Manual de Practica de Bioquimica PDF

UNIVE UNIVE UNIVE UNIVERSIDAD AUTNOMA RSIDAD AUTNOMA RSIDAD AUTNOMA RSIDAD AUTNOMA
BENITO JUAREZ DE OAXACA BENITO JUAREZ DE OAXACA BENITO JUAREZ DE OAXACA BENITO JUAREZ DE OAXACA
ESCUELA DE VETERINARIA Y ZOOTECNIA ESCUELA DE VETERINARIA Y ZOOTECNIA ESCUELA DE VETERINARIA Y ZOOTECNIA ESCUELA DE VETERINARIA Y ZOOTECNIA

ASIGNATURA: ASIGNATURA: ASIGNATURA: ASIGNATURA: LABORATORIO DE BIOQUMICA Y BIOLOGA CELULAR
RESPONSABLE(S): RESPONSABLE(S): RESPONSABLE(S): RESPONSABLE(S): ME. JORGE GONZLEZ ALCANTARA

NDICE
INTRODUCCIN

PRCTICA 1 Conocimiento del instrumental y equipo de laboratorio

Prctica 2 Prueba De Fehling: Glcidos Con Poder Reductor

Practica 3 Hidrolisis De La Sacarosa

Prctica 4 Deteccin De Polisacridos (Almidn)

Practica 5 Prueba De Molish

Practica 6 Prueba Xanto-proteica

Practica 7 Saponificacin

Prctica 8 Tincin de lpidos

Practica 9 Solubilidad De Los Lpidos

Practica 10 Enzimas: accin de la catalasa

Practica 11 Titulacin



PRCTICA 1
Conocimiento del instrumental y equipo de laboratorio
Objetivo: Conocer el instrumental y equipo de laboratorio por medio de su uso prctico con actividades
de medicin
Fundamento: En el laboratorio de Bioqumica se hace uso de una serie de instrumentos de vidrio y
plstico que resultan de verdadera utilidad para el clnico ya que durante su preparacin para mdicos se
requiere del uso preciso de estos instrumentos en diferentes actividades de su actividad clnica. As
mismo el equipo bsico en un laboratorio de bioqumica como son los potencimetros, las balanzas
analticas, los espectrofotmetros, las centrifugadoras, etc. Constituyen un referente imprescindible en
los estudios clnicos que les permiten diagnosticar enfermedades.
Materiales:
Tubos de ensayo Probetas
Gradilla Matraces Erlen Meyer
Pipetas graduadas Vasos de precipitado
Pro-pipetas Potencio-metro
Bao Mara balanza analtica
Cinta adhesiva Centrifugadora

Procedimiento:
1. Colocar en las mesas de trabajo los instrumentales de vidrio mencionados anteriormente, una
piseta con agua destila y un recipiente conteniendo agua coloreada con sufato de cobre
2. Medir diferentes volmenes con la pipeta y verterlos en cada uno de los instrumentales de vidrio
mencionados (de manera individual y por equipo)
3. Tomar 3 mililitros de solucin de sulfato de cobre y verter en un Matraz.
4. Agregar 5 mililitros, luego 7, luego y contar el volumen final
5. Efectuar el pipeteo con la boca para el agua y las soluciones con la perilla
6. Hacer mediciones con todo el instrumental de vidrio



7. Observar la centrifugacin de leche realizada por el profesor.
8. Realizar la centrifugacin por los alumnos.
9. Medir la absorbancia y la transmitancia de una muestra de Fehling relizada por el profesor
10. Medir el PH con el potenciometroa a tres muestras diferentes.
11. Registrar resultados

Prctica 2
Prueba De Fehling: Glcidos Con Poder Reductor
Objetivo: Identificar carbohidratos por medio de la tcnica de Fehling asociada a su poder reductor



Fundamento:
Todos los monosacridos y los disacridos con enlace mono-carbonilo, cuando se encuentran en solucin a
pH alcalino, tienen la capacidad de reducir otros compuestos. Esta capacidad reside en las caractersticas
del grupo carbonilo (C anomrico en formas cicladas) libre. Esta propiedad, y por tanto, la presencia de un
azcar reductor, se ponen de manifiesto mediante la reaccin de FEHLING.
El reactivo de Fehling consta de:
-Fehling A: CuSO
4
disuelto en H
2
O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua

Fundamento de la reaccin:
En medio alcalino, el cobre procedente del CuSO
4
se encuentra en forma de hidrxido cprico, y se
forma la correspondiente sal Na
2
SO
4
. Cuando el Cu(OH)
2
(de color azul) se calienta en presencia de un
compuesto reductor se forma xido cuproso (de color rojo ladrillo).

