LABORATORIOS HOSPITAL DR.

ABEL GILBERT PONTON

TOMA DE MUESTRAS
MUESTRAS DE SANGRE
Acudir al laboratorio en ayunas. Ayuno de 8 a 14 horas. No ingerir ni agua

No consumir alcohol 24 horas antes del examen.

No realizar ejercicio antes de la toma de la muestra. Permanecer en reposo
alrededor de 15 minutos, antes de la toma.

Si le ordenaron perfil lipdico o triglicridos y colesterol, el ayuno ha de ser
entre 12 y 24 horas y debe de tener una dieta pobre en grasas y no consumir
licor en las 72 horas antes del examen.

Para tamizaje o curvas de glicemia debe permanecer varias horas en el
laboratorio.

Para las curva de glicemia, si lleva una dieta pobre en carbohidratos (harinas y
azcar), deben aumentar el consumo tres das antes del examen (mnimo 150
gramos diarios).
MUESTRAS DE ORINA: UROCULTIVO Y CITOQUMICA DE
ORINA
Recoger la primera orina de la maana, despus de un estricto aseo genital.

Lavar las manos con agua y jabn.

Secar con gasa o toalla limpia

Comenzar a orinar descartando la primera parte de la orina, sin suspender el
chorro continuar recogiendo la muestra en el frasco entregado por el laboratorio.
Cerrarlo inmediatamente.

Llevar la muestra al laboratorio antes de una hora despus de su
recoleccin. Si esto no es posible, guardar en la nevera mientras la lleva al
laboratorio.
MUESTRA DE MATERIA FECAL
Recoger la muestra en horas de la maana, sin utilizar laxantes o aceites.

La muestra no puede estar en contacto con orina o agua.

Colocar en el frasco entregado por el laboratorio, la cantidad equivalente al
tamao de un frijol.

Llevar la muestra al laboratorio antes de dos horas, luego de su recoleccin.

Si le ordenaron sangre oculta en heces, no debe comer carnes rojas,
lentejas, frijoles 72 horas antes de recoger la muestra.


MUESTRA DE ESPUTO: Baciloscopia
Recipiente de laboratorio.

Recoger la muestra en ayunas o primera hora de la maana.

Lavar la boca solo con agua, sin utilizar cremas dentales ni enjuagues.

Respirar profundo, contener la respiracin y tratar de desgarrar , toser fuerte
hasta desgarrar el moco, depositar en el frasco y tapar inmediatamente.

Llevar al laboratorio lo antes posible.

Buena muestra: mucho moco y poca saliva.
MUESTRA DE FLUJO VAGINAL: directo y gram, Thayer Martin,
Citologa
Evitar las relaciones sexuales el mismo da de la toma de la muestra.

Presentare en el laboratorio mnimo cinco das antes o despus de la
menstruacin.

Evitar el uso de pomadas, talcos, duchas vaginales antes de realizar el examen.
Para citologa 8 das antes.

Baarse normalmente y presentarse en el laboratorio con ropa cmoda.
TENER EN CUENTA TODAS LAS RECOMENDACIONES
DE LA CALIDAD DE LA MUESTRA DEPENDE EL
RESULTADO
HEMOCULTIVOS
LABORATORIOS HOSPITAL DR. ABEL GILBERT PONTON
HEMOCULTIVOS
LA DETECCIN DE LA BACTERIEMIA Y DE LA FUNGEMIA CONSTITUYEN UNA
PRIORIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA CLNICA, DADA SU
IMPORTANCIA DIAGNSTICA Y PRONSTICA. SE ASOCIA CON UNA ELEVADA
MORTALIDAD QUE OSCILA ENTRE EL 20% -50%

BACTERIEMIA: PRESENCIA DE BACTERIAS EN EL TORRENTE SANGUNEO.
FUNGEMIA: PRESENCIA DE HONGOS EN EL TORRENTE SANGUNEO.

FOCO INFECCIOSO EXTRAVASCULAR (capilares sanguneos o vasos linfticos).
FOCO INFECCIOSO INTRAVASCULAR (endocarditis, infeccin de catteres
intravenosos o arteriales)


HEMOCULTIVOS
EL DIAGNSTICO DEFINITIVO SE CONSIGUE CUANDO SE AISLA EL
MICROORGANISMO CAUSAL EN LA SANGRE DEL ENFERMO MEDIANTE EL
CULTIVO DE ESTA.

ES TRASCENDENTE EL AISLAMIENTO DEL MICROORGANISMO EN LA
SANGRE. PODREMOS CONOCER SU SENSIBILIDAD ANTIBITICA E INSTAURAR
TRATAMIENTO O MODIFICAR EL TRATAMIENTO EMPRICO ESTABLECIDO.


INDICACIN DE LOS HEMOCULTIVOS
1. ANTES DE LA ADMINISTRACIN DE ANTIBITICOS.
2. SIEMPRE QUE EXISTA SOSPECHA CLNICA DE:
SEPSIS
MENINGITIS
OSTEOMIELITIS
PIELONEFRITIS
INFECCIN INTRAABDOMINAL
ARTRITIS
INFECCIONES GRAVES DE LA PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
NEUMONA
ENDOCARDITIS
FIEBRE DE ORIGEN DESCONOCIDO (ABSCESO OCULTO, FIEBRE TIFOIDES, BRUCELOSIS, TULAREMIA,
ETC)

SINTOMAS: FIEBRE, ESCALOFROS, LEUCOCITOSIS, GRANULOCITOPENIA, DETERIORO UNI O
MULTIORGNICO, SHOCK, COMPROMISO HEMODINAMICO DE CAUSA DESCONOCIDA.

3. EN NIOS PEQUEOS O ANCIANOS QUE PIERDEN VITALIDAD.
4. COMPLETAR EL ESTUDIO DE LA SANGRE CON EL DE OTROS FLUIDOS (LCR,
ORINA, MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR, LIQUIDO
SINOVIAL)

OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE
LA PROBABILIDAD DE QUE EL RESULTADO DE LOS HEMOCULTIVOS
POSITIVOS REPRESENTEN UNA BACTERIEMIA VERDADERA AUMENTA
CUANDO LA MUESTRA SE OBTIENE ADECUADAMENTE.

MOMENTO PTIMO: ANTES DE LA PRESENCIA DE ESCALOFROS.

LO ANTES POSIBLE UNA VEZ COMIENZA LA FIEBRE Y ESCALOFROS O
SIEMPRE QUE SE SOSPECHE INFECCIN GRAVE (BACTERIEMIAS
CONTINUAS).

BACTERIEMIAS TRANSITORIAS O INTERMITENTES: LO MS CERCA POSIBLE
AL PICO FEBRIL.


OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE
VENOPUNCIN
1. Extraccin de sangre de una vena generalmente del antebrazo.
2. La extraccin de sangre no ha de realizarse desde catteres intravenosos o
intraarteriales, salvo en casos de bacteriemia asociada a catter.
3. Cada muestra de sangre se obtendr de lugares de venopuncin diferentes.

4. Asepsia de la piel: despus de la palpacin de la vena elegida para la puncin, se
limpiar la zona con alcohol isoproplico o etlico de 70 durante 30 segundos. A
continuacin se aplicar una solucin yodada, cubriendo un rea circular de
aproximadamente 2 4 cm de dimetro. Es importante dejar actuar con su efecto
oxidante, evitando tocar con los dedos la zona, as como hablar o toser mientras se
realiza la extraccin.

5. Con una tcnica asptica correcta, el nmero de hemocultivos
contaminados no deben de exceder el 3%.
6. Se consideran microorganismos contaminantes, Staphylococcus coagulasa
negativos, bacillus spp, Corynebacterium spp, y otros que forman parte de la
microbiota de la piel, siempre que su presencia no se repita en ms de una muestra
por paciente.
OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE
EXTRACCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE

1. Limpiar los tapones de los frascos de hemocultivos con una solucin antisptica,
dejndola secar para que no penetre en el interior de los frascos (inhibe el
crecimiento de los microorganismos).
2. Se insertar la aguja en la vena extrayendo el volumen sin utilizar
anticoagulante.
3. No poner algodn ni otro material estril en la aguja al momento de sacarla de la
vena.
4. Los frascos de hemocultivo han de ser inoculados rpidamente para evitar la
coagulacin de la sangre. Primero se inocular el frasco de anaerobios y
posteriormente el aerobio.
OBTENCIN DE LA MUESTRA DE SANGRE
NMERO E INTERVALO DE LAS EXTRACCIONES
1. Una extraccin es la sangre extrada para hemocultivo por venopuncin
independientemente de los frascos inoculados (aerobio y anaerobio).
2. N ptimo de extracciones: de 2 a 3, de diferentes lugares de venopuncin.
3. Se detectan as el 95% de las bacteriemias.

