BioTecnologa, Ao 2012, Vol.

16 No. 3
21
El cido Poli(-glutmico): Produccin y Aplicaciones
Biomdicas
Jose A. Portilla-Arias
1
, Sebastian Muoz-Guerra
2
, Dulce Ma. Barradas-
Dermitz
1
y Ma. Guadalue A!uilar-"scan!a
1#
.
1
Instituto Tecnolgico de Veracruz, Departamento de Ingeniera Qumica y
Bioqumica-Unidad de Inestigacin y Desarrollo en !limentos "U#ID!$% !%
&iguel !% de Queedo '((), *ol% +ormando ,ogar% *-% )1./0% Veracruz, Ver%
&12ico% Tel% 34' '') )564(01 e2t% '11, +a27 34' '') )564(01 e2t% '01% 8-mail7
ga g u ila r9 it e r%e du %m 2
'
Departament d:8nginyeria Qumica, Uniersitat -olit;cnica de *atalunya,
8T<8IB%
RESUE!
-!lut$mico%, oli &Glu%, &Glu%n, &PGGA% se uede considerar una oliamida o
el nylon-' sustitu(do en el carbono ' or un !ruo carbo)ilo. *l enlace et(dico +ue se ,orma
!amma. *s roducido en la naturaleza or una e)tensa -ariedad de bacterias, se uede
sintetizar or -(a +u(mica y a tra-.s de bios(ntesis en el laboratorio en cantidades /asta de 01
!23-1. 3a e)celente biode!radabilidad y biocomatibilidad +ue resenta este biool(mero 4unto
con el /ec/o de estar ,uncionalizado, le /acen atracti-o ara alicaciones biom.dicas y
,armac.uticas de uso temoral. Sin embar!o, las di,icultades +ue entraa su modi,icaci5n
+u(mica, determinan +ue el !rado de desarrollo tecnol5!ico del PGGA sea a6n inciiente. *n
este art(culo se describe la estructura y las roiedades del PGGA, se /ace una re-isi5n de los
m.todos de s(ntesis y bios(ntesis +ue se conocen ara su rearaci5n, se resean y critican los
distintos deri-ados y modi,icaciones +u(micas +ue se /an realizado /asta el momento, con el
ob4eti-o de e)tender su uso a la ,abricaci5n de disositi-os biom.dicos de 6ltima !eneraci5n.
Pala"ras #la$e: $cido !lut$mico, $cido oli!lut$mico, biool(meros tecnol5!icos, ol(meros
biotecnol5!icos, oli.tidos, sistemas transortadores de ,$rmaco.
ABS%RA#%
-!lutamic acid%, oly &Glu%, &Glu%n, &PGGA% can be considered as a olyamide or
nylon-' 7it/ a carbo)ylic !rou substitution at carbon ' . 8/e etide bond ,ormed bet7een t/e
amino !rou and t/e !amma carbo)ylic !rou is t/e ori!in o, t/e !amma denomination. 9t is
roduced in nature by a 7ide -ariety o, bacteria. PGGA can be obtained by c/emical synt/esis
or by laboratory biosynt/esis attainin! yields u to 01 !23-1. 8/e e)cellent biode!radability and
biocomatibility dislayed by t/is innocuous bioolymer, alon! 7it/ t/e ,act o, bein!
,unctionalized, /as made it interestin! ,or temorary biomedical and /armaceutical
alications. :o7e-er, di,,iculties in c/emical modi,ication determine t/at t/e tec/nolo!ical
de-eloment o, PGGA is still inciient. 9n t/is aer, t/e structure and roerties o, PGGA are
described, and already ;no7n synt/etic and biosynt/etic met/ods ,or its rearation are
re-ie7ed. 8/e di,,erent deri-ati-es and c/emical modi,ications carried out u to date are
reorted and critically analysed 7it/ t/e aim o, e)tendin! its use to t/e manu,acture o, t/e latest
!eneration biomedical de-ices.
&ey 'ords: Glutamic acid, oly &!lutamic%, tec/nolo!ical bioolymers, biotec/nolo!ical
olymers, olyetides, dru! deli-ery systems.
(!%R)*U##(+!
3as contribuciones del traba4o con4unto
y arm5nico de cient(,icos e in!enieros est$n
!enerando nue-as soluciones a roblemas
m.dicos rele-antes -(a los
corresondientes desarrollos tecnol5!icos.
<tro /ec/o sin!ular es la acetaci5n en
Biolo!(a y Medicina de la =iencia Molecular
&>u(mica-Biol5!ica, Biolo!(a Molecular%
como base ara interretar los roblemas
de salud, y con ello la creaci5n de nue-as
,ormas ara tratar y curar en,ermedades.
*n ,orma aralela, el a-ance en
in-esti!aci5n en biomateriales /a dado
auta a resentar alternati-as tera.uticas
y de e)tensi5n de calidad de -ida.
De articular inter.s es el ael central
+ue /an tenido los biomateriales, en
esecial los biool(meros, en el desarrollo
de nue-os tratamientos durante los 6ltimos
?1 aos. 3os biool(meros son a/ora
emleados en muc/as rearaciones
biom.dicas y ,armac.uticas, 4u!ando un
ael central en disositi-os
e)tracor5reos, desde lentes de contacto
/asta riones arti,iciales, son comonentes
esenciales de imlantes, desde imlantes
-esiculares /asta marcaasos, y son la
base de la liberaci5n controlada de
,$rmacos, desde /idro!eles a
nanoart(culas.
"na estrate!ia interesante ara
desarrollar biomateriales 6tiles, es la
bios(ntesis y osterior modi,icacion +uimica
de biool(meros. *stos biool(meros
modi,icados tienen muy di-ersas
roiedades &@i!ura 1%. *l ro5sito de
este art(culo de re-isi5n es estudiar el
otencial como biomaterial del $cido
-!lut$mico% y sus deri-ados.