Si hay un compuesto reductor, el Cu cambia su estado de oxidacin de (2+ a 1+), lo que se evidencia
por el cambio de color.
Materiales:
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipetas graduadas
Propipetas
Bao Mara
Reactivos:
Solucin de Fehling A y B
Presentacin en polvo de glucosa,
maltosa y sacarosa.
Almidn en polvo
CuSO
4
Cu(OH) (azul)
2
Cu O (rojo ladrillo)
2
NaOH
+Calor
+R



Procedimiento:
12. Preparar mezclas de los distintos carbohidratos (excepto el almidn) calculando la molaridad
de cada solucin al .5 molar.
13. De cada una de las soluciones tomar 3 mililitros y colocarlos en un tubo de ensayo.
14. Etiquetar cada una de las muestras.
15. Aadir 2 mililitros de la solucin de Fehling a (contiene CuSO
4
) y un mililitro de Fehling b
(contiene NaOH).
16. Observar las muestras sin homogenizar.
17. Homogenizar las mezclas.
18. Observar la forma de las soluciones ya homogenizadas.
19. Depositar cada una de las muestras en el bao Mara con agua previamente calentada.
20. Mantener en calor los tubos hasta que se produzca un viraje en el color de las muestras.
21. Observar el resultado.
22. Registrar resultados
Resultados

Secarosa despues de la aplicacin de calor

Muestra de glucosa y Fehling despues de
aplicar calor



Muestra de maltosa y fehling despues de la
aplicacin de calor.

Se muestra el color rojo ladrillo (Positivo)
Fotografa comparativa de las 3 muestras

Cuadro 1,0.- comparacin entre el color de la solucin al entrar en contacto con el Fehling a-b

Carbohidrato

Solucin + Fehling A
(CuSO
4)

Solucin + Fehling B
(NaOH)

Glucosa

No presenta un gran cambio
visual, la solucin se torna de un
azul tenue, que es identificable,
pero no fuerte.

Al entrar en contacto con la
solucin la torna de un azul ms
intenso, al grado de un azul
marino que es ms fuerte

Maltosa

La solucin se torna de un azul
dbil.

La solucin obtiene una
coloracin azul marino



Sacarosa
Se presenta un viraje de
transparente a azul cielo que se
encuentra bastante diluido.
Se percibe un viraje de un azul
diluido a un azul ms obscuro
cuando el Fehling b entra en
contacto con la solucin.

Cuadro 1,1.- comparacin entre indica el color de las muestras antes y despus del bao Mara.

Carbohidrato

Color de la muestra +Fehling(a y
b) sin aplicacin de -

Color de la muestra despus de
la aplicacin de -

Glucosa

Azul marino
La muestra presenta un rojo
anaranjado con regiones
verdosas

Maltosa

Azul marino
La solucin posee una coloracin
rojo ladrillo con tonos caf
claros

Sacarosa

Azul marino
La solucin no presento cambio
alguno en presencia de calor y
la muestra conservo una
tonalidad azul marino

Conclusiones

Podemos concluir ahora, que cuando el Cu(OH)
2
(de color azul) se calienta en presencia de un
compuesto reductor se forma xido cuproso (de color rojo ladrillo); por esta razn la glucosa y la maltosa,
que son azcares reductores presentan un viraje de coloracin al someterlos a calentamiento; hecho que
no se presenta en la sacarosa por ser, claro est, un azcar no reductor.



