Escuela de Medicina Dr. Witremundo Torrealba Departamento de Fisiologa y Bioqumica. Bachilleres: Goitia Luisangela Utrera Thaimar Toribio Jhonattan
Marzo, 2012 13.- Relacionar las fluctuaciones de pH y temperatura con cambios en la conformacin nativa de una protena, y consecuentemente en su actividad biolgica.
14.- Explicar la participacin de las protenas plasmticas en las diversas funciones biolgicas.
15.- Interpretar el patrn electrofortico de un suero normal.
Desnaturalizacin y renaturalizacin de las protenas. Protenas del plasma. Importancias de las protenas plasmticas: albmina, a1 quimiotripsina, haptoglobina, celuloplasmina, transferrina, inmunoglobulina y protenas de coagulacin. Patrones electroforticos de sueros normales. Cambios en el entorno de la protena pueden acarrear cambios estructurares y funcionales. Condiciones diferentes a las de la clula pueden provocar cambios en la estructura tridimensional Ejemplo Elevamos suficiente la temperatura, o pH sea fuertemente acido o alcalino, o se aade al disolvente algunos tipos de molculas orgnicas, como alcoholes o urea, se despliega la estructura nativa de la protena.
Desnaturalizacin Perdida la estructura natural de la protena, junto con la mayora de sus propiedades especificas por factores externo. La cadena desplegada es un ovillo aleatorio Flucta continuamente entre un gran numero de conformaciones extendidas. pH Las variaciones de pH alteran los estados de ionizacin de las cadenas laterales de los aminocidos, lo que cambia la distribucin de carga de la protena y la destruccin de algunos enlaces de hidrgenos. Los detergentes Algunos de los cuales perturban de modo significativo las estructuras de las protenas a concentraciones tan bajas como 10-6M, asocindose hidrofobicamente con los restos no polares de una protena, interfiriendo con las interacciones hidrofobitas responsable de la estructura de la protena nativa Los disolventes orgnicos como la urea actan principalmente rompiendo las interacciones hidrofobicas que forman el ncleo estable de las protenas globulares. Temperatura Si se aumenta lentamente la temperatura la conformacin de la protena permanece generalmente intacta hasta que tiene lugar una perdida brusca de la estructura dentro de un estrecho margen de temperatura. Proceso cooperativo: la perdida de la estructura en una parte desestabiliza la estructura restante Temperatura de fusin (Tm ) Protenas 100 C El calor en las protenas de la clara de huevo, la desnaturalizacin se acompaa en este caso de coagulacin. Cuando la desorganizacin molecular no es muy intensa, la protena puede retomar su conformacin original. Renaturalizacin Temperatura La desnaturalizacin de algunas protenas es reversible Recupera su estructura nativa estable y su actividad biolgica Desnaturalizacin y renaturalizacin de la ribonucleasa PLASMA ? Fraccin lquida y acelular de la sangre, es decir, se obtiene al dejar a la sangre desprovista de clulas como los glbulos rojos y los glbulos blancos Funcin del Plasma ? Los alimentos Los desechos celulares Transporte Las Hormonas Importancia de las protenas plasmticas Funciones en conjunto de las protenas plasmticas Funcin onctica Funcin tampn o buffer Participacin en la viscosidad de la sangre Funcin electroqumica Albmina Ovoalbmina clara de huevo
Lactoalbmina leche
Seroalbmina
Es la protena ms abundante en el plasma; su contenido es de 4.5 g/dl, su PM es de 69,000 Daltons y comprende cerca de 60% de la protena plasmtica total. 40% est en el plasma y 60% en los espacios extracelulares El hgado produce alrededor de 12 g de albmina por da, lo cual representa alrededor de 25% de la sntesis proteica heptica total Cadena polipeptdica de 585 a.a. y contiene 17 enlaces disulfuro que determina su organizacin. Albmina La forma de la molcula completa es elipsoidal, lo que significa que no aumenta la viscosidad del plasma. Se piensa que la albmina es responsable del 75 a 80% de la presin osmtica del plasma humano Capacidad para unirse a varios ligando. Estos incluyen cidos grasos libres, calcio, bilirrubina Haptoglobina Tres tipos de haptoglobinas determinadas genticamente: Hp1-1, Hp2-1 y Hp2-2 que difieren en la estructura de su cadena . Formadas por dos pares de cadenas diferentes unidas por puentes disulfuro; 2 2. Forman complejos especficos y estables con la hemoglobina (Hb-Hp) La concentracin de Hp en el plasma humano vara entre 40 a 180 mg/dl. El PM de la Hb es de aprox. 65,000 PM de la forma polimrfica mas simple de Hp es de aprox. 90,000 PM complejo Hb-Hp aprox. 155,000 Evita la excrecin del hierro por la orina. Hp impedir la prdida de Hb libre por el rin. Es una globulina con PM aprox. de 160,000 concentracin plasmtica de 30 mg/dl. Tiene color azul debido a su contenido de cobre y transporta 90% del metal presente en el plasma Es el vehculo de transporte del cobre por la sangre y participa en su homeostasis. En la enfermedad de Wilson los niveles de esta protena estn drsticamente reducidos por lo que los niveles de Cu aumentan en cerebro e hgado originando daos severos neurolgicos y hepticos.
Ceruloplasmina Transferrina: 687 a.a. PM aprox. de 80,000 daltons. Posee 2 dominios homlogos La concentracin srica normal de la transferrina: 200 a 400 mg/dl. El hierro libre es toxico, pero su fijacin a transferrina disminuye su toxicidad y lo transporta donde se requiere Transporta iones frricos desde los lugares de almacenamiento de hierro hacia la mdula sea, donde los precursores de eritrocitos y linfocitos tienen receptores de transferrina en sus superficies. Inmunoglobulina Un par de cadenas ligeras con unos 220 aminocidos cada una, y un par de cadenas pesadas formadas por unos 440 aminocidos cada una. Glicoprotenas que actan como anticuerpos Respuesta a la deteccin de molculas extraas en nuestro cuerpo Diversos tipos de inmunoglobulinas: IgG, IgM, IgA, IgD e IgE Inmunoglobulina Parte del sistema inmunitario Los anticuerpos contribuyen a la inmunidad de tres formas distintas:
Impedir que los patgenos entren en las clulas o las daen al unirse a ellas.
Pueden estimular la eliminacin de un patgeno por los macrfagos.
Desencadenar la destruccin directa del patgeno estimulando otras respuestas inmune como la va del complemento Fibrinogeno Glicoprotena forma parte de la cascada final de la coagulacin, ya que por accin de la enzima trombina se transforma en un monmero de fibrina El fibringeno es una protena soluble del plasma sanguneo precursor de la fibrina, su longitud es de 46 nm, su peso 340 kDa Es una molcula fibrilar, que en sus extremos tiene cargas fuertemente negativas.
Compuesto por tres pares de cadenas de polipptidos que son, 2 cadenas , 2 y unidas por enlaces disulfuro La electroforesis es una tcnica de laboratorio, en la cual el suero sanguneo se coloca en un papel especialmente tratado y luego se expone a una corriente elctrica, las protenas se mueven o migran en el papel Separacin electroforetica del suero plasmtico genera cinco fracciones principales: Albmina que constituye el 54-58 % del total de protena
1- globulina con 6-7 %
2- globulinas con 8-9%
-globulinas con 13-14 %
globulinas que son 11-12% del total de protenas. s El aumento de las protenas alpha-1 globulina puede deberse a: