprapbica.

Deteccin de Bacteriuria

1. Tincin de Gram
El mtodo de tincin de Gram puede detectar la
presencia tanto de bacterias como leucocitos
en muestras de orina

Tcnica
1. Colocar 10 microlitros de orina no centrifugada
y bien mezclada sobre un portaobjetos de vidrio
y dejar secar al aire sin extender
2. Fijar, teir e identificar al microorganismo.
3. Determinar el nmero de microorganismos por
campo utilizando el objetivo de inmersin
Interpretacin:
1. Reportar el nmero de microorganismos: la
presencia de uno o ms microorganismos por
campo se correlaciona con una cuenta 10
5

UFC/ml.
2. La presencia de muchas clulas epiteliales
escamosas y diferentes morfotipos microbianos
indica contaminacin y requiere repetir la
muestra.

Mtodos de cultivo
1. Mtodo de estriado en superficie con asa
calibrada.
Las asas calibradas presentan caractersticas
especficas que las habilitan para recoger, si
solo se introduce a la muestra la parte circular,
un volumen conocido de orina. La siembra se
realiza descargando su contenido en toda la
superficie del medio seleccionado.
Cabe sealar que la eleccin de los medios es
importante. No debe faltar una gelosa sangre u
otro medio en el que pueda desarrollar el
agente etiolgico, aunque este sea exigente en
cuanto a sus requerimientos nutricionales, y
algunos otros medios con caractersticas
diferenciales y/o selectivas, que permitan el
desarrollo de los patgenos, inhibiendo a los
contaminantes.
Las placas sembradas se incuban a 35 C en
aerobiosis, durante 24 a 48 horas. Transcurrido
el tiempo, se analizan las caractersticas
macroscpicas obtenidas, poniendo especial
cuidado en detectar si estn presentes uno o
ms microorganismos diferentes y en realizar el
recuento correspondiente.
Como las asas comerciales ms utilizadas son
las que recogen un volumen de 0.001 ml de
orina, el nmero de colonias de cada caja
deber multiplicarse por 1000 para conocer la
cantidad de microorganismos o de UFC que la
muestra contiene por mililitro.
Adicionalmente, deben someterse a pruebas de
identificacin, tomando en cuenta que las
infecciones urinarias son causadas, en el 85 a
90 % de los casos, por una sola especie
bacteriana.
57

Para la interpretacin de resultados es importante
considerar de manera conjunta, la identidad de los
microorganismos encontrados, los criterios de
Kass, la historia clnica y algunos otros factores de
riesgo que apunten hacia la firme posibilidad de
una patologa urinaria, debido a que algunas
bacterias se pueden presentar como contaminantes
de la muestra o se presentan casos en los que no
llegan a alcanzar las cifras reconocidas como
significativas (segn Kass)

Los criterios de Kass establecen lo siguiente:

No de UFC/ ml INTERPRETACIN
100 000
10 000 y 100,000
1000
Infeccin activa
Dudosa*
Contaminacin de la
muestra
*Debe analizarse otra muestra del paciente.

Considerar
Los falsos negativos pueden obtenerse cuando
a) El paciente se encuentra bajo tratamiento
antimicrobiano poco antes o durante la
recoleccin de la muestra:
b) El microorganismo causante del cuadro es
incapaz de desarrollarse en los medios
utilizados o bajo las condiciones de incubacin
que se seleccionaron
c) La muestra analizada no fue la primera de la
maana
d) El depsito en el que se recoge el espcimen
contiene restos de detergente o desinfectante
e) El enfermo se encontraba recibiendo lquidos
intravenosos
f) La calidad y/o la preparacin de los medios no
es la adecuada
g) El asa calibrada recoge volmenes menores a
los esperados
h) La muestra no se homogeniz antes
de introducir el asa
i) La alcuota descargada en la superficie del
medio no se distribuy adecuadamente.

