Tecnicas de Separacion Cromatografica

Caracterizacin de Materiales y Defectos
Tcnicas de Separacin Cromatogrfica

TCNICAS DE SEPARACIN. CROMATOGRAFA
1.- Introduccin
Cromatografa y mtodos de separacin clsicos. Separacin de
componentes de una muestra. No son tcnicas de caracterizacin
propiamente dicha
Las propiedades de los materiales dependen de los componentes y de la
proporcin existente entre ellos
No dan informacin de la naturaleza de los componentes, necesitan otros
mtodos de anlisis.
1.1.- Cromatografa y ciencia de materiales
Separacin de compuestos relacionados con la sntesis de materiales
Evaluacin de la actividad de materiales catalizadores y soportes slidos
en sntesis orgnica.
Desarrollo de nuevos materiales empleados en cromatografa
Seguimiento de una sntesis
Fco. Javier Gonzlez Benito
2.- Lugar que ocupa la cromatografa en la caracterizacin de materiales
Muestra Muestra
Hay que solubilizarla?
Es voltil?
Descompone
trmicamente?
Forma
plasma?
Otros
mtodos
Es soluble? Digestin
GAS DISOLUCIN
Hay que separar
componentes?
Cromatografa
Hay que separar
componentes?
Tcnicas y Mtodos de anlisis Tcnicas y Mtodos de anlisis
NO
NO NO
NO
NO NO
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI SI
NO
3.- La cromatografa. Conceptos y definiciones
Cromatografa: mtodo fsico de separacin
Proceso cromatogrfico
Fase estacionaria (slido, gel o lquido). Lecho cromatogrfico o sorbente
Fase ligada
Fase inmovilizada
Fase mvil (gas portador, eluyente)
Cromatografa lquida
Cormatografa de gases
Cromatografa con fluido supercrtico
Eluir
Efluente
Muestra
Componentes
Zona o banda
Cromatograma
Cromatgrafo
3.1.- Mecanismos de separacin
a) Separacin por adsorcin (cromatografa de adsorcin)
Diferente afinidad de los componentes de la muestra sobre la superficie
de un slido activo (componentes con polaridad baja o media)
b) Separacin por reparto (cromatografa de reparto)
Diferente solublidad en fases estacionaria y mvil (Componentes con
polaridad media o alta)
[ ]
[ ] ia Estacionar Fase A
mvil Fase A
K
d
= = Reparto de e Coeficient
c) Separacin por tamao molecular (Cromatografa de permeacin de gel,
de tamiz molecular o de exclusin por tamaos).
Parmetros de columna
- Intervalo de trabajo: intervalo de M que pueden ser separados
- Lmite de exclusin: M mnimo a partir del cual las macromolculas no
experimentan retencin.
Partcula polimrica (gel)
con poros
Molculas grandes
Molculas pequeas
Pared de columna
cromatogrfica
Disolvente
F
l
u
j
o
d
e
l

d
i
s
o
l
v
e
n
t
e
Las molculas pequeas penetran en los poros
de las partculas de gel, por lo que necesitan
ms tiempo para salir al final de la columna. Las
molculas grandes, en cambio, al no penetrar
en las partculas de gel se mueven con el
disolvente a una velocidad mayor de elucin y
salen antes de la columna. Por tanto, a mayor
masa molecular menor tiempo de elucin. Este
mtodo permite separar por tamaos
moleculares siendo posible obtener incluso
distribuciones de masas moleculares a distintos
tiempos de elucin.
Una separacin puede estar basada en la conjuncin de diversos
mecanismos
d) Separacin por Intercambio inico
La separacin se basa principalmente en la diferente afinidad para el
intercambio de iones de los componentes de la muestra.
+
Partculas slidas (matriz)
cargada positivamente
Especies negativas
Especies positivas
Pared de columna
cromatogrfica
Disolvente
F
l
u
j
o
d
e
l

