Protocolos de Muestreo en Cultivos para Anlisis de Micronutrientes
James Stangoulis y Cristina Sison, Editores Los protocolos de muestreo fueron desarrollados con el apoyo de los lderes de cultivos y tomejoradores de HarvestPlus. En particular, se reconoce por su contribucin a: Abebe Menkir (maz), Stefania Grando (cebada), Stephen Beebe (frjol), Kiran Sharma (caup), Ashutosh Sarker (lenteja), N. K. Rai (mijo de perla), Rose Ndango y Mark Davey (banano), Belum Reddy (sorgo), Alfred Dixon (yuca), Bienvinido O. Juliano y Cristina Sison (arroz), Merideth Bonierbale (papa) e Ivn Ortiz Monasterio (trigo). La prueba de los protocolos requiri anlisis por parte del Servicio de Anlisis Waite. Por su asistencia, nuestra gratitud. AGRADECIMIENTOS PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 NOTAS DE PRECAUCIN PARA EVITAR LA CONTAMINACIN Es sabido que el tomejoramiento es un juego de nmeros y que la seleccin de los genotipos requiere de un esfuerzo considerable, tanto en el campo como en el laboratorio. Recolectar una muestra representativa y minimizar la contaminacin por el suelo y el polvo durante la cosecha o por los equipos de tratamiento de pos-cosecha, plantea un considerable desafo analtico cuando se est mejorando cultivos en cuanto a sus contenidos de hierro y zinc. Antes de utilizar los equipos, especialmente los de procesamiento para la preparacin de la muestra, se debe determinar de qu material estn hechos y si podran ser una fuente de contaminacin. Por ejemplo muchos molinos tienen componentes de acero inoxidable, que por lo general se cree no causan contaminacin por hierro. Sin embargo, algunos aceros vienen de diversos niveles de dureza y calidad que pueden ser una fuente de contaminacin. Otro ejemplo son los productos de caucho, comnmente encontrados en varios equipos de trilla, que pueden introducir hierro y zinc exgeno. MANEJO DEL MATERIAL RECOLECTADO El personal que recolecta y maneja las muestras debe entender la importancia de evitar la contaminacin. Las fuentes contaminantes comunes en la toma de muestras, en la manipulacin de los cultivos en el campo o en el laboratorio incluyen: El suelo o polvo en las manos o en los equipos. Productos para el cuidado de la piel como cremas de manos. Equipo sucio u oxidado (como los contenedores para las muestras o las cuchillas de trillado). El volcamiento de los cultivos (en caso de los cereales) que resulta con la espiga extendida en el suelo o el agua. El contacto o la mezcla accidental con otras muestras. MANTENIMIENTO DE LOS EQUIPOS DE POS-COSECHA No utilice ningn equipo que tenga partes oxidadas. Si no est seguro que su equipo puede causar contaminacin, ste debe ser probado. Para probarlo, prepare replicas de 2 3 variedades y analice el contenido de minerales de las muestras. Un alto nivel de hierro, con un consiguiente aumento de nivel de aluminio o titanio, puede indicar contaminacin. Por ejemplo, si una muestra molida de arroz blanco tiene un mayor contenido de hierro que la correspondiente a una muestra de arroz integral, es probable un contaminante en el hierro del arroz blanco. PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 RECOLECCIN DE UNA MUESTRA REPRESENTATIVA Una variabilidad genotpica inherente para el hierro y el zinc se observa entre plantas de la misma especie e incluso dentro de una misma planta. Por ejemplo, el hierro contenido en una espiga de trigo vara espacialmente; por lo tanto la necesidad de una muestra representativa que reeje verdaderamente la realidad de los valores de hierro y zinc del genotipo. Para los granos hay 2 maneras de recolectar una muestra representativa: Pile los granos uniformemente en una bandeja lavada con cido, aplane el montn y extienda los granos en un crculo (vea la fgura 1). Divida el crculo en cuatro partes iguales, aproximadamente. Descarte las 2 cuartas partes diametralmente opuestas y mezcle las otras 2 partes restantes. Repita el procedimiento hasta que la cantidad de granos se reduzca a la cantidad de muestra requerida para el experimento.