Los falsos positivos pueden ocurrir cuando
a) El paciente no efecta la limpieza previa en
forma adecuada
b) El espcimen se siembra despus de haber
permanecido dos horas o ms a temperatura
ambiente
c) El depsito en el que se recoge la muestra se
encuentra contaminado
d) El asa calibrada recoge mayores cantidades
que las esperadas
e) La paciente suspendi la miccin para
recolectar la parte media
f) El catter se encontraba contaminado

Procedimientos de medio mnimo
Mtodo de las diluciones
Este se considera ms confiable que el del asa
calibrada,
Se realiza preparando diluciones 1:10, 1:100 y
1:1000 a partir de la muestra, emplendose SSI
estril como diluyente, y, posteriormente, se coloca
1 ml de la ltima dilucin en una o mas cajas Petri
estriles, a las que despus se le vierten 20 ml de
los medios seleccionados cuando estos se han
esterilizado y se encuentran a una temperatura de
45 o 50 C.
Las cajas se mezclan, de manera que la alcuota se
distribuya uniformemente; finalmente, se permite
que los medios solidifiquen y la placa se incuba a
35 C en aerobiosis, durante 24 a 48 h.
El procedimiento y la interpretacin de resultados
son similares al descrito para el mtodo del asa
calibrada. Considerando en este caso, la posibilidad
de falsos negativos cuando los medios se vierten a
temperaturas mayores a las sealadas, y la de
falsos positivos cuando las diluciones se preparan
con una misma pipeta o sin condiciones aspticas.

Consideraciones especiales
1. No cultivar lo siguiente:
a) Puntas de catter de Foley
b) Orina en medio lquido
c) Sedimento de orina
2. El criterio de 10
5
UFC/ml puede ser aplicado
a la mayora de las muestras remitidas para
cultivo
3. Las cuentas de colonias o igual a 10
5
UFC en
muestras emitidas espontneamente con
disuria y sntomas de infeccin del tracto
urinario puede ser importante y debe ser
valorado por el clnico.
4. Realizar cultivos en anaerobiosis solo en
aspirados por puncin suprapbica cuando
sean requeridos
Desarrollo de la prctica:
Sesin I
1. El profesor del laboratorio conjuntamente con
infecciones bacterianas de vas urinarias e
identificarn:
c) Productos biolgicos a utilizar.
d) Exmenes de laboratorio a tiles para

58

2. Realizarn un urocultivo.

Material
1. Placa de Eosina Azul de Metileno (EMB) y
gelosa sangre.
2. Asa calibrada de 0.001 ml
3. Orina problema

Mtodo
1 Colectar la primera orina de la maana
Mediante la tcnica de chorro medio, el
paciente se debe lavar la regin periuretral y el
perin con agua jabonosa y enjuagar muy bien
con solucin salina estril o agua destilada.
Durante la recoleccin se desecha la primera
porcin de la orina para eliminar por arrastre
mecnico las bacterias residentes en la uretra
distal, recolectndose nicamente la porcin
media de la orina en un recipiente estril,
desechando la porcin final.
2. Homogenizar la orina agitando el frasco por
rotacin con el asa calibrada estril, tomar una
asada y descargar en lnea recta en el centro
de la placa de agar EMB y estriar masivamente
(en forma cruzada a la primera descarga).
3. Repetir el procedimiento en las placas de
gelosa sangre.
4. Incubar las cajas a 37C durante 24 a 48 horas.

Sesin II

Material
1. Cultivos demostrativos y de la prctica anterior
2. Equipo para tincin de Gram

Mtodo
Los alumnos:
1. Observarn macroscpicamente los cultivos
(morfologa colonial) y diferenciarn las
colonias.
2. Contarn el nmero de colonias que se
desarrollaron en las cajas
3. De acuerdo con el criterio de Kass y Stanford,
si el nmero de bacterias es 100 000 UFC/ml,
se proceder a identificar l o los
microorganismos por los mtodos usuales.
4. Realizarn tincion de Gram a partir de colonias
previamente identificadas y anotarn sus
caractersticas.
5. Interpretarn las pruebas bioqumicas junto con
los dems datos para llegar al diagnstico
etiolgico.

conocimiento
1. Mencione los criterios de Kass y Stanford para
el diagnstico de infecciones bacterianas de
vas urinarias.
2. En qu condiciones se pueden obtener falsos
positivos o negativos?
3. Qu indica el encontrar ms de una especie
bacteriana en un urocultivo?
4. Por qu se emplea un medio de cultivo para
Gram negativos?