d
i
s
o
l
v
e
n
t
e
+
+
+
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
+
-
-
-
+
-
+
-
-
Las especies cargadas negativamente se unen a la
matriz slida cargada positivamente y son
retenidas, mientras que las especies positivas son
rechazadas. De esta manera en funcin de la
carga las especies se eluyen a distintos tiempos
dando lugar a la correspondiente separacin.
La elucin de las especies retenidas se consigue
cambiando el pH del disolvente hasta igualarlo a su
punto isoelctrico o hasta invertir su carga neta.
3.2.- Mtodos de anlisis cromatogrfico
a) Anlisis por desarrollo (cromatografa en papel o capa fina)
b) Anlisis por elucin (cromatografa de gases, cromatografa lquida)
c) Anlisis frontal
d) Anlisis por desplazamiento
ANLISIS POR DESARROLLO
F
a
s
e
M
v
i
l
Cromatografa plana
F
a
s
e
m
v
i
l
Cromatografa en columna
Muestra Fase Mvil
S
o
r
b
e
n
t
e
Placa Porosa
Efluente
Anlisis por elucin
Volumen de fase mvil
Cromatograma
Fase Mvil
Con la muestra A+B+C
A
Placa Porosa
Efluente
A+B
A+B+C
Volumen de fase mvil
Cromatograma
A
A
+
B
A
+
B
+
C
Anlisis frontal
3.3.- Clasificacin de acuerdo con la forma del lecho cromatogrfico
a) Cromatografa en columna
- Columna empaquetada
- Columna tubular abierta
b) Cromatografa plana (o de lecho abierto)
- Cromatografa en papel
- Cromatografa en capa fina (TLC)
3.4.- Clasificacin de acuerdo con el estado fsico de la fase mvil
a) Tcnicas cromatogrficas
- GLC
- GSC
- LLC
- LSC
b) Cromatografa de gases (siempre en columna)
c) Cromatografa Lquida (en columna o sobre plano)
- Cromatografa Lquida de Alta Eficacia o de Alta Presin, HPLC
d) Cromatografa con fluido supercrtico
3.5.- Tcnicas especiales
a) Cromatografa con fase invertida
b) Cromatografa con fase normal
c) Anlisis isocrtico (composicin F. mvil constante)
d) Elucin con gradiente (Composicin F. mvil cambia de forma
continua)
e) Elucin en etapas o escalonada (Composicin F. mvil cambia de
forma escalonada)
f) Cromatografa bidimensional (etapas adicionales de separacin)
3.6.- Parmetros bsicos en cromatografa
a) Retencin = capacidad real de la fase estacionaria para retardar la
salida de un componente.
- si caudal constante v t
- t
M
= tiempo muerto
- t
R
= tiempo de retencin
- t
R
= tiempo de retencin corregido = t
R
- t
M
Figura tomada de:
-ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA,
T. y SERRATOSA, J.M.: "Introduccin a la
ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
b) Factor de capacidad (retencin de un compuesto con independencia del
caudal)
c) Dispersin de bandas
M
M R
M
R
t
t t
t
t
K

= =
'
'
Parmetros caractersticos
de un pico gaussiano
Figura tomada de:
d) Eficacia
- Nmero de platos tericos
2
R
t
n
2
16

=
b
R
W
t
n
2
545 . 5

=
h
R
W
t
n
-Altura equivalente de un plato terico = L/n
(Para comparar columnas de diferente
longitud)
Debe evitarse el ensanchamiento de
bandas. Dependen de caractersticas de
columna, velocidad de fase mvil, etc.
Figura tomada de:
e) Separacin y resolucin
- Retencin relativa
- Resolucin
1
2
'
'
R
R
t
t
=
2 1
2
b b
s
W W
t
R
+
=
Eficacia de columna
Sistema cromatogrfico
Figura tomada de:
4.- Tcnicas cromatogrficas no instrumentales
4.1.- Cromatografa en columna
El gradiente de presin necesario para el
desplazamiento de la fase mvil a travs
de la fase estacionaria se origina por
gravedad.
Figura tomada de:
4.2.- Cromatografa en capa fina
La elucin se consigue por el movimiento capilar ascendente de la fase mvil
a) aplicaciones analticas
b) aplicaciones preparativas
y
Aplicacin
Frente del disolvente
x
y
R
f
= == =
x
x
Aplicacin
Frente del disolvente
x
y
R
x
= == =
x
y
Sustancia patrn
5.- Mtodos instrumentales en cromatografa
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-Lquido)
Distribucin de un componente entre una fase mvil
gaseosa y una lquida inmovilizada sobre la superficie
de un slido inerte.
Componentes bsicos
- Gas portador segn detector (He, Ar, N
2
, CO
2
, H
2
)
- Sistema de inyeccin de muestra
- Columnas
Control de caudal
Medidor de caudal
Figura tomada de:
5.- Tcnicas instrumentales en cromatografa
Mejora de un cromatograma por
programacin de temperatura en
columna
Figura tomada de:
Detectores
CARACTERSTICAS DEL DETECTOR IDEAL
Adecuada sensibilidad
Buena estabilidad y reproducibilidad
Una respuesta lineal para los componentes que se extienda a
varios rdenes de magnitud
Intervalo trmico de trabajo (25 400)C
Un tiempo de respuesta corto que lo haga independiente del
caudal
Alta fiabilidad y manejo sencillo
Respuesta semejante para todos los componentes
No destructivo
5.1.- Cromatografa de gases (Gas-
Lquido)
Detectores
DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA
- Componente + H
2
/aire + encendido
elctrico iones + e
-
Diferencia de potencial entre extremo de
quemador y electrodo colector (se mide la
corriente que pasa a su travs)
- Iones producidos n tomos de carbono
sensible a masa
- C-OH; -C=O; -X; -NH
2
generan
pocos iones
- Insensible a: H
2
O; CO
2
; SO
2
y NO
x
-Detector de los ms utilizados para el
anlisis de compuestos orgnicos
+
-
H
2
Aire
Efluente de
la columna
Detectores
DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA
- Cambios de conductividad trmica del gas portador por la presencia de analito.
- Sensor = hilo de Pt, Au W calentado (a potencia elctrica cte) cuya T depende
del gas circundante (su R cambia)
- Caractersticas:
* Simple
* Amplio rango dinmico lineal (~ 10
5
)
* Respuesta universal (especies orgnicas e
inorgnicas)
* Carcter no destructivo
* Sensibilidad relativamente baja (~ 10
-8
g de soluto/ml
de gas portador)
Detectores
DETECTOR TERMOINICO
- Detector selectivo de compuestos orgnicos con P y N.
- Efluente + H
2
+ llama gas caliente + bola de silicato de rubidio caliente
(a 180V respecto colector)
Iones Plasma (600 800C)