Utilice divisores automticos de acero inoxidable (comnmente llamados divisores de muestra) para dividir los granos en dos, cuatro o ms lneas, de las cuales una puede ser tomada como la muestra representativa. Repita el procedimiento de divisin de la muestra hasta que la cantidad se reduzca hasta la deseada para la muestra. Para races y tubrculos, el mtodo ilustrado en la gura 1 tambin puede ser aplicado. Divida cada raz o tubrculo en cuatro partes iguales, aproximadamente, y descarte los dos cuartos diametral- mente opuestos. Combine los dos cuartos restantes como una muestra representativa. Para tener en cuenta la variacin entre las races o tubrculos en la misma planta, combine las cuartas partes diametralmente opuestas de varios tubrculos o races de la misma planta. ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS En cualquier etapa del proceso de muestreo del cultivo, cuando la muestra deba ser transportada, empacada o almacenada, la importancia de etiquetar correctamente, libre de contaminantes y libre de pesticidas, no debe ser sobreestimada. Las semillas y las muestras deben ser almacenadas adecuadamente para evitar la contaminacin y asegurar su integridad para el anlisis. En primer lugar, siempre etiquetar el envase de la muestra con el nombre del cultivo, el nombre de la variedad, la locacin y la fecha. Cada vez que un protocolo de muestreo requiera almacenamiento, el recipiente como cualquier equipo de tratamiento pos-cosecha, debe estar limpio y descontaminado. Las bolsas de papel y envolturas deben se nuevas y no usadas, preferiblemente tomadas de un paquete sellado que garan- tice que estn libres de suelo, polvo y otros contaminantes. Para la mayora de las muestras secas hay un almacenamiento entre la preparacin y el anlisis, las envolturas de papel moneda No.1 son del tamao perfecto. Figura 1. Recoleccin de una muestra representativa de races y tubrculos. PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 Los envases de plstico, bandejas de plstico y platos de Petri, deben ser lavados con cido a n de garantizar su limpieza. Lavar los recipientes con agua jabonosa (i.e. Pyroneg) y luego enjuagar en agua de osmosis reversa (RO). Coloque los recipientes en solucin de cido ntrico al 10% por 24 horas y luego enjuague con agua de alta pureza, preferiblemente milliQ. Si el lavado con cido no es posible, entonces lave con solucin jabonosa y enjuague con agua de osmosis reversa, aunque ante la ausencia de lavado con cido existe una ligera posibilidad de contaminacin. Para el almacenamiento a largo plazo, las bolitas de naftaleno pueden ser utilizadas para evitar la infestacin de insectos. En tal caso, coloque las bolsas con las muestras en una caja de cartn y ponga las bolitas de naftaleno alrededor de las bolsas que contienen las muestras (no dentro de las bolsas con muestras, pues stas no deben tocarse). MOLIENDA La trituracin es a menudo un requisito previo para la digestin de muestras y su anlisis. Por ello, debe utilizarse un molino libre de contaminantes. Los siguientes protocolos de muestreo para cultivos de HarvestPlus, mencionan el uso de un molino Retsch con cmaras de ten y bolas de circonio, y el triturador de IKA A10 (utilizados por muchos colaboradores de HarvestPlus). Sin embargo, estos molinos no son el nico medio adecuado que existe en el mercado. Para obtener una lista de molinos que HarvestPlus ha puesto a prueba hasta el momento (con evaluaciones de su rendimiento), pngase en contacto con el Dr. James Stangoulis Para ms informacin, contactar a: Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA LA CEBADA PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Cuando la cosecha haya alcanzado su madurez, elija aleatoriamente de 10 a 20 cabezas maduras. Rompa las cabezas a mano o corte con un par de tijeras de acero inoxidable. 3. Coloque las cabezas en bolsas de papel limpio, debidamente etiquetadas. EN EL LABORATORIO 4. Trille las espigas y las semillas a granel con las manos. 5. Pula el grano utilizando un pulidor no contaminante como el SATAKE TM-05. 6. Empaque los granos perlados en recipientes o en sobres de papel moneda No.1 limpios, nuevos y debidamente etiquetados. Almacene las muestras en lugar seco y libre de insectos hasta su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Stefania Grando, HarvestPlus, lder del cultivo de cebada (s.grando@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@adelaide.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA FRJOL PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Antes de la cosecha principal, rena al azar aproximadamente 10 vainas bien llenas. Coloque las vainas en sobres de papel nuevo y limpio (para evitar la contaminacin con polvo y tierra mientras se est desenterrando la planta y trillando en volumen). EN EL LABORATORIO 3. Trille las vainas a mano y recoja 5 gramos de semilla. Limpie las semillas con un pao humedecido con agua de alta pureza. 4. Seque las semillas a un 7-8% de humedad (normalmente 10-12% es la humedad en semillas frescas), en un horno libre de contaminacin (sin corrosin). 5. Muela 5 gramos de muestra con un molino no contaminante (por ejemplo, un molino Retsch con cmaras de ten y bolas de circonio o un IKA A10) para evitar la contaminacin del hierro y el zinc. La cantidad necesaria de muestra para el anlisis por Espectroscopia de Absorcin Atmica (AAS) o por Espectroscopia de Emisin de Plasma acoplado inductivamente (ICP-OES) es de 0.5-0.8 gramos. 6. Empaque las muestras en recipientes plsticos o bolsas de papel nuevas y limpias, correctamente etiquetadas. Gurdelas en un lugar limpio, seco y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Stephen Beebe, HarvestPlus, lder del cultivo de frjol (s.beebe@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA CAUP PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Recoja 1 kilogramo de vainas maduras de entre 5 a 10 plantas en dos las y coloque las muestras en bolsas de papel limpias y correctamente etiquetadas. EN EL LABORATORIO 3. Seque las muestras a 60C en horno (sin corrosin) durante 3 das, en un recipiente limpio y libre de contaminantes. 4. Trille las vainas suavemente sobre una bandeja plstica, libre de polvo. 5. Esparza las semillas y rena unos 10 gramos de ella. Guarde las muestras en bolsas de papel limpias y secas. 6. Muela las semillas usando un molino no contaminante como un molino Retsch con cmaras de ten y bolas de circonio, o un IKA A10. 7. Empaque las muestras molidas en recipientes nuevos y limpios, debidamente etiquetados, o en sobres de papel moneda No. 1, y almacnelos en un lugar limpio, seco y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Christian Fatokun, HarvestPlus, lder del cultivo de caup (c.fatokun@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE LENTEJAS PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Cuando las plantas comienzan a cambiar a una coloracin amarilla y a su vez, las vainas cambian de color caf a amarillo-marrn, pero an contienen suciente humedad para endurecer las vainas, seleccione al azar, para el muestreo, 10 plantas de lentejas en el campo. (Debido a que las vainas pueden romperse fcilmente, supervise de cerca la planta de lenteja a medida que se acerque la cosecha.). Coseche las lentejas cortndolas o guadaando. (Nota: La pasada de la guadaa no debe hacerse durante el tiempo caliente y seco del da). EN EL LABORATORIO 3. Mantenga las muestras en un lugar seco para reducir el contenido de humedad en alrededor de un 14% antes de la trilla. Si es necesario, seque las lentejas en secadores de aire caliente, a no ms de 43C, para reducir al mnimo el agrietamiento de las semillas. El secado al aire natural tiene ventajas sobre la de aire caliente, pero es necesario disear un buen sistema. Independientemente del mtodo de secado, se requiere un buen ujo de aire a travs de la semilla, lo que generalmente signica que deben utilizarse capas delgadas de ella en este proceso. 4. Trille las lentejas. Si utiliza una trilladora comercial y quiere evitar las grietas, utilice el cilindro a una velocidad ms lenta y coloque los cncavos de manera ms amplia que para la cosecha. El viento inicial y la conguracin de tamiz para el trigo pueden ser utilizados. Para evitar la contami- nacin, asegrese que las partes de la trilladora que puedan entrar en contacto con la muestra estn libres de moho (oxidacin). 