VOLUMEN Y DILUCIN DE LA SANGRE
1. Volumen recomendado en adultos: 10 mL.
2. El ndice de positividad aumenta por cada ml de sangre entre 3-5%.
3. En nios y neonatos, se considera que con volmenes incluso inferiores a 1 ml
se obtienen resultados aceptables y comparables a los de los adultos. Sin
embargo se ha demostrado que la bacteriemia de bajo nivel es muy comn en la
poblacin peditrica y que el volumen de sangre debe ser proporcional al peso y
edad. Se recomienda cultivar un volumen aproximado del 4,5% del volumen
total de sangre del paciente.
4. La dilucin recomendada es de 1/5 a 1/10 (volumen/volumen). Diluciones
menores reducen la positividad.
TRANSPORTE DE LOS HEMOCULTIVOS AL
LABORATORIO
IDENTIFICACIN DEL HEMOCULTIVO
1. Datos del paciente: nombre y apellidos, n de historia clnica, servicio, planta,
cama, nombre del mdico solicitante, diagnstico de sospecha, tratamiento
antimicrobiano que recibe, tipo de cultivo (convencional o sospecha de
microorganismos de crecimiento lento), n de telfono del control de enfermera
o en caso de ser dado de alta, n de telfono donde se localice al paciente.
2. Los frascos se trasladan inmediatamente al laboratorio. Si no es posible, se
incubarn en estufa a 35-37C.
3. El tiempo mximo que pueden permanecer fuera de las estufas no debe superar
las 18 horas. Se realizar un subcultivo ciego en estos casos.
4. LOS HEMOCULTIVOS NUNCA HAN DE SER
REFRIGERADOS.
RECEPCIN Y REGISTRO DE LOS
HEMOCULTIVOS
CRITERIOS DE RECHAZO
1. No se rechaza un hemocultivos dado la importancia diagnstica que tiene, a menos
que no est identificado o los frascos estn daados o contaminados.
2. En el caso de deficiencias, se contactar con el Servicio para solucionarlas.
3. Se registrarn en el sistema informtico del Laboratorio.

NORMAS DE SEGURIDAD
1. Seguimiento de las normas de bioseguridad del Laboratorio de Microbiologa Clnica.
PROCESAMIENTO DE LOS HEMOCULTIVOS
Observacin macroscpica de crecimiento bacteriano (enturbamiento del
medio, creacin de gas, hemlisis de hemates).
La mayora de los patgenos responsables se aislan en hemocultivos entre las
18 a 72 horas siguientes al inicio de su incubacin.
Ms del 95% de los microorganismos se aislan durante la primera semana, por
lo que hay que mantenerlos en incubacin 7 das.
Castaeda en los aos 40 cre el frasco bifsico con una fase slida y otra
lquida, pudiendo realizar subcultivos sin alterar el medio (importante avance en
la deteccin de la Brucella).
Sistemas automticos: BECTON DICKINSON utiliza substratos marcados con
C, que al ser metabolizado por los microorganismos, libera CO que difunde
a la atmsfera del frasco. La lectura es automatizada. Realizan agitacin
continua de los frascos. El CO reacciona por un material fluorescente situado
en el fondo del frasco, modulando la cantidad de luz que es detectada por un
sensor. Este sistema realiza lectura de todos los frascos cada 10 minutos y
mediante un sistema de alarma detecta los frascos positivos detectados en cada
lectura. El sistema Vital (Biomerieux), incorpora un indicador fluorescente en el
medio de cultivo. Los cambios de pH, CO, potencial redox, disminuyen la
fluorescencia del indicador. Se hace lectura cada 15 minutos. Cierta dificultad en
la deteccin de levaduras.

HEMOCULTIVOS POSITIVOS
1. TCNICA DE GRAM
2. SUBCULTIVOS: AGAR SANGRE, CHOCOLATE, AGAR SANGRE ENRIQUECIDO A 35-37C EN
ATMOSFERA AEROBIA, ANAEROBIA, CON 5% DE CO, 24 EN PERIODOS DE ENTRE 24 A
48-72 HORAS.
3. ANTIBIOGRAMA PREMILIMAR.
4. INFORME DE LOS HEMOCULTIVOS NEGATIVOS.
5. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.