1. Cul fue el agente etiolgico del caso clnico
revisado?
2. Cmo se confirm el diagnstico clnico del
caso clnico revisado?
3. Por qu se emplea el asa calibrada para la
siembra de la orina?
4. De acuerdo a los criterios de Kass y Stanford,
cmo se interpreta el encontrar >10
5
UFC/mL?


59

PRCTICA NO. 9
INFECCIONES DE TRANSMISIN SEXUAL

Objetivos generales:
de las infecciones de transmisin sexual.
Identificar los principales agentes de infecciones de
transmisin sexual.
Revisar los recursos para el diagnstico de las
infecciones de transmisin sexual de etiologa
bacterianas.

Antecedentes.
Las enfermedades de transmisin sexual (ETS) son
un conjunto de afecciones clnicas
infectocontagiosas, transmitidas de persona a
persona durante el acto sexual. Sin embargo, su
transmisin tambin puede realizarse a travs del
empleo de jeringas contaminadas, por transfusin
sangunea o durante el embarazo o parto. Las ETS
son causadas principalmente por bacterias y virus,
aunque tambin pueden ser ocasionadas por
hongos y protozoarios.
En la etiologa bacteriana, se cuenta con; Neisseria
gonorrhoeae, Mycoplasma homimis, Ureaplasma
urealyticum, Chlamydia trachomatis, Treponema
pallidum y Haemophilus ducreyi, productoras de
uretritis y/o lesiones ulcerativas. Otro cuadro clnico,
que no necesariamente es ocasionada por
transmisin sexual es la vaginosis bacteriana, la
cual se presenta como una alteracin en la
microbiota vaginal, con sobrecrecimiento de
Gardnerella vaginalis, junto con bacterias
anaerobias y disminucin de lactobacilos.
Aproximadamente el 50% de las pacientes cursan
asintomticas y se diagnostican durante una
exploracin o al realizar citologa de rutina. El
sntoma fundamental es leucorrea blanco-griscea,
adherente a las paredes vaginales, maloliente (olor
a pescado), al no existir proceso inflamatorio las
pacientes no refieren prurito, dispareunia ni disuria.
El diagnstico se realiza si se cumplen 3 de los 4
criterios diagnsticos de Amsel, que son los
siguientes:1) Secrecin caracterstica. 2) pH >4.5.
3) Olor a aminas de la secrecin despus de
agregarle KOH. 4) Clulas clave (clulas del epitelio
vaginal recubiertas de bacterias, que le dan un
aspecto granular).

Sesin I
los alumnos revisarn un caso clnico de ETS e
identificar:

b) Posibles diagnstico clnicos.
2. Realizar tincin de Gram y observacin de
material demostrativo.

Material
1. Placas de medio de cultivo sembradas
(demostrativo)
2. Laminillas con muestra clnica fijadas.

Mtodologa
1. Los alumnos observarn macroscpicamente
los cultivos (morfologa colonial).
2. Realizarn tinciones de Gram con las laminillas
facilitadas y anotarn las caractersticas
tintoriales y elementos observados.

conocimiento
1. Mencione las bacterias que se asocian a
cuadros de infecciones de transmisin sexual.
utilizan para el diagnstico de infecciones de
transmisin sexual.
etiolgico de una infeccin de transmisin
sexual?
4. Qu importancia tienen los criterios de Amsel
en el caso clnico discutido?


1. Cul fue el agente etiolgico en el caso clnico
revisado?
2. Qu estudios se usaron para confirmar el
diagnstico clnico del caso revisado?


El profesor junto con los alumnos correlacionarn el
elaborar un esquema grfico.

60

PRCTICA NO. 10
SISTEMA NERVIOSO CENTRAL

Objetivos generales
de infecciones bacterianas del sistema nervioso
central (SNC).
Identificar las bacterias causantes de infecciones
en el SNC
infecciones del SNC

Antecedentes:
El sistema nervioso central (SNC), puede ser
infectado por diferentes microorganismos, entre los
que se encuentran bacterias consideradas
potencialmente patgenas como es el caso de
Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae, Neisseria meningitidis y Mycobacterium
tuberculosis y aquellas pertenecientes a la
microbiota transitoria o permanente. La
participacin de estas va a depender de la edad,
estado inmunolgico e integridad anatmica del
SNC del paciente.
Entre los cuadros clnicos ocasionados; se
encuentran; meningitis aguda, crnica (tuberculosis,
brucelosis), absceso cerebral, infarto cerebral
embolico por endocarditis bacteriana y empiema
subdural.