Practica 3
Hidrolisis De La Sacarosa
Objetivo: Inducir la hidrlisis de la sacarosa para su identificacin con la tcnica de Fehling
Fundamento:
La sacarosa es un disacrido que no posee carbonos anomricos libres por lo que carece de poder
reductor y la reaccin con el licor de Fehling es negativa, tal y como ha quedado demostrado en el
experimento 1. Sin embargo, en presencia de HCl y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir, incorpora
una molcula de agua y se descompone en los monosacridos que la forman, glucosa y fructosa, que s son
reductores.
Materiales:
Tubo de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada



Pro-pipetas
Cinta adhesiva
Bolgrafo
Bao Mara
Reactivos:
HCl
Fehling a(CuSO
4
)
Fehling b(NaOH)
Agua
Solucin de sacarosa al .5 molar(de la
practica anterior)
Procedimiento:
1. Tomar 3 mililitros de la solucin de sacarosa y depositarlos en un tubo de ensayo.
2. Etiquetar la muestra.
3. Agregar a la sacarosa 10 gotas de HCl
4. Observar y anotar las caractersticas de la muestra.
5. Calentar a bao Mara la solucin de sacarosa y HCl durante 5 minutos.
6. Dejar enfriar.
7. Neutralizar aadiendo 3 ml. De NaOH (solucin alcalina, para este experimento se puede
utilizar Fehling b).
8. Llevar a cabo la prueba de Fehling a la muestra de sacarosa.
9. Observar y anotar las caractersticas de la muestra.
10. Elaborar un cuadro comparativo y registrar los resultados.
Resultados



Muestras siendo sometidas a calor en bao
maria

Aspecto de las muestras al agregar fehlin y
antes de la aplicacin de calore

Secarosa despues de la aplicacin de calor

Muestra de glucosa y Fehling despues de
aplicar calor

Muestra de maltosa y fehling despues de la
aplicacin de calor.

Fotografa en la que se pueden apreciar las dos
fases que presentan las muestras que viraron




Cuadro 2,0.- observaciones en la muestra en las 3 primeras etapas del proceso.

Carbohidrato

Forma de la muestra +
HCl

Forma de la muestra + hcl+

Color de la muestra +
fehling a y b

Sacarosa

Posee una apariencia
aceitosa, que incluye
pequeos hilos
visibles a contraluz

El calor parece haber
homogenizado la muestra,
es transparente, uniforme
Se ha tornado de un
color azul cielo, con
una tonalidad que es
ms parecida al azul
pastel, pero se logran
identificar 2 fases en la
solucin

Cuadro 2.1.-comparacion entre el color de las muestras antes y despus del bao mara.

Carbohidrato

Color de la muestra + Fehling(a y
b) sin aplicar

Color de la muestra despus de
la aplicacin de

Sacarosa

Color azul cielo
Presenta una coloracin rojo-
anaranjado, con zonas verdosas.



Conclusiones

Se hidroliz la sacarosa con HCl y con la aplicacin de calor para descomponerla en sus dos
monosacridos componentes; despus se neutraliz y se aplico la prueba de Fehling, (cuya reaccin ya fue
descrita con anterioridad), y he aqu el fruto de nuestra labor Nuestra solucin, presento el viraje de
coloracin que indica la presencia de azcares reductores; con lo que pudimos comprobar
satisfactoriamente el fundamento inicial.

Prctica 4
Deteccin De Polisacridos (Almidn)
Objetivo: Identificacin de polisacridos por hidrlisis del almidn
Fundamento:
En solucin acuosa de almidn, la amilasa forma estructuras helicoidales lineales (amilosa) y la
amilo-pectina ramificadas, gracias a la formacin de puentes de H entre los grupos OH de la glucosa y las
molculas de H
2
O. Si a una disolucin de almidn de le aade yodo, esta toma un color azul intenso. Esta
caracterstica es especfica del almidn, debido a su estructura, y se debe a la adsorcin del yodo por las
cadenas helicoidales, especialmente de la amilasa. Por tanto no es una reaccin qumica, sino una
interaccin fsica reversible por mtodos fsicos. Esto se puede comprobar fcilmente, pues al calentar la
mezcla, el color azul desaparece, y al enfriarla vuelve a aparecer.