Biocomatibilidad
Solubilidad en
a!ua
Biopol,meros
8o)icidad nula
>umicamente
modi,icables
De!radabilidad
-ig. /. Principales $enta0as de los "iopol,meros.
3a nomenclatura 9"PA= del $cido
-!lut$mico% esA PoliBimino-1-&2-
carbo)ietil%-2-o)o-1,2-etanodiiloC, &=/emical
AbstractA PolyBimino-1-&2-carbo)yet/yl%-2-
o)o-1,2-et/anediyl% y su reresentaci5n
condensada o abre-iada en base a la
:
9"PA= y a la 9"B &10D1%A oli &Glu%, &Glu%n.
De manera in,ormal se le denomina $cido
-!lut$mico% o PGGA indicando con
ello +ue el enlace et(dico se establece
entre el !ruo amino y el !ruo carbo)ilo
<
E
#
=
=<<:
n
@i!. 2.-*structura +u(mica del $cido oli&-!lut$mico% &PGGA%.
*l PGGA es el comonente rincial
del muc(la!o conocido como natto, un
alimento tradicional 4aon.s consumido
desde tiemos ancestrales y +ue tambi.n
es conocido en =/ina como Dan-douc/i
&:ara et al., 100?%. *l FnattoG mostrado en
la @i!ura ?, !oza de !ran reconocimiento
or sus e,ectos bene,iciosos en la
asimilaci5n del calcio or el or!anismo
&8animoto et al., 2111%. *l /ec/o de +ue el
PGGA sea comestible y de inocuidad
contrastada /a incenti-ado su inter.s como
ol(mero biode!radable ara alicaciones
biom.dicas.
-ig. 1. Alimento asi$tico conocido como FEattoG cuyo rincial in!rediente es el PGGA.
ES%RU#%URA 2 PR)P(E*A*ES
*l PGGA es una oliamida modi,icada
+ue tiene la articularidad de ser
biode!radable, tener un centro asim.trico,
y or consi!uiente o,recer un abanico de
osibilidades sin recedentes en el camo
de los nylons &oliamidas% tradicionales.
3a con,ormaci5n del PGGA en
disoluci5n es ,uertemente deendiente de
la concentraci5n de ol(mero, :,
resistencia i5nica y naturaleza de la sal
aadida. Si se traba4a a concentraciones de
1.1 H I- y : suerior a D, las cadenas se
encuentran en con,ormaci5n e)tendida, en
cambio a : in,erior a ? y ara las mismas
concentraciones de ol(mero se encuentran
estructuras m$s !lobulares.
*l PGGA es un oli$cido de Ja K
2.2D, un -alor seme4ante al de los $cidos
,os,5rico y ,luoroac.tico &Jubota et al.,
1002%. *l PGGA es or tanto un
olielectrolito, udiendo encontrarse sin
ionizar cuando est$ como oli$cido &PGGA-
:% o ionizado cuando se encuentra en
,orma de sal &PGGA-Ea o PGGA-J%. 3a
solubilidad del PGGA deende del !rado
de ionizaci5n y del !rado de estructuraci5n
secundaria +ue osee. 3as rearaciones
,rescas de PGGA-: suelen ser solubles en
a!ua ero de4an de serlo cuando /an
transcurrido -arios d(asL este ,en5meno se
debe a la e)istencia de reordenaciones
moleculares y es com6n en oli.tidos y
rote(nas.
3os 6nicos disol-entes or!$nicos
conocidos a temeratura ambiente ara el
PGGA-: son el sul,5)ido de dimetilo
&DMS<% y la /e)ametilen,os,oramida
&:MPA%. *n caliente es soluble en
dimetil,ormamida &DM@% y E-
metilirrolidona &EMP% &Jubota et al.,
1002%.
*3 PGGA es una oliamida y or tanto
es suscetible a /idr5lisis +u(mica tanto en
medio $cido como en medio b$sico.
Adem$s, la resencia del se!undo !ruo
carbo)ilo aumenta la /idro,ilicidad del
ol(mero y or consi!uiente su
accesibilidad or arte del a!ua.
PES) )3E#U3AR
*l PGGA se de!rada r$idamente con
a!ua a temeraturas or encima de M1N=L a
temeraturas or deba4o de M1N= la
-elocidad de de!radaci5n disminuye
notablemente ero si!ue siendo
imortante. &Jubota et al., 100M%. As(, un
PGGA de M K 1,2O1,111 Da asa a tener
la mitad de tamao inicial cuando se de4a '
d(as en a!ua a ?DN = &Jubota et al., 100O%.
3a /idr5lisis alcalina en caliente se utiliza
como m.todo ara obtener PGGA
,ra!mentado &Jubota et al., 100M%.
P.rez-=amero et al. &1000% encontraron
+ue mediante radiaci5n or ultrasonido se
uede reducir el eso molecular y al mismo
tiemo estrec/ar la oli-disersibidad del
PGGA de bios(ntesis sin modi,icar la
constituci5n +u(mica.
Jin! et al. &2111%, identi,icaron la
enzima oli!lutamil P-/idrolasa la cual
cataliza la /idrolisis del $cido oli&P-
!lut$mico% roducido a artir de Bacillus
lic/eni,ormis 00'OA. Se encontr5 +ue la
enzima estaba ,(sicamente asociada al
ol(mero or una ,uerte interacci5n ,(sica
no co-alente y +ue se acti-aba con la
resencia de sales de Qn&99% y =a&99% &Jin!
et al., 2111%.