La meningitis puede ser aguda o crnica,
dependiendo del agente infeccioso. Los principales
agentes bacterianos, en nios menores de cuatro
aos, son transmitidos por portadores sanos, que
tienen al microorganismo en las vas respiratorias
altas, que son: Haemophilus influenzae, Neisseria
meningitidis y Streptococcus pneumoniae y en la
crnica: Mycobacterium tuberculosis y Brucella sp.

El examen del lquido cefalorraqudeo (LCR) es
importante y fundamental en la valoracin del
paciente con una infeccin del SNC. Por lo quel se
requiere realizar una puncin raqudea
tcnicamente correcta y de un estudio meticuloso
del producto. Su anlisis incluye; la determinacin
de la presin de apertura, aspecto, recuento celular
y diferencial, glucosa y protenas. As como la
demostracin directa de patgenos a travs de la
microscopa y el empleo de tincin de Gram y/o
Ziehl Neelsen.

La deteccin de antgenos bacterianos se realiza
con el objeto de identificar al microorganismo sin
tener que esperar a su aislamiento mediante el
cultivo, el cual se debe realizar con el empleo de
medios de rutina para el aislamiento de bacterias y
confirmar el diagnstico etiolgico.

El diagnstico rpido y la aplicacin temprana del
tratamiento con el antibitico especfico, son pasos
esenciales para prevenir las complicaciones del
padecimiento, como son las secuelas neurolgicas
que pueden presentarse sobre todo en un nmero
apreciable de lactantes y nios. Sin embargo, pese
a la existencia de tratamiento efectivo, el ndice de
letalidad por meningitis bacteriana puede llegar al
15% aproximadamente.

Sesin I
1. El profesor, de laboratorio conjuntamente con
los alumnos, revisarn un caso clnico de
infeccin bacteriana del SNC para identificar:
c) Productos biolgicos a utilizar.
2. Realizarn un cultivo de lquido
cefalorraqudeo.

Material
1. Muestra de LCR
2. Placas de Agar chocolate , agar sangre.

Mtodo
El alumno:
1. Describir las caractersticas macroscpicas del
LCR proporcionado.
2. Sembrar la muestra en los medios de cultivo.
3. Realizar frote y tincin de Gram a partir de la
muestra.
4. Observar al microscopio el frote realizado.

61

Sesin II

Material
1. Placas de medios de cultivo demostrativas y las
sembradas por los alumnos.
2. Pruebas bioqumicas demostrativas.
4. Asas bacteriolgicas.

Mtodo
El alumno:
1. Describir la morfologa colonial.
2. Comparar su aislado con las placas de
demostracin.
3. Leer las pruebas bioqumicas demostrativas.
4. Realizar frote y tincin de Gram a partir de los
aislados.
5. Identificar la especie bacteriana aislada.

conocimiento
1. Cules son los efectos que pueden producir
las bacterias que infectan al SNC?
2. Qu estudios de laboratorio permiten
establecer el diagnstico etiolgico de una
infeccin bacteriana?
3. Mencione una prueba serolgica que permita
realizar un diagnstico rpido de una infeccin
del SNC?

1. Que utilidad tienen las pruebas rpidas en el
diagnstico de enfermedades de etiologa
bacteriana?
2. Qu estudios se utilizan para llegar al
diagnstico de meningoencefalitis?
3. Que muestras se deben tomar para realizar
los estudios de meningoencefalitis?
4. Qu mtodos directos se pueden emplear
para el diagnstico de origen bacteriano en el
laboratorio?