5. Limpie las semillas de cualquier materia extraa. Extraiga una muestra representativa de aproximadamente 5 gramos (rerase a recoleccin de una muestra representativa en la Figura 1 de las notas de precaucin para evitar la contaminacin). Empaque las muestras en recipientes limpios, nuevos, etiquetados correctamente, o en envolturas de papel moneda No. 1, y gurdelas en un rea limpia, seca y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Ashutosh Sarker, HarvestPlus, lder del cultivo de lentejas (a.sarker@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE MAZ PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Antes de la cosecha, cubra las mazorcas con bolsas de papel limpio para evitar la contaminacin de hierro del polvo o del suelo, (por ejemplo, si la planta se vuelca durante una tormenta severa). 3. Despus que la cosecha alcance la madurez siolgica (80 a 120 das despus de la siembra), recoja sucientes mazorcas para obtener una muestra representativa. Para variedades de polinizacin libre, cosechar 100 mazorcas, seleccionadas al azar y tomando de cada surco. Para las lneas puras (autopolinizadas), cosechar 3 a 10 mazorcas buenas y trillarlas juntas. EN EL LABORATORIO 4. Remueva la cscara de cada mazorca manualmente, utilizando un instrumento limpio como un cuchillo de acero inoxidable o un palo de plstico. 5. Almacene las mazorcas sin cscara en una cesta cubierta (o una bolsa plstica utilizada nicamente para este propsito). 6. Coloque las mazorcas sin cscara en bandejas plsticas para su secado. (Si se utilizan bandejas de madera, debe prevenir la contaminacin al colocar las mazorcas sin cscara directamente, utili- zando bolsas de papel marrn antes de colocar las muestras en las bandejas). Seque las muestras a 40C durante 5 das en un horno limpio, libre de contaminantes y sin corrosin. (Los hornos utilizados para secar las muestras a las que se har el anlisis de hierro, no deben utilizarse para secar otras muestras, como de tejidos nos del suelo y de la raz, pues pueden dejar residuos contaminantes en el horno). 7. Desgrane las mazorcas sin cscara, con las manos limpias o con guantes de caucho libre de contaminantes. Coloque los granos en una bandeja plstica limpia y mezclar completamente. Recolecte una muestra representativa de aproximadamente 250 g (Rerase a recoleccin de una muestra en las notas de precaucin para evitar la contaminacin). 8. Muela los granos namente (Los granos deben pasar a travs de un tamiz de malla 30) utilizando un molino no contaminante (Por ejemplo, un molino Retsch con cmaras de ten y bolas de circonio o un IKA A10). 9. Recoja una submuestra de 25 gramos para el anlisis. Empaque las muestras en recipientes limpios o bolsas de papel marrn nuevas, debidamente etiquetadas y gurdelas en un lugar limpio, seco y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Kevin Pixley, HarvestPlus, lder del cultivo de maz (k.pixley@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DEL MIJO DE PERLA PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Para obtener una verdadera muestra representativa, haga cruces entre hermanas, travs de polinizacin manual, con polen recogido de una muestra de 50 a 60 plantas. Cruce en 20 plantas de la misma especie. Cuando las panculas se desarrollen, cubra con bolsas de papel limpias para reducir la exposicin al polvo. 3. Cuando las plantas cruzadas entre hermanas hayan alcanzado la madurez siolgica (85-90 das despus de la siembra), coseche las panculas y colquelas en bolsas de papel marrn o en recipientes limpios. EN EL LABORATORIO 4. Seque las panculas en sus bolsas de papel, en un recipiente limpio, seco, a plena luz del sol. 5. Elimine los granos de las panculas con una trilladora. 6. Limpie manualmente las semillas de cualquier residuo de la pancula. 7. Extraiga una muestra representativa de 100 gramos del grano para el anlisis (Utilizar un separador de muestra, si hay disponible. Si no, rerase a: Recogiendo una muestra representativa y a la gura 1 en las notas de precaucin para evitar la contaminacin). Empaque las muestras en sobres limpios, nuevos y etiquetados correctamente, o en sobres de papel moneda No. 1, y gurdelas en un lugar limpio, seco y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para mas informacin, contactar a: Dr. K. N. Rai, HarvestPlus, lder del cultivo de mijo perlado (k.rai@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE PLTANO Y BANANO PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Coseche tres frutos maduros de 3 ramas del rbol que estn situados en la parte alta, media y baja del racimo. Haga esto a los 3 4 meses despus de la oracin, cuando el pice distal de la fruta o de la hoja est seca o cuando haya una formacin robusta del fruto. EN EL LABORATORIO 3. Pele el pltano o banano usando un cuchillo de acero inoxidable, limpio. 