Materiales: 2 Tubos de ensayo



Gradilla
Bao Mara
Pipeta graduada
Cinta adhesiva
Bolgrafo
Reactivos:
Fehling A y B
Almidn
Procedimiento:
1. Colocar en un tubo de ensayo 3 mililitros de la solucin de almidn.
2. Aadir 1 ml. de la solucin de Fehling A y B
3. Observar y anotar los resultados.
4. En dos tubos de ensayo verter 3 mililitros de almidn y agregar 1 mililitros de saliva.
5. Someter una de las muestras a bao Mara durante un lapso de 5 minutos.
6. Terminado el tiempo de calentamiento extraer la muestra y dejar enfriar.
7. A ambas muestras aplicar el mtodo de fehling.
8. Observar y registrar los resultados obtenidos.
Cuadro 3,0.-comparacion en el comportamiento de la muestra tomando como diferencial al calor.

Muestra

Almidn + saliva sin aplicacin
de -

Almidon + saliva sometida a -

Prueba de Fehling

La muestra presenta agregados
en varias zonas de la muestra, se
alcanza a notar la presencia de la
saliva ,la cual queda dividida en
dos fases, en este caso, la saliva
se encuentra en la parte superior
y va diluyendo hacia la
inferioridad del tubo, aunque la
presencia de amilasas salivales
ayudaron a romper algunos
enlaces dentro del almidonan fue
lo suficiente como para separar
Al entrar en contacto el fehling a-
b
Con la muestra de almidn esta
tomo una coloracin verde
limoneno la cual se puede
diferenciar la formacin de fases
dentro de la muestra del tubo de
ensayo, las fases se distinguan
por la tonalidades en diferentes
partes de la muestra, las cuales se
encontraban estratificadas, efecto
el cual, facilitaba su percepcin,



por completo la muestra, no se
alcanzo a percibir gran efecto del
fehling en la muestra, la cual
tomo una coloracin azul pastel
clara.
aunque se incluan tambin zonas
que posean tonos rojizos o
anaranjados. Lo que indica una
separacin parcial del
carbohidrato amilasa.

Practica 5
Prueba De Molish
Objetivo: Identificar carbohidratos por medio de la Tcnica de Molish
Fundamento:
La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reaccin de Molish, que
a cierto punto es la reaccin universal para cualquier carbohidrato.
Se basa en la accin hidrolizante y deshidratante del cido sulfrico sobre los hidratos de carbono.
En dicha reaccin el cido sulfrico cataliza la hidrlisis de los enlaces glucosdicos de la muestra y la
deshidratacin a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las hexosas).
Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molish (reaccin de Molish) dando un
producto coloreado.

Materiales:
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada
Propipetas
Cinta adhesiva
Reactivos:



Naftol al 5% con alcohol(reactivo de
Molish)
H
2
so
4
concentrado
Leche entera
Procedimiento:
1. En un tubo de ensayo, depositar 2 mililitros de la muestra a ensayar.
2. Rotular la muestra.
3. Agregar 2 gotas del reactivo de Molish y mezclar bien.
4. Observar y registrar la coloracin de la muestra.
5. Inclinar el tubo y con mucho cuidado agregar 2 mililitros de h
2
so
4
concentrado deslizndolo
por la pared del tubo.
6. No agitar.
7. Observar y registrar los resultados.
Resultados

Muestra positiv a la prueba de Molish

Fotografa en la que se puede observar el anillo
color violeta entre dos fases



Cuadro 4,0.-caracteristicas de la muestra con la
aplicacin de reactivo de Molish y acido
sulfrico

Muestra

Muestra +
reactivo de
Molish(naftol al
5% con alcohol)

Muestra +
Molish+h
2
so
4

Leche

La muestra
toma una
coloracin caf
claro, que se va
diluyendo
conforme se
homogeniza la
muestra.
Conforme se va
integrado el
acido sulfrico,
la muestra se va
calentando y
separando fases
en la solucin,
al final podemos
distinguir un
anillo color
violeta obscuro
que se
encuentra
flotando entre
dos fases en la
muestra de
leche.



Practica 6
Prueba Xanto-proteica
Objetivo: Identificar protenas por medio de la
Prueba Xanto proteica en muestras de origen
animal
Fundamento:
Esta reaccin se debe a la presencia en la
molcula proteica de grupos fenilos (-C6H5), con
el cual el cido ntrico forma compuestos
nitrados amarillos. Los complejos de la molcula
proteica de importancia en esta reaccin son los
de tirosina y triptfano. La fenilalanina no
responde a este ensayo en las condiciones en
que se ha desarrollado. La reaccin no es
satisfactoria para el examen de orina debido al
color amarillo de la reaccin final.
Materiales:
Tubo de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada
Propipetas
Cinta adhesiva
Bolgrafo

Reactivos:
HNO
3
concentrado
Leche
Huevos
Carne

Procedimiento:
1. Verter en un tubo de ensayo 2 mililitros de aceite de oliva.
2. Rotular la muestra.
3. Agregar un mililitro de acido ntrico concentrado.
4. Observar la reaccin que se lleva a cabo en la muestra.
5. Registrar los cambios que hayan sucedido.