*n traba4o e)tenso sobre la
biode!radaci5n del PGGA se aislaron e
identi,icaron 12 esecies di,erentes de
bacterias caaces de de!radar el $cido
oli&P-!lut$mico%. Para oder -eri,icar las
osibles rutas de de!radaci5n, el
crecimiento de las bacterias se realiz5 en
distintos medios indicando +ue los
rocesos de de!radaci5n roducidos
se!u(an la misma ruta +ue el del $cido
oli&P-!lut$mico%. *n este mismo traba4o se
estudi5 de ,orma e)/austi-a la de!radaci5n
con B. lic/eni,ormis A8==00'O, lle!$ndose
a la conclusi5n +ue el mecanismo de
de!radaci5n se od(a di-idir en dos etaas.
"na rimera en la +ue /ay una
,ra!mentaci5n aleatoria con ,ormaci5n de
distintos oli!5meros, y una se!unda, en la
+ue la roorci5n de $cido !lut$mico libre
aumenta considerablemente &<erman-
Sanio et al., 2112%.
B()S4!%ES(S
Di-ersas esecies del !.nero Bacillus
resentan la caacidad de ,abricar PGGA
como roducto de secreci5n +ue o bien se
retiene en la c$sula, o lo +ue es m$s
,recuente, se e)creta al medio circundante.
8/orne et al. &10O'% realizaron un
estudio sistem$tico ara conocer los
,actores +ue a,ectan la roducci5n de P-
PGGA con B. lic/eni,ormis A8== 00'O
&@i!ura '%, y -er en +u. condiciones se
obtienen los me4ores rendimientos, los
resultados de este estudio /an sido
-alidados y actualizados recientemente
&As/iuc/i R Misono 211O%. 3os e,ectos de
la comosici5n del medio
-ig. 5. Princiales esecies roductoras de PGGAA 9z+. B. lic=eni>ormis Der. B% su?tilis%
sobre la ,ermentaci5n son los si!uientesA el
contenido en sales inor!$nicas, $cido
!lut$mico, $cido c(trico y !licerol
determinan notablemente el rendimiento,
en ausencia de $cido !lut$mico la
roducci5n de PGGA resulta ser
sensiblemente menor, el E:'=l es esencial
ara la roducci5n de PGGAL su ,unci5n
rimordial es suministrar el nitr5!eno ero
tambi.n sir-e ara mantener el : a
-alores ba4os, el J2:P<' act6a como
,uente del ,5s,oro y en su ausencia no /ay
roli,eraci5n celular, el Mn&99% rolon!a la
-iabilidad de las c.lulas e in,luye sobre la
comosici5n DI3 del PGGA. 3a adecuada
combinaci5n =a&99%-Mn&99% ermite otimizar
el rendimiento.
3a mayor(a de los rocesos
biosint.ticos de PGGA se lle-an a cabo en
condiciones aer5bicas ya +ue esta
comrobado +ue la resencia de o)(!eno
in,luye ,a-orablemente en la roducti-idad.
Seemlazar el medio aer5bico or unas
condiciones de culti-o en medio nitri,icante
suone un a/orro econ5mico +ue /a
moti-ado el estudio de la obtenci5n de
PGGA en estas condiciones.
=on la bacteria denitri,icante &B.
lic/eni,ormis A?O% se alcanz5 un
rendimiento de T.1 ! 3-1 utilizando medio
M como medio de culti-o &=/en! et
al.,10T0%. *l roducto resultante de estas
,ermentaciones no conten(a deri-ados
olisac$ridos y la relaci5n DI3 en el
ol(mero ,inal se -e(a claramente a,ectada
or el contenido de Mn&99% en el medio. "na
mayor concentraci5n de Mn&99% aumentaba
la roorci5n de $cido D-!lut$mico desde
un O1 /asta un T1H. :oensac; et al.
&211?% /an e)lorado la osibilidad de
aro-ec/ar el nitr5!eno de esti.rcol ara
obtener PGGA. Sesecto a la roducci5n a
!ran escala, los traba4os mas recientes
lle!an a alcanzar una concentraci5n de
PGGA de ?O ! 3-1 con una roducti-idad
de 1 ! 3-1 /-1. *stos -alores se consi!uen
or culti-o alimentado de B. lic/eni,ormis
en medio * &Uoon et al.,2111%.
*n los aos sesenta <mata y sus
colaboradores estudiaron con detalle la
roducci5n de PGGA en B. subtilis O*
&@i!ura '%, culti-ado en un medio salino +ue
conten(a !lucosa y $cido !lut$mico,
descubriendo +ue se roduc(a muc/o m$s
!lut$mico del +ue inicialmente se on(a en
el medio. M$s tarde encontr5 +ue se od(a
obtener /asta 1T ! 3-1 de PGGA a artir de
un medio comuesto e)clusi-amente de
urea y !lucosa &Sa7a et al., 10D1 y 10D?%.
Jubota et al. &1002% usaron en sus
traba4os B. subtilis @-2-11, el cual uede
roducir PGGA con un rendimiento de O-11
! 3-1 sin recisar +ue el $cido !lut$mico
est. resente en el medio de culti-o. *ste
medio es un roducto est$ndar constitu(do
or olietona y cantidades -ariables de
!lucosa. Eo obstante, la adici5n de $cido
!lut$mico /ace aumentar notablemente la
roducci5n de PGGA &Jubota et al., 1002%.
*stos autores /an realizado
recientemente un estudio consistente en
aadir di-ersos amino$cidos al medio y
determinar su in,luencia sobre el
rendimiento y obser-an +ue en resencia
de concentraciones de $cido 3-!lut$mico
entre D y 1O H, se lle!an a alcanzar
roducciones de PGGA entre 'O y O1 ! 3-1
&Jubota et al., 100?%. Jun! et al. &211O%
/an otimizado la roducci5n de PGGA
utilizado B. subtilis SJU?, un nue-o bacilo
+ue con un sulemento de $cido 3-
!lut$mico de 01 !I3 ermite obtener un
rendimiento m$)imo de T?.2 !I3. A
di,erencia de otros rotocolos de
roducci5n descritos re-iamente, con el B.
subtilis SJU? arece +ue la roducci5n
deende m$s de la concentraci5n de M!2V
+ue de Mn2V &Jun! et al., 211O%.