62

ANEXO
DETERMINACIN DE SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS

Objetivos
Identificar el efecto antibacteriano de los frmacos en
un cultivo de bacterias.
Demostrar la utilidad de la prueba de sensibilidad
antimicrobiana por difusin en disco.
Identificar la utilidad de las pruebas de sensibilidad a
los antimicrobianos en la clnica.
Antecedentes
La quimioterapia antimicrobiana ha desempeado un
papel vital en el tratamiento de las enfermedades
infecciosas durante el siglo XX. Desde el
descubrimiento de la penicilina, cientos de agentes
antimicrobianos han sido obtenidos a partir de
microorganismos o por sntesis. El uso de estas
sustancias ha permitido la seleccin de variantes
resistentes a los mismos.
Existen dos mecanismos principales por los cuales los
microorganismos cambian su sensibilidad hacia los
antimicrobianos y otras drogas utilizadas en la prctica
mdica: la mutacin e intercambio gentico
(conjugacin, transformacin o transduccin). La
resistencia a los antimicrobianos se manifiesta como
decremento de la permeabilidad al medicamento,
modificacin de su receptor, inactivacin enzimtica de
la droga, alteracin del blanco del antimicrobiano,
etctera.

Las pruebas in vitro de sensibilidad antimicrobiana
estn indicadas para determinar los frmacos de
eleccin en infecciones producidas por
microorganismos cuya sensibilidad es impredecible o
en infecciones que no responden al tratamiento
inicialmente elegido, infecciones intrahospitalarias,
infecciones crnicas o cuadros clnicos de repeticin; y
para seleccionar el antimicrobiano ms adecuado en
pacientes con problemas especficos como edad,
hipersensibilidad, tc. Algunos microorganismos que
con frecuencia desarrollan resistencia a los
antimicrobianos son: Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae,
Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y
Proteus sp.
No est indicado solicitar pruebas de sensibilidad a
antimicrobianos cuando no se ha reportado resistencia
al agente de eleccin o est se ha reportado slo
raramente.
Algunas de las pruebas de sensibilidad antimicrobiana
realizadas en los laboratorios clnicos son las
siguientes:

1. Difusin en disco: procedimiento simple que
emplea agar Meller-Hinton, medio que permite el
crecimiento de la mayora de los microorganismos
para los cuales estas pruebas son relevantes. Est
tcnica es cualitativa, reproducible, econmica, no
requiere de equipo especial y est estandarizada
para probar bacterias de crecimiento rpido.
Determina sensibilidad, sensibilidad intermedia y
resistencia empleando un disco de papel filtro
impregnado con un antimicrobiano seleccionado
que se difunde a travs del medio.

Para efectuarla se inocula una placa de agar con el
microorganismo problema, a la que se le depositan
discos secos de papel filtro que contienen los
agentes antimicrobianos. Los discos adsorben
agua del medio, la droga se disuelve y difunde
hacia el medio adyacente siguiendo las leyes
fsicas que gobiernan la difusin de las molculas
a travs de agar. El resultado es un gradiente de
concentracin de la droga alrededor del disco. Las
clulas bacterianas que no son inhibidas por el
agente antibacteriano, sern capaces de crecer en
toda la zona alrededor del disco, mientras que en
las bacterias sensibles a la droga, no se observar
crecimiento en el rea donde las concentraciones
inhibitorias de la doga estn presentes. La zona de
inhibicin es afectada por la velocidad de difusin
de las diferentes drogas a travs del agar, por lo
que las zonas observadas con una droga no
pueden ser comparadas con las de otra droga. Sin
embargo, el dimetro de la zona de inhibicin es
inversamente proporcional al MIC.

Algunas de las limitaciones de este procedimiento
son:
a) El mtodo est estandarizado slo para
microorganismos aerobios de crecimiento
rpido incluyendo Enterococcus sp.,
Staphylococcus sp. Pseudomonas aeruginosa,
Acinetobacter sp., algunos Streptococcus y
Listeria monocytogenes y con algunas
modificaciones ha sido utilizado para
microorganismos exigentes como
Haemophilus sp., Neisseria sp. y
Streptococcus pneumoniae.
b) Organismos de crecimiento lento, anaerobios
obligados y aquellos que requieren CO
2
para
su crecimiento no dan resultados confiables al
ser probados por este mtodo por lo que se
recomiendan mtodos de dilucin.

63

2. Concentracin mnima inhibitoria (MIC) en caldo:
prueba cuantitativa til para microorganismos
anaerobios, determina la actividad bactericida o
evidencia el sinergismo o antagonismo entre
agentes antimicrobianos.

3. Produccin de beta-lactamasa: basada en la
deteccin de los productos finales de la hidrlisis
de beta-lactmicos por colorimetra. Los
procedimientos comnmente utilizados incluyen el
mtodo cromognico de cefalosporina, el
acidimtrico y el iodomtrico.