Resultados



Cuadro 5,0.-caracteristicas de la muestra antes y despus de la aplicacin de HNO
3

Muestra

Caractersticas de la
muestra

Muestra + hno
3
en el
instante

Muestra + HNO
3
despus de un tiempo

Leche

Es viscosa, amarilla, pero
transparente.
Cuando la muestra entra
en contacto con el HNO
3

se libera calor, el cual se
puede sentir al tocar la
parte inferior del tubo
de ensayo, toma una
coloracin amarilla,
pero ms fuerte.
Se puede percibir calor
todava, en el interior del
tubo parece haber una
masa de apariencia
cremosa, nadando en un
lquido amarillo.

Conclusiones
Con esta prctica pudimos comprobar nuestro fundamento inicial que postula que la nitracin del anillo
bencnico presente en los aminocidos tirosina, fenilalanina y triptofano, da lugar a nitrocompuestos de
color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio fuertemente alcalino (formacin del cido pirmico o
trinitrofenol).
Practica 7
Saponificacin



Objetivo: Identificar lpidos por medio de la propiedad de saponificacin en presencia de un agente alcalino
Fundamento:
La presencia de un lpido se puede detectar fcilmente por su insolubilidad en agua. Adems, se
puede detectar si un lpido es saponificable, mediante la reaccin de saponificacin, o formacin de jabn.
Los esteres de cidos grasos sufren hidrlisis en presencia de un agente alcalino. Esta hidrlisis
conduce a la liberacin del alcohol y a la formacin de sales de cido graso o jabones:

Materiales:
Tubo de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada
Propipetas
Cinta adhesiva
Bao Mara
Balanza granataria
Reactivos:
Hidrxido de sodio
Agua
Aceite de oliva

Procedimiento:
1. Calcular la cantidad de naoh+h
2
0 para una solucin bsica al 20%.
2. En un tubo de ensayo, verter 2 mililitros de aceite de oliva.
3. Agregar a la muestra 2 ml. De NaOH al 20%.
4. Observar la forma de la muestra.
5. Agitar enrgicamente la muestra.
CH
2
O CO R
3
CH
2
CH
O CO R
1
O CO R
2
+ 3NaOH
CH
2
OH
CH
2
OH
CHOH
R COO-Na
1
R COO-Na
2
R COO-Na
3
+
Triglicrido Glicerina
Sales sdicas de
ac. grasos (JABN)



6. Observar la forma de la muestra.
7. Colocar el tubo de ensayo en el bao Mara con agua previamente calentada, durante un lapso de
20 a 30 minutos.
8. Pasado el tiempo, extraer el tubo con mucho cuidado y observar el resultado final
9. Registrar las observaciones y resultado
Cuadro 6,0.- forma de la muestra en los tres primero pasos del la tcnica.

Lpido

Forma De La Muestra
Sin Naoh

Forma De La Muestra +
Naoh

Forma De La Muestra Ya
Homogenizada

Aceite De Oliva

Viscosa, amarillenta
Se pueden observar 2
fases, una de NaOH y
otra de aceite
Posee una apariencia
cremosa

Cuadro 6.1.- apariencia de la muestra antes y despus de calentar a bao Mara.

Lpido

Apariencia De La Muestra Antes
De Calentar

Apariencia De La Muestra
Despus De Calentar

Aceite De Oliva

Cremosa
Se distinguen tres fases en la
muestra,

Conclusiones

Con la realizacin de esta prctica hemos podido observar una de sus principales propiedades, la
saponificacin. Comprobamos lo mencionado en nuestro fundamento inicial, que postula que las grasas se
descomponen al reaccionar con el hidrxido sdico y potsico descomponindose en los dos elementos que
la forman: glicerina y cidos grasos, mismos que se combinan con los iones sodio y potasio para dar
jabones, que son, ni ms ni menos que las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos.