Wu y colaboradores &2111% aislaron una
nue-a cea de B. subtilis, EX-2, cuya
rincial caracter(stica es +ue no roduce
PGGA en resencia de $cido c(trico, ero si
lo /ace utilizando otras ,uentes de carbono
como !lucosa, sacarosa, maltosa, almid5n
y !licerolL en este traba4o estudiaron a ni-el
molecular las roiedades de transorte del
!lutamato en la s(ntesis de PGGA &Wu et
al., 2111%. 8/orne &10O'% ,ue el rimero en
rooner un mecanismo de bios(ntesis del
PGGA mediado or el $cido ir6-ico y
basado en la inter-enci5n de las enzimas
alanina-racemasa y de D y 3-!lutamil-
transamidasas. *n este mecanismo el
$cido Y-ceto!lut$rico 4ue!a un ael
central. 3as obser-aciones de 8roy est$n
en desacuerdo con esta interretaci5n y
su!ieren como alternati-a un roceso
basado en la ,ormaci5n de un /idro)amato
de !lutamilo &Gardner et al., 10D0%.
*l mecanismo m$s consistente con la
mayor(a de las obser-aciones /asta a/ora
descritas !ira alrededor del metabolismo de
los $cidos tricarbo)(licos c(trico e isoc(trico
&ciclo 8=A%. *ste mecanismo /a sido
elaborado or Junio;a en base a sus
estudios sobre B. subtilis 9@<???O. *l
mecanismo incorora el ciclo del ir6-ico
rouesto or 8/orne et al. &10O'% y e)lica
la ,ormaci5n de olisac$ridos a artir de la
!lucosa &@i!ura O%. :ay +ue sealar sin
embar!o +ue la roducci5n de olisac$rido
no se obser-a en la ,ermentaci5n de B.
lic/eni,ormis.
Glucosa
Ciclo de
Krebs
Acid
o
!
ce"oglu"arico
Acido #!
glu"a$ico
#!
alanina
%!alanina
N&3 Acido %!glu"a$ico
Acido 'oli(ga$$a #!glu"a$ico)
Acido poli(glutamico)
sintetas
a
-ig. 6. Suta metab5lica de obtenci5n de PGGA en B% su?tilis.
*ER(7A*)S *E3 P88A
3a esteri,icaci5n del PGGA no es una
reacci5n ,$cil de e4ecutar debido a +ue la
reacti-idad del !ruo carbo)ilo est$
atenuada or la ro)imidad de .ste a la
cadena rincial y or+ue las condiciones
de reacci5n no ueden e)tremarse sin +ue
se roduzcan descarbo)ilaciones o roturas
en la cadena olim.rica. Adem$s las
osibilidades de selecci5n del medio de
reacci5n est$n se-eramente limitadas or
la escasa solubilidad del PGGA. *n
consecuencia, la obtenci5n de
con-ersiones del 111H no es siemre
,actible, en articular cuando se trata de
introducir !ruos lar!os o -oluminosos. 3a
!ran mayor(a de los m.todos se basan en
la reacci5n del bromuro de al+uilo en
resencia de bicarbonato s5dico en un
disol-ente del PGGA, !eneralmente DMS<
o EMP.
"na ,orma de rearaci5n de Poli&Y-
al+uil- P-!lutamato%s a tra-.s de dos asosA
rimero esteri,icaci5n del PGGA ara
obtener Poli&Y-etil P-!lutamato% y
osteriormente transesteri,icaci5n de .ste
con el alco/ol adecuado en resencia de
catalizador de titanio ara obtener PAAG-n
&Mellis et al., 2111L Morillo et al., 2111%.
*ste rocedimiento es adecuado ara la
obtenci5n de .steres con !ruos al+uilos
lar!os &nZT% y su esectro de alicaci5n es
!eneral &@i!ura M%.
E
=<<:
E =
:
<
SBr
Ea:=<
?
=<<S
E =
:
<
V =<
2
V EaBr V :
2
<
-ig. 9. <btenci5n de P- oli!lutamatos de al+uilo.
P.rez-=amero et al. &2111% /an lle-ado
a cabo la rearaci5n de .steres solubles
en a!ua or transesteri,icaci5n del Poli&Y-
metil P-!lutamato% obtenido or el m.todo
del diazometano, con mono, di y
trietilen!licoles +ue tienen el /idro)ilo ,inal
blo+ueado como metil.ter.
3os comle4os i5nicos olielectrolito-
tensioacti-o constituyen un sistema de
inter.s actual or su ,acilidad de
rearaci5n y caacidad ara resentar
roiedades tales como si ,ueran
comuestos co-alentes. =ao et al. &2111%
describen la caacidad del PGGA ara
,ormar comuestos estables con roductos
de naturaleza cati5nica tales como
+uitosano o aminas cuaternarias, ero se
re,iere a ello como comle4os resultantes
de la ,ormaci5n intermolecular de uentes
de /idr5!eno y ,ormacion de ,ilms or
caas.
P.rez-=amero et al. &1000% /an
realizado un estudio e)loratorio de los
comle4os +ue ,orma el PGGA de B.
lic/eni,ormis con tensioacti-os cati5nicos
de al+uiltrimetilamonio &@i!ura D%. 3os
comle4os tienen comosici5n muy r5)ima
a la este+uiom.trica, son insolubles en
a!ua y solubles en =:=l?, y resentan
roiedades t.rmicas similares a las de los
PAAG-n.