4. Corte el pltano o banano longitudinal y luego transversalmente. Desechar dos cuartos diametralmente opuestos. Combine las dos partes restantes como la muestra representativa. (Consulte Recoleccin de una muestra representativa en la Figura 1 de las Notas de precaucin para evitar la contaminacin, para un ejemplo de cmo se hace esto). Combine las muestras de cada racimo (seis cuartos en total). 5. Coloque las piezas recogidas de la fruta en una caja petri limpia, lavada con cido y rotulada correctamente. Seque las muestras por 3 das a 60C, en un horno libre de contaminacin (corrosin). 6. Muela namente los frutos secos en un molino no contaminante. 7. Empaque las muestras en recipientes limpios, nuevos, etiquetados correctamente, o en envolturas de papel moneda No. 1, y almacnelos en un rea limpia, seca y libre de insectos hasta que estn listas para su anlisis. Para mayor informacin, contactar a: Dr. Abdou Tenkouano, HarvestPlus, lder de cultivo de banano(a.tenkouano@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Este protocolo fue adaptado del siguiente documento: Mark W. Davey, Ellen Stals, Grard Ngoh-Newilah, Kodjo Tomekpe, Charlotte Lusty, Richard Markham, Rony Swennen and Johan Keulemans (2007). Sampling Strategies and Variability in Fruit Pulp Micronutrient Contents of West and Central African Bananas and Plantains (Musa Species). Journal of Agricultural and Food Chemistry 55 (7), 2633 -2644. Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE ARROZ PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Coseche las panculas manualmente (120 das despus de la siembra), slo de plantas verticales y no cadas. EN EL LABORATORIO a 3. Trille manualmente las panculas y coloque el grano fresco en bolsas de papel marrn, limpias y etiquetadas correctamente. 4. Seque el arroz en un horno a 35-45C durante un mximo de 3 das para lograr un contenido de humedad de 12-14% (para minimizar la rotura de grano o suras, evitar el sobresecado y monitorear peridicamente el contenido de humedad de las muestras). Deje equilibrar el grano seco durante 3 das. Para obtener ptimos rendimientos de molienda, despus del secado, almacene el arroz en sacos o bolsas limpias por lo menos 2 meses despus de la cosecha. 5. Extraiga una muestra representativa de 50 a 120 gramos de arroz (rerase a la recogida de una muestra representativa en la Figura 1 de Notas de precaucin para evitar la contaminacin), dependiendo de qu molino se va a utilizar. 6. A la fecha, no se ha detectado un descascarador que no contamine una muestra. Dos alternativas pueden ser utilizadas para quitar la cscara del grano paddy b : Elimine manualmente las cscaras con pinzas recubiertas de tefn. Reemplace los compuestos contaminantes del descascarador SATAKE JUE-35A con compuestos no contaminantes de PVC (Contactarse con el Dr Stangoulis para ms detalles sobre este producto) y luego descascare los granos.
7. Los siguientes molinos c fueron sometidos a prueba por el Instituto Internacional de Investigacin del arroz (IRRI). Pueden ser usados para moler grandes cantidades (>70 gramos) de arroz integral: El MacGill No. 2 molino tipo- friccin o Grainman No. 60 (Grain Machinery Mfg Corp, Hialeah, FL, EE.UU.) requiere 120 gramos de arroz y producir alrededor de 60 gramos de arroz, dependiendo de la calidad de los granos y el contenido de humedad, antes de la molienda. El SATAKE TM-05 (abrasivos) molino con abrasivo de malla # 36 requiere por lo menos 50 gramos de arroz para lograr un grado de molienda y de calidad similar al producido por el molino Grainman. PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 La modifcacin hecha en Brasil al descascarador y pulidor de arroz Suzuki puede moler una muestra tan pequea como de 10 gramos. (Contacte con el Dr. Barry para ms detalles sobre este molino). Una modifcacin en el molino Kett puede tomar pequeas cantidades de muestra menores a 10 g. (Contacte con el Dr. Stangoulis para ms detalles).