4. Deteccin de resistencia a oxacilina (metacilina):
se emplea una oxacilina ms estable que permite
detectar tanto las cepas de Staphylococcus
oxacilina resistentes y la mayora de las cepas
metacilina resistentes. Esta prueba es importante
considerando que algunas cepas de
Staphylococcus pueden dar falsos negativos para
metacilina en pruebas de difusin debido, a la
rpida inactivacin de este medicamento en
refrigeracin.

5. Dilucin en caldo para bacterias anaerobias: se
emplean medios suplementados que favorezcan el
crecimiento de anaerobios. Se recomienda utilizar
microdilucin y macrodilucin en caldo. En
particular la microdilucin es til para Clostridium.

En laboratorios clnicos especializados se realizan
otras pruebas para determinar la sensibilidad a
antimicrobianos como:

1. Induccin de beta-lactamasa para bacilos Gram
negativos.
2. Cloranfenicol acetiltransferasa.
3. MIC por dilucin en agar para bacterias
anaerobias.
4. MIC por microdilucin en caldo para micobacterias
de crecimiento rpido y Nocardia.
5. Dilucin en agar (mtodo de las proporciones,
modificado para micobacterias de crecimiento
lento).
7. Radiomtricas (BACTEC) para micobacterias de
crecimiento lento.

Material
1. Cajas con gelosa Meller-Hinton con 4 mm de
grosor.
2. Tubo MacFarland de 0.5.
3. Tubos con solucin salina estril cada uno con 3
ml
4. Cultivos de 18 a 24 h en caldo nutritivo.

5. Discos impregnados con antibiticos.
6. Regla graduada en milmetros y centmetros (para
ajustar la turbidez del inculo).
7. Hisopos estriles.
8. Pinzas.
9. Marcador.

IV. Mtodo (consultar diagrama de flujo)

1. A partir de un cultivo en placa, tomar con un asa
bacteriolgica cuatro o cinco colonias bien aisladas
del mismo tipo morfolgico e inocularlas en un tubo
que contenga 5 ml de caldo Meller-Hinton.
2. Incubar a 35 C hasta que aparezca una turbidez
visible (2-5 h) que se ajusta, con caldo o solucin
salina, por comparacin visual hasta obtener una
turbidez de la mitad del estndar 1 de Mac Farland
(tubo 0.5). Otra alternativa para preparar el inoculo,
es resuspender un cultivo de toda la noche en
solucin salina y ajustar su densidad con el tubo
0.5 de Mac Farland. La suspensin ajustada del
inculo, no debe permanecer ms de 15 a 20 min.
antes de proceder a sembrarla en la placa de
gelosa Meller-Hinton.
3. Para inocular la placa, utilizar un hisopo estril, el
cual se moja en la suspensin bacteriana, quitando
el exceso de lquido al presionar el hisopo contra
las paredes del tubo, sembrar con el hisopo la caja
de agar en tres direcciones, con lo cual se produce
un crecimiento confluente de las bacterias. Dejar
secar unos cinco minutos la placa antes de
depositar los discos.
4. Depositar los discos con unas pinzas estriles y
apretarlos ligeramente contra el agar. Esperar 5
10 min, invertir la placa e incubarla a 35 C durante
16-18 h (el tiempo puede variar dependiendo de
los microorganismos).
5. Pasado el tiempo de incubacin, medir con una
regla, vernier o una plantilla diseada para este
propsito, los dimetros de las zonas de inhibicin
completas.
6. Comparar los resultados obtenidos con la tabla
proporcionada.
7. Reportar los resultados obtenidos.

64
DIAGRAMA DE FLUJO DE PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A
ANTIMICROBIANOS POR DIFUSIN EN DISCO

Primer da

Colonias puras (primoaislamiento) a partir de urocultivo, hemocultivo, heridas, LCR, etctera

Ajustar inculo a turbidez del tubo 0.5 de Mac Farland

Sembrar con hisopo (estra cerrada) en: placa de
Meller-Hinton

Colocar los discos con antibiticos segn su
morfotipo al Gram

Incubar a 37 C x 24 horas

Segundo da

Medir dimetro del halo de inhibicin

Comparar con tablas: sensible, intermedio,
resistente

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