: <
E =
-
: =<<
Me
Me
V
Me
&=:
2
%
n-1
=:
?
nA8MA[PGGA &n K 12,1',1M,1T,21,22%
-ig. :.- @5rmula +u(mica de los comle4os i5nicos y reresentaci5n de su estructura
molecular
*stos comuestos adotan una
estructura suramolecular de naturaleza
bi,$sica caracter(stica de ol(meros tio
eine, no estando claro si las cadenas
oliet(dicas se encuentran en
con,ormaci5n /elicoidal o e)tendida. 3os
comle4os nA8MA2PGGA resentan una
mor,olo!(a cristalina deendiente de la
lon!itud de la cadena lateral con te)turas
+ue -an desde la de mosaico roia de
cristales l(+uido esm.cticos &n K12% /asta
es,erul(ticas &n K22% &P.rez-=amero et al.,
1000%.
Garc(a-Al-arez et al. &211O% /an
centrado su estudio en comle4os
nA8MA2PGGA con con,i!uraci5n cercana a
la rac.mica. Al comarar con los comle4os
r$cticamente enantiomeros uros,
estudiados con anterioridad, constatan un
comortamiento similar, si bien e)isten
ciertas di,erencias en cuanto a cristalinidad
de la cadena lateral y resuesta
dimensional a la temeratura.
AP3(#A#()!ES B();*(#AS
3a mayor arte de las alicaciones
actuales del PGGA se sit6an en el sector
de la alimentaci5n. 3os desarrollos como
material ,loculante y !eli,icante est$n muy
a-anzados. Aun+ue se /an iniciado
numerosas in-esti!aciones sobre la osible
utilizaci5n del PGGA como material
biom.dico, estas alicaciones s5lo son
otenciales or el momento.
3a osibilidad de emlear PGGA en
alicaciones biom.dicas /a sido estudiada
or di,erentes autores. Al i!ual +ue la
Poli&lisina%, el $cido Poli&!lut$mico% es
soluble en a!ua, biode!radable, comestible
y no t5)ico. Por ello el PGGA /a !enerado
un inter.s creciente tanto a ni-el de
in-esti!aci5n como industrial. Su uso se /a
estudiado en $reas tales como el transorte
y liberaci5n de ,$rmacos o los bioad/esi-os
&S/i/ et al., 2111%.
3a caacidad del PGGA como
disensador de ,$rmacos y roteinas /a
sido in-esti!ada or di-ersos autores
&8a;a4ima et al. 2111%. Se /a robado en
articular el la o-oalbumina encasulada
en nanoes,eras de PGGA obser-$ndose
+ue la acti-idad del la roteina ersiste or
lar!os er(odos y +ue es moti-ada or la
/idr5lisis lenta del !ruo .ster, teniendo
una amlia alicaci5n otencial en la
liberaci5n de -acunas &A;a!i et al., 2111%.
Sun! et al.&211O% e)onen en su
traba4o de re-isi5n las m6ltiles
alicaciones del PGGA como a!ente
immuno-estimulante y anti-tumoral
esecialmente en el caso del ol(mero de
ele-ado eso molecular. *n inmunoteraia
anti-c$ncer se /an utilizado nanoart(culas
de PGGA como ortadoras de ant(!enos,
comrob$ndose +ue se incrementa la
resuesta inmune resecto a cuando .stos
se encuentran en solitario &Matsuo et al.,
211D%. *n ratones la resuesta inmune
ro-ocada or nanoart(culas de PGGA
ortadoras de ciertos ant(!enos de \9: /a
sido suerior a la ro-ocada cuando se /an
emleado nanoart(culas no-
biode!radables de oliestireno. &Wan! et
al., 211D%. 3a biode!rabilidad, no to)icidad
y roiedades re!ulatorias del sistema
inmune del PGGA de alto eso molecular
/an sido re-isadas recientemente or Poo
et al. &2111%.
*n la actualidad, la administraci5n de la
-acuna contra el bacilo del $ntra) &A\A%, la
6nica e)istente con licencia, comorta
des-enta4as considerables. *n este
sentido, se /a robado un sistema ,ormado
or PGGA casular ortador de SEA y
combinado con ciertas rote(nas +ue /an
inducido resuesta inmune en ratones
&Brian et al., 211M%.
3ian! et al. /an rearado
nanoart(culas de cool(meros en blo+ue
de PGGA-oli&lactida%. 3as art(culas con
un tamao de 1'1 nm y un otencial zeta
de -21 m\, resentan una ,orma es,.rica y
una suer,icie adecuada, tal como re-elan
las t.cnicas de microsco(a 8*M
&8ransmision *lectronic Microscoy% y
A@M &Atomic @orce Microscoy%. Se /a
e-aluado su interacci5n con determinadas
c.lulas /e$ticas cancerosas comrobando
su otencial alicaci5n en el
reconocimiento celular en teraia anti-
c$ncer &3ian! et al., 211O y 211M%.
Se /a estudiado el transorte
aracelular, en c.lulas de carcinoma
intestinal, mediante un nue-o sistema de
nanoart(culas de PGGA-+uitosano. 3os
resultados indican un incremento in -itro de
la ermeabilidad celular &3in et al., 211D%.
*studios realizados en animales in -i-o
/an re-elado +ue el iburo,eno incororado
a nano,ibras de PGGA es
si!ni,icati-amente e,ecti-o en la re-enci5n
de la ad/esi5n tisular e induce a la
cicatrizaci5n de /eridas, robablemente
debido a la /idro,ilicidad del PGGA y a sus
buenas roiedades barrera &Jo et al.,
211D%.
*n relaci5n a la absorci5n de insulina
,uncional administrada or -(a oral, se /a
comrobado +ue cuando se administra
insulina en el interior de nanoart(culas de
PGGA a ratas diab.ticas es osible la
ermeabilidad celular de dic/os
nanosomas ya +ue disminuyen los ni-eles
de !lucosa en san!re. 3os er,iles de
liberaci5n de insulina deenden en !ran
medida de los -alores de : del entorno
&3in et al., 211D%.