Prctica 8
Tincin de lpidos
Objetivo: Identificacin de lpidos a partir de muestras de origen animal y vegetal por medio de la tcnica
del sudn III
Fundamento:
El colorante sudan se emplea disuelto en un solvente orgnico en el cual los lpidos sean
relativamente insolubles, y en el que tambin el colorante sea solo parcialmente soluble. Adems, el
colorante debe ser ms soluble en lpidos que en el solvente, puesto que la coloracin tiene lugar porque
las molculas del colorante se distribuyen entre los lpidos y el solvente en relacin con su solubilidad en
ambos.
Los colorantes sudan tien fuertemente los triglicridos.

Materiales:
2 tubos de ensayo
Gradilla
Cinta adhesiva
Bolgrafo
Reactivos:
Sudan III en frasco gotero
Azul de metileno en frasco gotero

Procedimiento:
1. En una gradilla colocar 2 tubos de ensayo.
2. Enumerar los tubos de ensayo.
3. Agregar a cada uno 2 mililitros de aceite.
4. En el tubo 1 agregar de 4 a 5 gotas de sudan III.
5. En el tubo 2 agregar de 4 a 5 gotas de azul de metileno.



6. Observar las caractersticas de las 2 muestras.
7. Homogenizar ambas muestras y dejar reposar.
8. Observar la muestras y registrar
Resultados

Muestra de aceite ms azul de metileno.

Muestra de aceite mas sudan III

Muestra de aceite
Cuadro 7,0.-observacion de las muestras con los colorantes antes y despus de homogenizar

Tubos De Ensayo

Muestra + Colorante Sin
Homogenizar

Muestra + Colorante
Homogenizada

Tubo 1:Aceite + Sudan III
El sudan III se integrando de
manera lenta pero uniforme, al
mismo tiempo que se distribuye
por todo el espacio del tubo.
La muestra tomo una coloracin
rojo-anaranjado que cubre por
completo la muestra de aceite.



Tubo 2: Aceite + A. De M.
El azul de metileno va formando
gotitas dentro del aceite, su
distribucin es ms lenta y cubre
menos espacio en el tubo de
ensayo.
Al homogenizar la muestra con el
azul de metileno podemos notar
la formacin de gotas ms
pequeas que cubren ms
espacio, pero forman pequeas
nubes de grumos, hay que agitar
con mucha fuerza para lograr
homogenizar una parte de la
muestra.



Practica 9
Solubilidad De Los Lpidos
Objetivo: Observar la disolucin de los lpidos en solventes no polares

Fundamento:
Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas
gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por
reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua.

Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter, cloroformo, acetona,
benceno, etc. Su solubilidad en alcoholes depender del tamao del mismo as como de su ramificacin (a
mayor nmero de carbonos ms soluble ser el lpido no as con la ramificacin).
Materiales:
4 tubos de ensayo
Gradilla
Mortero con pistilo
Cacahuates
Reactivos:
ter
Cloroformo
Benceno
Hexano
Procedimiento
1. En el mortero colocar de 10 a 15 cacahuates.
2. Macerarlos con ayuda del pistilo hasta volverlos totalmente polvo.
3. Rotular cada uno de los tubos de ensayo con el solvente a utilizar.
4. Cuando los cacahuates estn convertidos en polvo, dividir la muestra principal entre los 4
tubos de ensayo.
5. A cada uno de los tubos de ensayo, aadir 4 mililitros del solvente correspondiente.
6. Homogenizar para que el efecto del solvente sea ms rpido.
7. Observar el resultado y registrarlos



Resultados

Muestra de lpidos en solucin de agua

Muestra de lpidos en solvente hexano

Muestra de lpidos en solvente benceno

Muestra de lpidos en solvente cloroformo



Cuadro 8,0.-tabla que indica en qu grado disolvi cada solvente a la muestra.