Detectores
DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES
- Detector selectivo de halgenos, perxidos, quinonas y grupos nitro.
- Efluente + emisor iones (gas portador) + rfaga de electrones
Corriente constante que vara en presencia de molculas capturadoras de e

-
DETECTOR DE EMISIN ATMICA
plasma de He que atomiza y excita el efluente espectros de
emisin
Mtodos acoplados
- GC/Espectrometra de masas
- GC/espectroscopa IR
5.2.- Cromatografa de gases (Gas-Slido)
H
2
S; CS
2
; NO
x
; CO; CO
2
; gases nobles
(no se retienen en columnas Gas/Lquido)
5.- Tcnicas instrumentales en cromatografa
5.3.- Cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC)
- Alta sensibilidad
- Adaptacin a determinaciones cuantitativas
- Separacin de especies no voltiles
- Separacin de especies termolbiles
5.3.- Cromatografa de lquidos de alta resolucin
Instrumentacin para la cromatografa de lquidos
- Recipientes para la fase mvil y sistemas para el tratamiento de disolventes
(eliminacin de O
2
y N
2
)
- Filtracin de disolventes
- Sistemas de bombeo
- Sistemas de inyeccin de muestra
- Columnas
- Precolumnas
-Termostatos
- Detectores: i) responden a propiedad de fase mvil; ii) responden a
propiedad del soluto.
5.3.- Cromatografa de lquidos de alta resolucin
Instrumentacin para la cromatografa de lquidos
Figura tomada de:
6.- Bibliografa
D.A. Skoog, J.J. Leary, Anlisis Instrumental, McGraw-Hill, Madrid (1996)
H.H. Willard, L.L. Merritt Jr.,J.A. Dean, F.A. Settle Jr., Mtodos Instrumentales de anlisis,
Grupo Editorial Iberoamericana S.A. de C.V., Mxico (1991).
TECHNIQUES in liquid chromatography Simpson, Colin F. John Wiley & Sons (1984).
Liquid chromatography column theory Scott, Raymond P.W. John Wiley & Sons (1992).
Chromatography of polymers : characterization by SEC and FFF American Chemical Society
(1993).
Handbook of size exclusion chromatography Marcel Dekker (1995).
Cromatografa de exclusin por tamaos [Vdeo] Prez Dorado, Angel, CEMAV, Universidad
Nacional de Educacin a Distancia (1997).
Manual de cromatografa Loro Ferrer, Juan Francisco Gobierno de Canarias, Direccin
General de Universidades e Investigacin (2001).
7.- Direcciones URL tiles
http://www.uib.es/depart/dqu/dquo/pau/Cromatograf%92a/chrom10/chrom/GC/concept/
main.htm
http://www.relaq.mx/RLQ/tutoriales/cromatografia/Gas.htm

Tecnicas de Separacion Cromatografica

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Tecnicas de Separacion Cromatografica

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Caracterizacin de Materiales y Defectos

Tcnicas de Separacin Cromatogrfica

Iones Plasma (600 800C)

Corriente constante que vara en presencia de molculas capturadoras de e

También podría gustarte