Por su arte, Jarma;er et al. &211D%
/an comrobado +ue la comle4aci5n del
=u2V con PGGA ori!ina comle4os cuya
estructura deende del : y e4ercen in -itro
un ael ,isiol5!ico similar al de la insulina.
3a acti-idad del PGGA-sul,onato como
,actor de crecimiento se /a comarado con
la /earina y con otros deri-ados
/earinoides, teniendo otencial alicaci5n
en in!enier(a de te4idos y en concreto en el
camo de los tratamientos -asculares. *l
an$lisis or Microsco(a de Barrido
*lectr5nico &S*M%, re-ela la asociaci5n
entre ,ibroblastos y dic/o material
&Matsusa;i et al., 211O%.
A;a!i y su !ruo de in-esti!aci5n
&211O% reararon y caracterizaron
nanoart(culas a artir de cool(meros de
in4erto de PGGA con se!mentos
/idro,5bicos del ester et(lico de la
,enilalanina, cuya alicaci5n ser(a el
transorte de ,$rmacos o rote(nas. 3as
art(culas resentaron una distribuci5n
monodisersa con tamaos entre 1O1 y
211 nm. *ste !ruo tambi.n /a e)lorado
la interacci5n PGGA-Prote(nas, ensayando
tres m.todos de con4u!aci5n rote(na-
nanoart(cula, or encasulaci5n, or
inmo-ilizaci5n co-alente y or adsorci5n.
3os resultados re-elan +ue la acti-idad
enzim$tica se -e a,ectada or el m.todo
utilizado, siendo la encasulaci5n el
m.todo 5timo &A;a!i et al., 211M%.
Portilla-Arias et al. &211D% /an reortado
el uso de los comle4os +ue ,orma el PGGA
con tensioacti-os cati5nicos de
al+uiltrimetilamonio, como disositi-os de
liberaci5n rolon!ada de ,$rmacos.
Mediante la ,abricaci5n de discos con
dic/os comle4os con e)tensi5n de cadena
de tensioacti-o de 1' y 1T $tomos de
carbono. *stos discos erosionan en masa
liberando el antibi5tico eritromicina de
,orma controlada si!uiendo una cin.tica
si!moidal indeendiente de la car!a de
eritromicina, y deendiente de la
/idro,obicidad del comle4o, siendo un
21H mas r$ida ara el comle4o mas
/idro,ilico, es decir el de 1' $tomos de
carbono.
*l mismo !ruo de in-esti!aci5n
reort5 la ,abricacion de nanoes,eras con
los .steres al+u(licos del PGGA mostrados
en la ,i!ura T. Mediante el uso del m.todo
de nano-reciitaci5n, se !eneraron
es,eras biode!radables de un di$metro
entre 211 y ?11 nm. *n estas es,eras se
encasularon mol.culas tera.uticas como
el antibi5tico eritromicina con una
e,ecti-idad de /asta el T1H y rote(nas
como la +uimotrisina +ue se liber5, en un
medio ,isiol5!ico simulado, de ,orma
controlada a la ar de la de!radaci5n
/idrol(tica del ol(mero, reteniendo su
acti-idad enzim$tica &Portilla-Arias et al.,
2110%.
-ig. <. =ool(meros del acido oli!lut$mico con cadenas al+u(licas laterales
"nos de los estudios m$s detallados
sobre tratamiento in -i-o alicando PGGA,
es el realizado or @en et al. &2111%. *n
este estudio se muestra la e,ecti-idad
antitumoral de un comle4o ,ormado or
cislatino y PGGA en ratones con un tumor
/umano de seno imlantado &@en et al.,
2111%.
RE-ERE!#(AS
A;a!i 8, :i!as/i M, Jane;o 8, Jida 8 R
A;as/i M &211M% :ydrolytic and
enzymatic de!radation o, nanoarticles
based on am/i/ilic oly&!amma-
!lutamic acid%-!ra,t-3-/enylalanine
coolymers. Biomacromolecules. DA20D-
?1?.
A;a!i 8, S/ima @ R A;as/i M &2111%
9ntracellular de!radation and distribution
o, rotein-encasulated am/i/ilic
oly&amino acid% nanoarticles.
Biomaterials. ?2A'0O0-'0MD.
As/iuc/i, M.R Misono, :. &211O% Poly-P-
!lutamic acid. A. Steinbuc/el, S.:.
Marc/essault &*ds.%, Bioolymers ,or
medical and /armaceutical
alications, \ol. 1Wiley]\=:,
Wein/eim . M10]M?'
Brian S R Q/en!ron! = &211M% Easal
immunization 7it/ a dual anti!en
ant/ra) -accine induced stron!
mucosal and systemic immune
resonses a!ainst to)ins and Bacilli.
\accine 2'A M'1O-M'1?.
=ao B,Uan S@, Q/an! JX, Son! QJ, =/en
X, =ui 3 R Uin J &2111% 3ayer-by-3ayer
Assembled Multilayer @ilms o,
Met/o)yoly&et/ylene !lycol%-bloc;-
oly&al/a,3-!lutamic acid% and
=/itosan 7it/ Seduced =ell Ad/esion.
Macromol. Biosci. 11A 1211-121D.
=/en! =, Asada U R Aida 8 &10T0%
Production o, !amma-oly!lutamic acid
by Bacillus lic/eni,ormis A?O under
denitri,yin! conditions. A!ric. Biol.
=/em. O?A 2?M0-2?DO.
@en! Q, Uuin! 3, :ai,en! U, Jin! :, Xu
GX R Qiron! W &2111% Poly &!amma,
3-!lutamic acid%-cislatin biocon4u!ate
e)/ibits otent antitumor acti-ity 7it/
lo7 to)icityA A comarati-e study 7it/
clinically used latinum deri-ati-es.
=ancer Sci. 11A2'DM-2'T2.
Garcia-Al-arez M, Al-arez JA, Alla A,
Martinez de 9larduya A, :erranz = R
Muoz-Guerra S &211O% =omb-li;e ionic
comle)es o, catonic sur,actants 7it/
bacterial oly&!-!lutamic acid% o,
racemic comosition. Macromol Biosci.
OA?1-?T.
Gardner JM R 8roy @A &10D0% =/emistry
and biosynt/esis o, t/e oly&P-D-
!lutamyl% casule in Bacillus
lic/eni,ormis. Acti-ation, racemization,
and olymerization o, !lutamic acid by a
membranous oly!lutamyl synt/etase
comle). J. Biol. =/em. 2O'A M2M2-
M2M0.
:ara 8, <!ata S R "eda S &100?% Plasmid
doistribution in !amma-oly!lutamate-
roducin! Bacillus strains isolated ,rom
Dan-douc/i a natto-li;e non-salty
,remented soybean ,ood in =/ina. J.
Gen. Al. Microbiol. ?0A DO-T2.
:oensac; A, <ermann-Sanio @B R
Steinbuc/el A &211?% =on-ersion o, t/e
nitro!en content in li+uid manure into
biomass and oly!lutamic acid by a
ne7ly isolated strain o, Bacillus
lic/eni,ormis. @*MS Micr. 3ett. 21TA ?0-
'O.
9"PA= 9nternational "nion o, Pure and
Alied =/emistry and 9"B 9nternational
"nion o, Bioc/emistry 10D1% bbre-iated
Eomenclature o, Synt/etic Polyetides
&Polimerized Amino Acids% 3ondresA
Butter7ort/s &en l(nea%. Disonible enA
/ttAII s t a!e . iu a c .o r ! I ob 4 9D I Artic l eIa c ?
?12)1'?D =onsultado el 11 A!osto
2111C
Jun! DU, Jun! S, Uun JS, Jim JE, Wee
UJ, Jan! :G R Syu :. &211O%
9n,luences o, cultural medium
comonent on t/e roduction o, oly&P-
!lutamic acid% by Bacillus s. SJU?.
Biotec/. Biorocess *n!. 11A 2T0-20O.
Jarma;er S, Sa/a J8 R Sa;urai : &211D%
9n-esti!ation o, a =u-99-oly&!amma-
!lutamic acid% comle) in a+ueous
solution and its insulin-mimetic acti-ity.
Macromol Biosci. DA 'OM-'MM.
Jin! *=, Blac;er AJ R Bu!! 8D: &2111%
*nzymatic brea;do7n o, oly-!amma-
D-!lutamic acid in Bacillus lic/eni,ormisA
9denti,ication o, a oly!lutamyl !amma-
/ydrolase enzyme. Biomacromolecules.
1A DO-T?.
Jo UG, Uoon J:, Par; =, Sun! M: R
J7on <J &211D% Prearation and
e-aluation o, oly&!amma-!lutamic
acid%-based anti-ad/esion membranes.
Jey *n!. Materials. ?'2-?'?A22O-22T.
Jubota :, Eambu U R *ndo 8 &100?%
=on-enient and +uantitati-e
esteri,ication o, oly&P-!lutamic acid%
roduced by microor!anism. J. Polym.
Sc. Part AA Polym. =/em. ?1A 2TDD-
2TDT.
Jubota :, Eambu U R *ndo 8 &100O%
=on-enient esteri,ication o, oly&P-
!lutamic acid% roduced by
microor!anism 7it/ al;yl /alides and
t/eir t/ermal roerties. J. Polym. Sc.
Part AA Polym. =/em. ??A TO-TT.
Jubota :, Eambu U R *ndo 8 &100M%
Al;aline /ydrolysis o, oly&!amma-
!lutamic acid% roduced by
microor!anism. J. Polym. Sci. Part AA
Polym. =/em. ?'A 1?'D-1?O1.
Jubota :, Matsunobu 8, "otani J, 8a;ebe
:, Sato/ A R 8ani!uc/i M &1002% 3ar!e
scale roduction o, oly&!-!lutamic
acid% by Bacillus subtillis @-2-11. Sci
Seort Mei4i Sei;a Jais/a. ?1A'1-O1.
3ian! :@, =/en =8, =/en S=, Jul;arni
AS, =/iu U3, =/en M= R Sun! :W
&211M% Paclita)el-loaded oly&!amma-
!lutamic acid%-oly&lactide%
nanoarticles as a tar!eted dru!
deli-ery system ,or t/e treatment o, li-er
cancer. Biomaterials 2DA21O1-21O0.
3ian! :@, Uan! 8@, :uan! =8, =/en M= R
Sun! :W &211O% Prearation o,
nanoarticles comosed o,
oly&!amma-!lutamic acid%-oly&lactide%
bloc; coolymers and e-aluation o,
t/eir uta;e by :eG2 cells. J. =ontrol.
Selease. 11OA 21?]2O.
3in U:, =/un! =J, =/en =8, 3ian! :@,
=/en S= R Sun! :W &211O%
Prearation o, nanoarticles comosed
o, c/itosanIoly-!ama-!lutamic acid
and e-aluation o, t/eir ermeability
t/rou!/ caco-2 cells.
Biomacromolecules. MA111']12.
3in U:, Mi @3, =/en =8, =/an! W=, Pen!
S@, 3ian! :@ R Sun! :W &211D%
Prearation and c/aracterization o,
nanoarticles s/elled 7it/ c/itosan ,or
oral insulin deli-ery.
Biomacromolecules. TA1'M-1O2.
Matsuo J, Uos/i;a7a 8, <da A, A;a!i 8,
A;as/i M, Mu;ai U, Uos/io;a U, <;ada
E R Ea;a!a7a S &211D% De-eloment
o, am/i/ilic !amma-PGA-
nanoarticle based tumor -accineA
Potential o, t/e nanoarticulate
cytosolic rotein deli-ery carrier.