8. Recoger de 2 a 5 gramos de arroz blanco. Empaque las muestras en recipientes limpios, nuevos, etiquetados correctamente, o en envolturas de papel moneda No. 1. Gurdelas en un lugar fresco (20C), seco y libre de insectos hasta que est listo para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Gerard Barry, HarvestPlus, lder de cultivos de arroz (g.barry@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) a Este protocolo de muestreo fue adaptado de un manual elaborado por el profesor Bienvenido O. Juliano para el Proyecto: Cultivo de arroz para una Mejor Nutricin de hierro, del Banco de Desarrollo de Micronutrientes de Asia. El manual puede obtenerse a travs del Dr. Stangoulis o del Dr. Barry. b
Evite cualquier contaminacin con suelo, vaina o salvado y evite tocar el arroz con las manos. Si es necesario, utilice guantes de plstico libres de polvo. No use guantes de goma. c
Limpie el molino a fondo despus de cada muestra. Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA SORGO PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Una vez los cultivos alcancen su madurez, elegir entre 10 y 20 plntulas al azar. Corte los tallos secos con las manos o con unas tijeras de acero inoxidable y colquelos en una bolsa de papel limpia, debidamente etiquetada y sellada. EN EL LABORATORIO 3. Trille manualmente los respectivos tallos, en un lugar limpio. 4. Seleccione los granos. 5. Limpie el polvo de los granos con un pao limpio, si es necesario. 6. Empaque los granos limpios en recipientes plsticos o en sobres de papel moneda No. 1, debidamente etiquetados. Almacene las muestras en un lugar limpio, seco y libre de insectos hasta que est listo para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Belum Reddy, HarvestPlus, lder del cultivo de sorgo (b.reddy@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE TUBRCULOS Y RACES (PAPA Y CAMOTE) PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Rena 30 tubrculos de mediano tamao, escogidos aleatoriamente por genotipo, de diferentes plantas que estn en el mismo campo. EN EL LABORATORIO Preparar tres muestras compuestas, por genotipo: 3. Lave los tubrculos con agua del grifo 4. Pele las races y enjuague con agua deionizada. 5. Seque los tubrculos con toallas de papel. Pele y corte rebanadas de cada tubrculo longitudinalmente, de los lados y del centro, con una rebanadora de hoja de acero inoxidable. Mezcle las rebanadas manualmente y tome una muestra de 50 gramos. O rerase a la recogida de una muestra repre- sentativa (gura 1) en las notas de precaucin para evitar la contaminacin: Divida cada raz o tubrculo en cuatro partes iguales aproximadamente, deseche dos cuartas partes diametralmente opuestas, y combine los restantes como una muestra representativa. (Para tener en cuenta la varia- cin entre las races o tubrculos en la misma planta, combinar las cuartas partes diametralmente opuestas de varios tubrculos o races de la misma planta). 6. Corte estas rebanadas en pedazos ms pequeos. 7. Coloque la muestra en un envase de plstico o un recipiente limpio de Petri. Secar la muestra en un horno a 60C en un perodo mnimo de 24 horas. 8. Muela las muestras secas en un molino no contaminante (como un molino Retsch con las cmaras de ten y bolas de circonio, o un IKA A10). 9. Empaque las muestras en recipientes en envases plsticos, nuevos y limpios, etiquetados correctamente con el nombre de la variedad. Almacene en un lugar seco hasta que estn listas para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Regina Kapinga, HarvestPlus, lder del cultivo de batata (r.kapinga@cgiar.org) o Dr. Merideth Bonierbale, HarvestPlus, lder del cultivo de papa (m.bonierbale@cgiar.org) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO DE YUCA Y AME PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Recoja cuatro a cinco races de tres plantas, de cada variedad. EN EL LABORATORIO 3. Lave las races con agua del grifo. 4. Pele las races y enjuage con agua deionizada. 5. Corte rebanadas de las partes lateral, central y prxima a cada raz. Mezcle manualmente las rodajas y recoja una muestra de 50 gramos. 6. Corte las rebanadas en pedazos ms pequeos. 