Muestra
Tubo 1:Cacahuate
+ter
Tubo 2: Cacahuate
+Hexano
Tubo 3: Cacahuate
+Cloroformo
Tubo 4: Cacahuate
+Benceno

Cacahuate
Pulverizado
Debido a que no
hubo ter en la
prctica,
dispusimos esta
muestra como un
control negativo de
contraste con las
dems mezclas.
El hexano es casi
transparente, no
tuvo mucha
actividad diluyente
con el cacahuate
pulverizado, este
no alcanzo a
diluirse en su
totalidad y una
gran parte se
sedimento en el
fondo del tubo de
ensayo.
El cloroformo logro
diluir una mayor
parte de la
muestra, aunque
una pequea parte
sigui
sedimentada.
El benceno fue el
mejor solvente
para el cacahuate,
debido a que
diluyo en su
totalidad al
cacahuate, se
puede notar una
gran tonalidad
diluida, signo de
que el benceno
diluyo bien la
muestra.

Practica 10
ENZIMAS: ACCION DE LA CATALASA



Objetivo: Observar la accin enzimtica de de la catalasa y la formacin de productos en forma de gas O
2
y
liquido H
2
O.

Las enzimas tienen una temperatura ptima de actuacin. La catalasa se encuentra en todos los
tejidos vivos, donde descompone el H
2
O
2
en H
2
O y O
2
, que al ser gas, en solucin acuosa se desprende en
forma de burbujas. Por tanto, al aadir agua oxigenada a un tejido vivo, la deteccin de desprendimiento de
oxgeno gas, indicar actividad de la catalasa.
Material:
4 tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada
Bao Mara
Corazn e Hgado de pollo
Hojas de planta
Cinta adhesiva
Bolgrafo
Reactivos:
Agua oxigenada(H
2
O
2
)
Agua destilada

Procedimiento:
1. Fragmentar en pequeos trozos el hgado.
2. Introducir los trozos del hgado en un tubo de ensayo.
3. Rotular las muestras.
4. Repetir los pasos 1-3 con las hojas de planta.
5. A cada una de las muestras agregar 4 mililitros de agua oxigenada(H
2
O
2
)
6. Observar la reaccin que se lleva a cabo en el interior de ambos tubos de ensayo.
7. Registrar los cambios y reacciones observados.
8. Tomar 2 nuevas muestras (1 de hgado y 1 de hojas) e introducirlas en 2 tubos de ensayo.
9. Rotular las muestras.



10. Someter ambas muestras a bao Mara con agua previamente calentada durante 5 minutos o
hasta que hiervan.
11. Observar y registrar los cambios sucedidos.
12. Dejar enfriar ambas muestras.
13. Agregar a cada uno de los tubos de ensayo 4 mililitros de agua oxigenada(H
2
O
2
)
14. Observar y registrar los cambios sucedidos.
15. Con ayuda de un bistur, volver trocitos la muestra de corazn de pollo.
16. Depositar la muestra de corazn en un vidrio de reloj.
17. A esta muestra aplicarle 5 mililitros de agua oxigenada.
18. Observar la reaccin que se lleva cabo y registrar los cambios.

Resultados

Espuma formada en la muestra de hgado

Reaccin en la muestra de higado



Reaccin en las hojas
Cuadro 10,0.-Caracteristicas de la muestra antes y despus de la aplicacin H
2
O
2

Muestra

Muestra +H
2
O

Muestra + H
2
O
2

Hgado de Pollo

No reacciona, solo se mantiene
nadando, no se alcanza a
percibir ninguna reaccin.
Al entrar en contacto el hgado
con el H
2
O
2
se produce una
reaccin al instante, que tiene
como efecto final una gran
expulsin de abundante
espuma amarilla, con un aspecto
seco, pero voluminoso, que
haciende de manera rpida por
las paredes del tubo,

Hoja de Planta
No hay cambio alguno. Se produce una ligera expulsin
de espuma de color caf
obscuro, que no es tan
abundante, pero que se puede
alcanzar a percibir.

Cuadro 10,1.- Caractersticas de la muestra con la aplicacin de calor y aplicacin de H
2
O
2

Muestra

Muestra +

Muestra + + H
2
O
2

Hgado de Pollo

El olor del Hgado se vuelve
ms fuerte, y su consistencia
La aplicacin directa de H
2
O
2
no
produzco ninguna reaccin o
cambio alguno en la muestra, en



cambia a una mas aguada. esta ocasin no hubo expulsin
de espuma.

Hoja de Planta

Con el calor las hojas tienden a
pegarse a las paredes del tubo,
pero no ocurre alguna reaccin.
Al entrar en contacto con el agua
oxigenada la muestra no
presenta reactividad alguna, ya
no se detecta espuma en el
interior del tubo.

PREGUNTAS

Por qu presenta un intenso burbujeo cuando el hgado entra en contacto con el H
2
O
2
?
Debido a que el hgado lleva a cabo procesos de desintoxicacin, este posee una gran cantidad de
enzimas catalasas. Por lo tanto al reaccionar con una sustancia altamente toxica para la clula como lo es
el perxido de hidrogeno entra en accin la catalasa desdoblando el perxido de hidrogeno en agua +
oxigeno, hecho que se puede percibir por una intensa liberacin de espuma amarilla y un aumento en la
temperatura de la muestra.

Por qu la reaccin se da en menor intensidad al entrar en contacto el H
2
O
2
con la hoja?
El oxigeno liberado durante la reaccin del hgado sigue una ruta distinta en la planta, una porcin
es liberada explicando esta forma la presencia de burbujas, pero es menor debido a que la otra porcin es
conducida por los peroxisomas a un ciclo de reciclaje.

Qu sucede cuando la muestra de hgado se somete a calentamiento?
Debido a que la catalasa es de origen proteico, al recibir un aumento de temperatura, se
desnaturaliza, perdiendo su funcionalidad.
Practica 11
Titulacin
Objetivo: Determinar volumtricamente la concentracin de una solucin mediante el proceso de titulacin



Fundamento:
Este mtodo sirve para determinar volumtricamente la concentracin de una sustancia especifica
de una solucin, aadiendo una solucione concentracin conocida hasta que la reaccin sea completa,
esto se indica usualmente por un cambio de color en un indicador por mediciones elctricas. En las
titulaciones acido-base se mide una solucin de un acido agregando gota a gota una solucin de base hasta
que se neutralice.

Material:
2 tubos de ensayo
Pipetas graduadas
Gradilla
Probeta graduada
2 buretas graduadas
Pinzas para bureta
Embudo
Tiras indicadoras de pH
Balanza granataria
Papel tornasol rojo y azul
Reactivos:
Fenolftalena
NaOH
HCl
Agua destilada



Cuadro 11,0.- comportamiento de la muestra en 3 fases del experimento

Muestra

Muestra Antes De
La Titulacin

Muestra Durante La
Titulacin

Muestra Al Final De
La Titulacin

HCl
La muestra presenta
una apariencia de
alta cristalinita,
debido a que se
encuentra
altamente diluida
no se alcanza a
percibir algunas
propiedades como
su olor.
Al llegar a cierto
volumen de descarga
de la base, la muestra
del acido empieza a
virar
momentneamente,
esto significa que, por
cada gota de base que
entra en contacto con
el acido, este vira a un
rosa tenue, pero solo
por un instante, la
agitacin permite
localizar un punto en el
descargue de la base,
en el cual el viraje del
acido es ms duradero
y conserva una
tonalidad rosa muy
baja, lo que indica la
neutralizacin de la
muestra de acido.
Tras el viraje de
color la muestra
adquiere un color
rosa, con una
tonalidad baja que
hace parecer a la
muestra muy
diluida, signo de que
el acido ha sido
neutralizado.

Cuadro 11,1.- comportamiento de la muestra en 3 fases del experimento



Muestra

Muestra Antes De
La Titulacin

Muestra Durante La
Titulacin

Muestra Al Final De
La Titulacin

NaOH
La muestra adquiere
una coloracin
rojiza, debido al
contacto de la
muestra bsica con
la fenolftalena, la
cual le da cierta
tonalidad.
Al principio la muestra
no da signos de
variacin alguna, caso
contrario al acido, la
muestra se mantiene
rosa hasta un punto
en el cual cambia
instantneamente a
blanco, lo cual indica
que la bases ha
entrado a una fase en
la que se empieza a
hacer ms notable la
neutralizacin, hasta
llegar a virar a blanco
diluido de forma
completa.
La muestra posee
una apariencia
lechosa, con
tonalidad blanco
diluido. Lo cual nos
indica que su pH
debe ser cercano a
7, y obviamente,
que la base se
encuentra
neutralizada.

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