Bioc/em. Bio/ys. Ses. =omm.
?MMA'1T-'1?.
Matsusa;i M R A;as/i M &211O% Eo-el
,unctional biode!radable olymer 9\A
:-Sensiti-e controlled release o,
,ibroblast !ro7t/ ,actor-2 ,rom a
oly&!amma-!lutamic acid%-sul,onate
matri) ,or tissue en!ineerin!.
Biomacromolecules. MA??O1-??OM.
Matsusa;i M, Seriza7a 8, Jis/ida A R
A;as/i M &211O% Eo-el ,unctional
biode!radable olymer 99A @ibroblast
!ro7t/ ,actor-2 acti-ities o,
oly&!amma-!lutamic acid%-sul,onate.
Biomacromolecules. MA'11-'1D.
Melis J, Morillo M, Mart^nez de 9larduya A R
Muoz-Guerra S &2111% Poly&a-al;yl-
!amma-!lutamate%s o, microbial ori!inA
9. *ster deri-atization o, oly &!amma-
!lutamic acid% and t/ermal de!radation.
Polymer. '2A0?10-0?2D.
Morillo M, Martinez de 9larduya A R Muoz-
Guerra S &2111% =ombli;e al;yl esters
o, biosynt/etic oly&!-!lutamic acid%. 1.
Synt/esis and c/aracterization.
Macromolecules. ?'ADTMT-DTDO.
<ermann-Sanio @B R Steinb_c/el A
&2112% <ccurrence, ,unctions and
biosynt/esis o, olyamides in
microor!anisms and biotec/nolo!ical
roduction. Eatur7issensc/a,ten. T0A
11-22.
Perez-=amero G, =on!re!ado @, Bou JJ R
Muoz-Guerra S &1000% Biosynt/esis
and ultrasonic de!radation o, bacterial
oly&!amma-!lutamic acid%. Biotec/.
Bioen!. M?A 111-11O.
Perez-=amero G, Garcia-Al-arez M,
Martinez de 9larduya A, @ernandez =*,
=amos 3 R Muoz-Guerra S &211'%
=ombli;e comle)es bacterial
oly&!amma,D-!lutamic acid% and
cationic sur,actants.
Biomacromolecules. OA1''-1O2.
Poo :, Par; =, J7a; MS, =/oi DW, :on!
SP, 3ee 9:, 3im U8,=/o UJ, Bae S@,
"yama :, Jim =J R Sun! M: &2111%
Ee7 biolo!ical ,unctions and
alications o, /i!/-molecular-mass
oly-!-!lutamic acid. =/em.
Biodi-ersity. DA1OOO-1OM2.
Portilla-Arias JA, =amar!o B, Garcia-
Al-arez M, Martinez de 9larduya A R
Muoz-Guerra S. &2110% Eanoarticles
made o, microbial oly&P-!lutamate%s
,or encasulation and deli-ery o, dru!s
and roteins. J. Biomat. Sci. 21A11MO-
11D0.
Portilla-Arias JA, Garcia-Al-arez M,
Martinez de 9larduya A R Muoz-Guerra
S &211D% 9onic comle)es o,
biosynt/etic olymalic and oly!lutamic
acids as rosecti-e dru! deli-ery
systems. Macromol Biosci. DATT?-T0M.
Sa7a S, Mura;a7a 8, Murao 8 R <mata S
&10D?% 9solation and uri,ication o,
oly!lutamic acid roduced by Bacillus
subtilis. Eion Eo!ei;a!a;u Jais/i. &O%
'DA 1O0-1MO.
S/i/ 93 R \an U8 &2111% 8/e roduction o,
oly-&P-!lutamic acid% ,rom
microor!anisms and its -arious
alications. Bioresour. 8ec/nol. D0A
21D]22O.
Sun! M, Par; =, Jim =J, Poo :, Soda J R
As/iuc/i M &211O% Eatural and edible
bioolymer oly-!amma-!lutamic acidA
Synt/esis, roduction, and alications.
=/emical Secord. OA?O2-?MM.
8a4ima 8, "eno S, Uabu E, Su;i!ara S R
Jo @ &2111% @abrication and
=/aracterization o, Poly-!amma-
!lutamic Acid Eano,iber. J. Al. Pol.
Sci. 122A1O1-1OT.
8animoto :, Mori M, Moto;i M, 8orii J,
Jado7a;i M R Eo!uc/i 8 &2111% Eatto
mucila!e containin! oly-!amma-
!lutamic acid increases soluble calcium
in t/e rat small intestine. Biosci.
Biotec/. Bioc/em. MOA O1M-O21.
8/orne =B, Gomez =G R Eoyes :* &10O'%
Production o, !lutamyl olyetide by
Bacillus subtilis. J. Bacteriolo!y. MTA
?1D-?1O.
Wan! X, "to 8, A;a!i 8, A;as/i M R Baba
M &211D% Poly&!amma-!lutamic acid%
nanoarticles as an e,,icient anti!en
deli-ery and ad4u-ant systemA Potential
,or an A9DS -accine. J. \irolo!y. T1A11-
10.
Wu >, Xu :, Q/an! D R <uyan! P &2111%
A Eo-el Glutamate 8ransort System in
Poly&P-Glutamic Acid%-Producin! Strain
Bacillus subtilis =GM== 1T??. Al.
Bioc/em. Biotec/nol. 1M'A1'?1-1''?.
Uoon S:, Do J:, 3ee SU R =/an! :E
&2111% Production o, oly-c-!lutamic
acid by ,ed-batc/ culture o, Bacillus
lic/eni,ormis. Biotec/nol. 3ett. 22AOTO]
OTT.
.