7. Coloque la muestra en un recipiente limpio de plstico o cpsula de Petri. Seque la muestra en un horno a 60C, por lo menos durante 24 horas. 8. Muela la muestra seca en un molino no contaminante (como un molino Retsch con cmaras ten y bolas de circonio o en IKA A10). 9. Empaque la muestra en un recipiente plstico limpio y lavado con cido. Coloque la etiqueta con el nombre de la variedad y almacene a temperatura ambiente. Para ms informacin, contactar a: Dr. Hernn Ceballos, HarvestPlus, lder del cultivo de yuca (h.ceballos@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 PROTOCOLOS PARA MUESTREO DE CULTIVOS Y ANLISIS DE SUS MICRONUTRIENTES www.harvestplus.org 2009 PROTOCOLO DE MUESTREO PARA TRIGO PROCEDIMIENTO DE CAMPO 1. Familiarice al equipo de campo con las precauciones necesarias que puedan evitar la contaminacin. 2. Extraiga una muestra representativa, alrededor de 250 gramos, si la cosecha es a granel, o de 10 grupos seleccionados al azar antes de la cosecha principal, si los granos son cosechados de una pequea parcela. Coloque las muestras en bolsas de papel nuevas y limpias, debidamente etique- tadas para evitar la contaminacin con el polvo y el suelo. EN EL LABORATORIO 3. Trille a mano (no utilice tabla de trillar con recubrimiento de caucho, pues podra contaminar la muestra) y almacene las semillas en bolsas de papel nuevas y limpias. 4. Pase los granos a travs de un ltro de aire para eliminar los materiales extraos que estn en la muestra. 5. Divida las muestras para obtener 10 gramos de la misma y elimine manualmente cualquier partcula visible del suelo. Coloque la muestra resultante en bolsas de papel limpias, de color marrn. 6. En las zonas donde es un problema el fungosis de karnal, deje secar los granos en un horno limpio, a 75C durante 48 horas, para destruir las esporas. Luego lave las semillas con agua de alta pureza y deje secar nuevamente en el horno durante 24 horas. 7. Para anlisis en ICP, recoja 5 gramos de muestra de granos enteros. Para anlisis en absorcin atmica, moler 5 gramos de granos en un molino no contaminante (como un molino Retsch con las cmaras de ten y bolas de circonio o un IKA A10) y recoja 0,5 gramos de muestra de harina de trigo. Empaque las muestras en recipientes nuevos y limpios, etiquetados correctamente, y almacene en un lugar seco hasta que est listo para su anlisis. Para ms informacin, contactar a: Dr. Ivn Ortiz-Monasterio, HarvestPlus, lder del cultivo de trigo (i.ortiz-monasterio@cgiar.org) o Dr. James Stangoulis (james.stangoulis@inders.edu.au) Revisado 10/24/07 Las monografas tcnicas HarvestPlus estn diseadas para proporcionar un foro a los resultados de la investigacin HarvestPlus. Las monografas tcnicas pueden ser de dos tipos: El estado de la tcnica de evaluacin que ayuda a establecer y defnir cuestiones de investigacin de HarvestPlus o Las reglas de oro de los procedimientos que deben seguirse en la investigacin de HarvestPlus. Las Monografas Tcnicas HarvestPlus estn escritas por reconocidos expertos en la materia y son revisados externamente antes de su publicacin. Traducido al espaol por: Dayron E. Gutirrez Editado y revisado por: Marlene Rosero Pabn Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT) Protocolos de Muestreo en Cultivos para Anlisis de Micronutrientes. Washington, DC y Cali: International Food Policy Research Institute (IFPRI) y Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT). HarvestPlus Derecho de Autor, 2008 MONOGRAFA TCNICA c/o International Food Policy Research Institute 2033 K Street, NW, Washington, DC 20006-1002 USA Phone: 1-202-862-5600 Fax: 1-202-467-4439 HarvestPlus@cgiar.org Breeding Crops for Better Nutrition Notas de precaucin para evitar la contaminacin Protocolo de muestreo para sorgo Protocolo de muestreo para trigo Protocolo de muestreo de tubrculos y races Protocolo de muestreo del mijo de perla Protocolo de muestreo de arroz Protocolo de muestreo de lentejas Protocolo de muestreo de maz Protocolo de muestreo de pltano y banano Protocolo de muestreo en yuca y ame Protocolo de muestreo para caup Protocolo de muestreo para la cebada Protocolo de muestreo para frjol