UNIVERSIDAD CATOLICA DE TEMUCO FACULTAD DE ACUICULTURA Y CS.

VETERINARIAS ESCUELA DE ACUICULTURA

REEMPLAZO PARCIAL DE HARINA DE PESCADO POR HARINA DE LUPINO BLANCO (Lupinus albus) EN DIETAS EXTRUIDAS PARA TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus mykiss): EFECTOS SOBRE LOS NDICES PRODUCTIVOS Y LA COMPOSICION DE ACIDOS GRASOS EN EL MSCULO.

EDISON R. SERRANO GUTIRREZ

TEMUCO 2004

UNIVERSIDAD CATOLICA DE TEMUCO FACULTAD DE ACUICULTURA Y CS. VETERINARIAS ESCUELA DE ACUICULTURA

REEMPLAZO PARCIAL DE HARINA DE PESCADO POR HARINA DE LUPINO BLANCO (Lupinus albus) EN DIETAS EXTRUIDAS PARA TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus mykiss): EFECTOS SOBRE LOS NDICES PRODUCTIVOS Y LA COMPOSICION DE ACIDOS GRASOS EN EL MSCULO.

Tesis de grado presentada como parte de de los requisitos para optar al grado de Licenciado en Ciencias de la Acuicultura.

Profesor Gua: Aliro Brquez Ramrez Realizado Por: Edison Serrano Gutirrez

TEMUCO 2004

AGRADECIMIENTOS

En la realizacin del presente proyecto de tesis de grado se agradece el patrocinio econmico otorgado por la direccin de investigacin de la Universidad Catlica de Temuco (DIUCT) y BIOMAR Chile. Igualmente el soporte tcnico otorgado por la Escuela de Acuicultura de la Universidad Catlica de Temuco

INDICE DE MATERIAS
Pgina Resumen Abstract 1. Introduccin. 2. Antecedentes Bibliogrficos. 2.1. Situacin Actual de la Produccin de Harina de Pescado y su Efecto en la Acuicultura. 2.2. Utilizacin de Ingredientes Alternativos en la Formulacin de Alimentos para Peces: Lupinus albus, una leguminosa potencial. 2.3. Situacin del Lupino Dulce en Chile. 2.4. Metabolismo Lipdico en Peces: Efectos de la inclusin de Materias primas vegetales. 3. Objetivos. 3.1. Objetivo General. 3.2. Objetivos Especficos. 4. Materiales y Mtodos. 4.1. Condiciones Experimentales para la Evaluacin de las Dietas. 4.2. Dietas. 4.3. Parmetros Bioqumicos Utilizados. 4.3.1. Composicin de la Carcasa. 21 23 26 26 15 20 20 20 21 06 12 04 01 04

4.3.2. Perfil de cidos Grasos Totales en el Msculo 4.4. Parmetros Biolgicos Utilizados. 4.4.1. Rendimientos Productivos. 4.4.2. Efectividad del Alimento. 4.4.3. ndice Hepatosomtico. 4.5. Mtodos Analticos de Composicin Proximal. 4.5.1. Humedad. 4.5.2. Cenizas. 4.5.3. Protenas. 4.5.4. Extracto Etreo. 4.5.5. Fibra. 4.5.6. Determinacin del Perfil de cidos Grasos Totales. 4.6. Tratamientos Estadsticos de los Datos. 5. Resultados. 5.1. Crecimientos y Rendimientos Productivos. 5.2. Composicin Corporal de los Peces. 5.3. Composicin de cidos Grasos en el Msculo. 6. Discusin. 7. Conclusiones. 8. Referencias bibliogrficas. 9. Anexos.

26 27 27 27 28 28 28 29 29 29 29 30 31 32 32 34 35 42 54 57 63

RESUMEN
Durante los ltimos aos, la acuicultura ha experimentado un gran desarrollo con el fin de abastecer a una poblacin en continuo crecimiento, con demandas cada vez ms altas de pescado. Sin embargo, la produccin mundial de harina de pescado ha decrecido en los ltimos aos, afectando la industria acucola, la cual depende de este insumo como principal ingrediente de los alimentos utilizados. Frente a este problema diferentes grupos de investigacin estn trabajando en sustituir parcialmente la cantidad de harina de pescado a incluir en los alimentos para peces con fuentes vegetales. En este sentido, la presente investigacin a estudiado la utilizacin el lupino blanco (Lupinus albus) como reemplazo parcial de harina de pescado en dietas para juveniles de trucha arcoris (Oncorhynchus mykiss). Los peces fueron alimentados con dietas que contenan 0 %, 10 %, 15 % y 20 % de harina de lupino. Estas dietas fueron formuladas isoenergticas e isoproteicas. Cada dieta fue ensayada en triplicado, la alimentacin fue manual y ha saciedad dos veces al da. Se usaron peces de 65.9 15.1g de peso inicial. Se evalu rendimientos productivos (factor de conversin, incremento en peso, tasa de crecimiento especfico y el coeficiente de crecimiento termal), ndices hepatosomticos, composicin proximal del pez completo y perfil de cidos grasos en el msculo. En general los rendimientos productivos en todos los tratamientos con harina de lupino no fueron diferentes. La composicin del pez completo no tuvo diferencias entre los tratamientos. En el msculo, los cidos grasos de la serie n-6 y n-3 permanecieron constantes mientras se incremento el contenido de lupino en la dieta. Entre los cidos grasos poliinsaturados, la cantidad de cido linolico, cido araquidnico, cido linolnico, cido eicosapentaenoico y el cido docosahexaenoico no variaron entre los tratamientos. La cantidad total de cidos grasos monoinsaturados fue afectada con la incorporacin de lupino blanco en la dieta, por la acumulacin del cido elaidico. Un dficit en los cidos grasos esenciales fue observado en todas las dietas experimentales incluido el control. Los resultados obtenidos muestran que el lupino blanco puede ser incluido hasta un 20 % en el alimento de trucha arcoiris sin efectos significativos en los rendimientos productivos o la composicin de cidos grasos. Palabras claves: Reemplazo de harina de pescado Trucha arcoiris Lupino Rendimientos Productivos Composicin proximal de la carcasa Composicin de cidos grasos.

ABSTRACT
Aquaculture has experienced a significant development during last years, due to overexploitation of fisheries stocks and a steady growth in the world population with an increasing demand of aquatic products for consumption. However, the world fish meal production decreased in the last years affecting to aquaculture industry that depends from fishmeal as a main ingredient for fish diets. To face this problem, different research groups are working in order to partially substitute certain amount of fish meal employed in fish diets as protein source with protein from vegetal sources. In this sense, the present investigation has studied the utilization of white lupin (Lupinus albus) as a partial replacement of fish meal in diets for juveniles of rainbow trout (Oncorhyncus mykiis). Fish were fed diets with 0 %, 10 %, 15 % and 20% lupin meal. These diets were formulated to be isonitrogenous and isoenergetic.Triplicate groups of trout were fed twice daily to satiation by hand during 12 weeks. Fishes with 65.9 15.11 g of initial weight were used. The growth performance (Conversion factor, increase in weight, specific growth rate and thermal growth coefficient), hepatosomatic indexes, whole body composition and fatty acids profile in the muscle were evaluated. Growth performances in all treatments with lupin meal had not differences, also the carcass content had not significant differences among treatments. The percentage of fatty acids (n-6 and n-3) were constant in the muscle although increasing level of dietary lupin seed meal. Among polyunsaturated fatty acid group, the levels of linoleic acid, araquidonic acid, linolenic acid, eicosapentanoic acid and docosahexanoic acid did not vary much between treatments. The total amount of monounsaturated fatty acids was affected for the accumulation of elaidic acid, when increasing levels of white lupin in diets. Essentials fatty acids deficit, were observed among all diets trials inclusive control diets. The results obtained showed that white lupin can be included at up to 20 % of a rainbow trout diet without a significant effect on the growth performance or muscle fatty acid composition. Keywords: Fish meal replacement Rainbow trout Lupin Growth performance Carcass composition Fatty acids composition.

INDICE DE FIGURAS

Figura 1. Evolucin del la superficie sembrada con lupino en Chile. 2. Sistema de estanques de crecimiento Etapa 1 (300l). 3. Sistema de estanques de crecimiento Etapa 2 (600l). 4. ndices hepatosomticos calculados para los diferentes tratamientos. 5. Concentraciones de cidos grasos esenciales (EFAs) observados en el msculo de trucha arcoiris (Oncorhyncus mykiss) en su estado inicial, como para las diferente dietas.
6.

Pgina 13 22 23 34

39

Perfil de cidos grasos totales presentes en el msculo de trucha arcoiris (Oncorhyncus mykiss), al comienzo del experimento y aquellos alimentados con las diferentes dietas. 40

INDICE DE TABLAS

Tabla 1. Composicin proximal de las semillas de lupino cultivadas en Chile. 2. Composicin de aminocidos de las especies de lupino cultivadas en Chile. 3. Composicin de cidos grasos de las especies de lupino cultivadas en Chile. 4. Formulacin y composicin de las dietas experimentales. 5. Composicin de cidos grasos de las dietas experimentales.
6.

Pgina 07

08

09 24 25

Crecimiento y rendimientos productivos en trucha arcoiris alimentadas con las diferentes dietas experimentales. 32

7. Composicin corporal de trucha arcoiris (Oncorhyncus mykiss) alimentado con diferentes dietas experimentales. 8. Perfil de cidos grasos presentes en el msculo de trucha arcoiris alimentado con diferentes dietas experimentales. 36 35

1. INTRODUCCION

Durante la ltima dcada, el mundo ha sido testigo del espectacular crecimiento de la produccin comercial de diversas especies de peces carnvoros en sistemas de cultivo intensivo. Sin embargo, para poder sostener este desarrollo, se requieren dietas nutricionalmente completas y de alto costo (Hasan, 2001). Los costos por concepto de alimento representan entre el 40 y 50% de los costos operacionales en el cultivo de especies salmondeas (Vega, 1990). Esto es atribuido a la utilizacin de la harina de pescado, como principal materia prima, en la fabricacin de los alimentos comerciales de salmnidos y otros peces carnvoros (Hardy, 1988), debido que es una fuente de aminocidos esenciales y de cidos grasos poliinsaturados de cadena larga, requeridos por los peces (Guillaume & Mtailler, 1999). En la actualidad la demanda por la harina de pescado se encuentra en aumento, ya que no solo es utilizada por la industria acucola, sino que adems es incluida en dietas para aves, cerdos, ovejas y vacunos (Windsor & Barlow, 1984). Por otro lado, su disponibilidad mundial a alcanzado niveles de produccin estticos y en disminucin (Pike & Zaldivar, 2002) aumentando su precio y originando variaciones en su composicin nutricional (Coll, 1991). Esta eventual escasez a mediano plazo de la harina de pescado, generar nuevos desafos a las empresas del rubro y a las instituciones cientficas y tecnolgicas chilenas, que debern comenzar a trabajar en la bsqueda de materias primas alternativas a la harina de pescado, asunto que ya es materia de atencin en el norte de Europa (Wurmann, 2000). Una de las fuentes alternativas de uso en los alimentos para peces, son las materias primas de origen vegetal (Tacon 1994). La competitividad de las harinas vegetales, frente a

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las harinas de pescado, se debe a su mayor produccin, la cual no se encuentra limitada por la productividad natural del medio. Adems muchas de ellas son subproductos agroindustriales y por consiguiente, los precios pueden llegar a ser muy competitivos (De la Higuera & Cardente, 1993). La posibilidad de utilizar las diferentes materias primas de origen vegetal debe responder a los requerimientos nutricionales de la especie (Guillaume & Metailler, 1999), siendo el contenido en cidos grasos, un factor determinante al evaluar una potencial inclusin en el alimento. Los cidos grasos de los peces proceden de la dieta y de la sntesis que se realice en sus propios tejidos (Fernndez, 1993). Las principales fuentes de lpidos en la dieta de los salmnidos son el aceite y la harina de pescado (Hardy, 1988), las cuales en general, presentan altos niveles de cidos grasos poliinsaturados de cadena larga de la serie n-3, PUFA (Guillaume & Metailler, 1999); cidos grasos requeridos por los salmnidos (Watanabe, 1982). Es por esto, que la composicin de cidos grasos en dietas que

contienen materias primas de origen vegetal, puede afectar fisiolgicamente al pez, sin manifestarse efectos inmediatos en el crecimiento o la mortalidad (Storebakken et al. 2000). Los inconvenientes que presenta la utilizacin de materias primas de origen vegetal en dietas para peces, no solo se reducen a posibles problemas fisiolgicos sino que, adems, los peces de cultivo alimentados con dietas comerciales que contienen aceites o harinas de origen vegetal presentan mayores niveles de cidos grasos poliinsaturados de la familia n-6 en los tejidos (Bell et al., 2001; Caballero et al. 2001; Torstensen et al. 2000). Este cambio en el perfil de cidos grasos se debe a que los altos niveles de 18:2 n-6, presente en la dieta, compiten metabolicamente con los cidos grasos de la familia n-3 (Storebakken et al., 2000). Por lo cual disminuyen los niveles de cidos grasos poliinsaturados de la serie n-3,

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presentes en el msculo del pez (Gmez et al., 1993). Entre las harinas de origen vegetal, las leguminosas de grano, son extensamente utilizadas como reemplazo de la harina de pescado en las dietas para peces (Allan, 1997). El reemplazo de la harina de pescado por harina de lupino en dietas para las distintas especies de salmnidos ha sido reportado con resultados satisfactorios, en cuanto a crecimiento y digestibilidad, por diversos autores (Alarcn, 2000; Bortquez & Alarcn, 2002; Burel et al. 1998; Carter & Farhangi, 2001; Carter & Hauler, 2000; De la Higuera, 1988; Hughes, 1988; Hughes, 1990; Moyano et al. 1992). El lupino presenta una ventaja econmica, sobre la utilizacin de otras harinas vegetales como la soja, lo cual la convierte en una fuente alternativa de reemplazo bastante atractiva (Hughes, 1988). Aunque la harina de lupino contiene altos niveles del cido graso linolnico, en comparacin a otras harinas vegetales, la presencia mayoritaria del cido graso linoleico (Masson & Mella, 1985), podra ocasionar problemas fisiolgicos y metablicos al ser incluidas en dietas comerciales para salmnidos. Los ensayos realizados en el presente estudio, buscan responder a esta interrogante. Determinando el efecto sobre los parmetros productivos y la composicin de los cidos grasos en el msculo de la inclusin de harina de lupino en dietas extrudas para Trucha Arcoiris (Oncorhynchus mykiss).

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2. ANTECEDENTES BIBLIOGRFICOS

2.1.

Situacin actual de la produccin de harina de pescado y su efecto en la acuicultura

Los salmnidos son peces carnvoros y se alimentan en la naturaleza de las presas vivas que capturan, por lo tanto, su aparato digestivo y todas sus funciones relacionadas con la digestin, absorcin, y utilizacin metablica se encuentran orientadas, de forma natural, a la propia naturaleza del alimento que habitualmente consumen (Blanco, 1995). Por esta razn, cuando son sometidos a cultivo se requiere del uso de la harina de pescado como ingrediente principal del alimento suministrado (Tacon, 1994). Dentro de las caractersticas nutricionales ms relevantes de la harina de pescado, se encuentran su elevada concentracin proteica, rica en aminocidos esenciales, adems de un alto contenido de cidos grasos poliinsaturados de la serie n-3. Es tambin, fuente de vitaminas del complejo B y cido fosfrico. Todas estas cualidades le confieren un importante rol en el mercado mundial de alimentos para peces, aves, cerdos, vacas y mascotas (Robaina, 1998). La harina de pescado usada en la manufacturacin de los alimentos para peces proviene de especies que no son usadas para consumo humano, debido a su tamao o a que no son muy abundantes. En Chile, un 60% de los insumos utilizados en la fabricacin de alimentos para salmondeos corresponde a harina de pescado, elaborada a partir de anchoveta y jurel (Brquez et al.1995).

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La produccin de harina de pescado viene determinada por el nivel de recursos disponibles, concentrndose en la explotacin de un pequeo nmero de especies, por consiguiente, es dependiente de su comportamiento. Este tipo de produccin trae consigo un tipo de mercado muy inestable, con unas disponibilidades y precios fluctuantes entre un ao y otro (Robaina 1998). En la dcada de los setenta, se desat una crisis en el sector debido a la coincidencia de una serie de factores como: la crisis del petrleo, las restricciones impuestas por varios pases a la pesca en sus aguas; al colapso de los stocks de anchoveta peruana, y por ultimo, el desarrollo de la acuicultura y especficamente el de la avicultura en China. La suma de estos factores origino un aumento de los precios, elevando los costos de los alimentos para peces (De la Higuera & Cardente, 1993). En la dcada de los 80, las capturas empezaron a incrementarse de nuevo, alcanzando un pico en 1989. Este resurgimiento de las pesqueras a nivel mundial no fue debido a un incremento general de los stocks de peces marinos, sino ms bien a la renovada explotacin de los stocks pelgicos de especies del tipo del arenque y del bacalao (Robaina 1998). En la pasada dcada, la produccin de harinas de pescado oscilaron entre 6 y 7 millones de toneladas anuales y la produccin de aceites de pescado entre 1 a 1,3 millones de toneladas anuales. La disminucin del ao 1998 fue una excepcin causada por uno de los ms grandes fenmenos del Nio, que han existido y que impacto a las pesqueras (Pyke et al. 2002). Actualmente se utilizan entre 2,5 a 3,0 millones de toneladas de harina de pescado, como insumo para alimentos de acuicultura, y se vislumbra una eventual escasez mundial en las prximas dcadas (Wurman, 2000). El incremento en la produccin nacional de salmones y truchas, hacen que la demanda interna por harina de pescado sea en este momento superior a las 300.000

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toneladas por ao. Con las actuales polticas de crecimiento de la industria salmonera, que esperan duplicar la produccin de salmnidos antes de 8 aos, la demanda por la harina de pescado de igual forma se duplicara, lo cual convertir progresivamente al pas en un importador parcial de este insumo (Zaldvar, 2004). Considerando los antecedentes anteriores, la investigacin de la nutricin en acuicultura, debe seguir los mismos pasos que ya se dieron con los organismos terrestres y as, al aumentar el nmero de especies cultivadas y el volumen de los cultivos, la demanda de alimentos que conllevan, ha obligado a los investigadores a dedicar mayor atencin a la bsqueda y evaluacin de fuentes proteicas que sirvan como alternativa a las harinas de pescado (De la Higuera & Cardente, 1993).

2.2.

Utilizacin de Ingredientes Alternativos en la Formulacin de Alimentos para Peces: Lupinus albus, una leguminosa potencial

Los ltimos avances en la formulacin de alimentos para peces se basan de un lado, en aumentar la eficacia de conversin de la protena y; por otro, en la utilizacin de fuentes de protenas, que sustituyan a la harina de pescado. La sustitucin de la harina de pescado por otras fuentes alternativas de protena tiene como factores determinantes el nivel de sustitucin y la calidad de la protena. Las sustituciones de la harina de pescado por mezclas de protena animal de forma que se alcance un balance equilibrado en aminocidos, permiten una sustitucin superior al 50% en algunos casos. La sustitucin por levaduras del petrleo o bacterias fermentadoras de alcoholes permite sustituir la tercera parte de la harina de pescado. Los niveles superiores de sustitucin requieren la adicin de lisina y metionina. La incorporacin de soja u otra torta de oleaginosa, sustituyendo la

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harina de pescado incluso a niveles bajos como el 25%, requieren ya una adicin de los aminocidos limitantes (Coll, 1991). Como fuentes de protena vegetal se utilizan: cereales, semillas oleaginosas y leguminosas. A esto se le aaden los subproductos de las industrias de fermentacin en el caso de los cereales, y los de la obtencin de aceite en el caso de las oleaginosas (Guillaume & Metallier, 1999). Con niveles de protena cercanos al 30%, adems de presentar la mayora de los aminocidos esenciales (Petterson et al., 1997), las leguminosas, como alfalfa, poroto, arveja, haba y soya, han sido utilizadas en reemplazo de la harina de pescado. No obstante su empleo se ve reducido en muchos casos, debido a su utilizacin en la alimentacin humana (Coll, 1991). A nivel mundial una de las leguminosas de mayor potencial como fuente de protena vegetal alternativa a la harina de pescado es el lupino (Lupinus spp), tambin conocido como altramuz o lupini. La semilla o grano de las especies domesticadas del genero Lupinus, las que incluyen al lupino dulce (Lupinus albus), lupino amargo (Lupinus angustifolius) y el lupino amarillo (Lupinus luteus), presentan una alta calidad nutricional (Tabla 1).
Tabla 1.Composicin proximal de las semillas de Lupino cultivadas en Chile. Composicin
Humedad Proteina (%MS) Extracto Etereo (%MS) Cenizas (%MS) Fibra (%MS) Extracto No Nitrogenado
1
1

L. albus (var. astra)

8,5 35,3 10,7 3,8 13,1 37,1

L. albus (var. Multolupa)

9,0 34,7 12,8 3,6 11,3 37,6

L. luteus
9,9 44,4 5,4 3,9 16,8 29,5

L. angustifolius
10,2 34,2 5,6 3,2 13,1 43,9

Calculado por diferencia. Modificado de Ynez et al. 1983

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Entre las distintas variedades de lupino, los niveles de protena cruda oscilan entre un 31 a 34% (Ynez et al. 1983), las semillas de L angustifolius y L. albus variedad astra y multolupa, contienen un 35% protena cruda, mientras que el L.luteus contiene un 44% de protena cruda. La totalidad de las protenas presentes en la harina de lupino son relativamente ricas en lisina, aunque deficientes en aminocidos azufrados, como metionina y cistina, fenmeno que limita su inclusin en la formulacin de alimentos (Petterson, 1997). La composicin de aminocidos de las variedades de lupino cultivadas en Chile, se muestra en la Tabla 2.

Tabla 2.Composicin de aminocidos(g 16g7N) de las especies de Lupino cultivadas en Chile. Aminocidos Esenciales Arginina Fenilalanina Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Treonina Triptofano Valina No esenciales cido Aspartico cido Glutmico Alanina Cistina Glicina Prolina Serina Tirosina Modificado de Ynez et al. 1983 1 Burel et al. 1998 L. albus (var. astra) 7,8 3,5 3,1 6,7 3,7 0,3 3,9 2,7 10,6 21,5 3,1 1,0 3,8 3,5 5,3 4,4 L. albus (var. multolupa) 8,6 3,9 0,8 4,1 7,4 4,3 0,5 4,1 3,6 9,5 21,6 3,3 1,2 3,6 4,3 4,9 4,8 L. luteus 8,5 3,5 3,2 3,1 7,3 4,8 0,4 3,5 2,8 10,2 25,4 3,2 2,0 3,5 3,7 5,0 2,7 L. angustifolius 9,1 3,6 3,3 6,7 4,5 0,4 3,6 3,0 9,7 24,3 3,4 1,3 4,0 4,2 5,5 3,6 Harina de Pescado1 5,0 4,0 2,5 4,3 7,3 5,8 2,4 3,6 1,1 5,4

0,9

3,2

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El contenido de aceite en el grano, es cercano al 12%, para L.albus (variedad astra y multolupa) y L. luteus, mientras que el L. angustifolius contiene solo un 5.6% (Ynez et al. 1983). El perfil de cidos grasos en el aceite de las diversas especies de lupino se muestra en la Tabla 3.
Tabla 3.Composicin de cidos grasos de las especies de Lupino cultivadas en Chile. cidos grasos L. albus L. luteus
tr. 4,8 2,5 2,6 7,1 0,8 tr. 0,7 20,3 1,8 0,8 17,20 9,45 0,40 47,3 8,0 -

L. angustifolius

Mirstico Palmitico Esterico Araqudico Behenico Lignocerico Palmitolico Vacenico Elaidico Oleico Eicosanoico Erucico Linoleico Linolnico Eicosadienoico Eicosatrienoico Araquidnico

C 14:0 C 16:0 C 18:0 C 20:0 C 22:0 C 24:0 C 16:1 C 18:1 n7 C 18:1 n9t C 18:1 n9c C 20:1 C 22:1 C 18:2 n6 C 18:3 n3 C 20:2 C 20:3 C 20:4

0,10 7,76 1,56 1,18 3,88 0,65 0,35 2,10 1,00 49,85 4,34

0,2 11,0 3,8 0,9 1,9 0,4 0,1 0,7 4,0 33,5 0,3 < 0,01 37,1 5,3 0,4 0,2 0,0

Modificado de Petterson et al. 1997

Los cidos grasos saturados, estn compuestos principalmente por el cido palmtico (C 16:0), representando un 11% en L. angustifolius, 8% en L. albus variedad astra, 5,7 % en L albus variedad multolupa y 5.6 % en L. luteus. Tambin, dentro de este grupo es posible encontrar solo trazas de cido mirstico (C14: 0) y muy bajas cantidades el cido esterico (C18: 0). El mayor porcentaje de cidos grasos presentes en el lupino corresponde a los monoinsaturados, siendo el cido olico (C18: 1 n9c), el mas importante. Los valores de

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este cido graso varan de acuerdo a la especie, encontrndose en L. albus un 49%, en L. angustifolius un 33.5% y en L. luteus un 20.3%. En relacin a la composicin de cidos grasos poliinsaturados, la semilla de lupino contiene cantidades apreciables de cido linolico (C18: 2 n6c), entre un 17.2% en L. albus y un 47.3% en L. luteus. Adems existen niveles importantes del cido linolnico (C18: 3 n3), siendo mas abundantes en L. albus (9.5%). Las otras especies presentan porcentajes menores, aunque bastante superiores a otras leguminosas (Masson & Mella, 1985), siendo el contenido en L. luteus de un 8%, mientras que en L. angustifolus representa un 5 %. Adems de las deficiencias en los aminocidos azufrados que se menciono anteriormente, otra de las complicaciones que presenta la utilizacin del lupino en la alimentacin animal, es su contenido de alcaloides, que hacen de su semilla un alimento no palatable e incluso en algunos casos txico. Sin embargo, a travs del mejoramiento gentico se han obtenido variedades dulces con un contenido de alcaloides inferior al 0.05%, de las cuales son bien aceptadas por los peces. Diversos estudios han demostrado que el lupino presenta buena aceptacin y un gran valor nutricional como ingrediente en muchas aplicaciones dietarias en acuicultura (De la Higuera et al., 1988; Hughes, 1988; Hughes, 1991; Gouveia et al., 1993; Morales et al., 1994; Robaina et al., 1995; Burel et al., 1998; Robaina, 1998; Alarcn 2000; Burel et al. 2000; Carter & Hauler, 2000; Farhangi & Carter, 2001; Bransden et al., 2001; y Glencross et al., 2002; Glencross et al., 2003). La protena y lpidos que componen el lupino, constituye la mayor parte de la energa digerible de este ingrediente en el alimento, la protena del lupino presenta a menudo una digestibilidad superior al de otras fuentes de protenas vegetales y animales (DFWA 2001).

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Los salmnidos han sido las especies de acuicultura mas extensamente estudiadas en relacin a la utilidad del lupino como una posible fuente nutritiva (Glencross, 2001). Segn De la Higuera et al. (1998) es posible reemplazar hasta un 30% la harina de pescado por harina de lupino (suplementando lisina y metionina) y conseguir ndices de produccin y de utilizacin de la protena ptimas en trucha arcoiris. De igual forma, experimentos en salmn del atlntico (Salmo salar) muestran que el reemplazo de la harina de pescado por harina de lupino de hasta un 33% en dietas extrudas, no afecta el crecimiento de los peces (Carter et al. 2000). Estudios realizados posteriormente por Faghangi & Carter (2001), sealan que la inclusin de un 40% de lupino en la dieta de trucha arco iris no presenta efectos significativos en el crecimiento o en la utilizacin de los nutrientes. La trucha del arco iris utiliza la protena del lupino tan eficazmente como la protena de harina de pescado pero tiene una habilidad menor para utilizar la energa contenida en altos niveles de inclusin de lupino. Sin embargo, se ha comprobado que la incorporacin de altos niveles de inclusin de lupino (superiores al 50%) en dietas extrudas provocaran en trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss), un aumento en la deposicin de grasas, adems de una reduccin en el crecimiento (Burel et al. 1998). El uso de alguna clase de tratamiento trmico sobre la harina de lupino para mejorar su utilizacin digestiva y metablica por parte de los peces, no es aconsejable (De la Higuera et al., 1988; Brquez & Alarcn, 2002), lo que implica su fcil inclusin en las dietas sin afectar los procesos tcnicos de fabricacin. Al igual que en salmondeos, la harina de lupino puede ser una fuente de protena alternativa en el alimento de peces marinos. Trabajos realizados en la dorada (Sparus

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aurata) han demostrado un crecimiento similar a los alcanzados con inclusiones de soya, a igual nivel sustitucin (Robaina et al. 1995; Robaina 1998). Otra de las especies en las cuales ha sido utilizado el lupino con excelentes resultados es el rodaballo (Scophthalmus maximus). Juveniles alimentados con un 50% del inclusin de lupino no exhiben efectos adversos en el crecimiento, ni tampoco cambios en la composicin corporal (Burel et al. 2000).

2.3.

Situacin del Lupino Dulce en Chile En Chile el cultivo del lupino ocupa un lugar secundario en la agricultura, a pesar de

su relevancia regional y el potencial desarrollo que podra alcanzar. En forma silvestre existen dos especies de lupino en Chile; ellos son la yerba del traro (L. microcarpus), y el lupino andino de grano grande (L. Mutabilis), este ultimo, originario de la Zona Norte de Chile, constituyo la base de la alimentacin de las culturas precolombinas. Los primeros lupinos introducidos al pas fueron L. Angustifolius, de flor azul, y amargos, que son utilizados como abono verde en las vias a partir de los inicios del siglo pasado (von Baer, 2001). Debido a las condiciones de invierno hmedo, verano seco y suelos cidos, del Centro sur y sur de Chile, hacen emerger al lupino como una leguminosa alternativa, para cultivo en el pas (Pealoza, 1997). En 1949 se da comienzo a la introduccin de L. albus y L. luteus, dulces o de bajo contenido de alcaloides, para fines forrajeros. Solo al alcanzar una superficie superior a 10.000 ha. en 1976 el lupino fue considerado como cultivo, no diferencindose entre dulce, amargo, blanco o australiano.

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Actualmente el cultivo del lupino, se concentra en la produccin del lupino dulce (L. albus) y el lupino amargo (L. angustifolius). El primero esta en manos de agricultura empresarial y fundamentalmente destinada a la alimentacin animal. El lupino amargo por su parte, se encuentra tradicionalmente en manos de la agricultura campesina, mayoritariamente de origen mapuche, que con un nivel bajo de tecnologa y costos, lo emplean hace mas de 30 aos en la rotacin del cultivo de trigo y una fuente de ingresos. La superficie cultivada ha fluctuado entre 15.000 y 25.000 ha (Figura 1), concentrndose principalmente en la IX Regin (Banfi, 2003). Durante la temporada 2002/03 el rea de cultivo fue de 15.720 ha, observndose un repunte de 8,1%, con relacin al periodo anterior.
30.000 25.000 20.000 Hectareas 15.000 10.000 5.000 0 1989/90 1990/91 1991/92 1992/93 1993/94 1994/95 1995/96 1996/97 1997/98 1998/99 1999/00 2000/01 2001/02 2000/03 2003/04

Figura 1. Evolucin del la Superficie Sembrada con Lupino en Chile

Las fluctuaciones de superficie se han debido a problemas de enfermedades, competencia con afrecho de soya importado y sobreproduccin de lupino amargo, cuyo

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nico destino rentable es la exportacin para produccin de snack. Los rendimientos han fluctuado entre los 10 y 60 qqm/ha con un promedio de alrededor de 20 qqm/ha. (von Baer 2001). Los principales usos del lupino producido en el pas estn en el mercado interno (Pealoza, 1997), siendo empleado en la alimentacin animal, en rumiantes monogstricos, aves y peces, entre otros. Principalmente es usado por la industria avcola y, en segundo termino, para las lecheras. Se ha realizado muchos ensayos y experiencias en otros mbitos de la ganadera (corderos, cerdos, etc), pero no ha existido mayor inters en su utilizacin (ProChile, 2001). Por otro lado, ms all de las industrias que hoy consumen la mayor parte del lupino dulce en Chile, existe un gran potencial en la industria de alimentos para peces, debido al encarecimiento de la soja y sus derivados, siendo el lupino una de las opciones aparentemente viable en trminos tcnicos y econmicos para su sustitucin (Hughes, 1988; Hughes, 1991). Durante el ao 2000 se produjeron casi 600.000 toneladas de alimento para peces, un 1% del cual se estima que podra corresponder a lupino descascarado proveniente de agricultura nacional. Este tendencia de la industria acucola ha sido favorable para los precios de venta del lupino, a raz de los contratos de siembra que se han comenzado a ofrecer desde la temporada pasada para lupino dulce, por parte de esta industria, es as como en la ltima cosecha se lograron valores de $ 90 por kilo, para el lupino amargo y de $ 105 por kilo para el lupino dulce, (Banfi, 2003), lo que permite hacer proyecciones de siembra a mediano plazo del orden de las 30.000 ha de lupino para este fin (ProChile, 2001).

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2.5.

Metabolismo Lipdico en Peces: Efectos de la Inclusin de Materias Primas Vegetales El aporte de grasa es un importante factor en la alimentacin (Coll, 1991). Debido a

su elevado contenido energtico, siendo adems un importante componente del alimento de los peces (Steffens, 1987). Como fuente de grasas se utilizan los aceites vegetales y aceites de pescado, principalmente, y tambin determinadas grasas de animales, sebos, etc. Las fuentes de grasa vegetal la constituyen principalmente, los aceites de semillas oleaginosas o de cereales como el maz. (Coll, 1991) Las grasas procedentes de la alimentacin son tratadas a nivel de intestino por los fermentos pancreticos, como la lipasa, y descompuestas en glicerol y cidos grasos libres, que, con el concurso de la bilis, atraviesa la barrera epitelial del intestino y son absorbidas, pasando al espacio linftico. Los cidos grasos, se transforman nuevamente en triglicridos, se asocian al parecer a una protena fijadora y a otros compuestos lipdicos, como el colesterol y fosfolpidos, forman determinadas macromolculas y, de esta forma, son transportados por la sangre. Los lpidos, tanto los recin absorbidos a nivel intestinal como los procedentes de otros tejidos de almacenamiento, para poder incorporarse a un medio lquido, como es la sangre, tienen que atenuar su carcter hidrfobo asocindose a molculas hidrfilas, como la protena fijadora. Esta protena, y es por esto lo importante de la alimentacin artificial, tendra mas afinidad por los cidos grasos insaturados que por los saturados. Los cidos grasos de cadena corta pasan directamente, segn se cree, a la sangre a travs del hgado. Los lpidos de esta forma llegaran a los tejidos, en donde serian utilizados dando origen como producto final a energa, agua y anhdrido carbnico o, por el contrario, pueden ser almacenados como reserva. (Blanco, 1995) Los cidos grasos esenciales desempean un papel decisivo para la flexibilidad y

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permeabilidad de las membranas plasmticas, funcionalismo normal de las mitocondrias y actividad enzimtica (ATPasa). La elevada necesidad de los peces en cidos grasos poliinsaturados (AGPI) de la serie n-3, se relaciona con el bajo punto de fusin de estas grasas y puede explicarse por las condiciones trmicas inferiores en comparacin con los mamferos (Bell, 1986). Los cidos grasos poliinsaturados tienen gran importancia para el transporte de algunas vitaminas y otras grasas, son precursores de la sntesis de prostaglandinas y participan en la formacin del sistema nerviosos (Watanabe, 1982). Determinados cidos grasos poliinsaturados, son requeridos para mantener la funcin celular, estos no pueden ser sintetizados por los peces y deben ser entregados en el alimento (Sargent et al. 1986). En experiencias intensivas realizadas en truchas arco iris se comprob que al cido linolnico (C18:3 n3), era de mxima importancia para esta especie, y que superaba al cido linoleico (C18:2 n6) en lo referente a estimulacin del crecimiento y mejora de la conversin del alimento (Steffens, 1987). Al administrar cido linolnico (C18:3 n3), con los alimentos los salmnidos son capaces de transformarlo en cidos grasos poliinsaturados de cadenas largas (HUFAs), principalmente en cido eicosapentaenoico (C20:5 n-3, EPA) y cido docosahexaenoico (C22:6 n-3DHA) por medio de elongaciones y desaturacin, elevando las cantidades de HUFAs presente en los tejidos (Henderson, 1996). En cambio, la incorporacin de cido linolico (C18:2 n6), se traduce en una elevacin de las concentraciones de los cidos araquidnico (C20:4 n6), docosapentaenoico (C22:5 n6) y docosatrienoico (C20:3 n9), en el organismo de la trucha. (Steffens, 1987). Adems de un crecimiento deficiente y un mal aprovechamiento del alimento, en caso de faltar el cido linolnico (C18:3 n3), en la dieta se observan como manifestaciones

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carenciales erosiones en las aletas, sobre todo en la aleta caudal; hgado plido, aumentado de volumen y afectado por degeneracin grasa, as como miocarditis local aguda (Fernndez, 1993). A nivel de tejidos se observa un incremento en el contenido del cido oleico (C18:1 n9) (Takeuchi et al., 1996; Furuita et al., 1996). Aunque los salmnidos tienen la capacidad de utilizar los cidos grasos de la serie n-6, lo que permite ahorrar los cidos grasos de la serie n-3 (Guillaume, 1991), se ha demostrado la competencia entre los cidos grasos de ambas series (n-3 y n-6), como sustratos de varias enzimas implicadas en el metabolismo de los lpidos (Robaina, 1998), siendo los excesos de cidos grasos n-6 perjudiciales en la utilizacin de los de la serie n-3 (Storebakken et al., 2000). El principal sitio de la lipognesis en los peces es el tejido heptico, la que es regulada tanto por el nivel dietario de lpidos como por la composicin de los mismos (Robaina, 1998). Como consecuencia de su importancia en el metabolismo alimenticio, las alteraciones del hgado son muy importantes, la degeneracin lipoide del hgado, debida a la infiltracin grasa del hgado, es un hallazgo comn en los salmnidos cultivados. Debido a que el aparato digestivo se sobrecarga por una alimentacin con niveles elevados de grasas inadecuadas (Roberts et al., 1980). Un desequilibrio en la composicin de cidos grasos de la dieta afectara de forma negativa la acumulacin de grasas en el hgado (Robaina 1998). Estudios histolgicos realizados en el hgado de dorada (Sparus aurata) las cuales haban sido alimentados con dietas en donde se incluy harina de lupino fue muy similar a la de los peces alimentados con la dieta control. Se observo un pequeo nmero de gotas lipdicas, junto con alguna reduccin del glucgeno en el citoplasma de los hgados de los peces alimentados con dietas que contenan una inclusin de un 20 y un 30% de lupino

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(Robaina 1998). Al parecer

no son afectados los ndices hepatosomticos, por los

diferentes niveles de inclusin de la harina de lupino tanto en Trucha arcoiris como en Dorada (Carter et al., 2001; Robaina, 1998). Sin embargo la inclusin de altos niveles de otros tipos de harinas vegetales como la harina de arveja en las dietas de Sea bass (Dicentrarchus labrax l.) y harina de soya en Dorada evidencia claramente un aumento de los depsitos de glucgeno y lpidos en el hgado (Russell, 2001; Robaina, 1998). La composicin de los cidos grasos en los salmnidos depende, entre otras, del medio ambiente, del sexo y la edad, como igualmente de la composicin de cidos grasos contenidos en el alimento (Watanabe, 1982; Berg, 2000) siendo esta ultima de gran importancia bajo condiciones de cultivo. Es un hecho bien conocido que al utilizar altas proporciones de aceite de soya, ello produce salmones con menos sabor a pescado del que tiene el salmn que se ha producido utilizando solamente aceite de pescado. El conocimiento de la relacin entre grasas vegetales y calidad del salmn y la trucha ser muy importante en los prximos aos (Berg, 2000). Resultados obtenidos por Gomes et al. (1993) quienes sustituyeron la harina de pescado por una mezcla entre harina de arvejas y raps en dietas para trucha arcoiris, sostienen que esta mezcla puede ser utilizada en niveles de un 20% de inclusin sin que se evidencien efectos negativos en el crecimiento y la composicin de cidos grasos del msculo. Cuando se utilizan niveles de 45% de inclusin de mezcla entre harina de arvejas y raps en la dieta, se incrementa en el msculo, los cidos grasos n-6, principalmente debido a un aumento en los niveles del cido linolico (C18:2 n6), no experimentando variaciones en el contenido del cido araquidnico (C20:4 n6). Sin embargo, aunque los niveles del cido docosahexaenoico (C22:6 n3) permanecan estables, el resto de los cidos grasos de

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la serie n-3 presentaban una tendencia decreciente, afectando de esta manera la relacin n3/n-6.

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3. OBJETIVOS

3.1 OBJETIVO GENERAL

Evaluar el efecto sobre la composicin de cidos grasos del msculo y los parmetros productivos de la inclusin de distintos niveles de harina de lupino blanco (Lupinus albus) en dietas para trucha arcoiris (Oncorhynchus mykiss).

3.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

Determinar del efecto distintos niveles de inclusin harina de lupino sobre: ndices zootcnicos (crecimiento, ndice de conversin, ganancia en peso, sobrevivencia, etc.). El perfil de cidos grasos en msculo y la relacin de cidos grasos n-3/n-6. El ndice hepatosomtico y la composicin bromatolgica corporal.

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4. MATERIALES Y MTODOS

4.1

Condiciones Experimentales para la Evaluacin de las Dietas.

La experimentacin se desarrollo en la Estacin experimental Piscicultura Los Laureles; perteneciente a la Escuela de Acuicultura de la Universidad Catlica de Temuco. Se trabajo con juveniles de Trucha Arcoiris (Oncorhynchus mykiss), de un peso promedio inicial de 65.9 15.11g y de 16.3 1.47cm de longitud estndar, los que fueron mantenidos por 10 das en un estanque de 2m3 para ser aclimatados a sus nuevas condiciones de cautiverio. Durante este periodo fueron alimentados con la dieta control, la misma que fue utilizada posteriormente en el experimento. Antes de distribuir los peces en los estanques experimentales de crecimiento, se dejaron en ayuno por 48 h para ser pesados y medidos. En el bioensayo de crecimiento se dividi en dos etapas, debido al gran tamao alcanzado por los individuos, siendo utilizados 2 modelos de estanques los que se muestran en las Figuras 2 y 3. Durante las primeras 8 semanas de experimentacin se ocupo 12 estanques de fibra de vidrio circulares de 300l cubiertos con una red de nylon. Las 4 semanas restantes, los peces fueron trasladados a 12 estanques de fibra de vidrio circulares de 600l cubiertos con una tapa cnica del mismo material con un orificio para alimentacin. Los peces se distribuyeron al azar en grupos de 46 peces por estanque, a una densidad inicial de 10,7kg/m3. El abastecimiento de agua a cada estanque se realizo por gravedad con una tasa de cambio de 1.5/hora. La temperatura promedio del agua fue de 13,5 2,8C.

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Los tratamientos fueron ensayados por triplicado, la entrega de alimento fue de forma manual "ad litum" los siete das de la semana dos veces al da, en la maana y en la tarde. Diariamente se registraron las mortalidades, la temperatura y gramos de alimento consumidos en cada estanque. El ensayo tuvo una duracin de 12 semanas. Con el fin de evitar situaciones de estrs, se realizo slo un muestreo al finalizar el perodo de experimentacin, donde se registro el peso total y la longitud estndar de todos los peces en estudio. Adems se tomaron las muestras de msculo para efectuar el anlisis de cidos grasos. Para el muestreo se utiliz una balanza marca Toledo (Modelo 9094-II) de 0.1 g de precisin y un ictimetro de 0.1 cm de precisin. Los peces fueron sedados empleando en cada estanque experimental anestsico BZ-20 de Veterqumica. Para la recuperacin de los peces se incremento el flujo de agua en los estanques. El muestreo se realizo luego de 48 h de ayuno.

Figura 2. Sistema de estanques de 0,3 m3 utilizado para el crecimiento de O. mykiss, provistos con desage telescpico y cubiertos con red de nylon.

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Figura 3. Sistema de estanques de 0,6 m3 utilizado para el crecimiento de O. mykiss, provistos con desage telescpico y tapa cnica.

4.2

Dietas Fueron evaluadas 4 dietas extrudas, una dieta control y tres experimentales,

desarrolladas por Biomar Chile. Las formulaciones se realizaron mediante un programa computacional FORMAT basado en programacin lineal, considerando los niveles mnimos de aminocidos, adems de las variables de proceso implicadas para fabricar estos productos como son: mnimo porcentaje de almidn extruble y mnimo porcentaje de humedad. La formulacin y composicin proximal de las dietas se muestra en la Tabla 4. mientras que su composicin de cidos grasos se muestran en la Tabla 5. La fuente de variacin de cada dieta experimental estar dada por los niveles de inclusin de la harina de lupino. En las dietas experimentales se reemplazo en un 10, 15 y 20% de la harina de pescado por harina de lupino, asignndosele a cada una de ellas la clave con la inicial de la fuente de reemplazo seguido por el nivel de sustitucin de la misma (L10, L15 y L20).

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Se uso una dieta control con 0% de inclusin de harina de lupino, como base de comparacin de los resultados frente a los tratamientos experimentales. Todas las dietas fueron formuladas para ser aproximadamente isocalricas en energa bruta y similares en el contenido de protenas y lpidos.

Tabla 4. Formulacin y composicin de las dietas experimentales.

Dietas experimentales L10 Ingredientes (%) Harina de pescado Aceite de pescado Lupino dulce Trigo Gluten de Maz Pluma Premix Biomar Agua Composicion Materia Seca (%) Proteina (%MS) Extracto Etereo (%MS) Cenizas (%MS) Fibra (%MS) Extracto No Nitrogenado Energa Bruta (Kj/ Kg) 92,70 46,96 27,26 8,26 1,48 16,79 23,36 92,00 46,96 25,88 7,98 2,22 18,61 23,52 90,50 45,34 22,99 7,98 2,05 22,64 22,92 90,70 45,07 25,95 8,13 0,73 20,49 23,55 42,6 14,2 10 16,2 8 7 0,7 1,3 40,6 14,1 15 13,3 8 7 0,7 1,3 38 14 20 13,3 8 7 0,7 1,1 46,7 15 0 22,6 8 7 0,7 0,8 L15 L20 Control

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Tabla 5. Composicin de cidos grasos de las dietas experimentales. Control

% Lpidos cidos Grasos Saturados C12:0 cido Lurico 0,00 0,00 8,04 0,24 0,90 0,02 20,80 0,09 0,97 0,04 4,21 0,08 0,06 0,09 2,58 0,10 0,00 0,00 0,73 0,04 0,00 0,00 38,30 0,17 0,00 0,00 6,47 0,04 1,04 0,07 12,47 0,05 2,77 0,00 1,46 0,05 0,15 0,06 0,48 0,00 24,85 0,03 1,60 0,02 5,90 0,12 1,27 0,06 0,40 0,01 0,25 0,02 0,00 0,00 0,50 0,04 1,24 0,02 11,63 0,09 14,07 0,44 36,86 0,20 26,97 0,29 9,89 0,09 2,73 0,06 25,69 0,35 1,08 0,04 0,24 0,12 8,49 2,16 0,91 0,17 21,70 2,70 0,96 0,01 4,17 0,16 0,00 0,00 2,40 0,21 0,11 0,16 0,39 0,55 0,00 0,00 39,36 4,07 0,00 0,00 6,45 0,64 1,09 0,14 12,85 0,44 2,71 0,08 1,41 0,22 0,07 0,02 0,42 0,01 25,00 0,06 1,65 0,25 6,19 0,35 1,36 0,01 0,37 0,00 0,12 0,16 0,00 0,00 0,44 0,06 1,23 0,06 10,77 1,75 13,50 2,69 35,64 4,13 25,64 4,43 10,00 0,30 2,57 0,52 24,28 4,44 1,17 0,20 0,20 0,13 6,78 1,65 0,72 0,20 19,24 1,63 1,06 0,17 4,20 0,01 0,00 0,00 2,42 0,02 0,31 0,03 0,70 0,01 0,19 0,06 35,82 3,46 0,15 0,06 5,61 0,30 1,00 0,00 14,56 0,36 2,80 0,12 1,49 0,20 0,09 0,03 0,45 0,02 26,16 0,26 1,47 0,08 6,39 0,00 1,58 0,06 0,44 0,02 0,26 0,01 0,00 0,00 0,42 0,05 1,31 0,05 11,48 0,93 14,67 2,30 38,03 3,20 27,73 3,29 10,33 0,10 2,69 0,34 26,15 3,23 1,20 0,15 0,17 0,00 6,49 0,26 0,66 0,01 19,40 0,04 0,93 0,03 4,24 0,07 0,00 0,00 2,30 0,01 0,08 0,01 0,64 0,01 0,18 0,01 35,09 0,28 0,16 0,03 5,57 0,05 1,04 0,00 15,33 0,07 2,82 0,03 1,49 0,01 0,10 0,05 0,45 0,05 26,94 0,11 1,46 0,02 6,76 0,07 1,65 0,01 0,42 0,03 0,27 0,00 0,39 0,02 0,42 0,05 1,33 0,04 10,91 0,06 14,34 0,03 37,96 0,17 27,30 0,05 10,66 0,12 2,56 0,02 25,64 0,04 1,27 0,01 C14:0 cido Mirstico C15:0 cido Pentadecanoico C16:0 cido Palmtico C17:0 cido Heptadecanoico C18:0 cido Esterico C20:0 cido Araqudico C21:0 cido Henicosanoico C22:0 cido Behnico C23:0 cido Tricosanoico C24:0 cido Lignocrico Total de SAFAs cidos Grasos Monoinsaturados C14:1 C16:1 C17:1 cido Miristolico cido Palmitolico cido Heptadecenoico 25,32 0,88

L10
23,74 0,86

L15
23,63 0,57

L20
24,70 0,39

C18:1n9t cido Elaidico C18:1n9c cido Olico C20:1n9 C22:1n9 C24:1n9 cido Eicosenoico cido Ercico cido Nervnico

Total de MUFAs cidos Grasos Poliinsaturados C18:2n6t cido Linollaidico C18:2n6c cido Linolico C18:3n3 cido Linolnico C18:3n6 cido g-linolnico C20:2 cido Eicosadienoico C20:3n3 cido Eicosatrienoico C20:3n6 cido Homo--Linolnico C20:4n6 cido Araquidnico C20:5n3 cido Eicosapentaenoico C22:6n3 cido Docosahexaenoico Total de PUFAs n-3 n-6 n-3/n-6 n-3 HUFAs C18:1n9*/DHA

Cada valor es el promedio su desviacin estndar (n = 6 replicas). * Incluidos los cidos elaidico y olico.

- 25 -

4.3

PARMETROS BIOQUIMICOS UTILIZADOS

4.3.1

Anlisis de la Carcasa Para el anlisis de la composicin corporal de los peces, se sacrificaron 15 peces

elegidos al azar al inicio de la experimentacin y 3 individuos por rplica al finalizar el periodo experimental con sobredosis de anestsico (BZ-20 de Veterqumica). En el laboratorio se clasificaran e identificaran las muestras de pez completo. Luego de un secado a 65C por 48 h; las muestras fueron trituradas en una moledora elctrica (Moulinette modelo 320) hasta obtener una harina fina, la que fue envasada y mantenida en un freezer a -20C hasta su posterior anlisis. 4.3.2 Perfil de cidos grasos totales en msculo Al finalizar el experimento, se sacrificaron 3 ejemplares por cada replica, para realizar el anlisis de determinacin del perfil de cidos grasos. Se extrajo muestras de msculo dorsal (sin espinas) las cuales fueron homogenizadas y almacenadas a - 40 C para la posterior determinacin de los cidos grasos totales.

- 26 -

4.4

PARMETROS BIOLGICOS UTILIZADOS

4.4.1

Rendimientos productivos Al trmino del experimento, se evalu el crecimiento en peso y longitud estndar en

cada estanque, de igual forma se determino el incremento en biomasa, factor de conversin, tasa de crecimiento especfico y el factor de crecimiento termal usando las siguientes ecuaciones:

% de Incremento en Peso = (WF WI) x 100 WI Tasa de Crecimiento Especfico (SGR) = (ln WF ln WI) D x100 Coeficiente de Crecimiento Termal (GF3) = [(WF - WI )]/ [T x D] x 100 Donde: WF = Peso Final WI = Peso Inicial T = Temperatura del agua C D = Numero de das 4.4.2 Efectividad del alimento Por medio del factor de conversin (FC) se evalu la eficacia del alimento en relacin al peso corporal ganado. De igual forma para determinar el rendimiento de las dietas se calculo la eficiencia del factor de conversin (EFC) expresado como porcentaje. Factor de Conversin (FC) = Alimento entregado Incremento en peso

- 27 -

Eficiencia del Factor de conversin (EFC) = Incremento en peso *100 Alimento entregado 4.4.3 ndice hepatosomtico Se registr en los peces sacrificados al finalizar el experimento, el peso corporal total y el peso del hgado, determinando el ndice hepatosomtico (IHS) mediante la siguiente expresin: IHS= Peso hgado (g) x 100 Peso pez (g)

4.5

MTODOS ANALTICOS DE COMPOSICIN

A continuacin se describen los mtodos de anlisis que se utilizaron en las diferentes muestras. Todos los anlisis de ingredientes, dietas y tejido; se realizaron por duplicado segn las tcnicas del mtodo AOAC (1998). Los resultados se entregaron en base seca. 4.5.1 Humedad La humedad de las muestras se determin por diferencia de peso (balanza analtica, Denver Instrument Company, AA-200) entre una masa inicial a temperatura ambiente y aquella resultante de la muestra llevada a desecacin en estufa (estufa WTB Binder) a 105C hasta peso constante. % Materia seca = Masa muestra seca 105C x 100 Masa inicial Muestra % Humedad = 100 - % Materia seca

- 28 -

4.5.2 Ceniza El contenido de ceniza se determin mediante la incineracin de las muestras en horno mufla (VULCAN A-550) a 550C por tres horas, hasta peso constante; fue determinado por diferencia de peso en balanza analtica. % Cenizas totales = Masa final x 100 Masa Inicial

4.5.3 Protenas El contenido de protenas (%N x 6.25) se determin a partir de la composicin de nitrgeno total de las muestras, mediante la tcnica Kjeldhal. El mtodo consiste en la digestin de las muestras con cido sulfrico concentrado a 400C en presencia de un catalizador utilizando un digestor Velp Scientifica DK6, seguido de una destilacin en un equipo semi automtico Velp Scientifica UDK12A, con Na(OH) al 40% en presencia de una solucin indicadora con cido brico al 4%. Por ltimo se realiza una titulacin con HCI 0.1 N. La conversin a porcentaje de protena bruta se realizo mediante la siguiente formula, Protenas (%)= (Valor HCI ml - Valor media blanco ml) x 0.1 x 14.007 x 6.25 x 100
Peso de la muestra (mg)

4.5.4 Extracto Etreo El contenido de lpidos totales de las muestras se determino mediante el mtodo de extraccin en caliente de grasa, con equipo Soxhlet usando ter de petrleo (40 - 60), % Extracto etreo = Masa muestra final x 100 Muestra masa inicial 4.5.5 Fibra El contenido de fibra se determino mediante una digestin cida de las muestras desgrasadas con H2SO4 (0,225N), seguida de una digestin bsica con NaOH (0,313N) en

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un sistema de digestin VELP. A continuacin el residuo obtenido se seco en una estufa a 105C hasta peso constante, fue pesado y calcinado a 550C durante 30 minutos en mufla para pesar al final el residuo restante. % Fibra = Peso de la muestra seca a 105C - Peso de la muestra calcinada a 550C x100 Peso de la muestra desgrasada

4.5.6 Determinacin del perfil de cidos grasos totales Las muestras de msculo dorsal fueron maceradas hasta lograr una masa homognea. A continuacin se procedi a la extraccin de los lpidos, a partir de 0.1g de muestra, utilizando como solvente cloroformo: metanol (2:1) y como antioxidante butilhidroxitolueno (BHT ) 0.01%. De acuerdo a los procedimientos descritos por Folch et al. (1957). La determinacin del perfil de cidos grasos del msculo, como esteres metlicos se realiz en un cromatgrafo de gases Hewlett Packard modelo HP6890 GC System, equipado con un detector FID y una columna SP2380 (30m de largo, 0.25mm dimetro interno, 0.20m espesor de film), usando el Helio como gas trasportador. Los cidos grasos fueron identificados por referencia del estndar Superco-37 (para 37 cidos grasos) y cuantificados mediante el software HPCHEM Stations, siendo expresaron como porcentaje de rea, de acuerdo al total de los cidos grasos identificados.

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4.6

TRATAMIENTOS ESTADSTICOS DE LOS DATOS

Para el anlisis estadstico de los datos, se utilizo el programa StatMost (Statistical Analysis and Graphics versin 3.0). Los datos se sometieron a anlisis de varianza de una va (ANOVA) y las diferencias entre medias se comparo mediante por el test de Tukey con un intervalo de confianza del 95% (P< 0.05). Previo a la aplicacin de la ANOVA se verifico el supuesto de homogeneidad de varianzas, a travs del test de Bartlett. La normalidad de los datos se comprob mediante la prueba Kolmogorov-Smirnov. En los datos expresados como porcentajes se aplico la transformacin arcosenx para lograr homocedasticidad.

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5. RESULTADOS

5.1. Crecimiento y rendimientos productivos. Durante las 12 semanas de experimentacin, todas las dietas experimentales fueron bien aceptadas por los peces. La sobrevivencia fue cercana al 95% para todos los tratamientos. La Tabla 6 muestra los resultados obtenidos por los diversos factores productivos estudiados: tasa de crecimiento diario, incremento en peso, incremento en biomasa, alimento entregado, factor de conversin, ndice hepatosomtico, tasa de crecimiento especifico (SGR) y el coeficiente de crecimiento termal (GF3).

Tabla 6. Crecimiento y rendimientos productivos en trucha arcoiris alimentadas con las diferentes dietas experimentales.
Porcentaje de Lupino Blanco en la dieta Parmetro 0% 10% 15% 20%

Peso Inicial (g) 65,90 15,11 65,90 15,11 65,90 15,11 65,90 15,11 Peso Final (g) 236,05 56,09 255,72 59,93 242,08 67,22 260,45 57,39 Biomasa Inicial (g) 2919,23 36,4 2874,00 64,55 2875,77 64,05 3446,30 490,43 Biomasa Final (g) 10229,00 93,96 10807,00 1022,87 10086,67 188,59 10939,00 757,14 Incremento en Biomasa (g) 7762,87 131,19 8440,50 576,1 10939,00 757,14 7865,08 292,14 % Incremento en Peso 258,23 15,40 281,32 15,40 268,47 28,06 295,27 35,38 Consumo diario de alimento(g) 98,74 9,73 100,81 4,88 104,98 6,90 95,17 1,23 FC 1,07 0,12 1,0 0,03 1,16 0,04 1,02 0,03 EFC 94,28 10,49 99,62 2,8 86,54 2,7 98,37 2,8 S.G.R. 1,52 0,02 1,59 0,05 1,55 0,09 1,63 0,11 G.F.3 0,17 0,00 0,18 0,01 0,17 0,01 0,19 0,02 IHS 1,1 0,27 1,0 0,18 1,1 0,12 1,1 0,23 Los valores son el promedio con una desviacin estndar de tres replicas.

El uso del lupino en dietas extrudas, independiente de su nivel de incorporacin (10%, 15% y 20%), presenta una performance similar de crecimiento a la obtenida por la

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dieta control. El peso medio final para las dietas se distribuyo entre los 236g (Dieta Control) a 260g (Dieta L20), no evidencindose diferencias significativas (P>0.05). El crecimiento de los peces expresado en trminos de incremento en peso, no presento diferencias estadsticas, los valores alcanzados fueron mayores al 258%. De igual modo, cuando se compararon los incrementos en biomasa no se encontraron diferencias entre los peces alimentados con las dietas experimentales y el control. En cuanto al consumo diario de alimento no se observaron diferencias, mostrando valores muy homogneos para todas las dietas. El factor de conversin (FC) fue similar para todos los tratamientos, encontrndose valores medios de 1.0 para las dietas L10, L20 y C00 y de 1.16 para la dieta L15. La eficiencia del factor de conversin (EFC), presenta valores que oscilan entre 87% y el 99,62%, siendo el menor el obtenido por la dieta L-15, como respuesta al mayor FC presente por esta dieta, sin embargo no presentan diferencias significativas (P>0.05) con los dems tratamientos. Al termino del experimento la tasa de crecimiento especifica (SGR) del grupo control fue de 1.52, valor menor en relacin al resto de los tratamientos; 1.59, 1.55 y 1.63 para las dietas L-10, L-15 y L-20 respectivamente. Sin embargo estas diferencias no son estadsticamente significativas (P>0.05). Los valores del factor de crecimiento 3 (GF3), resultaron semejantes (P>0.05). Estos fluctuaron entre los 0.17 y 0.19, resultado semejante al obtenido por la dieta control. Los ndices hepatosomticos (IHS), no difirieron entre los peces alimentados con los distintos tratamientos, valores cercanos al 1.0 %, no obstante estos valores son menores significativamente en relacin a los tomados al iniciar el experimento (Figura 4).

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2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 Inicial Control L10 L15 L20

Figura 4. ndices Hepatosomticos calculados para los diferentes tratamientos.

5.2. Composicin corporal de los peces La composicin corporal inicial y final de los peces utilizados en el presente experimento son mostrados en la Tabla 7. En general, la inclusin de la harina de lupino en la racin alimenticia, no afecto en forma significativa la composicin de los peces (P>0.05). Los resultados de materia seca obtenidos fueron bastante homogneos entre los diferentes tratamientos (P>0.05). De igual manera, el contenido de cenizas no evidenci diferencias entre los grupos (P>0.05), obteniendo valores entre un 8.30% (L10) y un 7.01% (L20). Al comparar los resultados de protena, no se encontraron diferencias estadsticas (P>0.05), entre los peces alimentados con las dietas experimentales y la dieta control. El grupo alimentado con un 10% de lupino presento el mayor porcentaje de protena (56.6%), mientras el menor fue la dieta L20 (52.12%). Por otra parte, la composicin corporal

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lipdica presenta valores similares para todos los tratamientos (P>0.05), estos oscilaron entre 28.85% (L15) y 33.4% (L20). Al finalizar las 12 semanas de experimentacin, todos tratamientos presentan variaciones relativas, respecto a la composicin corporal inicial, mostrando una disminucin en el contenido de materia seca y cenizas (P<0.05), producto de un aumento en el contenido de agua durante este periodo.

TABLA 7. Composicin corporal de Trucha Arcoiris (Oncorhyncus mykiss) alimentado con diferentes dietas experimentales.

Inicial

Dieta Control

L-10

L-15

L-20

23,77a 15,83 2,86b 13,62 1,38b 15,63 0,94b 15,21 1,00b Materia seca a a a a 66,74 55,89 7,03 56,63 6,24 55,91 4,28 52,12 1,30a Protenas 21,16a 29,81 8,64a 33,30 6,69a 28,85 6,29a 33,40 4,77a E. Etreo a b ab ab 9,39 7,22 0,38 8,30 0,44 7,84 0,77 7,01 0,44b Cenizas Cada valor es el promedio su desviacin estndar (n = 3 replicas). a,b Valores en una misma fila con distinto superndice son significativamente diferentes (P<0.05).

5.3. Composicin de cidos grasos en el msculo. El perfil de cidos grasos contenidos por el msculo de trucha arcoiris; en su estado inicial como aquellas que fueron alimentadas con las dietas: Control, L10, L15 y L20; se muestran en la Tabla N 8. Como se aprecia en la Figura 5a, la incorporacin de la harina de lupino, no afecta el porcentaje de cidos grasos saturados totales (SAFA), no encontrando, diferencias con el control y la cantidad contenida inicialmente (P>0.05). Dentro de este grupo, el cido palmtico (C16:0), se presenta en mayor cantidad, observndose una ligera tendencia a disminuir, conforme aumenta el nivel de lupino en el alimento, sin embargo esta no es significativa (P>0.05).

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Tabla 8. Perfil de cidos grasos presentes en el msculo de trucha arcoiris alimentado con las diferentes dietas experimentales. Inicial
% Lpidos cidos Grasos Saturados C12:0 cido Lurico C14:0 cido Mirstico C15:0 cido Pentadecanoico C16:0 cido Palmtico C17:0 cido Heptadecanoico C18:0 cido Esterico C20:0 cido Araqudico C21:0 cido Henicosanoico C22:0 cido Behnico C23:0 cido Tricosanoico C24:0 cido Lignocrico Total de SAFAs cidos Grasos Monoinsaturados C14:1 cido Miristolico C15:1 cido Pentadecenoico C16:1 cido Palmitolico C17:1 cido Heptadecenoico C18:1n9t cido Elaidico C18:1n9c cido Olico C20:1n9 cido Eicosenoico C22:1n9 cido Ercico C24:1n9 cido Nervnico Total de MUFAs cidos Grasos Poliinsaturados C18:2n6t cido Linollaidico C18:2n6c cido Linolico C18:3n3 cido Linolnico C18:3n6 cido g-linolnico C20:2 cido Eicosadienoico C20:3n3 cido Eicosatrienoico C20:3n6 cido Homo--Linolnico C20:4n6 cido Araquidnico C20:5n3 cido Eicosapentaenoico C22:2 cido Docosadienoico C22:6n3 cido Docosahexaenoico Total de PUFAs n-3 n-3 HUFAs n-6 n-3/n-6 C18:1n9*/DHA 1,30 0,36a 0,00 0,00a 3,03 0,62a 0,00 0,00a 28,24 5,00a 0,00 0,00a 7,06 0,91a 0,00 0,00a 0,67 0,15a 0,00 0,00a 0,00 0,00a 0,00 0,00a 39,01 6,68a 0,00 0,00a 0,00 0,00a 3,62 0,33a 0,00 0,00a 14,12 0,44a 2,83 0,52a 0,89 0,19a 0,00 0,00a 0,00 0,00a 21,45 0,21a 0,00 0,00a 6,65 0,11a 1,00 0,01a 0,00 0,00a 0,63 0,21a 0,00 0,00a 0,00 0,00a 2,17 0,93a 6,73 0,04a 0,00 0,00a 22,37 7,69a 39,54 6,89a 30,10 7,72a 29,10 7,73a 9,44 0,83 3,24 1,10a 0,81 0,28a

Control
2,25 1,85a 0,10 0,17a 5,89 0,42b 0,61 0,24b 28,13 2,97a 0,69 0,10b 6,41 1,43ab 0,24 0,12b 0,89 0,09b 0,38 0,17ac 0,67 0,20b 0,00 0,00a 44,00 4,67a 0,25 0,24a 0,00 0,00a 5,94 0,64b 0,80 0,06b 17,06 0,78b 2,81 0,11a 1,33 0,68a 0,00 0,00a 0,40 0,06b 28,59 1,64b

L10
4,34 0,78a

L15
4,66 2,08a

L20
5,34 4,07a 0,06 0,08a 5,43 0,59b 0,60 0,08b 21,78 2,29b 0,58 0,14b 4,47 0,65b 0,33 0,08b 1,25 0,13b 0,15 0,12b 0,95 0,10b 0,00 0,00a 35,60 2,70a 0,00 0,00a 0,02 0,05a 6,33 0,68b 0,84 0,15b 19,92 1,02c 3,19 0,14a 1,85 0,21a 0,32 0,49a 0,23 0,24b 32,69 2,11b

0,05 0,09a 0,04 0,09a 6,41 0,55b 5,70 0,49b b 0,54 0,32 0,61 0,06b ab 25,64 1,19 22,88 0,99ab b 0,84 0,31 0,75 0,44b a 4,98 0,53 4,68 0,28b b 0,32 0,04 0,27 0,15b 1,00 0,05b 1,21 0,11b acb 0,23 0,12 0,11 0,12bc b 0,82 0,05 0,89 0,10b a 0,05 0,12 0,18 0,16a a 38,91 2,09 37,31 1,09a 0,24 0,30a 0,17 0,22a 6,19 0,36b 0,84 0,05b 16,95 1,14b 2,88 0,08a 1,55 0,17a 0,02 0,05a 0,36 0,21b 29,20 1,50b 0,05 0,12a 0,11 0,15a 6,71 0,47b 0,93 0,08b 19,25 1,14bc 2,99 0,07a 1,34 0,67a 0,00 0,00a 0,37 0,17b 31,74 1,83b

0,80 0,08b 0,86 0,08b 0,73 0,43b 0,95 0,17b bc b bc 3,54 0,26 3,42 0,18 3,85 0,21 4,10 0,26c a a a 0,91 0,44 0,85 0,04 1,19 0,23 1,19 0,10a a a a 0,40 0,22 0,23 0,12 0,13 0,15 0,16 0,06a 0,63 0,13b 0,63 0,16ab 0,45 0,16ab 0,36 0,07ab a a a 0,20 0,31 0,08 0,18 0,06 0,10 0,07 0,08a ab b ab 0,31 0,26 0,48 0,26 0,35 0,20 0,37 0,22ab a a a 1,05 0,06 0,86 0,38 1,12 0,18 0,82 0,35a a a a 6,08 1,01 6,68 0,43 7,46 0,28 7,46 0,57a 0,06 0,15a 0,01 0,02a 0,00 0,00a 0,00 0,00a b ab ab 13,43 2,92 15,82 1,52 15,61 1,62 16,24 1,64ab bc bc bc 27,41 3,43 29,91 1,72 30,95 1,51 31,71 2,13ac b b b 20,62 3,53 23,43 1,81 24,32 1,81 24,95 1,90b b b b 19,71 3,84 22,58 1,81 23,13 1,72 23,76 1,87b 6,73 0,17 6,48 0,18 6,63 0,64 6,76 0,31 a a a 3,07 0,53 3,62 0,35 3,71 0,60 3,69 0,21a 1,53 0,30bc 1,27 0,17ac 1,44 0,23bc 1,44 0,16bc

Cada valor es el promedio su desviacin estndar (n = 6 replicas). a,b,c,d Valores en una misma fila con distinto superndice son significativamente diferentes (P<0.05). * Incluidos los cidos elaidico y olico.

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El porcentaje total de cidos grasos monoinsaturados (MUFA), no presenta diferencias entre las dietas experimentales y el control. El cido elaidico (C 18:1 n9t), evidencia un incremento significativo (P<0.05), como respuesta a la inclusin de la harina de lupino, siendo la dieta L20 la que presenta una mayor cantidad de este cido graso, existiendo diferencias con el control y la dieta L10 (P<0.05), no obstante su contenido es similar al encontrado en el msculo de los peces alimentados con la dieta L15 (P>0.05). Para el cido oleico (C18:1 n-9c), el porcentaje contenido en los msculos parece ser independiente de las dietas, mantenindose valores homogneos entre los distintos tratamientos (P>0.05). Cuando se compararon los porcentajes totales de cidos grasos monoinsaturados, evaluados al final del experimento, independiente al tratamiento, se observo un aumento significativo (P<0.05), en relacin al porcentaje presente en el msculo inicialmente (Figura 5b); debido al aumento significativo en la cantidad de los cidos Palmitolico (C16:1) y elaidico (C18:1n9t). La cantidad total de los cidos grasos poliisaturados (PUFA), presenta una ligera tendencia a incrementarse conforme el nivel de incorporacin de lupino en el alimento aumenta (Figura 5c). Este comportamiento es causado por los incrementos en los cidos linolnico (C18:3 n3), linolico (C18:2 n6) y Docosahexaenoico (C22:6n3), sin embargo en ningn caso fue significativo (P>0.05). En general, los n-3 PUFA obtuvieron valores similares (P>0.05), entre los tratamientos dietarios. En los peces que recibieron alimento con lupino, el porcentaje de cido linolnico (C18:3 n3), oscila entre 0.85% y 1.19%, siendo similar a los encontrados en el grupo control (Fig. 6b). As mismo, los porcentajes del cido eicosapentaenoico

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(EPA; C 20:5 n3), no difieren estadsticamente (P>0.05), el msculo alcanzo valores de 6.08% en la Dieta Control y 7.5% en las Dietas L15 y L20 (Fig. 6d). El contenido del cido docosahexaenoico (DHA; C22:6 n3), en el msculo se mantiene constante para todos los grupos (Fig. 6e), no presentando diferencias significativas (P>0.05), no obstante el porcentaje contenido en los msculos de los peces alimentados con lupino fue ligeramente superior al contenido en los respectivos alimento, aunque no es significativo (P>0.05). Para ninguno de los cidos grasos de la serie n-3, se observaron diferencias (P>0.05) entre su contenido inicial y final . La cantidad total de cidos grasos de la serie n-6, en el msculo se incrementa levemente conforme se incrementa el porcentaje de lupino en la dieta, de 6.48% (L10) a 6.78% (L20), no obstante esta tendencia no es estadsticamente significativa (P>0.05). La cantidad de cido linolico (C 18:2 n6c), en todos los grupos experimentales no presenta diferencias con el control (Fig. 6a). No obstante, existe diferencias significativas (P< 0.05), entre aquellos que alcanzaron un menor valor (3.42 %) perteneciente a la dieta L10, y los que lograron un valor mayor (4.10%), grupo alimentado con la dieta L20.

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a)

Contenido de Acidos Grasos Saturados Totales (SAFAs) en el musculo de Trucha Arcoiris

60 50

% de Area

40 30 20 10 0 Inicial Control L-10 Dietas L-15 L-20

b)

Contenido Acidos Monoinsaturados Totales (MUFAs) en el musculo de Trucha Arcoiris

40 30 % de Area 20 10 0 Inicial Control L-10 Dietas L-15 L-20

c)
50 40

Contenido de Acidos Grasos Poliinsaturados totales (PUFAs) en el musculo de Trucha Arcoiris

% de Area

30 20 10 0 Inicial Control L-10 L-15 L-20

Dietas

Figura 5. Perfil de cidos grasos totales presentes en el msculo de Trucha Arcoiris (Oncorhyncus mykiss), al comienzo del experimento y aquellos alimentados con las diferentes dietas. Cada columna representa la media desviacin estndar.

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El porcentaje mayor de cido araquidnico (C20:4n6) corresponde a la dieta L15, sin embargo no es significativamente diferente cuando se compara con los otros tratamientos (Fig. 6c), incluido el control (P>0.05).

a)
8,0 7,0 6,0 5,0 4,0 3,0 2,0 1,0 0,0

Contenido de Acido Linolico (C18:2n6c) en el Musculo de O. mykiss

b)
1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0

Contenido de Acido Linolnico (C18:3 n3) en Musculo de O. mykiss

% de Area

INICIAL

C00

Dietas

L10

L15

L20

% de Area

INICIAL

C00

Dietas

L10

L15

L20

c)
3,5 3,0

Contenido de Acido Araquidnico (C20:4n6) en el Musculo de O. mykiss

d)
9,0 8,0 7,0 6,0 5,0 4,0 3,0 2,0 1,0 0,0

Contenido de Acido Eicosapentanoico (C20:5n3) en el Musculo de O. mykiss

2,0 1,5 1,0 0,5 0,0

INICIAL

C00

L10
Dietas

L15

L20

% de Area

2,5 % de Area

INICIAL

C00

Dietas

L10

L15

L20

e)
35 30 25
% de Area

Contenido de Acido Docosahexanoico (C22:6n3) en el Musculo de O. mykiss

20 15 10 5 0

Figura 6. Concentraciones de cidos grasos esenciales (EFAs) observados en el msculo de Trucha Arcoiris (O. mykiss) en su estado inicial, como para las diferente dietas. Cada columna representa la media desviacin estndar.
INICIAL C00
Dietas

L10

L15

L20

El contenido de n-6 PUFA en el msculo de los peces alimentados tanto, con las dietas experimentales como con el control presenta porcentajes menores a la contenida inicialmente en el msculo. Este es el caso de los cidos grasos esenciales (EFAs) linolico

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y araquidnico cuyos porcentajes presentan diferencias significativas (P<0.05) en relacin a los contenidos inicio del experimento (Figuras 6a y 6c). Por otro lado como respuesta, a los distintos alimentos ensayados, aparecen nuevos cidos grasos de la serie n 6 en el msculo, tales como los cidos linollaidico (C18:2 n6t), g-linolnico (C18:3 n6) y el homo linolnico (C20:3 n6), modificando su perfil inicial. La relacin n 3/n 6 PUFA en el msculo, no presento diferencias estadsticas (P<0.05) entre los tratamientos y el control, de igual forma que para el coeficiente calculado inicialmente. Los valores alcanzados fueron superiores a 1.0 denotando la abundancia de la serie n-3 sobre la n-6. Cuando se compararon los valores resultantes de la relacin C 18:n9/ DHA en el msculo, estos muestran valores semejantes (P>0.05), entre cada uno de los grupos experimentales y el control. Los valores variaron entre 1.27 y 1.53, lo que sugiere un dficit en las EFAs, debido al incremento de C 18:1 n9. No obstante, estos ndices fueron significativamente mayores (P<0.05), al momento de ser comparados con el coeficiente inicial del msculo.

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6. DISCUSIN
El presente estudio demuestra el potencial de la harina de lupino para ser utilizada en el alimento comercial para salmnidos, coincidiendo con resultados bastante satisfactorios de una gran cantidad de investigaciones conducidas en este tema (De la Higuera et al., 1988; Hughes, 1988; Hughes, 1991; Gouveia et al., 1993; Morales et al., 1994; Robaina et al., 1995; Burel et al., 1998; Robaina, 1998; Alarcn 2000; Burel et al. 2000; Carter & Hauler, 2000; Farhangi & Carter, 2001; Bransden et al., 2001; y Glencross et al., 2002; Glencross et al., 2003). Los niveles de reemplazo de la harina de pescado por lupino blanco en las dietas evaluadas son menores al 20%, valores relativamente bajos, comparado con aquellos utilizados en otros trabajos. De acuerdo con las primeras investigaciones realizadas por De la Higuera et al. (1988), la inclusin de niveles menores a un 30 % de Lupinus albus en el alimento para trucha arcoiris no afecta los ndices de crecimiento. No obstante, Trabajos posteriores Hughes (1991), Farhangi & Carter (2001) y Bransden et al., (2001), con distintas especies de semillas de lupino; aumentan este porcentaje de inclusin a un 40 % sin causar efectos significativo sobre el crecimiento. Por su parte, Burel et al (1998) y Glencross (2002) han usado niveles aun mayores, al incluir un 50% de lupino en la formulacin del alimento sin evidenciar algn efecto sobre los rendimientos productivos de los peces. Esta clara tendencia a extender el porcentaje de incorporacin del lupino se debe al desarrollo de nuevas variedades de semillas ms ricas en aminocidos azufrados (Glencross et al..; 2003) y con un menor contenido de alcaloides (Petterson; 2000). En trminos generales los crecimientos obtenidos por los peces alimentados con lupino, independientes de su nivel de inclusin, son similares a los conseguidos por la dieta

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control. La misma tendencia es compartida entre las diversas investigaciones llevadas a cabo en el uso de la harina de lupino como sustituto de la harina de pescado en la formulacin de dietas para Salmnidos (Alarcn 2000; Borquez & Alarcn, 2002; Burel et al. 1998 Hughes, 1991; Farhangi & Carter, 2001; Bransden et al., 2001 Carter & Hauler, 2000; Gouveia et al., 1993 y Glencross et al., 2002). En donde incluso, dietas con inclusiones de lupino han reportado ndices de crecimiento superiores a los logrados por aquellas a base de harina de pescado. La tasa de crecimiento de los peces expresada mediante el ndice de crecimiento especifico (SGR), no presentaron diferencias entre los tratamientos. Esto se debe a la capacidad de adaptacin que tiene la trucha arcoiris a dietas con protenas vegetales dentro del primer mes de alimentacin (Refstie et al 1997). No obstante, investigaciones realizadas previamente en otros experimentos, reportan valores de SGR mayores a los conseguidos en el presente experimento. Peces alimentados con dietas que contenan distintas leguminosas obtuvieron SGR superiores a la dieta control, a partir de harina de pescado. Los mejores coeficientes, cercanos a 2.12 %, fueron alcanzados por el grupo de trucha arcoiris

alimentado con inclusiones de lupino (Gouveia et al., 1993). De igual manera Morales et al. (1994) menciona valores de SGR similares al utilizar lupino en el alimento, tanto en relacin con otros ingredientes vegetales, como tambin con harina de pescado. Al calcular la tasa de crecimiento, utilizando el coeficiente de crecimiento termal (GF3), estos coincidieron con los valores normales reportados en bibliografa para trucha arcoiris, los cuales se sitan entre 0.153% y 0.203% (Bureau & Cho; 1999), mantenindose constantes entre los distintos grupos no observndose diferencias, lo cual sugiere que los valores de GF3 fueron independientes a las dietas ensayadas. Igualmente, Caballero et al. (2001) utilizando niveles de reemplazo de un 50% de aceite de pescado, por distintas

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fuentes de aceites vegetales, registraron similar comportamiento de independencia al alimento en trucha arcoiris. Por otro lado, trabajos en sustituciones con harinas vegetales no han demostrado efectos sobre el GF3. Glencross et al. (2002), al incluir en el alimento de trucha arcoiris un 50% de lupino amarillo (Lupinus lateus), logr GF3 similares al utilizar un alimento comercial. En dietas para salmn del atlntico, Campbell et al. (2001), al usar torta de maravilla en un nivel mximo de 21%, no mostraron diferencias en el GF3 al compararlo con el control. Sin embargo, cuando en la racin se reemplazo el contenido de soya; por un 10% de harina de raps, este tuvo un dramtico efecto negativo en el apetito de los peces y por ende un menor GF3, que despleg el resto de los alimentos. Sin embargo, en la bibliografa citada ostenta GF3 superiores, prximos a un 0.39%. Los altos GF3 comentados anteriormente, no pueden ser atribuidos solamente a la calidad de las dietas (Glengloss et al., 2002), ya que este ndice de crecimiento es dependiente de distintos factores como: la especie, stock gentico, temperatura y otros factores ambientales (Bureau & Cho, 1999). Si bien diversos autores no encontraron efectos adversos al utilizar al utilizar substituciones parciales de lupino menores a un 50% (Alarcn 2000; Burel et al. 1998 Hughes, 1991; Farhangi & Carter, 2001; Bransden et al., 2001 Carter & Hauler, 2000; Gouveia et al., 1993 y Glencross et al., 2002), De la Higuera et al. (1988), observa un aumento en la dispersin de los pesos individuales al finalizar el periodo de experimentacin conforme se incrementa el nivel de harina de lupino, presumiblemente debido a una escasa o ausente actividad de alimentacin. Sin embargo, los resultados del presente estudio no reflejan dicha conducta siendo los pesos finales bastante homogneos entre los grupos.

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Por otro lado, los buenos niveles de ingesta logrados por las dietas con harina de lupino concuerdan con aquellos descritos previamente, a pesar de que el incremento en el contenido de lupino en las dietas reporta una baja ingesta de alimento debido una mayor dificultad de adaptacin por parte de los peces a las propiedades organolpticas de cada dieta (De la Higuera 1988). En truchas se ha observado un pobre crecimiento al ser alimentadas con un 70% de lupino, como resultado de las pobres ingestas, adems de una supresin de la tasa metablica, producto de factores antinutricionales del tipo antitiroideal presentes en la harina de Lupinus albus (Burel et al., 1998). En contraste con el uso de otras harinas vegetales, la harina de lupino presenta factores antinutricionales, como los alcaloides que podran contribuir a una mala palatabilidad por parte de los peces (Tacon; 1995), afectando la ingesta del alimento. Sin embargo Morales et al. (1994) reporta un mayor consumo de alimento, en dietas que contena lupino, comparadas con otras fuentes vegetales usadas comnmente en la formulacin de alimentos para salmnidos. Aunque la ganancia en peso generalmente decrece con mayores niveles de inclusin de lupino. Los resultados obtenidos no muestran diferencias entre cada una de las dietas, debido a los bajos niveles de inclusin. De la Higuera et al. (1988), Farhangi & Carter (2001) y Hugues (1991) mencionan que solo inclusiones de Lupinus albus sobre un 40% en dietas suplementadas con aminocidos, disminuye la ganancia en peso en trucha arcoiris. La cuantificacin de la eficiencia del alimento, mediante el factor de conversin (FC), revela que el valor nutricional de las inclusiones de lupino es semejante al control, observndose bajos FC. Similar, comportamiento es reportado por otros autores previamente (De la Higuera et al; 1988, Gouveia et al.; 1991, Alarcn; 2000, Carter & Hauler; 2000, Farhangi & Carter; 2001, Bransden et al. 2001,) en donde los valores fueron cercanos a 1,0.

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Los valores del FC estn estrechamente relacionados con la digestibilidad y utilizacin metablica de las dietas (Morales et al., 1994). Por tanto el FC se incrementa con el aumento en el nivel de inclusin de lupino; sin embargo la incorporaron de lupino en niveles entre un 10% y un 50% no presenta diferencias (Burel et al.; 1998), encontrndose un FC optimo, con un nivel de inclusin de un 40% (Farhangi & Carter, 2001). Por otro lado un mayor FC puede limitar la inclusin de lupino en alimentos utilizados en sistemas de produccin intensivos, debido a que estos deterioran la calidad de agua (Burel et al., 2000). Estos efectos en el aumento del FC, son apreciados en truchas arcoiris alimentadas con dietas que contenan un 70% de lupino (Burel et al. 1998). El uso de leguminosas y cereales en la nutricin de peces, puede tener efectos adversos sobre el hgado, despus de largos periodos de alimentacin, debido a una tendencia a incrementar los depsitos de glicgeno (Russell et al. 2001). Fanhargi & Carter (2001) advierten una mayor actividad de gluconeogenesis en el hgado cuando se incrementa los niveles de inclusin de lupino. De manera contraria, Russell et al. (2001) reporta que ante un incremento en la inclusin de harina de arvejas en la dieta, los ndices hepatosomticos (IHS), se reducen progresivamente. En este estudio los IHS, fueron similares para los diferentes tratamientos. Anlogos resultados son encontrados cuando se increment gradualmente la inclusin hasta niveles de un 50% (Fanhargi & Carter 2001). Estos IHS cercanos a 1,0 en la trucha arcoiris sugieren una buena condicin de salud, al ser alimentados con dietas formuladas con ingredientes vegetales (Watanabe et al. 1993). No obstante, estos coeficientes son menores al ser contrastado con los IHS conseguidos por Gouveia et al. (1991), donde al alimentar truchas arcoiris con un 20% de lupino en la dieta, se observaron IHS prximos a 2,0.

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La disminucin en los IHS al finalizar el periodo de experimentacin, podra ser asociado al cambio del rgimen dietario inicial. A pesar de que cada rgano tiende a representar un porcentaje fijo del peso total del pez independiente a su tamao, el peso y tamao del hgado responden a las caractersticas nutricionales del alimento, siendo los altos niveles de carbohidratos responsables de aumentar su tamao (Shearer, 1994). As mismo, no es posible descartar la participacin de otros factores sobre IHS como una alta densidad de cultivo, la cual produce una disminucin del peso del hgado y por consiguiente un menor IHS, fenmeno que ha sido asociado con una mayor utilizacin de los lpidos contenidos en el hgado (Montero et al. 2001). Otro factor asociado es un aumento del fsforo disponible para los peces en el alimento, el cual es responsable de producir una depresin del tamao del hgado, debido a su efecto sobre el metabolismo lipdico (Robaina 1998). La composicin proximal de la carcasa en los peces, no evidenci la influencia del rgimen dietario. Coincidiendo con los resultados de Hughes, (1991); Gouveia et al., (1993); Burel et al., (1998); Alarcn, (2000); Carter & Hauler, (2000) y Bransden et al., (2001), al utilizar niveles superiores de inclusin de harina de lupino. No obstante, los porcentajes de protena y lpidos son mayores a los logrados por estos autores. Antagnicamente, Fanhargi & Carter (2001) reportan variaciones en las concentraciones de protena, mayores niveles se observaron en los peces alimentados con dietas que incluan un 10% de lupino al ser comparados con aquellos que recibieron un 20 % de inclusin. Este decrecimiento en el contenido proteico de los peces alimentados con altos niveles de inclusin de materias primas vegetales es asociado con un aumento en el contenido de lpidos en el pez (Gmez et al., 1993). En inclusiones de un 50% de lupino, se ha observado un incremento del contenido de lpidos en la carcasa (Burel et al., 1998). De

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igual forma, este mayor contenido de lpidos en los peces alimentados con altos nivel de lupino, tambin puede ser relacionado con el gran tamao alcanzado por estos (Glencross et al., 2002), como a su vez, al efecto de factores exgenos como la alimentacin a saciedad y las bajas temperaturas (Shearer, 1994). Gran parte de la protena es utilizada por los peces con fines energticos, existiendo una cierta predisposicin de los mismos a utilizar las cadenas carbonatadas de los aminocidos como sustrato energtico. En este sentido, la existencia en la dieta de una elevada proporcin del cido glutmico, aminocido que se encuentra en una proporcin cercana a un 6,7% en la semilla de lupino (Petterson et al., 1997), podra representar un ahorro importante en la sntesis de aminocidos no esenciales, pudiendo adems ser utilizado para la sntesis de cidos grasos y el engorde. Igualmente la harina de lupino posee otros nutrientes energticos como lpidos y carbohidratos, cuya buena calidad nutritiva podra favorecer la deposicin de protenas (Robaina, 1998). Las variaciones experimentadas por los tratamientos, respecto a la composicin corporal inicial, se reflejan en la disminucin del contenido de materia seca, producto del aumento en el contenido de agua. Fenmeno caracterstico de la etapa juvenil, en donde los peces tienden a utilizar la energa en incrementar su tamao, antes que almacenarla, originando con esto bajos niveles de lpidos y altos niveles de humedad, como respuesta a la relacin inversa, que existe entre el contenido de lpido y humedad. Aunque este comportamiento es comn en peces en estado silvestre (Shearer, 1994). De igual modo, la disminucin en el contenido de cenizas sufrida por los peces, estara relacionada con el crecimiento experimentado durante la etapa juvenil. El cual es caracterizado por una predisposicin de la masa muscular a incrementarse de manera mas rpida que la masa sea, ocasionando una disminucin en las concentraciones de calcio y

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fsforo (Shearer, 1994), componentes minerales de las cenizas. A su vez, como se menciono anteriormente, la concentracin de fsforo en el pez puede ser afectada por la existencia de insumos vegetales en la dieta. Burel et al. (1998), al utilizar dietas con un 50% de lupino, ha reportado una disminucin en el contenido de fsforo de los peces, menguando igualmente su contenido de cenizas. Por el contrario, al utilizar niveles de inclusin menores a un 40% de lupino (Hughes, 1991; Gouveia et al., 1993; Carter & Hauler, 2000 y Bransden et al., 2001) los valores de materia seca y cenizas se mantienen inmutables durante todo el periodo de experimentacin. La composicin de cidos grasos en el msculo de trucha arcoiris esta directamente relacionado al perfil de cidos grasos contenidos en las respectivas dietas. Concordando estos resultados con observaciones realizadas anteriormente en distintas especies de salmnidos (Watanabe, 1982; Bell et al., 1986; Gomes et al., 1993; Guillou el al., 1995; Henderson, 1996; Bell el al., 2001; Campbell el al., 2001; Montero et al., 2001; Caballero et al., 2002). Estos cambios en la composicin del tejido del msculo ocurren entre 4 y 6 semanas iniciada la alimentacin (Guillou el al., 1995) Al incrementar la inclusin de harinas vegetales, decrece el porcentaje de SAFA debido a la depleccin del cido palmtico (Gmes et al, 1993), principal cido graso saturado componente del msculo de trucha arcoiris en cultivo (Sanches et al., 1992). No obstante, aunque en este experimento, se advirti una ligera disminucin en las concentraciones del cido palmtico, al incorporar lupino en las dietas el perfil de SAFA se mantuvo constante. Sin embargo, estos fueron mayores a los reportados por Campbell et al., (2001) al utilizar un 20% torta de maravilla. Los altos ndices de crecimiento de los salmones de cultivo son responsabilidad del

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uso de dietas de alta de energa, ricas en MUFA, principalmente el cido oleico (Bell et al., 2001). La concentracin de MUFAs se ve afectada al utilizar ingredientes vegetales en el alimento, al incitar la acumulacin del 18:1 (n-9) en el msculo (Gomes et al., 1993; Guillou el al., 1995; Bell el al., 2001; Campbell el al., 2001; Caballero el al., 2002), como consecuencia de que los salmondeos son incapaces de desaturar el 18:1 (n-9) en presencia de 18:3 (n-3) o 18:2 (n-6) dietario (Montero el al., 2001). Si bien estos trabajos no hacen referencia al tipo de isomero cuantificado al nombrar el 18:1 (n-9), el comportamiento descrito previamente por los autores correspondera al isomero trans, el cido elaidico, el cual aumenta con los niveles de lupino. Mientras que el isomero cis, el acido oleico, se mantiene inmutable en su contenido, siendo similar al inicial. Otro efecto asociado con la inclusin de vegetales es el incremento de los cidos grasos poliinsaturados de la serie n-6, los cuales en general son mayoritarios en todos los productos de origen vegetal al igual que en la semilla de lupino (Yaes et al., 1983; Masson & Mella, 1985; Petterson et al., 1997). Esto es relacionado a la accin enzimtica de la 6 desaturasa por la cual compiten como sustrato tanto el 18:2 (n-6) como el 18:3 (n-3) (Storebakken et al., 2000) de manera que al existir un alto contenido de 18:2 (n-6) en la dieta, puede inhibir el metabolismo de 18:3 (n-3) provocando una baja actividad de desaturacin para la serie n-3 y un aumento en los n-6 PUFAs totales en el msculo. No obstante, Con la inclusin del lupino en el alimento los contenidos de 18:2 (n-6) en el msculo, fueron similares al control, lo cual sugiere un efecto sobre el metabolismo enzimtico del aceite de pescado utilizado en la formulacin del alimento, ricos en cidos de la serie n-3 (Windsor & Stuart, 1984). De igual forma los niveles de 20:4 (n-6) no variaron entre los tratamientos, anlogos resultados

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son reportados al emplear harina de torta de maravilla y raps (Gomes et al., 1993; Campbell el al., 2001). Fenmeno que expresa una carencia en la conversin del 18:2 (n-6) a 20:4 (n6) debido a la interaccin competitiva entre los PUFAs de la serie n-3 y n-6 por las vas de saturacin en el hgado (Bell et al., 2001). El cido linolnico (C18: 3 n-3), se encuentra en un 9%, dentro de la semilla de lupino (Yaes et al., 1983; Masson & Mella, 1985; Petterson et al., 1997), por lo cual se puede atribuir que al ser incluido en las dietas, contribuye a mantener constantes tanto su contenido en el msculo, como los contenidos de EPA y DHA. Efectos adversos ocurren al utilizar otros ingredientes vegetales, mermando el contenido de C18: 3 (n-3) en los tejidos (Gomes et al., 1993; Guillou et al., 1995; Bell et al., 2001; Campbell et al., 2001; Caballero et al., 2002). Tanto la presencia de una mayor cantidad de DHA en el msculo en relacin con el contenido dietario, como la invariabilidad sufrida por los niveles de DHA en los distintos tratamientos concuerdan con Gomes et al., (1993), y Bell et al., (2001). De acuerdo a estos autores ambos fenmenos son el resultado de una acumulacin selectiva del DHA en el msculo, aunque exista una reduccin de este cido graso en la dieta. Debido a una mayor actividad de desaturacin en los hepatocitos de salmondeos alimentados con aceites vegetales (Tocher et al., 2001). En general tanto la cantidad de los cidos grasos de la serie n-6 como los n-3 finales fueron inferiores en relacin, a la cantidad contenida inicialmente, lo cual se debera a la calidad nutricional del alimento ingerido por los peces previos al experimento adems de los cambios en el perfil de cidos grasos producidos por el crecimiento (Shearer, 1994; Sheridan et al., 1985)

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Cuando la dieta es rica en aceites de origen vegetal tiende a alterar la relacin de n3/n-6 PUFAs en la carne del pez. Este desequilibrio en los cidos grasos dietarios, afectara de forma negativa la acumulacin de grasas en el hgado (Robaina, 1998). Como se coment anteriormente, a pesar de que la cantidad de lpidos aportada por la harina de lupino es muy poca su elevada proporcin de cidos grasos de la serie n-6 podra hacer que la relacin n-3/n-6 en el alimento se desequilibrara rpidamente. Sin embargo, la relacin n-3/n-6 no se ve afectada por las dietas, debido a la abundancia de la serie n-3, proveniente del aceite de pescado dietario, como a los niveles de cido linolnico (C18:3 n3) contenido en la semilla del lupino. Estos resultados se contraponen a los obtenidos en la literatura preliminarmente al utilizar harinas vegetales, en los cuales se observa una reduccin de la relacin n-3/n-6, como respuesta tanto a un incremento en la concentracin de 18:2 (n-6) (Campbel et al., 2001) como al mismo tiempo un decrecimiento en el porcentaje de los cidos grasos de la serie n-3 (Gomes et al., 1993). Un indicador de la deficiencia de EFA en la dieta usado de manera comn es la relacin 18:1 (n-9)/DHA (Watanabe, 1982; Montero et al., 2001; Takeuchi et al., 1996; Furuita et al., 1996). Aunque, los resultados obtenidos en la relacin 18:1(n-9)/DHA entre todos los tratamientos incluido el control fueron similares, estos lograron valores superiores a los calculados inicialmente, siendo mayores a 1.0, expresando de esta forma un dficit en los EFAs dietario (Furuita et al., 1996). Los insumos vegetales utilizados en la fabricacin de alimentos para salmondeos son deficientes en EFA, lo que resulta en elevados niveles de cido eicosatrienoico y oleico (Watanabe, 1982). Adems, los altos niveles de carbohidratos contenidos en esta clase de materias primas, contribuyen a incrementar la cantidad de cidos grasos monoinsaturados de la serie n-7 y n-9 en los tejidos (Walton et al., 1982), ya que estos puedes ser

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sintetizados de manera endgena desde precursores no lipdicos por los peces (Henderson, 1996). Los productos de la industria salmonicultora son de alta calidad nutricional con una abundancia de cidos grasos altamente insaturados (HUFAs) de la serie n-3 y una alta relacin n-3/n-6 PUFAs. Es por esta razn, que tanto productores como consumidores de salmondeos desean minimizar cualquier percepcin en la reduccin en la calidad que surge de la inclusin de ingredientes vegetales, en trminos de crecimiento y salud de los peces, adems de la imagen saludable del salmn como parte de la dieta humana (Bell et al., 2001). Estos efectos beneficiosos para la salud humana atribuidos al consumo de pescado, permiten disminuir los niveles de colesterol, previniendo las enfermedades cardiovasculares (Corraze, 1999). Al utilizar la composicin de cidos grasos, como un indicador de la calidad de la carne para el consumo humano, el uso de la harina de lupino, en un nivel mximo de inclusin de un 20 %, no altera de forma significativa la calidad nutricional de esta. Finalmente y a manera de cometario, seria recomendable efectuar nuevas investigaciones relacionadas con potenciar el uso del lupino como ingrediente en la formulacin de alimentos para salmondeos en nuestro pas. La orientacin de dichas investigaciones debera apuntar hacia la etapa de engorda, realizadas en sistemas marinos, como de igual forma a optimizar el nivel de inclusin. Con respecto a este ltimo punto, se ha comprobado en trabajos bastante recientes que los niveles de inclusin de un 40 % no afectan los factores productivos en salmondeos (Burel et al., 1998; Bransden et al., 2001 Carter & Hauler, 2000; Farhangi & Carter, 2001) no obstante resulta imperativo estimar los efectos de dichas incorporaciones sobre el perfil de cidos grasos del msculo.

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7. CONCLUSIONES

1.

La inclusin de harina de lupino blanco (Lupinus albus) en dietas extrudas para

juveniles de trucha arcoiris (Oncorhyncus mykiss) no afecta los rendimientos productivos, los parmetros biolgicos y el perfil de cidos grasos en el msculo de los peces; lo cual lo convierte en un buen sustituto de la harina de pescado.

2.

Los distintos niveles de inclusin de lupino utilizados en las dietas extrudas para

trucha arcoiris, no afectaron en forma significativa los rendimientos productivos tales como factores de conversin (FC), incremento en peso, tasa de crecimiento especifico (SGR), y el factor de crecimiento termal (GF3).

3.

Los distintos niveles de inclusin de lupino utilizado en las dietas extrudas, no

afectaron en forma significativa los ndices hepatosomticos (IHS); mejorando incluso, los ndices calculados inicialmente. De igual forma, las inclusiones crecientes de lupino dietario no alteraron la composicin proximal del pez completo.

4.

La composicin de cidos grasos en el msculo de trucha arcoiris dependi

directamente del perfil de cidos grasos presentes en la dieta.

5.

La composicin de cidos grasos de la harina de lupino, en relacin con su elevado

contenido de cido linolnico, no contribuyo a desequilibrar el perfil de cidos grasos dietarios.

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6.

La incorporacin de la harina de lupino, en sus diferentes niveles de inclusin, no

afecta el porcentaje de cidos saturados totales en el msculo de trucha arcoiris.

7.

El porcentaje total de cidos grasos monoinsaturados totales presentes en el

msculo de trucha arcoiris no difirieron entre los tratamientos dietarios, no obstante aument, en relacin al porcentaje contenido inicialmente.

8.

La inclusin de lupino en la dieta incrementa el contenido del cido elaidico en el

msculo, el cual aumenta en forma directamente proporcional al nivel de incorporacin de harina de lupino en el alimento.

9.

Las cantidades totales de cidos poliinsaturados de la serie n-3 y n-6 en el msculo

de trucha arcoiris obtuvieron valores similares entre los tratamientos; producto del aporte de n-3 PUFAs del aceite de pescado utilizado en la formulacin del alimento. Del mismo modo, La inclusin de lupino en la dietas, no altero la relacin n-3/n-6 en el msculo de trucha arcoiris.

10.

Las sustituciones parciales con harina de lupino, no afectaron la cantidad de los

cidos linolnico, eicosapentaenoico (EPA) y docosahexaenoico (DHA) en el msculo de trucha arcoiris. Por su parte, la cantidad de cido araquidnico (AA) se mantuvo inmutable debido al alto contenido de cidos grasos de la serie n-3 en la dieta.

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11.

La carencia en los cidos grasos esenciales dietarios, tanto al utilizar lupino como

en el control, afecto la relacin 18:1 (n9)/ DHA en el msculo; la cual se incremento en comparacin al coeficiente calculado inicialmente.

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8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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9. ANEXOS

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